JP2015099162A - 糖鎖アレイ - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 本発明者らにより開発された、特定の糖鎖が固定化された糖鎖アレイが、感染症の病原体やその分泌物などの検出対象物質と糖鎖との結合の検出に有用であることを見出した。さらに、この糖鎖アレイにおいて、一級アミノ基を有するユニット、親水性を保持するためのユニット、および疎水性基を有するユニットを含む高分子化合物で被覆された基材を用いると、効率的に糖鎖を固定化しうるとともに、検出対象物質の非特異的な吸着・結合を効果的に抑制しうることを見出した。
【選択図】 なし
Description
[5] 一般式〔1〕において、Yが下記一般式〔2〕又は〔3〕である、[4]記載の糖鎖アレイ。
[6] 高分子化合物における一級アミノ基が、オキシルアミノ基および/またはヒドラジド基である、[2]から[5]のいずれかに記載の糖鎖アレイ。
(実施例)
飽和環状ポリオレフィン樹脂(5−メチル−2ノルボルネンの開環重合体の水素添加物、MFR(Melt flow rate):21g/10分、水素添加率:実質的に100%、熱変形温度123℃)をスライドガラス形状(寸法:75mm×25mm×1mm)に加工して固相基板を作成した。この固相基板を2−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン(MPC)、n−ブチルメタクリレート(BMA)、N−[2−[2−[2−(t−ブトキシカルボニルアミノオキシアセチルアミノ)エトキシ]エトキシ]エチル]−メタクリルアミド(OA)の共重合体(各基はモル%で26:66:8)の0.3重量%エタノール溶液に浸漬し、乾燥することにより、基板表面に上記高分子物質を含む層を導入した。
(比較例)
実施例の固相基板を高分子物質を塗布せずに用いた。
(糖脂質糖鎖の固定化)
次に、実施例および比較例で得られた担体に、ガングリオシド系糖脂質の糖鎖部を0.5Mの酢酸バッファー中に0.5mMの濃度になるように調製した溶液を、自動スポッターを用いてスポットし、80℃で1時間静置して固定化させた。固定化後、超純水による洗浄を行った。
(糖鎖結合性タンパクとの反応)
次に、上記洗浄後の担体に、表8に示した各濃度(溶媒:0.05wt%Tween20入りトリスバッファー)で、糖鎖結合性タンパクであるラベル化コレラトキシンBサブユニット(Molecular PROBE社)を溶解した溶液を接触させ、室温で2時間静置することで糖鎖−タンパクの特異的反応を実施した。反応後、各々の担体について、0.05wt%Triton X−100入りトリスバッファーを用いて、室温にて2分間洗浄を行った。
Claims (10)
- 下記表1〜表6に記載された糖鎖からなる群より選択される少なくとも1つの糖鎖が基材に固定化されている糖鎖アレイであって、
基材が一級アミノ基を有するユニットを含む高分子化合物で被覆されたものであり、
当該高分子化合物における一級アミノ基を有するユニットの含有量が、高分子化合物の全ユニットの20mol%以上、40mol%以下であり、
当該一級アミノ基と糖鎖の還元末端とを結合させることにより、糖鎖が基材に固定化されている糖鎖アレイ。
- 高分子化合物が、さらに、親水性を保持するためのユニットおよび疎水性基を有するユニットを含む、請求項1に記載の糖鎖アレイ。
- 高分子化合物が、下記一般式〔1〕で表されるものである、請求項2に記載の糖鎖アレイ。
- 一般式〔1〕において、Yが下記一般式〔2〕又は〔3〕である、請求項3記載の糖鎖アレイ。
- 高分子化合物における一級アミノ基が、オキシルアミノ基および/またはヒドラジド基である、請求項1から4のいずれかに記載の糖鎖アレイ。
- 一般式〔1〕において、Xがエチレンオキシ基である、請求項3に記載の糖鎖アレイ。
- 高分子化合物の主鎖が(メタ)アクリル骨格である、請求項1から6いずれか記載の糖鎖アレイ。
- 疎水性基R4が炭素数2〜10のアルキル基である、請求項3に記載の糖鎖アレイ。
- 疎水性基R4が環状アルキル基である、請求項8に記載の糖鎖アレイ。
- 環状アルキル基がシクロヘキシル基である、請求項9に記載の糖鎖アレイ。
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