JP2016186463A - 血液分析装置および血液分析方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】リンパ球の計数とともに、細胞表面抗原の分類および計数を低コスト且つ短時間で行える血液分析装置および血液分析方法を提供する。
【解決手段】試料調製部１３は、血液検体１０１に、赤血球を溶血する溶血剤１１２およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ４抗原を標識する蛍光標識抗体試薬１１３を混合して第１測定試料を調製する。光源部２２１は、フローセル２１１を流れる第１測定試料に光を照射する。受光部２３１、２４３、２５２は、それぞれ、光の照射により第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光を受光する。処理部２１は、第１散乱光情報および第２散乱光情報を用いて第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、第１蛍光情報を用いて第１測定試料中のＣＤ４陽性Ｔ細胞を分類して計数する。
【選択図】図１
【解決手段】試料調製部１３は、血液検体１０１に、赤血球を溶血する溶血剤１１２およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ４抗原を標識する蛍光標識抗体試薬１１３を混合して第１測定試料を調製する。光源部２２１は、フローセル２１１を流れる第１測定試料に光を照射する。受光部２３１、２４３、２５２は、それぞれ、光の照射により第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光を受光する。処理部２１は、第１散乱光情報および第２散乱光情報を用いて第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、第１蛍光情報を用いて第１測定試料中のＣＤ４陽性Ｔ細胞を分類して計数する。
【選択図】図１
Description
本発明は、血液検体の血球を計数する血液分析装置および血液分析方法に関する。
血液検体中に含まれる細胞表面抗原の状態を分析することは、疾病の診断において有効である。たとえば、ＨＩＶ（Human Immunodeficiency Virus）に感染した被験者では、病状の進行に伴い血液中のＣＤ４陽性Ｔ細胞の数が減少する。血液検体中のＣＤ４陽性Ｔ細胞の数に基づいて、ＨＩＶに対する感染および病状の進行を診断できる。特許文献１には、白血球を認識する第１蛍光標識抗体、好中球系細胞の成熟段階に応じて変化する抗原を認識する第２蛍光標識抗体、および、幼若顆粒球系細胞の成熟段階に応じて変化する抗原を認識する第３蛍光標識抗体を使用し、散乱光強度と３種類の蛍光によって成熟度の異なる幼若顆粒球を分類し計数する方法が記載されている。
特許文献１に記載の方法では、細胞表面抗原の分類および計数にあたり種々の蛍光標識抗体試薬を準備する必要がある。また、測定前に、血液検体に塩化アンモニウムをベースとした溶血剤を混和し、さらに遠心分離によって赤血球の除去や血小板の除去を行うため、測定試料を調製するために煩雑な前処理が必要であった。このため、細胞表面抗原の分類および計数にコストが嵩み、且つ、長時間を要していた。
本発明の第１の態様に係る血液分析装置は、血液検体に、赤血球を溶血する溶血剤および血球の所定の表面抗原を標識する蛍光標識抗体試薬を混合して第１測定試料を調製する試料調製部と、試料調製部により調製された第１測定試料を流すフローセルと、フローセルを流れる第１測定試料に光を照射する光源部と、光の照射により第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光をそれぞれ受光する受光部と、第１散乱光に基づく第１散乱光情報および第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、第１蛍光に基づく第１蛍光情報を用いて第１測定試料中の所定の表面抗原を有する血球を分類して計数する処理部と、を備える。
本発明の第２の態様に係る血液分析方法は、血液検体に、赤血球を溶血する溶血剤および血球の所定の表面抗原を標識する蛍光標識抗体試薬を混合して第１測定試料を調製し、調製した第１測定試料をフローセルに流し、フローセルを流れる第１測定試料に光を照射し、光の照射により第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光をそれぞれ検出し、第１散乱光に基づく第１散乱光情報および第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、第１蛍光に基づく第１蛍光情報を用いて第１測定試料中の所定の表面抗原を有する血球を分類して計数する。
本発明によれば、リンパ球の計数とともに、細胞表面抗原の分類および計数を低コスト且つ短時間で行える血液分析装置および血液分析方法を提供できる。
＜実施形態１＞
図１に示すように、血液分析装置１００は、測定部１０と情報処理部２０を備える。測定部１０は、測定制御部１１と、記憶部１２と、試料調製部１３と、光学検出部１４と、電気抵抗式検出部１５と、信号処理回路１６と、を備える。情報処理部２０は、処理部２１と、記憶部２２と、表示部２３と、入力部２４と、を備える。
図１に示すように、血液分析装置１００は、測定部１０と情報処理部２０を備える。測定部１０は、測定制御部１１と、記憶部１２と、試料調製部１３と、光学検出部１４と、電気抵抗式検出部１５と、信号処理回路１６と、を備える。情報処理部２０は、処理部２１と、記憶部２２と、表示部２３と、入力部２４と、を備える。
測定制御部１１は、たとえばＣＰＵである。測定制御部１１は、測定部１０の各部が出力する信号を受信し、測定部１０の各部を制御する。測定制御部１１は、情報処理部２０と通信を行う。記憶部１２は、ＲＯＭ、ＲＡＭ、ハードディスク等である。測定制御部１１は、記憶部１２に記憶されたプログラムに基づいて処理を実行する。
試料調製部１３には、希釈液１１１と、溶血剤１１２と、蛍光標識抗体試薬１１３と、溶血剤１１４と、染色液１１５とをそれぞれ収容する容器が接続されている。希釈液１１１は、光学検出部１４のフローセル２１１と、電気抵抗式検出部１５のフローセルとに測定試料を流すためのシース液としても用いられる。
溶血剤１１２は、赤血球を溶血する。溶血剤１１２は、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドを０．９４ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライドを０．１３ｍＭ、ＢＯ−２０ＳＶを０．１３ｇ、クエン酸（無水）を５ｍＭ、クエン酸３Ｎａ２水和物を５ｍＭ（ｐＨ７．０）、ＮａＣｌを適量（３００ｍＯｓｍ）、および、精製水を１Ｌ含む。
蛍光標識抗体試薬１１３は、血球の表面抗原を標識する。蛍光標識抗体試薬１１３は、後述する光源部２２１から出射される光により励起されて所定波長の蛍光を発する蛍光色素と、血球の表面抗原と結合する抗体とを有する。蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が血球の表面抗原と結合することにより、血球の表面抗原が標識される。実施形態１の蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体は、ＣＤ４抗原と結合する抗体である。したがって、実施形態１では、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ４抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。
溶血剤１１４は、赤血球を溶血する。溶血剤１１４は、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドを３４．１ｍＭ、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライドを１．７ｍＭ、ＥＤＴＡ−２Ｋを１．０ｇ／Ｌ、ｐＨ５．０のリン酸緩衝液を２０ｍＭ、ＮａＣｌを適量、および、精製水を１Ｌ含む。染色液１１５は、核のない赤血球を染色せず、マラリア原虫の核酸を染色する。
試料調製部１３は、患者から採取された末梢血である血液検体１０１を受け付ける。試料調製部１３は、血液検体１０１と、希釈液１１１と、溶血剤１１２と、蛍光標識抗体試薬１１３とを混合して、第１測定に用いるための第１測定試料を調製する。第１測定試料の調製において、血液検体１０１に含まれる赤血球が溶血され、血液検体１０１に含まれるＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面抗原が標識される。試料調製部１３は、血液検体１０１と、希釈液１１１と、溶血剤１１４と、染色液１１５とを混合して、第２測定に用いるための第２測定試料を調製する。第２測定試料の調製において、血液検体１０１に含まれる赤血球の細胞膜が部分的に溶解し、マラリア感染赤血球内のマラリア原虫の核酸が染色液１１５により染色される。試料調製部１３は、血液検体１０１と希釈液１１１を混合して、第３測定に用いるための第３測定試料を調製する。
第１測定試料の調製において、希釈液１１１による希釈倍率を変更した上で、溶血剤１１２に代えて溶血剤１１４が混合されても良い。この場合も、血液検体１０１に含まれる赤血球を溶血できる。しかしながら、上記のように溶血剤１１４を用いる方が第１測定の精度を高めることができるため、第１測定試料の調製においては、溶血剤１１２ではなく溶血剤１１４を用いるのが望ましい。
第１および第２測定試料は、流路を介して光学検出部１４に送られる。第３測定試料は、流路を介して電気抵抗式検出部１５に送られる。
光学検出部１４は、フローサイトメトリー法により、第１測定試料に基づいて第１測定を行い、第２測定試料に基づいて第２測定を行う。光学検出部１４は、フローセル２１１と、光源部２２１と、受光部２３１、２４３、２５２と、を備える。フローセル２１１には、第１測定の際に第１測定試料が流され、第２測定の際に第２測定試料が流される。
光源部２２１は、第１測定においてフローセル２１１を流れる第１測定試料に光を照射し、第２測定においてフローセル２１１を流れる第２測定試料に光を照射する。光源部２２１からの光が第１測定試料に照射されると、第１測定試料中の血球から第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光が生じる。光源部２２１からの光が第２測定試料に照射されると、第２測定試料中の血球から第３散乱光、第４散乱光および第２蛍光が生じる。第１測定において、受光部２３１、２４３、２５２は、それぞれ、第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光を受光する。第２測定において、受光部２３１、２４３、２５２は、それぞれ、第３散乱光、第４散乱光および第２蛍光を受光する。受光部２３１、２４３、２５２は、それぞれ受光した光に基づく信号を信号処理回路１６に出力する。光学検出部１４の詳細な構成については、追って図２を参照して説明する。
電気抵抗式検出部１５は、シースフローＤＣ検出法により、第３測定試料に基づいて第３測定を行う。電気抵抗式検出部１５は、電気抵抗式検出部１５のフローセルに流れる第３測定試料に電圧を印加し、血球が通過することによる電圧の変化を捉えて血球を検出する。電気抵抗式検出部１５は、検出信号を信号処理回路１６に出力する。
信号処理回路１６は、受光部２３１、２４３、２５２から出力された信号に基づいて、血球に対応する波形を抽出し、波形のピーク値、幅、面積等を算出する。信号処理回路１６は、第１散乱光、第２散乱光、第３散乱光、第４散乱光、第１蛍光、および第２蛍光に基づく信号から得られた波形のピーク値を、それぞれ、第１散乱光情報、第２散乱光情報、第３散乱光情報、第４散乱光情報、第１蛍光情報、および第２蛍光情報として測定制御部１１に出力する。信号処理回路１６は、電気抵抗式検出部１５から出力された信号に基づいて血球に対応する波形を抽出し、波形のピーク値を血球情報として測定制御部１１に出力する。
測定制御部１１は、第１〜第３測定の際に信号処理回路１６から出力された情報を記憶部１２に記憶する。第１〜第３測定が終わると、測定制御部１１は、記憶部１２に記憶した情報を、測定データとして情報処理部２０に送信する。
処理部２１は、たとえばＣＰＵである。処理部２１は、情報処理部２０の各部が出力する信号を受信し、情報処理部２０の各部を制御する。処理部２１は、測定部１０と通信を行う。記憶部２２は、ＲＯＭ、ＲＡＭ、ハードディスク等である。処理部２１は、記憶部２２に記憶されたプログラムに基づいて処理を実行する。
処理部２１は、第１散乱光情報と第２散乱光情報を用いて、第１測定試料中の血球を少なくともリンパ球、単球および顆粒球に分類して計数する。処理部２１は、第１蛍光情報と第２散乱光情報を用いて、第１測定試料中のＣＤ４陽性Ｔ細胞を分類して計数する。処理部２１は、第１蛍光情報と第２散乱光情報を用いて、第１測定試料中の好酸球を分類して計数する。顆粒球は、好中球および好酸球からなることにより、処理部２１は、顆粒球の分類と好酸球の分類に基づいて、第１測定試料中の好中球を分類して計数する。処理部２１は、第３散乱光情報と第２蛍光情報を用いて、第２測定試料中のマラリア感染赤血球を計数する。処理部２１は、血球情報を用いて、第３測定試料中の赤血球および血小板を計数する。処理部２１による詳細な処理については、追って図３を参照して説明する。
表示部２３は、情報を表示するディスプレイであり、入力部２４は、マウスやキーボードである。処理部２１は、測定結果を記憶部２２に記憶するとともに表示部２３に表示する。処理部２１は、入力部２４を介してオペレータからの指示を受け付ける。
図２に示すように、光学検出部１４は、シースフロー系２１０と、ビームスポット形成系２２０と、前方散乱光受光系２３０と、側方散乱光受光系２４０と、蛍光受光系２５０と、を備える。光学検出部１４の光学系は、図２に示す構成以外にも適宜変更可能である。
シースフロー系２１０は、フローセル２１１を備える。フローセル２１１は、透光性を有する材料によって管状に構成されている。第１および第２測定試料は、シース液に包まれた状態で、フローセル２１１内に流される。第１および第２測定試料に含まれる粒子は、一列に整列した状態でフローセル２１１内を通る。
ビームスポット形成系２２０は、光源部２２１から出射された光が、コリメータレンズ２２２と集光レンズ２２３を通って、フローセル２１１内を流れる第１および第２測定試料に照射されるよう構成される。光源部２２１は、半導体レーザ光源である。光源部２２１から出射される光は、青色波長帯域のレーザ光である。光源部２２１から出射される光の波長は、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下に設定される。実施形態１では、光源部２２１から出射される光の波長は、約４０５ｎｍである。
上述したように、第１測定試料に光が照射されると、第１測定試料中の血球から、第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光が生じる。第２測定試料に光が照射されると、第２測定試料中の血球から、第３散乱光、第４散乱光および第２蛍光が生じる。実施形態１では、第１および第３散乱光は、前方散乱光であり、第２および第４散乱光は、側方散乱光である。前方散乱光は、粒子の大きさに関する情報を反映し、側方散乱光は、粒子の内部情報を反映し、蛍光は、粒子の染色度合いを反映する。フローセル２１１に照射された光のうち、粒子に照射されずにフローセル２１１を透過した光は、ビームストッパ２２４により遮断される。
前方散乱光受光系２３０は、第１および第３散乱光を受光部２３１で受光するように構成されている。受光部２３１は、フォトダイオードである。受光部２３１は、受光した第１および第３散乱光の強度に応じた電気信号を出力する。側方散乱光受光系２４０は、第２および第４散乱光を、側方集光レンズ２４１により集光し、ダイクロイックミラー２４２で反射させ、受光部２４３で受光するよう構成されている。受光部２４３は、フォトダイオードである。受光部２４３は、受光した第２および第４散乱光の強度に応じた電気信号を出力する。
蛍光受光系２５０は、側方集光レンズ２４１により集光され、ダイクロイックミラー２４２を透過した第１および第２蛍光を、分光フィルタ２５１を通して、受光部２５２で受光するよう構成されている。第１および第２測定試料から生じる蛍光は、受光部２５２に受光される。具体的には、好酸球から生じる自家蛍光と、蛍光標識抗体試薬１１３から生じる蛍光と、染色液１１５から生じる蛍光とは、何れもダイクロイックミラー２４２と分光フィルタ２５１を透過し、受光部２５２に受光される。受光部２５２は、アバランシェフォトダイオードである。受光部２５２は、受光した蛍光の強度に応じた電気信号を出力する。
次に、血液分析装置１００による処理について図３のフローチャートを参照して説明する。
図３に示すように、測定制御部１１は、ステップＳ１０１〜Ｓ１０６において、試料調製部１３を制御して測定試料の調製を行い、光学検出部１４と電気抵抗式検出部１５を制御して測定を行う。具体的には、ステップＳ１０１において、第１測定試料が調製され、ステップＳ１０２において、光学検出部１４により第１測定が行われる。ステップＳ１０３において、第２測定試料が調製され、ステップＳ１０４において、光学検出部１４により第２測定が行われる。ステップＳ１０５において、第３測定試料が調製され、ステップＳ１０６において、電気抵抗式検出部１５により第３測定が行われる。第１〜第３測定により得られる第１〜第４散乱光情報および第１、第２蛍光情報は、測定部１０の記憶部１２に記憶される。
ステップＳ１０７において、測定制御部１１は、第１〜第３測定で取得した情報を、測定データとして情報処理部２０に送信する。ステップＳ２０１において、処理部２１は、測定部１０から測定データを受信すると、ステップＳ２０２以下の処理を実行する。
ステップＳ２０２において、処理部２１は、３種類の白血球、すなわち、リンパ球、単球および顆粒球の分類および計数を行う。具体的には、処理部２１は、第１散乱光情報および第２散乱光情報に基づいて、図４（ａ）に示すスキャッタグラム３１０を作成し、スキャッタグラム３１０に領域３１１〜３１３を設定する。スキャッタグラム３１０において、縦軸は第１散乱光情報を示し、横軸は第２散乱光情報を示す。領域３１１〜３１３は、それぞれ、リンパ球、単球および顆粒球を含むとされる領域である。
続いて、処理部２１は、領域３１１〜３１３に含まれる粒子を、それぞれ、リンパ球、単球および顆粒球に分類する。処理部２１は、領域３１１〜３１３に含まれる粒子を計数することにより、リンパ球、単球および顆粒球の数を取得する。処理部２１は、リンパ球、単球および顆粒球の数を合計することにより、白血球の数を取得する。
ステップＳ２０２では、説明の便宜上、スキャッタグラム３１０が作成され、スキャッタグラム３１０に領域３１１〜３１３が設定されている。しかしながら、スキャッタグラム３１０と領域３１１〜３１３が必ずしも作成される必要はなく、領域３１１〜３１３に含まれる粒子がデータ処理により分類および計数されても良い。
後述する処理においても同様である。すなわち、ステップＳ２０３においても、スキャッタグラム３２０と領域３２１、３２２が必ずしも作成される必要はなく、領域３２１、３２２に含まれる粒子がデータ処理により分類および計数されても良い。ステップＳ２０６においても、スキャッタグラム３３０と領域３３１〜３３３が必ずしも作成される必要はなく、領域３３１〜３３３の粒子がデータ処理により分類および計数されても良い。後述する実施形態２のステップＳ２１１においても、図７（ｂ）に示すスキャッタグラム３２０と領域３２１、３２２が必ずしも作成される必要はなく、領域３２１、３２２に含まれる粒子がデータ処理により分類および計数されても良い。
ステップＳ２０２において、第１散乱光情報と、第２散乱光情報と、蛍光情報とを３軸とするスキャッタグラムが作成されても良い。こうすると、ステップＳ２０２で設定するリンパ球、単球および顆粒球を含むとされる領域と、後述するステップＳ２０３で設定する好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞を含むとされる領域とを、１つのスキャッタグラムに対して設定できる。
ステップＳ２０３において、処理部２１は、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の分類および計数を行う。具体的には、処理部２１は、第２散乱光情報および第１蛍光情報に基づいて、図４（ｂ）に示すスキャッタグラム３２０を作成し、スキャッタグラム３２０に領域３２１、３２２を設定する。スキャッタグラム３２０において、縦軸は第２散乱光情報を示し、横軸は第１蛍光情報を示す。領域３２１、３２２は、それぞれ、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞を含むとされる領域である。
ここで、好酸球は自家蛍光を発する。したがって、好酸球に対応する粒子は、スキャッタグラム３２０において、他の粒子よりも蛍光が大きい位置に分布する。ＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面抗原は、第１測定試料の調製において、蛍光標識抗体試薬１１３により標識されている。したがって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞も、スキャッタグラム３２０において、他の粒子よりも蛍光が大きい位置に分布する。好酸球とＣＤ４陽性Ｔ細胞とでは、粒子の内部情報を反映する値、すなわち第２散乱光情報の値が異なっている。よって、スキャッタグラム３２０に、好酸球に対応する領域３２１と、ＣＤ４陽性Ｔ細胞に対応する領域３２２とを設定できる。スキャッタグラム３２０の縦軸は第２散乱光情報とされたが、粒子の大きさに関する情報、すなわち第１散乱光情報であっても良い。
続いて、処理部２１は、領域３２１、３２２に含まれる粒子を、それぞれ、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞に分類する。処理部２１は、領域３２１、３２２に含まれる粒子を計数することにより、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得する。
上述したように、リンパ球、単球および顆粒球の分類および計数と、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の分類および計数とを、１回の測定で行うことができる。すなわち、これら血球の分類および計数を、第１測定試料をフローセル２１１に１回流す間に得られた光学情報に基づいて行うことができる。したがって、分類および計数を迅速に行うことができる。
上述したように、試料調製部１３により血液検体１０１から１測定試料が調製され、調製された第１測定試料が光学検出部１４により測定される。したがって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の分類および計数を行うために、複雑な前処理を行う必要がないため、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の分類および計数を低コスト且つ短時間で行える。オペレータによる前処理が必要ないため、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の分類および計数の結果のばらつきを抑制できる。
ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得するために、白血球の数を求めるための装置と、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を求めるための装置とを別々に用意する必要がない。すなわち、白血球の数を求めるための装置で得られた白血球の数に、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を求めるための装置で得られたＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を掛けて、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得する必要がない。血液分析装置１００によれば、１つの装置だけでＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得できる。
ＨＩＶの感染者では、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数が減少することが知られている。したがって、取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を、ＨＩＶに対する感染および病状の診断に役立てることができる。図４（ｂ）の領域３２２に基づいてＣＤ４陽性Ｔ細胞を正確に分類できるため、精度の高いＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得できる。したがって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を診断に役立てる場合に、診断の精度を高めることができる。その他、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数が増減する疾病においても、取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を診断に役立てることができる。
ステップＳ２０４において、処理部２１は、好中球の分類および計数を行う。具体的には、処理部２１は、ステップＳ２０２で取得した顆粒球の分類から、ステップＳ２０３で取得した好酸球の分類を引くことにより、好中球を分類する。すなわち、処理部２１は、ステップＳ２０２で顆粒球と見なされたスキャッタグラム３１０上の粒子から、ステップＳ２０３で好酸球と見なされた粒子を除くことにより、スキャッタグラム３１０上において好中球を含むとされる領域を設定する。処理部２１は、スキャッタグラム３１０において、好中球を含むとされる領域に含まれる粒子を計数することにより、好中球の数を取得する。好中球の数は、顆粒球の数から好酸球の数を引くことにより取得しても良い。
ＨＩＶの感染者では、好中球の数が減少することが知られている。したがって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数に加えて、取得した好中球の数を用いることにより、ＨＩＶに対する感染および病状の診断をより詳細に行える。その他、好中球の数が増減する疾病においても、取得した好中球の数を診断に役立てることができる。
ステップＳ２０５において、処理部２１は、各白血球の比率、すなわち、リンパ球、単球、好中球、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を算出する。具体的には、処理部２１は、ステップＳ２０２〜Ｓ２０４で取得したリンパ球、単球、好中球および好酸球の数を、ステップＳ２０２で取得した白血球の数で割ることにより、それぞれ、リンパ球、単球、好中球および好酸球の比率を算出する。処理部２１は、ステップＳ２０３で取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を、当該ステップＳ２０５で取得したリンパ球の数で割ることにより、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を算出する。
ステップＳ２０６において、処理部２１は、マラリア感染赤血球および白血球の分類および計数を行う。具体的には、処理部２１は、第３散乱光情報および第２蛍光情報に基づいて、図４（ｃ）に示すスキャッタグラム３３０を作成し、スキャッタグラム３３０に領域３３１〜３３３を設定する。スキャッタグラム３３０において、縦軸は第３散乱光情報を示し、横軸は第２蛍光情報を示す。領域３３１〜３３３は、それぞれ、マラリア感染赤血球、白血球およびゴーストを含むとされる領域である。領域３３３のゴーストは、マラリアに感染していない赤血球を含む。続いて、処理部２１は、領域３３１、３３２に含まれる粒子を、それぞれ、マラリア感染赤血球および白血球に分類する。処理部２１は、領域３３１、３３２に含まれる粒子を計数することにより、マラリア感染赤血球および白血球の数を取得する。
マラリア感染赤血球の数を取得できるため、被検者がマラリアに罹患しているか否かの判断、および、治療中の被検者においてマラリアが完治したか否かの判断を行うことができる。後述するマラリア感染赤血球の比率を用いても、これらの判断を行うことができる。ＣＤ４陽性Ｔ細胞およびマラリア感染赤血球の数により、ＨＩＶ、結核、マラリアといった所謂三大感染症のうち２つの疾病、すなわちＨＩＶとマラリアについての診断を行うことができる。また、マラリア感染赤血球の測定を、白血球の測定を行う検出部、すなわち光学検出部１４により行うことができるため、血液分析装置１００の構成を簡素にできる。
ステップＳ２０７において、処理部２１は、各白血球の数、すなわち、リンパ球、単球、好中球、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を取得する。具体的には、処理部２１は、ステップＳ２０６で取得した白血球の数に、ステップＳ２０５で取得したリンパ球、単球、好中球および好酸球の比率を掛けることにより、それぞれ、リンパ球、単球、好中球および好酸球の数を算出する。処理部２１は、当該ステップＳ２０７で取得したリンパ球の数に、ステップＳ２０５で取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を掛けることにより、ＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を算出する。ステップＳ２０７で取得された血球の数は、後述する画面４００の表示に用いられる。
ステップＳ２０７では、ステップＳ２０６で取得された白血球の数にステップＳ２０５で取得された比率を掛けることにより、各白血球の数が取得された。しかしながら、これに限らず、他の測定試料を用いて行った他の測定により白血球の数を取得し、他の測定により取得した白血球の数を用いて、ステップＳ２０７において各白血球の数を取得するようにしても良い。
他の測定は、たとえば、有核赤血球および白血球を分類および計数するための測定であっても良い。この場合、試料調製部１３は、血液検体１０１と、他の溶血剤と、他の染色液とを混合することにより他の測定試料を調製する。他の測定試料の調製において、赤血球は溶血され、有核赤血球および白血球の核酸や細胞小器官が染色される。他の測定試料は、第１および第２測定試料と同様、フローセル２１１に流される。光を照射して他の測定試料中の血球から生じる前方散乱光と蛍光に基づいてスキャッタグラムが作成される。作成されたスキャッタグラムに領域が設定されることにより、有核赤血球および白血球の分類および計数が行われる。
ステップＳ２０８において、処理部２１は、第３測定によって取得された血球情報に基づいて、赤血球および血小板の数を計数し、ヘマトクリット値の算出を行う。
ステップＳ２０９において、処理部２１は、マラリア感染赤血球の比率を算出する。具体的には、処理部２１は、まず、ステップＳ２０６で取得したマラリア感染赤血球の数と、ステップＳ２０８で取得した赤血球の数とを、同じ容量に応じた値に合わせる。たとえば、これら２つの数が、血液検体１０１の１μＬ中に含まれる個数に換算される。そして、処理部２１は、単位調整後のマラリア感染赤血球の数を、単位調整後の赤血球の数で割ることにより、比率を算出する。
ステップＳ２１０において、処理部２１は、処理部２１の処理によって取得された血球の数等を含む画面４００を表示部２３に表示する。こうして、血液分析装置１００の処理が終了する。
図５に示すように、画面４００は、リスト４０１、４０２と、図４（ａ）〜（ｃ）に示すスキャッタグラム３１０〜３３０とを備える。
リスト４０１、４０２において、単位が“10^2/uL”または“10^4/uL”となっているデータは、所定量の血液検体１０１に含まれる血球の数を示している。リスト４０１は、上から順に、ステップＳ２０６で取得された白血球の数と、ステップＳ２０８で取得された赤血球の数、ヘマトクリット値および血小板の数と、ステップＳ２０６で取得されたマラリア感染赤血球の数と、ステップＳ２０９で取得されたマラリア感染赤血球の比率と、を表示する。リスト４０２は、上から順に、ステップＳ２０７で取得された好中球、リンパ球、単球、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の数と、ステップＳ２０５で取得された好中球、リンパ球、単球、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率と、を表示する。
リスト４０１に表示される白血球の数は、ステップＳ２０２で取得される白血球の数であっても良く、リスト４０２に表示されるリンパ球、単球、好中球、好酸球およびＣＤ４陽性Ｔ細胞の数は、ステップＳ２０２〜Ｓ２０４で取得される各血球の数であっても良い。ただし、ステップＳ２０６で取得される白血球の数およびステップＳ２０７で取得される各血球の数の方が、ステップＳ２０２〜Ｓ２０４で取得される数よりも精度の高いものとなり得る。したがって、リスト４０１に表示される白血球の数は、上記のようにステップＳ２０６で取得される白血球の数であるのが望ましく、リスト４０２に表示される血球の数は、上記のようにステップＳ２０７で取得される血球の数であるのが望ましい。
表示部２３に、リンパ球、単球、好中球、好酸球、ＣＤ４陽性Ｔ細胞およびマラリア感染赤血球の数および比率が表示されるため、オペレータは、これらの数値を視覚的に把握できる。これらの数値は１つの画面４００に表示されるため、オペレータは、表示された数値の比較を円滑に行うことができる。
次に、実際に取得されたＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率の精度を検証する。
この検証では、異なる被検者から採取された１５の血液検体に基づいて、実施形態１によって取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率と、比較例によって取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率とを比較した。比較例では、血液検体に対して前処理を行い、前処理後の血液検体を、汎用フローサイトメータを用いて測定した。
図６の縦軸は、実施形態１により取得されたＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率を示す。図６の横軸は、比較例により取得されたＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率である。図６のグラフには、実施形態１による比率と、比較例による比率とをパラメータとして、１５の血液検体に対応する点がプロットされている。図６のグラフには、１５の血液検体に対応する点の近似直線が示されている。図６には、横軸をｘとし縦軸をｙとした場合の近似直線の式、および、実施形態１による比率と比較例による比率との相関係数ｒの値が示されている。近似直線の傾きと相関係数の値は、何れも１に近づくほど、実施形態１による比率と比較例による比率との相関性が高くなる。
図６に示すように、実施形態１による比率と比較例による比率との相関性は高い。したがって、実施形態１によるＣＤ４陽性Ｔ細胞の比率は、比較例と同程度の精度を有すると言える。
＜実施形態１の変更例＞
実施形態１では、蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体は、ＣＤ４抗原と結合する抗体であったが、これに限らず、他の抗原と結合する抗体であっても良い。たとえば、蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体は、ＣＤ３抗原、ＣＤ８抗原、ＣＤ１４抗原、ＣＤ１９抗原、ＣＤ４５抗原などに結合する抗体でも良い。
実施形態１では、蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体は、ＣＤ４抗原と結合する抗体であったが、これに限らず、他の抗原と結合する抗体であっても良い。たとえば、蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体は、ＣＤ３抗原、ＣＤ８抗原、ＣＤ１４抗原、ＣＤ１９抗原、ＣＤ４５抗原などに結合する抗体でも良い。
蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、ＣＤ８抗原に結合する抗体である場合、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ８抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。この場合に調製された第１測定試料に基づいて第１測定が行われると、図７（ａ）、（ｂ）に示すスキャッタグラム３１０、３２０が作成される。この場合も、領域３１１〜３１３、３２１が設定可能であるため、実施形態１と同様の白血球の分類を行うことができる。図７（ｂ）において、領域３２２は、ＣＤ８陽性Ｔ細胞を含むとされる領域である。したがって、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の分類および計数が可能となる。
一般に、ＨＩＶの病状の進行にともなって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比が変化する。したがって、取得したＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を、ＨＩＶに対する感染および病状の診断に役立てることができる。また、図７（ｂ）の領域３２２に基づいてＣＤ８陽性Ｔ細胞を正確に分類できるため、精度の高いＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を取得できる。したがって、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を診断に役立てる場合に、診断の精度を高めることができる。ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比を、１回の測定で取得する場合については、追って実施形態２で説明する。
蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、ＣＤ１９抗原に結合する抗体である場合、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞の表面に発現しているＣＤ１９抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。この場合も、実施形態１と同様、スキャッタグラム３１０、３２０の領域３１１〜３１３、３２１に基づいて、白血球の分類を行うことができる。また、スキャッタグラム３２０において、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞を含む領域３２２を設定できるため、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞の分類および計数が可能となる。
ＣＤ１９陽性Ｂ細胞は抗体を産生する細胞であり、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞が多いほど免疫グロブリンが多く出ている状態であるため、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞の数は臨床的に意義が高いと言える。したがって、取得したＣＤ１９陽性Ｂ細胞の数を病状の診断に役立てることができる。
この他、蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、それぞれ、ＣＤ３抗原、ＣＤ１４抗原、ＣＤ４５抗原に結合する抗体である場合も、図７（ｃ）、（ｄ）、図８（ａ）〜（ｄ）に示すように、血球の分類および計数が可能となる。
蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、ＣＤ３抗原に結合する抗体である場合、ＣＤ３陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ３抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。この場合に調製された第１測定試料に基づいて第１測定が行われると、図７（ｃ）、（ｄ）に示すスキャッタグラム３１０、３２０が作成される。この場合も、領域３１１〜３１３、３２１が設定可能であるため、実施形態１と同様の白血球の分類を行うことができる。図７（ｄ）において、領域３２２は、ＣＤ３陽性Ｔ細胞を含むとされる領域である。したがって、ＣＤ３陽性Ｔ細胞の分類および計数が可能となる。
蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、ＣＤ１４抗原に結合する抗体である場合、単球の表面に発現しているＣＤ１４抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。この場合に調製された第１測定試料に基づいて第１測定が行われると、図８（ａ）、（ｂ）に示すスキャッタグラム３１０、３２０が作成される。この場合も、領域３１１〜３１３、３２１が設定可能であるため、実施形態１と同様の白血球の分類を行うことができる。図８（ｂ）において、領域３２２は、単球を含むとされる領域である。したがって、スキャッタグラム３２０を用いても、単球の分類および計数が可能となる。
蛍光標識抗体試薬１１３に含まれる抗体が、ＣＤ４５抗原に結合する抗体である場合、白血球の表面に発現しているＣＤ４５抗原が、蛍光標識抗体試薬１１３により標識される。ＣＤ４５抗原は、白血球に共通の表面抗原である。この場合に調製された第１測定試料に基づいて第１測定が行われると、図８（ｃ）、（ｄ）に示すスキャッタグラム３１０、３２０が作成される。この場合、好酸球からは、自家蛍光と蛍光標識抗体試薬１１３による蛍光とが生じるため、実施形態１よりも、領域３２１の位置が第１蛍光の大きい方向に移動する。この場合も、領域３１１〜３１３、３２１が設定可能であるため、実施形態１と同様の白血球の分類を行うことができる。また、図８（ｄ）において、白血球を含むとされる領域３２２は、白血球全体に対応するように設定可能である。したがって、スキャッタグラム３２０を用いても、白血球全体の分類および計数が可能となる。
＜実施形態２＞
図９（ａ）に示すように、実施形態２では、実施形態１と比較して、試料調製部１３に蛍光標識抗体試薬１１６を収容する容器が接続されている。蛍光標識抗体試薬１１６は、蛍光標識抗体試薬１１３と同様、血球の表面抗原を標識する。蛍光標識抗体試薬１１６は、光源部２２１から出射される光により励起されて、蛍光標識抗体試薬１１３とは異なる波長の蛍光を発する蛍光色素と、血球の表面抗原と結合する抗体とを有する。実施形態２の蛍光標識抗体試薬１１６に含まれる抗体は、ＣＤ８抗原と結合する抗体である。したがって、実施形態２では、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ８抗原が、蛍光標識抗体試薬１１６により標識される。
図９（ａ）に示すように、実施形態２では、実施形態１と比較して、試料調製部１３に蛍光標識抗体試薬１１６を収容する容器が接続されている。蛍光標識抗体試薬１１６は、蛍光標識抗体試薬１１３と同様、血球の表面抗原を標識する。蛍光標識抗体試薬１１６は、光源部２２１から出射される光により励起されて、蛍光標識抗体試薬１１３とは異なる波長の蛍光を発する蛍光色素と、血球の表面抗原と結合する抗体とを有する。実施形態２の蛍光標識抗体試薬１１６に含まれる抗体は、ＣＤ８抗原と結合する抗体である。したがって、実施形態２では、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の表面に発現しているＣＤ８抗原が、蛍光標識抗体試薬１１６により標識される。
蛍光標識抗体試薬１１６に含まれる抗体は、ＣＤ４抗原およびＣＤ８抗原以外の抗原と結合する抗体であっても良い。
実施形態２では、第１測定試料の調製において、さらに蛍光標識抗体試薬１１６が混合される。すなわち、試料調製部１３は、血液検体１０１と、希釈液１１１と、溶血剤１１２と、蛍光標識抗体試薬１１３、１１６とを混合して、第１測定試料を調製する。これにより、血液検体１０１に含まれるＣＤ４陽性Ｔ細胞の表面抗原に加えて、さらに血液検体１０１に含まれるＣＤ８陽性Ｔ細胞の表面抗原も標識される。
図９（ｂ）に示すように、実施形態２では、実施形態１と比較して、光学検出部１４の蛍光受光系２５０が、ダイクロイックミラー２５３と、分光フィルタ２５４と、受光部２５５と、を備える。ダイクロイックミラー２４２を透過した第１蛍光のうち、好酸球の自家蛍光と蛍光標識抗体試薬１１３による蛍光は、ダイクロイックミラー２５３を透過して、実施形態１と同様、受光部２５２により受光される。ダイクロイックミラー２４２を透過した第１蛍光のうち、蛍光標識抗体試薬１１６による蛍光は、ダイクロイックミラー２５３により反射され、分光フィルタ２５４を透過して、受光部２５５により受光される。受光部２５５は、アバランシェフォトダイオードである。
図１０に示すように、実施形態２の血液分析装置１００による処理では、実施形態１と比較して、ステップＳ２０４の後段に、ステップＳ２１１が追加されている。以下、実施形態１と異なる処理についてのみ説明する。
ステップＳ１０１において、上述したように、血液検体１０１と、希釈液１１１と、溶血剤１１２と、蛍光標識抗体試薬１１３、１１６とが混合され、第１測定試料が調製される。ステップＳ１０２において、光学検出部１４により第１測定が行われる。このとき、受光部２５５は、受光した蛍光に基づく信号を信号処理回路１６に出力し、信号処理回路１６は、受光部２５５の信号から得られた波形のピーク値を、第３蛍光情報として測定制御部１１に出力する。
ステップＳ２１１において、処理部２１は、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の分類および計数を行う。具体的には、処理部２１は、第２散乱光情報および第３蛍光情報に基づいて、図７（ｂ）に示すスキャッタグラム３２０と同様のスキャッタグラム３２０を作成し、スキャッタグラム３２０に領域３２１、３２２を設定する。このスキャッタグラム３２０において、縦軸は第２散乱光情報を示し、横軸は第３蛍光情報を示す。領域３２１、３２２は、それぞれ、好酸球およびＣＤ８陽性Ｔ細胞を含むとされる領域である。処理部２１は、領域３２２に含まれる粒子をＣＤ８陽性Ｔ細胞に分類し、領域３２２に含まれる粒子を計数することにより、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を取得する。
ステップＳ２０５において、処理部２１は、上述した各血球の比率に加えて、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の比率を算出する。具体的には、ステップＳ２１１で取得したＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を、当該ステップＳ２０５で取得したリンパ球の数で割ることにより、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の比率を算出する。また、ステップＳ２０５において、処理部２１は、ステップＳ２０３で取得したＣＤ４陽性Ｔ細胞の数を、ステップＳ２１１で取得したＣＤ８陽性Ｔ細胞の数で割ることにより、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比を算出する。
実施形態２によれば、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比を、第１測定試料に対する測定を１回行うだけで算出できる。上述したように、ＨＩＶの病状の進行にともなって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比が変化する。したがって、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比を円滑に取得しつつ、取得した比を、ＨＩＶに対する感染および病状の進行を診断する際に役立てることができる。
ステップＳ２０７において、処理部２１は、上述した各血球の数に加えて、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を算出する。具体的には、処理部２１は、当該ステップＳ２０７で取得したリンパ球の数に、ステップＳ２０５で取得したＣＤ８陽性Ｔ細胞の比率を掛けることにより、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の数を取得する。
図１１に示すように、実施形態２の画面４００は、実施形態１と比較して、さらにＣＤ８陽性Ｔ細胞の分類および計数に用いたスキャッタグラム３２０を備える。実施形態２のリスト４０２は、実施形態１と比較して、さらにＣＤ８陽性Ｔ細胞の数と、ＣＤ８陽性Ｔ細胞の比率と、ＣＤ４陽性Ｔ細胞とＣＤ８陽性Ｔ細胞の数の比と、を表示する。図１１の画面４００により、オペレータは、ＣＤ８陽性Ｔ細胞に関する各値を視覚的に把握できる。
１３ … 試料調製部
２１ … 処理部
２３ … 表示部
１００ … 血液分析装置
１１２ … 溶血剤
１１３、１１６ … 蛍光標識抗体試薬
２１１ … フローセル
２２１ … 光源部
２３１、２４３、２５２、２５５ … 受光部
４００ … 画面
２１ … 処理部
２３ … 表示部
１００ … 血液分析装置
１１２ … 溶血剤
１１３、１１６ … 蛍光標識抗体試薬
２１１ … フローセル
２２１ … 光源部
２３１、２４３、２５２、２５５ … 受光部
４００ … 画面
Claims (15)
- 血液検体に、赤血球を溶血する溶血剤および血球の所定の表面抗原を標識する蛍光標識抗体試薬を混合して第１測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部により調製された前記第１測定試料を流すフローセルと、
前記フローセルを流れる前記第１測定試料に光を照射する光源部と、
前記光の照射により前記第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光をそれぞれ受光する受光部と、
前記第１散乱光に基づく第１散乱光情報および前記第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて前記第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、前記第１蛍光に基づく第１蛍光情報を用いて前記第１測定試料中の前記所定の表面抗原を有する血球を分類して計数する処理部と、を備える血液分析装置。 - 前記処理部は、前記第１散乱光に基づく第１散乱光情報および前記第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて前記第１測定試料中の単球をさらに分類して計数する、請求項１に記載の血液分析装置。
- 前記処理部は、前記第１散乱光に基づく第１散乱光情報および前記第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて前記第１測定試料中の顆粒球をさらに分類して計数する、請求項１または２に記載の血液分析装置。
- 前記第１散乱光は前方散乱光であり、
前記第２散乱光は側方散乱光であり、
前記処理部は、前記側方散乱光に基づく第２散乱光情報および前記第１蛍光に基づく第１蛍光情報を用いて前記第１測定試料中の前記所定の表面抗原を有する血球を分類して計数する、請求項１ないし３の何れか一項に記載の血液分析装置。 - 前記所定の表面抗原を有する血球は、ＣＤ４陽性Ｔ細胞である、請求項１ないし４の何れか一項に記載の血液分析装置。
- 前記所定の表面抗原を有する血球は、ＣＤ８陽性Ｔ細胞である、請求項１ないし４の何れか一項に記載の血液分析装置。
- 前記所定の表面抗原を有する血球は、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞である、請求項１ないし４の何れか一項に記載の血液分析装置。
- 情報を表示する表示部を備え、
前記処理部は、計数した前記所定の表面抗原を有する血球の数に基づく情報を前記表示部に表示させる、請求項１ないし７の何れか一項に記載の血液分析装置。 - 前記処理部は、計数した前記リンパ球の数に基づく情報を前記表示部に表示させる、請求項８に記載の血液分析装置。
- 前記処理部は、計数した前記所定の表面抗原を有する血球の数に基づく情報と、計数した前記リンパ球の数に基づく情報とを含む画面を前記表示部に表示させる、請求項８または９に記載の血液分析装置。
- 前記処理部は、前記第１蛍光情報を用いて前記第１測定試料中の好酸球をさらに分類して計数する、請求項１ないし１０の何れか一項に記載の血液分析装置。
- 前記処理部は、前記顆粒球の計数および前記好酸球の計数に基づいて、前記第１測定試料中の好中球を計数する、請求項１１に記載の血液分析装置。
- 情報を表示する表示部を備え、
前記試料調製部は、前記血液検体に、赤血球を溶血する溶血剤およびマラリア原虫の核酸を染色する染色液を混合して第２測定試料を調製し、
前記受光部は、前記光の照射により前記第２測定試料中の血球から得られる第３散乱光および第２蛍光をそれぞれ受光し、
前記処理部は、前記第３散乱光に基づく第３散乱光情報および前記第２蛍光に基づく第２蛍光情報を用いて前記第２測定試料中のマラリア感染赤血球を分類して計数し、
前記処理部は、前記マラリア感染赤血球の計数結果を前記表示部に表示させる、請求項１ないし１２の何れか一項に記載の血液分析装置。 - 前記光源部は、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長の光を照射する、請求項１ないし１３の何れか一項に記載の血液分析装置。
- 血液検体に、赤血球を溶血する溶血剤および血球の所定の表面抗原を標識する蛍光標識抗体試薬を混合して第１測定試料を調製し、
調製した前記第１測定試料をフローセルに流し、
前記フローセルを流れる前記第１測定試料に光を照射し、
前記光の照射により前記第１測定試料中の血球から得られる第１散乱光、第２散乱光および第１蛍光をそれぞれ検出し、
前記第１散乱光に基づく第１散乱光情報および前記第２散乱光に基づく第２散乱光情報を用いて前記第１測定試料中のリンパ球を分類して計数し、
前記第１蛍光に基づく第１蛍光情報を用いて前記第１測定試料中の前記所定の表面抗原を有する血球を分類して計数する、血液分析方法。
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