JP2017502072A - Ｄｏ３ａ−トラネキサム酸コンジュゲートを含むガドリニウム錯体 - Google Patents
Ｄｏ３ａ−トラネキサム酸コンジュゲートを含むガドリニウム錯体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017502072A JP2017502072A JP2016545967A JP2016545967A JP2017502072A JP 2017502072 A JP2017502072 A JP 2017502072A JP 2016545967 A JP2016545967 A JP 2016545967A JP 2016545967 A JP2016545967 A JP 2016545967A JP 2017502072 A JP2017502072 A JP 2017502072A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- do3a
- tranexamic acid
- mixture
- contrast agent
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 25
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 17
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 17
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims abstract description 46
- -1 ester compound Chemical class 0.000 claims abstract description 30
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 claims abstract description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 24
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 14
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 claims description 12
- HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCNCCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 HHLZCENAOIROSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 241000282376 Panthera tigris Species 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 8
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 7
- LSTRKXWIZZZYAS-UHFFFAOYSA-N 2-bromoacetyl bromide Chemical compound BrCC(Br)=O LSTRKXWIZZZYAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 4
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JNPGUXGVLNJQSQ-BGGMYYEUSA-M (e,3r,5s)-7-[4-(4-fluorophenyl)-1,2-di(propan-2-yl)pyrrol-3-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoate Chemical compound CC(C)N1C(C(C)C)=C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)C(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1 JNPGUXGVLNJQSQ-BGGMYYEUSA-M 0.000 claims description 2
- HIHOEGPXVVKJPP-JTQLQIEISA-N 5-fluoro-2-[[(1s)-1-(5-fluoropyridin-2-yl)ethyl]amino]-6-[(5-methyl-1h-pyrazol-3-yl)amino]pyridine-3-carbonitrile Chemical compound N([C@@H](C)C=1N=CC(F)=CC=1)C(C(=CC=1F)C#N)=NC=1NC=1C=C(C)NN=1 HIHOEGPXVVKJPP-JTQLQIEISA-N 0.000 claims description 2
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000004202 aminomethyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- ZLLCIVOTFYORGF-UHFFFAOYSA-N cyclohexylmethanamine Chemical compound C1(CCCCC1)CN.NCC1CCCCC1 ZLLCIVOTFYORGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002616 MRI contrast agent Substances 0.000 abstract description 13
- 150000000921 Gadolinium Chemical class 0.000 abstract description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 32
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 16
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 16
- 238000011160 research Methods 0.000 description 16
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K gadoterate meglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 RYHQMKVRYNEBNJ-BMWGJIJESA-K 0.000 description 8
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OCDAWJYGVOLXGZ-VPVMAENOSA-K gadobenate dimeglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)C(C([O-])=O)COCC1=CC=CC=C1 OCDAWJYGVOLXGZ-VPVMAENOSA-K 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 5
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K gadoteric acid Chemical compound [Gd+3].OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108010089503 Organic Anion Transporters Proteins 0.000 description 3
- 102000007990 Organic Anion Transporters Human genes 0.000 description 3
- 108010087367 P-glycoprotein 2 Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- ZPDFIIGFYAHNSK-UHFFFAOYSA-K gadobutrol Chemical compound [Gd+3].OCC(O)C(CO)N1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 ZPDFIIGFYAHNSK-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- PCZHWPSNPWAQNF-LMOVPXPDSA-K 2-[[(2s)-2-[bis(carboxylatomethyl)amino]-3-(4-ethoxyphenyl)propyl]-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl]amino]acetate;gadolinium(3+);hydron Chemical compound [Gd+3].CCOC1=CC=C(C[C@@H](CN(CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O)CC([O-])=O)N(CC(O)=O)CC([O-])=O)C=C1 PCZHWPSNPWAQNF-LMOVPXPDSA-K 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- MXZROTBGJUUXID-UHFFFAOYSA-I [Gd+3].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(=O)[O-])CCN(CC([O-])=O)C(C([O-])=O)COCC1=CC=CC=C1 Chemical compound [Gd+3].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(=O)[O-])CCN(CC([O-])=O)C(C([O-])=O)COCC1=CC=CC=C1 MXZROTBGJUUXID-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K gadodiamide Chemical compound [Gd+3].CNC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC(=O)NC HZHFFEYYPYZMNU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K gadolinium trichloride Chemical compound Cl[Gd](Cl)Cl MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000003107 structure activity relationship analysis Methods 0.000 description 2
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- PHDIJLFSKNMCMI-ITGJKDDRSA-N (3R,4S,5R,6R)-6-(hydroxymethyl)-4-(8-quinolin-6-yloxyoctoxy)oxane-2,3,5-triol Chemical compound OC[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H](C(O1)O)O)OCCCCCCCCOC=1C=C2C=CC=NC2=CC=1)O PHDIJLFSKNMCMI-ITGJKDDRSA-N 0.000 description 1
- QBPPRVHXOZRESW-UHFFFAOYSA-N 1,4,7,10-tetraazacyclododecane Chemical compound C1CNCCNCCNCCN1 QBPPRVHXOZRESW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LIQBKSIZAXKCPA-UHFFFAOYSA-N 4,4,4-trifluoro-3-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(F)(F)F LIQBKSIZAXKCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100028162 ATP-binding cassette sub-family C member 3 Human genes 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVQWVCLDFYLNBX-MGCOHNPYSA-N CC(C)(C)OC(=O)N[C@H]1CC[C@H](NC(=O)CCl)CC1 Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H]1CC[C@H](NC(=O)CCl)CC1 JVQWVCLDFYLNBX-MGCOHNPYSA-N 0.000 description 1
- 208000033978 Device electrical impedance issue Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 101000986633 Homo sapiens ATP-binding cassette sub-family C member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000836286 Homo sapiens Solute carrier organic anion transporter family member 1C1 Proteins 0.000 description 1
- 238000012307 MRI technique Methods 0.000 description 1
- 101001122350 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) Dihydrolipoyllysine-residue acetyltransferase component of pyruvate dehydrogenase complex, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 1
- 102100022004 Solute carrier organic anion transporter family member 4A1 Human genes 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N Tranexamic acid Chemical compound NCC1CCC(C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- VKIRRGRTJUUZHS-UHFFFAOYSA-N cyclohexane-1,4-diamine Chemical compound NC1CCC(N)CC1 VKIRRGRTJUUZHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVKNGPAMCBSNSO-UHFFFAOYSA-N cyclohexylmethanamine Chemical compound NCC1CCCCC1 AVKNGPAMCBSNSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000005292 diamagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002000 high resolution fast-atom bombardment mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002075 inversion recovery Methods 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000001254 matrix assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004452 microanalysis Methods 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- UYBJHVSZRXMCIQ-UHFFFAOYSA-N n-(cyclohexylmethyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCC1CCCCC1 UYBJHVSZRXMCIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002114 nanocomposite Substances 0.000 description 1
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 1
- 238000001208 nuclear magnetic resonance pulse sequence Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003307 reticuloendothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 238000012306 spectroscopic technique Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- SXVCBXHAHBCOMV-UHFFFAOYSA-K trichlorogadolinium;hydrate Chemical compound O.[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Gd+3] SXVCBXHAHBCOMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/101—Organic compounds the carrier being a complex-forming compound able to form MRI-active complexes with paramagnetic metals
- A61K49/106—Organic compounds the carrier being a complex-forming compound able to form MRI-active complexes with paramagnetic metals the complex-forming compound being cyclic, e.g. DOTA
- A61K49/108—Organic compounds the carrier being a complex-forming compound able to form MRI-active complexes with paramagnetic metals the complex-forming compound being cyclic, e.g. DOTA the metal complex being Gd-DOTA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/101—Organic compounds the carrier being a complex-forming compound able to form MRI-active complexes with paramagnetic metals
- A61K49/106—Organic compounds the carrier being a complex-forming compound able to form MRI-active complexes with paramagnetic metals the complex-forming compound being cyclic, e.g. DOTA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本発明は、ガドリニウム錯体を含有するＭＲＩ造影剤に関し、より具体的に、化学式１の構造を有するＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物とそれらのガドリニウム錯体に関する。本発明によれば、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を製造でき、前記化合物を利用してガドリニウム錯体を製造できる。本発明によって製造されたガドリニウム錯体は、熱力学的及び速度論的安定性を示し、現在商用中の臨床的造影剤に匹敵する弛緩率を示した。したがって、本発明によるガドリニウム錯体は、磁気共鳴映像（ＭＲＩ）の造影剤として広く使用され得る。【選択図】図４
Description
本発明は、ガドリニウム錯体を含有するＭＲＩ造影剤に関し、より具体的に、化学式１の構造を有する新規のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物とそれらのガドリニウム錯体に関する。
本発明は、韓国未来創造科学部の支援下に課題番号２０１３０２９６１８によって行われたものあって、前記課題の研究管理専門機関は、韓国研究財団、研究事業名は、「核心研究支援事業」、研究課題名は、「多重エネルギー帯域幅を有する高敏感度ＣＴ分子映像ナノ複合体研究」、主管機関は、慶北大学校産学協力団、研究期間は、２０１３年５月１日から２０１４年４月３０日である。
また、本発明は、韓国未来創造科学部の支援下に課題番号２０１３０６９５０７によって行われたものであって、前記課題の研究管理専門機関は、韓国研究財団、研究事業名は、「基礎研究事業」、研究課題名は、「中性子捕獲治療用ガドリニウムナノ構造体基礎研究室」、主管機関は、慶北大学校産学協力団、研究期間は、２０１３年１２月１日から２０１４年１０月３１日である。
磁気共鳴映像（ＭＲＩ）は、優れた空間的解像度（ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）及び対照度（ｃｏｎｔｒａｓｔ）に基づき、人体解剖学、生理学及び病態生理学の非侵襲的診断のための最も強力な技術中の１つである。現在、多数のＭＲＩ技術は、人体内で水プロトン弛緩率（ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ ｒａｔｅ）を増加させて、映像対照度を向上させるために、Ｇｄ（III）錯体を利用して実施された。Ｇｄ（III）イオンを利用した代表的な利点は、高い磁性モーメント及び長い電子スピン弛緩時間のような独特の特性からもたらされる。しかし、それらの広範且つ成功的な臨床的応用にもかかわらず、従来のＧｄ（III）に基づく造影剤（ＧＢＣＡｓ）は、大部分速い腎臓（ｒｅｎａｌ）排出を示す細胞外液（ｅｘｔｒａｃｅｌ ｌｕｌａｒ ｆｌｕｉｄ；ＥＣＦ）造影剤であった。そのため、向上した性能及び特異的機能性を同時に有する新しいＭＲＩ造影剤に対する必要性が提起された。器官（ｏｒｇａｎ）標的ＭＲＩ造影剤として使用するための新しいクラスのＭＲＩ造影剤を開発するために多大な努力が行われてきた。
肝（Ｌｉｖｅｒ）特異性ＭＲＩ造影剤は、２つのカテゴリーに分けられる：（ｉ）肝胆汁（ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ）特異性（または肝胆汁性）造影剤、（ｉｉ）細網内皮細胞（ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ）特異性（またはナノ粒子性）造影剤。前者（ｔｈｅ ｆｏｒｍｅｒ）クラスの造影剤は、機能的肝細胞によって吸収され、胆汁（ｂｉｌｅ）として排出され、それらの常磁性（ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ）性質は、肝及び胆ツリーの縦軸（ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ）弛緩時間（Ｔ１）の短縮をもたらす。このクラスの現在使用可能な造影剤は、Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標））及びＧｄ−ＢＯＰＴＡ（Ｍｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標））のようなＧｄ−キレートに基づく。注射時に、それらは、初期にＥＣＦ ＣＡｓ区画に分布（ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅ）され、後続的に肝細胞（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ）によって吸収される。一方、後者（ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ）クラスは、細網内皮系システムのクッパー（Ｋｕｐｆｆｅｒ）細胞を標的化し、そこで、造影剤の食作用（ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ）が生じ、鉄（ｉｒｏｎ）イオンの効果によって、肝信号の強度が減少し、肝細胞特異性造影剤で典型的に観察される「白色（ｗｈｉｔｅ）」肝の代わりに、「黒色（ｂｌａｃｋ）」肝を示す。
本発明者は、最近、いくつかのＤＯ３Ａ−トラネキサメート（２ａ−２ｂ、チャート１）のガドリニウム錯体を合成し、それらが肝胆汁に特異的な性質を示すことを報告した（Ｇｕ、Ｓ．；Ｋｉｍ、Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ、Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ、Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ、Ｙ．；Ｋｉｍ、Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１、５４、１４３．）。これらの観察と最近の多機能性（ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）造影剤を開発しようとする研究活動に動機を得て、本発明者は、新しいクラスの肝特異性造影剤として使用するために、いくつの追加的なＤＯ３Ａ−トラネキサメート（ｌｃ−１ｅ）とそれに対応するＧｄ−錯体（２ｃ−２ｅ）を製造した。また、本発明者は、肝特異性に対する構造活性相関（ＳＡＲ）分析を実施した。
したがって、本発明の主な目的は、化学式１の構造を有するＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を提供することにある。
本発明の他の目的は、前記化合物を含む錯体リガンド（Ｌ）用組成物及び前記化合物をリガンドとして含むガドリニウム錯体を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は、高い弛緩率と熱力学及び速度論的安定性及びｐＨ安定性を有するガドリニウム錯体を含有するＭＲＩ造影剤を提供することにある。
本発明の一様態によれば、本発明は、下記化学式１の構造を有するＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を提供する：
前記化学式で、Ｒは、Ｈ、ＮＨ２またはＣＯＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ２である。
本発明の他の様態によれば、本発明は、下記工程を含む前記ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式で、Ｒ＝ＣＯＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ２；化合物１ｃ）の製造方法を提供する：
ａ）トランス−４（アミノメチル）シクロヘキサンエチルカルボキシレートヒドロクロライド（ｔｒａｎｓ一４（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｅｔｈｙｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記 ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートに１、２−ジアミノエタンを添加する工程；
ｄ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記物質を真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。
ａ）トランス−４（アミノメチル）シクロヘキサンエチルカルボキシレートヒドロクロライド（ｔｒａｎｓ一４（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｅｔｈｙｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記 ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートに１、２−ジアミノエタンを添加する工程；
ｄ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記物質を真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。
本発明の他の様態によれば、本発明は、下記工程を含む前記ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式で、 Ｒ＝ＮＨ２；化合物１ｄ）の製造方法を提供する：
ａ）トランス−１、４−ジアミンシクロヘキサン（ｔｒａｎｓ-ｌ、４-ｄｉａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄｉ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ ｄｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｃ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックアミンコンジュゲートを作る工程；
ｄ）前記混合物を真空で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサミックアミン化合物を得る工程。
ａ）トランス−１、４−ジアミンシクロヘキサン（ｔｒａｎｓ-ｌ、４-ｄｉａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄｉ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ ｄｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｃ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックアミンコンジュゲートを作る工程；
ｄ）前記混合物を真空で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサミックアミン化合物を得る工程。
本発明の他の様態によれば、本発明は、下記工程を含む前記ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式でＲ＝Ｈ；化合物１ｅ）の製造方法を提供する：
ａ）アミノメチルシクロヘキサン（（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｄ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｅ）真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。
ａ）アミノメチルシクロヘキサン（（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｄ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｅ）真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。
本発明の他の様態によれば、本発明は、前記ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を含む錯体リガンド（Ｌ）用組成物を提供する。
本発明の一様態によれば、本発明は、前記ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物をリガンド（Ｌ）として含み、前記リガンドに配位結合する金属原子を含む錯体を提供する。
本発明において、前記金属原子は、ガドリニウム（Ｇｄ）であることを特徴とする。
また、前記リガンドに配位結合する金属原子を含む錯体は、［Ｇｄ（Ｌ）（Ｈ２Ｏ）］の化学式を有することを特徴とする。
本発明において、前記金属原子は、ガドリニウム（Ｇｄ）であることを特徴とする。
また、前記リガンドに配位結合する金属原子を含む錯体は、［Ｇｄ（Ｌ）（Ｈ２Ｏ）］の化学式を有することを特徴とする。
本発明の金属原子を含む錯体は、上述したように、合成されたＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（１ｃ−１ｅ化合物）を利用して製造する。それぞれの１ｃ〜１ｅ化合物と、ＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｈｅｘａｈｙｄｒａｔｅ）を反応させて、ガドリニウム錯体を製造する。
本発明の一様態によれば、前記錯体を有効成分として含有する磁気共鳴映像（ＭＲＩ）造影剤を提供する。
本発明において、前記造影剤は、ＥＣＦ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒ ｆｌｕｉｄ）造影剤機能を有することを特徴とする。本発明の実施例では、５個の錯体（２ａ−２ｅ）に対して構造活性相関性分析を実施した結果、ただ２ａのみが肝特異性を示した。２ｂ及び２ｃが肝で強い向上を示したにもかかわらず、肝特異性造影剤と呼ばれる程度の胆汁排出が観察されなかった。残りは、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような通常のＥＣＦ造影剤と非常に類似した行動をした。また、本願の新規シリーズは、生体内で使用されるのに何らの毒性を有しなかった。
本発明において、前記造影剤は、ＥＣＦ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒ ｆｌｕｉｄ）造影剤機能を有することを特徴とする。本発明の実施例では、５個の錯体（２ａ−２ｅ）に対して構造活性相関性分析を実施した結果、ただ２ａのみが肝特異性を示した。２ｂ及び２ｃが肝で強い向上を示したにもかかわらず、肝特異性造影剤と呼ばれる程度の胆汁排出が観察されなかった。残りは、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような通常のＥＣＦ造影剤と非常に類似した行動をした。また、本願の新規シリーズは、生体内で使用されるのに何らの毒性を有しなかった。
本発明において、前記造影剤は、高い弛緩率、向上した熱力学及び速度論的安定性、及びｐＨ安定性を有することを特徴とする。本発明の実施例を通じて、本願シリーズがｐＨ３〜１１の広い範囲にわたって高い速度論的安定性を示すことを証明した。
具体的に、本発明の実施例では、シリーズのＤＯ３Ａ−トラネキサメート（ｔｒａｎｅｘａｍａｔｅｓ）コンジュゲート（１ｃ−１ｅ）及び肝特異性ＭＲＩ造影剤として使用されるためのそれらのＧｄ錯体（２ｃ−２ｅ）を合成した。すべてのこれら錯体は、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような構造的に関連する臨床的造影剤に匹敵する熱力学的（ｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃ）及び速度論的（ｋｉｎｅｔｉｃ）安全性を示した。また、それらのＲ１弛緩率（ｒｅｌａｘｉｖｉｔｉｅｓ）は、３．６８〜４．８４ｍＭ−１ｓ−１範囲であって、商業的造影剤に匹敵した。２ａ−２ｅとしてのマウス生体内（Ｉｎ ｖｉｖｏ）ＭＲイメージは、２ａのみが肝（ｌｉｖｅｒ）特異性を示すことが分かる。２ｂ及び２ｃが肝（ｌｉｖｅｒ）で強い増強（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）を示したにもかかわらず、肝特異性造影剤と言える程度の胆汁（ｂｉｌｅ）排出は観察されない。残りは、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような一般的なＥＣＦ造影剤と非常に類似した態度を示した。これら新規シリーズは、生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）で使用されるのに毒性を有しなかった。
前述したように、新しいシリーズの肝特異性ＭＲＩ造影剤に対する調査は、２ａがＨＳＡ標的だけでなく、ある程度の肝特異性を示すＧｄ錯体の速度論的不活性（ｉｎｅｒｔ）生体適合性キレートとして作用するという本発明者の先行発見に基づくものである。新しいシリーズのＤＯ３Ａ−トラネキサメートコンジュゲートは、２ｃ−２ｅを含み、それらの合成は、典型的に２ａの合成に基づいく少しの変形から製造された。すなわち、前記合成は、初期にＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３トラネキサメートコンジュゲートの形成から始まって、引き続いてＴＦＡによってｔｅｒｔ−ブチル基を脱保護してシリーズ１を形成し、ガドリニウムクロライドで錯体化した後、シリーズ２を収得した（図１〜図３参照）。それらの合成は、マイクロ分析及び多様な分光（ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ）技術によって確認された。
以上説明したように、本発明の新しいシリーズのＤＯ３Ａトラネキサメートコンジュゲート（１ｃ−１ｅ）とそれらのＧｄ錯体（２ｃ−２ｅ）が、肝特異性ＭＲＩ造影剤として使用されるために製造された。すべてのこれら錯体は、熱力学的及び速度論的安定性を示し、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような構造的に関連する臨床的造影剤に匹敵するＲ１弛緩率を示した。５個の錯体（２ａ−２ｅ）に対して構造活性相関性分析を実施した結果、ただ２ａのみが肝特異性を示した。２ｂ及び２ｃが肝で強い向上を示したにもかかわらず、肝特異性造影剤と呼ばれる程度の胆汁排出が観察されなかった。残りは、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）のような通常のＥＣＦ造影剤と非常に類似した行動をした。新規シリーズは、生体内で使用されるのに何らの毒性を有しなかった。
図１は、本発明によるＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（１ｃ）及びそのガドリニウム錯体（２ｃ）の合成模式図を示したものである。
図２は、本発明によるＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（１ｄ）及びそのガドリニウム錯体（２ｄ）の合成模式図を示したものである。
図３は、本発明によるＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（１ｅ）及びそのガドリニウム錯体（２ｅ）の合成模式図を示したものである。
図４は、多様なＭＲＩ造影剤に対する時間に対する関数としてＲ１Ｐ（ｔ）／Ｒ１Ｐ（０）の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
図５（Ａ）は、造影剤の注射後５分後のＩＣＲマウスの冠状面（ｃｏｒｏｎａｌ）及び軸面（ａｘｉａｌ）Ｔ１−加重（ｗｅｉｇｈｔｅｄ）イメージを示す。Ｋ、腎臓；Ａ、腹部大動脈。
図５（Ｂ）は、造影剤の注射後１ｈ後の冠状面及び軸面Ｔ１−加重イメージを示す。Ｈ、心臓；Ｌ、肝；Ｂ、膀胱；Ｇ、胆嚢。
図６は、Ｇｄ−ＤＯＴＡ及び２ｂ−２ｅによって得られた正常結膜線維芽細胞の相対的細胞毒性（％）を示す。標準偏差（±ＳＤ）は、三重分析（ｎ＝３）で得られた。
図７ａ〜図７ｃは、リガンドに対するＧｄ３＋の結合熱力学のＩＴＣ決定を示す。結合等温は、Ｇｄ３＋／１ａ−１ｅのモル比の関数として積分熱（ｈｅａｔｓ）のプロットに該当する。実線は、数学的に決定された１セットのサイトモデル内でデータの最上フィットカーブに該当し、各リガンドに１分子（Ｇｄ３＋）結合を示す。解離定数（Ｋｄ）、結合定数（Ｋａ）、リガンド当たりの結合されたＧｄ３＋数（Ｎ）、及び連合エンタルピー変化（ΔＨ）は、データ分析で得られた。解離及び結合定数は、リガンド（１ａ−１ｅ）に比較した相対的安定性を決定するのに重要な接近方法である。
図８は、肝及び腎臓に対する多様な造影剤によって得られたＣＮＲプロファイルを示す。
図９は、互いに異なるｐＨ条件の下でインキュベーション時間の関数としてＰＢＳで２（［Ｇｄ］＝１．０ｍＭ）に対するＲ１の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
図２は、本発明によるＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（１ｄ）及びそのガドリニウム錯体（２ｄ）の合成模式図を示したものである。
図３は、本発明によるＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（１ｅ）及びそのガドリニウム錯体（２ｅ）の合成模式図を示したものである。
図４は、多様なＭＲＩ造影剤に対する時間に対する関数としてＲ１Ｐ（ｔ）／Ｒ１Ｐ（０）の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
図５（Ａ）は、造影剤の注射後５分後のＩＣＲマウスの冠状面（ｃｏｒｏｎａｌ）及び軸面（ａｘｉａｌ）Ｔ１−加重（ｗｅｉｇｈｔｅｄ）イメージを示す。Ｋ、腎臓；Ａ、腹部大動脈。
図５（Ｂ）は、造影剤の注射後１ｈ後の冠状面及び軸面Ｔ１−加重イメージを示す。Ｈ、心臓；Ｌ、肝；Ｂ、膀胱；Ｇ、胆嚢。
図６は、Ｇｄ−ＤＯＴＡ及び２ｂ−２ｅによって得られた正常結膜線維芽細胞の相対的細胞毒性（％）を示す。標準偏差（±ＳＤ）は、三重分析（ｎ＝３）で得られた。
図７ａ〜図７ｃは、リガンドに対するＧｄ３＋の結合熱力学のＩＴＣ決定を示す。結合等温は、Ｇｄ３＋／１ａ−１ｅのモル比の関数として積分熱（ｈｅａｔｓ）のプロットに該当する。実線は、数学的に決定された１セットのサイトモデル内でデータの最上フィットカーブに該当し、各リガンドに１分子（Ｇｄ３＋）結合を示す。解離定数（Ｋｄ）、結合定数（Ｋａ）、リガンド当たりの結合されたＧｄ３＋数（Ｎ）、及び連合エンタルピー変化（ΔＨ）は、データ分析で得られた。解離及び結合定数は、リガンド（１ａ−１ｅ）に比較した相対的安定性を決定するのに重要な接近方法である。
図８は、肝及び腎臓に対する多様な造影剤によって得られたＣＮＲプロファイルを示す。
図９は、互いに異なるｐＨ条件の下でインキュベーション時間の関数としてＰＢＳで２（［Ｇｄ］＝１．０ｍＭ）に対するＲ１の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
以下、実施例を通じて本発明をより詳しく説明する。これら実施例は、ただ本発明を例示するためのもので、本発明の範囲がこれら実施例によって制限されるものと解釈されない。
本実施例で、すべての反応は、標準Ｓｃｈｌｅｎｋ技術を利用して二窒素（ｄｉｎｉｔｒｏｇｅｎ）の環境の下で実施した。溶媒は、標準手続を利用して精製されて乾燥した。１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン（ＤＯＴＡ）は、Ｓｔｒｅｍ（Ｕ．Ｓ．）から購入し、トランス−４−（アミノメチル）−シクロヘキサンカルボン酸（トラネキサム酸）及びトランス−１，４−ジアミノシクロヘキサンは、Ａｌｄｒｉｃｈで購入し、アミノメチルシクロヘキサンは、ＴＣＩで購入した。すべての他の商業的試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈで購入し、他の表示がない限り、受けたものをそのまま使用した。脱イオン水（ＤＩ ｗａｔｅｒ）は、すべての実験に使用された。１Ｈ実験は、ＫＢＳＩにあるＢｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅ ４００または５００ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ上で実施した。化学的シフト（Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｈｉｆｔｓ）は、内部標準としてテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する比較値としてδ値で与えられた。カップリング定数は、Ｈｚで示し、ＦＡＢマススペクトルは、ＪＭＳ−７００ ｍｏｄｅｌ（Ｊｅｏｌ，Ｊａｐａｎ）ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを利用して得た。ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦマススペクトルは、Ｖｏｙａｇｅｒ ＤＥ−ＳＴＲ（Ａｐｐｌｉｅｄ ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｕ．Ｓ．）を利用して得た。成分（ｅｌｅｍｅｎｔａｌ）分析は、ＫＮＵのＣｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓで実施された。
実施例１．リガンド（Ｌｉｇａｎｄ）合成：
１）１ａ及び１ｂの合成
１ａ及び１ｂは、従来文献（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造された。
１）１ａ及び１ｂの合成
１ａ及び１ｂは、従来文献（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造された。
２）１ｃの合成
従来文献の方法（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造されたＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲート（６．８ｍｍｏｌ）（ｃｆ，Ｒ＝ＣＯ２Ｅｔ，Ｃｈａｒｔ１）をニット（ｎｅａｔ）１，２−ジアミノエタン（２．３ｍＬ，３３．８ｍｍｏｌ）に添加した。前記混合物を室温（ＲＴ）で７２ｈの間に撹拌した後、クロロホルムを添加して水で抽出した（３０ｍＬ×３ｔｉｍｅｓ）。有機（ｏｒｇａｎｉｃ）抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗（ｃｒｕｄｅ）産物を得、それをシリカ状のクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２、Ｒｆ＝０．６（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝２：８））によってさらに精製し、黄色固体を得た。これをジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロアセト酢酸を添加し、ｔｅｒｔ−ブチル基を脱保護させた。前記混合物を一晩中室温で撹拌し、溶媒を真空の下に除去し、オイル状残基（ｏｉｌｙ ｒｅｓｉｄｕｅ）のみを残して、これを水に吸収させた。アセトンを添加して、生成物を白色固体で沈殿させ、これを数回アセトンで洗浄し、真空の下に乾燥させた：収率：０．３６ｇ（９２％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．８２（ｓ，４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．６２（２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．６７（ｓ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＯＮ），３．４４（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−ｉｎ ｔｈｅ ｒｉｎｇ（８Ｈ）＆-ＣＯＮＨＣＨ２−（２Ｈ）），３．０８（ｄ，２Ｈ，−ＣＯＮＨＣＨ−２Ｃ−），２．２４／１．５２（ｍ，２Ｈ，−ＣＯＮＨ），１．８５／１．４１（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ），１．０３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４７Ｎ７Ｏ８・２Ｈ２Ｏ：Ｃ，５０．２３；Ｈ，８．２７；Ｎ，１５．７７．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５０．６６；Ｈ，８．２４；Ｎ，１６．０１．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４７Ｎ７Ｏ８：５８５．３５，Ｆｏｕｎｄ：５８６．７４（［ＭＨ］＋），６０８．７０（［ＭＮａ］＋）。
従来文献の方法（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造されたＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲート（６．８ｍｍｏｌ）（ｃｆ，Ｒ＝ＣＯ２Ｅｔ，Ｃｈａｒｔ１）をニット（ｎｅａｔ）１，２−ジアミノエタン（２．３ｍＬ，３３．８ｍｍｏｌ）に添加した。前記混合物を室温（ＲＴ）で７２ｈの間に撹拌した後、クロロホルムを添加して水で抽出した（３０ｍＬ×３ｔｉｍｅｓ）。有機（ｏｒｇａｎｉｃ）抽出物をＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗（ｃｒｕｄｅ）産物を得、それをシリカ状のクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２、Ｒｆ＝０．６（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝２：８））によってさらに精製し、黄色固体を得た。これをジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロアセト酢酸を添加し、ｔｅｒｔ−ブチル基を脱保護させた。前記混合物を一晩中室温で撹拌し、溶媒を真空の下に除去し、オイル状残基（ｏｉｌｙ ｒｅｓｉｄｕｅ）のみを残して、これを水に吸収させた。アセトンを添加して、生成物を白色固体で沈殿させ、これを数回アセトンで洗浄し、真空の下に乾燥させた：収率：０．３６ｇ（９２％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．８２（ｓ，４Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．６２（２Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．６７（ｓ，２Ｈ，−ＣＨ２ＣＯＮ），３．４４（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−ｉｎ ｔｈｅ ｒｉｎｇ（８Ｈ）＆-ＣＯＮＨＣＨ２−（２Ｈ）），３．０８（ｄ，２Ｈ，−ＣＯＮＨＣＨ−２Ｃ−），２．２４／１．５２（ｍ，２Ｈ，−ＣＯＮＨ），１．８５／１．４１（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ），１．０３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４７Ｎ７Ｏ８・２Ｈ２Ｏ：Ｃ，５０．２３；Ｈ，８．２７；Ｎ，１５．７７．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５０．６６；Ｈ，８．２４；Ｎ，１６．０１．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４７Ｎ７Ｏ８：５８５．３５，Ｆｏｕｎｄ：５８６．７４（［ＭＨ］＋），６０８．７０（［ＭＮａ］＋）。
３）１ｄの合成
従来文献の方法（Ｌｅｅ，Ｄ．Ｗ．；Ｈａ，Ｈ．Ｊ．Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎ ２００７，３７，７３７ Ｒｏｔｈ，Ｇ．Ｊ．；Ｈｅｃｋｅｌ，Ａ．；Ｃｏｌｂａｔｚｋｙ，Ｆ．；Ｈａｎｄｓｃｈｕｈ，Ｓ．；Ｋｌｅｙ，Ｊ．；Ｌｅｈｍａｎｎ−Ｌｉｎｔｚ，Ｔ．；Ｌｏｔｚ，Ｒ．；Ｔｏｎｔｓｃｈ−Ｇｒｕｎｔ，Ｕ．；Ｗａｌｔｅｒ，Ｒ．；Ｈｉｌｂｅｒｇ，Ｆ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９，５２，４４６６）によってトランス−１，４−シクロヘキサンから製造されたクロロホルム（１００ｍＬ）中のトランス−［４−（２−クロロアセチルアミノ）シクロヘキシル］カルバミックｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｇ，３．４ｍｍｏｌ）溶液にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３（１．６ｇ，３．１ｍｍｏｌ）を添加した。前記混合物を室温で２４ｈの間に撹拌し、すべての固体を濾過で除去し、濾過液を真空の下に蒸発させて、黄色オイル状残基を残した。引き続いて、シリカ状のカラムクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ：ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２，Ｒｆ＝０．４（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１：９））を実施して、黄白色（ｏｆｆ−ｗｈｉｔｅ）固体を得た。これをジクロロメタンに再溶解させ、過量のＴＦＡを添加した。一晩中撹拌を継続した後、メタノールを添加して白色固体を沈殿させ、常用法でさらに精製した。収率：０．６２ｇ（８７％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．７２（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ−ＮＣＨ２ＣＯ２−（８Ｈ），−ＣＯＮＨＣＨ−＆Ｈ２ＮＣＨ−（２Ｈ）），３．４０／３．２１（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２．０６／１／５５／１．３８（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ４０Ｎ６Ｏ７・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・２Ｈ２Ｏ：Ｃ，３９．００；Ｈ，６．２９；Ｎ，１０．５０．Ｆｏｕｎｄ Ｃ，３９．１３；Ｈ，６．０５；Ｎ，９．３５．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ４０Ｎ６Ｏ７：５００．３０，Ｆｏｕｎｄ：５０１．３３［ＭＨ］＋，５２３．３３［ＭＮａ］＋。
従来文献の方法（Ｌｅｅ，Ｄ．Ｗ．；Ｈａ，Ｈ．Ｊ．Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍｕｎ ２００７，３７，７３７ Ｒｏｔｈ，Ｇ．Ｊ．；Ｈｅｃｋｅｌ，Ａ．；Ｃｏｌｂａｔｚｋｙ，Ｆ．；Ｈａｎｄｓｃｈｕｈ，Ｓ．；Ｋｌｅｙ，Ｊ．；Ｌｅｈｍａｎｎ−Ｌｉｎｔｚ，Ｔ．；Ｌｏｔｚ，Ｒ．；Ｔｏｎｔｓｃｈ−Ｇｒｕｎｔ，Ｕ．；Ｗａｌｔｅｒ，Ｒ．；Ｈｉｌｂｅｒｇ，Ｆ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９，５２，４４６６）によってトランス−１，４−シクロヘキサンから製造されたクロロホルム（１００ｍＬ）中のトランス−［４−（２−クロロアセチルアミノ）シクロヘキシル］カルバミックｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｇ，３．４ｍｍｏｌ）溶液にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３（１．６ｇ，３．１ｍｍｏｌ）を添加した。前記混合物を室温で２４ｈの間に撹拌し、すべての固体を濾過で除去し、濾過液を真空の下に蒸発させて、黄色オイル状残基を残した。引き続いて、シリカ状のカラムクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ：ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２，Ｒｆ＝０．４（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１：９））を実施して、黄白色（ｏｆｆ−ｗｈｉｔｅ）固体を得た。これをジクロロメタンに再溶解させ、過量のＴＦＡを添加した。一晩中撹拌を継続した後、メタノールを添加して白色固体を沈殿させ、常用法でさらに精製した。収率：０．６２ｇ（８７％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．７２（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ−ＮＣＨ２ＣＯ２−（８Ｈ），−ＣＯＮＨＣＨ−＆Ｈ２ＮＣＨ−（２Ｈ）），３．４０／３．２１（ｍ，１６Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），２．０６／１／５５／１．３８（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ４０Ｎ６Ｏ７・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・２Ｈ２Ｏ：Ｃ，３９．００；Ｈ，６．２９；Ｎ，１０．５０．Ｆｏｕｎｄ Ｃ，３９．１３；Ｈ，６．０５；Ｎ，９．３５．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ４０Ｎ６Ｏ７：５００．３０，Ｆｏｕｎｄ：５０１．３３［ＭＨ］＋，５２３．３３［ＭＮａ］＋。
４）１ｅの合成
従来文献の方法（Ｃｈｏ，Ｓ．Ｄ．；Ｓｏｎｇ，Ｓ．Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｋ．Ｈ．；Ｚｈａｏ，Ｂ．Ｘ．；Ａｈｎ，Ｃ．；Ｊｏｏ，Ｗ．Ｈ．；Ｙｏｏｎ，Ｙ．Ｊ．；Ｆａｌｃｋ，Ｊ．Ｒ．；Ｓｈｉｎ，Ｄ．Ｓ．Ｂ Ｋｏｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓ℃．２００４，２５，４１５）によって製造されたアセトニトリル（３０ｍＬ）中の２−クロロ−Ｎ−シクロヘキシルメチルアセトアミド（１．２ｇ，６．４ｍｍｏｌ）溶液にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３（３．０ｇ，５．８ｍｍｏｌ）を添加した。前記溶液を室温で２４ｈの間に撹拌した。固体不純物を濾過によって除去し、濾過液を真空の下に蒸発させて、オイル状残基を得た。引き続いて、シリカ状のカラムクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ：ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２，Ｒｆ＝０．４（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１：９））を実施し、減圧の下に蒸発させて、黄白色の固体を得た。前記１ｄの製造に記述した通り、ＴＦＡによる脱保護を実施し、黄白色の固体を生成物として得た。収率：２．４ｇ（８２％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．７４／３．５７（ｍ，８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．３０（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ-ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−（８Ｈ）＆-ＣＯＮＨＣＨ２−（２Ｈ）），３．１０（ｍ，８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．９８／１．４４／１．２７（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ），１．８８（ｍ，１Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＨ−）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３９Ｎ５Ｏ７・３ＣＦ３ＣＯＯＨ・３Ｈ２Ｏ：Ｃ，３８．１４；Ｈ，５．４９；Ｎ，７．９４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３７．８３；Ｈ，５．７６；Ｎ，８．４４．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３９Ｎ５Ｏ７，：４８５．２８，Ｆｏｕｎｄ：４８６．４２（［ＭＨ］＋），５０８．４４（［ＭＮａ］＋）。
従来文献の方法（Ｃｈｏ，Ｓ．Ｄ．；Ｓｏｎｇ，Ｓ．Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｋ．Ｈ．；Ｚｈａｏ，Ｂ．Ｘ．；Ａｈｎ，Ｃ．；Ｊｏｏ，Ｗ．Ｈ．；Ｙｏｏｎ，Ｙ．Ｊ．；Ｆａｌｃｋ，Ｊ．Ｒ．；Ｓｈｉｎ，Ｄ．Ｓ．Ｂ Ｋｏｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓ℃．２００４，２５，４１５）によって製造されたアセトニトリル（３０ｍＬ）中の２−クロロ−Ｎ−シクロヘキシルメチルアセトアミド（１．２ｇ，６．４ｍｍｏｌ）溶液にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３（３．０ｇ，５．８ｍｍｏｌ）を添加した。前記溶液を室温で２４ｈの間に撹拌した。固体不純物を濾過によって除去し、濾過液を真空の下に蒸発させて、オイル状残基を得た。引き続いて、シリカ状のカラムクロマトグラフィー（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ：ＣＨ２Ｃｌ２ ｔｏ １０％ ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２，Ｒｆ＝０．４（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１：９））を実施し、減圧の下に蒸発させて、黄白色の固体を得た。前記１ｄの製造に記述した通り、ＴＦＡによる脱保護を実施し、黄白色の固体を生成物として得た。収率：２．４ｇ（８２％）。１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：δ＝３．７４／３．５７（ｍ，８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＯ２−），３．３０（ｍ，１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ-ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−（８Ｈ）＆-ＣＯＮＨＣＨ２−（２Ｈ）），３．１０（ｍ，８Ｈ，−ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ−），１．９８／１．４４／１．２７（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−，ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ），１．８８（ｍ，１Ｈ，−ＮＨＣＨ２ＣＨ−）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３９Ｎ５Ｏ７・３ＣＦ３ＣＯＯＨ・３Ｈ２Ｏ：Ｃ，３８．１４；Ｈ，５．４９；Ｎ，７．９４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３７．８３；Ｈ，５．７６；Ｎ，８．４４．ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３９Ｎ５Ｏ７，：４８５．２８，Ｆｏｕｎｄ：４８６．４２（［ＭＨ］＋），５０８．４４（［ＭＮａ］＋）。
実施例２．Ｇｄ錯体（ｃｏｍｐｌｅｘ）の合成：
１）２ａ及び２ｂの合成
２ａ及び２ｂは、従来文献（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造された。
１）２ａ及び２ｂの合成
２ａ及び２ｂは、従来文献（Ｇｕ，Ｓ．；Ｋｉｍ，Ｈ．Ｋ．；Ｌｅｅ，Ｇ．Ｈ．；Ｋａｎｇ，Ｂ．Ｓ．；Ｃｈａｎｇ，Ｙ．；Ｋｉｍ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，１４３）によって製造された。
２）２ｃの合成
水中（５０ｍＬ）１ｃ（１．０ｇ，１．７ｍｍｏｌ）溶液にガドリニウムクロライド（０．６４ｇ，１．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で４８ｈの間に撹拌した。ｐＨは、周期的にチェックして１ Ｎ ＮａＯＨを使用し、７．０〜７．５に調整した。前記反応混合物を真空の下に乾燥させて、オイル状残基を残し、これを水に吸収させた。前記溶液にアセトンを添加して、白色の固体を沈殿させ、濾過によって分離させ、アセトンで洗浄し、真空の下に乾燥させた。その生成物は、吸湿性（ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃ）のアイボリー色の固体として得た。収率：０．７５ｇ（８６％）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・８Ｈ２Ｏ：Ｃ，３２．４０；Ｈ，５．６２；Ｎ，８．８２．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３１．９９；Ｈ，５．２２；Ｎ，９．００．ＨＲ−ＦＡＢＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４５ＧｄＮ７Ｏ８，７４１．２６（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：７４１．２５６７；Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８Ｎａ，７６３．２４（［ＭＮａ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：７６３．２３９７。
水中（５０ｍＬ）１ｃ（１．０ｇ，１．７ｍｍｏｌ）溶液にガドリニウムクロライド（０．６４ｇ，１．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で４８ｈの間に撹拌した。ｐＨは、周期的にチェックして１ Ｎ ＮａＯＨを使用し、７．０〜７．５に調整した。前記反応混合物を真空の下に乾燥させて、オイル状残基を残し、これを水に吸収させた。前記溶液にアセトンを添加して、白色の固体を沈殿させ、濾過によって分離させ、アセトンで洗浄し、真空の下に乾燥させた。その生成物は、吸湿性（ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃ）のアイボリー色の固体として得た。収率：０．７５ｇ（８６％）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・８Ｈ２Ｏ：Ｃ，３２．４０；Ｈ，５．６２；Ｎ，８．８２．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３１．９９；Ｈ，５．２２；Ｎ，９．００．ＨＲ−ＦＡＢＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４５ＧｄＮ７Ｏ８，７４１．２６（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：７４１．２５６７；Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８Ｎａ，７６３．２４（［ＭＮａ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：７６３．２３９７。
３）２ｄの合成
標題化合物は、１ｃを１ｄに代替したことを除いて、前記製造方法と同一に製造された。その生成物は、吸湿性の黄白色の固体として得た。収率：１．１５ｇ（８８％）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３７ＧｄＮ６Ｏ７・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・５Ｈ２Ｏ：Ｃ，３２．１０；Ｈ，５．０８；Ｎ，８．６４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３１．５５；Ｈ，５．０９；Ｎ，９．０６．ＨＲ−ＦＡＢＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３８ＧｄＮ６Ｏ７，６５６．２１（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６５６．２０４５；Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８Ｎａ，６７８．１９（［ＭＮａ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６７８．１８６７。
標題化合物は、１ｃを１ｄに代替したことを除いて、前記製造方法と同一に製造された。その生成物は、吸湿性の黄白色の固体として得た。収率：１．１５ｇ（８８％）。Ａｎａｌ． Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３７ＧｄＮ６Ｏ７・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・５Ｈ２Ｏ：Ｃ，３２．１０；Ｈ，５．０８；Ｎ，８．６４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３１．５５；Ｈ，５．０９；Ｎ，９．０６．ＨＲ−ＦＡＢＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ３８ＧｄＮ６Ｏ７，６５６．２１（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６５６．２０４５；Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ４４ＧｄＮ７Ｏ８Ｎａ，６７８．１９（［ＭＮａ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６７８．１８６７。
４）２ｅの合成
標題化合物は、１ｃを１ｅに代替したことを除いて、前記製造方法と同一に製造された。その生成物は、吸湿性の黄白色の固体として得た。収率：０．７５ｇ（８６％）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ３８ＧｄＮ５Ｏ７・４Ｈ２Ｏ：Ｃ，３８．０６；Ｈ，６．３９；Ｎ，９．６５．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３８．５９；Ｈ，６．０９；Ｎ，９．６９。ＨＲ−ＦＡＢ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ３９ＧｄＮ５Ｏ７，６５５．２１（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６５５．２０９３。
標題化合物は、１ｃを１ｅに代替したことを除いて、前記製造方法と同一に製造された。その生成物は、吸湿性の黄白色の固体として得た。収率：０．７５ｇ（８６％）。Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ３８ＧｄＮ５Ｏ７・４Ｈ２Ｏ：Ｃ，３８．０６；Ｈ，６．３９；Ｎ，９．６５．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，３８．５９；Ｈ，６．０９；Ｎ，９．６９。ＨＲ−ＦＡＢ ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ３９ＧｄＮ５Ｏ７，６５５．２１（［ＭＨ-Ｈ２Ｏ］＋）。Ｆｏｕｎｄ：６５５．２０９３。
実施例３．弛緩率（Ｒｅｌａｘｉｖｉｔｙ）の測定
Ｔ１測定は、１．５Ｔ（６４ＭＨｚ）で変動逆転時間（ＴＩ）で逆転回収法（ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｍｅｔｈｏｄ）を利用して実施した。ＭＲイメージは、５０〜１７５０ｍｓ範囲の３５個互いに異なるＴＩ値として得た。Ｔ１弛緩時間は、各ＴＩ値で測定された信号強度の非線形最小二乗法（ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｌｅａｓｔ−ｓｑｕａｒｅｓ ｆｉｔ）から得た。Ｔ２ ＣＰＭＧ（Ｃａｒｒ−Ｐｕｒｃｅｌｌ−Ｍｅｉｂｏｏｎ−Ｇｉｌｌ）パルスシーケンス測定のために、多重スピン−エコー測定に適応された。３４個のイメージを１０〜１９００ｍｓ範囲の３４個互いに異なるエコー時間（ＴＥ）値として得た。Ｔ２弛緩時間は、各エコー時間で多重スピン−エコー測定のための平均（ｍｅａｎ）ピクセル値の非線形最小二乗法から得た。次に、弛緩率（Ｒ１及びＲ２）をｍＭ当たり弛緩時間の逆数で計算した。決定された弛緩時間（Ｔ１及びＴ２）と弛緩率（Ｒ１及びＲ２）を最終的にイメージプロセッシングして、弛緩時間マップと弛緩率をそれぞれ得た。
Ｔ１測定は、１．５Ｔ（６４ＭＨｚ）で変動逆転時間（ＴＩ）で逆転回収法（ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｍｅｔｈｏｄ）を利用して実施した。ＭＲイメージは、５０〜１７５０ｍｓ範囲の３５個互いに異なるＴＩ値として得た。Ｔ１弛緩時間は、各ＴＩ値で測定された信号強度の非線形最小二乗法（ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｌｅａｓｔ−ｓｑｕａｒｅｓ ｆｉｔ）から得た。Ｔ２ ＣＰＭＧ（Ｃａｒｒ−Ｐｕｒｃｅｌｌ−Ｍｅｉｂｏｏｎ−Ｇｉｌｌ）パルスシーケンス測定のために、多重スピン−エコー測定に適応された。３４個のイメージを１０〜１９００ｍｓ範囲の３４個互いに異なるエコー時間（ＴＥ）値として得た。Ｔ２弛緩時間は、各エコー時間で多重スピン−エコー測定のための平均（ｍｅａｎ）ピクセル値の非線形最小二乗法から得た。次に、弛緩率（Ｒ１及びＲ２）をｍＭ当たり弛緩時間の逆数で計算した。決定された弛緩時間（Ｔ１及びＴ２）と弛緩率（Ｒ１及びＲ２）を最終的にイメージプロセッシングして、弛緩時間マップと弛緩率をそれぞれ得た。
２ａ−２ｅは、Ｇｄ−ＤＯＴＡ（Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標））及びＧｄ−ＢＴ−ＤＯ３Ａ（Ｇａｄｏｖｉｓｔ（登録商標））のような臨床的に利用可能なＭＲＩ造影剤に匹敵するか、これらより良好なＰＢＳでのＲ１弛緩率を示した（表１）。シリーズ中で比較したとき、Ｒ１’ｓの観察に値する差異は発見されなかった。測定は、それらがどんな血液−プール（ｂｌｏｏｄ−ｐｏｏｌ）効果を示すかどうかを調べるために、２つの互いに異なる媒体、ＰＢＳ（ｐＨ＝７．４）及びＨＳＡのＰＢＳ溶液で実施した。ＰＢＳでのＲ１’ｓに比べてＨＳＡでＲ１のどんな有意的な増加が観察され、これは、本願の新規シリーズとＨＳＡとの間に少しの相互作用があることを示す。
実施例４．金属交換速度論（Ｔｒａｎｓｍｅｔａｌａｔｉｏｎ Ｋｉｎｅｔｉｃｓ）
この実験は、従来文献の方法（Ｌａｕｒｅｎｔ，Ｓ．Ｅｌｓｔ，Ｌ．Ｖ．；Ｃｏｐｏｉｘ，Ｆ．；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｒ．Ｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ ｒａｄｉｏｌｏｇｙ ２００１，３６，１１５）によって用意した。それは、２．５ｍｍｏｌ／Ｌガドリニウム錯体及び２．５ｍｍｏｌ／Ｌ ＺｎＣｌ２を含有する緩衝溶液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ，ｐＨ７．４）の水プロトン縦軸弛緩率（Ｒ１Ｐ）の進化（ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）の測定に基づく。次に、１０μＬのＺｎＣｌ２ ２５０ｍｍｏｌ／Ｌ溶液を１ｎｋの常磁性（ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ）錯体緩衝溶液に添加した。その混合物を強く撹拌し、３００μＬを取って、弛緩測定（ｒｅｌａｘｏｍｅｔｒｉｃ）の研究に使用した。Ｇｄ−ＤＯＴＡ、Ｇｄ−ＢＯＰＴＡ、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、及びＧｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡに対して実施した対照群研究は、ＺｎＣｌ２の存在の下に得られたものと同一の結果を示した。観察された弛緩率Ｒ１＝（１／Ｔ１）から水プロトン弛緩の半磁性（ｄｉａｍａｇｎｅｔｉｃ）寄与を控除した後、Ｒ１Ｐ弛緩率を得た。測定は、室温で３Ｔ ｗｈｏｌｅ ｂｏｄｙ ｓｙｓｔｅｍ（Ｍａｇｎｅｔｏｍ Ｔｉｍ Ｔｒｉｏ，Ｓｉｍｅｎｓ，Ｋｏｒｅａ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌｏｇｉｃａｌ ＆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ）上で実施した。
この実験は、従来文献の方法（Ｌａｕｒｅｎｔ，Ｓ．Ｅｌｓｔ，Ｌ．Ｖ．；Ｃｏｐｏｉｘ，Ｆ．；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｒ．Ｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ ｒａｄｉｏｌｏｇｙ ２００１，３６，１１５）によって用意した。それは、２．５ｍｍｏｌ／Ｌガドリニウム錯体及び２．５ｍｍｏｌ／Ｌ ＺｎＣｌ２を含有する緩衝溶液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ，ｐＨ７．４）の水プロトン縦軸弛緩率（Ｒ１Ｐ）の進化（ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）の測定に基づく。次に、１０μＬのＺｎＣｌ２ ２５０ｍｍｏｌ／Ｌ溶液を１ｎｋの常磁性（ｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ）錯体緩衝溶液に添加した。その混合物を強く撹拌し、３００μＬを取って、弛緩測定（ｒｅｌａｘｏｍｅｔｒｉｃ）の研究に使用した。Ｇｄ−ＤＯＴＡ、Ｇｄ−ＢＯＰＴＡ、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、及びＧｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡに対して実施した対照群研究は、ＺｎＣｌ２の存在の下に得られたものと同一の結果を示した。観察された弛緩率Ｒ１＝（１／Ｔ１）から水プロトン弛緩の半磁性（ｄｉａｍａｇｎｅｔｉｃ）寄与を控除した後、Ｒ１Ｐ弛緩率を得た。測定は、室温で３Ｔ ｗｈｏｌｅ ｂｏｄｙ ｓｙｓｔｅｍ（Ｍａｇｎｅｔｏｍ Ｔｉｍ Ｔｒｉｏ，Ｓｉｍｅｎｓ，Ｋｏｒｅａ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌｏｇｉｃａｌ ＆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ）上で実施した。
図４は、多様なＭＲＩ造影剤に対する時間に対する関数としてＲ１Ｐ（ｔ）／Ｒ１Ｐ（０）の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
正常の常磁性縦軸弛緩率Ｒ１Ｐ（ｔ）／Ｒ１Ｐ（０）の評価は、本シリーズ２ａ−２ｅ及び比較目的のＤｏｔａｒｅｍ（登録商標）、Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）、Ｍｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）、Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標）で観察された（図４）。試験に使用された錯体は、進化パターンによって２つのグループに分けられる：（ｉ）巨大環（ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃ）キレートを採用するもの、（ｉｉ）非環（ａｃｙｃｌｉｃ）キレートを有するもの。本シリーズは、巨大環リングを採用し、非常に高い速度論的非活性（ｉｎｅｒｔｎｅｓｓ）を有する確率が高いため、７２ｈの間に初期測定中に９０％以上の常磁性弛緩率を維持した。しかし、対照的に、後者グループに属するものは、顕著に減少した弛緩率が観察された。例えば、Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）は、勾配（ｓｌｏｐｅ）が非常に急激で、同一の測定期間中にわずか５０％の初期弛緩率を維持した。
実施例５．等温滴定カロリメーター（Ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ：ＩＴＣ）
リガンド溶液に対する常磁性金属イオンＧｄ３＋の結合等温（ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｓｏｔｈｅｒｍｓ）を定量するために、ＶＰ−ＩＴＣ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｍｉｃｒｏｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ（Ｍｉｃｒｏｃａｌ，ＵＳＡ）でＩＴＣ実験を実施した。データ収集、分析及びプロッティング（ｐｌｏｔｔｉｎｇ）Ｍｉｃｒｏｃａｌで供給されたｓｏｆｔｗａｒｅ ｐａｃｋａｇｅ Ｏｒｉｇｉｎ、ｖｅｒｓｉｏｎ ８．０の助けで実施した。試料セル（ｃｅｌｌ）は、１．４３ｍＬの体積を有する。そこに１ａ−１ｅリガンド（０．２ｍＭ）の水性緩衝溶液で満たした。Ｇｄ３＋（１．０ｍＭ）の水性緩衝溶液を３００μＬ連続撹拌された（３００ｒｐｍ）シリンジーに入れ、１０μＬ分液（ａｌｉｑｕｏｔｓ）でセル内に注射し、３分間隔で２０ｓにわたって伝達した。データポイントは、毎２ｓごとに収集した。測定は、２５℃で実施した。すべての滴定（ｔｉｔｒａｔｉｏｎｓ）は、３回実施して、データの一貫性と溶液の安定性を確保した。これら滴定等温（ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍｓ）を積分し、各注射時にエンタルピー（ｅｎｔｈａｌｐｙ）変化を求めた。２つの数学的に互いに異なるセットのサイトモデルに良好にフィッティングするために、等温を分析した。カロリー測定分析を通じて、結合定数（Ｋａ）、エンタルピー変化（ΔＨ）、及び結合の化学量論（Ｎ）を含むパラメータを計算した。次に、自由エネルギー（ΔＧ）及びエントロピー（ΔＳ）の変化を次の錯体化（ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ）等式を利用して決定した：Ｍｎ＋＋ｎＬ⇔ＭＬｎ：ΔＧ＝−ＲＴ・ｌｎＫａ＝ΔＨ−ＴΔＳ、前記式で、Ｒは、普遍的（ｕｎｉｖｅｒｓａｌ）ガス定数であり、Ｔは、ケルビン（Ｋｅｌｖｉｎ）温度である。
リガンド溶液に対する常磁性金属イオンＧｄ３＋の結合等温（ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｓｏｔｈｅｒｍｓ）を定量するために、ＶＰ−ＩＴＣ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｍｉｃｒｏｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ（Ｍｉｃｒｏｃａｌ，ＵＳＡ）でＩＴＣ実験を実施した。データ収集、分析及びプロッティング（ｐｌｏｔｔｉｎｇ）Ｍｉｃｒｏｃａｌで供給されたｓｏｆｔｗａｒｅ ｐａｃｋａｇｅ Ｏｒｉｇｉｎ、ｖｅｒｓｉｏｎ ８．０の助けで実施した。試料セル（ｃｅｌｌ）は、１．４３ｍＬの体積を有する。そこに１ａ−１ｅリガンド（０．２ｍＭ）の水性緩衝溶液で満たした。Ｇｄ３＋（１．０ｍＭ）の水性緩衝溶液を３００μＬ連続撹拌された（３００ｒｐｍ）シリンジーに入れ、１０μＬ分液（ａｌｉｑｕｏｔｓ）でセル内に注射し、３分間隔で２０ｓにわたって伝達した。データポイントは、毎２ｓごとに収集した。測定は、２５℃で実施した。すべての滴定（ｔｉｔｒａｔｉｏｎｓ）は、３回実施して、データの一貫性と溶液の安定性を確保した。これら滴定等温（ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍｓ）を積分し、各注射時にエンタルピー（ｅｎｔｈａｌｐｙ）変化を求めた。２つの数学的に互いに異なるセットのサイトモデルに良好にフィッティングするために、等温を分析した。カロリー測定分析を通じて、結合定数（Ｋａ）、エンタルピー変化（ΔＨ）、及び結合の化学量論（Ｎ）を含むパラメータを計算した。次に、自由エネルギー（ΔＧ）及びエントロピー（ΔＳ）の変化を次の錯体化（ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ）等式を利用して決定した：Ｍｎ＋＋ｎＬ⇔ＭＬｎ：ΔＧ＝−ＲＴ・ｌｎＫａ＝ΔＨ−ＴΔＳ、前記式で、Ｒは、普遍的（ｕｎｉｖｅｒｓａｌ）ガス定数であり、Ｔは、ケルビン（Ｋｅｌｖｉｎ）温度である。
本シリーズは、等温滴定カロリーメーターによって測定したとき、４次数（ｏｒｄｅｒ）の高い形成定数（Ｋａ）を有する点から、本シリーズの高い熱力学的安定性に留意する必要がある（表２及び図７参照）。シリーズ内で比較したとき、１ｂは、未知の理由で、Ｇｄ３＋イオンに対する最高選好度（ｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）を示す。図７は、リガンドに対するＧｄ３＋の結合熱力学のＩＴＣ決定を示す。結合等温は、Ｇｄ３＋／１ａ−１ｅのモル比の関数として積分熱（ｈｅａｔｓ）のプロットに該当する。実線は、数学的に決定された１セットのサイトモデル内でデータの最上−フィットカーブに該当し、各リガンドに１分子（Ｇｄ３＋）結合を示す。解離定数（Ｋｄ）、結合定数（Ｋａ）、リガンド当たり結合されたＧｄ３＋数（Ｎ）、及び連合エンタルピー変化（ΔＨ）は、データ分析で得られた。解離及び結合定数は、リガンド（１ａ−１ｅ）に比較した相対的安定性を決定するのに重要な接近方法である。
実施例６．生体内（Ｉｎ ｖｉｖｏ）ＭＲ実験
生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）研究は、慶北大学校動物研究委員会の規則に従って実施した。２９〜３１ｇ体重の６週齢雄性ＩＣＲマウスを生体内研究に使用した。マウス（ｎ＝３）を酸素中に１．５％イソプルランで麻酔した。測定は、尾静脈を通じた２ａ−２ｅの注射前後に実施した。各注射当たり造影剤の量は、次の通りである：ＭＲイメージのために、０．１ｍｍｏｌのＧｄ／ｋｇ。各測定後に、マウスを麻酔から覚めさせた後、飼料及び食べ物の自由接近が可能なケージに入れた。これら測定中に、動物は、暖かいウォーターブランケットを利用して約３７℃に維持させた。ＭＲイメージは、手作り小型動物ＲＦコイルが装着された１．５ Ｔ ＭＲ ｕｎｉｔ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）で撮影した。前記コイルは、５０ｍｍの内径を有するレシーバータイプであった。スピンエコー（ＳＥ）のイメージングパラメータは、次の通りである：繰り返し時間（ＴＲ）＝３００ｍｓｅｃ；エコー時間（ＴＥ）＝１３ｍｓｅｃ；８ｍｍフィールドのビュー（ＦＯＶ）；１９２×１２８マトリックスサイズ１．２ｍｍスライス厚さの収得個数（ＮＥＸ）＝８。ＭＲイメージは、注射後に２４ｈの間に得た。向上した対照度（ｃｏｎｔｒａｓｔ）を有する解剖学的位置は、ポストコントラスト（ｐｏｓｔ ｃｏｎｔｒａｓｔ）ＭＲイメージ上で肝（ｌｉｖｅｒ）、胆管（ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ）、及び腎臓（ｋｉｄｎｅｙ）に対して同定された。定量的測定のために、特定関心領域（ＲＯＩ）での信号強度をＡｄｖａｎｔａｇｅ Ｗｉｎｄｏｗ ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＧＥ ｍｅｄｉｃａｌ，Ｕ．Ｓ．）を利用して測定した。ＣＮＲは、次の等式（１）を利用して計算した。下記式で、ＳＮＲは、信号−対−ノイズの比率である。
生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）研究は、慶北大学校動物研究委員会の規則に従って実施した。２９〜３１ｇ体重の６週齢雄性ＩＣＲマウスを生体内研究に使用した。マウス（ｎ＝３）を酸素中に１．５％イソプルランで麻酔した。測定は、尾静脈を通じた２ａ−２ｅの注射前後に実施した。各注射当たり造影剤の量は、次の通りである：ＭＲイメージのために、０．１ｍｍｏｌのＧｄ／ｋｇ。各測定後に、マウスを麻酔から覚めさせた後、飼料及び食べ物の自由接近が可能なケージに入れた。これら測定中に、動物は、暖かいウォーターブランケットを利用して約３７℃に維持させた。ＭＲイメージは、手作り小型動物ＲＦコイルが装着された１．５ Ｔ ＭＲ ｕｎｉｔ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）で撮影した。前記コイルは、５０ｍｍの内径を有するレシーバータイプであった。スピンエコー（ＳＥ）のイメージングパラメータは、次の通りである：繰り返し時間（ＴＲ）＝３００ｍｓｅｃ；エコー時間（ＴＥ）＝１３ｍｓｅｃ；８ｍｍフィールドのビュー（ＦＯＶ）；１９２×１２８マトリックスサイズ１．２ｍｍスライス厚さの収得個数（ＮＥＸ）＝８。ＭＲイメージは、注射後に２４ｈの間に得た。向上した対照度（ｃｏｎｔｒａｓｔ）を有する解剖学的位置は、ポストコントラスト（ｐｏｓｔ ｃｏｎｔｒａｓｔ）ＭＲイメージ上で肝（ｌｉｖｅｒ）、胆管（ｂｉｌｅ ｄｕｃｔ）、及び腎臓（ｋｉｄｎｅｙ）に対して同定された。定量的測定のために、特定関心領域（ＲＯＩ）での信号強度をＡｄｖａｎｔａｇｅ Ｗｉｎｄｏｗ ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＧＥ ｍｅｄｉｃａｌ，Ｕ．Ｓ．）を利用して測定した。ＣＮＲは、次の等式（１）を利用して計算した。下記式で、ＳＮＲは、信号−対−ノイズの比率である。
ＣＮＲ＝ＳＮＲｐｏｓｔ−ＳＮＲｐｒｅ（１）
図５（Ａ）は、造影剤の注射後５分後のＩＣＲマウスの冠状面（ｃｏｒｏｎａｌ）及び軸面（ａｘｉａｌ）Ｔ１−加重（ｗｅｉｇｈｔｅｄ）イメージを示す。Ｋ、腎臓；Ａ、腹部大動脈。図５（Ｂ）は、造影剤の注射後１ｈ後の冠状面及び軸面Ｔ１−加重イメージを示す。Ｈ、心臓；Ｌ、肝；Ｂ、膀胱；Ｇ、胆嚢。
図８は、肝及び腎臓に対する多様な造影剤によって得られたＣＮＲプロファイルを示す。
心臓及び腹部大動脈（ａｂｄｏｍｉｎａｌ ａｏｒｔａ）の両方で強い信号向上（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）が２ａ−２ｅで５分内に観察された（図５Ａ）。５個のうち、初めて３個（２ａ−２ｃ）は、初期１時間の間に肝で向上を示すという点から、典型的な肝特異性造影剤であるＰｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）に匹敵した。しかし、Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）に比較してみれば、ただ２ａだけが胆汁（ｂｉｌｅ）を通じて排出されるという点から、真正な肝特異性造影剤に分類され得る（図５Ｂ）。たとえ、２ｅも、また、胆汁−排出を示すが、肝特異性造影剤と命名するには信号向上が非常に弱い。２ｅの信号強度は、典型的ＥＣＦ造影剤であるＧａｄｏｖｉｓｔ（登録商標）のように弱い（図５Ａ）。たとえ、２ｄが、腎臓及び腹部大動脈の両方で初期に強い向上を示すが、Ｇａｄｏｖｉｓｔ（登録商標）のように１時間以内に排出がほぼ完了するという点から、ＥＣＦ造影剤に分類され得る。２ｂ及び２ｃに対しても、肝での強い向上が発見されるが（図５Ａ及び図８）、胆汁−排出は観察されない。２ｂ及び２ｃで観察されるそのような異常態度を説明するために、２つの仮定が設定され得る：有機アニオン輸送ポリペプチド（ＯＡＴＰ）を通じて肝細胞に入った後、細胞の細管膜に存在する輸送分子である多剤耐性タンパク質２（ＭＲＰ２）が２ｂ及び２ｃを輸送（ｔｒａｎｓｐｏｒｔ）する能力がないかまたはＭＲＰ３または双方向ＯＡＴＰを通じた２ｂ及び２ｃの洞様血管（ｓｉｎｕｓｏｉｄｓ）への復帰（ｒｅｔｕｒｎ）のためである。
心臓及び腹部大動脈（ａｂｄｏｍｉｎａｌ ａｏｒｔａ）の両方で強い信号向上（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）が２ａ−２ｅで５分内に観察された（図５Ａ）。５個のうち、初めて３個（２ａ−２ｃ）は、初期１時間の間に肝で向上を示すという点から、典型的な肝特異性造影剤であるＰｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）に匹敵した。しかし、Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）に比較してみれば、ただ２ａだけが胆汁（ｂｉｌｅ）を通じて排出されるという点から、真正な肝特異性造影剤に分類され得る（図５Ｂ）。たとえ、２ｅも、また、胆汁−排出を示すが、肝特異性造影剤と命名するには信号向上が非常に弱い。２ｅの信号強度は、典型的ＥＣＦ造影剤であるＧａｄｏｖｉｓｔ（登録商標）のように弱い（図５Ａ）。たとえ、２ｄが、腎臓及び腹部大動脈の両方で初期に強い向上を示すが、Ｇａｄｏｖｉｓｔ（登録商標）のように１時間以内に排出がほぼ完了するという点から、ＥＣＦ造影剤に分類され得る。２ｂ及び２ｃに対しても、肝での強い向上が発見されるが（図５Ａ及び図８）、胆汁−排出は観察されない。２ｂ及び２ｃで観察されるそのような異常態度を説明するために、２つの仮定が設定され得る：有機アニオン輸送ポリペプチド（ＯＡＴＰ）を通じて肝細胞に入った後、細胞の細管膜に存在する輸送分子である多剤耐性タンパク質２（ＭＲＰ２）が２ｂ及び２ｃを輸送（ｔｒａｎｓｐｏｒｔ）する能力がないかまたはＭＲＰ３または双方向ＯＡＴＰを通じた２ｂ及び２ｃの洞様血管（ｓｉｎｕｓｏｉｄｓ）への復帰（ｒｅｔｕｒｎ）のためである。
典型的な肝特異性造影剤であるＰｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）の場合、受動的拡散が正常肝細胞の基底側膜上に存在するＯＡＴＰ１を通じて起きるということに注意する必要がある。引き続いて、胆汁への排出がＭＲＰ２の作用によって起きる。Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ（登録商標）及びＭｕｌｔｉｈａｎｃｅ（登録商標）で親脂質性エトキシベンジルの存在がすべてのこのようなプロセスで重要な役目をすると信じられる。このような点から、２ａで親脂質性シクロヘキシル部分の存在が類似の役目をすることができる。このような問題は、追加的な研究が必要である。
実施例７．細胞生存率（Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）測定
正常結膜線維芽細胞を使用した。細胞を熱−不活性化されたＦＣＳ（１０％）、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍＬ）、及びゲンタマイシン（２００ｍｇ／ｍＬ）（すべてＧｉｂｃｏ（登録商標）で購入）が補充されたＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ）で維持した。培地は、毎２日ごとに交替し、細胞を９６−ウェルプレート（１×１０４ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ／２００μＬ）に分注した。多様なＧｄ（III）濃度（５０〜５００μＭ）の造影剤を培養無血清培地に添加し、２４ｈの間にインキュベートした。次に、ＣＣＫ−８（１０μＬ）を各ウェルに添加して細胞生存率を評価した。溶液は、３７℃で４ｈ後に除去した。マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ，ＵＳＡ Ｂｉｏ−ｒａｄ ５５０ Ｒｅａｄｅｒ）を使用して４５０ｎｍでのＯ．Ｄ．（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｓｉｔｙ）値を読み出して、細胞生存率／毒性を決定した。
正常結膜線維芽細胞を使用した。細胞を熱−不活性化されたＦＣＳ（１０％）、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍＬ）、及びゲンタマイシン（２００ｍｇ／ｍＬ）（すべてＧｉｂｃｏ（登録商標）で購入）が補充されたＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ）で維持した。培地は、毎２日ごとに交替し、細胞を９６−ウェルプレート（１×１０４ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ／２００μＬ）に分注した。多様なＧｄ（III）濃度（５０〜５００μＭ）の造影剤を培養無血清培地に添加し、２４ｈの間にインキュベートした。次に、ＣＣＫ−８（１０μＬ）を各ウェルに添加して細胞生存率を評価した。溶液は、３７℃で４ｈ後に除去した。マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ，ＵＳＡ Ｂｉｏ−ｒａｄ ５５０ Ｒｅａｄｅｒ）を使用して４５０ｎｍでのＯ．Ｄ．（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｓｉｔｙ）値を読み出して、細胞生存率／毒性を決定した。
図６は、Ｇｄ−ＤＯＴＡ及び２ｂ−２ｅによって得られた正常結膜線維芽細胞の相対的細胞毒性（％）を示す。標準偏差（±ＳＤ）は、三重分析（ｎ＝３）で得られた。
２ｂ−２ｅの細胞生存率は、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）に匹敵する（図６）。すなわち、２４ｈの間にインキュベートしたとき、何らの細胞増殖及び生存率に影響がなかった。ＭＲイメージで強度向上を得るのに必要な濃度範囲でどんな細胞毒性も示さないという点から、本シリーズ内にほとんど差異が発見されなかった。
実施例８．多様なｐＨ領域での速度論的（Ｋｉｎｅｔｉｃ）安定性
安定性は、室温でインキュベーション時間に対する関数として多様なｐＨ条件（ｐＨ：１，３，５，７，９及び１１）でＰＢＳで２（［Ｇｄ］＝１．０ｍＭ）に対する水プロトン弛緩率（Ｒ１）の進化（ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）で与えられた。測定は、１．５ Ｔ ｗｈｏｌｅ ｂｏｄｙ ｓｙｓｔｅｍ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ，ＵＳＡ）上に実施した。
安定性は、室温でインキュベーション時間に対する関数として多様なｐＨ条件（ｐＨ：１，３，５，７，９及び１１）でＰＢＳで２（［Ｇｄ］＝１．０ｍＭ）に対する水プロトン弛緩率（Ｒ１）の進化（ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）で与えられた。測定は、１．５ Ｔ ｗｈｏｌｅ ｂｏｄｙ ｓｙｓｔｅｍ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ，ＵＳＡ）上に実施した。
図９は、互いに異なるｐＨ条件の下でインキュベーション時間の関数としてＰＢＳで２（［Ｇｄ］＝１．０ｍＭ）に対する Ｒ１の進化（Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
本シリーズは、ｐＨ３〜１１の広い範囲にわたって高い速度論的安定性を示した（図９）。２ａは、ｐＨ１でも充分に安定していることが分かる。
実施例９．Ｈ ２ Ｏで加水分解に対する安定性
造影剤１００ｍｇを蒸留水１０ｍＬにとかした後、５０℃で７２時間放置した。その後、ＨＰＬＣを使用して１９７ｎｍでＯ．Ｄ．（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｓｉｔｙ）値を読み出して物質の安定性を決定した。また、分解産物の正確な同定のために、各ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅでの物質をＬＣ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙを利用して確認した。
造影剤１００ｍｇを蒸留水１０ｍＬにとかした後、５０℃で７２時間放置した。その後、ＨＰＬＣを使用して１９７ｎｍでＯ．Ｄ．（Ｏｐｔｉｃａｌ Ｄｅｎｓｉｔｙ）値を読み出して物質の安定性を決定した。また、分解産物の正確な同定のために、各ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅでの物質をＬＣ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙを利用して確認した。
下記表３は、２ａ化合物の７２時間後の加水分解安全性を示す表である。２ａは、Ｈ２Ｏで７２時間放置した結果、２ｂ（Ｇｄ−ａｃｉｄ）で加水分解が起き、安定性が劣った。２ａ化合物は、ｔｒａｎｓ及びｃｉｓの２つの異性体が存在することを確認した。
下記表４は、２ｂ化合物の７２時間後の加水分解安全性を示す表である。２ｂは、Ｈ２Ｏで７２時間放置した結果、ｕｎｋｎｏｗｎ ｉｍｐｕｒｉｔｙが増加した。２ｂ化合物は、ｔｒａｎｓ及びｃｉｓの２つの異性体が存在することを確認した。
下記表５は、２ｃ化合物の７２時間後の加水分解安全性を示した表である。２ｃは、Ｈ２Ｏで７２時間放置した結果、ｕｎｋｎｏｗｎ ｉｍｐｕｒｉｔｙが微量増加したが、比較的安定したものと現われた。２ｃ化合物は、ｔｒａｎｓ及びｃｉｓの２つの異性体が存在することを確認した。
下記表６は、２ｄ化合物の７２時間後の加水分解安全性を示した表である。２ｄは、Ｈ２Ｏで７２時間放置した結果、ｕｎｋｎｏｗｎ ｉｍｐｕｒｉｔｙが微量増加したが、比較的安定したものと現われた。
下記表７は、２ｅ化合物の７２時間後の加水分解安全性を示した表である。２ｅは、Ｈ２Ｏで７２時間放置した結果、 ｕｎｋｎｏｗｎ ｉｍｐｕｒｉｔｙが微量増加したが、比較的安定したものと現われた。
Claims (10)
- 下記化学式１の構造を有するＤＯ３Ａ−トラネキサム酸（ｔｒａｎｅｘａｍｉｃ ａｃｉｄ）またはそのエステル化合物：
- 下記工程を含む請求項１に記載のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式で、Ｒ＝ＣＯＮＨ（ＣＨ２）２ＮＨ２；化合物ｌｃ）の製造方法：
ａ）トランス−４（アミノメチル）シクロヘキサンエチルカルボキシレートヒドロクロライド（ｔｒａｎｓ一４（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｅｔｈｙｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３-トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記 ＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックエチルエステルコンジュゲートに１、２−ジアミノエタンを添加する工程；
ｄ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ - ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記物質を真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。 - 下記工程を含む請求項１に記載のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式でＲ＝ＮＨ２；化合物１ｄ）の製造方法：
ａ）トランス−１，４−ジアミンシクロヘキサン（ｔｒａｎｓ−１，４−ｄｉａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄｉ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｄｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｃ）前記混合物にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックアミンコンジュゲートを作る工程；
ｄ）前記混合物を真空で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｅ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｆ）前記真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサミックアミン化合物を得る工程。 - 下記工程を含む請求項１に記載のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物（化学式でＲ＝Ｈ；化合物１ｅ）の製造方法：
ａ）アミノメチルシクロヘキサン（（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）にブロモアセチルブロマイド（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）を添加して撹拌する工程；
ｂ）前記混合物にＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３を添加して撹拌し、ＤＯ３Ａ−（ｔＢｕＯ）３−トラネキサミックコンジュゲートを作る工程；
ｃ）前記混合物を低圧で溶媒をすべて除去した後、メタノールを入れてとかした後、シリカゲルクロマトグラフィーを行う工程；
ｄ）前記クロマトグラフィーから得た物質にＴＦＡを添加し、ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌグループを脱保護させる工程；及び
ｅ）真空状態で乾燥し、ＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を得る工程。 - 請求項１に記載のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物を含む錯体リガンド（Ｌ）用組成物。
- 請求項１に記載のＤＯ３Ａ−トラネキサム酸またはそのエステル化合物をリガンド（Ｌ）として含み、前記リガンドに配位結合する金属原子を含む錯体。
- 前記金属原子は、ガドリニウム（Ｇｄ）であることを特徴とする請求項６に記載の錯体。
- 請求項６または７に記載の錯体を有効成分として含む磁気共鳴映像（ＭＲＩ）造影剤。
- 前記造影剤は、ＥＣＦ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒ ｆｌｕｉｄ）造影剤機能を有することを特徴とする請求項８に記載の磁気共鳴映像（ＭＲＩ）造影剤。
- 前記造影剤は、向上した熱力学及び速度論的安定性及びｐＨ安定性を有することを特徴とする請求項８に記載の磁気共鳴映像（ＭＲＩ）造影剤。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2014-0003596 | 2014-01-10 | ||
| KR1020140003596A KR101603699B1 (ko) | 2014-01-10 | 2014-01-10 | Do3a-아미노메틸사이클로헥산 콘쥬게이트를 포함하는 가돌리늄 착물 |
| PCT/KR2015/000194 WO2015105352A1 (ko) | 2014-01-10 | 2015-01-08 | Do3a-트라넥스아믹산 콘쥬게이트를 포함하는 가돌리늄 착물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2017502072A true JP2017502072A (ja) | 2017-01-19 |
| JP6246378B2 JP6246378B2 (ja) | 2017-12-13 |
Family
ID=53524125
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2016545967A Active JP6246378B2 (ja) | 2014-01-10 | 2015-01-08 | Ｄｏ３ａ−トラネキサム酸コンジュゲートを含むガドリニウム錯体 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10245328B2 (ja) |
| EP (1) | EP3093285B1 (ja) |
| JP (1) | JP6246378B2 (ja) |
| KR (1) | KR101603699B1 (ja) |
| CN (1) | CN105899494B (ja) |
| WO (1) | WO2015105352A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102232979B1 (ko) * | 2018-03-22 | 2021-03-29 | 경북대학교 산학협력단 | Do3a 가돌리늄 착물의 신규한 구조를 갖는 화합물, 이를 포함하는 항염증제 및 조영제 |
| KR102167614B1 (ko) * | 2018-08-23 | 2020-10-19 | 에스티팜 주식회사 | 가도부트롤의 제조방법 |
| KR102203368B1 (ko) * | 2020-10-30 | 2021-01-14 | 경북대학교 산학협력단 | 신규한 화합물 및 이를 함유하는 mri 조영제 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010502596A (ja) * | 2006-08-30 | 2010-01-28 | ジーイー・ヘルスケア・アクスイェ・セルスカプ | 動的核分極（ｄｎｐ）方法並びに該方法で使用するための化合物及び組成物 |
| US20100227794A1 (en) * | 2008-11-26 | 2010-09-09 | I.S.T. Corporation | Smart contrast agent and method for detecting transition metal ions and treating related disorders |
| JP2013540120A (ja) * | 2010-09-30 | 2013-10-31 | キョンブク ナショナル ユニバーシティ インダストリー−アカデミック コーオペレーション ファウンデーション | ガドリニウム錯体を含有するｍｒｉ造影剤 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004526671A (ja) * | 2000-10-31 | 2004-09-02 | ブラッコ インターナショナル ベースローテン フェンノートシャップ | 診断および治療への適用において使用するための抗酸化剤の金属キレート配位子との結合体 |
-
2014
- 2014-01-10 KR KR1020140003596A patent/KR101603699B1/ko active IP Right Grant
-
2015
- 2015-01-08 EP EP15735222.0A patent/EP3093285B1/en active Active
- 2015-01-08 WO PCT/KR2015/000194 patent/WO2015105352A1/ko active Application Filing
- 2015-01-08 US US15/110,386 patent/US10245328B2/en active Active
- 2015-01-08 CN CN201580004135.8A patent/CN105899494B/zh active Active
- 2015-01-08 JP JP2016545967A patent/JP6246378B2/ja active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010502596A (ja) * | 2006-08-30 | 2010-01-28 | ジーイー・ヘルスケア・アクスイェ・セルスカプ | 動的核分極（ｄｎｐ）方法並びに該方法で使用するための化合物及び組成物 |
| US20100227794A1 (en) * | 2008-11-26 | 2010-09-09 | I.S.T. Corporation | Smart contrast agent and method for detecting transition metal ions and treating related disorders |
| JP2013540120A (ja) * | 2010-09-30 | 2013-10-31 | キョンブク ナショナル ユニバーシティ インダストリー−アカデミック コーオペレーション ファウンデーション | ガドリニウム錯体を含有するｍｒｉ造影剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3093285A1 (en) | 2016-11-16 |
| EP3093285A4 (en) | 2017-06-21 |
| EP3093285B1 (en) | 2020-07-08 |
| US10245328B2 (en) | 2019-04-02 |
| KR101603699B1 (ko) | 2016-03-15 |
| KR20150083721A (ko) | 2015-07-20 |
| JP6246378B2 (ja) | 2017-12-13 |
| CN105899494B (zh) | 2018-06-15 |
| WO2015105352A1 (ko) | 2015-07-16 |
| US20160331849A1 (en) | 2016-11-17 |
| CN105899494A (zh) | 2016-08-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5763772B2 (ja) | ガドリニウム錯体を含有するｍｒｉ造影剤 | |
| JP6542748B2 (ja) | 濃度非依存応答性を示すｃｅｓｔシステム | |
| Luo et al. | Zn2+ responsive bimodal magnetic resonance imaging and fluorescent imaging probe based on a gadolinium (III) complex | |
| KR101469900B1 (ko) | Do3a-디아미노바이페닐 화합물 및 이를 리간드로 포함하는 가돌리늄 착물 | |
| Chirayil et al. | Manganese (II)-based responsive contrast agent detects glucose-stimulated zinc secretion from the mouse pancreas and prostate by MRI | |
| JP6246378B2 (ja) | Ｄｏ３ａ−トラネキサム酸コンジュゲートを含むガドリニウム錯体 | |
| Gu et al. | Gd-complexes of 1, 4, 7, 10-tetraazacyclododecane-N, N′, N′′, N′′′-1, 4, 7, 10-tetraacetic acid (DOTA) conjugates of tranexamates as a new class of blood-pool magnetic resonance imaging contrast agents | |
| Urbanovský et al. | Lanthanide complexes of DO3A–(dibenzylamino) methylphosphinate: effect of protonation of the dibenzylamino group on the water-exchange rate and the binding of human serum albumin | |
| WO2012155085A1 (en) | Fe(ii) sequestering agents and uses thereof | |
| Islam et al. | Manganese (II) Complex of 1, 4, 7-Triazacyclononane-1, 4, 7-Triacetic Acid (NOTA) as a Hepatobiliary MRI Contrast Agent | |
| Wan et al. | Binuclear gadolinium (III) complex based on DTPA and 1, 3-bis (4-aminophenyl) adamantane as a high-relaxivity MRI contrast agent | |
| CN104189924B (zh) | 一种以碳基材料为支架的磁共振造影剂及其制备方法 | |
| CN102973955B (zh) | 一种含三价铝的磁共振成像造影剂 | |
| KR101836463B1 (ko) | 망간 착물을 함유하는 mri 조영제 | |
| Xin et al. | Dopamine-containing gadolinium complex as magnetic resonance imaging contrast agent | |
| Tei et al. | Synthesis and solution thermodynamic study of rigidified and functionalised EGTA derivatives | |
| Miyake et al. | Synthesis and functional evaluation of chiral dendrimer-triamine-coordinated Gd complexes with polyaminoalcohol end groups as highly sensitive MRI contrast agents | |
| KR101836461B1 (ko) | 페로센을 기반으로 한 새로운 형태의 mr 조영제의 개발 | |
| KR101197511B1 (ko) | 유리딘계 가돌리늄 착물 및 이를 포함하는 ｍｒｉ 조영제 | |
| US10759757B2 (en) | Crystalline contrast agent for magnetic resonance imaging, kit and composition comprising it and their use | |
| US20220259243A1 (en) | Iron(iii) and gallium(iii) metal organic polyhedra, methods of making same, and uses thereof | |
| Nam et al. | Gadolinium Complex of 1, 4, 7, 10-Tetraazacyclododecane-N, N', N'', N'''-1, 4, 7-trisacetic Acid (DO3A) Conjugate of Tranexamates: A Quest for a Liver-specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent | |
| CN105963720A (zh) | 天冬氨酸-亮氨酸共聚物修饰的顺磁性金属配合物及其制备方法与应用 | |
| Liao et al. | Synthesis and Evaluation of Neutral Gd (III), Mn (II) Complexes From DTPA-Bisamide Derivative as Potential MRI Contrast Agents | |
| TW442454B (en) | Bis(amide) compounds containing triamine and triacetic acid groups, and paramagnetic metal complexes used as MRI contrast agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160722 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20170502 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170516 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170810 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171005 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20171024 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20171114 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6246378 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |