JP2015510876A - 干渉ペプチド及び微生物の検出方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(i)微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)微生物M1とは異なる微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択され、
前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すことが理解されることを特徴とする干渉ペプチドに関する。
a)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbM2に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体である工程、
b)(i)微生物M2とは異なる微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)前記微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来し、前記少なくとも1個の結合パートナーのペプチド配列内に含まれる7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択される配列を有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、
前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すことが理解される工程、
c)前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbM2と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M2の存在を検出する工程を含むことを特徴とする方法に関する。
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物M2の前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)(i)微生物M2とは異なる微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)前記微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来し、前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列内に含まれる7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択される配列を有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、
前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すことが理解される工程、
c)前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M2の存在を検出する工程を含むことを特徴とする方法に関する。
(i)微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)前記微生物M1とは異なる微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択される配列を有する干渉ペプチドの使用であって、
生物サンプル内の検出する前記微生物M2を表す検体のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法において、前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すことが理解される使用に関する。
(i)微生物M2とは異なる微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択される配列を有する少なくとも1個の干渉ペプチドであって、
前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すことが理解される干渉ペプチドの使用を含むことを特徴とする、生物サンプル内の検出される微生物M2を表す検体のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法の特異性を改善するための方法に関する。
それらは微生物M2とは異なる微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1を有する、又はそれらは検出される微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2を有する、
配列S1とS2が互いに対してアラインメントされる、
配列S1とS2が7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示す、
配列S1とS2が同一の長さを有すること、又はそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸長相違を示す。
配列番号1の配列を有するY7E−1、配列番号2の配列を有するペプチドV7Eである配列S’を有するペプチド、
配列番号2の配列を有するV7E、配列番号1の配列を有するペプチドY7E−1である配列S’を有するペプチド、
配列番号3の配列を有するA8E、配列番号4の配列を有するペプチドE8Eである配列S’を有するペプチド、
配列番号5の配列を有するY7E−2、配列番号4の配列を有するペプチドE8Eである配列S’を有するペプチド、
配列番号6の配列を有するD8E、配列番号4の配列を有するペプチドE8Eである配列S’を有するペプチド、
配列番号4の配列を有するE8E、配列番号3の配列を有するペプチドA8E又は配列番号5の配列を有するY7E−2又は配列番号6の配列を有するD8Eである配列S’を有するペプチド、
配列番号7の配列を有するE8L−1、配列番号8の配列を有するペプチドE8L−2である配列S’を有するペプチド、及び
配列番号8の配列を有するE8L−2、配列番号7の配列を有するペプチドE8L−1である配列S’を有するペプチド。
(i)微生物M1の抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S1、及び
(ii)微生物M1とは異なる微生物M2の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S2から選択される配列を有する干渉ペプチドであって、
前記配列S1とS2が互いに対してアラインメントされること、それらが7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すこと、及び配列番号2の配列を有するペプチドV7Eが除外されることが理解される干渉ペプチドに関する。
それらは同一である、
それらがアナログを示す場合、それらは最大1個又は2個のアナログを示す、
保存的置換によりそれらは最大3個のアナログを示す、
欠失によりそれらは最大1個又は2個のアナログを示す。
保存的置換によりそれらは同一又は類似である、
それらがアナログを示すとき、アナログの最大1個又は2個がある。
a)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbM2に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体である工程、
b)前に定義した少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、配列S1が検出される微生物M2と異なる微生物M1に属し、配列S2が前記少なくとも1個の結合パートナーのペプチド配列中に含まれることが理解される工程、
c)前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbM2と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M2の存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
a)前に定義したペプチド配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程、
b)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbMに対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体であり、ペプチド配列Sを含む工程、
c)ペプチド配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbMと結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物Mの存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
a)前に定義したペプチド配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程、
b)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbM’に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体であり、前に定義したペプチド配列S’を含む工程、
c)ペプチド配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbM’と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M’の存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物M2の前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)前に定義した少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、配列S1が検出される微生物M2と異なる微生物M1に属し、配列S2が前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列中に含まれることが理解される工程、
c)前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M2の存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物Mの前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)前に定義した配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、前記配列Sが前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列内に含まれる工程、
c)配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物Mの存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物M’の前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)前に定義した配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、対応する配列S’が前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列内に含まれることが理解される工程、
c)配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナー(一又は複数)の間で形成される複合体の測定により微生物M’の存在を検出する工程を含む又はそれらからなる。
・例えば比色定量分析、蛍光又は発光により検出可能なシグナルを生成する酵素、例えばホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ又はグルコース−6−リン酸デヒドロゲナーゼ、
・発色団、例えば蛍光、発光又は色素化合物、
・放射性分子、例えば32P、35S又は125I、及び
・Alexas又はフィコシアニンなどの蛍光分子。
HCV又は黄色ブドウ球菌による感染を診断するためのイムノアッセイの特異性を改善するため、本発明による2つの干渉ペプチドを定義した。
HCV、肺炎レンサ球菌、枯草菌、又はシュードモナス・エントモフィラ若しくはシュードモナス・プチダGB−1菌株による感染を診断するためのイムノアッセイの特異性を改善するため、本発明による数個の干渉ペプチドを定義した。
HIV−1又は肺炎マイコプラズマによる感染を診断するためのイムノアッセイの特異性を改善するため、本発明による干渉ペプチドを定義した。
C型肝炎ウイルス感染の診断は、第3世代免疫酵素血清検査であり特定検査に関してタンパク質コア、NS3、及びNS4、及びNS5を対象とする抗体を実証するイムノアッセイを使用して、現在実施されている。これらの検出抗HCV抗体は現在又は過去の感染の証拠である。
参照文献
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Kricka LJ, 1999, Clinical Chemistry 45(7): 942-956
Fields GB, Noble RL., 1990, Int J Pept Protein Res., 35(3):161-214
Merrifield, 1962, J. Am. Chem. Soc. 85:2149
Ng and Henikoff, 2001, Genome Res 11: 863-874
Tate J and Ward G, 2004, Clin Biochem Rev, 25: 105-120
Claims (27)
- 微生物Mの抗原タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列Sを有する干渉ペプチドであって、前記配列Sが微生物Mと異なる微生物M’の標的タンパク質のペプチド配列に由来する7−12個のアミノ酸のペプチド配列S’に対してアラインメントされ、前記配列SとS’が7−12個のアミノ酸と少なくとも4個の同一又は類似隣接アミノ酸のそれらの長さにわたり少なくとも50%の同一性を示すこと、それらの長さが同一であること、あるいはそれらが前記配列の一端及び/又は他端に分布する1個又は2個のアミノ酸相違を示すこと、及び配列番号2の配列を有するペプチドV7Eが除外されることが理解される、干渉ペプチド。
- 配列SとS’が8−10個のアミノ酸を有することを特徴とする、請求項1に記載の干渉ペプチド。
- 微生物M’がウイルス又は細菌であることを特徴とする、請求項1又は2に記載の干渉ペプチド。
- 微生物M’がウイルスであり微生物Mが細菌であることを特徴とする、請求項1から3の何れか一項に記載の干渉ペプチド。
- 微生物M’が細菌であり微生物Mがウイルスであることを特徴とする、請求項1から3の何れか一項に記載の干渉ペプチド。
- ウイルスがC型肝炎ウイルス(HCV)であることを特徴とする、請求項3から5の何れか一項に記載の干渉ペプチド。
- HCVウイルスと異なる微生物が、黄色ブドウ球菌(staphylococcus aureus)、肺炎レンサ球菌(streptococcus pneumoniae)、枯草菌(bacillus subtilis)、シュードモナス・エントモフィラ(pseudomonas entomophila)及びシュードモナス・プチダ(pseudomonas putida)(GB−1菌株)から選択されることを特徴とする、請求項6に記載の干渉ペプチド。
- 配列Sを有するペプチドが、配列番号1の配列を有するY7E−1、配列番号3の配列を有するA8E、配列番号5の配列を有するY7E−2、配列番号6の配列を有するD8E及び配列番号4の配列を有するE8Eから選択されることを特徴とする、請求項1から3の何れか一項に記載の干渉ペプチド。
- ウイルスがヒト免疫不全ウイルスHIV−1であることを特徴とする、請求項3から5の何れか一項に記載の干渉ペプチド。
- 検出するウイルスと異なる微生物が肺炎マイコプラズマ(mycoplasma pneumoniae)であることを特徴とする、請求項9に記載の干渉ペプチド。
- 配列Sを有するペプチドが、配列番号7の配列を有するE8L−1及び配列番号8の配列を有するE8L−2から選択されることを特徴とする、請求項10に記載の干渉ペプチド。
- 検出される微生物Mの標的タンパク質に対する少なくとも1個の抗体AbMの検出を含むか又はその検出からなる、生物サンプル内の微生物Mの存在のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法において、
a)請求項1から11の何れか一項に記載のペプチド配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程、
b)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbMに対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体であり、ペプチド配列Sを含む工程、
c)ペプチド配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbMと結合パートナーの間で形成される複合体の測定により微生物Mの存在を検出する工程
を含むか又はそれらからなる、方法。 - 検出される微生物M’の標的タンパク質に対する少なくとも1個の抗体AbM’の検出を含むか又はその検出からなる、生物サンプル内の微生物M’の存在のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法において、
a)請求項1から11の何れか一項に記載のペプチド配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程、
b)イムノアッセイに必要とされる、検出される前記少なくとも1個の抗体AbM’に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程であって、前記少なくとも1個の結合パートナーが、抗体が対象とする前記標的タンパク質に由来するか又は標的タンパク質自体であり、前に定義したペプチド配列S’を含む工程、
c)ペプチド配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)抗体AbM’と結合パートナーの間で形成される複合体の測定により微生物の存在を検出する工程
を含むか又はそれらからなる、方法。 - 検出される微生物Mの少なくとも1個の標的タンパク質の検出を含むか又はその検出からなる、生物サンプル内の微生物Mの存在のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法において、
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物Mの前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)請求項1から11の何れか一項に記載の配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、前記配列Sが前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列内に含まれる工程、
c)配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナーの間で形成される複合体の測定により微生物Mの存在を検出する工程
を含むか又はそれらからなる、方法。 - 検出される微生物M’の少なくとも1個の標的タンパク質の検出を含むか又はその検出からなる、生物サンプル内の微生物M’の存在のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法において、
a)イムノアッセイに必要とされる、前記微生物M’の前記少なくとも1個の標的タンパク質に対する少なくとも1個の結合パートナーを提供する工程、
b)請求項1から11の何れか一項に記載の配列Sを有する少なくとも1個の干渉ペプチドを提供する工程であって、対応する配列S’が前記少なくとも1個の標的タンパク質のペプチド配列内に含まれることが理解される工程、
c)配列Sを有する前記少なくとも1個の干渉ペプチドの存在下でイムノアッセイを実施する工程、及び
d)標的タンパク質と結合パートナーの間で形成される複合体の測定により微生物M’の存在を検出する工程
を含むか又はそれらからなる、方法。 - 生物サンプル内の検出される微生物M又はM’を表す検体のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法における、請求項1から11の何れか一項に記載のペプチド配列Sを有する干渉ペプチドの使用。
- 生物サンプル内の検出される微生物M又はM’を表す検体のインビトロイムノアッセイベースの検出のための方法の特異性を改善するための方法において、イムノアッセイの実施中に、請求項1から11の何れか一項に記載のペプチド配列Sを有する少なくとも1個のペプチドを使用することを含むことを特徴とする、方法。
- 検出される微生物M又はM’がウイルス又は細菌である、請求項12から17の何れか一項に記載の方法又は使用。
- 検出される微生物M又はM’がウイルスであり、対応する微生物M’又はMが細菌であることを特徴とする、請求項12から17の何れか一項に記載の方法又は使用。
- 検出される微生物M又はM’が細菌であり、対応する微生物M’又はMがウイルスであることを特徴とする、請求項12から17の何れか一項に記載の方法又は使用。
- 配列番号1の配列を有するペプチドY7E−1。
- 配列番号3の配列を有するペプチドA8E。
- 配列番号4の配列を有するペプチドE8E。
- 配列番号5の配列を有するペプチドY7E−2。
- 配列番号6の配列を有するペプチドD8E。
- 配列番号7の配列を有するペプチドE8L−1。
- 配列番号8の配列を有するペプチドE8L−2。
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