JP2015518163A - 少なくとも1つの取り外し可能な切片を有する電気泳動ゲルカセット - Google Patents
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Abstract
Description
・緩衝剤パッド322をトレイ300の緩衝剤パッドホルダー320a及び320bに入れる(図8)。
・裏打ちフィルム40の取り外し可能な切片210a及び210bをそれぞれ剥離タブ211a及び211bを引っ張ることによりカセット10から取り外すことにより、それぞれ支持フレーム30の緩衝剤スリット150a及び150bを通してゲル部材36を露出させる(図9)。
・サンプルウェルカバー50を取り外してサンプルウェル110を露出させる(図9)。
・カセット10をトレイ300上に載せ、支持フレーム30のアラインメントタグ180を相補的アラインメント構造体330に合わせて配置することで、カセット10のトレイ300上における適切な配向を保証する(図10)。
・サンプルを、例えばピペット360などによってサンプルウェル110中に装填する(図11)。
・電気泳動装置350を用いて電気泳動プロセスを実施する(図11)。
・剥離タブ211cを引っ張ることにより裏打ちフィルム40の取り外し可能な切片210cをカセット10から除去することにより、ゲル部材36の分離−ゾーンが支持フレーム30の分離−ゾーンウィンドウ160を通して露出される(図12a)。
・剥離タブ170を引っ張ることによって、取り付けられたゲル部材36と共に支持フレーム30を引き剥がす(図12b)。
図12cは、ハウジング20から引き剥がされた後の、支持フレーム30と取り付けられたゲル部材36とからなる電気泳動ゲルユニット35を示す。カセット10の物理的フォーマット及び次の例えば免疫ブロッティングなどのプロセスステップのための機器に起因するフォーマット要件に応じて、支持フレーム30とゲル部材36の、次のステップで使用しない部分を、場合により、図12cに破線で示されているように切り落として、例えばより小さい大きさの支持フレーム30とそれに取り付けられたゲル部材36の分離ゾーンを残してもよい。支持フレームの利益を維持するために、分離−ゾーンウィンドウの周りに支持フレームの充分な部分を残すべきであることに留意されたい。図13は電気泳動ゲルユニット35の一例を示し、図14〜17eに模式的に開示されている免疫ブロッティングフォーマットに適合させるために支持フレーム30及びゲル部材36の端部部分が除去されている。
これに関連して、用語剛性とは、殊に膜外形の歪みを回避するために平面内で、膜と比較してより剛性の高いフィルムのことをいう。膜410は、十分な結合特性を提供するように適切な方法で剛性のブロットフレーム420に取り付けることができる。一実施形態では膜410は2以上のプラスチックフィルムのラミネート層から形成され得、ブロット膜の1以上の部分がプラスチックフィルムの層間に差し込まれる。1以上のプラスチック層は1つの面接着層が設けられた剛性ポリマーフィルムからなり得、剛性ポリマーフィルムは例えばPETからなり得、接着層は例えばEVA層であり得る。
1.電気移送中電気泳動ゲルユニット35と膜ユニット400の全表面で均一な圧力を達成するために、第1のスポンジ部材480を第1のパネル510aの上に配置する。開示されている実施形態において、スポンジ部材は、パネル510aのアラインメント構造体と協同する任意のアラインメントホールを備えている(図17a)
2.膜ユニット400をスポンジ部材480の上に配置する(図17b)
3.ゲル部材36が膜410と適切に接触して配置されるように、電気泳動ゲルユニット35を膜ユニット400の上に配置する(図17c)
4.第2のスポンジ部材480を電気泳動ゲルユニット35の上に配置する(図17d)
5.第2のパネル510bをサンドイッチの上に配置し、電気ブロッティング移送プロセスの間合わせて保つ(図17e)。
前面と背面を有するハウジング内にゲル部材を含む電気泳動カセットを準備する、
電気泳動実験を行うための電気泳動カセットを支持するように配置された準備する、ここでトレイは電気泳動中少なくとも電気泳動カセットの分離ゾーンを支持するためのカセット支持面を含んでおり、カセット支持面は両脇に一対の緩衝剤パッドホルダーがあり、その各々は電気泳動カセットの背面の緩衝剤連結部分に対して噛み合い位置に緩衝剤パッドを保持するように配置されており、
緩衝剤パッドを緩衝剤パッドホルダー内に配置する、
電気泳動カセットをトレイ上の所定の位置に配置する、
電気泳動カセットの1以上のサンプルウェル中にサンプルを装填する、そして
緩衝剤パッド間に電場をかける。
1.カバー860を外す
2.サンプルをウェル880に加える
3.緩衝液を緩衝剤パッド870a及び870bに加える
4.電気泳動分離のためにプロセッサー装置に挿入する。
1.カバー950を外す
2.加工処理したゲルカードを、アラインメント構造体を用いてゲルカード800の前面に合体させる
3.ゲルカード背壁805の取り外し可能な切片865を除去してゲル部材850の背面へのアクセスを提供する
4.移送カード960のカバー980を外す
5.アラインメント構造体を用いてゲルカード800の背面に移送カード960を合体させる
6.ブロットプロセスのためにブロッター(図には示してない)に挿入する
7.全て切り離す
8.ブロットカードの緩衝剤パッド930を取り外して膜を遊離させる
9.インキュベーターに挿入する
10.ブロット結果を画像表示するためにプロセッサーに挿入する。
少なくとも1種の電気泳動ゲルカード、
少なくとも1種のブロット膜カード、
電気泳動ゲルカードを用いて電気泳動実験を行うための電気泳動装置、
分離されたサンプルを電気泳動ゲルカードからブロット膜カードに移すためのブロット移送ユニット、
電気泳動ゲルカード及びブロット膜カード内の分離されたサンプルの像を記録するためのイメージング装置
を含み、
電気泳動ゲルカード及びブロット膜カードは各々が、移送中の相互配置のための、また電気泳動ゲルカード及びブロット膜カード内の分離されたサンプルの機械的に整列された像を提供するためにイメージング装置内の相補的アラインメント構造体に関する配置のための、位置参照を規定するアラインメント構造体を備えた剛性支持体を含んでいる、
電気泳動システムが提供される。
Claims (17)
- 第1及び第2の面を有するゲル部材のためのゲル区画を規定する、第1及び第2の 面壁部材並びに1以上の側壁部材を含む電気泳動ゲルカセットであって、第1の面 壁部材は第2の面壁部材と比較して高いゲル粘着力を有していることにより、カセ ット内で成形されたゲル部材はカセットが開放されたとき高いゲル粘着力の面壁部 材に取り付けられたままで留まり、第1の面壁部材はゲル部材の第1の面の一部分 を露出させるために少なくとも1つの取り外し可能な切片を備えており、第1の面 壁部材の取り外し可能な切片は第1の面壁部材の取り外し可能でない部分と比較し てより低いゲル粘着力を有する、前記電気泳動ゲルカセットり。
- 側壁部材が面壁部材の1つと一体的に形成されてカセット本体を形成している、請求項1記載の電気泳動ゲルカセット。
- 1つの取り外し可能な切片が、ゲル部材の第1の面の本質的に分離ゾーンに対応す る部分を露出させるように配置されている、請求項1又は2記載の電気泳動ゲルカ セット。
- 1以上の取り外し可能な切片が、ゲル部材の第1の面の緩衝液接触部分を露出させ るように配置されている、請求項1乃至請求項3のいずれか1項記載の電気泳動ゲ ルカセット。
- 一体化された緩衝剤区画及び場合により電極を含む、請求項1乃至請求項3のいず れか1項に記載の電気泳動ゲルカセット。a
- 第1及び第2の面壁部材の少なくとも1つがプラスチックフィルムで形成されてい る、請求項1乃至請求項5のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の面壁部材が2以上のプラスチックフィルムのラミネート層で形成されており 、ゲル区画に面する第1の層に1以上の開口が形成されており、これら開口が第2 の層の1以上の剥離可能な切片により被覆される、請求項6記載の電気泳動ゲルカ セット。
- 第1の層が両面に接着層が設けられた剛性ポリマーフィルムからなり、第2の層が 剛性ポリマーフィルムからなる、請求項7記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の層が両面に接着性EVA層が設けられたPETフィルムからなり、第2の層 がPETフィルムからなる、請求項8記載の電気泳動ゲルカセット。
- 側壁部材が第2の面壁部材と一体的に形成されて、第1の面壁部材が取り外し可能 なように取り付けられる側壁の周りにリムを有するカセット本体を形成する、請求 項7乃至請求項9のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1及び第2の層の少なくとも1つがその取り外しを容易にするために剥離タブを 備えている、請求項6乃至請求項8のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の面壁部材が、カセットからの取り外しを容易にするためにゲルの周辺に高い ゲル粘着力を備えている、請求項1乃至請求項11のいずれか1項記載の電気泳動 ゲルカセット。
- プレキャストゲルを含む、請求項1乃至請求項12のいずれか1項記載の電気泳動 ゲルカセット。
- 第1及び第2の面壁部材の少なくとも1つが光学的に透明な材料からなり、カセッ トを開放することなくゲルの撮像が可能である、請求項1乃至請求項13のいずれ か1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の面壁部材が、カセットから取り外された後ゲル部材の形状を維持しその取り 扱いを容易にするように配置された剛性支持体として形成されている、請求項1乃 至請求項14のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の面壁部材が、カセットから取り外された後ゲルカセット及びゲル部材の整列のための位置参照を規定するアラインメント構造体を備えている、請求項1乃至請求項15のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
- 第1の面壁部材が識別コードを備えている、請求項1乃至請求項16のいずれか1項記載の電気泳動ゲルカセット。
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