JP2016536114A - 硫酸化水和セルロース膜、それを製造する方法、及びウイルス精製のための吸着膜としての該膜の使用 - Google Patents
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Abstract
Description
―粒状分離材料での拡散「流」とは反対の対流
―可能な限り高い流量
―配位子へのより良好な接近性(accessibility:アクセシビリティ)及びウイルスに対するより高い結合能
―より単純な規模設定性、すなわち低容量の膜吸着体から大容量の膜吸着体への規模の増大。
硫酸化度(重量%単位)=(n硫酸塩×M(SO3)/(mセルロース+(n硫酸塩×M(SO3)))×100%
(式中、
mセルロース=膜当たりのセルロースの質量(μg/cm2)であり、
硫酸基密度n硫酸塩は下記式:
硫酸基密度:n硫酸塩(μmol/cm2)=c(NaOH)×t(NaOH)×V(NaOH)×1000/A
(式中、
c(NaOH)は水酸化ナトリウム水溶液滴定液の定量濃度(mol/l単位)であり、
V(NaOH)は当量点(pH7)で消費される滴定液の量(ml単位)であり、
t(NaOH)は滴定液の補正係数であり、
1000はmol/lからμmol/mlへの換算係数であり、
Aは有効フィルター表面(cm2単位))を用いて決定され、
M(SO3)はSO3のモル質量(μg/μmol単位)である)。
DC=3.24×ΔM/Mv
(式中、
DC:本発明による膜の架橋度であり、
ΔM:出発膜(starting membrane)の初期質量の架橋による本発明による膜の質量増分(%単位)であり、
Mv:架橋剤のモル質量である)。
平均孔径が0.1μm〜20μm、好ましくは0.5μm〜15μm、より好ましくは1μm〜10μmの本発明による方法における出発膜として用いられる水和セルロース膜は、例えばL. J. Zeman et al., "Microfiltration and ultrafiltration principles and applications", Marcel Dekker 1996, "Part I", "Chapter 3.1"、独国特許出願公開第10326741号及び独国特許出願公開第3447625号に記載されているような技術分野より知られる慣習的な作製方法により作製する。平均孔径を求めるために、「毛管流ポロメトリー試験(capillary flow porometry test)」を実施した。詳細は「Capillary Flow Porometer 6.0」(CAPWINソフトウェアシステム、Porous Materials Inc.)の操作説明書に見ることができる。
架橋剤はセルロース膜のヒドロキシル基と反応する官能基を分子中に少なくとも2つ有し、それによりセルロース膜の架橋を可能にするものである。例えば、セルロース膜の架橋は、セルロースポリマー鎖のヒドロキシル基に対して反応性のある官能基を少なくとも2つ有する上述の架橋剤により、2つのセルロースポリマー鎖の(分子間)連結又はセルロースポリマー鎖の反復単位の(分子内)連結を介して達成される。用いることができる架橋剤は原則、何ら特定の制限を受けることなく、当業者であれば、続く硫酸化の反応条件に対して架橋剤を選択することができる。しかしながら、架橋工程においては、ジエポキシド化合物、又は更にセルロースのヒドロキシル基と反応性のある反応性官能基を少なくとも2つ有する他の化合物、例えばジイソシアネート、エピクロロヒドリン、エピブロモヒドリン、ジメチル尿素、ジメチルエチレン尿素、ジメチルクロロシラン、ビス(2−ヒドロキシエチルスルホン)、ジビニルスルホン、アルキレンジハライド、ヒドロキシアルキレンジハライド及びジグリシジルエーテルを使用することが好まれる。架橋工程にジエポキシド化合物を使用することが特に好まれる。
硫酸化は架橋した水和セルロース膜とルイス塩基−SO3錯体との反応により達成される。この反応は、アミンの存在下でのクロロ硫酸を用いて、SO3−アミド錯体との反応(ここではジメチルホルムアミドがアミドとして好ましく使用され得る)により、又はSO3−アミン錯体との反応(ここではピリジン又はトリメチルアミンがアミンとして好ましく使用され得る)により達成することができる。SO3−ピリジン錯体がこの反応に特に好ましい。
架橋反応は20℃〜25℃で行う。10%の水酸化ナトリウム水溶液を、予め投入しておいた量(g単位)の逆浸透水に添加し、撹拌する。次いで、1,4−ブタンジオールジグリシジルエーテル(シグマアルドリッチ社、カタログ番号220892)を添加し、均質な溶液が形成されるまで撹拌する。架橋度は架橋溶液中の1,4−ブタンジオールグリシジルエーテルの濃度により制御することができる。本実施例にて調製された架橋溶液中の逆浸透水、水酸化ナトリウム水溶液及び1,4−ブタンジオールジグリシジルエーテル(BUDGE)のそれぞれの量、並びに本発明による膜の得られる架橋度を表1にまとめている。
ΔM=100%×((mv−mA−mB)/(mA−mB))、
(式中、
mvは架橋した膜の質量であり、
mAは非架橋の膜の質量であり、
mBはブランクサンプルの浸出性構成要素の質量である)。
2gのピリジン−三酸化硫黄錯体(シグマアルドリッチ社、カタログ番号84737−500g)を8gの2−ピロリドンに撹拌しながら添加する。反応容器を密封する。次いで混合物を70℃ヘと温度制御すると、ピリジン−三酸化硫黄錯体が溶解し、黄土色の硫酸化溶液が形成される。
ピリジン(シグマアルドリッチ、カタログ番号270970−1L)及びクロロスルホン酸(シグマアルドリッチ、カタログ番号571024−100G)を使用前に−18℃まで冷却する。激しく撹拌しながら、60mlのクロロスルホン酸を1000mlのピリジンに15分かけて等圧滴下漏斗及び乾燥管を介して滴加し、温度は5℃を超えてはならず、ここでは白色固体が沈殿する。
―逆浸透水を10分流し、
―1000mlの1M NaClと10分振盪させ、
―逆浸透水を10分流し、
―30重量%グリセロール及び70重量%水の溶液中で10分振盪する。
47mm径のディスクを実施例3による硫酸化セルロースマイクロフィルター膜から打ち抜く。これらを逆浸透水にて湿らせ、逆浸透水を流して5分すすぐ。打ち抜いたブランクを16249タイプのザルトリウス加圧式フィルターホルダーに組み込む。測定は20℃〜25℃及び0.1barの陽圧で行う。100gの媒体を膜フィルターに通すのにかかる時間を測定する。このようにして求められた流量の単位はml/(cm2・分・bar)で示される。逆浸透水及びpH7の10mM リン酸カリウムバッファーの両方を媒体として使用する。
30mm径のディスクを、丸パンチを用いて硫酸化セルロースマイクロフィルター膜から打ち抜く。30mm径の打ち抜いたブランクを、デッドボリュームを最適化したフィルターホルダーに組み込む。有効フィルター表面は5.7cm2である。気泡を排除しながら、フィルターホルダーに逆浸透水を満たす。フィルターホルダーをワトソン・マーロー社製の多重チャンネルカートリッジポンプ(205 Uタイプ)に接続し、そのラインには気泡が含まれていない。カートリッジポンプ出力はおよそ5ml/分である。次いで下記の媒体:1M NaCl、1M HCl、1mM HCl、逆浸透水を順番にそれぞれ4分間、膜フィルターに通して送り込む。
硫酸基密度:
n硫酸塩(μmol/cm2)=c(NaOH)×t(NaOH)×V(NaOH)×1000/A
(式中、
c(NaOH)は水酸化ナトリウム水滴定液の定量濃度(mol/l単位)であり、
V(NaOH)は当量点(pH7)で消費される滴定液の量(ml単位)であり、
t(NaOH)は滴定液の補正係数であり、
1000はmol/lからμmol/mlへの換算係数であり、
Aは有効フィルター表面(cm2単位)である)であり、
M(SO3)はSO3のモル質量(μg/μmol単位)である)。
硫酸化度(重量%単位)=(n硫酸塩×M(SO3)/(mセルロース+(n硫酸塩×M(SO3)))×100%
(式中、
mセルロースは打ち抜いたブランク1cm2当たりのセルロース質量(μg単位)である)。
それぞれ有効膜表面が17.6cm2である膜サンプルを、35mlの10mM リン酸カリウムバッファー(KPi)(pH7.0)中にて5分間、約80の毎分回転数(rpm)で3回振盪した後、35mlの2mg/mlリゾチームの10mM Kpi溶液(pH7.6)中に20℃〜25℃で12時間〜18時間おく。次いで膜サンプルを毎回35mlの10mM KPiバッファー(pH7.0)にて2×15分すすぐ。その後、膜サンプルを20mlの10mM KPiバッファー(pH7.0)及び1M NaCl水溶液中で振盪する。溶出したタンパク質の量を、280nmでの光学密度(OD)を測定することにより求める。
宿主細胞タンパク質の結合を求めるために、10倍濃度のHCPのPBSバッファー溶液(リン酸緩衝生理食塩溶液、pH7.4)を抗体なしで使用し、契約生産者(contract producer)の場合はチャイニーズハムスター卵巣細胞株の「擬似(mock)」操作(抗体産生のない細胞株の培養)にて調製する。HCP溶液を20mM TRIS/HClバッファー(pH7.4)にて1:10で希釈して、導電率をNaClの添加により10mS/cmに調整する。膜に充填するために1000mlの希釈HCP溶液を使用する。HCP濃度は手順仕様書に従ってELISA法(「酵素結合免疫吸着測定法 ELISA Cygnus CM015」)を用いて求める。宿主細胞タンパク質(HCP)の濃度は7μg/mlである。
1.10mlの導電率が10mS/cmである20mM TRIS/HClバッファー(pH7.4)を用いて膜を平衡化する工程、
2.100mlのHCP溶液を膜に充填する工程、
3.10mlの20mM TRIS/HCl(pH7.4、導電率10mS/cm)で洗浄する工程、及び、
4.10mlの1M NaClの20mM TRIS/HClバッファー(pH7.4)にて溶出する工程。
インフルエンザAプエルトリコ/8/34、H1N1は接着MDCK細胞(GMEM培地)にて産生する(Y. Genzel et al., Vaccine 22 (2004), 2202-2208を参照)。培養後、培養ブロスを2つのろ過工程にて連続して濾過し(孔径5μm及び0.65μmのフィルター厚、GE Water & Process Technologies)、続いて3mM β−プロピオラクトンにて37℃で24時間、化学的に不活化する。不活化後、溶液を更に清澄化し(0.45μmの膜フィルター、GE Water & Process Technologies)、続いてクロスフロー濾過(750kDa MWCO、GE Healthcare)により20倍に濃縮する(B. Kalbfuss et al., Biotechnol. Bioeng. 97 (1), 2007, 73-85を参照)。濃縮サンプルを使用に必要となるまで−80℃で保存する。
C0:開始溶液におけるウイルス濃度(ウイルス粒子数/ml=粒子数/ml)
Vx:x%の破過まで達した際の投入量(ml)
Ax:x%の破過まで達した際の連続流におけるウイルス粒子の数
VB:試験ユニットのカラム体積
x%の破過までの動的結合能(粒子数/ml)=(Vx×C0−Ax)/VB
Claims (15)
- 孔を備える架橋した水和セルロースマトリクスを含む硫酸化水和セルロース膜であって、
該孔が該膜の一方の主表面から他方の主表面へと延びており、
該水和セルロース膜が吸着物質の分離のために該膜の内表面及び外表面上に硫酸配位子を有する、硫酸化水和セルロース膜。 - 前記水和セルロースマトリクスの硫酸化度が10重量%以上である、請求項1に記載の硫酸化水和セルロース膜。
- 前記膜の平均孔径が0.5μm〜5.0μmである、請求項1又は2に記載の硫酸化水和セルロース膜。
- 前記水和セルロースマトリクスの架橋度が0.05〜0.5である、請求項1から3のいずれかに記載の硫酸化水和セルロース膜。
- 孔径が0.1μm〜20μmの水和セルロース膜を準備する工程と、
水和セルロースマトリクスのヒドロキシル基と反応する官能基を分子中に少なくとも2つ有する架橋剤を用いて、前記水和セルロースマトリクスを架橋する工程と、
該架橋した水和セルロースマトリクスを硫酸化する工程とを含む、
請求項1に記載の硫酸化水和セルロース膜を作製する方法。 - 前記架橋剤が、ジエポキシド化合物、ジイソシアネート、エピクロロヒドリン、エピブロモヒドリン、ジメチル尿素、ジメチルエチレン尿素、ジメチルクロロシラン、ビス(2−ヒドロキシエチルスルホン)、ジビニルスルホン、アルキレンジハライド、ヒドロキシアルキレンジハライド及びジグリシジルエーテルからなる群より選択される架橋剤、又はそれらの混合物である、請求項5に記載の方法。
- 1,4−ブタンジオールジグリシジルエーテル又はエチレングリコールジグリシジルエーテルを架橋剤として使用する、請求項5又は6に記載の方法。
- 架橋溶液中の前記架橋剤の濃度が10重量%〜30重量%である、請求項5から7のいずれかに記載の方法。
- 前記硫酸化が、前記架橋した水和セルロースマトリクスとルイス塩基−SO3錯体とを反応させることにより起こる、請求項5から8のいずれかに記載の方法。
- 前記硫酸化がSO3−ピリジン錯体との反応により起こる、請求項5から9のいずれかに記載の方法。
- 硫酸化溶液中の前記SO3−ピリジン錯体の濃度が1重量%〜40重量%である、請求項10に記載の方法。
- 前記硫酸化が20℃〜90℃の温度で起こる、請求項5から11のいずれかに記載の方法。
- ウイルス又はウイルス断片の精製のための吸着膜としての請求項1から4のいずれかに記載の硫酸化水和セルロース膜の使用。
- 分子質量が107Daより大きいウイルスの精製のための請求項13に記載の使用。
- インフルエンザウイルスの精製のための請求項13又は14に記載の使用。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018135139A1 (ja) * | 2017-01-23 | 2018-07-26 | パナソニックIpマネジメント株式会社 | 高分子および高分子膜の製造方法 |
JP2020506044A (ja) * | 2017-02-02 | 2020-02-27 | ザルトリウス ステディム ビオテック ゲーエムベーハー | 架橋非強化水和セルロース膜、その作製方法、及びその使用 |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102015005244A1 (de) | 2015-04-24 | 2016-11-10 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Verfahren zur Sterilisierung eines Chromatographiematerials und danach sterilisiertes Chromatographiematerial |
DK3448928T3 (da) | 2016-04-29 | 2023-05-30 | Nanopareil Llc | Hybridmembran, der omfatter krydsbundet cellulose |
DE102016010601B4 (de) * | 2016-09-01 | 2018-11-08 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Verfahren zur Aufreinigung von Viren oder virusähnlichen Partikeln unter Verwendung einer vernetzten Cellulosehydrat-Membran |
DE102017000631A1 (de) | 2017-01-24 | 2018-07-26 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Chromatographiemedium mit gebundenen Mikroglobuli und Verfahren zu dessen Herstellung |
CN111346618A (zh) * | 2020-03-30 | 2020-06-30 | 无锡加莱克色谱科技有限公司 | 一种用于纯化病毒的亲和层析介质的制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5116393A (en) * | 1974-07-30 | 1976-02-09 | Lion Fat Oil Co Ltd | Ryusankaseruroosuno seizoho |
US20100093059A1 (en) * | 2007-04-17 | 2010-04-15 | Michael Wolff | Method for the Preparation of Sulfated Cellulose Membranes and Sulfated Cellulose Membranes |
US20110163029A1 (en) * | 2008-04-14 | 2011-07-07 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Method for substance separation using a cellulose hydrate membrane in size exclusion chromatography |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4064342A (en) | 1974-07-30 | 1977-12-20 | Lion Fat And Oil Co., Ltd. | Method of manufacturing sulfated cellulose |
JPS5790002A (en) | 1980-11-27 | 1982-06-04 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Cellulose sulfate containing heparin-like property and its production |
JPS60141733A (ja) | 1983-12-29 | 1985-07-26 | Fuji Photo Film Co Ltd | 微孔性シ−トの製造方法 |
JPS6147186A (ja) | 1984-08-09 | 1986-03-07 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | インフルエンザウイルスの精製方法 |
JPS6147185A (ja) | 1984-08-09 | 1986-03-07 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 日本脳炎ウイルスの精製方法 |
JPS6147187A (ja) | 1984-08-10 | 1986-03-07 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 狂犬病ウイルスの精製方法 |
JPS6153226A (ja) | 1984-08-24 | 1986-03-17 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 単純ヘルペスサブユニツトワクチンの精製方法 |
JP3615785B2 (ja) | 1994-04-28 | 2005-02-02 | テルモ株式会社 | Hiv及びその関連物質除去材料 |
EP0762929B1 (de) | 1994-05-30 | 2001-02-21 | Sartorius Ag | Hydrophile, poröse membranen aus vernetztem cellulosehydrat, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
US5739316A (en) * | 1995-05-26 | 1998-04-14 | Sartorius Ag | Cross-linked cellulose hydrate membranes |
DE10326741B4 (de) | 2003-06-13 | 2017-07-27 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer mikroporösen Membran auf Cellulosebasis und durch das Verfahren erhaltene mikroporöse Membran auf Cellulosebasis |
EP1698641B1 (en) | 2005-03-01 | 2011-09-28 | JNC Corporation | Compound selected from sulfated cellulose and salts thereof and dermatitis therapeutic agent |
GB0515577D0 (en) * | 2005-07-29 | 2005-09-07 | Amersham Biosciences Ab | Process for cross-linking cellulose ester membranes |
EP2066418A4 (en) | 2006-09-29 | 2011-12-28 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | SEPARATION MATRIX FOR VIRAL PURIFICATION |
GB0702504D0 (en) * | 2007-02-09 | 2007-03-21 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | Cross-linked cellulose membranes |
US8003364B2 (en) * | 2007-05-14 | 2011-08-23 | Bavarian Nordic A/S | Purification of vaccinia viruses using hydrophobic interaction chromatography |
DE102008055821A1 (de) * | 2008-04-14 | 2009-10-15 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Cellulosehydrat-Membran, Verfahren zur ihrer Herstellung und Verwendung davon |
DE102011012569A1 (de) * | 2011-02-26 | 2012-08-30 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Verfahren zur Gewinnung sekundärer Pflanzeninhaltsstoffe unter Verwendung einer Membran mit kationenaustauschenden Gruppen |
-
2013
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2014
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5116393A (en) * | 1974-07-30 | 1976-02-09 | Lion Fat Oil Co Ltd | Ryusankaseruroosuno seizoho |
US20100093059A1 (en) * | 2007-04-17 | 2010-04-15 | Michael Wolff | Method for the Preparation of Sulfated Cellulose Membranes and Sulfated Cellulose Membranes |
US20110163029A1 (en) * | 2008-04-14 | 2011-07-07 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Method for substance separation using a cellulose hydrate membrane in size exclusion chromatography |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING, vol. 103, no. 6, JPN5016010654, 3 April 2009 (2009-04-03), pages p.1144 - 1154 * |
BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING, vol. 107, no. 2, JPN5016010656, 18 May 2010 (2010-05-18), pages 312 - 320 * |
高分子論文集, vol. 66, no. 4, JPN6017015231, April 2009 (2009-04-01), pages 130 - 135 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018135139A1 (ja) * | 2017-01-23 | 2018-07-26 | パナソニックIpマネジメント株式会社 | 高分子および高分子膜の製造方法 |
JPWO2018135139A1 (ja) * | 2017-01-23 | 2019-11-07 | パナソニックIpマネジメント株式会社 | 高分子および高分子膜の製造方法 |
US10851181B2 (en) | 2017-01-23 | 2020-12-01 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Ltd. | Polymer and method for producing polymer membrane |
JP7113194B2 (ja) | 2017-01-23 | 2022-08-05 | パナソニックIpマネジメント株式会社 | 高分子膜の製造方法 |
JP2020506044A (ja) * | 2017-02-02 | 2020-02-27 | ザルトリウス ステディム ビオテック ゲーエムベーハー | 架橋非強化水和セルロース膜、その作製方法、及びその使用 |
US11224843B2 (en) | 2017-02-02 | 2022-01-18 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Crosslinked unreinforced cellulose hydrate membrane, method for the production thereof, and use thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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