JP2017198632A - アトピー性皮膚炎の皮膚局所の重症度及び治療効果の指標 - Google Patents
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Abstract
Description
以上のように、皮膚角層細胞中のSCCA-1を指標とすることで、アトピー性皮膚炎の治療を受療中の対象者、過去に受療し、現在は寛解期にある対象者、更には健常と見えるがアトピーの発症の可能性を持っている対象者などにおいて局所病態を把握することが可能となる。
(1)アトピー性皮膚炎の治療を受療中の対象者において当該治療方針を決定するための診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
i)当該SCCA-1の発現値がアトピー性皮膚炎を有しない者の値に比べ、統計学的に有意に高くない場合、当該治療を中断し当該疾患は治療を継続する必要はないと決定する、診断補助方法。
(2)アトピー性皮膚炎の治療を受療中の対象者において当該治療方針を決定する診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
ii)当該SCCA-1の発現値を指標として当該対象者のアトピー性皮膚炎の症度を階級分けし、各階級に合ったアトピー性皮膚炎治療方法を当該対象者に適用することを決定する、アトピー性皮膚炎の治療方針を決定する診断補助方法。
(3)アトピー性皮膚炎の治療の要否判断が必要な対象者あるいは治療を受療中の対象者において、当該治療の要否判断あるいは当該治療を必要と判断した場合の治療方針を決定する診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
i)当該SCCA-1の発現値がアトピー性皮膚炎を有しない者の値に比べ、統計学的に有意に高くない場合、当該治療は不要と判断するあるいは受療中の場合は当該治療により当該疾患は治療を継続する必要がないと決定し、統計学的に有意に高い場合、治療を開始する判断あるいは当該治療を継続する必要があると決定した場合、さらに、
ii)当該SCCA-1の発現値を指標として当該対象者のアトピー性皮膚炎の症度を階級分けし、各階級に合ったアトピー性皮膚炎治療方法を当該対象者に適用することを決定する、アトピー性皮膚炎の治療の要否判断あるいは治療方針を決定する診断補助方法。
(4)前記治療方針の決定を長期にわたり繰り返し行う、(1)〜(3)のいずれかの診断補助方法。
(5)アトピー性皮膚炎の症度の項目が、紅斑(erythema)、浸潤(oozing)、丘疹(papule)、掻破痕(excoriation)、苔癬化(lichenification)、乾燥・落屑(xerosis)及びそう痒感(itch)から成る群から選ばれる1または複数である、(1)〜(4)のいずれかの診断補助方法。
(6)前記皮膚細胞がテープストリッピングにより非侵襲的に採取される、(1)〜(5)のいずれかの診断補助方法。
(7)前記SCCA-1の発現をSCCA-1に特異的な抗体を使用する免疫学的検出方法により実施する、(1)〜(6)のいずれかの診断補助方法。
(8)前記免疫学的検出方法が酵素免疫測定法(ELISA法、EIA法を含む)、蛍光免疫測定法、放射免疫測定法(RIA)、発光免疫測定法、表面プラズモン共鳴法(SPR法)、水晶振動子マイクロバランス(QCM法)、免疫比濁法、ラテックス凝集免疫測定法、ラテックス比濁法、粒子凝集反応法、金コロイド法、キャピラリー電気泳動法、グラフェンバイオセンサ、アンペロメトリックバイオセンサ、レーザー分光法及び表面濃縮免疫測定法から成る群から選ばれる、(7)の診断補助方法。
(9)前記皮膚細胞の採取及び前記SCCA-1の発現の測定が在宅で行われる、(7)又は(8)の診断補助方法。
(10)前記テープストリッピングによる採取を、対象者当たり3箇所以上の皮膚部位にて行う、(1)〜(9)のいずれかの診断補助方法。
SCCAは染色体18q21.3上にタンデムに並んでいる二つの遺伝子SCCA-1及びSCCA-2遺伝子によりコードされる。それらによりコードされるタンパク質、SCCA-1及びSCCA-2は共に分子量約45,000のタンパクであり、高い相同性を示し、そのホモロジーは核酸レベルで95%である。これらのSCCAはovalbumin‐serine protease inhibitor(ov-serpin)ファミリーに属している。ov-serpinはセルピンス−パーファミリーの中でもユニークな特徴を有している。一般にセルピンは分泌されて細胞外で働くとされているが、ov-serpinは主に細胞内でも働くprotease inhibitorである。
SCCA-1はパパイン様システインプロテアーゼ阻害剤であるが、SCCA-2はキモトリプシン様セリンプロテアーゼ阻害であり、相同性が高いにも関わらず反応部位のアミノ酸配列が異なるため、異なった特性を有することもある(Schick et al.J.Biol.Chem.(1997)27213,1849−55)。本発明者は、特にSCCA-1が非侵襲的手段により、アトピー性皮膚炎の症度の評価の指標となることを見出した。
以下の用語の定義や説明は、原則として日本皮膚科学会のアトピー性皮膚炎診療ガイドラインに基づく。
<アトピー性皮膚炎>
増悪・寛解を繰り返す、そう痒のある湿疹を主病原とする疾患であり、患者の多くは、アトピー素因を持つ(同一人内に異なる症度の皮疹をもつ)。
<アトピー性皮膚炎の診断基準>
一般に、そう痒、特徴的皮疹と分布、慢性・反復的経過(乳児では2か月以上、その他6か月以上)、の基本3項目を満たすものをアトピー性皮膚炎と判断する。
日本皮膚科学会のアトピー性皮膚炎診療ガイドラインなどによれば、アトピー性皮膚炎の皮疹の症度は、寛解、軽微、軽症、中症、重症に階級分けすることができる。以下、各症度の状態及び選択すべき治療法を示す。
1)重症
・皮疹の重症度:高度の腫脹・浮腫・浸潤または苔癬化を伴う紅斑、丘疹の多発、高度の鱗屑、痂皮の付着、小水疱、びらん、多数の掻破痕、痒疹結節などを主体とする。
・外用剤の選択:必要かつ十分な効果のあるベリーストロングまたはストロングクラスのステロイド外用剤を第一選択とする。痒疹結節でベリーストロングでも十分な効果が得られない場合はその部位に限定してストロンゲストクラスの使用もある。
2)中症
・皮疹の重症度:中程度までの紅斑、鱗屑、少数の丘疹、掻破痕などを主体とする。
・外用剤の選択:ストロングまたはミディアムクラスのステロイド外用薬を第一選択とする。
3)軽症
・皮疹の重症度:乾燥および軽度の紅斑、鱗屑などを主体とする。
・外用剤の選択:ミディアム以下のステロイド外用剤を第一選択とする。
4)軽微:炎症症状に乏しい乾燥症状主体。
・外用剤の選択:ステロイドを含まない外用剤を選択する。
5)寛解:永続的であるか一時的であるかを問わず、病気による症状が好転または、ほぼ消失し、臨床的にコントロールされた状態を指す。すなわち、一般的な意味で完治せずとも、臨床的に「問題ない程度」にまで状態がよくなる。その後、増悪する可能性も含む状態。(治癒、完治とは異なる。)
・外用剤の選択:ステロイドを含まない外用剤、保湿剤などを選択する。
・皮疹(eruption):皮膚に現れる病変を総称して皮疹又は発疹という。
・皮膚炎(dermatitis):皮膚に生じている炎症のこと (皮膚科外来の1/3-1/5を占める)。皮膚で生じた炎症反応が湿疹として表現される。臨床的には、そう痒や発赤、落屑、丘疹を生じる。
・湿疹(eczema):皮膚炎と同義。
・紅斑(erythema):真皮乳頭および乳頭下層での血管拡張,充血により生じる紅色の斑のこと。
・丘疹(papule):直径1cm以下の限局性の隆起変化(皮膚の隆起)をいう。
・結節(nodule):結節は丘疹と同様の限局性の皮膚変化で直径1 cm以上のもので2〜3cm程度のもの。丘疹より深く真皮あるいは皮下組織に及ぶ。
・苔癬 (lichen): 丘疹の永続したもの。
・浸潤(oozing):皮膚炎が起こった病変部位の皮膚内に、白血球細胞やリンパ球が侵入した状態。病巣が周囲に正常組織へと徐々に侵入していく状況を指す場合もある。
・痂皮(crust, crusting):角質、滲出液、血液、膿または壊死組織が凝固したもの。いわゆる、瘡蓋である。
・そう痒(pruritus):痒み。
かかる症度の客観的な指標を患者に提示することで、例えばステロイド薬に対する誤った知識をもつ患者に対しても、それを使用した治療方針が必要であることを納得させる材料となり、その患者の症度に合った有効な治療方針を適用することを可能にする。アトピー性皮膚炎は治療が長期にわたる疾患であり、医者と患者との信頼関係や患者の受療に対するモチベーションの維持が重要であることから、本指標は有効であると考える。
従前の方法では、アトピー性皮膚炎が、治療が必要かどうかを評価する客観的な指標は存在しなかったため、常に一部の熟練した医師による所見を仰いでいた。本発明によれば、寛解の状態をより詳細に評価することが可能となり、極めて有利である。そのためには、まずアトピー性皮膚炎に罹ってない複数の人数の健常人の角層SCCA-1の値を測定する。測定する健常人の数が特に限定されないが、多いほど好ましくは、例えば10人以上、より好ましくは20人以上、最も好ましくは50人以上とするが、それらに限定されるものではない。これにより、健常人の角層SCCA-1の値がわかり、この値に対し被検者の角層SCCA-1の値が統計学的に有意に高い場合、アトピー性皮膚炎が有意に再燃しやすい状態にあることがわかる。
本発明は寛解において定期的に、弱い抗炎症剤の間欠塗布と、保湿剤、保護剤などのスキンケアによる治療を行い、治療が不要な段階に至ったら保湿剤、保護剤によるスキンケアのみに切り替える、といったプロアクティブ療法(予防的な間欠塗布法)に採用することができる。
2種類のSCCA-1に特異的な抗体の一方を一次抗体として担体に固定化する。担体としては固体担体が好ましく、例えば固体担体として免疫測定法において常用される任意のものを使用してよく、例えば任意の大きさ、形状に成形されたスチレンやポリスチレンなどの高分子担体のほか、これらの適当な材料で成形した反応容器、例えばELISAプレートのウェルの内壁などが挙げられる。
以下、具体例を挙げて、本発明を更に具体的に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。
(1)医師による皮膚局所の所見
各部位で、(A)紅斑(erythema)、(B)浸潤(oozing)、(C)丘疹(papule)、(D)掻破痕(excoriation)、(E)苔癬化(lichenification)、(F)乾燥・落屑(xerosis)、(G)そう痒感(itch)を観察し、重症度をケースカードに記入した。
評価基準は、0:なし(absence)、1:軽症(mild)、2:中症(moderate)、3:重症(severe)とした。角層を採取した健常部位、皮疹部位、無疹部位を全身図に記載した。
被験部位の角層をセロテープ(登録商標)(2 cm x 6cm)を用いて採取した。得られた角層サンプルは、タンパク質抽出液( 0.1M Tris-HCl (pH8.0), 0.14M NaCl ,0.1% Tween 20 )に浸漬し、バイオラプターにて抽出した。遠心を行い、その上清をELISAに用いた。
リコンビナントヒトSCCA-1はSCCA-1 cDNAをpQE30 ベクターに挿入して得た。Ni-Agaroseにてリコンビナントを精製した後に、Mono Q chromatographyで更に精製を行い、ELISAアッセイのスタンダードとしたSCCA-1測定方法を示す。Rabbit antiSCCA-1 polyclonal antibody(資生堂作製)を、一次抗体として96-wellプレートに固相化して用いた。ImmunoBlock(DS Pharma Biomedical, Osaka, Japan)でブロッキング後 、100 μl の角層抽出液をwellに添加し、プレートを1 h 、37oCで反応させた。Monoclonal anti-SCCA1 antibody (Santa Cruz) を二次抗体として用いて、1 h 、37oCで反応させた。その後、horseradish peroxidase-conjugated anti-mouse F(ab’)2 (GE Healthcare)を添加し、TMB peroxidase EIA substrate kit (Bio-Rad)で発色させた。 反応は1 M H2SO4で停止し、450 nmで測定した。
健常人52人およびアトピー性皮膚炎患者189人を対象として試験を実施した。健常人は、医師によりアレルギー性疾患(アトピー性皮膚炎を含む)を有さないと診断された者とした。アトピー性皮膚炎患者の適格条件は、1)過去あるいは現在、医師よりアトピー性皮膚炎と診断された者、2)試験開始前から1週間以上、被験部位に試験開始前から1週間以上、被験部位に上記薬剤を使用しないことが可能な者、3)20歳以上の者とした。
アトピー性皮膚炎の除外基準は、1)試験開始前から1ヶ月以上、ステロイドもしくは免疫抑制剤を含む内服治療を受けた者、2)試験開始前から1週間以上、被験部位にステロイド外用剤、タクロリムス水和物軟膏、非ステロイド系抗炎症剤、その他外用剤(一般用医薬品を含む)等による治療を行った者。もしくは試験開始前から1週間以上、被験部位に上記薬剤を使用しないことが不可能な者。ただし、保湿剤の塗布は可とする、3)被験部位にアトピー性皮膚炎以外の皮膚疾病を有する者、4)妊娠中、授乳中の者、5)試験責任医師・試験分担医師・試験協力医師に、試験への参加が不適当と判断された者とした。
検量線の作成
SCCA-1と同様、角層TARCについてもその値と皮膚所見と相関を調べた。角層TARCの測定は、得られた角層抽出液をELISAに供することで行った。ELISAにはQuantikine ELISA Human CCL17/TARC(R&D Systems)を用いた。
その結果を図4に示す。アトピー性皮膚炎における皮膚の重症度と角層TARC1値のSpearman相関係数は0.2750と低く、角層TARCはアトピー性皮膚炎の症度の指標にはなれないことを示す。
アトピー性皮膚炎の症度の判別は熟練した医師でさえも困難な場合があり、ましてや医療経験のない一般人が症度を判別するのは極めて困難である。本実施例では、アトピー性皮膚炎の診察について熟練した医師と、患者自身とによる皮膚所見の乖離について調べた。
アトピー性皮膚炎の症度が比較的軽い2名の被検者について、各部位で、(A)紅斑(erythema)、(B)浸潤(oozing)、(C)丘疹(papule)、(D)掻破痕(excoriation)、(E)苔癬化(lichenification)、(F)乾燥・落屑(xerosis)、(G)そう痒感(itch)を、医師及び被検者自身が各々観察し、重症度をケースカードに記入した。評価基準は、0:なし(absence)、1:軽症(mild)、2:中症(moderate)、3:重症(severe)とした。角層を採取した健常部位、皮疹部位、無疹部位を全身図に記載した。
その結果を図5に示す。2名の被検者の自己所見は共に、医師所見に比べ、明らかに低い値を示した。したがって、アトピー性皮膚疾患については、特に症度が軽い場合、患者は自己所見を低く評価しがちであることがわかる。その結果アトピー性皮膚炎は、治療が必要な状態であるにもかかわらず、治療を中止・中断することで症状の再燃が起きやすい疾患であることがわかる。上述のとおり、角層SCCA-1は例えばテープストリッピングといった極めて簡単且つ非侵襲的な操作で採取可能である。SCCA-1の測定は簡易測定キットの開発により病院や検査施設でなく、在宅でも可能となる得るため、アトピー性皮膚疾患の症度や現在施されている治療効果の評価にとおり極めて優れた指標となる。特にアトピー性皮膚疾患の患者には乳幼児が多く、自ら症状を訴えることができず、また通院も容易でない対象者にとって簡単に在宅で自己の疾患の症度を判別できることは極めて有利である。
治療経過の追跡1-1
患者TA04-1
患者TA04の被験部位1は皮膚所見の合計値が10と、症度としては中症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1値は6510ng/mgと、かなり高い値を呈していた。同患者に抗ヒスタミン剤であるアレロック(登録商標)ODを連用すると共に、フロモックス(登録商標)錠100mgを服用させた。治療開始28日後に測定したSCCA-1値は415.9 ng/mgと、治療開始時に比べ顕著に低下し、その結果は皮膚所見(合計値1)と連動していた。その結果を図6(A)に示す。
患者TB03
患者TB03は皮膚所見が4と、症度としては軽症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1の値は392.5ng/mgと、健常人に比べ高めの値を呈し。同患者にはステロイド外用剤アンテペート(登録商標)軟膏を連用した。治療開始42日後に測定板SCCA-1値は112.6ng//mgと、治療開始時に比べ顕著に低下し、その結果は皮膚所見(合計値0)と連動していた。その結果を図6(B)に示す。
患者TA03
28才女性患者TA-03は皮膚所見の合計値が7と、症度としては軽症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1値は1745.6ng//mgと、かなり高い値を呈していた。同患者には56日後からアンテベート(登録商標)軟膏を連用させた。治療開始56日後に測定したSCCA-1値は39.6 ng//mgと、治療開始時に比べ顕著に低下し、その結果は良好な皮膚所見(合計値1)と連動していた。その結果を図6(C)に示す。
患者TA04-2
27才男性患者TA04の被験部位2は皮膚所見の合計値が21と、症度としては重症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1値は9119.9ng//mgと、かなり高い値を呈していた。同患者に抗ヒスタミン剤であるアレロック(登録商標)ODを連用すると共に、フロモックス(登録商標)錠100mgを服用させた。治療開始28日後に測定したSCCA-1値は36.6 ng/mgと、治療開始時に比べ顕著に低下し、その結果は良好な皮膚所見(合計値1)と連動していた。その結果を図6(D)に示す。
患者TB03-2
55才男性患者TB03の被験部位2は皮膚所見の合計値が4と、症度としては軽症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1値は392.5ng/mgとの値を呈していた。同患者にはアンテベート(登録商標)軟膏を連用させた。治療開始42日後に測定したSCCA-1値は112.6 ng/mgと、治療開始時に比べ低下し、その結果は極めて良好な皮膚所見(合計値0)と連動していた。その結果を図6(E)に示す。
患者TB05
21才男性患者TB05は皮膚所見の合計値が5と、症度としては軽症の部類に入っていた。治療観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療に使用した投与内服薬剤及びその投与期間、投与外用剤の名称及び投与被験部位を確認した。治療開始時のSCCA-1値は560.9ng/mgとの値を呈していた。同患者に抗ヒスタミン剤であるアレグラ(登録商標)120mgを服用させると共に、マイザー(登録商標)クリームを連用させた。治療開始50日後に測定したSCCA-1値は64.7 ng/mgと、治療開始時に比べ低下し、その結果は極めて良好な皮膚所見(合計値0)と連動していた。治療開始72日後及び113日後に測定したSCCA-1値は、原因は不明であるがそれぞれ125.0 ng/mg及び176.6 ng/mgへと上昇し、皮膚所見も治療開始50日後の合計値0に比べ合計値1へと上昇し、SCCA-1値と皮膚所見は連動していた。その結果を図6(F)に示す。
経過の追跡2-1-1
患者AW1-1
患者AW1の被験部位No.1は医師により寛解期と診断された部位である。観察開始時は皮膚症状を呈しておらず、医師による皮膚所見値(合計値)は0であった。観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。なお、同患者は観察の期間の間アトピー性皮膚疾患の治療は受けていない。治療開始時のSCCA-1値は約302.4 ng/mgと健常人に比べ優位に高く(19.1 ng/mg)無視できない程度の値を示していた。医師による皮膚所見は、観察を開始してから15日目ぐらいまでは値は0であったが、SCCA-の値の上昇と共に、皮膚所見値が1へと上昇し、悪化し始めた。患者による自己所見の値は観察期間中変動せず、0のままであった。この観察結果を図7(A)に示す。
患者AW1-2
患者AW1の被験部位No2は医師により観察開始時には軽症と診断された部位である。観察開始時は皮膚症状を呈しておらず、医師による皮膚所見値(合計値)は0であったが、医師による所見は時間経過とともに上昇した。自己所見はわずかながらも上昇したが(0から1に上昇)、医師の所見に比べると、自己所見の値は低かった。なお、同患者は観察の期間の間アトピー性皮膚疾患の治療は受けていない。治療開始時のSCCA-1値は約227.0 ng/mgであった。医師による皮膚所見も、観察を開始してから40日目ぐらいまでは値は0であったが、SCCA-の値の上昇と共に、皮膚所見値も1へと上昇し、悪化し始めた。なお、患者による事故所見の値は観察期間中変動せず、0のままであった。この観察結果を図7(B)に示す。
患者AW1-5
患者AW1の被験部位No.5も医師により寛解期と診断された部位である。観察開始時は皮膚症状を呈しておらず、医師による皮膚所見値(合計値)は0であった。観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。なお、同患者は観察の期間の間アトピー性皮膚疾患の治療は受けていない。治療開始時のSCCA-1値は約313.4 ng/mgであった。医師による皮膚所見も、観察を開始してから30日目ぐらいまでは値は0であったが、SCCA-の値の上昇と共に、皮膚所見値も1へと上昇し、悪化し始めた。なお、患者による事故所見の値は観察期間中変動せず、0のままであった。この観察結果を図7(C)に示す。
患者AW3-4
患者AW3の被験部位No.4は、観察開始時も皮膚症状を呈さなかった。観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療開始時のSCCA-1値は43.9 ng/mgと、やや低めながらも健常人に比べ優位に高く(19.1 ng/mg)、無視できない程度の値を示していた。観察開始43日後にSCCA-1値は184.7 ng/mgと、観察開始時に比べ顕著に増加し、その結果は医師による皮膚所見(合計値3)と連動していた。一方、自己所見の上昇は観察期間を通してわずかであった(合計値1)。その結果を図8(A)に示す。
患者AW3の被験部位No.6は、観察開始時も皮膚症状を呈さなかった。観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療開始時のSCCA-1値は82.5 ng/mgと、健やや低めながらも健常人に比べ優位に高く(19.1 ng/mg)、無視できない程度の値を示していた。観察開始85日後にSCCA-1値は425.9ng/mgと、観察開始時に比べ顕著に増加し、その結果は医師による皮膚所見(合計値7)と連動していた。一方、自己所見の上昇は観察期間を通してわずかであった(合計値1)。その結果を図8(B)に示す。
患者AW3の被験部位No.7は、観察開始時も皮膚症状を呈さなかった。観察期間の間、来院毎に観察及び角層の採取を行った。治療開始時のSCCA-1値は50.7 ng/mgと、やや低めながらも健常人に比べ優位に高く(19.1 ng/mg)、無視できない程度の値を示していた。観察開始85日後にSCCA-1値は250.6ng/mgと、観察開始時に比べ顕著に増加し、その結果は医師による皮膚所見(合計値7)と連動していた。一方、自己所見の上昇は観察期間を通してわずかであった(合計値1)。その結果を図8(C)に示す。
アトピー性皮膚炎の重症度の分類に頻用されているのはSCORAD値である(非特許文献1)。対象者の皮膚症状を、皮疹の面積(A)(体表面積に占める割合)および紅斑、浸潤/皮疹、滲出液/痂皮、掻破痕、苔癬化、乾燥の各皮疹につき、その程度(0=なし、1=軽度、2=中程度、3=重度)の合計(B)を求め、被験者による自覚症状をVASによって評価(C)し、A/5+7XB/2+CによりSCORAD値として算出した。
SCORAD値を求めた各対象者について、テープストリッピングにより角層試料を採譜し、SCCA-1値も測定した。その際、皮膚の採取は対象者によりを1箇所のみ行った者(N=1)、2箇所行った者(N=2)、3箇所行なった者(N=3)とに分け、2箇所、3箇所採取した場合の対象者のSCCA-1値はそれぞれ平均値を求めた。次に、各対象者のSCORAD値と、N=1、N=2、N=3の各対象者のSCCA-1値との相関を求めた。
以下にその結果をまとめた。
Claims (10)
- アトピー性皮膚炎の治療を受療中の対象者において当該治療方針を決定するための診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
i)当該SCCA-1の発現値がアトピー性皮膚炎を有しない者の値に比べ、統計学的に有意に高くない場合、当該治療を中断し当該疾患は治療を継続する必要はないと決定する、診断補助方法。 - アトピー性皮膚炎の治療を受療中の対象者において、当該治療方針を決定する診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
ii)当該SCCA-1の発現値を指標として当該対象者のアトピー性皮膚炎の症度を階級分けし、各階級に合ったアトピー性皮膚炎治療方法を当該対象者に適用することを決定する、アトピー性皮膚炎の治療方針を決定する診断補助方法。 - アトピー性皮膚炎の治療の要否判断が必要な対象者あるいは治療を受療中の対象者において、当該治療の要否判断あるいは当該治療を必要と判断した場合の治療方針を決定する診断補助方法であって、当該対象者の皮膚角層細胞中のSCCA-1の発現値を測定し、
i)当該SCCA-1の発現値がアトピー性皮膚炎を有しない者の値に比べ、統計学的に有意に高くない場合、当該治療は不要と判断するあるいは受療中の場合は当該治療により当該疾患は治療を継続する必要がないと決定し、統計学的に有意に高い場合、治療を開始する判断あるいは当該治療を継続する必要があると決定した場合、さらに、
ii)当該SCCA-1の発現値を指標として当該対象者のアトピー性皮膚炎の症度を階級分けし、各階級に合ったアトピー性皮膚炎治療方法を当該対象者に適用することを決定する、アトピー性皮膚炎の治療の要否判断あるいは治療方針を決定する診断補助方法。 - 前記治療方針の決定を長期にわたり繰り返し行う、請求項1〜3のいずれか1項に記載の診断補助方法。
- アトピー性皮膚炎の症度の項目が、紅斑(erythema)、浸潤(oozing)、丘疹(papule)、掻破痕(excoriation)、苔癬化(lichenification)、乾燥・落屑(xerosis)及びそう痒感(itch)から成る群から選ばれる1または複数である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の診断補助方法。
- 前記皮膚細胞がテープストリッピングにより非侵襲的に採取される、請求項1〜5のいずれか1項に記載の診断補助方法。
- 前記SCCA-1の発現の測定をSCCA-1に特異的な抗体を使用する免疫学的検出方法により実施する、請求項1〜6のいずれか1項に記載の診断補助方法。
- 前記免疫学的検出方法が酵素免疫測定法(ELISA法、EIA法を含む)、蛍光免疫測定法、放射免疫測定法(RIA)、発光免疫測定法、表面プラズモン共鳴法(SPR法)、水晶振動子マイクロバランス(QCM法)、免疫比濁法、ラテックス凝集免疫測定法、ラテックス比濁法、粒子凝集反応法、金コロイド法、キャピラリー電気泳動法、グラフェンバイオセンサ、アンペロメトリックバイオセンサ、レーザー分光法及び表面濃縮免疫測定法から成る群から選ばれる、請求項7に記載の診断補助方法。
- 前記皮膚細胞の採取及び前記SCCA-1の発現の測定が在宅あるいは検診で行われる、請求項6〜8のいずれか1項に記載の診断補助方法。
- 前記テープストリッピングによる採取を、対象者当たり3箇所以上の皮膚部位にて行う、請求項1〜9のいずれか1項に記載の診断補助方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019191007A (ja) * | 2018-04-25 | 2019-10-31 | 日本全薬工業株式会社 | 血清中tarcをマーカーとして用いるイヌアトピー性皮膚炎(cad)の診断 |
WO2022114200A1 (ja) * | 2020-11-30 | 2022-06-02 | 花王株式会社 | アトピー性皮膚炎の症度の検出方法 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023154764A2 (en) * | 2022-02-08 | 2023-08-17 | Biomerica, Inc. | Compositions, devices, and methods of eczema food sensitivity testing |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006098523A1 (ja) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする皮膚性状の評価方法 |
WO2007046463A1 (ja) * | 2005-10-21 | 2007-04-26 | Fancl Corporation | アトピー性皮膚炎マーカーとその利用技術 |
JP2009115813A (ja) * | 2008-12-26 | 2009-05-28 | Tokiwa Yakuhin Kogyo Kk | アトピー性皮膚炎の局所病態の非侵襲的評価方法 |
JP2012177601A (ja) * | 2011-02-25 | 2012-09-13 | Fancl Corp | アトピー性皮膚炎の検査方法 |
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006098523A1 (ja) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする皮膚性状の評価方法 |
WO2007046463A1 (ja) * | 2005-10-21 | 2007-04-26 | Fancl Corporation | アトピー性皮膚炎マーカーとその利用技術 |
JP2009115813A (ja) * | 2008-12-26 | 2009-05-28 | Tokiwa Yakuhin Kogyo Kk | アトピー性皮膚炎の局所病態の非侵襲的評価方法 |
JP2012177601A (ja) * | 2011-02-25 | 2012-09-13 | Fancl Corp | アトピー性皮膚炎の検査方法 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
出原賢治: "アレルギー疾患のトランスクリプトーム解析II 新規アレルギー疾患マーカーとしての扁平上皮細胞癌抗原(", 臨床検査, vol. 49, no. 7, JPN6017026342, 15 July 2005 (2005-07-15), pages 769 - 772, ISSN: 0004406555 * |
太田昭一郎、出原賢治: "III.アトピー性皮膚炎の新しいバイオマーカー", アレルギー・免疫, vol. 23, no. 2, JPN6017026346, 15 January 2016 (2016-01-15), pages 190 - 196, ISSN: 0004406557 * |
松元有羽子 ほか: "乳幼児アトピー性皮膚炎を対象とした低刺激性スキンケアの効果と角層中のSCCA1タンパク質の変動", 日本小児皮膚科学会学術大会プログラム・抄録集, vol. 36, JPN6017026340, 2012, pages 112, ISSN: 0004406559 * |
松元有羽子 ほか: "乳幼児のアトピー性皮膚炎とSCCA1およびS100A8/A9の関連性", 日本小児アレルギー学会誌, vol. 25, no. 3, JPN6017026338, 20 August 2011 (2011-08-20), pages 545, ISSN: 0004406558 * |
阿部隆: "スキンケア化粧品の研究開発動向(2007年)", FRAGR.J, vol. 36, no. 4, JPN6017026343, 15 April 2008 (2008-04-15), pages 78 - 83, ISSN: 0004406556 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019191007A (ja) * | 2018-04-25 | 2019-10-31 | 日本全薬工業株式会社 | 血清中tarcをマーカーとして用いるイヌアトピー性皮膚炎(cad)の診断 |
WO2022114200A1 (ja) * | 2020-11-30 | 2022-06-02 | 花王株式会社 | アトピー性皮膚炎の症度の検出方法 |
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