JP2015529202A - オランザピンに対する抗体及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2012年8月21日に出願された米国仮出願第61/691,645号の利益を主張する。
本発明は、イムノアッセイの分野、特に、イムノアッセイにおいてオランザピンの検出のために使用され得る、オランザピンに結合する抗体に関する。
本発明は、オランザピンに結合する単離抗体を提供する。「抗体」という用語は、その抗原又は部分に結合することが可能な(本発明においては、抗精神病薬又はその代謝産物に結合することが可能な)特定のタンパク質を指す。抗体は、宿主、例えば、動物又はヒトに注射によって導入された可能性がある免疫原に反応して生成される。「抗体」という総称は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、及び抗体断片を含む。
上述の抗体を含む、アッセイキット(試薬キットとも称される)もまた提供され得る。代表的な試薬キットは、抗精神病薬オランザピンに結合する抗体、標識部分に連結された抗精神病薬の類似体又はその誘導体を含む複合体を含むことができ、任意選択で、既知の量の抗精神病薬又は関連する標準物を含む1つ以上の検量用試料をもまた含むことができる。
のように産生された抗体は、抗精神病薬を認識する/抗精神病薬に結合するために、イムノアッセイにおいて使用され得、これにより患者試料中の薬物の存在及び/又は量を検出する。好ましくは、アッセイ形式は、競合的イムノアッセイ形式である。数ある中でも、Hampton et al.(Serological Methods,A Laboratory Manual,APS Press,St.Paul,MN 1990)、及びMaddox et al.(J.Exp.Med.158:12111,1983)において、そのようなアッセイ形式及び他のアッセイが説明される。
アリピプラゾールに対する抗体
抗体17.3クローン3D7
17.3クローン3D7を指定されたハイブリドーマは、アリピプラゾールに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、17.3クローン3D7を指定する。mAb 17.3クローン3D7の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号41を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号42を指定する。mAb 17.3クローン3D7のVL内で、配列番号41のヌクレオチド136〜165は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号41のヌクレオチド211〜231は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号41のヌクレオチド328〜354は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 17.3クローン3D7のVH内で、配列番号42のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号42のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号42のヌクレオチド352〜375は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
17.3クローン5C7(第1)を指定されたハイブリドーマは、アリピプラゾールに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、17.3クローン5C7(第1)を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第1)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号45を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号46を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第1)のVL内で、配列番号45のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号45のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号45のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 17.3クローン5C7(第1)のVH内で、配列番号46のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号46のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号46のヌクレオチド352〜378は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
17.3クローン5C7(第2)を指定されたハイブリドーマは、アリピプラゾールに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、17.3クローン5C7(第2)を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第2)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号49を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号50を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第2)のVL内で、配列番号49のヌクレオチド130〜174は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号49のヌクレオチド220〜240は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号49のヌクレオチド337〜363は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 17.3クローン5C7(第2)のVH内で、配列番号50のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号50のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号50のヌクレオチド352〜390は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
17.3クローン5C7(第3)を指定されたハイブリドーマは、アリピプラゾールに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、17.3クローン5C7(第3)を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第3)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号53を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号54を指定する。mAb 17.3クローン5C7(第3)のVL内で、配列番号53のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号53のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号53のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 17.3クローン5C7(第3)のVH内で、配列番号54のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号54のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号54のヌクレオチド352〜366は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
オランザピンに対する抗体
抗体11.1クローン35
11.1クローン35を指定されたハイブリドーマは、オランザピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、11.1クローン35を指定する。mAb 11.1クローン35の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号9を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号10を指定する。mAb 11.1クローン35のVL内で、配列番号9のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号9のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号9のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 11.1クローン35のVH内で、配列番号10のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号10のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号10のヌクレオチド352〜366は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
11.1クローン61を指定されたハイブリドーマは、オランザピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、11.1クローン61を指定する。mAb 11.1クローン61の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号13を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号14を指定する。mAb 11.1クローン61のVL内で、配列番号13のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号13のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号13のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 11.1クローン61のVH内で、配列番号14のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号14のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号14のヌクレオチド352〜366は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
15.5クローン3F11(第1)を指定されたハイブリドーマは、オランザピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、15.5クローン3F11(第1)を指定する。mAb 15.5クローン3F11(第1)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列配列番号29を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号30を指定する。mAb 15.5クローン3F11(第1)のVL内で、配列番号29のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号29のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号29のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 15.5クローン3F11(第1)のVH内で、配列番号30のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号30のヌクレオチド205〜252は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号30のヌクレオチド355〜381は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
15.5クローン3F11(第2)を指定されたハイブリドーマは、オランザピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体、15.5クローン3F11(第2)を指定する。mAb 15.5クローン3F11(第2)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号33を、重鎖可変領域(VH)に配列番号34を指定する。mAb 15.5クローン3F11(第2)のVL内で、配列番号33のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号33のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号33のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 15.5クローン3F11(第2)のVH内で、配列番号34のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号34のヌクレオチド205〜261は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号34のヌクレオチド358〜381は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
15.5サブクローン4G9−1を指定されたハイブリドーマは、オランザピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、15.5サブクローン4G9−1を指定する。mAb 15.5サブクローン4G9−1の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号37を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号38を指定する。mAb 15.5サブクローン4G9−1のVL内で、配列番号37のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号37のヌクレオチド208〜228は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号37のヌクレオチド325〜351は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 15.5サブクローン4G9−1のVH内で、配列番号38のヌクレオチド130〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号38のヌクレオチド205〜252は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号38のヌクレオチド358〜381は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
クエチアピンに対する抗体
抗体13.2サブクローン89−3(第1)
13.2サブクローン89−3(第1)を指定されたハイブリドーマは、クエチアピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、13.2サブクローン89−3(第1)を指定する。mAb 13.2サブクローン89−3(第1)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号17を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号18を指定する。mAb 13.2サブクローン89−3(第1)のVL内で、配列番号17のヌクレオチド127〜174は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号17のヌクレオチド220〜240は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号17のヌクレオチド337〜363は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 13.2サブクローン89−3(第1)のVH内で、配列番号18のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号18のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号18のヌクレオチド352〜387は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
13.2サブクローン89−3(第2)を指定されたハイブリドーマは、クエチアピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、13.2サブクローン89−3(第2)を指定する。mAb 13.2サブクローン89−3(第2)の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号21を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号22を指定する。mAb 13.2サブクローン89−3(第2)のVL内で、配列番号21のヌクレオチド127〜174は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号21のヌクレオチド220〜240は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号21のヌクレオチド337〜363は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 13.2サブクローン89−3(第2)のVH内で、配列番号22のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号22のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号22のヌクレオチド367〜387は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
13.2サブクローン89−5を指定されたハイブリドーマは、クエチアピンに特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、13.2サブクローン89−5を指定する。mAb 13.2サブクローン89−5の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号25を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号26を指定する。mAb 13.2サブクローン89−5のVL内で、配列番号25のヌクレオチド127〜174は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号25のヌクレオチド220〜240は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号25のヌクレオチド337〜363は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 13.2サブクローン89−5のVH内で、配列番号26のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号26のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号26のヌクレオチド367〜387は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
リスペリドン/パリペリドンに対する抗体
抗体5_9
5_9と指定されたハイブリドーマは、リスペリドン(及びその代謝産物パリペリドン)に特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、5−9を指定する。mAb 5−9の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号1、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号2を指定する。mAb 5−9のVL内で、配列番号1のヌクレオチド130〜180は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号1のヌクレオチド226〜246は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号1のヌクレオチド343〜369は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 5−9のVH内で、配列番号2のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号2のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号2のヌクレオチド352〜366は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
5_5と指定されたハイブリドーマは、リスペリドン(及びその代謝産物パリペリドン)に特異的なモノクローナル抗体(mAb)を分泌する。抗体に、5−5を指定する。mAb 5−5の軽鎖可変領域(VL)のヌクレオチド配列に配列番号5を、重鎖可変領域(VH)のそれに配列番号6を指定する。mAb 5−5のVL内で、配列番号5のヌクレオチド130〜180は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号5のヌクレオチド226〜246は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号5のヌクレオチド343〜369は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。mAb 5−9のVH内で、配列番号6のヌクレオチド133〜162は第1の相補性決定領域(CDR1)を表し、配列番号6のヌクレオチド205〜255は第2の相補性決定領域(CDR2)を表し、配列番号6のヌクレオチド352〜366は第3の相補性決定領域(CDR3)を表す。
オランザピンのための競合的イムノアッセイ、並びにアリピプラゾール、オランザピン、クエチアピン、及びリスペリドン/パリペリドンのための多重競合的イムノアッセイ
オランザピン免疫原での一連の免疫原化に続いて、マウスの尾からの採血を、ELISAを使用して反応性について試験した。ハイブリドーマの上清もまた試験し、以下の表1及び2に示されるELISAデータは、いくつかのハイブリドーマの反応性を示す(融合パートナーはNSO細胞であった)。
Claims (26)
- 単離抗体又はその結合断片であって、オランザピンに結合し、
(i)
a)配列番号11、配列番号15、配列番号31、配列番号35、又は配列番号39のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
b)配列番号12、配列番号16、配列番号32、配列番号36、又は配列番号40のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
c)配列番号11のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、及び配列番号12のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
d)配列番号15のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、及び配列番号16のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
e)配列番号31のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、及び配列番号32のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
f)配列番号35のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、及び配列番号36のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、
g)配列番号39のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域、及び配列番号40のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む、単離抗体又はその断片と、からなる群から選択される抗体であるか、あるいは、
(ii)(i)の前記抗体によって結合されるエピトープと同じであるエピトープに対して競合する、単離抗体又はその結合断片。 - 前記抗体が、配列番号11、配列番号15、配列番号31、配列番号35、又は配列番号39との少なくとも80%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、軽鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、配列番号12、配列番号16、配列番号32、配列番号36、又は配列番号40との少なくとも80%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、アミノ酸配列配列番号11を有する軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号12を有する重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、アミノ酸配列配列番号15を有する軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号16を有する重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、アミノ酸配列配列番号31を有する軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号32を有する重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、アミノ酸配列配列番号35を有する軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号36を有する重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、アミノ酸配列配列番号39を有する軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号40を有する重鎖可変領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、
a)配列番号11のアミノ酸残基44〜54を含む軽鎖CDR1配列と、
b)配列番号11のアミノ酸残基70〜76を含む軽鎖CDR2配列と、
c)配列番号11のアミノ酸残基109〜117を含む軽鎖CDR3配列と、
d)配列番号12のアミノ酸残基45〜54を含む重鎖CDR1配列と、
e)配列番号12のアミノ酸残基69〜85を含む重鎖CDR2配列と、
f)配列番号12のアミノ酸残基118〜122を含む重鎖CDR3配列と、を含む、請求項1に記載の抗体。 - 前記抗体が、
a)配列番号15のアミノ酸残基44〜54を含む軽鎖CDR1配列と、
b)配列番号15のアミノ酸残基70〜76を含む軽鎖CDR2配列と、
c)配列番号15のアミノ酸残基109〜117を含む軽鎖CDR3配列と、
d)配列番号16のアミノ酸残基45〜54を含む重鎖CDR1配列と、
e)配列番号16のアミノ酸残基69〜85を含む重鎖CDR2配列と、
f)配列番号16のアミノ酸残基118〜122を含む重鎖CDR3配列と、を含む、請求項1に記載の抗体。 - 前記抗体が、
a)配列番号31のアミノ酸残基44〜54を含む軽鎖CDR1配列と、
b)配列番号31のアミノ酸残基70〜76を含む軽鎖CDR2配列と、
c)配列番号31のアミノ酸残基109〜117を含む軽鎖CDR3配列と、
d)配列番号32のアミノ酸残基44〜54を含む重鎖CDR1配列と、
e)配列番号32のアミノ酸残基69〜84を含む重鎖CDR2配列と、
f)配列番号32のアミノ酸残基119〜127を含む重鎖CDR3配列と、を含む、請求項1に記載の抗体。 - 前記抗体が、
a)配列番号35のアミノ酸残基44〜54を含む軽鎖CDR1配列と、
b)配列番号35のアミノ酸残基70〜76を含む軽鎖CDR2配列と、
c)配列番号35のアミノ酸残基109〜117を含む軽鎖CDR3配列と、
d)配列番号36のアミノ酸残基45〜54を含む重鎖CDR1配列と、
e)配列番号36のアミノ酸残基69〜87を含む重鎖CDR2配列と、
f)配列番号36のアミノ酸残基120〜127を含む重鎖CDR3配列と、を含む、請求項1に記載の抗体。 - 前記抗体が、
a)配列番号39のアミノ酸残基44〜54を含む軽鎖CDR1配列と、
b)配列番号39のアミノ酸残基70〜76を含む軽鎖CDR2配列と、
c)配列番号39のアミノ酸残基109〜117を含む軽鎖CDR3配列と、
d)配列番号40のアミノ酸残基44〜54を含む重鎖CDR1配列と、
e)配列番号40のアミノ酸残基69〜84を含む重鎖CDR2配列と、
f)配列番号40のアミノ酸残基120〜127を含む重鎖CDR3配列と、を含む、請求項1に記載の抗体。 - 前記抗体断片が、Fv、F(ab’)、F(ab’)2、scFv、ミニボディ(minibody)、及びダイアボディ(diabody)断片からなる断片の群から選択される、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項1に記載の抗体。
- 請求項1に記載の抗体を含む、アッセイキット。
- 請求項1に記載の抗体を含む、アッセイ装置。
- 前記装置が、側方流動アッセイ装置である、請求項17に記載のアッセイ装置。
- 試料中のオランザピンを検出する方法であって、前記方法が、
(i)試料を、検出可能なマーカーで標識された請求項1に記載の抗体と接触させる工程であって、前記標識された抗体及び試料中に存在するオランザピンが、標識された複合体を形成する、工程と、
(ii)前記試料中のオランザピンを検出するために、前記標識された複合体を検出する工程と、を含む、方法。 - 試料中のオランザピンを検出するための競合的イムノアッセイ方法であって、前記方法が、
(i)試料を、請求項1に記載の抗体と、及びオランザピン又はオランザピンの競合的結合パートナーと接触させる工程であって、前記抗体、及び前記オランザピン又はその競合的結合パートナーのうちの1つが、検出可能なマーカーで標識され、試料オランザピンが、前記オランザピン又はその競合的結合パートナーと、前記抗体への結合に対して競合する、工程と、
(ii)試料オランザピンを検出するために、前記標識を検出する工程と、を含む、方法。 - 前記オランザピン又はその競合的結合パートナーが、前記検出可能なマーカーで標識される、請求項20に記載の方法。
- 前記抗体が、検出可能なマーカーで標識される、請求項20に記載の方法。
- 前記イムノアッセイが、側方流動アッセイ装置において行われ、前記試料が、前記装置に適用される、請求項20に記載の方法。
- オランザピンに加えて、1つ以上の検体の存在を検出することを更に含む、請求項19又は20に記載の方法。
- 前記1つ以上の検体が、オランザピン以外の抗精神病薬である、請求項24に記載の方法。
- オランザピン以外の前記抗精神病薬が、リスペリドン、パリペリドン、クエチアピン、アリピプラゾール、及びその代謝産物からなる群から選択される、請求項25に記載の方法。
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