JP2017502650A - snoRNA、組成物、及び使用 - Google Patents
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Abstract
Description
老化(すなわち、加齢による生存能及び繁殖能の進行的な衰え)の機序は、社会及び科学界を何世紀にもわたり困惑させてきた。現在、2つの一般に広まっている理論があり、一方は老化が遺伝子的に予めプログラム化された進化経路から生じるというもの、他方は老化が存在の正常な結果であり、その間に細胞性及び分子性傷害が蓄積するというものである。この傷害は、フリーラジカルによって誘発される酸化的傷害、ミトコンドリア異常、体細胞突然変異、進行的なテロメアの短小化、プログラム化細胞死、及び傷害された細胞の増殖などを含む(Semsei I. (2000) On the nature of aging. Mech Aging Dev 117:93-108)。
本発明は、本発明者らが老化の機序に特に関与することを実証した、関心対象のRNA配列の予防使用又は治療使用に関する。本発明者らは、特に、これらの配列が、老化の機序を停止させ、それに伴う有害な作用と闘うことによって、対象の寿命を飛躍的に延ばすことができることを示した。本発明の配列はまた、老化に関連した疾病、例えば変性疾患、ラミノパチー、及び癌、並びに、糖尿病及び肥満と闘う。それらは特に、不妊症又は生殖不能(すなわち、妊娠困難又は妊娠不能)の処置、並びに対象、特に性的に成熟した対象、好ましくは高齢対象のストレスに対する抵抗性を高めるのに効果的であることが証明された。
本発明は、ショウジョウバエの寿命に対する、核小体低分子DNA配列(本文書で配列番号1として同定された、「youth」と呼ばれる、snoRNA:Ψ28S−1153)の影響の本発明者らによる実証からもたらされる。このsnoRNAは、ショウジョウバエゲノムに関連したsnoRNAの系統的なスクリーニングの一部として同定され(Huang et al., 2005)、これまでどのような機能もそれに帰せられていない。
以前に説明されているように、本発明は、それによって恩恵を得ることのできる対象、典型的には動物又は昆虫、例えば哺乳動物又はげっ歯類、好ましくはヒトにおいて医薬品として使用するための、ショウジョウバエ(キイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster))において初めて同定された配列番号1の配列の機能的特徴を有する単離された又は合成のリボヌクレオチド配列(RNA配列)に関する。
本発明は特に、医薬品として使用するための、本発明に記載の関心対象のRNA配列若しくはDNA配列からなるか又はこれを含む、本文書に記載されているような産物に関する。
本発明はまた、老化の有害な作用若しくはストレス、並びに、このようなストレス若しくはこのような老化機序に関連した病態と闘うための、又は不妊症と闘うための、試験化合物の美容効力又は治療効力を評価するための方法を提供する。
i)本発明に記載のRNA配列を発現していないか、又は異常な形の該RNA配列を発現している、細胞、細胞集団、又は組織;又は、本発明に記載のトランスジェニックマウスの曝露、
ii)該細胞(群)又は該組織又は該トランスジェニックマウスの表現型に対する試験化合物の効果(ある場合)の評価、及び
iii)該試験化合物の美容効力又は治療効力、すなわち該試験化合物の効力と相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の回復の決定。
i)本発明に記載のRNA配列を含む本発明に記載の細胞、細胞集団、又は本発明に記載の細胞を含む組織の曝露、
ii)該細胞又は細胞集団又は該組織の表現型に対する試験化合物の効果(ある場合)の評価、及び
iii)該試験化合物の美容効力又は治療効力、すなわち該試験化合物の効力に相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の増加の決定。
1)P[GAL4]4C遺伝子座に位置するsnoRNA:Ψ28S−1153(youth)の遺伝子的及び分子的特徴付け
この実験は、ショウジョウバエの自発運動行動に関与する神経基盤についての調査、及び中心複合体、特に楕円体の構造と機能との間の関係の研究の一部である。この文脈では、P[GAL4]エンハンサートラップ系統のライブラリーのスクリーニングは、楕円体において特異的に発現されているP[GAL4]4C系統の同定を可能とした(図1)。様々な遺伝子的アプローチ、特に破傷風毒素の標的化発現は、これらのニューロンの遮断が、自発運動活性に異常を発生することを示した(Martin et al., 2002)。第二の工程では、これらのニューロンを詳細にさらに特徴付け、かつ自発運動活性に関与する神経ネットワーク内のその機能をより良く決定するために、P[GAL4]4C系統の挿入遺伝子座を遺伝子的にかつ分子的に特徴付けた。PCRによるレスキューが行なわれ、2R染色体(右:すなわち、右アーム上)の50A位の2つの遺伝子:CG13333とCG13334との間にP[GAL4]4CのP因子の挿入点を示すことを可能とした(図1)。次いで、これらの2つの遺伝子のそれぞれの表現型及び機能を示すことができるように、P因子を再度切り出すことによって(ジャンプアウト又は復帰突然変異と呼ばれる遺伝子的アプローチによって)それらの中に突然変異を作成した。このようにして、F4と命名された632塩基対(bp)の小さな欠失が得られた(図1)。
P[GAL4]4C系統の標識されたリング状のニューロンにおける破傷風毒素の標的化発現を介してハエの自発運動活性を定量するために研究が実施されたのと同時に、本発明者らは、これらのハエが非常に短い寿命を有することを観察し、P[GAL4]4C/UAS−破傷風毒素のハエ並びにF4のハエ(4C遺伝子座において突然変異)の該寿命を正確に定量することを決定した。したがって、F4のハエは短い寿命を有し(野生型の対照ハエと比較して約30%)、このことはsnoRNAの欠失が寿命(生涯期間)に影響を及ぼす可能性があることを示唆する(図3)。本発明者らはまた、この効果が、ハエの性別に応じて異なり、効果は、雄よりも雌においてはるかにより顕著であることを観察した。
F4突然変異体の表現型が実際に、snoRNAの欠失に起因するかを実証するために、snoRNA(図1)及びその調節配列を含む1723bpの領域のゲノムDNA配列(66377〜68100)を有するトランスジェニックショウジョウバエの系統を作製した。より正確には、1723bpの領域からのゲノム断片をPCRによって増幅し、Xba1制限酵素部位を介してpCaSper−4ベクター(このベクターは全くプロモーター配列/調節配列を含有していない)に挿入した。次いで、トランスジェニックハエを標準的な技術に従って作製し、同導入遺伝子を発現しているがゲノムの別の場所に挿入されたハエの系統を得た(独立した挿入;G4、G5)。
生涯期間に対して作用する遺伝子は一般的にストレスに対する抵抗性を高めることが現在一般的に認められている。本発明者らは、このsnoRNAの過剰発現が、飢餓、熱ショック、及び(パラコートによって誘発される)酸化ストレスなどのストレス条件下に関わる対象の寿命を効果的に延ばすことができるかを検証し、その確証を得た(図4)。
雄及び雌を、食物を含有する標準的なチューブにおいて3日間一緒に飼育する。3日令の時に、雄と雌とを、食物を含有する標準的なチューブに20匹ずつのグループに別々に分配する。ハエを熱ショックにかけるために、ハエを含有するチューブを36℃のインキュベーター中に入れる。死滅したハエの数を6時間毎に計数する。図4Aの熱ショック(36℃)では、F4突然変異体のハエ(雌のみ)は対照のハエよりも抵抗性が高いことを注記する。しかし、G5のハエ(雄及び雌)は対照及びF4突然変異体よりも抵抗性が高く、一方、F4突然変異体におけるG5導入遺伝子の発現の結果として(F4;G5ハエ)、これらのハエもまた、対照のハエ及びF4突然変異体のハエよりもはるかに抵抗性が高い。
熱抵抗性試験と同様に、雄及び雌を、食物を含有する標準的なチューブで3日間一緒に飼育する。3日令の時に、雄と雌とを、ろ紙と乾燥を防ぐための水 400μLとを含有するチューブに、20匹ずつのグループに別々に分配する。ハエを24℃の加湿部屋で飼い、死滅したハエの数を6時間毎に計数する。図4Bの飢餓では、F4突然変異体のハエ(雄及び雌)は対照のハエよりも抵抗性が高いことを注記する。さらに、G5のハエ(雌)はさらにより抵抗性が高く、一方、F4突然変異体における導入遺伝子の発現(F4;G5)は正常な生存期間を回復する(雌において)。
パラコート(1,1’−ジメチル−4,4’−ビピリジニウムジクロリド)はNADHを還元し、次いで安定なパラコートラジカルを生成し、次いで酸素と反応してROS(活性酸素種)を生成する。結果として、ROSは細胞傷害を引き起こす(Rzezniczak et al., 2011)。以前の試験と同様に、雄及び雌を、食物を含有する標準的なチューブで3日間一緒に飼育する。3日令の時に、雄及び雌を、空の標準的なチューブに、20匹ずつのグループに別々に分配し、それらを6時間飢餓状態にする。次に、ハエを、ろ紙と食物摂取を促進するための1%ショ糖に希釈された20mMパラコート450μlとを含有するチューブに移す。ハエを24℃の加湿部屋で飼い、死滅したハエの数を6時間毎に計数する。
関心対象のsnoRNAがどのような細胞及び/又は組織において発現され作用するかを決定するために、このsnoRNAの空間−時間の発現プロファイルを本発明の文脈において、成体ハエにおいてインサイツハイブリダイゼーション(HIS)によって抗センス鎖snoRNAを使用して決定した。チラミドを使用して標識を増幅させた。雄及び雌の両方において、youthsnoRNAは腸壁(上皮)において発現されているが(図5A)、一方、予想された通り、F4突然変異体には存在しない(図5B)。より具体的には、腸の様々な細胞型に特異的なP[Gal4]系統を二重標識と組み合わせて使用することにより、youthsnoRNAは腸細胞(主な細胞及び大半の細胞は腸上皮を形成している)の核小体に特異的に発現され(図6A)、一方、他の細胞型には発現されていないことが実証された(図6B、C、D、E)。さらに、雌では、それはまた卵巣にも、より特定するとナース細胞にも発現されている(図5C及び5D)。
3つの他の明確に異なるGal4ドライバー系統の使用を介した腸上皮以外の細胞型におけるsnoRNA(UAS−8M)の標的化発現(異所性)が行なわれた:esg−Gal4(esg−Gal4、F4/F4;UAS−8M/+)及びDelta−Gal4(Delta−Gal4、F4/F4;UAS−8M/+)は腸幹細胞(ISC)を標的化し、一方、Su(H)−Gal4(Su(H)−GBE−Gal4、F4/F4;UAS−8M/+)は腸芽細胞を標的化する(図7)。これらの結果は、1)snoRNAが他の細胞型において異所的に発現され得、2)この異所性発現はまた、特定のストレスに対する抵抗性を高めることを実証する(図8)。要約すると、これらの結果は、snoRNAがまた、それが腸上皮以外の細胞型において発現される場合にも保護を付与することができることを示す。
本発明者らは、2つの独立したアプローチによって、腸細胞における標的化発現が、ストレス抵抗性表現型を回復させるのに十分であることを実証した。ゲノムトランスジェニック系統(生涯期間を増加させる系統:G5、同様に、別の独立した挿入(G4))から行なわれたインサイツハイブリダイゼーション技術によって、snoRNAが腸細胞において発現され、生涯期間の調節のためには腸細胞におけるsnoRNAの発現が十分であることを実証することができた。
配列相同性の探索は、これらのsnoRNAがまた、ゲノムが入手可能である11個の他の種のショウジョウバエにも存在することを示した(図9A)(12個の種のショウジョウバエの共通構造も参照:図9B)。
F4ハエは非常に短い寿命を有し、一方、snoRNAを過剰発現しているハエ(G5)はより長く生きるので、あらゆる神経変性病変(脳に存在するより大きなサイズ又はより小さなサイズのより多くの又はより少ない穴)の存在について確認するために老齢なハエ(40日令)を研究した。全体的に、対照ハエ(Canton−S)では、ハエの約60%が病変を呈する(しかし、CSハエの50%はすでに40日目に死滅している)(図12)[さらなる詳細については、半定量分析についての図12dを参照]。F4突然変異体では、全てのハエ(100%)が病変を有し、それらは一般的に対照よりもより重度であるが(穴のサイズ及び数)、F4;G5のハエは、有意により少ない穴を有し(ハエの僅か約10%)、これらの穴はまたより小さなサイズである。最終的にG5のハエでは、CS対照とほぼ同じ比率のハエが病変を呈するが(約40%)、これらの病変は明らかにより重度が低い(図12d)。要約すると、ゲノム導入遺伝子(F4;G5)は部分的に神経変性表現型をレスキューするが、snoRNAの過剰発現(G5)は神経変性から保護する。
同様に、snoRNAによって与えられた神経保護が、感覚運動パラメーターなどの生理学的パラメーターに対して効果を及ぼすかどうかを確認するために、40日令よりも老齢なハエの自発運動活性を定量し(ビデオでの追跡によって)(Martin, 2004)、4日令の幼若なハエと比較した(図13)。まず、4日令のハエと40日令のハエとの間に巨大な差が観察され;40日令のハエは4日令のハエが移動した距離の3分の1しか移動しない。しかし、老齢な40日令のハエでは、snoRNAを過剰発現するハエ(G5)は対照のハエ(Canton−S)、F4突然変異体、及び遺伝子突然変異体バックグラウンドにおいてsnoRNAを発現しているハエ(F4;G5)よりも長い距離を歩く。この効果は、雌よりも雄においてより認められる。要約すると、老齢な40日令のハエでは、本発明者らは、snoRNAを過剰発現しているハエは、対照のハエよりも良好な感覚運動成績を有することを認める。これらの結果は、老化の機序に関連した有害な作用に対するsnoRNAの保護性質を実証する。
雌では、snoRNAは、卵巣及びより正確にはナース細胞においても発現されている(図5C、D)。本発明者らはまた、突然変異体のハエ(F4)が、受精能の変化も有することを示した(生殖能の表現型)。F4突然変異体は、対照のハエ(CS)よりもいくつかより多くの卵を産む(図14)。突然変異体の遺伝子バックグラウンドにsnoRNAを有するハエ(F4;G4)は多くのより少ない卵を産むが(受精能の低下)、snoRNAを過剰発現しているハエ(G4)は対照のハエよりもより多くの卵を産む(図14)。これらの結果は、卵巣においてsnoRNAによって発揮された重要な効果、及び雌の受精能に対するその影響を紛れもなく実証する。
snoRNAは、経口で(per os)又は注射によって投与され得る。他の投与経路、例えば吸入及び局所/皮膚適用も、使用されるベクターの種類に依存して使用され得る。
哺乳動物及びショウジョウバエの両方において、delta/notch遺伝子が腸(intestine、gut)前駆細胞の分化を調節し、一方、Wntシグナル伝達経路はISCの維持及び増殖に関与することが示された。同様に、サイトカインシグナル伝達経路(Upd/Jak/Stat)及びEGFR(上皮増殖因子受容体)経路は、ISCの増殖を調節する(図15〜16)(Jiang and Edgar, 2011; Takashima et al., 2011)。
本発明者らは、youthsnoRNAが、klarsicht遺伝子のスプライシング(スプライシングされたRNAの量)を調節することを実証した(図18A)。この遺伝子は、核の内膜に位置するタンパク質であるラミナ(Patterson et al., 2004)と相互作用し、早老症(ヒトにおいて早老及び促進老化を引き起こす疾病)に関与することが示された(図18B)。早老症は、800万人中1人の個体が患う稀な疾病である(Scaffidi and Misteli, 2006; Broers et al., 2006; Cohen et al., 2001; Cau et al., 2014; Coutinho et al., 2009)。youth snoRNAは、その表現型(生涯期間に関与)及びklarsicht遺伝子の調節におけるその関与を通して、ラミノパチー、例えばハッチンソン−ギルフォード症候群又は早老症、下顎骨異形成(MAD)、エメリー・ドレイフス型筋ジストロフィー、非定型ウェルナー症候群、拘束性皮膚障害、致命的な胎児アキネジア、LIRLLC(全身性脂肪萎縮症、インスリン抵抗性糖尿病、白斑黒皮症の丘疹、脂肪肝、及び肥大性心筋症(Hutchison, 2002; Broers et al, 2006)、特にハッチンソン−ギルフォード症候群(早老症)の処置のための新たな展望を提供する。
本発明者らは、youth snoRNAが、脂肪酸2−ヒドロキシラーゼ(fa2h)をコードするCG30502遺伝子のスプライシング(スプライシングされたRNAの量)を調節することを実証した(図18B)。この遺伝子は、脂肪酸の生合成過程、より特定すると、複合脂質、例えばスフィンゴ脂質及びセラミドの代謝過程に関与している(Carvalho et al., 2010)。ヒトでは、このfa2hは、様々な形態の神経変性(脱髄)、例えば脳内での鉄の蓄積に関連した神経変性、特定の白質ジストロフィー、及び最終的には遺伝性痙性対麻痺(SPG35)などに関連している(Kruer et al., 2010; Pierson et al., 2012; Schneider and Bhatia, 2010)。その表現型(F4突然変異体に観察された生涯期間及び/又は脂肪体肥大に関与)及びfa2h遺伝子の調節におけるその関与に因り、youth snoRNAは、上記の神経変性疾患の処置のための新たな展望を与える。
以前に記載されているように、snoRNA突然変異体(F4)は脂肪体肥大を呈し、腹部及び頭蓋内の脳の周辺の両方で見られる(図21)。さらに、トリグリセリドの定量により、この肥大症が確認された(したがって、ハエの「肥満」資格認定因子)。この表現型は、腸内でのsnoRNAの発現と、神経変性病変と、延長した寿命との間の代謝的及び/又は神経内分泌的な関係を示唆する。より具体的には、この代謝の破壊は、インスリンシグナル伝達経路の関与を示唆し、この経路は、ショウジョウバエの生涯期間に関与しているとして何回も記載されている(Tatar et al., 2001; Bai et al., 2012; Partridge et al., 2011; Fontana et al., 2010))。活性化抗カスパーゼ−3抗体に対して指向される免疫組織化学的マーカーにより、成体ショウジョウバエにおいて、F4突然変異体では脳の境界付近に位置する脂肪が大きく破壊されている(すなわち肥大している)が、これはsnoRNAの過剰発現(導入遺伝子G5)によって保護され、並びにレスキュー(発現の回復)(F4;G5)において保護されていることが示された(図21)。これらの結果は、snoRNAが、該snoRNAを発現する生物を脂肪体の変化から保護し、それ故、肥満から伸張によって保護することを実証する。さらに、インスリン受容体(InR)突然変異とF4突然変異体とを含む遺伝子相互作用実験(二重突然変異体)は、snoRNAの突然変異が、インスリン受容体の突然変異の表現型を少なくとも部分的にレスキューすることができることを示す(図21及びその見出しを参照)。これらの結果は、インスリンシグナル伝達経路と、snoRNAと、生涯期間との間の連鎖(直接的であれ間接的であれ)の存在を示す。前の結果は、snoRNAの突然変異及び/又は調節不全が、炭水化物及び脂質の代謝を破壊することを示す。それ故、youth snoRNAは、糖尿病及び肥満の両方を処置するための新たな展望を与える。
RT−PCRアプローチによって、本発明者らは、哺乳動物において具体的に発現されたyouth snoRNA(ショウジョウバエにおいて初めて同定された)に対する相同的配列、より正確にはオルソロガスな配列の存在を実証した(図20)。ヒトでは、159bpのsnoRNA(配列番号2)が腸及び脳において発現され、僅かに卵巣及び腎臓において発現されている。マウスでは、129bpのsnoRNA−1(配列番号3)は脳にしか発現されておらず、122bpのsnoRNA−2(配列番号4)は、腸、脳、及び卵巣において発現されているが、腎臓には発現されていない。これらのデータは、これらのsnoRNAの発現がヒト及びマウスの両方において機能的である可能性が非常に高いことを支持する。
Claims (21)
- 医薬品としての使用のための、配列番号1の配列、オルソロガス配列、又は機能的に類似した配列を含む、単離された又は合成のRNA配列。
- 前記のオルソロガス配列が、ヒト起源でありかつ配列番号2の配列からなるか、又はマウス起源でありかつ配列番号3及び配列番号4の中から選択された配列からなることを特徴とする、請求項1記載のRNA配列。
- 前記配列が、核小体低分子RNA(snoRNA)であることを特徴とする、請求項1又は2記載のRNA配列。
- 前記の機能的に類似した配列が、Ir56d、buttonhead、klarsicht、CG3262、CG30502(fa2h)、CG11125、CG9339及びCG40006の中から選択されたキイロショウジョウバエ遺伝子のスプライシングを可能とすることを特徴とする、請求項1記載のRNA配列。
- 対象の寿命を延ばすこと、ストレスに対する抵抗性を高めること、又は対象における老化の有害な効果と闘うことにおける使用のための、請求項1〜4のいずれか一項記載のRNA配列。
- 対象の変性疾患、特に神経変性疾患、ラミノパチー、糖尿病、肥満、又は癌の予防又は治療に使用するための、請求項1〜5の一項記載のRNA配列。
- 癌が、フリーラジカルによって誘発される癌である、請求項6記載のRNA配列。
- 対象の不妊症の処置又は受精能の刺激のための、請求項1〜3の一項記載のRNA配列。
- 対象が動物若しくは昆虫、典型的には哺乳動物、好ましくはヒト、さらにより好ましくは、請求項1〜3の一項記載のRNA配列を発現していないか若しくは異常な形の該RNA配列を発現している対象、飢餓、熱ショック、若しくは酸化ストレスなどのストレス条件を受けている対象、及び/又は、変性疾患、ラミノパチー、糖尿病、肥満、癌、若しくは受精能問題を患う対象であることを特徴とする、請求項5〜8の一項記載のRNA配列。
- 請求項1〜3の一項記載のRNAを発現していないか又は異常な形の該RNA配列を発現している対象のゲノムが、突然変異を含むDNA配列を含有し;該配列は、配列番号5、配列番号6、配列番号7及び配列番号8の中から選択された野生型状態であり;該突然変異は、好ましくは1つ以上の塩基対の欠失、置換、又は付加の中から選択されることを特徴とする、請求項9記載のRNA配列。
- 請求項1〜10の一項記載のRNA配列をコードするDNA配列。
- 好ましくは、腸細胞若しくは卵巣細胞において請求項1〜4の一項記載のRNA配列の発現を促進するプロモーター及び/又は調節エレメントを含む、例えば、プラスミド、コスミド、ウイルスベクター、及びファージの中から選択された、該RNA配列の発現を可能とするベクター。
- 請求項1〜4の一項記載のRNA配列を含むか、又は請求項12記載のベクターを使用して形質転換された、細胞。
- 請求項1〜4の一項記載のRNA配列、請求項12記載のベクター、又は請求項13記載の細胞と、食物的に又は薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
- インビトロ又はエクスビボで請求項1〜10の一項記載のRNA配列の発現を回復又は調節するための、連続的な又は順次の、請求項1〜10の一項記載のRNA配列、請求項12記載のベクター、請求項13記載の細胞、又は請求項14記載の組成物の使用。
- ゲノム内の配列番号3及び配列番号4の一方及び/又は他方が、該配列の一方及び/又は他方の発現を妨げるか又は改変させるために改変されている、トランスジェニックマウス。
- i)請求項1〜3の一項記載のRNA配列を発現していないか又は異常な形の該RNA配列を発現している細胞又は細胞集団の、又は請求項16記載のトランスジェニックマウスの、試験化合物への曝露、ii)もしあれば、該細胞(群)又は該トランスジェニックマウスの表現型に対する試験化合物の効果の評価、及びiii)該試験化合物の美容効力、すなわち該試験化合物の効力と相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の回復の決定、を含む、試験化合物の美容効力を評価するための方法。
- i)請求項1〜3の一項記載のRNA配列を発現していないか又は異常な形の該RNA配列を発現している細胞又は細胞集団の試験化合物への曝露;(ii)もしあれば、該細胞(群)の表現型に対する試験化合物の効果の評価、及びiii)該試験化合物の治療効力、すなわち該試験化合物の効力と相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の回復の決定、を含む、老化の有害な作用、若しくはストレス、ラミノパチー、糖尿病、肥満と闘うための、又は不妊症と戦うための試験化合物の治療効力を評価するための方法。
- i)請求項1〜3の一項記載のRNA配列を含む請求項13記載の細胞、又は請求項13記載の細胞を含む細胞集団の試験化合物への曝露、ii)もしあれば、該細胞又は該細胞集団の表現型に対する試験化合物の効果の評価、及びiii)該試験化合物の美容効力、すなわち該試験化合物の効力と相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の増加の決定、を含む、試験化合物の美容効力を評価するための方法。
- 請求項1〜3の一項記載のRNA配列を含む請求項13記載の細胞、又は請求項13記載の細胞を含む細胞集団の試験化合物への曝露、ii)もしあれば、該細胞又は該細胞集団の表現型に対する試験化合物の効果の評価、及びiii)該試験化合物の治療効力、すなわち該試験化合物の効力と相関している該RNA配列の活性及び/又は発現の増加の決定、を含む、老化の有害な作用、若しくはストレス、ラミノパチー、糖尿病、肥満と闘うための、又は不妊症と闘うための試験化合物の美容効力を評価するための方法。
- 曝される細胞又は細胞集団が、腸又は卵巣を起源とする、請求項17〜20の一項記載の方法。
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C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
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C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
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C13 | Notice of reasons for refusal |
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C141 | Inquiry by the administrative judge |
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A521 | Request for written amendment filed |
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C54 | Written response to inquiry |
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C23 | Notice of termination of proceedings |
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C03 | Trial/appeal decision taken |
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C30A | Notification sent |
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A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
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R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
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