JP2015502135A - 多発性硬化症の治療のためのａｐｃ媒介寛容誘導 - Google Patents
多発性硬化症の治療のためのａｐｃ媒介寛容誘導 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015502135A JP2015502135A JP2014532366A JP2014532366A JP2015502135A JP 2015502135 A JP2015502135 A JP 2015502135A JP 2014532366 A JP2014532366 A JP 2014532366A JP 2014532366 A JP2014532366 A JP 2014532366A JP 2015502135 A JP2015502135 A JP 2015502135A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- nucleic acid
- protein
- multiple sclerosis
- mog
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 title description 5
- 230000024664 tolerance induction Effects 0.000 title description 3
- 108010000123 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Proteins 0.000 claims abstract description 55
- 102000002233 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Human genes 0.000 claims abstract description 55
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 30
- KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[6-amino-2-[[2-[[2-[[5-amino-2-[[2-[[1-[2-[[6-amino-2-[(2,5-diamino-5-oxopentanoyl)amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)p Chemical compound C1CCN(C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CCC(N)=O)C1C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 102000047918 Myelin Basic Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 102000016202 Proteolipids Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 108010010974 Proteolipids Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 29
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 28
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 26
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 17
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 claims description 16
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 16
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 16
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 16
- 101710190014 Dendritic cell-specific transmembrane protein Proteins 0.000 claims description 15
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 15
- 102100024230 Dendritic cell-specific transmembrane protein Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 claims description 13
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 claims description 13
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 230000001400 myeloablative effect Effects 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 claims description 10
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 claims description 9
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 claims description 9
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 6
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 52
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 42
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 29
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 23
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 20
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 18
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 15
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 14
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 14
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 12
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 12
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 12
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 12
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 12
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 12
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 11
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 11
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 10
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 10
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 8
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 6
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 4
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 3
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 3
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101001018318 Homo sapiens Myelin basic protein Proteins 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 101100077708 Mus musculus Mog gene Proteins 0.000 description 3
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- JGPOSNWWINVNFV-UHFFFAOYSA-N carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester Chemical compound C=1C(OC(=O)C)=CC=C2C=1OC1=CC(OC(C)=O)=CC=C1C2(C1=C2)OC(=O)C1=CC=C2C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JGPOSNWWINVNFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 102000054064 human MBP Human genes 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000009258 tissue cross reactivity Effects 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 3
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 2
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 2
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 2
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 2
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 2
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 2
- 102000008763 Neurofilament Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010088373 Neurofilament Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- -1 dacarbazine) Chemical compound 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 2
- 210000005044 neurofilament Anatomy 0.000 description 2
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 208000010713 partial hind limb paralysis Diseases 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHYQAEFVHIZFLR-UHFFFAOYSA-L 4-(4-diazonio-3-methoxyphenyl)-2-methoxybenzenediazonium;dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].C1=C([N+]#N)C(OC)=CC(C=2C=C(OC)C([N+]#N)=CC=2)=C1 LHYQAEFVHIZFLR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- FVLVBPDQNARYJU-XAHDHGMMSA-N C[C@H]1CCC(CC1)NC(=O)N(CCCl)N=O Chemical compound C[C@H]1CCC(CC1)NC(=O)N(CCCl)N=O FVLVBPDQNARYJU-XAHDHGMMSA-N 0.000 description 1
- 101100421200 Caenorhabditis elegans sep-1 gene Proteins 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101001115699 Homo sapiens Myelin-oligodendrocyte glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000766306 Homo sapiens Serotransferrin Proteins 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 101100120552 Mus musculus Foxp3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100394237 Mus musculus Hand1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101001115695 Mus musculus Myelin-oligodendrocyte glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102000055324 Myelin Proteolipid Human genes 0.000 description 1
- 108700021862 Myelin Proteolipid Proteins 0.000 description 1
- 102300037678 Myelin basic protein isoform 1 Human genes 0.000 description 1
- 102300037676 Myelin basic protein isoform 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100026784 Myelin proteolipid protein Human genes 0.000 description 1
- 101710094913 Myelin proteolipid protein Proteins 0.000 description 1
- 102300057843 Myelin proteolipid protein isoform 1 Human genes 0.000 description 1
- 102300057841 Myelin proteolipid protein isoform DM-20 Human genes 0.000 description 1
- 102300056698 Myelin-oligodendrocyte glycoprotein isoform 1 Human genes 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 238000007800 T cell depleted bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007238 Transferrin Receptors Human genes 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000002502 anti-myelin effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229940045687 antimetabolites folic acid analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045688 antineoplastic antimetabolites pyrimidine analogues Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000007844 axonal damage Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000009109 curative therapy Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 208000010726 hind limb paralysis Diseases 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012333 histopathological diagnosis Methods 0.000 description 1
- 102000052611 human IL6 Human genes 0.000 description 1
- 102000047972 human MOG Human genes 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000008629 immune suppression Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000002418 meninge Anatomy 0.000 description 1
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 108010087487 myelin basic protein 85-99 Proteins 0.000 description 1
- 239000000537 myeloablative agonist Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- OSTGTTZJOCZWJG-UHFFFAOYSA-N nitrosourea Chemical compound NC(=O)N=NO OSTGTTZJOCZWJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 1
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 108700019620 rat Foxp3 Proteins 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003440 semustine Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Natural products CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- 230000003614 tolerogenic effect Effects 0.000 description 1
- AYNNSCRYTDRFCP-UHFFFAOYSA-N triazene Chemical compound NN=N AYNNSCRYTDRFCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 1
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/095—Sulfur, selenium, or tellurium compounds, e.g. thiols
- A61K31/10—Sulfides; Sulfoxides; Sulfones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
- A61K48/0058—Nucleic acids adapted for tissue specific expression, e.g. having tissue specific promoters as part of a contruct
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
【課題】【解決手段】本発明は、自己抗原タンパク質、即ち、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の発現を制御する樹状細胞特異的プロモーターを含む、多発性硬化症の治療法において使用するための導入遺伝子発現構築物、特に自己不活性化レンチウイルスベクターに関する。【選択図】図1
Description
多発性硬化症(multiple sclerosis, MS又はencephalomyelitis disseminata)の原因は不明であり、疾患の発生につながる発病過程は完全には理解されていない。現在の知識では、ミエリン成分又はミエリン産生細胞を標的とする、T細胞に媒介される自己免疫性の病因が支持されている。MS及びその動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)は、中枢神経系(central nervous system, CNS)内の抗原提示細胞(antigen presenting cells, APCs)及び自己反応性リンパ球の活性化及び蓄積を特徴とする。自己反応性T細胞により認識されることが知られている一部のミエリンタンパク質には、ミエリン塩基性タンパク質(myelin basic protein, MBP)、プロテオリピドタンパク質(proteolipid protein, PLP)、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質(myelin oligodendrocyte glycoprotein, MOG)が含まれる。
ミエリン塩基性タンパク質(myelin basic protein, MBP)は、オリゴデンドロサイト及びシュワン細胞のミエリン鞘の主成分である。ヒトオルソログの遺伝的データは、米国国立生物工学情報センター(NCBI)において遺伝子ID 4155として公開されている。ヒトMBPタンパク質データは、UniProtにおいてP02686として利用できる。
プロテオリピドタンパク質(PLP、リポフィリン)は、中枢神経系由来の主要ミエリンタンパク質であり、ミエリンの多層構造の形成又は維持において重要な役割を果たす。ヒトオルソログの遺伝的データは、NCBI遺伝子ID 5354として公開されている。ヒトMBPタンパク質データは、UniProtにおいてP60201として利用できる。
ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質(MOG)は、ミエリン鞘に構造的完全性をもたらす上で役割を果たすと考えられる糖タンパク質である。ヒトオルソログの遺伝的データは、NCBI遺伝子ID 4340として公開されている。ヒトMBPタンパク質データは、UniProtにおいてQ16653として利用できる。
多発性硬化症の病因は、未だ完全に理解されておらず、現時点で利用可能な治癒的治療は存在しない。自家T細胞枯渇骨髄移植は、多発性硬化症患者に対する臨床試験において、効果があり有益であることが証明されている。しかしながら、自己反応性T細胞の再出現による疾患の再発は、特異的療法において、恒久的免疫寛容の誘導を考慮するべきであることを示唆している。しかしながら、幾つかの研究で実証されている抗ミエリンT細胞反応性パターン(抗原伝播)の動的変化、更には、改変ペプチドリガンドに基づく治療により寛容を安全に誘導することが困難であることから、多発性硬化症の抗原特異的免疫療法のための現行の戦略の有用性には疑問が生じている。
自己免疫疾患の標準的治療は、全身性免疫抑制に依存する。しかしながら、上述した困難はあるものの、病原体及び癌と戦う免疫系の能力を維持する、新規の抗原特異的な治療形態を設計することが重要である。例えば、以前の研究では、MOG又はPLPを発現する標準的なガンマレトロウイルスベクターにより形質導入した骨髄由来HSCが、マウスをEAEから保護可能であることが明らかとなっている。これらの研究者は、様々な造血細胞においてMOG発現を媒介可能な構成的プロモーターを用いており、有害な副作用を発生させる恐れがある。この制限を克服するため、Koらは、cd11cプロモーターをガンマレトロウイルスベクターに関連して用いて、MOG発現を樹状細胞(dendritic cells, DCs)に方向付けた。この戦略は疾患の発生を遅延させたが、EAEの発生を防止していない(Ko et al., 2010, Eur. J. Immunol. 40, 3499-3509)。
Dreschら(J. Immunology 2008, 181; 4495-4506)は、DC特異的DC-STAMPプロモーターからEGFP又はオボアルブミン(ovalbumin, OVA)を発現する自己不活性化(self-inactivating, SIN)レンチウイルスベクターによる造血幹細胞(hematopoietic stem cells, HSC)の形質導入が、DCsに対する導入遺伝子発現の転写標的化と、免疫寛容の抗原特異的誘導とをもたらすことを実証した。
Ko et al., 2010, Eur. J. Immunol. 40, 3499-3509
Dresch et al., J. Immunology 2008, 181; 4495-4506
本発明の目的は、MSにおける自己抗原反応性免疫プロセスに対する寛容の導入を可能とすることにより、確立した自己免疫プロセスを逆転し、症状を軽減し、多発性硬化症の進行を停止する手段及び方法を提供することである。
本発明の第1の態様によれば、核酸配列が提供される。この核酸配列は、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒトタンパク質に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードする発現配列を含む。前記発現配列は、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある。
本発明の第2の態様によれば、核酸配列を含むレンチウイルスが提供され、前記核酸配列は、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒトタンパク質に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードする発現配列を含む。
本発明の第3の態様によれば、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒトタンパク質に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードする発現核酸配列を含む、単離樹状細胞が提供される。
本発明の第4の態様によれば、脱髄疾患、特に多発性硬化症の治療のための医薬組成物が提供される。前記医薬組成物は、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒトタンパク質に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードする発現核酸配列を含んだ単離樹状細胞を含む。
本発明の他の態様によれば、多発性硬化症を治療する方法が提供され、当該方法は、必要とする患者に本発明による単離樹状細胞を提供することを含む。
更に、本発明は、患者の多発性硬化症を治療するための細胞調製物を生産する方法に関し、当該方法は、前記患者に由来する抗原提示細胞(APC)の調製物に、本発明による発現核酸配列を導入するステップを備える。
「APCの調製物」とは、本明細書での使用において、APCを富化した任意の調製物を示し得る。こうした調製物は、当該技術分野において周知であり、その生産方法は、通例のものであると考えられる。例示的且つ非限定的な調製物の一種は、骨髄由来造血幹細胞(bone marrow derived hematopoietic stem cells, BM-HSC)である。BM-HSC調製物を調製する方法は、周知且つ通例のものであり、特に本明細書において例示している。
本発明は、樹状細胞に対して特異的なプロモーター配列により駆動された、自己抗原をコードする導入遺伝子の樹上細胞における発現が、自己免疫疾患の発生を防止し得るだけでなく、確立された自己免疫プロセスを元に戻し、脱髄疾患の進行を停止することが可能であるという驚くべき発見に基づく。
本発明は、樹状細胞特異的プロモーターからのMSに関与する抗原を発現するベクターによる造血幹細胞(HSC)の生体外改変により、恒久的な抗原特異的寛容が誘導されることを実証する。
本発明によれば、樹状細胞特異的プロモーターの転写制御下にあるヒト自己抗原をコードする発現核酸配列が提供される。
本発明に関連するDC特異的プロモーター配列は、ヒト未熟樹状細胞において、その制御下にあるコード配列を構成的に発現する核酸配列である。好適なDC特異的プロモーター配列は、DC-STAMPプロモーター配列、又はDC-STAMP遺伝子の5’非翻訳領域である(Hartgers et al., Eur. J. Immunol. 2000; 30, 3585-90参照)。特に好適なDC特異的プロモーター配列は、SEQ ID 02の配列である。他の好適なDC特異的プロモーター配列は、SEQ ID 19の配列である(GenBank受入番号AF305068)。対象となる更に他のDC-STAMPプロモーター領域は、Dreschら(前掲)に記載の適切なプライマを用いて、全ゲノムDNAからPCRにより容易に増幅することができる。
一実施形態によれば、当該発現配列は、DC特異的プロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒト自己抗原、又はその一部をコードする。
一実施形態によれば、当該発現配列は、ミエリン塩基性タンパク質アイソフォーム1(SEQ ID 05及び20)又はそのフラグメントをコードする。他の実施形態によれば、当該発現配列は、ミエリン塩基性タンパク質アイソフォーム2(SEQ ID 35)、アイソフォーム3(SEQ ID 36)、アイソフォーム4(SEQ ID 06)、アイソフォーム5(SEQ ID 37)、アイソフォーム6(SEQ ID 38)、又はアイソフォーム7(SEQ ID 39)、或いはそのフラグメントをコードする。他の実施形態によれば、当該発現配列は、ミエリンプロテオリピドタンパク質アイソフォーム1(SEQ ID 07)又はそのフラグメントをコードする。他の実施形態によれば、当該発現配列は、ミエリンプロテオリピドタンパク質アイソフォームDM-20(SEQ ID 08)又はそのフラグメントをコードする。他の実施形態によれば、当該発現配列は、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質アイソフォーム1(SEQ ID 09)、アイソフォーム2(SEQ ID 10)、アイソフォーム3(SEQ ID 11)、アイソフォーム4(SEQ ID 12)、アイソフォーム5(SEQ ID 13)、アイソフォーム6(SEQ ID 14)、アイソフォーム7(SEQ ID 15)、アイソフォーム8(SEQ ID 16)、アイソフォーム9(SEQ ID 17)、又はアイソフォーム10(SEQ ID 18)、或いはそのフラグメントをコードする。
一実施形態によれば、発現核酸配列は、ヒト自己抗原の特定のポリペプチド部分のみをコードする。一実施形態において、前記ポリペプチド部分は、前記自己抗原の共通HLA Iエピトープを表す。他の実施形態において、前記ポリペプチド部分は、前記自己抗原の主要HLA Iエピトープを表す。一実施形態において、前記ポリペプチド部分は、前記自己抗原の共通HLA IIエピトープを表す。他の実施形態において、前記ポリペプチド部分は、前記自己抗原の主要HLA IIエピトープを表す。エピトープを予測する方法は、当該技術分野において公知であり、特にH.G.Rammensee、J.Bachmann、及びS.Stevanovic著の書籍「MHC Ligands and Peptide Motifs」に記載されている。
本発明において有用となり得る例示的且つ非限定的なMBP HLA Iエピトープには、MBP84-102、更に具体的にはMBP85-99(ENPVVHFFKNIVTPR、SEQ ID 21)(Hansen BE et al. Tissue Antigens. 2011 Mar;77(3):229-34)、MBP154-172(Martin R et al, J Immunol. 1990 Jul 15;145(2):540-8)、hMBP64-78(ARTAHYGSLPQKSHG、SEQ ID 22)、hMBP82-100(DENPVVHFFKNIVTPRTPP、SEQ ID 23)、hMBP111-129(LSRFSWGAEGQRPGFGYGG、SEQ ID 24)、及びhMBP138-151(HKGFKGVDAQGTLS、SEQ ID 25)(Kawamura K et al, J Immunol. 2008 Sep 1;181(5):3202-11)が含まれる。一部の実施形態では、本発明において使用されるポリヌクレオチド配列は、上述したMBP HLA Iエピトープの1つに含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を発現する。他の実施形態では、本発明において使用されるポリヌクレオチド配列は、上述したMBP HLA Iエピトープの1つ以上を発現する。
本発明において有用となり得る例示的且つ非限定的なPLP HLA Iエピトープには、ヒトPLP31-70(CGCGHEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLINVIHAFQYVI、SEQ ID 26)(Mangalam AK et al, Eur J Immunol. 2004 Jan;34(1):280-90)、更に具体的には40-60(GTEKLIETYFSKNYQDYEYLI、SEQ ID 27)(Pelfrey CM et al, J Neuroimmunol. 1993 Jul;46(1-2):33-42)、91-120(YTTGAVRQIFGDYKTTICGKGLSATVTGGQ、SEQ ID 28)、及び178-228(NTWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMYGVLPWNAFPGKVCGSNLLSICK、SEQ ID 29)が含まれる。一部の実施形態では、本発明において使用されるポリヌクレオチド配列は、上述したPLP HLA Iエピトープの1つに含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を発現する。他の実施形態では、本発明において使用されるポリヌクレオチド配列は、上述したPLP HLA Iエピトープの1つ以上を発現する。
本発明において有用となり得る例示的且つ非限定的なMOGエピトープには、マウスMOGエピトープ1-21、35-55、67-87、104-117、及び202-218(Mendel I et al, Eur J Immunol. 1995 Jul;25(7):1951-9)、及びヒトMOGエピトープ99-107(FFRDHSYQE、SEQ ID 30)、15-23(LVGDEVELP、SEQ ID 31)、83-91(LRIRNVRFS、SEQ ID 32)、120-128(YWVSPGVLV、SEQ ID 33)、及び40-48(YRPPFSRVV、SEQ ID 34)(Forsthuber TG et al, Journal of Immunology, 2001, 167:7119-7125)が含まれる。一部の実施形態では、本発明において使用されるポリヌクレオチド配列は、上述したMOG HLA Iエピトープの1つに含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を発現する。他の実施形態では、本発明において使用されるポリペプチド配列は、上述したMOG HLA Iエピトープの1つ以上を発現する。
他の実施形態において、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質のそれぞれの1つ以上の HLA Iエピトープを含むポリペプチドがコードされる。他の実施形態では、これら3つのタンパク質それぞれからの1つ以上の主要HLA Iエピトープが存在する。
一実施形態によれば、前記ポリペプチド部分は、少なくとも9、12、15、18、21、14、17、30、40、50、60、70、80、90、100、125、150、175個、又は少なくとも200個のアミノ酸の長さの連続したアミノ酸配列である。
一実施形態によれば、発現核酸配列は、単離DNA配列として提供される。非限定的な例として、こうした単離DNA配列は、プラスミド、コスミド、又はミニ染色体として提供される。
他の実施形態によれば、発現核酸は、ウイルスベクターとして提供される。非限定的な例として、こうしたウイルスベクターは、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、アデノ随伴ウイルス、又はレトロウイルスである。
一実施形態によれば、DC特異的プロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒト自己抗原をコードする発現核酸配列、又は前記発現核酸配列の逆相補的配列を含むレンチウイルスが提供される。
好適なレンチウイルスは、Loisら(Science 2002、295、868-872)が記述した自己不活性化(SIN)レンチウイルスである。SINレンチウイルスベクターが媒介する、HSCにおける導入遺伝子のゲノム組込みは、抗原を発現する「定常状態」の樹状細胞の一定の供給を支援する。非炎症状態の胸腺及び周辺における、こうした細胞による安定した抗原提示は、自己反応性T細胞を寛容化する可能性が高く、そのため、疾患の発生又は進行を防止する。例示的且つ非限定的なSINレンチウイルスの一種は、TATAボックスを含む、3’LTRのU3領域における欠失を含み、感染細胞内のプロウイルスにおいて、LTRの転写不活性化をもたらす(Myoshi H et al、J Virol. 1998 Oct;72(10):8150-7)。
本発明の他の態様は、本発明による発現核酸配列を含む単離樹状細胞に関する。
一実施形態において、樹状細胞は、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒト自己抗原をコードする発現核酸配列を含む。
本発明は、更に、患者から取得した抗原提示細胞を含むと共に、前記抗原提示細胞が本発明による核酸配列又は本発明によるウイルスを含むことを特徴とする細胞調製物を包含する。当該細胞調製物は、脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法において自家使用のために提供される。
一実施形態において、前記細胞調製物は、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質から選択される2種類又は3種類の異なるヒトタンパク質をコードする核酸配列を含む。
更に、本発明の範囲には、脱髄疾患、特に多発性硬化症の治療のための医薬組成物が含まれる。組成物は、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質の群から選択されるヒト自己抗原に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードする発現核酸配列を含んだ単離樹状細胞を含む。
本発明の更に他の態様によれば、脱髄疾患、特に多発性硬化症の治療法において使用する投薬計画が提供され、本発明の細胞調製物は、部分的骨髄破壊療法用の薬物と併せて投与される。
本発明の更に他の態様によれば、多発性硬化症を治療する方法が提供され、当該方法は、必要とする患者に本発明による単離樹状細胞を提供することを含む。
本発明の更に他の態様によれば、多発性硬化症を治療する方法が提供され、当該方法は、必要とする患者に本発明によるウイルスを提供することを含む。
特定の実施形態において、本発明の方法は、部分的骨髄破壊療法と併せて実施される。他の実施形態において、本発明の医薬組成物は、部分的骨髄破壊療法と併せた投与に適用される。同様に、本発明の生体外方法は、一部の実施形態において、部分的骨髄破壊療法と併せた投与に適用される医薬組成物を生産し得る。「部分的骨髄破壊療法と併せた」という用語は、医薬組成物及び部分的骨髄破壊療法の同時投与と、医薬組成物及び部分的骨髄破壊療法の時間的に近い投与との両方を含む。一般に、医薬組成物及び部分的骨髄破壊療法は、互いの48時間以内に投与される。
上述した部分的骨髄破壊療法は、好ましくは、ブスルファン等の部分的骨髄破壊剤の投与を含み得る。他の実施形態において、以下の作用剤の1つ以上が投与される: アルキル化剤(例えば、ナイトロジェンマスタード[メクロレタミン等]、シクロホスファミド、メルファラン、及びクロラムブシル)、スルホン酸アルキル(例えば、ブスルファン)、ニトロソウレア(例えば、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、及びストレプトゾシン)、トリアゼン(例えば、ダカルバジン)、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート等の葉酸類似体)、ピリミジン類似体(例えば、フルオロウラシル及びシタラビン)、プリン類似体(例えば、フルダラビン、イダルビシン、シトシンアラビノシド、メルカプトプリン、及びチオグアニン)、ビンカアルカロイド(例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンデシン)、エピポドフィロトキシン(例えば、エトポシド及びテニポシド)、抗生物質(例えば、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリカマイシン、及びマイトマイシン)、ジブロモマンニトール、デオキシスパガリン、ジメチルミレラン、及びチオテパ。
特定の更に具体的な実施形態では、低用量ブスルファンを使用し得る。更に具体的な実施形態において、一日9mg/kg以下、更に好ましくは一日1乃至9mg/kgが使用される。他の実施形態において、ブスルファンは、0.8mg/kg/日以下、更に好ましくは0.1乃至0.8mg/kg/日で投与される。
本明細書に提示した戦略は、臨床応用に対して特に有望であり、これは患者の骨髄から単離された造血幹細胞が、遺伝子的に改変された免疫寛容誘発「定常状態」樹状細胞の恒久的且つ連続的産出のために改変されるためである。
以下の実施例は、このEAEにおけるミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質(MOG)特異的寛容を誘導する戦略の有効性を実証する。MOG発現レンチウイルスベクター(DC-MOG)により形質導入したHSCを受容した全てのマウスは、免疫時にEAEから保護され(臨床スコア0)、対照ベクターにより形質導入したHSCを受容した全てのマウスは、EAEを発症した。組織学的分析により、罹患マウスでは、脳、脊髄、及び視神経における脱髄及び広範な炎症が明らかとなったが、処置済みマウスではならなかった。IFN-γ、TNF-α、及びIL-17を含む炎症性サイトカインは、寛容化マウスでは殆ど存在しなかったが、罹患マウスでは高レベルで存在した。結果からは、更に、DC-MOGにより形質導入したBM-HSCを受容したマウスが、MOG特異的T細胞の効率的な欠失と、Foxp3+調節性T細胞の生成とを示すことが明らかとなった。最も重要な点として、事前に確立されたEAEを有するマウスにおいて、部分的骨髄破壊条件下でのDC-MOGベクター形質導入HSCの移植は、疾患の持続性の臨床的改善をもたらした。
標的とされる特異的ヒト自己抗原や発現されるポリペプチドの長さ等の、単一の特徴の選択肢が本明細書において「実施形態」とされる場合は常に、こうした選択肢を自由に組み合わせて、本明細書に記載の方法又は医学的適用の個別の実施形態を形成し得ると理解されるべきである。
他の実施形態及び利点を引き出すことが可能な以下の各図及び説明は、本発明を如何なる形でも限定せず、例示するために記載されたものである。
材料及び方法
マウス
C57BL/6(CD45.1及びCD45.2)及び2D2(CD45.2)マウスを、チューリッヒ大学ウイルス学研究所の動物施設において維持及び飼育した。2D2マウスは、ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質ペプチド(MOG)35-55に対して特異的なトランスジェニックVα3.2/Vβ11 TCRsを有する。
SINレンチウイルスベクター
ヒトトランスフェリン受容体(htfr)の膜貫通ドメインと融合するEGFP又はオボアルブミン(OVA)を発現するSINレンチウイルスベクター(DC-EGFP、DC-OVA)は、それぞれ以前に記述されている(Dresch et al., J. Immunology 2008, 181; 4495-4506)。SINレンチウイルスベクターDC-MOGは、DC-STAMPプロモーター(配列プロトコル: SEQ ID 02参照)の制御下で完全長マウスMOG ORF (配列プロトコル: SEQ ID 01参照)を発現し、次のように構築された: MOG配列を、プライマ38(5’gtaccggtgccaccatggcctgtttgtggagctt3’、SEQ ID 03)及び39(5’aggaattcccaggaagacacaaccatcac3’、SEQ ID 04)を用いて、マウスMOG cDNAを含有するプラスミド(pFLC1、ImaGenes GmbH、ドイツ、ベルリン)からPCRにより増幅した。PCR産物をAgeI及びEcoRIにより消化し、DC-EGFPのAgeI及びEcoRI部位間に挿入した。ベクターストックを生成し、Dresch et al., 2008の記載通りに力価を定めた。
骨髄キメラ
少なくとも6週齢の雌C57BL/6又は2D2マウスの骨髄(BM)細胞を、5フルオロウラシル(150mg/kg体重)の静脈注射から4日後に採取した。当該細胞は、無血清造血幹細胞拡張培地(serum-free hematopoietic stem cell expansion medium, Stemline、Sigma-Aldrich)にペニシリン-ストレプトマイシンと、ヒトIL-6(25ng/ml)、ネズミIL-3(10 ng/ml)、及びネズミ幹細胞因子(50ng/ml)を含む増殖因子混合物とを補充したものにおいて2日間予備刺激した。当該細胞は、SINレンチウイルスベクターの無細胞ストック(感染多重度MOI=45)を用いたスピン感染(300×g、2時間、32℃)により、硫酸プロタミン(4μg/ml)存在下で形質導入した。形質導入後、1乃至3×106細胞/マウスを、致死量放射線照射(11Gy)C57BL/6受容動物に静脈注射した。キメラは、移植後3週間に亘りネオマイシンにより処置した。
EAEの誘導
予防的モデル。移植の8週間後に、MOGペプチド(ProSpec、イスラエル、レホヴォト、カタログID PRO-371)0.1mgを、完全フロイントアジュバントに5mg/mlの結核菌を補充したものにおいて乳化し、合計体積200μlとして骨髄キメラに皮下注射した。その後、動物には、300ngの百日咳毒素を腹腔内注射し、この注射を48時間後に繰り返した。マウスを、EAEの神経学的徴候について毎日監視し、次のように採点した: 0、臨床的徴候無し; 1、尾の脱力; 1.5、尾の脱力及び後肢虚弱; 2.0、片側の部分的後肢麻痺; 2.5、両側の部分的後肢麻痺; 3.0、完全な両後肢麻痺(動物は、この段階で死亡させた)。
治癒的モデル。EAEを、未処理の6週齢雌C57BL/6マウスにおいて上述したように誘導した。動物を疾患の徴候に関して毎日採点し、最初の症状が発生した後4日目及び5日目に20mg/kgのブスルファンにより条件付けした。ベクター形質導入BM-HSC(1乃至3×106細胞/マウス)を2回目のブスルファン処置後2日目に静脈注射した。
CNSの病理組織診断
脳及び視神経を4％ホルムアルデヒド中で固定し、パラフィンで包埋した。脊髄は椎骨内に残し、固定後2週間、25％EDTAにより脱灰後、パラフィン包埋した。組織化学的及び免疫組織化学的染色のために、厚さ3mmのスライドをキシロール及びアルコールにより脱パラフィン化し、ヘマトキシリン及びエオシンにより染色するか、或いは次のように処理した: 脱髄を評価するため、スライドをルクソールファストブルー中でインキュベートし、クリスタルバイオレットにより対比染色した。免疫組織化学的染色のため、スライドを以下の抗体により染色した: ラット抗マウス抗Mac3(マクロファージ、1:10、BD Pharmingen)、マウス抗SMI 32(神経フィラメント、1:400、Abcam、英国ケンブリッジ)、又はウサギ抗マウスCD3(T細胞、1:100、Ventana Medical Systems,Inc.、米国アリゾナ州ツーソン)。
骨髄由来樹状細胞及び試験管内T細胞増殖アッセイ
キメラからの骨髄細胞を、EAE誘導の6乃至8週間後に大腿骨及び脛骨から抽出した。当該細胞は、その後、6ウェルプレート内で、RPMI 1640培地に10％ウシ胎仔血清(FBS)、1％ペニシリン-ストレプトマイシン、0.1mM HEPES、及びDC分化因子GMC-SFを補充したものにおいて37℃で培養した。6日目に、2.5μM CFSE(カルボキシフルオセイン二酢酸サクシニミジルエステル)により標識した2D2 T細胞をBM培養物に添加し、増殖を3日後にフローサイトメトリーにより分析した。
サイトカインの分析
サイトカインは、試験管内脾細胞刺激により測定した。このために、脾細胞を6ウェルプレート(ウェル当たり1×107細胞)内で、DMEMに10％FBS、1％ペニシリン-ストレプトマイシン、0.1mM HEPES、2mM L-グルタミン、0.01mM非必須アミノ酸を補充したものにおいて培養した。脾細胞を、MOG35-55ペプチド(PBS中5μg/ml、PROSPEC、イスラエル)により刺激した。陽性対照として、脾細胞を5μg/mlのPMAにより刺激し、陰性対照として、脾細胞をペプチド無しで培養した。上清を、刺激後12、24、48、及び72時間に収集し、-80℃で保存した。上清中のサイトカイン(GM-CSF、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-17、TNF-α)は、FlowCytomix Mouse Th1/Th2 10plexキット(Bender MedSystems、オーストリア、ウィーン)を製造業者のプロトコルに従って用いて、フローサイトメトリーにより測定した。サイトカインは、CNSの上清中でも測定した。このために、脳及び脊髄をホモジネートして最終体積を1mg/μlとし、1200rpmで5分間遠心分離し、上清を直接分析するか、或いは-80℃で保存後に分析した。
DC-MOG又はDC-OVAベクター形質導入BM-HSCによる抗原特異的寛容誘導
抗原特異性を判定するために、サイトカイン応答を上述したように測定した。但し、脾細胞は、ベクター形質導入BM-HSC移植の8週間後にMOG及びOVA抗原により同時に以下のように免疫したキメラから単離した。 0.1mgのMOGペプチド(ProSpec)及び0.1mgのOVAタンパク質(NeoMPS、フランス、ストラスブール)を、完全フロイントアジュバントに5mg/mlの結核菌を補充したものにおいて乳化し、マウス当たりの合計体積を200μlとして皮下注射した。その後、動物には、300ngの百日咳毒素(Sigma Aldrich)を腹腔内注射し、この注射を48時間後に繰り返した。脾細胞は、動物がスコア3に達した時点、或いは、保護マウスの場合、最後の罹患動物が分析された14日後に単離した。
脳からのCD4 T細胞の単離
脳におけるCD4 T細胞の頻度を分析するため、当該臓器をDMEM中でホモジナイズし、1200rpmで10分間、室温において遠心分離した。ペレットを5mlの37％パーコール含有PBSに懸濁させ、2.5mlの70％パーコール含有PBSを慎重に添加した。試料を600gで20分間、室温において遠心分離して、界面内の白血球を採取し、PBSにより数回洗浄し、フローサイトメトリーにより分析した。
FACS分析
ドナーの生着及びキメラ化を、移植の6乃至8週間後に、胸腺におけるCD45.1対CD45.2のサイトメトリー解析により、APC共役抗CD45.1(A20、BD Biosciences)及びPE共役抗CD45.2(104、eBioscience)をそれぞれ用いて評価した。DCs及びEGFP導入遺伝子発現のDC特異性の分析のため、以下の抗体を用いた: ビオチン共役抗CD3(145-2C11、BD Biosciences)、PE共役抗CD11b(M1/70、BD Biosciences)、PerCP共役抗CD45(RA3-6120.1、BD Biosciences)、PE共役抗I-A[b]、(AF6-120.1、BD Biosciences)、ビオチン共役抗Ly-6G/Ly-6C(Gr-1、RB6-8C5、BD Biosciences)、FITC共役抗CD3(145-2C11、BD Biosciences)、APC共役抗CD11c(N418、BD Biosciences)、PerCP共役抗cD11c(N418、BD Biosciences)、PerCP共役抗CD8(53-6.7、BD Biosciences)、PE共役抗CD19(6D5、BD Biosciences)、PerCP/Cy5.5共役抗CD103(2E7、BD Biosciences)、PerCP共役抗F4/80(BM8、BD Biosciences)、PE-conjugated streptavidin(BD Biosciences)、PE/Cy7共役抗CD4(GK1.5、eBioscience)、PE/Cy5共役抗NK1.1(PK136、eBioscience)、及びAPC共役抗NK(Dx5、eBioscience)。Treg及び2D2 T細胞を含むT細胞は、以下の抗体により分析した: FITC共役抗Vα3.2(RR3/16、BD Biosciences)、PE共役抗Vβ11(KT11、BioLegend)、APC共役抗CD4(RM4-5、BD Biosciences)、PE共役抗CD152(UC10-4B9、BioLegend)、APC共役抗Foxp3+(APC抗マウス/ラットFoxp3染色セットキット、eBioscience)、APC共役抗CD25(PC61.5、eBioscience)、APC共役抗CD69、H1.2F3、BD Biosciences)、APC共役抗CD44(IM7、eBioscience)、APC共役抗CD62L(MEL-14、eBioscience)、FITC共役抗CD3(145-2C11、BD Biosciences)、APC共役抗CD4(RM4-5、BD Biosciences、PerCP共役抗CD8(53-6.7、BD Biosciences)。
統計的分析
統計的分析は、GraphPad Prismバージョン5.02ソフトウェアを用いた片側(図5、左パネル)又は両側(他の全ての統計分析)t検定により行った。データは、特に明記しない限り平均値±SDとして提示している。差は、p値が0.05未満である場合に有意とした。
結果
実施例1: SINレンチウイルスベクター媒介DC特異的抗原発現
DC特異的STAMPプロモーターを用いて、完全長ネズミMOGを発現するSINレンチウイルスを構築した(DC-MOG、図1A)。DC-STAMPプロモーターからEGFP又は膜標的(membrane targeted)OVAを発現する対照ベクター(DC-EGFP、DC-OVA)は、以前に記述されている(Dresch et al. 2008)。ベクター媒介MOG発現は、ベクター形質導入骨髄由来DCs(bone marrow derived DCs, BM-DC)の免疫蛍光分析により実証された(図示せず)。ベクター形質導入BM-DC並びにMOG35-55ペプチドを認識するT細胞受容体(Vα3.2及びVβ11鎖)に対してトランスジェニックである2D2マウスから単離されたCD4+ T細胞を用いたT細胞増殖アッセイが示す通り、ベクターコードMOGは機能性を有した(図示せず)。
DC-STAMPプロモーターが与える転写特異性は、以前に実証されており(Dresch et al., 2008)、ここでは次のように確認した: C57BL/6ドナーマウスからの骨髄由来造血幹細胞(BM-HSC)を、DC-EGFPにより形質導入した後、致死量放射線照射同系受容マウスに移植した。DC-EGFP形質導入BM-HSCの移植の6週間後に、EGFP蛍光を、cd11c+細胞の35％超において検出した一方、cd11c-細胞の5％未満がEGFP陽性となった。更に、当該5％のcd11c-細胞における平均蛍光強度(MFI)は、EGFP陽性のcd11c+細胞よりも有意に低かった(図1B)。脾臓におけるキメラ化は、少なくとも96％となった(図示せず)。
実施例2: DC-MOGベクター形質導入BM-HSCの移植はマウスをEAE疾患から保護する
次に、致死量放射線照射C57BL/6マウスに、同系ドナーからのDC-MOG又は対照ベクター(DC-EGFP又はDC-OVA)形質導入BM-HSCを移植した。8週間後、EAEを誘導し、疾患の臨床的徴候を1日に2回評価した。図2Aは、対照マウスにおいて、誘導後10日目辺りからEAEの発病が始まり(平均発病日10.5+1.3)、全ての動物が、発病後1週間未満で臨床スコア3に達したことを示している。重要な点として、DC-MOG形質導入BM-HSCを受容したマウスでは、神経学的症状が全く発生していないことである(臨床スコア0)。DC-MOGキメラは、誘導後少なくとも5週間はEAEを発病しておらず、これらの動物から単離したBM-DCsの存在下での2D2 T細胞の増殖により実証されるように、免疫系の再構成後、少なくとも13週間に亘り、MOG発現DCsの生産を継続した(図2B)。3回の独立した実験では、何れのDC-MOGキメラにおいても、臨床的症状の徴候が全く発生しておらず、一方、対照ベクター形質導入BM-HSCを受容したキメラは、全て臨床スコア3まで進行しており、この時点で死亡させた。
寛容化した動物の組織学的分析では、CNSの病変を示す証拠は存在しなかった。一方、対照ベクター形質導入BM-HSCを受容したキメラは、脳(図示せず)、視神経、及び脊髄内に広範な多巣性の炎症性浸潤及び脱髄を示した。中度から重度の脱髄及び軸索損傷が患部組織において観察され、それぞれミエリン及び神経フィラメントの染色により判定された。炎症プロセスには、マクロファージ及びT細胞の大量の浸潤が関与した。罹患動物のCNSにおけるCD4 T細胞の頻度は、保護マウスよりも7倍超高かった(図3)。脳内では、主に髄膜及び白質が関与し、灰白質は殆ど関与しなかった(図示せず)。脊髄では、脱髄及び炎症プロセスの強度は、尾部へ向けて増加していた(図示せず)。
罹患及び保護マウスの脾臓及びCNSにおけるサイトカイン生成パターンを分析した。図4Aに示したように、罹患DC-OVA対照ベクター形質導入BM-HSCキメラの脾臓におけるTh2サイトカイン(IL4、IL-5、IL-6)及び炎症性サイトカイン(IL-17、TNF-α、GM-CSF、及びIFN-γ)の濃度は、保護DC-MOGキメラのものより大幅に高かった。保護マウスにおけるサイトカイン生成の一般的障害の可能性は、PMAによる非特異的刺激時に、IFN-γ生成が罹患及び保護マウスからの脾細胞において同程度であったことから除外される(図4A)。CNSにおいて見られたサイトカインパターンは、脾臓におけるものと同等であり、但し、この組織では、保護(DC-MOG)及び罹患(DC-OVA)動物の両方でIL-17が検出できなかった(図4B)。
寛容の特異性は、DC-MOG又はDC-OVAベクター形質導入BM-HSCキメラをOVA及びMOGペプチドにより同時に免疫し、脾細胞のIFN-γ生成を測定することにより実証された。予想通り、DC-MOG寛容化キメラにおけるIFN-γ応答は、OVAペプチドによる刺激時には検出されたが、MOGペプチドによる刺激時には検出されず、一方、DC-OVA寛容化キメラにおけるサイトカイン応答は、MOGペプチドによる刺激時には得られたが、OVAペプチドによる刺激時には得られなかった(図5)。
DC-MOGベクター形質導入BM-HSCの移植は、MOG特異的T細胞の枯渇及び調節性T細胞の誘導をもたらす
寛容誘導の考えられるメカニズムを調査するために、致死量放射線照射C57BL/6マウスに、2D2ドナーから単離したBM-HSCにDC-MOG又はDC-OVAベクターを形質導入したものを移植し、キメラからのMOG特異的2D2 T細胞を6乃至8週間後に定量した。結果は、図6に示しており、次のように要約することができる: 2D2 T細胞は、対照ベクター(DC-OVA)形質導入BM-HSCを受けた動物と比較して、DC-MOGベクター形質導入BM-HSCを受けたキメラにおいて大幅に枯渇した。DC-MOG処理マウスでは、脾臓内の僅か約4％のCD4+ T細胞がVα3.2/Vβ11 TCRを含んでいたが、DC-OVA対照ベクター処理マウスの約55％がMOG35-55特異的TCRを含んでいた(図6A)。保護マウスの脾臓内の2D2 T細胞の総数は、罹患マウスのものよりも大幅に少なかった(図6B)。保護マウスでの2D2 T細胞の枯渇は、胸腺においては脾臓ほど顕著ではなかったが、しかしながら有意となった(図6B)。更に、脾臓内の残りの2D2 T細胞を更に分析すると、CD25、CD44、及びCD69の上方制御とCD62Lの僅かな下方制御とを特徴とする、DC-MOGキメラの抗原経験表現型が明らかとなった(図7A)。更に、残りの2D2 T細胞を調節性T細胞(Treg)表現型について分析し、DC-MOG処理マウスの脾臓において、残りの2D2 T細胞の50％超がCTLA-4及びFoxp3陽性であり、DC-OVA処理マウスから単離した2D2 T細胞の1％未満が、Treg表現型を示すことを発見した(図7B)。DC-MOG及びDC-OVAキメラの胸腺及び脾臓におけるTreg2D2 T細胞の絶対数を図7Cに示す。
DC-MOGベクター形質導入BM-HSCの移植は、確立されたEAEを改善する
MOG発現DCsを発生させるSINレンチウイルスベクター形質導入BM-HSCを移植する戦略が、確立されたEAEを治療する上でも有効となり得るかを調査した。この治癒的プロトコルのために、予防的プロトコルの説明と全く同様にMOGペプチドにより免疫することにより、未処理マウスにおいてEAEを確立した。最初の症状が観察された後4日及び5日目に、動物を、低用量ブスルファンにより条件付けし、材料及び方法において説明したDC-MOG又はDC-OVA形質導入BM-HSCを移植した。2回の独立した実験において、DC-MOG群の全ての動物で臨床的な改善が観察され、実験の全期間に亘って維持された(図8)。一方、対照群(DC-OVA)では臨床的改善は観察されず、臨床スコア3が移植後2日間を超えて維持された時点で動物を死亡させた。
これらの結果は、DC-MOGにより形質導入した自己BM-HSCの移植が、EAE/MSを治療する有望なアプローチであることを示している。この戦略は、病変の発生に関与する自己抗原が公知である他の自己免疫疾患の治療においても有用となる可能性がある。
[図1]
B
％EGFP positive cells: EGFP陽性細胞(％)
[図2]
A
Mean clinical score: 平均臨床スコア
Days after EAE induction: EAE誘導後の日数
B
# Cells: 細胞数
[図3]
％ CD4 T cells: CD4 T細胞(％)
[図4]
A
Hours: 時間
[図5]
IFN-γ ratio: IFN-γ比
[図6]
A
counts: 計数
B
Spleen: 脾臓
Thymus: 胸腺
cells: 細胞
[図7]
C
Spleen: 脾臓
Thymus: 胸腺
[図8]
Mean clinical score: 平均臨床スコア
Days after EAE induction: EAE誘導後の日数
B
％EGFP positive cells: EGFP陽性細胞(％)
[図2]
A
Mean clinical score: 平均臨床スコア
Days after EAE induction: EAE誘導後の日数
B
# Cells: 細胞数
[図3]
％ CD4 T cells: CD4 T細胞(％)
[図4]
A
Hours: 時間
[図5]
IFN-γ ratio: IFN-γ比
[図6]
A
counts: 計数
B
Spleen: 脾臓
Thymus: 胸腺
cells: 細胞
[図7]
C
Spleen: 脾臓
Thymus: 胸腺
[図8]
Mean clinical score: 平均臨床スコア
Days after EAE induction: EAE誘導後の日数
Claims (21)
- 核酸分子であって、
i. ミエリン塩基性タンパク質、
ii. プロテオリピドタンパク質、及び
iii. ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質
の群から選択されるヒトタンパク質に含有される少なくとも9個のアミノ酸の連続した配列を含むポリペプチドをコードするオープンリーディングフレームを有する配列を含み、
前記オープンリーディングフレームは、DC-STAMPプロモーター配列の転写制御下にある、核酸分子。 - 脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法に使用するための請求項1記載の核酸分子。
- 請求項1記載の核酸配列、又は前記核酸配列の逆相補的配列を含むウイルス。
- 前記ウイルスは、レンチウイルスである、請求項3記載のウイルス。
- 前記レンチウイルスは、自己不活性化(SIN)レンチウイルスベクターである、請求項4記載のウイルス。
- 脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法に使用するための請求項1記載の請求項3乃至5の何れかに記載のウイルス。
- 請求項1記載の核酸配列を含む、単離樹状細胞。
- 請求項4乃至5の何れかに記載の前記レンチウイルスにより形質導入された単離樹状細胞。
- 患者から取得した抗原提示細胞を含む細胞調製物であって、前記抗原提示細胞が請求項1記載の核酸配列、又は請求項3乃至5の少なくとも1つに記載のウイルスを含むことを特徴とする、脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法において自家使用するための細胞調製物。
- ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、及びミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質から選択される2種類又は3種類の異なるヒトタンパク質をコードする核酸配列を含むことを特徴とする、請求項9記載の細胞調製物。
- 請求項1記載の核酸配列、又は請求項3乃至5の少なくとも1つに記載のウイルスを、前記患者由来の抗原提示細胞の調製物に導入する、脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法に使用するための細胞調製物を生産する方法。
- 請求項7又は8記載の単離樹状細胞、又は請求項9又は10記載の細胞調製物を含む、脱髄疾患の治療に使用するための医薬組成物。
- 前記ヒトタンパク質がミエリン塩基性タンパク質である請求項7記載の単離樹状細胞と、前記ヒトタンパク質がプロテオリピドタンパク質である請求項7記載の第2の単離樹状細胞と、前記ヒトタンパク質がミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質である請求項7記載の第3の単離樹状細胞とを含む、脱髄疾患、特に多発性硬化症の予防又は治療法において自家使用するための医薬組成物。
- 必要とする患者に請求項7記載の単離樹状細胞を投与するステップを備える、多発性硬化症を治療するための方法。
- 単離樹状細胞を投与する前記ステップは、部分的骨髄破壊療法と共に実施される、請求項14記載の方法。
- 前記ヒトタンパク質がミエリン塩基性タンパク質である請求項8記載の第1の単離樹状細胞と、前記ヒトタンパク質がプロテオリピドタンパク質である請求項8記載の第2の単離樹状細胞と、前記ヒトタンパク質がミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質である請求項8記載の第3の単離樹状細胞とを含む医薬組成物。
- 必要とする患者に請求項8記載の単離樹状細胞を投与するステップを備える、多発性硬化症を治療する方法。
- 単離樹状細胞を投与する前記ステップは、部分的骨髄破壊療法と共に実施される、請求項17記載の方法。
- 必要とする患者に請求項3乃至5の何れかに記載のウイルスを投与するステップを備える、多発性硬化症を治療する方法。
- ウイルスを投与する前記ステップは、部分的骨髄破壊療法と共に実施される、請求項19記載の方法。
- 前記部分的骨髄破壊療法は、ブスルファンの投与を含む、請求項15、18、又は20記載の方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11182700.2 | 2011-09-26 | ||
| EP11182700 | 2011-09-26 | ||
| US61/573,200 | 2011-09-26 | ||
| PCT/EP2012/068954 WO2013045488A1 (en) | 2011-09-26 | 2012-09-26 | Apc-mediated tolerance induction for therapy of multiple sclerosis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2015502135A true JP2015502135A (ja) | 2015-01-22 |
| JP2015502135A5 JP2015502135A5 (ja) | 2015-11-19 |
Family
ID=46924448
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2014532366A Pending JP2015502135A (ja) | 2011-09-26 | 2012-09-26 | 多発性硬化症の治療のためのａｐｃ媒介寛容誘導 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9592259B2 (ja) |
| EP (1) | EP2760478A1 (ja) |
| JP (1) | JP2015502135A (ja) |
| KR (1) | KR20140116054A (ja) |
| CN (1) | CN104010664A (ja) |
| WO (1) | WO2013045488A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20160296609A1 (en) * | 2013-06-28 | 2016-10-13 | Baylor Research Institute | Dendritic cell asgpr targeting immunotherapeutics for multiple sclerosis |
| RS60816B1 (sr) * | 2014-04-24 | 2020-10-30 | Univ Florida | Genska terapija za multiplu sklerozu bazirana na aav |
| WO2018183613A1 (en) * | 2017-03-31 | 2018-10-04 | The Children's Medical Center Corporation | Antibody-mediated conditioning with immunosuppression to enable allogeneic transplantation |
| WO2020247432A1 (en) * | 2019-06-04 | 2020-12-10 | Thomas Jefferson University | Oligodendrocyte-derived extracellular vesicles for therapy of multiple sclerosis |
| CN111089972B (zh) * | 2019-12-18 | 2021-05-14 | 天津天海新域生物科技有限公司 | 一种用于检测抗人体髓鞘碱性蛋白抗体的试剂盒及其应用 |
| WO2023240274A1 (en) * | 2022-06-10 | 2023-12-14 | The Medical College Of Wisconsin, Inc. | Immune tolerance induction for auto-immune diseases through platelet targeted gene therapy involving myelin oligodendrocyte glycoprotein (mog) polypeptide. |
| CN116200414A (zh) * | 2022-08-31 | 2023-06-02 | 天津华科泰生物技术有限公司 | 一种重组人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白及其制备方法和应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004525909A (ja) * | 2001-03-05 | 2004-08-26 | スラビン、シモン | 脱灰骨基質及び／又は石灰化骨基質と共に骨髄細胞を含む組成物並びに骨髄移植におけるその使用 |
| JP2004535364A (ja) * | 2001-01-26 | 2004-11-25 | エモリー・ユニバーシティ | 臓器移植の免疫寛容を誘発し、異常血色素症を処置する方法 |
| JP2008061622A (ja) * | 2006-09-11 | 2008-03-21 | Mitsubishi Kagaku Iatron Inc | 造血幹細胞移植療法の施行患者の病態把握方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7090982B2 (en) * | 1991-10-22 | 2006-08-15 | The Governors Of The University Of Alberta | Methods of predicting therapeutic efficacy of treatment of a multiple sclerosis patient |
| US20030049797A1 (en) * | 2001-04-16 | 2003-03-13 | Yoshikazu Yuki | Hybrid proteins for autoimmune disease |
| KR20070029733A (ko) * | 2004-06-04 | 2007-03-14 | 제넨테크, 인크. | 다발성 경화증의 치료 방법 |
| US8071376B2 (en) * | 2005-10-13 | 2011-12-06 | Anthrogenesis Corporation | Production of oligodendrocytes from placenta-derived stem cells |
| US8188218B2 (en) * | 2006-10-27 | 2012-05-29 | University Of Kansas | Bi-functional peptides for multiple sclerosis treatment and diagnosis |
| US8673286B2 (en) | 2007-04-09 | 2014-03-18 | Northwestern University | DOPA-functionalized, branched, poly(aklylene oxide) adhesives |
| DE102007039429A1 (de) * | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Imtm Gmbh | Verfahren zur Aktivierung regulatorischer T-Zellen |
| KR101103423B1 (ko) | 2009-09-04 | 2012-01-06 | 아주대학교산학협력단 | 생체 주입형 조직 접착성 하이드로젤 및 이의 생의학적 용도 |
| US20130053594A1 (en) | 2009-12-17 | 2013-02-28 | The University Of Chicago | Methods of making self-healing polymer and gel compositions |
-
2012
- 2012-09-26 KR KR1020147010794A patent/KR20140116054A/ko not_active Application Discontinuation
- 2012-09-26 JP JP2014532366A patent/JP2015502135A/ja active Pending
- 2012-09-26 CN CN201280058005.9A patent/CN104010664A/zh active Pending
- 2012-09-26 WO PCT/EP2012/068954 patent/WO2013045488A1/en active Application Filing
- 2012-09-26 US US14/347,439 patent/US9592259B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-09-26 EP EP12762610.9A patent/EP2760478A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004535364A (ja) * | 2001-01-26 | 2004-11-25 | エモリー・ユニバーシティ | 臓器移植の免疫寛容を誘発し、異常血色素症を処置する方法 |
| JP2004525909A (ja) * | 2001-03-05 | 2004-08-26 | スラビン、シモン | 脱灰骨基質及び／又は石灰化骨基質と共に骨髄細胞を含む組成物並びに骨髄移植におけるその使用 |
| JP2008061622A (ja) * | 2006-09-11 | 2008-03-21 | Mitsubishi Kagaku Iatron Inc | 造血幹細胞移植療法の施行患者の病態把握方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| AUTOIMMUNITY,2011,44(3),P.177-87,EPUB-2010-OCT-1, JPN6016031329, ISSN: 0003382366 * |
| J.IMMUNOL.,2008,181(7),P.4495-506, JPN6016031331, ISSN: 0003382367 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104010664A (zh) | 2014-08-27 |
| US20140242037A1 (en) | 2014-08-28 |
| EP2760478A1 (en) | 2014-08-06 |
| US9592259B2 (en) | 2017-03-14 |
| WO2013045488A1 (en) | 2013-04-04 |
| KR20140116054A (ko) | 2014-10-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Marín et al. | Tolerogenic dendritic cells in solid organ transplantation: where do we stand? | |
| Raimondi et al. | Mammalian target of rapamycin inhibition and alloantigen-specific regulatory T cells synergize to promote long-term graft survival in immunocompetent recipients | |
| US9592259B2 (en) | APC-mediated tolerance induction for therapy of multiple sclerosis | |
| US9018006B2 (en) | Stable Tregs and related materials and methods | |
| JP5898260B2 (ja) | 併用療法におけるｃｄ８３の使用 | |
| JP2019511244A (ja) | 操作された抗原提示細胞及びそれらの使用 | |
| JP2020055844A (ja) | 単離されたドナーｍｈｃ由来ペプチド及びその使用 | |
| Ha et al. | Transplantation of mouse HSCs genetically modified to express a CD4-restricted TCR results in long-term immunity that destroys tumors and initiates spontaneous autoimmunity | |
| Koga et al. | IL10-and IL35-secreting MutuDC lines act in cooperation to inhibit memory T cell activation through LAG-3 expression | |
| US20140219979A1 (en) | Hsp60, hsp60 peptides and t cell vaccines for immunomodulation | |
| US20220387517A1 (en) | Fibroblast therapy for inflammatory bowel disease | |
| JP2004523202A (ja) | 遺伝子修飾ｔ細胞、該細胞の製造方法および該細胞の使用 | |
| EP3958887B1 (en) | Medical uses for inducing or restoring immune tolerance | |
| EP1589030A1 (en) | Bob-1 specific T cells and methods to use | |
| US9011867B2 (en) | Use of specific peptides in the preparation of a medicament for the treatment of monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) or of smoldering multiple myeloma (SMM) | |
| JP2017533238A (ja) | 抗原特異的寛容のための組成物及び方法 | |
| WO2022245841A1 (en) | Synthetic protein for inducing immune tolerance | |
| Nagy | Acceptance of allogeneic cell transplants without systemic immune suppression | |
| Ha | CD4+ T cell mediated tumor immunity following transplantation of TRP-1 TCR gene modified hematopoietic stem cells | |
| Lahl | Control of immune responses towards self and non-self by Foxp3+ regulatory T cells | |
| Curran | Expansion of antigen specific regulatory T cells in an IDO expressing fibroblast co-culture | |
| Li | CD24 in T lymphocyte homeostatic proliferation and autoimmune disease | |
| CN111836888A (zh) | 用于癌症治疗的工程化干细胞 | |
| Azulay | T Cell Tolerance as Function of Tumor Progression | |
| Shameli | Developmental Biology of Low-avidity Autoreactive CD8+ T Cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150925 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150928 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160824 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161124 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20170208 |