JP2016519115A - ドラスタチン１０およびアウリスタチンの誘導体 - Google Patents

Abstract

本発明は、下式（Ｉ）の化合物：［式中、Ｒ１はＨまたはＯＨであり、Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）またはチアゾリル基であり、Ｒ３はＨまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、かつ、Ｒ４は、ＯＨおよびＮＲ９Ｒ１０基から選択される１以上の基で置換されたアリール−（Ｃ１−Ｃ８）アルキル基である］またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物、ならびに特に癌の治療のためのその使用、それを含有する医薬組成物およびその製造方法に関する

Description

本発明の主題は、ドラスタチン１０およびアウリスタチンの新規な誘導体、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、および特に、癌の治療における医薬品としてのそれらの使用に関する。

ドラスタチン１０（Ｄ１０）は、海洋軟体動物タツナミガイ(Dolabella auricularia)から単離される細胞傷害性ペプチド誘導体であり、その絶対構造は決定されており、その後、その完全合成の後に確認された(Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 6883; Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7581; Pettit, G. R. Heterocycles 1989, 28, 553; Pettit, G. R. J. Am. Chem. Soc. 1989,111, 5015; Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6692)。Ｄ１０は、ドラバリン（Ｄｏｖ）、バリン（Ｖａｌ）、ドライソロイシン（Ｄｉｌ）、ドラプロリン（Ｄａｐ）およびドラフェニン（Ｄｏｅ）と呼ばれる５つのユニットから形成される。この化合物の一定数の類似体がその成分アミノ酸の性質を改変することによって合成されている(Pettit G. R. J. Med. Chem. 1990, 33, 3133; Miyazaki K. Peptide Chemistry 1993, 31, 85; Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706)。また、Ｃ末端部分（右末端）の改変も行われており、アウリスタチンＥまたはＦを含むいくつかの誘導体が得られている(Pettit G. R. Anticancer Drug Design, 1998, 13, 243; Pettit G. R. Antimicrobial Agents And Chemotherapy, 1998, 2961)。

本発明は、ドラスタチン１０ならびにアウリスタチンＥおよびＦの誘導体のＮ末端部分（左末端）の改変に着目した。この位置になされた改変で、活性の低下をもたらした例は文献にはほとんど報告されていない(Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706)。本発明に記載の化合物は、それらの元の化学構造によって、およびまた文献に報告されている要素を考慮して全く予期されない顕著な生物学的特性によって、従来技術のものとは異なる。これらの顕著な活性により、これらの化合物は癌の治療に好適なものとなる。

さらに、これらの化合物は、細胞傷害性薬剤として活性があるとともに親化合物よりも溶解度が高いという利点を有する。

発明の具体的説明

従って、本発明の主題は、下式（Ｉ）の化合物：

［式中、
Ｒ_１は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ_２は、基：（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル（例えば、メチル）、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−（（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル）（例えば、ＣＯＯＭｅ）またはチアゾリル（例えば、チアゾール−２−イル）であり、
Ｒ_３は、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基（例えば、メチル）、特に、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基であり、かつ、
Ｒ_４は、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される１以上の基（特に、１つ、好ましくは、アリール部分上）で置換されたアリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基であり、ここで、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれ互いに独立にＨまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基（例えば、メチル）を表す］
またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物。

基Ｒ_２〜Ｒ_４、特に、Ｒ_４はキラル基であり得、それらの種々の立体異性体の形態、および場合により立体異性体の混合物の形態であり得る。

本発明の意味において「立体異性体」は、幾何異性体または光学異性体を意味する。

幾何異性体は、二重結合上の置換基の位置の違いによって生じ、従ってＺ型またはＥ型をとり得る。

光学異性体は、特に、４つの異なる置換基を含んでなる炭素原子上の置換基の空間内の位置の違いによって生じる。従って、この炭素原子はキラル中心または不斉中心を形成する。光学異性体は、ジアステレオ異性体および鏡像異性体を含んでなる。互いに鏡像であるが重ね合わせることのできない光学異性体は、「鏡像異性体」と呼ばれる。互いに鏡像の重ね合わせることのできる像でない光学異性体は「ジアステレオ異性体」と呼ばれる。

逆のキラリティーの２つの個々の鏡像異性体の等量含有混合物は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。

本発明において、「薬学的に許容可能な」とは、一般に安全で非毒性であり、生物学的にもその他の点でも望ましくないものではなく、かつ、獣医学的使用ならびにヒト医学的使用に許容可能な医薬組成物の製造において使用可能なものを意味する。

化合物の「薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物」とは、本明細書に定義されるように薬学的に許容可能であり、かつ、親化合物の所望の薬理活性を有する塩、水和物または溶媒和物を意味する。

薬学的に許容可能な塩は特に
（１）塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および類似の酸などの薬学的に許容可能な無機酸を伴って形成される；または酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ステアリン酸、乳酸および類似の酸などの薬学的に許容可能な有機酸を伴って形成される薬学的に許容可能な酸の付加塩；および
（２）親化合物中に存在する酸プロトンが、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンもしくはアルミニウムイオンで置換されているか、またはリシン、アルギニンおよび類似物などの薬学的に許容可能な有機塩基とともに；または水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムおよび類似物などの薬学的に許容可能な無機塩基とともに配位している、薬学的に許容可能な塩基の付加塩
を含んでなる。

これらの塩は、従来の化学法を用い、塩基または酸官能基を含有する本発明の化合物と、対応する酸または塩基から作製することができる。

本発明の式（Ｉ）の化合物は好ましくは、塩の形態、特に薬学的に許容可能な酸付加塩である。

好ましくは、本発明による式（Ｉ）の化合物は、薬学的に許容可能な酸付加塩の形態であり、この酸はトリフルオロ酢酸、酢酸または塩酸、例えば、特にトリフルオロ酢酸であり得る。

溶媒和物は、本発明の化合物の最後の製造工程で溶媒が存在するために得られる従来の溶媒和物を含んでなり、この溶媒は例えばエタノールであり得る。

本発明において「アルキル」とは、直鎖または分岐型の飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルまたはヘキシル基が挙げられる。

本発明の意味において「（Ｃ_ｘ−Ｃ_ｙ）アルキル」とは、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含んでなる上記で定義されるものなどのアルキル鎖を意味する。従って、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基は、１〜６個の炭素原子を有するアルキル鎖である。

本発明の意味において「アリール」とは、好ましくは、６〜１０個の炭素原子を有し、１または２個の縮合環を含んでなり得る芳香族炭化水素基を意味する。例えば、フェニルまたはナフチルが挙げられる。有利には、それはフェニルである。

本発明の意味において「アリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル」は、上記で定義されるものなどのアルキル基を介して分子の残りの部分に結合され、かつ、１〜８個、特に１〜６個、有利には１〜４個、好ましくは１または２個の炭素原子を含んでなる上記で定義されるものなどのアリール基を意味する。アリール部分は、好ましくは、フェニル部分である。（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル部分は、有利には、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、好ましくは（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキルである。特に、アリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基は、ベンジルまたはフェネチル基である。

本発明の化合物の中で、１つの特に価値が認められる化合物種は、Ｒ_１がＯＨであって、Ｒ_２が（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、例えばメチルを表す式（Ｉ）の化合物に相当する。

別の特に価値が認められる化合物種は、Ｒ_１が水素であって、Ｒ_２がチアゾール（特に、チアゾール−２−イル基）である式（Ｉ）の化合物に相当する。

別の特に価値が認められる化合物種は、Ｒ_１が水素であって、Ｒ_２がＣＯＯ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、例えばＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物に相当する。

別の特に価値が認められる化合物種は、Ｒ_１が水素であって、Ｒ_２がＣＯＯＨ基である、式（Ｉ）の化合物に相当する。

従って、本発明の化合物は、有利には、
Ｒ_１＝ＯＨおよびＲ_２＝Ｍｅ（メチル）、または
Ｒ_１＝ＨおよびＲ_２＝ＣＯＯＨ、ＣＯＯＭｅまたはチアゾール−２−イル
の式（Ｉ）の化合物である。

本発明の１つの特定の実施態様によれば、Ｒ_２は、より詳しくは、メチル、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＭｅまたはチアゾール−２−イル基である。

好ましくは、Ｒ_１はＨであって、Ｒ_２はＣＯＯＨまたはＣＯＯ（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、特にＣＯＯＨまたはＣＯＯＭｅである。

第１の好ましい実施態様によれば、Ｒ_１はＨであって、Ｒ_２はＣＯＯＨである。

第２の好ましい実施態様によれば、Ｒ_１はＨであって、Ｒ_２はＣＯＯＭｅである。

Ｒ_３は、特に、Ｈまたはメチル基、有利にはメチル基を表す。

Ｒ_４は、有利には、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０から選択される、特にＮＲ_９Ｒ_１０である１個の基で置換されたアリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基、特にアリール−（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル基、例えばアリール−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキル基を表す。

Ｒ_４は、有利には、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０から選択される、特にＮＲ_９Ｒ_１０である１つの基でアリール部分において置換されたアリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基、特に、アリール−（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル基、例えば、アリール−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキル基を表す。

アリール基は、有利にはフェニル基である。

よって、Ｒ_４は、特に、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０から選択される、特にＮＲ_９Ｒ_１０である１つの基で（好ましくは、フェニル部分上で）置換されたフェニル−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキルを表し得る。

よって、Ｒ_４は、下式：

を持つことができ、式中、Ｘ_０は、ＯＨまたはＮＲ_９Ｒ_１０、特に、ＮＲ_９Ｒ_１０を表し、ｍは、１〜８の間、特に１〜４の間を含む、有利には１または２である整数を表す。

好ましい実施態様によれば、Ｒ_４は、下式：

を有し、ここで、Ｘ_０およびｍは従前に定義される通りであり、特に、Ｘ_０＝ＮＲ_９Ｒ_１０およびｍ＝１または２である。

Ｒ_４は、特に、

から選択され得る。

有利には、式（Ｉ）の化合物は、以下の実施例に記載される化合物１１〜１５、１９〜２０、２３〜２４、２７〜２９、４９〜５１および６１〜６４から選択される。

本発明のさらなる主題は、特に、癌または良性増殖性障害の治療または予防のために、医薬品として使用される、上記で定義されるものなどの式（Ｉ）の化合物である。

本発明はまた、特に、癌または良性増殖性障害の治療または予防を意図した医薬品を製造するための、上記で定義されるものなどの式（Ｉ）の化合物の使用に関する。

本発明はまた、癌または良性増殖性障害を治療または予防するための方法であって、それを必要とするヒトに有効量の上記で定義されるものなどの式（Ｉ）の化合物を投与することを含んでなる方法に関する。

治療または予防される癌は、より詳しくは、肺、膵臓、皮膚、頭部、頸部、子宮、卵巣、肛門、胃、結腸、乳房、食道、小腸、甲状腺、リンパ系、前立腺、腎臓、もしくは膀胱の癌、または急性もしくは慢性白血病、またはこれらの癌の２以上の組合せである。

良性増殖性障害は、転移を生じることができない、または癌にまだ進行していない（前癌腫瘍）増殖性障害を意味する。

本発明のさらなる主題は、上記で定義されるものなどの式（Ｉ）の化合物と少なくとも１種類の薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物である。

有効成分は、従来の医薬担体との混合物として単位投与形で動物またはヒトに投与することができる。好適な単位投与形は、経口経路による形態、舌下または口内投与用の形態、非経口経路による（皮下、皮内、筋肉内または静脈内）投与用の形態、局所投与（皮膚および粘膜、鼻腔内および眼内投与を含む）用の形態、および直腸投与用の形態を含んでなる。

このような組成物は、固体、液体、エマルション、ローションまたはクリームの形態であり得る。

経口投与用の固体組成物としては、錠剤、丸剤、散剤（ゼラチン硬カプセル剤または軟カプセル剤）または顆粒剤が使用可能である。これらの組成物では、本発明の有効成分を、アルゴン流中でデンプン、セルロース、スクロース、ラクトースまたはシリカなどの１種類以上の不活性希釈剤と混合する。これらの組成物はまた、希釈剤以外の物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムまたはタルクなどの１種類以上の滑沢剤、着色剤、コーティング（コーティング錠）またはワニスも含んでなり得る。

経口投与用の液体組成物としては、薬学的に許容可能であり、かつ、水、エタノール、グリセロール、植物油またはパラフィン油などの不活性希釈剤を含有する溶液、懸濁液、エマルション、シロップおよびエリキシル剤が使用可能である。これらの組成物は、希釈剤以外の物質、例えば、湿潤剤、甘味剤、増粘剤、香味剤または安定剤を含んでなり得る。

非経口投与用の無菌組成物は、好ましくは、水性または非水性溶液、懸濁液またはエマルションであり得る。溶媒またはビヒクルとしては、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特に、オリーブ油、注射可能な有機エステル、例えば、オレイン酸エチルまたは他の好適な有機溶媒が使用可能である。これらの組成物はまた、アジュバント、特に、湿潤剤、等張化剤、乳化剤、分散剤および安定剤も含有し得る。滅菌は、いくつかの様式で、例えば、除菌濾過、組成物中への殺菌剤の配合、放射線または加熱によって行うことができる。それらはまた、使用時に無菌水または他の任意の注射可能な無菌媒体に溶かすことができる固体無菌組成物の形態で調製することもできる。

直腸投与用組成物は、有効成分に加えて、カカオ脂、半合成グリセリドまたはポリエチレングリコールなどの賦形剤を含有する坐剤または直腸カプセルである。

局所投与用組成物は、例えば、クリーム、ローション、点眼剤、口内洗浄剤、点鼻剤またはスプレーであり得る。

用量は、所望の効果、処置の長さおよび使用する投与経路によって異なる。一般に、医師ならば、年齢、体重および処置される対象者に特定の他のあらゆる因子に関して好適な用量を決定することができる。

別の有効成分も、本発明による医薬組成物中に含有してよい。特に、それは抗癌薬、特に、ナベルビン、ビンフルニン、タキソール、タキソテール、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドキソルビシン(doxorabicin)、カンプトテシン、ゲムシタビン(gemcitabin)、エトポシド、シスプラチンもしくはカルムスチン（ＢＣＮＵとも呼ばれる）などの細胞傷害性抗癌薬、またはタモキシフェンもしくはメドロキシプロゲステロンなどのホルモン抗癌薬であり得る。

放射線処置（Ｘ線またはγ線）も本発明の化合物の投与と組み合わせることができる。このような放射線は、外部源を用いて、または微量内部放射線源を移植することにより投与することができる。

本発明はまた、以下の合成スキームに記載されている一般法を用い、必要な場合には、文献に記載されているもしくは当業者に周知の、または本明細書の実験の部の例に記載されている任意の標準的操作を場合によっては補う、本発明による式（Ｉ）の化合物の製法に関する。

スキーム１は、式（Ｉ）の化合物を製造するために使用することのできる第１の一般法を示す。上記一般式では、Ｒ_１、Ｒ_２、およびＲ_３はそれぞれ従前に定義されているものなどであり、Ｒ_４ａは、場合により保護形態の、従前に定義されているものなどのＲ_４基を表し、Ｇは保護基である。

第１工程は、そのアミン官能基において保護基Ｇで保護された化合物（ＩＩ）と化合物（ＩＩＩ）との縮合からなる。Ｘは、塩素などの脱離基を表し得る。この場合、第１工程は、酸塩化物とアミンの間の反応からなる。この反応は、当業者に周知の方法および技術を用いて行うことができる。１つの特に価値が認められる方法では、これらの２つの実体を、特に−２０℃〜１００℃の温度でＴＨＦ、ジクロロメタン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなどの溶媒中、有機または無機塩基、例えば、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ピリジン、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３、Ｋ_２ＣＯ_３の存在下で反応させる。Ｘはまたヒドロキシル（ＯＨ）であってもよい。この場合、第１工程は、カルボン酸（ＩＩ）とアミン（ＩＩＩ）の間の縮合反応である。この反応は、当業者に周知の方法および技術に従って行うことができる。１つの特に価値が認められる方法では、これら２つの実体を、特に−１５℃〜４０℃の間の温度で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）、３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オンなどのカップリング剤、ジイソプロピルエチルアミンなどの第三級アミンの存在下で反応させる。別の特に価値が認められる方法では、これらの２つの実体を、−１５℃〜４０℃の間の温度で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、ジエチルリン酸シアニド（ＤＥＰＣ）、第三級アミン、例えばトリエチルアミンの存在下で反応させる。別の特に価値が認められる方法は、これら２つの実体を、−１５℃〜１００℃の間の温度で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、第三級アミン、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下で反応させることからなる。

当業者に周知の技術(《 Protective Groups in Organic Synthesis 》, T.W. Greene, John Wiley & Sons, 2006 and 《 Protecting Groups 》, P.J. Kocienski, Thieme Verlag, 1994)を用いた中間体の脱保護後、上記の方法および技術に従って、化合物（ＩＶ）を化合物（Ｖ）と縮合させて、脱保護工程後に化合物（ＶＩ）を得ることができる。次に、この化合物は、中間体（ＶＩＩ）との縮合および任意選択の脱保護の後に、式（Ｉ）の化合物の形成に至る。化合物（ＶＩ）は、Ｒ’_３がＲ_３の前駆体、特に、保護基によって保護されたＲ_３基である化合物（ＶＩＩ’）とカップリングさせることもできる。カプリングとその後の基Ｒ’_３の脱保護によるＲ_３への到達は、従前に記載したものと同じ手順に従って行うことができる。

スキーム２は、式（Ｉ）の化合物を製造するために使用することのできる第２の一般法を示す。上記の一般式では、Ｒ_１、Ｒ_２、およびＲ_３は従前に定義されているものなどであり、Ｒ_４ａは、場合により保護形態の、従前に定義されているものなどのＲ_４基を表し、Ｒ_４ｂはＲ_４基の前駆体であり、Ｇは保護基である。

第１工程において、そのアミン官能基において保護基Ｇで保護された化合物（ＩＸ）を化合物（ＶＩ）と縮合させる。Ｘは、脱離基、例えば塩素を表し得る。この場合、第１工程は、酸塩化物とアミンの間の反応からなる。この反応は、当業者に周知の方法および技術を用いて行うことができる。１つの特に価値が認められる方法では、これら２つの実体を、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、ＴＨＦ、ジクロロメタン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなどの溶媒中、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ピリジン、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３、Ｋ_２ＣＯ_３などの有機または無機塩基の存在下で反応させる。Ｘはヒドロキシルも表し得る。この場合、第１工程はカルボン酸（ＩＸ）とアミン（ＶＩ）の間の縮合反応である。この反応は、当業者に周知の方法および技術に従って行うことができる。１つの特に価値が認められる方法では、これらの２つの実体を、特に−１５℃〜４０℃の温度で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）、３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン、第三級アミン、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下で反応させる。別の特に価値が認められる方法では、これらの２つの実体を、特に−１５℃〜４０℃の間の温度で、ジクロロメタンまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒中、ジエチルリン酸シアニド（ＤＥＰＣ）、第三級アミン、例えばトリエチルアミンの存在下で反応させる。

中間体の脱保護後、当業者に周知の技術を用い、得られた化合物（ＶＩＩＩ）から、Ｒ_４Ｙとの反応後に式（Ｉ）の化合物に至らせることができる。この場合、Ｙは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ_２ＣＨ_３、ＯＳＯ_２ＣＦ_３またはＯ−トシルなどの脱離基である。この反応は、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなどの極性無水溶媒中、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３、Ｋ_２ＣＯ_３などの有機または無機塩基の存在下で行う。別の特に価値が認められる方法では、化合物（ＶＩＩＩ）を、Ｒ_４ｂがＲ_４の前駆体に相当する式Ｒ_４ｂ−ＣＨＯのアルデヒドと反応させる。この場合、この反応は、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、酢酸などの酸の添加によって制御され得るｐＨにおいて、任意選択のチタンイソプロポキシド（ＩＶ）の存在下、１，２−ジクロロエタン、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨなどの極性溶媒中、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＨ_３ＣＮ、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３などの還元剤の存在下での還元的アミノ化である。

上述の合成スキームでは、式（Ｉ）の化合物は、例えば、エステル、好ましくはメチルエステルを表すＲ_２基がカルボン酸を表すＲ_２基へ変更される、当業者に周知の方法を用いる鹸化などの付加的反応の後に、式（Ｉ）の別の化合物に至り得る。

酸付加塩の状態で少なくとも１つの塩基官能基を含有する式（Ｉ）の化合物を単離することが望まれる場合には、これは式（Ｉ）の化合物（少なくとも１つの塩基官能基を含有する）の遊離塩基を好適な酸で、好ましくは等量で処理することにより可能である。この好適な酸は、特にトリフルオロ酢酸であり得る。

よって、本発明のさらなる主題は、下式（ＶＩ）の化合物：

（式中、Ｒ_１およびＲ_２は従前に記載されているものなどである）
と下式（ＶＩＩ）の化合物：

（式中、Ｒ_３は従前に記載されているものなどであり、Ｒ_４ａは、場合により保護形態の、従前に定義されているものなどのＲ_４基に相当し、ＸはＯＨまたはＣｌである）
の間の縮合反応を含んでなる、式（Ｉ）の化合物を製造するための第１の方法である。

Ｘ＝ＯＨである場合、このカップリング反応は、当業者に周知のペプチドカップリング条件下で行うことができる。

前記ペプチドカップリングは、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（ｌＨ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｏ−（７−アゾベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、ジエチルリン酸シアニド（ＤＥＰＣ）または（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロロジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(tripyrrolodinophosphonium)（ＰｙＢＯＰ）などのカップリング剤の存在下、場合により、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアゾール（ＨＯＯＢｔ）、ｌ−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＡｔ）、Ｎ−ヒドロキシシルホスクシンイミド(N-hydroxysylfosuccinimide)（スルホＮＨＳ）またはジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などのカップリング補助剤と組み合わせて行うことができる。好ましくは、カップリング剤はＨＡＴＵまたはＤＥＰＣである。

この反応はまた、ＤＩＥＡ（ジイソプロピルエチルアミン）などの塩基の存在下で行うことができる。

特に、ペプチドカップリングは、ＨＡＴＵまたはＤＥＰＣおよびＤＩＥＡの存在下で行う。

前記反応は、特に−１５℃〜４０℃の間の温度で、ジクロロメタン（ＤＣＭ）またはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの極性非プロトン性溶媒中で行うことができる。

Ｘ＝Ｃｌである場合、縮合反応は、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ピリジン、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３、またはＫ_２ＣＯ_３などの、有機または無機であり得る塩基の存在下で行われる。

この反応は、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの溶媒中で行うことができる。

式（ＶＩ）および（ＶＩＩ）の化合物は、以下の実験の部に記載の合成プロトコールに従って、または当業者に公知の技術に従って、製造することができる。

本発明のさらなる主題は、下式（ＶＩＩＩ）の化合物：

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は従前に定義されているものなどである）
と下式（Ｘ）の化合物：
Ｒ_４ａ−Ｙ （Ｘ）
（式中、Ｒ_４ａは、場合により保護形態の、従前に定義されているものなどのＲ_４基であり、Ｙは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ_２ＣＨ_３、ＯＳＯ_２ＣＦ_３またはＯ−トシルなどの脱離基である）
の間の置換反応を含んでなる、式（Ｉ）の化合物を製造するための第２の方法である。

置換反応は、特に、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ＮａＨ、Ｃｓ_２ＣＯ_３、またはＫ_２ＣＯ_３などの、有機または無機であり得る塩基の存在下で行われる。

この反応は、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、ＤＣＭ、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＤＭＳＯなどの極性溶媒、好ましくは、無水溶媒で実施できる。

式（ＶＩＩＩ）および（Ｘ）の化合物は、以下の実験の部に記載の合成プロトコールに従い、または当業者に公知の技術を用いて製造することができる。

本発明のさらなる主題は、Ｒ_４が−ＣＨ_２Ｒ_４ｂ基であり、ここで、Ｒ_４ｂはＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される１以上の基（特に、１つ、好ましくは、アリール部分上）で置換されたアリールまたはアリール−（Ｃ_１−Ｃ_７）アルキル基を表す、式（Ｉ）の化合物を製造するための第３の方法であって、下式（ＶＩＩＩ）の化合物：

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は従前に定義されているものなどである）
と下式（ＸＩ）の化合物：
Ｒ_４ｂ−ＣＨＯ （ＸＩ）
（式中、Ｒ_４ｂは上記で定義されるものなどである）
の間の還元的アミノ化反応を含んでなる方法である。

この還元的アミノ化反応は、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＨ_３ＣＮまたはＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３などの還元剤および場合によりチタンイソプロポキシド（ＩＶ）の存在下で行うことができる。

ｐＨは、酢酸などの酸を添加することにより、特に４〜５の間のｐＨとするように制御することができる。

この反応は、特に−２０℃〜１００℃の間の温度で、ＤＣＥ（１，２−ジクロロエタン）、ＤＣＭ、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはメタノールなどの極性溶媒中で実施することができる。

式（ＶＩＩＩ）および（ＸＩ）の化合物は、以下の実験の部に記載のまたは当業者に公知の技術を用いた以下の合成プロトコールに従って製造することができる。

上記の３つの方法のうちの１つの縮合／置換／還元的アミノ化工程の後に得られる化合物に対して、特に置換基Ｒ_２およびＲ_４に関する付加的な脱保護工程、および場合により当業者に周知の方法を用いた付加的な官能基化工程を行うことができる。

Ｒ_２がＣＯＯＨ基を表す場合、上述の縮合／置換／還元的アミノ化工程は、Ｒ_２基がＣＯＯ−（（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル）エステル官能基を表す式（ＶＩ）の化合物から行うことができ、このエステル官能基は鹸化されて、Ｒ_２＝ＣＯＯＨの式（Ｉ）の化合物を得ることができる。

Ｒ_４基がＮＨ官能基を含んでなる場合、これは窒素原子をＢｏｃまたはＦｍｏｃ基などのＮ−保護基で置換することによって、縮合／置換／還元的アミノ化反応を行う前に保護することができる。

本発明における「保護基」は、化学合成においてそれと慣例的に関連付けられる意味において多官能性化合物においてある反応性部位を選択的に遮断して、化学反応が別の非保護反応性部位において選択的に起こり得るようにする基を意味する。

本発明において「Ｎ−保護基」とは、Greene, 《 Protective Groups In Organic synthesis 》, (John Wiley & Sons, New York (1981))およびHarrison et al. 《 Compendium of Synthetic Organic Methods 》, Vols. 1 to 8 (J. Wiley & sons, 1971 to 1996)に記載のＮ−保護基などの、望まない反応からＮＨ基を保護する任意の置換基を意味する。Ｎ−保護基は、カルバメート、アミド、Ｎ−アルキル化誘導体、アミノアセタール誘導体、Ｎ−ベンジル誘導体、イミン誘導体、エナミン誘導体およびＮ−ヘテロ原子誘導体を含んでなる。Ｎ−保護基は、ホルミル；ｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）などの１または数個のメトキシ基で置換されていてもよい、フェニルなどのアリール；ベンジルなどのアリール−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、このアリール部分は、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）または３，４−ジメトキシベンジル（ＤＭＰＭ）などの１または数個のメトキシ基で置換されていてもよい；アセチル（Ａｃ）、ピバロイル（ＰｉｖまたはＰｖ）、ベンゾイル（Ｂｚ）またはｐ−メトキシベンジルカルボニル（Ｍｏｚ）などの−ＣＯ−Ｒ_ＧＰ１；ｔブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、トリクロロエトキシカルボニル（ＴＲＯＣ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣｂｚまたはＺ）または９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）などの−ＣＯ_２−Ｒ_ＧＰ１；フェニルスルホニル、トシル（ＴｓまたはＴｏｓ）または２−ニトロベンゼンスルホニル（ノシル−ＮｏｓまたはＮｓとも呼ばれる）などの−ＳＯ_２−Ｒ_ＧＰ１などであり得、
ここで、Ｒ_ＧＰ１は、ＦまたはＣｌなどの１または数個のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル；アリルなどの（Ｃ_２−Ｃ_６）アルケニル；ＯＭｅ（メトキシ）およびＮＯ_２（ニトロ）から選択される１または数個の基で置換されていてもよい、フェニルなどのアリール；アリール部分が１または数個のメトキシ基で置換されていてもよい、ベンジルなどのアリール−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル；または９−フルオレニルメチル基を表す。

特に、Ｎ−保護基は、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、フェニルスルホニル、ベンジル（Ｂｎ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジル−オキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル（ＴＲＯＣ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、トリフルオロ−アセチル、カルバミン酸ベンジル（置換または非置換）および同様のものを含んでなる。それは特にＢｏｃまたはＦｍｏｃ基であり得る。

ＮＨアミン官能基のＢｏｃまたはＦｍｏｃ基による保護、および縮合／置換／還元的アミノ化反応後の、続いてのその脱保護は当業者に周知であり、特に以下の実験の部に記載されている。

上述の３つの方法のうちの１つで得られる式（Ｉ）の化合物はまた、薬学的に許容可能な塩基または酸、特にトリフルオロ酢酸などの薬学的に許容可能な酸を加えることによって塩化することもできる。前記工程は、別の反応工程と同時に、特に、これを例えば酸媒体中で行わなければならない場合に脱保護工程と同時に行ってもよい。

これらの３つの方法のうち１つで得られる化合物は、場合により、脱保護、官能基化および／または塩化のための１または複数の付加的工程の後、抽出、溶媒蒸発または沈澱および濾過によるなどの当業者に周知の方法を用いて反応媒体から分離することができる。

本化合物はまた、必要であれば、当業者に周知の技術を用いて、例えば、化合物が結晶性である場合には再結晶化により、蒸留、シリカゲルカラムクロマトグラフィーまたは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により精製することができる。

以下の例は本発明を説明するものであって、その範囲を限定するものではない。

実施例
Ｉ−本発明の化合物の合成
下記の略語を下記の実施例で使用する。
ａｑ． 水性
ｅｅ 鏡像体過剰率
ｅｑｕｉｖ 当量
ＥＳＩ エレクトロスプレーイオン化
ＬＣ／ＭＳ 質量分析と連結した液体クロマトグラフィー
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ｓａｔ． 飽和
ＵＶ 紫外線

参照例１
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノプロピル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド，ビストリフルオロ酢酸

実施例１Ａ：（４Ｒ，５Ｓ）−４−メチル−５−フェニル−３−プロパノイル−１，３−オキサゾリジン−２−オン

（４Ｒ，５Ｓ）−４−メチル−５−フェニル−１，３−オキサゾリジン−２−オン（５．８ｇ、３２．７ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でテトラヒドロフラン（ＴＨＦ、１２０ｍＬ）に溶かした。この混合物を−７８℃まで冷却し、ｎ−ブチルリチウム（１４．４ｍＬ）を滴下した。−７８℃で３０分間撹拌した後、塩化プロパノイル（５．７ｍＬ）を加えた。撹拌を−７８℃で３０分間、次いで、周囲温度で一晩続けた。この反応混合物を濃縮した後、２００ｍＬの水に再溶解させた。溶液のｐＨを、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で７に調整した。この水相を１００ｍＬの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、６．８ｇ（８９％）の化合物１Ａを黄色油状物の形態で獲た。

実施例１Ｂ：（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチル−３−［（４Ｒ，５Ｓ）−４−メチル−２−オキソ−５−フェニル−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ａ（１７．６ｇ、７５．４５ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でジクロロメタン（ＤＣＭ、２８６ｍＬ）に溶かした。この溶液を氷浴で冷却した。反応混合物の温度を２℃未満に保持しつつ、トリエチルアミン（ＴＥＡ、１２．１ｍＬ、１．１５当量）およびＢｕ_２ＢＯＴｆ（７８．３ｍＬ、１．０４当量）を滴下した。撹拌を０℃で４５分間続け、その後、反応物を−７８℃まで冷却した。ＤＣＭ（４２ｍＬ）中、（２Ｓ）−２−ホルミルピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８．５ｇ、４２．６６ｍｍｏｌ、０．５７当量）の溶液を滴下した。撹拌を−７８℃で２時間、次いで、０℃で１時間、最後に、周囲温度で１時間続けた。この反応物を７２ｍＬのリン酸バッファー（ｐＨ＝７．２〜７．４）および２１４ｍＬのメタノールで中和し、０℃まで冷却した。温度を１０℃未満に維持しつつ、メタノール中３０％の過酸化水素溶液（２５７ｍＬ）を滴下した。撹拌を０℃で１時間続けた。この反応物を１４２ｍＬの水で中和した後、減圧下で濃縮した。得られた水溶液を２００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃと石油エーテル（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ＝１：８）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１３．１６ｇ（４０％）の化合物１Ｂを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｃ：（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（２Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］ピロリジン−２−イル］−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸

化合物１Ｂ（１３．１６ｇ、３０．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）を過酸化水素（水中３０％、１５．７ｍＬ）の存在下でＴＨＦ（４６０ｍＬ）に溶かした後、氷浴で冷却した。反応温度を４℃未満に保持しつつ、水酸化リチウム水溶液（０．４ｍｏｌ／Ｌ、１５２．１ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を０℃で２．５時間撹拌した。温度を０℃に保持しつつ、Ｎａ_２ＳＯ_３水溶液（１ｍｏｌ／Ｌ、１６７．３ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を周囲温度で１４時間撹拌した後、１５０ｍＬの冷重炭酸ナトリウム飽和溶液で中和し、５０ｍＬのＤＣＭで３回洗浄した。この水溶液のｐＨを、ＫＨＳＯ_４の１Ｍ水溶液で２〜３に調整した。この水溶液を１００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、７．３１ｇ（８８％）の化合物１Ｃを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｄ：（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（２Ｓ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］ピロリジン−２−イル］−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸

化合物１Ｃ（７．３１ｇ、２６．７４ｍｍｏｌ、１．００当量）を、不活性雰囲気中、ヨードメタン（２５．３ｍＬ）の存在下でＴＨＦ（１３５ｍＬ）に溶かした。この反応媒体を氷浴で冷却し、その後、ＮａＨ（油中６０％、４．２８ｇ）を少量ずつ加えた。この反応物を０℃、撹拌下で３日置いた後、１００ｍＬの重炭酸ナトリウム飽和水溶液で中和し、５０ｍＬのエーテルで３回洗浄した。この水溶液のｐＨを１Ｍ ＫＨＳＯ_４水溶液で３に調整した。この水溶液を１００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、１００ｍＬのＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３（水中５％）で１回、ＮａＣｌ飽和溶液で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、５．５ｇ（７２％）の化合物１Ｄを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｅ：Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−フェニルアセトアミド

２−フェニル酢酸（１６．２ｇ、１１８．９９ｍｍｏｌ、１．００当量）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、１３０ｍＬ）に溶かした後、−１０℃まで冷却した。ジエチルリン酸シアニド（ＤＥＰＣ、１９．２ｍＬ）、塩酸メトキシ（メチル）アミン（１２．９２ｇ、１３３．２０ｍｍｏｌ、１．１２当量）およびトリエチルアミン（３３．６ｍＬ）を加えた。この反応混合物を−１０℃で３０分間、次いで、周囲温度で２．５時間撹拌した。次に、これを１リットルのＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相を合わせ、５００ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で２回、４００ｍＬの水で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００から１：３）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２０．２ｇ（９５％）の化合物１Ｅを黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｆ：２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エタン−１−オン

テトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ、２７．２ｍＬ）を不活性雰囲気中でＴＨＦ（３００ｍＬ）に溶かした後、−７８℃まで冷却し、その後、ｎ−ＢｕＬｉ（６７．６ｍＬ、２．５Ｍ）を滴下した。２−ブロモ−１，３−チアゾール（１５．２ｍＬ）を滴下し、撹拌を−７８℃で３０分間続けた。ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かした化合物１Ｅ（２５ｇ、１３９．５０ｍｍｏｌ、１．００当量）を滴下した。撹拌を−７８℃で３０分間、次いで、−１０℃で２時間続けた。この反応物を５００ｍＬのＫＨＳＯ_４（飽和）で中和した後、１リットルのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、４００ｍＬの水で２回、および７００ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で２回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００から１：１０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２５ｇ（８８％）の化合物１Ｆを黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｇ：（１Ｒ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エタン−１−オール

不活性雰囲気中で、エーテル（３００ｍＬ）中、化合物１Ｆ（１５ｇ、７３．８ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液を（＋）−Ｂ−クロロジイソピノカンフェイルボラン（（＋）−Ｉｐｃ_２ＢＣｌ、１１０．８ｍＬ）に滴下した。この反応混合物を０℃で２４時間撹拌した後、ＮａＯＨ（水中１０％）とＨ_２Ｏ_２（水中３０％）の（１：１）混合物３００ｍＬで中和し、最後に５００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、３００ｍＬのＫ_２ＣＯ_３（飽和）で２回および５００ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃとＰＥ（１：２０から１：２）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、６．３ｇ（４２％）の化合物１Ｇを白色固体の形態で得た。

実施例１Ｈ：２−［（１Ｓ）−１−アジド−２−フェニルエチル］−１，３−チアゾール

化合物１Ｇ（６ｇ、２９．２３ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、トリフェニルホスフィン（１３ｇ、４９．５６ｍｍｏｌ、１．７０当量）の存在下でＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶かした後、０℃まで冷却した。アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ、７．６ｍＬ）次いで、アジ化ジフェニルホスホリル（ＤＰＰＡ、１１ｍＬ）を滴下し、その後、冷却浴を外し、この溶液を周囲温度、撹拌下で４８時間置いた。媒体を減圧下で濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００から１：３０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、８ｇの部分精製化合物１Ｈを黄色油状物の形態で得た。化合物１Ｈをそのまま次の工程で使用した。

実施例１Ｉ：Ｎ−［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｈ（６．５ｇ、２８．２ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、トリフェニルホスフィン（６．５ｇ、３３．９ｍｍｏｌ、１．２０当量）の存在下でＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かし、２時間５０℃に加熱した。次に、アンモニア（７０ｍＬ）を加え、加熱を３時間続けた。この反応物を冷却し、５００ｍＬの水で中和した後、５００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、で５００ｍＬの１Ｎ ＨＣｌで２回抽出した。水相を合わせ、水酸化ナトリウム溶液（水中１０％）を加えることによりｐＨ８〜９とした後、５００ｍＬのＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、４．８ｇ（８３％）の（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エタン−１−アミンを黄色油状物の形態で得た。次に、この化合物を、それが精製可能となるように、Ｂｏｃ基（（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル）で保護した。これを不活性雰囲気中で１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）に溶かした後、０℃まで冷却した。２０ｍＬの１，４−ジオキサン中に希釈した（Ｂｏｃ）_２Ｏ（１０．２６ｇ、４７．０１ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下した。冷却浴を外し、この溶液を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、３００ｍＬの水で中和し、５００ｍＬのＥｔＯＡで２回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃおよびＰＥ（１：１００から１：２０、ｅｅ＝９３％）の混合物を用いるシリカカラムで精製した。次に、これをヘキサン／アセトン混合物（約５〜１０／１、１ｇ／１０ｍＬ）中で再結晶化し、６ｇ（８４％）の化合物１Ｉを白色固体の形態で得た（ｅｅ＞９９％）。

実施例１Ｊ：（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−２−［［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバモイル］エチル］ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｉ（３ｇ、９．８６ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中で１０ｍＬのＤＣＭに溶かした。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１０ｍＬ）を加え、この溶液を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮し、２．０ｇ（６４％）の（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エタン−１−アミン；トリフルオロ酢酸を黄色油状物の形態で得た。この中間体を２０ｍＬのＤＣＭに再溶解させ、その後、化合物１Ｄ（１．８ｇ、６．２６ｍｍｏｌ、１．０５当量）、ＤＥＰＣ（１．１ｇ、６．７５ｍｍｏｌ、１．１３当量）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、１．６４ｇ、１２．７１ｍｍｏｌ、２．１３当量）を加えた。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００から１：３）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２．３ｇ（８１％）の化合物１Ｊを淡黄色固体の形態で得た。

実施例１Ｋ：（２Ｒ，３Ｒ）−３−メトキシ−２−メチル−Ｎ−［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］−３−［（２Ｓ）−ピロリジン−２−イル］プロパンアミド；トリフルオロ酢酸

化合物１Ｊ（２．２５ｇ、４．７５ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中で１０ｍＬのＤＣＭに溶かした。ＴＦＡ（１０ｍＬ）を加え、この溶液を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮し、２．１８ｇ（９４％）の化合物１Ｋを黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｌ：（２Ｓ，３Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−３−メチルペンタン酸

２Ｎ水酸化ナトリウム溶液（３７５ｍＬ）に、（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチルペンタン酸（９８．４ｇ、７５０ｍｍｏｌ、１．００当量）を周囲温度で少量ずつ加えた。ベンズアルデヒド（７９．７ｇ、７５１．０２ｍｍｏｌ、１．００当量）を素早く加え、得られた溶液を３０分撹拌した。温度を５〜１５℃の間に保持しつつ、水素化ホウ素ナトリウム（１０．９ｇ、２８８．１７ｍｍｏｌ、０．３８当量）を少量ずつ加えた。撹拌を周囲温度で４時間続けた。この反応混合物を２００ｍＬの水で希釈した後、２００ｍＬのＥｔＯＡｃで２回洗浄した。この水溶液のｐＨを２Ｎ塩酸溶液で７に調整した。生じた沈澱を濾取し、１４９．２ｇ（９０％）の化合物１Ｌを白色固体の形態で得た。

実施例１Ｍ：（２Ｓ，３Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−３−メチルペンタン酸

化合物１Ｌ（２５ｇ、１１２．９７ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、ホルムアルデヒド（水中３６．５％、２２．３ｇ）の存在下でギ酸（３１．２ｇ）に溶かした。この溶液を９０℃で３時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を２５０ｍＬのアセトン中で摩砕した後、濃縮した。５００ｍＬのアセトンを用いてこの摩砕／蒸発操作を２回繰り返し、２１．６ｇ（８１％）の化合物１Ｍを白色固体の形態で得た。

実施例１Ｎ：（２Ｓ，３Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−３−メチルペンタン−１−オール

ＬｉＡｌＨ_４（０．３６ｇ）を０℃、不活性雰囲気中で１０ｍＬのＴＨＦに懸濁させた。温度を０〜１０℃の間に保持しつつ、化合物１Ｍ（１．５ｇ、６．３７ｍｍｏｌ、１．００当量）を少量ずつ加えた。この反応混合物を６５℃で２時間撹拌した後、再び０℃まで冷却し、その後、３６０μＬの水、１ｍＬの１５％水酸化ナトリウムおよび３６０μＬの水を順次加えて中和した。沈澱したアルミニウム塩を濾去した。濾液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：５０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、８２０ｍｇ（５８％）の化合物１Ｎを淡黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｏ：（２Ｓ，３Ｓ）−２−［ベンジル（メチル）アミノ］−３−メチルペンタナール

塩化オキサリル（０．４ｍＬ）を不活性雰囲気中でＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶かした。この溶液を−７０℃まで冷却し、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）の溶液を１５分間で滴下した。この反応混合物を３０分撹拌し、その後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、化合物１Ｎ（８２０ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液を１５分間で滴下した。この反応混合物を低温で３０分撹拌した後、トリエチルアミン（２．５ｍＬ）をゆっくり加えた。この反応混合物を−５０℃で１時間撹拌した後、冷却浴を外し、この反応物を、常温に戻しつつ、２５ｍＬの水で中和した。この溶液を３０ｍＬのＮａＣｌ飽和水溶液で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：２００）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、０．４２ｇ（５２％）の化合物１Ｏを黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｐ：（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−ベンジル−１，１−ジメトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタン−２−アミン

化合物１Ｏ（４．７ｇ、２１．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）を０℃で２０ｍＬのメタノールに溶かした。濃硫酸（４．３ｍＬ）を滴下し、撹拌を０℃で３０分間続けた。オルトギ酸トリメチル（２１．４ｍＬ）を加え、冷却浴を外し、この反応媒体を周囲温度、撹拌下で３時間置いた。この反応媒体を２００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、１００ｍＬの１０％Ｎａ_２ＣＯ_３および２００ｍＬの飽和ＮａＣｌで順次洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、３．４ｇ（６０％）の化合物１Ｐを淡黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｑ：［［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）エテニル］オキシ］（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン

ジイソプロピルアミン（２０ｇ、１８６．７１ｍｍｏｌ、１．０８当量）を不活性雰囲気中で１７０ｍＬのＴＨＦに溶かし、−７８℃まで冷却した。ｎＢｕＬｉ（２．４Ｍ、７８．８ｍＬ）を滴下し、この溶液を低温で３０分撹拌し（ＬＤＡ−リチウムジイソプロピルアミドを得るため）、その後、酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（２０ｇ、１７２．１８ｍｍｏｌ、１．００当量）を加えた。この反応混合物を−７８℃で２０分撹拌し、その後、ヘキサメチルホスホルアミド（ＨＭＰＡ、２５．８ｍＬ）、および３５ｍＬのＴＨＦ中、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（ＴＢＤＭＳＣｌ、２８ｇ、１８５．８０ｍｍｏｌ、１．０８当量）の溶液を加えた。撹拌を低温でさらに２０分続けた後、冷却浴を外した。この溶液を減圧下で濃縮した。残渣を１００ｍＬの水に再溶解させ、１００ｍＬのＰＥで３回抽出した。有機相を合わせ、５００ｍＬのＮａＣｌ飽和水溶液で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を蒸留により精製し、１６．６ｇ（８３％）の化合物１Ｑを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｒ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［ベンジル（メチル）アミノ］−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｐ（２．０ｇ、７．５４ｍｍｏｌ、１．００当量）および化合物１Ｑ（２．６ｇ、１１．２８ｍｍｏｌ、１．５０当量）を不活性雰囲気中で３３ｍＬのＤＣＭに溶かした。この溶液を０℃まで冷却した。ＤＭＦ（１．２ｇ）を７．５ｍＬのＤＣＭ中、ＢＦ_３・Ｅｔ_２Ｏ（２．１ｇ）の溶液とともに滴下した。撹拌を０℃で２４時間続けた。この反応媒体を３０ｍＬの炭酸ナトリウム（１０％）で１回および５０ｍＬのＮａＣｌ飽和水溶液で２回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１．８２ｇ（９１％）の化合物１Ｒを黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｓ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）ヘプタン酸塩酸塩

化合物１Ｒ（２．４ｇ、６．８７ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、Ｐｄ／Ｃ（０．１２ｇ）および濃塩酸（０．６３ｍＬ）の存在下で３５ｍＬのエタノールに溶かした。窒素雰囲気を水素雰囲気に置き換え、この反応媒体を周囲温度、撹拌下で１８時間置いた。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を５０ｍＬのヘキサン中で摩砕し、上清を除去し、その後、減圧下で乾燥させ、１．６６ｇ（８２％）の化合物１Ｓを白色固体の形態で得た。

実施例１Ｔ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［（２Ｓ）−２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド］−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸ｔｅｒｔ−ブチル

（２Ｓ）−２−［［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ］−３−メチルブタン酸（１５ｇ、０．４０ｍｍｏｌ、１．００当量）をＤＩＥＡ（３８．３ｍＬ）およびブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒＯＰ、３２．３ｇ）の存在下で３００ｍＬのＤＣＭに溶かした。この溶液を周囲温度で３０分撹拌し、その後、化合物１Ｓ（１５．９９ｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１．０７当量）を加えた。この反応媒体を２時間撹拌した後、濃縮した。残渣をアセトニトリル（ＡＣＮ）と水（４０分で３０：７０から１００：０へ）の混合物を用いる逆相（Ｃ１８）で精製し、１７ｇ（５８％）の化合物１Ｔを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｕ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド］−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｔ（７６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、Ｐｄ／Ｃ（０．０５ｇ）の存在下で１０ｍＬのエタノールに溶かした。窒素雰囲気を水素雰囲気に置き換え、この反応物を周囲温度で２時間撹拌した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、６４ｍｇの化合物１Ｕを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｖ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［（２Ｓ）−２−［［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ］−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド］−３−メトキシ−５−メチルヘプタノエート

化合物１Ｕ（１８．１９ｇ、５０．７４ｍｍｏｌ、１．００当量）を重炭酸ナトリウム（１２．７８ｇ、１５２ｍｍｏｌ、３．００当量）およびクロロギ酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（Ｆｍｏｃ−Ｃｌ、１９．６９ｇ、７６ｍｍｏｌ、１．５０当量）の存在下で４００ｍＬの１，４−ジオキサン／水混合物（１：１）に溶かした後、周囲温度で２時間撹拌した。次に、この反応媒体を５００ｍＬの水で希釈し、２００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、２００ｍＬのＮａＣｌ飽和水溶液で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、４０ｇの部分精製化合物１Ｖを淡黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｗ：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［（２Ｓ）−２−［［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ］−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド］−３−メトキシ−５−メチルヘプタン酸

化合物１Ｖ（４０ｇ、６８．８８ｍｍｏｌ、１．００当量）を中性雰囲気中で６００ｍＬのＤＣＭに溶かした。ＴＦＡ（３００ｍＬ）を加えた。この溶液を周囲温度で２時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を、メタノールとＤＣＭ（１：１０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２３．６ｇ（６５％）の化合物１Ｗを無色の油状物の形態で得た。

実施例１Ｘ：Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−［（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−２−［［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバモイル］エチル］ピロリジン−１−イル］−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］（メチル）カルバモイル］−２−メチルプロピル］カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル

化合物１Ｗ（２．５３ｇ、４．８２ｍｍｏｌ、１．０８当量）を化合物１Ｋ（２．１８ｇ、４．４７ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＤＥＰＣ（８７５ｍｇ、５．３７ｍｍｏｌ、１．２０当量）およびＤＩＥＡ（１．２５ｇ、９．６７ｍｍｏｌ、２．１６当量）の存在下で２０ｍＬのＤＣＭに溶かした。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、５０ｍＬの飽和ＫＨＳＯ_４および１００ｍＬの水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、メタノールとＤＣＭ（１：２００から１：４０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２．８ｇ（７１％）の化合物１Ｘを淡黄色固体の形態で得た。

実施例１Ｙ：（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［（３Ｒ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−［（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−２−［［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバモイル］エチル］ピロリジン−１−イル］−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド

化合物１Ｘ（２．８ｇ、３．１８ｍｍｏｌ、１．００当量）をピペリジン（３ｍＬ）の存在下でアセトニトリル（ＡＣＮ、１２ｍＬ）に溶かし、周囲温度、撹拌下で１８時間置いた。この反応物を５０ｍＬの水で中和した後、１００ｍＬのＤＣＭで２回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、メタノールとＤＣＭ（１：１００から１：４０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１．２ｇ（５７％）の化合物１Ｙを黄色固体の形態で得た。

実施例１ＺＡ：（２Ｓ）−２−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸

（２Ｓ）−２−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ］−３−メチルブタン酸（６３ｇ、２８９．９７ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、ヨードメタン（１８１ｍＬ）の存在下でＴＨＦ（１０００ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却し、その後、水素化ナトリウム（１１６ｇ、４．８３ｍｏｌ、１６．６７当量）を少量ずつ加えた。この反応混合物を０℃で１．５時間撹拌し、その後、冷却浴を外し、撹拌を１８時間続けた。この反応を２００ｍＬの水で中和した後、減圧下で濃縮した。残った水相を４リットルの水で希釈し、２００ｍＬのＥｔＯＡｃで１回洗浄し、そのｐＨを１Ｎ塩酸溶液で３〜４の間に調整した。得られた混合物を１．２ＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、６０ｇ（８９％）の化合物１ＺＡを黄色油状物の形態で得た。

実施例１ＺＢ：（２Ｓ）−２−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物１ＺＡ（４７ｇ、２０３．２１ｍｍｏｌ、１．００当量）をＬｉ_２ＣＯ_３（１５．８ｇ、２１３．８３ｍｍｏｌ、１．０５当量）の存在下でＤＭＦ（６００ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、臭化ベンジル（ＢｎＢｒ ５７．９ｇ、３３８．５３ｍｍｏｌ、１．６７当量）を滴下した。この反応混合物を撹拌下で一晩置き、その後、４００ｍＬの水で中和し、濾過した。得られた溶液を５００ｍＬのＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００から１：２０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２２．５ｇ（３４％）の化合物１ＺＢを黄色油状物の形態で得た。

実施例１ＺＣ：（２Ｓ）−３−メチル−２−（メチルアミノ）ブタン酸ベンジル塩酸塩

化合物１ＺＢ（２２．５ｇ、７０．００ｍｍｏｌ、１．００当量）を１５０ｍＬのＤＣＭに溶かした。気体塩酸をバブリングした。この反応物を周囲温度で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮し、１７ｇ（９４％）の化合物１ＺＣを黄色固体の形態で得た。

実施例１ＺＤ：Ｎ−（３，３−ジエトキシプロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

３，３−ジエトキシプロパン−１−アミン（６ｇ、４０．７６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＥＡ（４．４５ｇ、４３．９８ｍｍｏｌ、１．０８当量）の存在下で１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）に溶かした後、０℃まで冷却した。２０ｍＬの１，４−ジオキサン中に希釈した（Ｂｏｃ）_２Ｏ（９．６ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ、１．０８当量）を滴下した。この溶液を０℃で２時間、次いで、周囲温度で一晩撹拌し、その後、１０ｍＬの水で中和した。ｐＨをＨＣｌ（１％）で５に調整した。この溶液を５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、８．２１ｇ（８１％）の化合物１ＺＤを淡黄色油状物の形態で得た。

実施例１Ｚ：Ｎ−（３−オキソプロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１ＺＤ（８．２０ｇ、３３．１５ｍｍｏｌ、１．００当量）を１８．７５ｍＬの酢酸に溶かし、周囲温度、撹拌下で一晩置いた。次に、この反応媒体を３０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、３０ｍＬの飽和ＮａＣｌ溶液で３回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、５ｇ（８７％）の化合物１ＺＥを暗赤色の油状物の形態で得た。

実施例１ＺＦ：（２Ｓ）−２−［（３−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ］プロピル）（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸

化合物１ＺＥ（２．４ｇ、１３．８６ｍｍｏｌ、１．００当量）を化合物１ＺＣ（３．５６ｇ、１３．８１ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＤＩＥＡ（９．１６ｍＬ、４．００当量）の存在下で５０ｍＬのＴＨＦに溶かした。この反応混合物を周囲温度で３０分撹拌し、その後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５．８７ｇ、２７．７０ｍｍｏｌ、２．００当量）を加えた。撹拌を一晩続けた後、この反応物を１００ｍＬの水で中和し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃとＰＥ（１：４）の混合物を用いるシリカカラムで部分精製した。得られた粗生成物をＰｄ／Ｃ（１．２ｇ）の存在下で２０ｍＬのメタノールに再溶解させ、常温および常圧で２０分間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、２００ｍｇ（５％）の化合物１ＺＦを白色固体の形態で得た。

実施例１ＺＧ：Ｎ−（３−［［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−１−［［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−［（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−２−［［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバモイル］チル(thyl)］ピロリジン−１−イル］−５−メチル−１−オキソヘプタン−４イル］（メチル） カルバモイル］−２−メチルプロピル］カルバモイル］−２−メチルプロピル］（メチル）アミノ］プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｙ（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、１．００当量）を化合物１ＺＦ（２６．２ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＥＡ（３７．７ｍＬ）およびＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、４３．３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．５０当量）の存在下で２ｍＬのＤＭＦに溶かした。この反応物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、１０ｍＬの水で希釈し、５ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、１００ｍｇの化合物１ＺＧを部分精製の無色油状物の形態で得た。

実施例１：化合物１ＺＧ（９０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）を中性雰囲気中で２ｍＬのＤＣＭに溶かし、この溶液を氷浴で冷却した。ＴＦＡ（１ｍＬ）を加え、この反応物を周囲温度で２時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％のＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；７分で１８％から３１％ＡＣＮへ、次いで、２分で３１％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１は２５％（２３ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｔ３カラム、３μｍ、４．６×１００ｍｍ；３５℃；１ｍＬ／分、水中３０％から６０％ＡＣＮ（６分で２０ｍＭ酢酸アンモニウム）；ESI (C₄₄H₇₃N₇O₆S, 精密質量827.53) m/z: 829 (MH⁺), 5.84分 (93.7 %, 254 nm)。

¹H NMR (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.85 - 7.80 (m, 1H); 7.69 - 7.66 (m, 1H), 7.40 - 7.10 (m, 5H), 5.80 - 5.63 (m, 1H), 4.80 - 4.65 (m, 2H), 4.22 -4.00 (m, 1H), 3.89 - 0.74 (m, 58H)。

参照例２
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（２−アミノピリジン−４−イル）メチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド，トリフルオロ酢酸

実施例２Ａ：（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｄ（２．５ｇ、８．７０ｍｍｏｌ、１．００当量）および（１Ｓ，２Ｒ）−２−アミノ−１−フェニルプロパン−１−オール（１．３１５ｇ、８．７０ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＤＭＦ（３５ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、ＤＥＰＣ（１．３９ｍＬ）およびＴＥＡ（１．８２ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間、次いで、周囲温度で４時間撹拌した。この反応混合物を２００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、５０ｍＬのＫＨＳＯ_４（１ｍｏｌ／Ｌ）で１回、５０ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で１回、５０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、３．６ｇ（９８％）の化合物２Ａを黄色固体の形態で得た。

実施例２Ｂ：２，２，２−トリフルオロ酢酸（２Ｒ，３Ｒ）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチル−３−（（Ｓ）−ピロリジン−２−イル）プロパンアミド

化合物２Ａ（２．７ｇ、６．４２ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＤＣＭ（４０ｍＬ）に溶かした後、０℃まで冷却した。ＴＦＡ（２５ｍＬ）を加え、この溶液を０℃で２時間撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、４．４ｇの化合物２Ｂを黄色油状物の形態で得た。

実施例２Ｃ：（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）（メチル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル

化合物２Ｂ（４．４ｇ、１０．１３ｍｍｏｌ、１．００当量）および１Ｗ（５．３１ｇ、１０．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＤＣＭ（４５ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、ＤＥＰＣ（１．６２ｍＬ）およびＤＩＥＡ（８．４ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間、次いで、周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を１００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、５０ｍＬのＫＨＳＯ_４（１ｍｏｌ／Ｌ）で１回、５０ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で１回、５０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、圧力下で(under pressure)濃縮し、３．３ｇ（３９％）の化合物２Ｃを黄色固体の形態で得た。

実施例２Ｄ：（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド

化合物２Ｃ（３００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＡＣＮ（２ｍＬ）およびピペリジン（０．５ｍＬ）に溶かした。この溶液を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で蒸発乾固した。残渣を、ＤＣＭとＭｅＯＨ（１：１００）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１５０ｍｇ（６８％）の化合物２Ｄを白色固体の形態で得た。

実施例２Ｅ：２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）イソニコチン酸メチル

２−アミノピリジン−４−カルボン酸メチル（２ｇ、１３．１４ｍｍｏｌ、１．００当量）をｔｅｒｔ−ブタノール（２０ｍＬ）に溶かし、その後、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４．０２ｇ、１８．４２ｍｍｏｌ、１．４０当量）を加えた。この反応混合物を６０℃で一晩撹拌した後、この反応を、１Ｍ ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）を添加することで停止させた。固体を濾取し、５０ｍＬのＥｔＯＨで洗浄した後、真空乾燥させ、２．５ｇ（７５％）の化合物２Ｅを白色固体の形態で得た。

実施例２Ｆ：（４−（ヒドロキシメチル）ピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物２Ｅ（２．５ｇ、９．９１ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＣａＣｌ_２（１．６５ｇ）をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、ＮａＢＨ_４（１．１３ｇ、２９．８７ｍｍｏｌ、３．０１当量）を徐々に加えた。この溶液を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、反応を、水（５０ｍＬ）を添加することで停止させた。この混合物を２０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、２０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で２回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、２．０ｇ（９０％）の化合物２Ｆを無色の固体の形態で得た。

実施例２Ｇ：（４−ホルミルピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物２Ｆ（２．５ｇ、１１．１５ｍｍｏｌ、１．００当量）をＤＣＥ（２５ｍＬ）に溶かした後、１９．４ｇ（２２３．１４ｍｍｏｌ、２０．０２当量）のＭｎＯ_２を加えた。この混合物を７０℃、撹拌下で一晩置いた後、固体を濾去した。濾液を蒸発乾固させ、１．４ｇ（５７％）の化合物２Ｇを白色固体の形態で得た。

実施例２Ｈ：（Ｓ）−２−（（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピリジン−４−イル）メチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物２Ｇ（２．３ｇ、１０．３５ｍｍｏｌ、１．００当量）を化合物１ＺＣ（２．９３ｇ、１１．３７ｍｍｏｌ、１．１０当量）、ＤＩＥＡ（５．３９ｇ、４１．７１ｍｍｏｌ、４．０３当量）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（４．３９ｇ、２０．７１ｍｍｏｌ、２．００当量）の存在下で２５ｍＬのＴＨＦに溶かした。この反応混合物を周囲温度で６時間撹拌した後、６０ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で中和し、２０ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した。有機相を合わせ、２０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１５）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２．７ｇ（６１％）の化合物２Ｈを白色固体の形態で得た。

実施例２Ｉ：（Ｓ）−２−（（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピリジン−４−イル）メチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸

化合物２Ｈ（５００ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、１．００当量）をＰｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）の存在下で１０ｍＬのＡｃＯＥｔおよび２ｍＬのメタノールに溶かし、周囲温度、大気圧下で３時間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、２５４ｍｇ（６４％）の化合物２Ｉを無色の固体の形態で得た。

実施例２Ｊ：（４−（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ）−９−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル）−１０−（２−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３，６−ジイソプロピル−２，８−ジメチル−４，７−ジオキソ−１１−オキサ−２，５，８−トリアザドデシル）ピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物２Ｊは、ＤＭＦ（３ｍＬ）中のアミン２Ｄ（８５．２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、１．５０当量）、酸２Ｉ（３１．７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＨＡＴＵ（４２．９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．２０当量）およびＤＩＥＡ（３６．７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、３．０２当量）から、化合物１ＺＧの場合と同様に製造した。蒸発乾固後、１００ｍｇの粗生成物が白色固体の形態で得られた。

実施例２：化合物２Ｊ（１００ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．００当量）を２ｍＬのＤＣＭおよび１ｍＬのＴＦＡに溶かした。この反応物を周囲温度で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣（８０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物２は、６％（６．３ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．８ｍＬ／分、６分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＡＣＮへ）； ESI (C₄₅H₇₃N₇O₇, 精密質量823.56) m/z: 824.5 (MH⁺)および412.9 (M.2H⁺/2, 100 %), 3.21分 (99.2 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.81 - 7.79 (m, 1H); 7.39 - 7.29 (m, 5H); 6.61 - 6.59 (m, 2H); 4.84 - 4.52 (m, 1H); 4.32 - 4.02 (m, 1H); 3.90 - 2.98 (m, 10H); 2.90 - 2.78 (m, 1H); 2.55 - 0.81 (m, 39H)。

参照例３
（（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−Ｎ，３−ジメチル−２−（（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（ピリジン−４−イルメチル）アミノ）ブタンアミド）ブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル，トリフルオロ酢酸

実施例３Ａ：（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（（（Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１Ｄ（３ｇ、１０．４４ｍｍｏｌ、１．００当量）および（Ｓ）−２−アミノ−３−フェニルプロパン酸メチル（２．２５ｇ、１２．５５ｍｍｏｌ、１．２０当量）を不活性雰囲気中でＤＭＦ（４０ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、ＤＥＰＣ（１．６７ｍＬ、１．０５当量）およびＴＥＡ（３．６４ｍＬ、２．５０当量）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間、次いで、周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を１００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、１００ｍＬのＫＨＳＯ_４（１ｍｏｌ／Ｌ）で１回、１００ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で１回、１００ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、圧力下で(under pressure)濃縮し、４ｇ（８５％）の化合物３Ａを無色の油状物の形態で得た。

実施例３Ｂ：（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−メトキシ−２−メチル−３−（（Ｓ）−ピロリジン−２−イル）プロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチルの２，２，２−トリフルオロ酢酸塩

化合物３Ａ（５ｇ、１１．１５ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＤＣＭ（４０ｍＬ）に溶かした。ＴＦＡ（２５ｍＬ）を加え、この溶液を２時間撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、８ｇの化合物３Ｂを黄色油状物の形態で得た。

実施例３Ｃ：（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル

化合物３Ｂ（８．０３ｇ、１７．３６ｍｍｏｌ、１．００当量）および１Ｗ（９．１ｇ、１７．３４ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＤＣＭ（８０ｍＬ）に溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、ＤＥＰＣ（２．８ｍＬ）およびＤＩＥＡ（１２ｍＬ）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間、次いで、周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を２００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、５０ｍＬのＫＨＳＯ_４（１ｍｏｌ／Ｌ）で１回、５０ｍＬのＮａＨＣＯ_３（飽和）で１回、５０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、５ｇ（３４％）の化合物３Ｃを黄色固体の形態で得た。

実施例３Ｄ：（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル

化合物３Ｃ（５．５ｇ、６．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中で、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ、２．６１ｇ、９．９８ｍｍｏｌ、１．５５当量）の溶液に溶かした。この溶液を周囲温度で２時間撹拌した後、１００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、３．３ｇ（８１％）の化合物３Ｄを黄色固体の形態で得た。

実施例３Ｅ：（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（ピリジン−４−イルメチル）アミノ）ブタン酸ベンジル

ピリジン−４−カルバルデヒド（１ｇ、９．３４ｍｍｏｌ、１．００当量）を化合物１ＺＣ（２．９ｇ、１１．２５ｍｍｏｌ、１．２１当量）およびチタンイソプロポキシド（ＩＶ）（４．１９ｍＬ、１．４０当量）の存在下で１０ｍＬの１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）に溶かした。この混合物を周囲温度で３０分間撹拌した後、２．７７ｇのＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（１３．０７ｍｍｏｌ、１．４０当量）を加えた。この反応媒体を撹拌下で一晩置いた後、１００ｍＬの水で中和し、この混合物を５０ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した。有機相を合わせ、蒸発乾固させた。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：２０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１．３ｇ（４５％）の化合物３Ｅを無色の油状物の形態で得た。

実施例３Ｆ：（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（ピリジン−４−イルメチル）アミノ）ブタン酸

化合物３Ｅ（８００ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＰｄ／Ｃ（３００ｍｇ）の存在下で３０ｍＬのＡｃＯＥｔに溶かし、周囲温度、大気圧下で３時間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＤＣＭとＭｅＯＨ（１００：１から５：１）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１００ｍｇ（１８％）の化合物３Ｆを白色固体の形態で得た。

実施例３：化合物３Ｄ（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、１．００当量）および３Ｆ（２６．３４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１．５０当量）を３ｍＬのＤＣＭに溶かした。この溶液を０℃まで冷却した後、０．０１８ｍＬのＤＥＰＣおよび０．０３９２ｍＬのＤＩＥＡを加えた。この反応物を０℃で２時間、次いで、周囲温度で一晩撹拌した。この反応媒体を減圧下で濃縮し、残渣（７０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％のＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物３は、２７％（２０ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＡＣＮへ）; ESI (C₄₆H₇₂N₆O₈, 精密質量836.5) m/z: 837.5 (MH⁺)および419.4 (M.2H⁺/2 (100 %)), 7.04分 (90.0 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.76 - 8.74 (m, 2H); 8.53 - 8.48 (m, 0.4H, NHCO不完全交換); 8.29 - 8.15 (m, 0.8H, NHCO不完全交換); 8.01 (s, 2H), 7.31 - 7.22 (m, 5H), 4.88 - 4.68 (m, 3H); 4.31 - 4.07 (m, 2H); 3.94 - 2.90 (m, 18H); 2.55 - 0.86 (m, 38H)。

参照例４
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−Ｎ，３−ジメチル−２−（（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（ピリジン−４−イルメチル）アミノ）ブタンアミド）ブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸，トリフルオロ酢酸

実施例４：化合物３（１００ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．００当量）を水（５ｍＬ）、ＡＣＮ（５ｍＬ）とピペリジン（２．５ｍＬ）の混合物に溶かした。この反応混合物を撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、２０ｍｇ（２０％）の化合物４を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＡＣＮへ）； ESI (C₄₅H₇₀N₆O₈, 精密質量822.5) m/z: 823.5 (MH⁺)および412.4 (M.2H⁺/2, 100 %), 6.84分 (89.1 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.79 - 8.78 (m, 2H); 8.09 (m, 2H); 7.30 - 7.21 (m, 5H); 4.80 - 4.80 (m, 1H), 4.36 - 0.87 (m, 58H)。

参照例６
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノプロピル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル、ビストリフルオロ酢酸

実施例６Ａ：（２Ｓ）−２−［（２Ｒ）−２−［（Ｒ）−［（２Ｓ）−１−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［（２Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−［（３−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ］プロピル）（メチル）アミノ］−３−メチルブタンアミド］−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド］−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル］ピロリジン−２−イル］（メトキシ）メチル］プロパンアミド］−３−フェニルプロパン酸メチル

化合物３Ｄ（１５７．５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．００当量）を０℃、不活性雰囲気中、カルボン酸１ＺＦ（７８．７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、１．１０当量）、ＤＥＰＣ（４６μｌ）およびＤＩＥＡ（１２４μｌ）の存在下で３ｍＬのＤＣＭを溶かした。この反応混合物を低温で２時間撹拌した後、冷却浴を除去し、撹拌を４時間続けた.次に、それを減圧下で濃縮し、２００ｍｇの化合物６Ａを粗黄色油状物の形態で得た。これをそのまま次の工程で使用した。

実施例６：化合物６Ａ（２００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中、０℃で２ｍＬのＤＣＭに溶かした。ＴＦＡ（１ｍＬ）を滴下し、冷却浴を外した。この反応混合物を周囲温度で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を、分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、６０ｍｇ（２工程の収率２６％）の化合物６を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｚｏｒｂａｘ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ８、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；１ｍＬ／分、４０℃、１８分で水（０．１％Ｈ_３ＰＯ_４）中、３０から８０％メタノールへ）；ESI (C₄₃H₇₄N₆O₈, 精密質量802.56) m/z: 804 (MH⁺); 11.50分 (91.5 %, 210 nm)。

¹H NMR (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.52 (d, 0.3H, NHCO不完全交換); 8.25 (d, 0.5H, NHCO不完全交換); 7.30-7.22 (m, 5H); 4.9-4.6 (m, 3H); 4.2-4.0 (m, 1H); 4.0-0.86 (m, 61H)。

参照例７
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノプロピル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸、ビストリフルオロ酢酸

実施例７：化合物６（７０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、１．００当量）を水（５ｍＬ）、ＡＣＮ（２．５ｍＬ）とピペリジン（５ｍＬ）の混合物に溶かした。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；ＵＶ Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、１４．６ｍｇ（２１％）の化合物７を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；１．５ｍＬ／分、４０℃、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中０から８０％メタノールへ）；ESI (C₄₂H₇₂N₆O₈, 精密質量788.54) m/z: 790 (MH⁺), 5.71分 (96.83 %, 210 nm)。

¹H NMR (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.42 (d, 0.3H, NHCO不完全交換); 8.15 (d, 0.2H, NHCO不完全交換); 7.31-7.21 (m, 5H); 4.9-4.6 (m, 3H); 4.25-4.0 (m, 1H); 4.0-0.86 (m, 59H)。

実施例１１
（Ｓ）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチル−２−（（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（４−（メチルアミノ）フェネチル）アミノ）ブタンアミド）ブタンアミド，トリフルオロ酢酸

実施例１１Ａ：Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
化合物１１Ａは、周囲温度、ＴＨＦ中での２−（４−アミノフェニル）エタノールとＢＯＣ_２Ｏの反応の後に７５％の収率で得られた。

実施例１１Ｂ：Ｎ−［４−（２−オキソエチル）フェニル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１１Ａ（２．５ｇ、１０．５ｍｍｏｌ、１．００当量）を２５ｍＬのＤＣＭに溶かした後、−７８℃まで冷却した。ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のデス・マーチン・ペルヨージナン溶液（ＤＭＰ、６．７１ｇ、１５．８ｍｍｏｌ、１．５当量）を滴下した。冷却浴を外し、撹拌を周囲温度で１時間続けた。この反応物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液とＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３飽和水溶液の５０／５０混合物６０ｍＬで中和した。得られた溶液を３０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、ＮａＣｌ飽和水溶液で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ １／１５）で精製し、１．０ｇ（４０％）の化合物１１Ｂを淡黄色固体の形態で得た。

実施例１１Ｃ：（２Ｓ）−２−［［２−（４−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ］フェニル）エチル］（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物１ＺＣ（３．５ｇ、１３．６ｍｍｏｌ、１．１当量）をＤＩＥＡ（６．４ｇ、４９．７ｍｍｏｌ、４．０当量）、アルデヒド１１Ｂ（２．９ｇ、１２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５．２３ｇ、４９．７ｍｍｏｌ、２．０当量）の存在下でＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶かした。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、６０ｍＬの重炭酸ナトリウム飽和溶液で中和した。得られた溶液を３０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、ＮａＣｌ飽和水溶液で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ １：２０）で精製し、３．７ｇ（６８％）の化合物１１Ｃを黄色油状物の形態で得た。

実施例１１Ｄ：（２Ｓ）−２−［［２−（４−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ］フェニル）エチル］（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸

化合物１１Ｃ（２ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１当量）をＰｄ／Ｃ（２ｇ）の存在下で１０ｍＬのメタノールに溶かし、常温および常圧で２時間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、１．２ｇ（７５％）の化合物１１Ｄを黄色油状物の形態で得た。

実施例１１Ｅ：（２Ｓ）−２−［［２−（４−［［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］（メチル）アミノ］フェニル）エチル］（メチル）アミノ］−３−メチルブタン酸

化合物１１Ｄ（１．２ｇ、３．４ｍｍｏｌ、１．００当量）を不活性雰囲気中でＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶かした。この反応媒体を氷浴で冷却し、その後、ＮａＨ（油中６０％、５４９ｍｇ、１３．７ｍｍｏｌ、４．０当量）を少量ずつ加えた後、ヨードメタン（４．９ｇ、３４ｍｍｏｌ、１０当量）を加えた。この反応物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、水で中和し、１００ｍＬのＥｔＯＡｃで洗浄した。この水溶液のｐＨを１Ｎ ＨＣｌで６〜７に調整した。この水溶液を１００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮し、８００ｍｇ（６４％）の化合物１１Ｅを黄色固体の形態で得た。

実施例１１Ｆ：Ｎ−［４−（２−［［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−１−［［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−［（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−２−［［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（１，３−チアゾール−２−イル）エチル］カルバモイル］エチル］ピロリジン−１−イル］−５−メチル−１−オキソヘプタン−４ｙｌ］（メチル）カルバモイル］−２−メチルプロピル］カルバモイル］−２−メチルプロピル］（メチル）アミノ］エチル）フェニル］−Ｎ−メチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１１Ｆは、アミン１Ｙ（１５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．２当量）および酸１１Ｅ（７０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、１．０当量）から、化合物６Ａの場合と同様に製造した。シリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ １：１）での精製後、１００ｍｇ（５２％）の目的生成物が淡黄色固体の形態で得られた。

実施例１１：化合物１１は、中間体１１Ｆ（１００ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）から、化合物１の場合と同様に製造した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１１は、３９％（３９．７ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ８、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；１ｍＬ／分、４０℃、１８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中、５０から９５％メタノールへ）；ESI (C₅₀H₇₇N₇O₆S, 精密質量903.57) m/z: 904.5 (MH⁺), 7.53分 (93.68 %, 254 nm)。

¹H NMR (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.84 (d, 0.5H, NHCO不完全交換); 8.7-8.5 (m, 0.9H, NHCO不完全交換); 7.76-7.73 (m, 1H); 7.55 - 7.4 (m, 1H); 7.28-7.22 (m, 7H); 7.08-7.05 (m, 2H); 5.51-5.72 (m, 1H); 4.9-4.80 (m, 2H); 4.3-0.7 (m, 60H)。

実施例１２
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−Ｎ，３−ジメチル−２−（（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（４−（メチルアミノ）フェネチル）アミノ）ブタンアミド）ブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル，トリフルオロ酢酸

実施例１２：化合物１の合成の最終工程と同様に、化合物１２をアミン３Ｄ（１１８ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）および酸１１Ｅ（８２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）から２工程で製造した。最終的な残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１２は、７％（１３．７ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ８、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；１ｍＬ／分、４０℃、１８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中、４０から９５％メタノールへ）；ESI (C₄₉H₇₈N₆O₈, 精密質量878.59) m/z: 879.7 (MH⁺), 10.07分 (90.6 %, 254 nm)。

¹H:NMR (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.40 (se, 2H); 7.38-7.22 (m, 7H); 4.95-4.7 (m, 3H); 4.2-4.0 (m, 1H); 3.9-0.86 (m, 62H)。

実施例１３
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−Ｎ，３−ジメチル−２−（（Ｓ）−３−メチル−２−（メチル（４−（メチルアミノ）フェネチル）アミノ）ブタンアミド）ブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸，トリフルオロ酢酸

実施例１３：化合物１３は、化合物１２（１００ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）から、化合物７の場合と同様に製造した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１３は、２０％（２０ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；１．５ｍＬ／分、４０℃、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％メタノールへ）;ESI (C₄₈H₇₆N₆O₈, 精密質量864.57) m/z: 865.6 (MH⁺), 6.05分 (90.9 %, 210 nm)。

¹H NMR: (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.32-7.19 (m, 9H); 4.9-4.65 (m, 3H); 4.2-4.0 (m, 1H); 3.9-0.86 (m, 59H)。

実施例１４
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド，トリフルオロ酢酸

実施例１４Ａ：（３−（ヒドロキシメチル）フェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

（３−アミノフェニル）メタノール（３ｇ、２４．３６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶かし、その後、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．３８ｇ、２９．２３ｍｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、反応物を２００ｍＬの水を加えることで希釈した。この生成物を１００ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した後、有機相を再び合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物（１３．８５ｇの化合物１４Ａ）を黄色油状物の形態で得た。

実施例１４Ｂ：（３−ホルミルフェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１４Ａ（１３．８ｇ、６１．８１ｍｍｏｌ、１．００当量）をＤＣＥ（４００ｍＬ）に溶かした後、ＭｎＯ_２（５４ｇ、６２１．１４ｍｍｏｌ、１０．０５当量）を加えた。この混合物を周囲温度、撹拌下で３日間置き、その後、固体を濾去した。濾液を蒸発乾固し、残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：３０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、３ｇ（２２％）の化合物１４Ｂを白色固体の形態で得た。

実施例１４Ｃ：（Ｓ）−２−（（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物１４Ｂ（１ｇ、４．５２ｍｍｏｌ、１．００当量）を化合物１ＺＣ（１．１６ｇ、４．５０ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＤＩＥＡ（３ｍＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（１．９２ｇ、９．０６ｍｍｏｌ、２．０１当量）の存在下で２０ｍＬのＴＨＦに溶かした。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、１００ｍＬの水で中和し、５０ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：５０）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１．９ｇ（９９％）の化合物１４Ｃを白色固体の形態で得た。

実施例１４Ｄ：（Ｓ）−２−（（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸

化合物１４Ｃ（１ｇ、２．３４ｍｍｏｌ、１．００当量）をＰｄ／Ｃ（４００ｍｇ）の存在下で３０ｍＬのＡｃＯＥｔおよび４ｍＬのメタノールに溶かし、周囲温度、大気圧下で１時間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、６８０ｍｇ（８６％）の化合物１４Ｄを白色固体の形態で得た。

実施例１４Ｅ：（３−（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ）−９−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル）−３，６−ジイソプロピル−１０−（２−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２，８−ジメチル−４，７−ジオキソ−１１−オキサ−２，５，８−トリアザドデシル）フェニル） カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物１４Ｅは、ＤＣＭ（３ｍＬ）中の アミン１Ｙ（１００ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．００当量）、酸１４Ｄ（１０２．２７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、２．００当量）、ＤＥＰＣ（０．０５３ｍＬ）およびＤＩＥＡ（０．０４６ｍＬ）から、化合物３の場合と同様に合成した。粗生成物（８０ｍｇ）を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１００ｍｇ（６７％）の化合物１４Ｅを淡黄色固体の形態で得た。

実施例１４：化合物１４は、中間体１４Ｅ（１００ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）から、化合物２の場合と同様に合成した。粗生成物（８０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１４は、１０％（１０ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｅｃｌｉｐｓｅ ｐｌｕｓ Ｃ８カラム、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；４０℃；１．０ｍＬ／分、１８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中４０％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₈H₇₃N₇O₆S, 精密質量875.5) m/z: 876.5 (MH⁺)および438.9 (M.2H⁺/2, 100 %), 11.35分 (95.6 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.92 - 8.86 (m, 0.4H, NH不完全交換); 8.70 - 8.54 (m, 0.6H, NH不完全交換); 7.88 - 7.78 (m, 1H); 7.60 - 7.50 (m, 1H); 7.45 - 6.97 (m, 9H); 5.80 - 5.65 (m, 1H); 4.85 - 4.70 (m, 1H); 4.40 - 0.80 (m, 56H)。

実施例１５
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル，トリフルオロ酢酸

実施例１５Ａ：（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル

化合物１５Ａは、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のアミン３Ｄ（２００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１．００当量）、酸１４Ｄ（２１２．６ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ、２．００当量）、ＤＥＰＣ（０．１１０３ｍＬ）およびＤＩＥＡ（０．１５７ｍＬ、３．００当量）から、化合物３の場合と同様に合成した。粗生成物を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２００ｍｇ（６７％）の化合物１５Ａを黄色固体の形態で得た。

実施例１５：化合物１５は、中間体１５Ａ（２００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１．００当量）から、化合物２の場合と同様に合成した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ＵＶ検出器 ２５４５ ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物１５は、１９％（３８．６ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₇H₇₄N₆O₈, 精密質量850.5) m/z: 851.5 (MH⁺)および426.4 (M.2H⁺/2, 100 %), 6.61分 (91.1 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.53 - 7.42 (m, 1H); 7.35 - 7.18 (m, 8H); 4.88 - 4.79 (m, 2H); 4.42 - 4.00 (m, 3H); 3.93 - 2.71 (m, 22H); 2.61 - 0.81 (m, 33H)。

実施例１９および２０

化合物１９および２０は、アミン１Ｙおよび１ＺＣならびに対応するアルデヒドから、化合物１の場合と同様に製造した。

化合物１９の製造に関与する４−ホルミルフェニル炭酸ｔｅｒｔ−ブチルを次のように１工程で製造した：４−ヒドロキシベンズアルデヒド（２．５ｇ、２０．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を不活性雰囲気中、１８−クラウン−６（０．２５ｇ）および炭酸カリウム（５ｇ）の存在下でＴＨＦ（２０ｍＬ）を溶かした。この反応混合物を０℃まで冷却した後、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５．８ｇ、２６．５８ｍｍｏｌ、１．３０当量）を加えた。撹拌を低温で１時間続け、その後、反応物を３０ｍＬの水で中和した。得られた溶液を２００ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ １：１０）で精製し、４．２ｇ（９２％）の４−ホルミルフェニル炭酸ｔｅｒｔ−ブチルを淡黄色固体の形態で得た。

化合物２０の製造に関与する４−ニトロベンズアルデヒドは市販品であった。

化合物２０の合成は、ニトロ基の還元によって完了した。これは次のように行った：（２Ｓ）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−［［（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル］カルバモイル］−１−メトキシ−２−メチルエチルピロリジン−１−イル］−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ，３−ジメチル−２−［（２Ｓ）−３−メチル−２−［メチル［（４−ニトロフェニル）メチル］アミノ］ブタンアミド］ブタンアミド（４０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を１５ｍＬのエタノールに溶かした。二水和塩化スズ（ＩＩ）（３１７ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ、３０当量）を加え、この溶液を周囲温度、撹拌下で３日間置いた。この反応物を５０ｍＬの水で中和した後、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、化合物２０を粗物質の状態で得た。

最終生成物の特性：
化合物１９ LC/MS/UV ESI: (C₄₈H₇₂N₆O₇S, 精密質量876.52) m/z 877 (MH⁺), 439 [100 %, (M.2H⁺)/2]; UV: RT = 1.76分 (93.2 %, 220 nm)。

化合物２０ ¹H NMR: (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.85-7.80 (m, 1H); 7.6-7.5 (m, 1H); 7.4-7.15 (m, 5H); 7.1-7.05 (m, 2H); 6.73-6.70 (m, 2H); 5.8-5.55 (m, 1H); 5.0-4.7 (m, 2H); 4.25-4.05 (m, 1H); 4.0-0.8 (m, 54H)。LC/MS/UV ESI: (Ｃ₄₈H₇₃N₇O₇S, 精密質量875.53) m/z 876 (MH⁺), 439 [75 %, (M.2H⁺)/2]; UV: RT = 4.83分 (96.8 %, 254 nm)。¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.85-7.80 (m, 1H); 7.6-7.5 (m, 1H); 7.4-7.1 (m, 7H); 6.76-6.72 (m, 2H); 5.8-5.55 (m, 1H); 4.9-4.65 (m, 2H); 4.25-4.05 (m, 1H); 4.0-0.8 (m, 54H)。

実施例２３および２４

化合物２３および２４は、アミン１Ｙをアミン２Ｄに置き換えて、化合物１９および２０の場合と同様に製造した。

最終生成物の特性：
化合物２３ LC/MS/UV (ESI) (C₄₆H₇₃N₅O₈, 精密質量823.55) m/z 824 (MH⁺), 846 (MNa⁺), 413 (100 %, (M.2H⁺)/2); UV: 4.76分 (98.5 %, 215 nm)。¹H NMR (400MHz, CDCl₃, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.5-7.2 (m, 5H); 7.9-7.75 (m, 2H); 5.5-5.3 (m, 1H); 4.9-4.6 (m, 2H); 4.55-4.15 (m, 4H); 4.0−0.8 (m, 55H)。

化合物２４ LC/MS/UV (ESI) (C₄₆H₇₄N₆O₇, 精密質量822.56) m/z 823 (MH⁺), 845 (MNa⁺), 861 (MK⁺); UV: 3.68分 (99.15 %, 254 nm)。¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.0-7.7 (m, 0.5H, NHCO不完全交換); 7.5-7.0 (m, 7H); 6.75-6.65 (m, 2H); 4.85-4.5 (m, 2H); 4.4-4.05 (m, 2H); 4.0-0.8 (m, 56H)。

実施例２７
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル，トリフルオロ酢酸

実施例２７：化合物２７は、ＤＣＭ（３ｍＬ）中のアミン３Ｄ（７０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．００当量）、酸４９Ｃ（５５．５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、２．００当量）、ＤＥＰＣ（０．０３４ｍＬ、２．００当量）およびＤＩＥＡ（０．０５５ｍＬ、３．００当量）から、化合物３の場合と同様に製造した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４５％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物２７は、３％（２．９ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ８カラム、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；４０℃；１．５ ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₈H₇₅N₅O₉, 精密質量866.56) m/z: 866.5 (MH⁺)および433.9 (M.2H⁺/2, 100 %), 6.61分 (89.1 %, 210 nm)。

¹H NMR (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.70 - 8.49 (m, 0.9 H, NH/OH不完全交換); 8.30 - 8.22 (m, 0.3H, NH不完全交換); 7.36 - 7.02 (m, 7H); 6.86 - 6.62 (m, 2H); 4.82 - 4.69 (m, 2H); 4.20 - 4.03 (m, 1H); 3.91 - 3.33 (m, 12H); 3.30 - 2.90 (m, 17H); 2.55 - 0.80 (m, 35H)。

実施例２８
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド，トリフルオロ酢酸

実施例２８Ａ：（３−（（３Ｓ，６Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ）−９−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル）−１０−（２−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３，６−ジイソプロピル−２，８−ジメチル−４，７−ジオキソ−１１−オキサ−２，５，８−トリアザドデシル）フェニル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

化合物２８Ａは、ＤＣＭ（３ｍＬ）中のアミン２Ｄ（１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、１．００当量）、酸１４Ｄ（１１１．２５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、２．００当量）、ＤＥＰＣ（０．０５８ｍＬ）およびＤＩＥＡ（０．０５ｍＬ）から、化合物３の場合と同様に製造した。残渣を、ＥｔＯＡｃとヘキサン（１：１）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、１００ｍｇ（６６％）の化合物２８Ａを白色固体の形態で得た。

実施例２８：化合物２８は、中間体２８Ａ（１００ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．００当量）から、化合物２の場合と同様に合成した。粗生成物（８０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物２８は、２０％（２０ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＭｅＯＨへ）； ESI (C₄₆H₇₄N₆O₇, 精密質量822.56) m/z: 823.5 (MH⁺)および412.4 (M.2H⁺/2, 100 %), 12.45分 (87.2 %, 210 nm)。

¹H NMR: (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.47 - 7.20 (m, 5H); 7.10 - 7.01 (m, 1H); 6.80 - 6.56 (m, 3H); 4.82 - 4.52 (m, 3H); 4.33 - 4.03 (m, 2H); 3.91 - 3.82 (m, 0.5H); 3.75 - 3.35 (m, 9.5H); 3.28 - 3.10 (m, 2H); 2.79 - 2.90 (m, 1H); 2.60 - 2.40 (m, 2H); 2.30 - 0.80 (m, 40H)。

実施例２９
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（３−アミノベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸、トリフルオロ酢酸

実施例２９：化合物１５（１００ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）を水（５ｍＬ）、ＡＣＮ（５ｍＬ）とピペリジン（２．５ｍＬ）の混合物に溶かした。この反応混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた後、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、２０ｍｇ（２０％）の化合物２９を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ８カラム、３．５μｍ、４．６×１５０ｍｍ；４０℃；１．０ ｍＬ／分、１８分で水（０．０５％ＴＦＡ）４０％から９５％ＭｅＯＨへ）； ESI (C₄₆H₇₂N₆O₈, 精密質量836.54) m/z: 837.5 (MH⁺)および419.4 (M.2H⁺/2, 100 %), 10.61分 (92.5 %, 210 nm)。

¹H NMR: (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.38 - 7.15 (m, 6H); 7.00 - 6.99 (m, 3H); 4.85 - 4.68 (m, 2H); 4.37 - 3.38 (m, 11H); 3.31 - 2.70 (m, 8H); 2.60 - 0.82 (m, 35H)。

実施例４９
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド，トリフルオロ酢酸

実施例４９Ａ：２−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアルデヒド

４−（２−ヒドロキシエチル）フェノール（４ｇ、２８．９５ｍｍｏｌ、１．００当量） をＤＭＳＯ（３２ｍＬ）に溶かした後、ＴＥＡ（８．８ｍＬ、２．２０当量）を滴下した。ＤＭＳＯ（３６ｍＬ）中、ＳＯ_３．Ｐｙ（１０ｇ、２．２０当量）の溶液を加え、この混合物を周囲温度、撹拌下で一晩置いた。この反応混合物を２５０ｍＬの水で中和し、１００ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した。有機相を合わせ、水（１００ｍＬ）で５回、次いで、１５０ｍＬのＮａＣｌ（飽和）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ（１：１０）で精製し、１ｇ（２５％）の化合物４９Ａを無色の油状物の形態で得た。

実施例４９Ｂ：（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物４９Ｂは、ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のアミン１ＺＣ（１．５ｇ、５．８２ｍｍｏｌ、０．９９当量）、アルデヒド４９Ａ（８００ｍｇ、５．８８ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（２．７ｇ、１２．７４ｍｍｏｌ、２．１７当量）およびＤＩＥＡ（４．２３ｍＬ）から、化合物１４Ｃの場合と同様に合成した。この反応混合物を５０ｍＬの水で中和し、５０ｍＬのＡｃＯＥｔで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ（１：１０）で精製し、６００ｍｇ（３７％）の化合物４９Ｂを白色固体の形態で得た。

実施例４９Ｃ：（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸

化合物４９Ｂ（０．５ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＰｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）の存在下で４０ｍＬのＭｅＯＨに溶かし、周囲温度、大気圧下で３時間水素化した。この反応媒体を濾過し、減圧下で濃縮し、０．４ｇの化合物４９Ｃを白色固体の形態で得た。

実施例４９：化合物４９は、ＤＣＭ（３ｍＬ）中のアミン１Ｙ（５３．４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、２．００当量）、酸４９Ｃ（７０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＤＥＰＣ（０．０３２ｍＬ、２．００当量）およびＤＩＥＡ（０．０５３ｍＬ、３．００当量）から、化合物３の場合と同様に合成した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｔ３カラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４５％ＡＣＮへ、次いで、２分で４５％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、３ｍｇ（１％）の化合物４９を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₉H₇₄N₆O₇S, 精密質量890.5) m/z: 891.5 (MH⁺)および446.4 (M.2H⁺/2, 100 %), 6.69分 (100 %, 210 nm)。

¹H NMR: (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.92 - 8.87 (m, 0.5 H, NHCO,不完全交換), 8.70 - 8.63 (m, 0.4 H, NHCO,不完全交換), 8.85 - 8.77 (m, 1H), 7.59 - 7.51 (m, 1H), 7.35 - 7.03 (m, 7H), 6.82 - 6.71 (m, 2H), 5.77 - 5.58 (m, 1H), 5,81 - 5.70 (m, 1H), 4.21 - 0.80 (m, 58H)。

実施例５０
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸，トリフルオロ酢酸

実施例５０：化合物５０は、化合物２７（１００ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）から、化合物４の場合と同様に製造した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−００１ ＳＨＩＭＡＤＺＵ、Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｔ３カラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２０％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２５４５ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製し、１０．７ｍｇ（１１％）の化合物５０を白色固体の形態で得た。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ａｓｃｅｎｔｉｓ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｃ１８カラム、２．７μｍ、４．６×１００ｍｍ；４０℃；１．５ｍＬ／分、８分で水（０．０５％ＴＦＡ）中１０％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₇H₇₃N₅O₉, 精密質量851.5) m/z: 852.5 (MH⁺)および426.8 (M.2H⁺/2, 100 %), 6.46分 (91.7 %, 210 nm)。

¹H NMR: (400MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 7.34 - 7.15 (m, 5H); 7.15 - 7.04 (se, 2H), 6.82 - 6.83 (m, 2H), 4.83 - 4.70 (m, 1H), 4.21 - 4.00 (m, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.74 - 3.62 (m, 1H), 3.57 - 2.86 (m, 20H), 2.56 - 0.80 (m, 36H)。

実施例５１
（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−ヒドロキシベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル，トリフルオロ酢酸

実施例５１Ａ：（４−ホルミルフェニル）炭酸ｔｅｒｔ−ブチル

４−ヒドロキシベンズアルデヒド（３．０ｇ、２４ｍｍｏｌ）を４−ＤＭＡＰ（３００ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ、０．１当量）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５．３５ｇ、２４ｍｍｏｌ、１．０当量）の存在下で３０ｍＬのＤＣＭに溶かし、周囲温度で１時間撹拌した。次に、この溶液を２００ｍＬの水で希釈し、１００ｍＬのＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、５ｇ（９２％）の化合物５１Ａを白色固体の形態で得た。

実施例５１Ｂ：（Ｓ）−２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸ベンジル

化合物５１Ａ（２２０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を化合物１ＺＣ（２５５ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（４２０ｍｇ、２ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＤＩＥＡ（６５４μｌ）の存在下で５ｍＬのＴＨＦに溶かし、周囲温度で一晩撹拌した。次に、この溶液を１００ｍＬの水で希釈し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過しおよび減圧下で濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃとＰＥ（１：１００）の混合物を用いるシリカカラムで精製し、２００ｍｇ（４７％）の化合物５１Ｂを白色固体の形態で得た。

実施例５１Ｃ：（Ｓ）−２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタン酸

化合物５１Ｃは、化合物３Ｆの製造に使用したプロトコールに従い、化合物５１Ｂ（２００ｍｇ）の水素化により製造した。

実施例５１Ｄ：（Ｓ）−２−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）ベンジル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパンアミド）−３−フェニルプロパン酸メチル

化合物５１Ｄは、化合物３の製造に使用したプロトコールに従い、化合物５１Ｃとアミン３Ｄのカップリングにより製造し、黄色油状物の形態の目的生成物を６０％の収率で得た。

実施例５１：化合物５１Ｄ（８０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を０．５ｍＬのＴＦＡの存在下で１ｍＬのＤＣＭに溶かし、周囲温度で２時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を 分取ＨＰＬＣ（Ｐｒｅ−ＨＰＬＣ−０１０、ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；溶離相：０．０５％ＴＦＡで緩衝させた水／ＡＣＮ；１０分で２３％から４０％ＡＣＮへ、次いで、２分で４０％から９５％ＡＣＮへの勾配；Ｗａｔｅｒｓ ２４８９ ＵＶ検出器 ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物５１は、２４％（２０ｍｇ）の収率で、白色固体の形態で得られた。

ＬＣ／ＭＳ／ＵＶ（Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ−Ａｑ、１．８μｍ、４．６×１００ｍｍ；１分間、水（０．０５％ＴＦＡ）中２％ＭｅＯＨ、次いで、１３分で２％から９５％ＭｅＯＨへ）；ESI (C₄₇H₇₃N₅O₉, 精密質量851.54) m/z: 874.5 (MNa⁺), 426.9 (M.2H⁺/2); 12.48分 (96 %, 210 nm)。

¹H NMR: (300MHz, CD₃OD, ppm): δ (回転異性体の存在) 8.1 - 8.6 (m, 0.9H, NHCO不完全交換); 7.29 - 7.27 (m, 2H), 7.25 - 6.86 (m, 5H), 6.84 - 6.83 (m, 2H), 4.83 - 4.72 (m, 3H), 4.26 - 0.82 (m, 58H)。

実施例６１
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−アミノフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−（（（Ｓ）−２−フェニル−１−（チアゾール−２−イル）エチル）アミノ）プロピル）ピロリジン−１−イル）−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド

実施例６１Ａ：Ｎ−（４−アミノフェネチル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリン二塩酸塩

化合物１１Ｄ（９６２ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を市販のプロパン−２−オール中のＨＣｌ溶液（５〜６Ｍ）１０ｍｌに溶かし、室温で２時間撹拌した。ＴＬＣ分析は、出発材料の完全な消費を示した。溶媒を減圧下で蒸発させ、生じた黄色固体をＥｔ_２Ｏ（２×１０ｍｌ）中で摩砕した。生成物を真空下で乾燥させ、化合物６１Ａを黄色固体として得た（３２２ｍｇ、４７％）。

実施例６１：カルボン酸６１Ａ（７３ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１当量）およびアミン１Ｙ（１５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＭＦ（２ｍｌ）に溶かした。ＤＩＥＡ（１５８μｌ、０．９０ｍｍｏｌ、４当量）およびＤＥＣＰ（５１μｌ、０．３４ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、この反応物を室温で４時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳによる分析は、出発材料の完全な消費を示した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、化合物６１を淡黄色固体として得た（８３ｍｇ、４０％）。

¹H NMR: (500MHz, DMSO-d₆, ppm): δ (回転異性体の存在), 8.86 (d, 0.5H, NHCO); 8.65 (d, 0.5H, NHCO), 8.11-8.05 (m, 1H, NHCO), 7.80 (d, 0.5H, チアゾール), 7.78 (d, 0.5H, チアゾール), 7.65 (d, 0.5H, チアゾール), 7.63 (d, 0.5H, チアゾール), 7.32 - 7.12 (m, 5H), 6.83 (d, J=8.3 Hz, 2H), 6.45 (d, J=8.3 Hz, 2H), 5.56 - 5.49 (m, 0.5 H), 5.42 - 5.35 (m, 0.5H), 4.78 (s, 2H, NH₂), 4.74 - 4.46 (m, 2H), 4.01 - 0.66 (m, 57H)。

ＨＰＬＣ（Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×５０ｍｍ；３．５ｍｌ／分、４０℃、２．２５分で水（０．１％ＴＦＡ）中０％から９５％ＭｅＣＮへ、次いで、０．５分間、９５％ＭｅＣＮ、Ｔｒ＝１．３１分（９６．５％、２２０ｎｍ）。

m/z (Q-TOF ESI⁺) 890.5558 (2%, MH⁺, C₄₉H₇₆N₇O₆S理論値890.5572), 445.7834 (100 %, (MH₂)²⁺, C₄₉H₇₇N₇O₆S理論値445.7823)。

実施例６２
メチル（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−アミノフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパノイル）−Ｌ−フェニルアラニネート

実施例６２：化合物６２は、カルボン酸６１Ａ（６９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１当量）、アミン３Ｄ（１３５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＩＥＡ（７５μｌ、０．４３ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＥＣＰ（４９μｌ、０．３２ｍｍｏｌ、１．５当量）を用い、化合物６１の場合と同様に製造した。粗生成物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、化合物６２を帯黄色固体として得た（８２ｍｇ、４５％）。

¹H NMR: (500MHz, DMSO-d₆, ppm): δ (回転異性体の存在), 8.50 (d, J=8.3, 0.5H, NHCO); 8.27 (d, J=8.0, 0.5H, NHCO), 8.15-8.04 (m, 1H, NHCO), 7.27 - 7.13 (m, 5H), 6.86 - 6.79 (m, 2H), 6.48 - 6.42 (m, 2H), 4.78 (s, 2H, NH₂), 4.74 - 4.44 (m, 3H), 4.01 - 3.72 (m, 1.5H), 3.66 (s, 1.5H, CO₂Me), 3.63 (s, 1.5H, CO₂Me), 3.57 - 0.65 (m, 55.5H)。

ＨＰＬＣ（Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×５０ｍｍ；３．５ｍｌ／分、４０℃、２．２５分で水（０．１％ＴＦＡ）中０％から９５％ＭｅＣＮへ、次いで、０．５分間、９５％ＭｅＣＮ、Ｔｒ＝１．２９分（９５．３％、２２０ｎｍ）。

m/z (Q-TOF ESI⁺) 865.5800 (2%, MH⁺, C₄₈H₇₇N₆O₈理論値865.5797), 433.2937 (100 %, (MH₂)²⁺, C₄₈H₇₈N₆O₈理論値433.2935)。

実施例６３
２，２，２−トリフルオロ酢酸（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−アミノフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド）−３−メトキシ−５−メチルヘプタノイル）ピロリジン−２−イル）−３−メトキシ−２−メチルプロパノイル）−Ｌ−フェニルアラニン

実施例６３：化合物６２（２３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を水（１ｍｌ）とアセトニトリル（１ｍｌ）の混合物に溶かした。ピペリジン（０．７５ｍｌ）を加え、この混合物を室温で５時間撹拌した。ＴＬＣ分析は、出発材料の完全な消費を示した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐカラム Ｃ１８ ＯＢＤ、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；移動相：０．１％ＴＦＡで緩衝させた水／ＭｅＣＮ；１０分で２０％から４０％ＭｅＣＮへ、次いで、２分で４０％から１００％ＭｅＣＮへの勾配；検出器ＵＶＷａｔｅｒｓ ２５４５ ２５４ｎｍおよび２２０ｎｍ）により精製した。化合物６３は、白色固体として得られた（１４ｍｇ、６６％）。

¹H NMR: (500MHz, DMSO-d₆, ppm): δ (回転異性体の存在), 12.7 (s(br), 1H, CO₂H), 9.58 (m(br), 1H); 9.04 - 8.89 (m, 1H), 8.41 (d, 0.6H, NHCO), 8.15 (d, 0.4H, NHCO), 7.27 - 7.13 (m, 5H), 7.13 - 6.99 (m(br), 2H), 6.90 - 6.64 (s(br), 2H), 4.77 - 3.40 (m, 10H), 3.34 - 2.75 (m, 20H), 2.34 - 1.94 (m, 4H), 1.90 - 0.7 (m, 25H)。

ＨＰＬＣ（Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×５０ｍｍ；３．５ｍｌ／分、４０℃、２．２５分で水（０．１％ＴＦＡ）中０％から９５％ＭｅＣＮへ、次いで、０．５分間、９５％ＭｅＣＮ、Ｔｒ＝１．２４分（１００％、２２０ｎｍ）。

m/z (Q-TOF ESI⁺) 851.5641 (6%, MH⁺, C₄₇H₇₅N₆O₈理論値851.5641), 426.2854 (100 %, (MH₂)²⁺, C₄₇H₇₆N₆O₈理論値426.2857)。

実施例６４
（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（４−アミノフェネチル）（メチル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）−Ｎ−（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル）−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド

化合物６４は、カルボン酸６１Ａ（９３ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１当量）、アミン２Ｄ（１７４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＩＥＡ（１００μｌ、０．５８ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＥＣＰ（６６μｌ、０．４３ｍｍｏｌ、１．５当量）を用い、化合物６１の場合と同様に製造した。粗生成物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、化合物６４を灰白色固体として得た（５１ｍｇ、２１％）。

¹H NMR: (500MHz, DMSO-d₆, ppm): δ (回転異性体の存在), 9.61 (m(br), 1H); 9.05 - 8.89 (m, 1H), 7.93 (d, 0.6H, NHCO), 7.64 (d, 0.4H, NHCO), 7.36 - 6.98 (m, 7H), 6.92 - 6.70 (m(br), 2H), 5.45 (s(br), 1H), 4.80 - 4.41 (m, 3H), 4.06 - 3.44 (m, 4H), 3.37 - 2.79 (m, 18H), 2.45 - 2.21 (m, 3H), 2.17 - 0.70 (m, 35H)。

ＨＰＬＣ（Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｓｈｉｅｌｄ Ｃ１８、３．５μｍ、４．６×５０ｍｍ；３．５ｍｌ／分、４０℃、２．２５分で水（０．１％ＴＦＡ）中０％から９５％ＭｅＣＮへ、次いで、０．５分間、９５％ＭｅＣＮ、Ｔｒ＝１．２０分（１００％、２２０ｎｍ）。

m/z (Q-TOF ESI⁺) 837.5826 (33%, MH⁺, C₄₇H₇₇N₆O₇理論値837.5848), 419.2956 (100 %, (MH₂)²⁺, C₄₇H₇₆N₆O₈理論値419.2961)。

ＩＩ−本発明の化合物の生物活性
方法：
細胞培養
Ａ５４９（非小細胞肺癌−ＡＴＣＣ ＣＣＬ−１８５）細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（乳腺癌−ＡＴＣＣ ＨＴＢ−２６）細胞をそれぞれ、５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含むイーグル最小必須培地（ＭＥＭ）および１０％ＦＣＳを含むダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で培養した。ＭＣＦ７（乳管癌−ＡＴＣＣ ＨＴＢ−２２）細胞およびＳＮ−１２Ｃ（腎臓癌−ＡＴＣＣ）細胞は、１０％ＦＣＳを含有するＲＰＭＩ１６４０培地（ＭＣＦ７細胞の場合にはフェノールレッド不含）で維持した。総ての培地にファンギゾン（１．２５μｇ／ｍＬ）およびペニシリン−ストレプトマイシン（１００Ｕ／１００μｇ／ｍＬ）を添加した。細胞を３７℃、５％ＣＯ_２および９５％大気湿度のインキュベーターにて、標準条件下で培養した。

４種の腫瘍細胞株に対する抗増殖活性
本発明による化合物を、４種の細胞株の包括的パネルにおけるＡＴＰｌｉｔｅ増殖アッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、ヴィルボン・シュル・イヴェット、フランス）を用い、それらの抗増殖活性に関して調べた。０日目に、細胞を９６ウェルプレートに、細胞が７２時間の薬物処理期間に対数細胞増殖期に留まるような密度（Ａ５４９の場合には１０^３細胞／ウェル、ＭＣＦ７、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＳＮ１２Ｃの場合には２．１０^３細胞／ウェル）で播種した。２４時間のインキュベーション期間の後、総ての細胞を供試化合物の希釈系（１％ＤＭＳＯ中、１０倍溶液１１μＬ−６ウェル／条件）で処理した。化合物のチップへの付着を避けるため、２つの連続する希釈液の間ではチップを交換した。次に、細胞を３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーターに入れた。４日目に、細胞生存率を生存細胞によって放出されるＡＴＰを測定する(dosing)ことによって評価した。生存細胞の数を溶媒処理細胞の数と比較して分析した。ＥＣ_５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄソフトウエア（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．、ＣＡ、ＵＳＡ）が提供しているアルゴリズムを用いて実行する曲線フィッティング解析（Ｓ字用量応答、変数としてのヒル係数を用いた非線形回帰モデル）を用いて決定した。

結果：
種々の化合物：
本発明による種々の化合物を、上記の方法に従ってＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株に対するそれらの抗増殖活性を決定するために試験した。測定された活性はＥＣ_５０＜０．１μＭの値を示した。

本発明による化合物から選択されるいくつかの下記実施例は、それらの十分に顕著な抗増殖特性を示す：
実施例１２：ＥＣ_５０＝５．８０×１０^−１０Ｍ；実施例１３：ＥＣ_５０＝７．９５×１０^−８Ｍ；実施例１５：ＥＣ_５０＝１．７０×１０^−１０Ｍ；実施例２７：ＥＣ_５０＝１．２０×１０^−１０Ｍ。

種々の細胞株：
化合物１５を、上記の方法に従い、種々の細胞株（Ａ５４９、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＣＦ−７、ＳＮ１２Ｃ）で試験した。測定された活性はＥＣ_５０＜０．１μＭの値を示した。

比較例：
フェニル環での置換（アミノ／ヒドロキシル対カルボキシル）を下記の比較例で検討したところ、アミノまたはヒドロキシル置換基を含んでなる本発明による薬物の抗増殖活性の改善が示された。

Claims (16)

1. 下式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物：
   

   

   ［式中、
   Ｒ_１は、ＨまたはＯＨであり、
   Ｒ_２は、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−（（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル）またはチアゾリル基であり、
   Ｒ_３は、Ｈまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基であり、かつ
   Ｒ_４は、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される１以上の基で置換されたアリール−（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基であり、ここで、Ｒ_９およびＲ_１０はそれぞれ互いに独立にＨまたは（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基を表す］。
2. Ｒ_１＝ＯＨ、かつ、Ｒ_２が（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基を表すか、または
   Ｒ_１＝Ｈ、かつ、Ｒ_２がＣＯＯＨ、ＣＯＯ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキルまたはチアゾール基を表す、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ_１がＨを表し、Ｒ_２がＣＯＯＨまたはＣＯＯＭｅを表す、請求項１または２に記載の化合物。
4. Ｒ_３がＨまたはメチル基を表す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
5. Ｒ_４が、アリール部分において、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される、特にＮＲ_９Ｒ_１０である１つの基で置換されたアリール−（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル基を表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
6. Ｒ_４が、フェニル部分において、ＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される、特にＮＲ_９Ｒ_１０である１つの基で置換されたフェニル−（Ｃ_１−Ｃ_２）アルキル基を表す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
7. Ｒ_４が下式：
   

   

   を有し、ここで、Ｘ_０はＯＨまたはＮＲ_９Ｒ_１０、特にＮＲ_９Ｒ_１０を表し、ｍは１〜８の間を含む整数を表し、有利には、ｍは１または２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
8. Ｒ_４が下式：
   

   

   を有し、ここで、Ｘ_０はＮＲ_９Ｒ_１０を表し、ｍは１または２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
9. 

   

   

   

   

   から選択される請求項１に記載の化合物、およびトリフルオロ酢酸を伴って形成される塩などのその薬学的に許容可能な塩。
10. 医薬品として使用するための請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
11. 癌または良性増殖性障害の治療を意図した医薬品として使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
12. 請求項１〜９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物と少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物。
13. 有利には、特に、ナベルビン、ビンフルニン、タキソール、タキソテール(taxoter)、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドキソルビシン(doxorabicin)、カンプトテシン、ゲムシタビン(gemcitabin)、エトポシド、シスプラチンまたはカルムスチン(carmustine)などの細胞傷害性抗癌薬；およびタモキシフェンまたはメドロキシプロゲステロンなどのホルモン抗癌薬を含んでなる抗癌剤から選択される別の有効成分をさらに含んでなる、請求項１２に記載の医薬組成物。
14. 請求項１〜９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を製造するための方法であって、下式（ＶＩ）の化合物：
    

    

    （ここで、Ｒ_１およびＲ_２は請求項１に定義される通り）
    と下式（ＶＩＩ）の化合物：
    

    

    （ここで、Ｒ_３は請求項１に定義される通りであり、Ｒ_４ａは場合により保護形態の請求項１に定義されるＲ_４基を表し、かつ、ＸはＯＨまたはＣｌである）
    の間の縮合反応を含んでなる、方法。
15. 請求項１〜９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を製造するための方法であって、下式（ＶＩＩＩ）の化合物：
    

    

    （ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は請求項１に定義される通り）
    と下式（Ｘ）の化合物：
    Ｒ_４ａ−Ｙ （Ｘ）
    （ここで、Ｒ_４ａは場合により保護形態の請求項１に定義されるＲ_４基を表し、かつ、ＹはＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＳＯ_２ＣＨ_３、ＯＳＯ_２ＣＦ_３またはＯ−トシルなどの脱離基である）
    の間の置換反応を含んでなる、方法。
16. Ｒ_４が−ＣＨ_２Ｒ_４ｂ基を表し、ここで、Ｒ_４ｂはＯＨおよびＮＲ_９Ｒ_１０基から選択される１以上の基で置換された、アリールまたはアリール−（Ｃ_１−Ｃ_７）アルキル基を表す、請求項１〜９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を製造するための方法であって、
    下式（ＶＩＩＩ）の化合物：
    

    

    （ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は請求項１に定義される通り）
    と下式（ＸＩ）の化合物：
    Ｒ_４ｂ−ＣＨＯ （ＸＩ）
    （ここで、Ｒ_４ｂは従前に定義される通り）
    の間の還元的アミノ化反応を含んでなる、方法。