JP2017145266A - 抗認知症用組成物 - Google Patents
抗認知症用組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017145266A JP2017145266A JP2017111539A JP2017111539A JP2017145266A JP 2017145266 A JP2017145266 A JP 2017145266A JP 2017111539 A JP2017111539 A JP 2017111539A JP 2017111539 A JP2017111539 A JP 2017111539A JP 2017145266 A JP2017145266 A JP 2017145266A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- composition
- salamander
- dementia
- antidementia
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
サンショウ果皮を採取するサンショウには、ミカン科サンショウ属(Zanthoxylum)の植物であれば特に限定することなく使用できる。具体的には、サンショウ(サンショウ、Zanthoxylum piperitum DC)、アサクラザンショウ(Z.piperitum DC.var.inerme Makino)、イヌザンショウ(青椒、青花椒:Z.schinifolium Sieb.et Zucc.)、ホワジョウ(花椒:Z.bungeanum Maxim.)などが例示できる。中でも、食品に一般的に使用されており、品質に優れ、安全性の高いサンショウ、アサクラザンショウが好ましく、和歌山県の特産品である品種名ブドウザンショウがより好ましい。
水系溶媒抽出物の調製方法として、具体的には、以下の調製方法が考えられる。まず、サンショウ果皮をメタノール、エタノール、アセトン等の有機溶媒に浸漬してエキスを抽出し、当該エキスを水で希釈する。つぎに、希釈したエキスとジエチルエーテル等の有機溶媒により溶媒抽出し、その水相を回収する。さらに、必要に応じて、回収した水相をDIAION HP-20などのスチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤を使用して精製する。
(1)その他の成分
本発明の抗認知症用組成物は、サンショウ果皮の水系溶媒抽出物を有効成分とするものである。ただ、食味や食感を向上させるため、最終製品である抗認知症用組成物の形態(液体、固体など)に合わせて、サンショウ果皮の水系溶媒抽出物に加えて公知の物質やその混合物を使用してもよい。
本発明の抗認知症用組成物は、その形態に合わせて、特に限定することなく公知の方法によって製造することができる。例えば、例えば、抗認知症用組成物が液体製剤である場合には、各成分を計量して攪拌すれば製造できる。また、また、抗認知症用組成物が固体製剤である場合には、各成分を計量して型に入れて錠剤機等で加圧すれば製造できる。さらに、抗認知症用組成物が食品の場合には、計量した材料を加熱撹拌機等で加熱攪拌すれば製造できる。
なお、1回当たりのサンショウ果皮の水系溶媒抽出物の服用量及びこれを含有する抗認知症用組成物の服用量は、抗認知症用組成物中のサンショウ果皮の水系溶媒抽出物の含有量、認知症患者の年齢、性別、症状に応じて自由に設定することができる。
本発明の抗認知症用組成物の材料であるサンショウ果皮が、マウスに対して抗認知症効果があるか否かを調べた。具体的には、以下のようにして調べた。
1)被験物質等
被験物質は、完熟サンショウ果実(和歌山県産、品種名:ブドウザンショウ)を乾燥させ、篩で篩って果皮と種子とを分離した。果皮を粉砕して80メッシュの篩を通過した粉サンショウを使用した。
認知症及びパーキンソン症状を呈する21週齢、雄性のSJLB(SPF)マウス77匹を、(株)トランスジェニックより2015年3月5日に入手した。入手した動物は入荷日に尾へのフェルトペンによるマーキングにより個体識別し、入荷から投与開始日前日まで馴化した。
1)投与物質の調製方法
被験物質を、電子上皿天秤又は電子分析天秤Sartorius Laboratory(ザルトリウス(株))を使用して秤量したのち、0.5% CMCに溶解し、全量を所定量にメスアップしたものを被験物質高用量群の投与物質とした。また、被験物質高用量群を所定濃度に希釈したものを、被験物質低用量群の投与物質とした。2回/週の頻度で調製し、残余投与物質は、大量の水道水で希釈し廃棄した。
投与液量は、最新の体重を基づいて10mL/kgの割合で換算して、小数第3位を四捨五入し、小数第2位まで算出した。投与液を経口ゾンデ(ステンレス製経口ゾンデ、(株)夏目製作所)を装着した注射筒(ディスポーザブルシリンジ、テルモ(株))に充填し、1回/1日、42日間(42回)強制経口投与した。
入荷時に動物をケージに無作為に所属させ、検疫・馴化期間中に一般状態に異常の認められなかった動物を使用した。フットプリントを指標に、層別連続無作為化法により表1の群構成表に従い群分けを実施した。
投与期間中、一般状態は毎日観察し、体重は2回/週の頻度で測定した。
(a)シャトルボックス
獲得試行は、投与6週目に実施した。マウスをステップスルー型受動的回避反応装置(室町機械(株))の明室(幅9x奥行き11.5x高さ15cm)に入れてから、30秒後に暗室(幅14x奥行き17.5x高さ15cm)の扉を開き、マウスが暗室に進入するまでの時間(潜時)を測定した。測定後、暗室中のマウスに0.2mAの電流を3秒間流してから元のケージに収容した。なお、「マウスが暗室に進入する。」とは、暗室の扉を閉めた時マウスが明室に戻れなくなるまで進入した状態と定義した。潜時は最大で60秒まで計測した。
投与6週目に実施した。マウスをオープンフィールド(幅45x奥行き45x高さ40cm、バイオリサーチ(株)製)内の中央近辺に置き、20分間自由に探索させ、一定時間の移動距離を解析した。
投与5〜6週目に実施した。水迷路(直径90cm、高さ60cm、バイオリサーチ(株)製)を白い無害の塗料で白濁させ、仮想の4象限(東西南北)に分けた。円形のプラットフォームを水表面から深さ約1.5cmに沈め、北の象限の中央に設置した。迷路外手掛かりとしては、水迷路の壁に黒い目印を設置した。
投与前及び投与6週目に実施した。マウスをスロープ(幅約5cm、傾斜角度30度)の下端に置き、黒色の塗料をマウスの後肢に塗布し、スロープに設置した紙片上をマウスに進ませて、歩幅(stride length(cm))を測定した。なお、1匹につき3回の測定を実施し、各測定の最長の歩幅の平均歩幅を個体値とした。
最終投与翌日に実験動物を解剖した。具体的には、実験動物をイソフルラン麻酔下で放血安楽致死させたのち、直ちに脳を摘出した。摘出した脳は10%中性緩衝ホルマリン溶液に固定して保存した。
得られた数値は各群で平均値及び標準誤差を算出した。群分け後は体重において、一元配置分散分析で有意差がないことを確認した。A群とB、C群の比較は、Bartlett法により等分散性を検定し、等分散の場合はさらに一元配置分散分析し、有意な場合はDunnett法により平均値を比較した。不等分散の場合はKruskal-WallisのH検定をし、有意な場合はDunnett法により平均順位を比較した。Bartlett法、一元配置分散分析及びKruskal-WallisのH検定については、有意水準を危険率5%、Dunnett法については有意水準を危険率5%及び1%とした。
1)一般状態観察及び体重測定
投与期間中、一般状態観察によって、特記する異常所見及び死亡例は認められなかった。また、体重推移を図1〜3に示す。なお、図1は体重推移を群ごとに示すグラフであり、図2は体重推移を群ごとに示す表であり、図3は体重推移を個体ごとに示す表である。
(a)シャトルボックス
潜時を図4〜6に示す。なお、図4は潜時を群ごとに示すグラフであり、図5は潜時と移動距離とを群ごとに示す表であり、図6は潜時を個体ごとに示す表である。
移動距離を図7〜8に示す。なお、図7は移動距離を群ごとに示すグラフであり、図8は移動距離を個体ごとに示す表である。
逃避潜時の経時変化を図9〜11に示す。なお、図9は逃避潜時の経時変化を群ごとに示すグラフであり、図10は逃避潜時の経時変化を群ごとに示す表であり、図11は逃避潜時の経時変化を個体ごとに示す表である。
歩幅の経時変化を図12〜14に示す。なお、図12は歩幅の経時変化を群ごとに示すグラフであり、図13は歩幅の経時変化を群ごとに示す表であり、図14は歩幅の経時変化を個体ごとに示す表である。
シャトルボックスを使用したステップスルー型受動的回避学習試験において、潜時の延長が認められたことから、本発明の抗認知症用組成物の被験物質の学習・記憶能力改善効果が明らかとなった。また、フットプリントにおいて歩幅の延長が認められたことから、本発明の抗認知症薬の運動機能改善効果も明らかとなった。そのため、本発明の抗認知症用組成物は、抗認知作用及びパーキンソン症状改善作用を発揮する優れた食品素材であることが明らかとなった。
実施例1から、サンショウ果皮粉末が抗認知症作用を備えていることが分かった。そこで、サンショウ果皮に含まれるPHF形成阻害物質を探索した。具体的には、図15に従って、以下のような手順で探索した。
和歌山県産ブドウザンショウの果皮10kgを10Lのナス型フラスコに入れ、メタノール(MeOH)5Lを加え室温で1週間冷浸した。冷浸後,減圧吸引ろ過によりサンショウ果皮とメタノール抽出物に分離した。サンショウ果皮について新たにメタノールを加え冷浸した。これをさらにもう一度繰り返し合計3回の冷浸を行った。得られた3回分のメタノール抽出物15Lを減圧下濃縮乾固し、エキス3.5kg得た。
抽出で得られたエキスを水/メタノール(1:1)混合液に溶解し、混合溶液をDIAION HP-20(MITSUBISHI CHEMICAL)に吸着させた。その後、水100%、20%、50%及び100%とメタノールの比率を順次上げながら、各溶媒5Lずつで溶出させた。
得られた各分画のtauタンパク質重合阻害効果を検討したところ、50% MeOH-H2O 溶出分画F1にtauタンパク質重合阻害活性が認められた。なお、tauタンパク質重合阻害活性は以下の公知の方法により測定した。
50% MeOH-H2O分画F1(850g)について、活性を指標に分離精製を進め、活性本体を特定した。具体的には、以下のように精製した。まず、ODS silica gel(富士シリシア化学)を充填剤とした中圧カラムクロマトグラフィー(水100%、10%,20%,50%,100%メタノール各1L)を使用して、分画F1を再度分離した。その結果、図18に示すように、50%MeOH-H2Oで溶出した分画F2(7.2g)及びF3(10.8g)に最も強い活性が認められた。
高純度のヒペロシドをより効率的、かつ大量に分離する方法を検討した。具体的には、以下の分離方法を検討した。
実施例2で分離して使用しなかった活性分画F3を、種々の溶媒を使用して再結晶して、最適な溶媒を検討した。その結果、メタノールを使用した場合に、ヒペロシドが短時間で再結晶できた。特に、再結晶を数回繰り返すことによって、活性分画F3から比較的大量に高純度のヒペロシド(502.4mg)が単離できた。
(1)から、再結晶が有効であることが分かったので、より簡便な分離方法、具体的には図21に示す分離方法に従って分離した。具体的には、以下の手順に従って、分離した。まず、サンショウ果皮10kgを実施例2と同様の方法で抽出し、エキス(3.2kg)を得た。つぎに、エキスを水に溶解したのち、ジエチルエーテルで抽出して脂溶性物質を除き、水層F6を得た。さらに、水層F6をDIAION HP-20(H2O-MeOH gradient)に通し、50% MeOH-H2Oで溶出した分画F7(90.5g)を分離した。最後に、分画F7をメタノールにより再結晶し、高純度のヒペロシド7.2gを得た
和歌山県産サンショウ果皮のヒペロシド含有量を測定し、中国産サンショウの果皮のヒペロシド含有量と比較した。具体的には、以下の手順で測定した。
粉末にした和歌山県産サンショウ果皮4.5g及び中国産サンショウ果皮5.0gを精秤し、それぞれナス型フラスコに入れた。ナス型フラスコに100%メタノールをそれぞれ60 mL加え、80℃で1時間加熱還流抽出した。ナス型フラスコを自然冷却させたのち、内容液を吸引ろ過して、得られたろ液の液量がメスフラスコによって正確に全量100mLになるように100% メタノールを加えて調整し、分析サンプルとした。
ヒペロシド標準品(別途、独自に精製したものを使用した。)を100% メタノールに溶解して、以下のHPLC条件で検量線を作成した。その結果を図22に示す。
1)HPLC本体
ポンプ:PU-2086 Plus(JASCO)
カラムオーブン:CO-2060 Plus (JASCO)
検出器:RI-2031 Plus (JASCO)
インテグレーター:807-IT (JASCO)
2)測定条件
移動相:2.5%酢酸:MeOH:アセトニトリル(70:10:20)
流速:1mL/min
Attenuator:128
Injection:標準サンプル2.0,1.0,0.2,0.1mg/mLをそれぞれ25μLずつサンプリングした。
標準サンプルと同じ条件で、和歌山産サンショウ果皮及び中国産サンショウ果皮由来のサンプルを、50μLをそれぞれ3回ずつサンプリングした。図23にHPLCの結果の一例を示す。なお、図23の(a)はヒペロシド標準品由来、(b)は日本和歌山県産山椒、(c)中国産山椒由来サンプルのHPLCチャートをそれぞれ示す。
ヒペロシドが、tauタンパク質と同様に、アルツハイマー型認知症発症に関与すると考えられているアミロイドβタンパク質の自己重合に対して、重合阻害活性を有するか否かを確認した。具体的には、アミロイドβタンパク質重合阻害活性を以下の公知の方法により測定した。その結果を図25に示す。なお、ヒペロシドは実施例3で精製したF5を使用した。また、ヒペロシドのみを加えていない反応液を実験対照として使用した。
Claims (2)
- サンショウ果皮の水系溶媒抽出物を有効成分として含有する抗認知症用組成物。
- 水系溶媒が、水とメタノールの混合溶媒である請求項1に記載の抗認症用組成物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017111539A JP2017145266A (ja) | 2017-06-06 | 2017-06-06 | 抗認知症用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017111539A JP2017145266A (ja) | 2017-06-06 | 2017-06-06 | 抗認知症用組成物 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015202908A Division JP2017075112A (ja) | 2015-10-14 | 2015-10-14 | 抗認知症用組成物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017145266A true JP2017145266A (ja) | 2017-08-24 |
Family
ID=59681894
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017111539A Pending JP2017145266A (ja) | 2017-06-06 | 2017-06-06 | 抗認知症用組成物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2017145266A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110279768A (zh) * | 2018-07-27 | 2019-09-27 | 成都中医药大学 | 花椒在制备预防和/或治疗神经退行性疾病的药物中的用途 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002515443A (ja) * | 1998-05-20 | 2002-05-28 | ナティヴィア・ヘルス・プロダクツ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 新生物疾患を予防および治療するためのサンザシ属製剤の使用 |
CN1899341A (zh) * | 2006-07-27 | 2007-01-24 | 上海林赛娇生物科技发展有限公司 | 美洲一枝黄花总黄酮提取物及其制备方法和用途 |
CN101797267A (zh) * | 2010-04-28 | 2010-08-11 | 北京大学第一医院 | 一种防治老年痴呆症的药物组合物 |
CN101888847A (zh) * | 2007-12-04 | 2010-11-17 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 含有全果实Zanthoxylum Bungeanum提取物的营养药物性组合物 |
CN102935100A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-20 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种大花罗布麻叶总黄酮的制备方法和用途 |
JP2013526487A (ja) * | 2010-05-10 | 2013-06-24 | ダルハウジー、ユニバーシティー | リンゴの皮由来のフェノール組成物およびその使用 |
-
2017
- 2017-06-06 JP JP2017111539A patent/JP2017145266A/ja active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002515443A (ja) * | 1998-05-20 | 2002-05-28 | ナティヴィア・ヘルス・プロダクツ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 新生物疾患を予防および治療するためのサンザシ属製剤の使用 |
CN1899341A (zh) * | 2006-07-27 | 2007-01-24 | 上海林赛娇生物科技发展有限公司 | 美洲一枝黄花总黄酮提取物及其制备方法和用途 |
CN101888847A (zh) * | 2007-12-04 | 2010-11-17 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 含有全果实Zanthoxylum Bungeanum提取物的营养药物性组合物 |
CN101797267A (zh) * | 2010-04-28 | 2010-08-11 | 北京大学第一医院 | 一种防治老年痴呆症的药物组合物 |
JP2013526487A (ja) * | 2010-05-10 | 2013-06-24 | ダルハウジー、ユニバーシティー | リンゴの皮由来のフェノール組成物およびその使用 |
CN102935100A (zh) * | 2012-11-30 | 2013-02-20 | 中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院 | 一种大花罗布麻叶总黄酮的制备方法和用途 |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY, vol. 59(9), JPN6016047990, 2005, pages 481 - 490, ISSN: 0004451997 * |
BULLETIN OF THE KOREAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 35(8), JPN6016047994, 2014, pages 2361 - 2366, ISSN: 0004451998 * |
EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, vol. 672(1-3), JPN6016047987, 2011, pages 45 - 55, ISSN: 0004451996 * |
JOURNAL OF THE SCIENCE OF FOOD AND AGRICULTURE, vol. 94(8)、1693-1700, JPN6020017512, 2014, ISSN: 0004274112 * |
NATURAL MEDICINES, vol. 48(4), JPN6021006567, 1994, pages 317 - 321, ISSN: 0004452000 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110279768A (zh) * | 2018-07-27 | 2019-09-27 | 成都中医药大学 | 花椒在制备预防和/或治疗神经退行性疾病的药物中的用途 |
CN110279768B (zh) * | 2018-07-27 | 2021-11-26 | 成都中医药大学 | 花椒在制备预防和/或治疗神经退行性疾病的药物中的用途 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sterner et al. | Novel natural vanilloid receptor agonists: new therapeutic targets for drug development | |
JP5667561B2 (ja) | 4’−デメチルノビレチン又は4’−デメチルタンゲレチンを有効成分として含有する神経突起伸長剤、記憶改善剤、抗アルツハイマー剤、並びに、その製造方法 | |
Dean | Extracts of peanut skins as a source of bioactive compounds: methodology and applications | |
CN109674778B (zh) | 脂类抗菌组合物、提取方法、检测方法和用途 | |
Chen et al. | Isolation and identification of polyphenols from fresh sweet sorghum stems and their antibacterial mechanism against foodborne pathogens | |
Nam et al. | Correlation between acetogenin content and antiproliferative activity of pawpaw (Asimina triloba [L.] Dunal) fruit pulp grown in Korea | |
Ozpinar et al. | The effects of Erzincan grape (Vitis vinifera spp., Cimin) and benzothiazol on a Caenorhabditis elegans organism model | |
KR20200044373A (ko) | 계요등 꽃 앱솔루트를 포함하는 피부 재생 및 상처 치료용 조성물 | |
JP2017145266A (ja) | 抗認知症用組成物 | |
KR101685773B1 (ko) | 산국 에센셜 오일을 유효성분으로 함유하는 항산화 및 항비만 조성물 | |
JP2017075112A (ja) | 抗認知症用組成物 | |
KR102253137B1 (ko) | 진세노사이드 Re를 포함하는 거저리 유충 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물 | |
Qusa et al. | Olive oil lignan (+)-acetoxypinoresinol peripheral motor and neuronal protection against the tremorgenic mycotoxin penitrem A toxicity via STAT1 pathway | |
JPH09278666A (ja) | 抗菌剤およびその製造法 | |
US8557309B2 (en) | Antimicrobial composition based on botanical extracts from oil palm vegetation liquor | |
JP2016029032A (ja) | 抗認知症用組成物 | |
KR101784294B1 (ko) | 모과 추출물을 포함하는 뇌신경질환 예방 또는 치료용 의약 조성물 | |
KR101149382B1 (ko) | 모로우붉은실 추출물 또는 이로부터 분리되거나 합성된 화합물을 포함하는 항스쿠티카충 조성물 | |
Kulathilaka et al. | Determination of cytotoxicity and chemical identities in natural plants and callus cultures of Spilanthes paniculata Wall. ex DC. | |
JP2013060380A (ja) | 黒酢由来成分を有効成分とする脳機能改善用組成物 | |
Njue et al. | Evaluation of oral toxicity level of ethyl acetate extract, from garlic (allium sativum) in onorrh dawleys rats as per OECD guidelines 423 | |
CN105237364A (zh) | 一种反式茴香脑的制备方法及应用 | |
KR101901491B1 (ko) | 밤꽃으로부터 추출된 앱솔루트 또는 신나밀 알코올을 포함하는 항비만 조성물 | |
KR101351406B1 (ko) | 바우미 상황버섯 유래의 폴리페놀 추출물을 유효성분으로 함유하는 동맥경화 예방 및 치료용 조성물 | |
EP2609929A1 (en) | Composition for preventing or treating dementia |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181012 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190903 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20191030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20191226 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200602 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20200701 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200730 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200930 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210302 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210914 |