JP2016512684A - 高密度細胞バンキングの方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本明細書において使用される場合、用語「回分培養」は、ある量の新鮮な培養培地に、すぐに対数増殖期に入る細胞が播種され、当該培養物の増殖培地が、連続的に除去され新鮮な培地と取り替えられるわけではない、細胞培養技術を意味する。
従来の細胞培養は、「回分」培養プロセスを伴う。このタイプの培養では、ある量の新鮮な培地に、すぐに対数増殖期に入る細胞が播種される。これらの細胞が増殖し分裂すると、それらは、培地から利用できる栄養素を消費し、有害な老廃物を排出する。時間と共に、当該培養は、定常期に入り、最終的に減衰期に入るであろう。「回分」培養プロセスに対する修正は、時間をかけてそれをより効率的にしたが、結果として得られる修正回分培養プロトコルは、依然として、結果として急速な増殖および減衰サイクルを生じる。さらに、「回分」培養プロセスは、高密度細胞バンキングを可能にするために必要なレベルの細胞密度に達するための能力が限られている。
細胞の培養に好適な任意のタイプの細胞培養培地を、本発明の方法において使用することができる。適切な細胞培地を選択するためのガイドラインは当技術分野において周知であり、例えば、Freshney,R.I. Culture of Animal Cells(基本技術のマニュアル)、第4版 2000、Wiley−Lisslの8章および9章、およびDoyle,A.、Griffiths,J.B.、Newell,D.G. Cell & Tissue Culture:Laboratory Procedures 1993、John Wiley & Sonsにおいて提供されている。これらの参考文献のそれぞれは、その全体が本明細書に組み入れられる。例えば、国際特許出願第97/05240号、同第96/26266号、および同第00/11102号、米国特許第6,100,061号、同第6,475,725号、および同第8,084,252号に見られるものなど、動物由来成分不含およびタンパク質不含の条件下での細胞培養物の調製および維持のための、当技術分野のさらなる方法(CHO細胞に関する方法を含む)が存在する。各先行文献は、参照によってその全体が本明細書に組み入れられる。本発明の一実施形態において、動物由来成分(ADC)不含の培地を使用することができる。従来の合成の最少培地は、無機塩、アミノ酸、ビタミン、炭水化物源、および水を含み得る。本発明の特定の実施形態において、使用され得る培地は、CD−CHO(GIBCO、Invitrogen Corp.;化学的に定義され、タンパク質、加水分解物質、または由来不明の成分を含まない、動物由来不含培地)である。さらに、当該培地は、グルタミンおよび/またはメトトレキサートあるいは増殖もしくは粘着の役に立ち得る他の因子を含む、追加の成分を含んでいてもよい。特定の実施形態において、当該追加の成分は、約2mMから約8mMの間、例えば、約2mM、約3mM、約4mM、約5mM、約6mM、約7mM、または約8mMにおいて加えられたGLUTAMAX−1またはL−グルタミンであり得る。
ある特定の実施形態において、本発明の細胞バンキングプロセスにおいて採用される細胞は、関心対象の治療関連タンパク質もしくは他のポリペプチドの発現のための発現構成体を有する宿主細胞である。関心対象のポリペプチド(例えば、結合ポリペプチド)を発現させるために使用することができる任意の細胞は、本明細書において説明される方法により使用することができる。当該細胞は、場合により、天然由来の核酸配列もしくは組み換え核酸配列、例えば、関心対象のポリペプチドを含有する発現ベクタなど、を含有していてもよい。当該発現ベクタは、場合により、適切な転写制御および翻訳制御を含有していてもよく、ならびに当技術分野において公知の組み換えDNA技術を使用して構成することができる。発現ベクタは、当技術分野において公知の技術によって任意の宿主細胞に移すことができ、次いで、当該形質転換された細胞は、高密度細胞バンクを作製するために本発明の方法により培養することができる。さらに、当該高密度細胞バンクは、関心対象のコードされたタンパク質を産生するために、当技術分野において公知の技術により、解凍および培養することができ、所望であれば、このタンパク質は、その後に精製してもよい。
灌流培養条件下での細胞の培養に好適な任意のバイオリアクタを、本発明の方法において採用することができる。当該バイオリアクタは、適切なシード密度における細胞のアリコート(例えば、スタータ培養物からのバイアル瓶の細胞または細胞など、例えば、振とうフラスコまたはその密度まで培養されている振とうフラスコシードトレイン)を使用して播種される。培養物にとって適切なシード密度は、使用される細胞のタイプおよび播種されるバイオリアクタを含むいくつかの因子に依存する。適切なシード密度は、当技術分野において利用可能な方法を使用して特定することができる。
灌流培養は、細胞への損傷を最小限に抑えつつ培養物から栄養枯渇および老廃物含有培地を除去する能力に依存している。培養された細胞から枯渇培地が分離される細胞保持の初期の方法は、しばしば、剪断力の発生などの固有問題により、細胞を損傷した。これは、最終的に、フィルタの詰まりと灌流装置の故障を引き起こし、それらの多くが、培養システムに内在するものであった。したがって、一態様において、本開示は、培地の交換を可能にしかつ精子バンキングのために細胞培養物をさらに濃縮するために使用される「細胞保持システム」を使用する方法を提供する。
凍結保存は、時間または酵素的活性もしくは化学的活性によって生じるダメージに影響を受けやすい細胞、組織、または任意の他の物質を、氷点下温度に冷却して貯蔵することによって保存するプロセスを意味する。重要な細胞株の凍結保存の重要性は、(他の重要な利点の中でも)、継続的な培養においてそれらを継代することなくこれらの株の維持を可能にし、汚染のリスクを減少させ、ならびに遺伝的浮動のリスクを減少するので、その重要性を過小評価することはできない。
上記において示したように、本発明の方法は、後の使用のための素晴らしい細胞生存率を維持しつつ、高密度での細胞バンキングを可能にする。本明細書において使用される場合、用語「細胞生存率」は、所定の試料における健康な細胞の数もしくは割合として定義することができる。細胞の生存率は、説明した高密度細胞バンキングプロセスにおける任意の時点において、当技術分野において利用可能な任意の方法を使用して特定することができる。細胞生存率の特定のために一般的に使用される方法は、主に、生きた細胞は、ある特定の染料、例えば、トリパンブルー(ジアゾ染料)、エオシン、またはプロピジウムなど、を排除する無傷の細胞膜を有するが、死んだ細胞は有さない、という原理に基づいている。
1)非アポトーシス細胞(または健康な細胞)
2)アネキシンV(−)および7−AAD(−)
3)初期アポトーシス細胞:アネキシンV(+)および7−AAD(−)
4)後期アポトーシス細胞および死んだ細胞:アネキシンV(+)および7−AAD(+)
のように区別することができる。
本発明の高密度細胞精子バンキング方法に由来する細胞は、タンパク質の製造のために後の生産期において用いることができる。例えば、バイオリアクタにおいて繁殖させ、本発明の方法により高密度バンクアリコートにおいて凍結させた細胞は、治療関連タンパク質などの生物学的物質の生産に使用することができる。これらの生物学的物質は、これらに限定されるわけではないが、ウイルス(例えば、WO200138362を参照されたい)、抗体などの結合ポリペプチド、例えば、モノクローナル抗体など、およびその断片、例えば、fab断片など;Fc融合タンパク質、抗凝血剤、血液因子、骨形成タンパク質、遺伝子組み換えタンパク質の骨組、酵素、成長因子、ホルモン、インターフェロン、インターロイキン、および血栓溶解剤、を含み得る。これらの生物学的物質は、当技術分野において利用可能な任意の方法を用いて収穫することができる。一実施形態において、本発明は、生物学的物質の生産に好適な条件下において生物学的物質を発現することができる細胞を培養する工程を含む、生物学的物質を製造する方法であって、細胞が、灌流培養および非遠心分離濃縮法を用いて製造された高密度凍結細胞バンクから得られる、方法を提供する。当該生物学的物質は、(これらに限定されるわけではないが)タンパク質(例えば、任意の治療関連タンパク質)であり得る。
この高密度細胞精子バンキングプロトコルは、およそ2.0〜2.4×107生存細胞/mL(標準的細胞凍結保存条件)の密度において2mLのマスターセルバンクバイアル瓶の細胞(作業容積は1.5mL)によって開始される。当該細胞は、次いで、灌流培養において増殖され、交互接線流によって濃縮される。濃縮された細胞培養物にDMSOを加えた後、この高密度細胞培養物は、高密度細胞バンク(およそ10×107細胞/mL)として、貯蔵のために、およそ200個の別々の5mLバイアル瓶(およそ4.5mLの作業容積)へと分配される。
高密度細胞培養バンク化システムの作製(図1)での使用に最適な細胞保持方法を特定するために、標準的GE灌流バイオリアクタにおけるビルトイン浮遊式フィルタ、TFF(接線流ろ過)、ATF2、およびATF4を、定義されたパラメータ下(表1)での増加した細胞増殖および生存細胞密度を支援するそれらの能力について評価した。
後続の最終濃縮および高密度細胞精子バンキングのための最適な細胞収穫のタイミングを特定するために、rCHO細胞株1の培養物を、交互接線流システムを使用した灌流培養条件下において、カスタム10−L WAVE(登録商標)(GE Healthcare Life Sciences)セルバッグバイオリアクタにおいて増殖させた。異なる細胞密度(14×106、33×106、56×106/mL)の細胞を、灌流培養の間の複数の時点において収集し、ミニバンクを作成した(図1)。
この高密度細胞培養およびバンキングプロセスをより頑健でGMP実施可能にするため、自動化pHおよびDO制御の不在下においてこの培養を維持することができるシステムを確立するために、WAVE(登録商標)操作パラメータを検討し定義した。
細胞品質に対するATF4濃縮工程および凍結前DMSO暴露の効果を特定するため、増殖評価のために、高密度細胞バンキング手順の異なる段階において採取した生きた細胞を振とうフラスコに播種した。表7に示された条件下において採取および実験された試料は、濃縮前、濃縮後、0から120分のDMSO暴露長さであった。
高密度細胞バンクのバンキング後細胞品質を特定するため、解凍後細胞を培養し、それらの相対細胞増殖速度、生存率、およびアポトーシスのレベルを特定するために実験した。さらに、このプラットホームが他の細胞株に容易に適用可能であることを確保するために、3つの異なる細胞株(rCHO細胞株1、2、および3)を使用した。これらの細胞をバンキング前およびバンキング後に増殖させた実験条件を表8に詳述する。
Claims (20)
- a)灌流バイオリアクタにおいて細胞を培養する工程であって、該バイオリアクタが、効率的な混合およびガス交換のために撹拌され、ならびに該バイオリアクタが、細胞保持システムに連結されている、前記工程;
b)該細胞を非遠心分離濃縮することにより、濃縮された細胞集団を製造する工程;
c)該濃縮された細胞集団を凍結保存することにより、高密度凍結細胞バンクを製造する工程
を含む、高密度凍結細胞バンクを製造するための非遠心分離方法。 - 細胞保持システムは、フィルタを含む交互接線流ろ過システムを含む、請求項1に記載の方法。
- フィルタは、少なくとも0.3m2、好ましくは約0.3m2から約0.5m2、約0.5m2から約1.0m2、約0.7m2から約0.8m2、約1.0m2から約2.0m2、約2.0m2から約3.0m2、約3.0m2から約4.0m2、または約4.0m2から約5.0m2の表面積を有する、請求項2に記載の方法。
- フィルタは、0.2μm、0.4μm、および0.65μmからなる群より選択される孔径を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 濃縮された細胞集団は、1.0×108、1.1×108細胞/mL、1.2×108細胞/mL、1.3×108細胞/mL、1.5×108細胞/mL、1.7×108細胞/mL、および2.0×108細胞/mLからなる群より選択される細胞密度を有する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記凍結保存工程は、濃縮された細胞集団に約5v/v%から約10v/v%の最終濃度までDMSOを加える工程を含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 前記凍結保存工程は、凍結保存条件下での貯蔵に適切なコンテナにおいて、濃縮された細胞集団の少なくとも一部を凍結する工程を含む、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- コンテナはバイアル瓶である、請求項7に記載の方法。
- コンテナはクライオバッグである、請求項7に記載の方法。
- 高密度凍結細胞バンクは、約1×108細胞/mLの細胞密度を有する、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 灌流バイオリアクタの灌流速度は、約0.02nL/細胞/日から約0.5nL/細胞/日の間である、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 灌流バイオリアクタの細胞培養物は、約6.8から約7.2の間のpHを有する、請求項1〜11のいずれか1項に記載の方法。
- 灌流バイオリアクタの細胞培養物は、少なくとも約30%の溶存酸素濃度を有する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法。
- バイオリアクタはフレキシブルバッグバイオリアクタである、請求項1〜13のいずれか1項に記載の方法。
- 高密度凍結細胞バンクは、少なくとも60%、少なくとも約90%、および少なくとも約95%から選択される解凍後生存率を有する、請求項1〜14のいずれか1項に記載の方法。
- 細胞は哺乳動物細胞である、請求項1〜15のいずれか1項に記載の方法。
- 細胞はトランスフェクトされた細胞である、請求項1〜16のいずれか1項に記載の方法。
- a)交互接線流ろ過システムに連結された灌流バイオリアクタにおいて細胞を培養する工程であって、該バイオリアクタが、フレキシブルバッグバイオリアクタを含み、該フィルタが、少なくとも0.3m2のフィルタ表面積および少なくとも50kDaのMWCOサイズを有する、前記工程;
b)約1.0×108細胞/mLを超える密度を有する濃縮された細胞集団を製造するために、該交互接線流ろ過システムを使用して該細胞を非遠心分離濃縮する工程;
c)高密度凍結細胞バンクを製造するために該濃縮された細胞集団を凍結保存する工程であって、該濃縮された細胞集団に約5v/v%から約10v/v%の最終濃度までDMSOを加える工程を含む、前記工程
を含み、
該高密度凍結細胞バンクが、約108細胞/mLの細胞密度を有する、高密度凍結細胞バンクを製造するための非遠心分離方法。 - 培養物のpHおよびDOは、自動化された方法によって制御される、請求項1〜18のいずれか1項に記載の方法。
- 培養物のpHおよびDOは、自動化されていない方法によって制御される、請求項1〜18のいずれか1項に記載の方法。
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CA2962262A1 (en) * | 2014-09-18 | 2016-03-24 | Genzyme Corporation | Ultra-high density cell banking methods |
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EP3795672A1 (en) * | 2019-09-18 | 2021-03-24 | Sartorius Stedim Biotech GmbH | System and method for the generation of high cell density seed culture |
WO2023285444A1 (en) * | 2021-07-13 | 2023-01-19 | Novo Nordisk A/S | Method for large-scale banking of human pluripotent stem cells and products derived thereof |
EP4370647A1 (en) * | 2021-07-15 | 2024-05-22 | Just-Evotec Biologics, Inc. | Bidirectional tangential flow filtration (tff) perfusion system |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007525984A (ja) * | 2004-03-05 | 2007-09-13 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 連続的灌流および交互接線流による細胞培養の方法 |
WO2011091248A1 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Lonza Walkersville, Inc. | High yield method and apparatus for volume reduction and washing of therapeutic cells using tangential flow filtration |
WO2012128703A1 (en) * | 2011-03-18 | 2012-09-27 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Flexible bag for cultivation of cells |
JP2012531930A (ja) * | 2009-07-06 | 2012-12-13 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 真核生物細胞の培養方法 |
WO2013006461A1 (en) * | 2011-07-01 | 2013-01-10 | Biogen Idec Ma Inc. | Cholesterol-based media supplementals for cell culture |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3649249B2 (ja) | 1995-02-23 | 2005-05-18 | クエスト・インターナショナル・サービシーズ・ビー・ブイ | 組織および細胞培養用ペプチド |
AUPN442295A0 (en) | 1995-07-26 | 1995-08-17 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Regulated autocrine growth of mammalian cells |
AT407255B (de) | 1997-06-20 | 2001-02-26 | Immuno Ag | Rekombinanter zellklon mit erhöhter stabilität in serum- und proteinfreiem medium und verfahren zur gewinnung des stabilen zellklons |
US6475725B1 (en) | 1997-06-20 | 2002-11-05 | Baxter Aktiengesellschaft | Recombinant cell clones having increased stability and methods of making and using the same |
US6391257B1 (en) | 1998-08-19 | 2002-05-21 | Prestone Products Corporation | Antifreeze compositions comprising carboxylic acid and cyclohexenoic acid |
EP1103610A1 (en) | 1999-11-26 | 2001-05-30 | Introgene B.V. | Production of vaccines from immortalised mammalian cell lines |
US6544424B1 (en) | 1999-12-03 | 2003-04-08 | Refined Technology Company | Fluid filtration system |
US6544788B2 (en) | 2001-02-15 | 2003-04-08 | Vijay Singh | Disposable perfusion bioreactor for cell culture |
US20030054331A1 (en) * | 2001-09-14 | 2003-03-20 | Stemsource, Inc. | Preservation of non embryonic cells from non hematopoietic tissues |
US20060166364A1 (en) * | 2004-12-22 | 2006-07-27 | Introgen, Inc. | Use of flexible bag containers for viral production |
CN101155914B (zh) * | 2005-04-08 | 2013-03-06 | 阿戈斯治疗公司 | 树状细胞组合物和方法 |
SI2041259T1 (sl) * | 2006-07-14 | 2016-04-29 | Dpx Holdings B.V. | Izboljšan postopek kultiviranja celic |
WO2011140241A2 (en) | 2010-05-04 | 2011-11-10 | The General Hospital Corporation | Methods and compositions for preserving tissues and organs |
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007525984A (ja) * | 2004-03-05 | 2007-09-13 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー.ブイ. | 連続的灌流および交互接線流による細胞培養の方法 |
JP2012531930A (ja) * | 2009-07-06 | 2012-12-13 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 真核生物細胞の培養方法 |
WO2011091248A1 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Lonza Walkersville, Inc. | High yield method and apparatus for volume reduction and washing of therapeutic cells using tangential flow filtration |
WO2012128703A1 (en) * | 2011-03-18 | 2012-09-27 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Flexible bag for cultivation of cells |
WO2013006461A1 (en) * | 2011-07-01 | 2013-01-10 | Biogen Idec Ma Inc. | Cholesterol-based media supplementals for cell culture |
Non-Patent Citations (1)
Title |
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SETH G, ET AL.: "Development of a new bioprocess scheme using frozen seed train intermediates to initiate CHO cell cu", BIOTECHNOL BIOENG., vol. 110, no. 5, JPN6018007051, 4 January 2013 (2013-01-04), pages 1376 - 1385, XP071104590, ISSN: 0004127685, DOI: 10.1002/bit.24808 * |
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