JP2014502843A - ホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチド及びそれを発現する微生物 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明において、ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドは、下記の反応式のとおり、メチオニン生合成経路に存在するホモセリンとスクシニル−CoAを用いて、О−スクシニルホモセリンを合成する活性を有するポリペプチドを意味する。
前記ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドは、エンテロバクター属、サルモネラ属、シュードモナス属、バシラス属、エシェリキア属の微細物に由来するポリペプチドであってもよく、好ましくは、エシェリキア属微生物由来のホモセリンスクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドであってもよく、より好ましくは、大腸菌(E. coli)由来のホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼ活性を有するポリペプチドであってもよい。
本発明において、前記変異型ポリペプチドは、配列番号17で表われるポリペプチドまたは前記ポリペプチド配列と95%以上の相同性を有するポリペプチドの開始メチオニンから111番目のアミノ酸がグルタミン酸に置換され(配列番号18)、さらに112番目のアミノ酸がスレオニン(配列番号19)またはヒスチジン(配列番号20)に置換された変異型ポリペプチドであってもよい。
他の一態様として、本発明は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または前記ポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターを提供する。
Phosphoenolpyruvate+H2O+CO2⇔Oxaloaxetate+Phosphate
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ(aspC)
Oxaloacetate+Glutamate⇔Aspartate+a−ketoglutarate
アスパラギン酸キナーゼ(thrA)
Aspartate+ATP⇔Aspartyl−4−phosphate+ADP
アスパラギン酸セミアルデヒドデヒドロゲナーゼ(asd)
Aspartyl−4−phosphate+NADPH⇔Aspartate−semialdehyde+Phosphate+NADP+
ホモセリンデヒドロゲナーゼ(thrA)
Aspartate−semialdehyde+NADPH⇔Homoserine
前記反応式において、アスパラギン酸キナーゼとホモセリンデヒドロゲナーゼの二つの役割をする酵素をコードするthrA遺伝子は、実験例2に示すCJM2菌株にフィードバック解除を通じた強化が既に行われた状態であり、残りの三つの酵素は、遺伝子のコピー数が増加されたり、または前記遺伝子のプロモーターを活性が増進されたプロモーターに置換したり、または活性が増進されるように変異させる方法で活性を強化させることができる。
また他の一態様として、本発明は、前記変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む微生物、または変異型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが作動可能に連結された組み換えベクターに形質転換された微生物を培養する段階、及び前記微生物培養過程において生成されたО−アセチルホモセリンを得る段階を含むО−アセチルホモセリンの生産方法を提供する。
ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼ及びホモセリンО−アセチルトランスフェラーゼを含むプラスミドの作製
米国生物資源センター(American Type Culture Collection)から購買した大腸菌W3110菌株(寄託番号ATCC9637)の染色体を鋳型とし、配列番号1及び配列番号2のプライマーを用いてPCRを行うことにより、ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼをコードするmetA遺伝子を増幅した。
5’ AATTGATATCATGCCGATTCGTGTGCCGG 3’
<配列番号2>
5’ AATTAAGCTTTTAATCCAGCGTTGGATTCATGTG 3’
デイノコッカスラジオデュランス(Deinococcus radiodurans)の染色体を鋳型とし、配列番号3及び配列番号4のプライマーを用いてPCRを行うことにより、ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼをコードするmetA遺伝子(配列番号44)を増幅した。配列番号3及び配列番号4のプライマーは、それぞれ制限酵素EcoRV部位及びHindIII部位を有している。
5’ AATTGATATCATGACCGCCGTGCTCGC 3’
<配列番号4>
5’ AATTAAGCTTTCAACTCCTGAGAAACGCCCC 3’
PCR条件は、94℃で3分間変性後、94℃で30秒間変性、56℃で30秒間アニーリング、72℃で5分間重合を25回繰り返した後、72℃で7分間重合反応を行った。
このように得られたPCR産物及びcj1プロモーター(特許文献5)が入っているpCL1920プラスミドに、それぞれEcoRV及びHindIIIの制限酵素を処理してクローニングした。クローニングされたプラスミドを用いて大腸菌のDH5αを形質転換した後、スペクチノマイシン50μg/mlを含むLBプレートにおいて形質転換された大腸菌のDH5αを選別してプラスミドを得た。得られたプラスミドをそれぞれpCL_Pcj1_metA及びpCL_Pcj1_metXdrと命名した。
ホモセリンО−アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの作製
site directed mutagenesis kit(Stratagene、米国)を用いて、前記実施例1において作製したpCL_Pcj1_metAのプラスミドを鋳型とし、О−スクシニルトランスフェラーゼの111番のアミノ酸であるグリシン(Gly)をグルタミン酸(Glu)に置換した。使用したプライマー配列は、以下のとおりである。
5’ ttgtaactggtgcgccgctggaactggtggggtttaatgatgtc 3’
<配列番号6>
5’ gacatcattaaaccccaccagttccagcggcgcaccagttacaa 3’
作製された変異のG111E metAの遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metA(EL)と命名した。
<配列番号7>
5’ tgtaactggtgcgccgctggaaaccgtggggtttaatgatgtcg 3’
<配列番号8>
5’ cgacatcattaaaccccacggtttccagcggcgcaccagttaca 3’
ロイシンをヒスチジンに置換
<配列番号9>
5’ tgtaactggtgcgccgctggaacatgtggggtttaatgatgtcg 3’
<配列番号10>
5’ cgacatcattaaaccccacatgttccagcggcgcaccagttaca 3’
作製されたプラスミドのうち、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからスレオニンに置換されたmetA遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metA(ET)と命名した。同様に、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからヒスチジンに置換されたmetA遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metA(EH)と命名した。
フィードバック調節解除(feedback-resistance)されたホモセリンアセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの作製
前記実施例1において作製されたpCL_Pcj1_metAのプラスミドを鋳型とし、前記実施例2と同様の方法を用いてメチオニンに対するフィードバック調節が解除された特性を有するmetA遺伝子(metA ♯11)を作製した。具体的に、特許文献3に開示された内容によって、О−スクシニルトランスフェラーゼの29番のアミノ酸をセリンからフロリンに(S29P)、114番のアミノ酸をグルタミン酸からグリシンに(E114G)、140番のアミノ酸をフェニルアラニンからセリンに置換(F140S)した。このとき、使用したプライマー配列は、以下のとおりである。
<配列番号11>
5’ ATGACAACTTCTCGTGCGCCTGGTCAGGAAATTCG 3’
<配列番号12>
5’ CGAATTTCCTGACCAGGCGCACGAGAAGTTGTCAT 3’
グルタミン酸をグリシンに置換
<配列番号75>
5’ CGCCGCTGGGCCTGGTGGGGTTTAATGATGTCGCT 3’
<配列番号14>
5’ AGCGACATCATTAAACCCCACCAGGCCCAGCGGCG 3’
フェニルアラニンをセリンに置換
<配列番号15>
5’ CACGTCACCTCGACGCTGAGTGTCTGCTGGGCGGT 3’
<配列番号16>
5’ ACCGCCCAGCAGACACTCAGCGTCGAGGTGACGTG 3’
それぞれの前記変異を順次導入し、3種の変異を全て導入したmetA(#11)遺伝子を含有したプラスミドを製造した後、pCL_Pcj1_metA#11と命名した。
以降、前記作製されたpCL_Pcj1_metA#11のプラスミドを鋳型とし、前記実施例2のホモセリンО−アセチルトランスフェラーゼ活性を有する変異型ポリペプチドの変異を同様に有するポリペプチドを発現させるためのプラスミドを作製した。
作製されたプラスミドのうち、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に置換されたmetA #11遺伝子を含んだプラスミドをpCL_Pcj1_metA#11(EL)に、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからスレオニンに置換されたmetA #11遺伝子を含んだプラスミドをpCL_Pcj1_metA#11(ET)に、111番のアミノ酸がグリシンからグルタミン酸に、112番のアミノ酸がロイシンからヒスチジンに置換されたmetA #11遺伝子を含むプラスミドをpCL_Pcj1_metA#11(EH)と命名した。
大腸菌の変異体(variants)E. coli O9:H4(strain HS)、E. coli O139:H28(strain E24377A)、及びE. coli O157:H7、E. coli(strain ATCC8739)において示されるホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列[順に、配列番号41、配列番号42、配列番号43]をCLC Main Workbench(CLC bio、デンマーク)プログラムを用いて比較してみた。
比較の結果、図3及び図4に示すように、メチオニンに対するフィードバック調節が解除された変異ホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼのアミノ酸の一次配列は5%未満の変異が存在することが分かった(図3及び図4)。
このような結果は、大腸菌に存在するホモセリンО−スクシニルトランスフェラーゼのポリペプチドは、相互間に95%以上の相同性を有しており、5%未満の配列差にもかかわらず、ホモセリンスクシニルトランスフェラーゼの活性には、大きな差がないことが示される。
2−1:実験菌株の作製
2−1−1)metA及びmetA遺伝子の欠損
О−アセチルホモセリンを過量生産する変異型ポリペプチドの活性を比較するために、ホモセリンを蓄積し、生産されたО−アセチルホモセリンの利用性が欠損した菌株を作製した。前記菌株の作製は、特許文献7に明記されたスレオニン生産菌株であるFTR2533(KCCM 10541)菌株に基づいて、特許文献8に開示された実施例1−1乃至1−4の方法で、metA及びmetA遺伝子が欠損した菌株を作製し、CJM2と命名した。CJM2は、菌株内にホモセリンが過量蓄積され、導入される遺伝子により、О−アセチルホモセリンまたはО−スクシニルホモセリンを生産可能な菌株である。
О−アセチルホモセリンを過量生産するために、大腸菌内にホモセリンとアセチルCoAの生成が円滑でなければならない。第一に、アセチルCoAの供給を円滑にするために、acs(acetyl−coA synthetase)遺伝子のプロモータを配列番号30の構成的発現プロモータ(constitutive promoter)であるproに置換し、目的遺伝子の常時過剰発現を誘導した。前記プロモータの交替のために、FRT−one−step PCRの変形された方法を用いた(非特許文献5)。図5に示すようなカセットを作製するために、配列番号31と配列番号33を用いて、pKD3(PNAS (2000) vol.97: 6640-6645)由来のクロラムフェニコール耐性遺伝子FRTカセットをPCRし、配列番号32と配列番号34を用いたproプロモーター領域をPCRし、両PCRの結果物をOverlapping PCR法を用いて、一つのカセット(acsプロモータ欠損−proプロモータ交替カセット)として作製した(非特許文献6)。変性段階は94℃で30秒、アニーリング段階は55℃で30秒、延長段階は72℃で1分間実施し、これを30回行った。
5’ AGGGGCTTCATCCGAATTGCGCCATTGTTGCAATGGCGGTGCTGGAGCTGCTTCGAAGTTC 3’
<配列番号32>
5’ GATATTCATATGGACCATGGCTCGAGCATAGCATTTTTATCC 3’
<配列番号33>
5’ GGATAAAAATGCTATGCTCGAGCCATGGTCCATATGAATATC 3’
<配列番号34>
5’ CGATGTTGGCAGGAATGGTGTGTTTGTGAATTTGGCTCATATGTACCTTTCTCCTCTTTA 3’
その結果、得られたPCR産物を1.0%アガロースゲルにおいて電気泳動した後、約1.2kbpサイズのバンドからDNAを精製した。回収されたDNA切片は、pKD46ベクター(非特許文献5)に予め形質転換させたCJM2菌株にエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションのために、pKD46に形質転換されたCJM2菌株は、100μg/Lのアンピシリンと5mMのアラビノース(l−arabinose)が含まれたLB培地を用いて、30℃でОD600=0.6まで培養させた後、滅菌蒸留水で1回、10%グリセロールで2回洗浄して使用した。エレクトロポレーションは、2500Vで加えた。回収された菌株を25μg/Lのクロラムフェニコールを含んだLB平板培地に塗抹し、37℃で一晩培養した後、耐性を示す菌株を選別した。
前記CJM2−AP菌株において、feedback resistant coaA形質を有するようにするために、w3110 gDNAを鋳型とし、制限酵素EcoRIが含まれた配列番号35及び配列番号36のプライマーを用いたPCRを行い、パントテン酸キナーゼをコードするcoaA遺伝子を確保した。重合酵素は、PfuUltraTMの信頼性の高いDNAポリマラーゼ(Stratagene)を使用し、PCR条件は、変性96℃、30秒;アニーリング50℃、30秒;及び重合反応72℃、2分を30回繰り返した。
5’ ATGAGTATAAAAGAGCAAAC 3’
<配列番号36>
5’ TTATTTGCGTAGTCTGACC 3’
前記で得られたpSG−76C−coaAを用いてsite directed mutagenesis (Stratagene、米国)法で、配列番号37及び配列番号38のプライマーを用いてpSG−76C−coaA(R106A)を作製した。
5’GGAAAAGTACAACCGCCgccGTATTGCAGGCGCTATT 3’
<配列番号38>
5’AATAGCGCCTGCAATACggcGGCGGTTGTACTTTTCC 3’
CJM2−AP菌株に前記pSG76C−coaA(R106A)プラスミドを形質転換し、LB−Cm(Yeast extract 10g/L、NaCl 5g/L、Tryptone 10g/L、クロラムフェニコール 25μg/L)培地において培養した後、クロラムフェニコール耐性を有するコロニーを選抜した。選抜された形質転換体は、pSG76c−coaA(R106A)が遺伝体内のcoaA部分に1次で挿入された菌株である。
CJM2またはCJM2−AP/CO菌株は、ホモセリンが過量生産される菌株であるが、ホモセリンの生産性をより向上させるために、ppc、aspC、asdの三つの遺伝子のコピー数の増幅を試みた。特許文献6の実施例<1−1>乃至<1−3>に開示された方法であり、pSG76c−2ppc、pSG76c−2aspC、pSG76c−2asdのプラスミドを作製し、CJM2−AP/CO菌株に前記プラスミドを作製し、実施例<1−5>の方法で、前記三つの遺伝子を順次に2コピー増幅された菌株を作製した。このように作製された菌株は、CJM3と命名した。CJM3は、菌株内にホモセリンがCJM2菌株に比べてさらに過量蓄積され、導入されるプラスミドにより、О−アセチルホモセリンまたはО−スクシニルホモセリンを生産することができる菌株である。
CJM2とCJM3の2種の菌株をコンピテント細胞で作製し、コンピテント細胞に電気穿孔法(electroporation)で、pCL_Pcj1_metX、pCL_Pcj1_metA、pCL_Pcj1_metA(EL)、pCL_Pcj1_metA(EH)、pCL_Pcj1_metA(ET)、pCL_Pcj1_metA#11、pCL_Pcj1_metA#11(EL)、pCL_Pcj1_metA#11(EH)、 pCL_Pcj1_metA#11(ET)の9種のプラスミドをそれぞれ導入した。
Claims (18)
- 配列番号17のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたは前記ポリペプチド配列と95%以上の相同性を有するポリペプチドの開始メチオニンから111番目のアミノ酸が、グルタミン酸に置換されたホモセリンО−アセチルトランスフェラーゼ活性を有する、変異型ポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、さらに、112番目のアミノ酸がスレオニンまたはヒスチジンに置換されたものである、請求項1に記載の変異型ポリペプチド。
- 前記変異型ポリペプチドが、配列番号18乃至20のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有するものである、請求項1または2に記載の変異型ポリペプチド。
- 前記ポリペプチドのアミノ酸を置換し、メチオニンに対するフィードバック調節が解除されたものである、請求項1に記載の変異型ポリペプチド。
- 前記アミノ酸の置換が、29番目のアミノ酸がプロリンに置換、114番目のアミノ酸がグリシンに置換、140番目のアミノ酸がセリンに置換、または前記3種のアミノ酸置換のうち、1種以上を組み合わせたものである、請求項4に記載の変異型ポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、さらに、112番目のアミノ酸がスレオニンまたはヒスチジンに置換されたものである、請求項5に記載の変異型ポリペプチド。
- 前記変異型ポリペプチドが、配列番号21乃至23のアミノ酸配列のいずれか一つのアミノ酸配列を有するものである、請求項5または6に記載の変異型ポリペプチド。
- 請求項1に記載の変異型ポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
- 前記ポリヌクレオチドが、配列番号24乃至29の塩基配列のいずれか一つの塩基配列を有するものである、請求項8に記載のポリヌクレオチド。
- 請求項8に記載のポリヌクレオチドが作動可能に連結された、組み換えベクター。
- 請求項8に記載のポリヌクレオチドを含む、微生物。
- さらに、アセチル−CoAシンテターゼ(acetyl-CoA synthetase)の活性が内在的アセチル−CoAシンテターゼの活性に比べ強化され、またはパントテン酸キナーゼ(pantothenate kinase)の活性がCoAの蓄積によるフィードバック阻害が解除されるように変形されたものである、請求項11に記載の微生物。
- さらに、ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼコード遺伝子(ppc)、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼコード遺伝子(aspC)、及びアスパラギン酸セミアルデヒドデヒドロゲナーゼコード遺伝子(asd)からなる群から選ばれる一つ以上の遺伝子のコピー数が増加され、または前記遺伝子のプロモーターの活性が増進されたプロモーターに置換されるか、または活性が増進されるように変異された、請求項11に記載の微生物。
- 請求項10に記載の組み換えベクターに形質変換された、微生物。
- 前記微生物が、エシェリキア(Escherichia)属である、請求項14に記載の微生物。
- 前記微生物が、大腸菌である、請求項15に記載の微生物。
- 前記微生物が、受託番号KCCM11145P、KCCM11146P、KCCM11147P、KCCM11228P、KCCM11229P、またはKCCM11230Pである、請求項16に記載の微生物。
- 請求項11乃至17のいずれか一項に記載の微生物を培養する段階、及び前記微生物培養過程において生成したО−アセチルホモセリンを得る段階を含む、О−アセチルホモセリンの生産方法。
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Cited By (4)
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US9920357B2 (en) | 2012-06-06 | 2018-03-20 | The Procter & Gamble Company | Systems and methods for identifying cosmetic agents for hair/scalp care compositions |
US10072293B2 (en) | 2011-03-31 | 2018-09-11 | The Procter And Gamble Company | Systems, models and methods for identifying and evaluating skin-active agents effective for treating dandruff/seborrheic dermatitis |
JP7491588B2 (ja) | 2018-07-09 | 2024-05-28 | コデクシス, インコーポレイテッド | 操作されたパントテン酸キナーゼ改変体酵素 |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9834491B2 (en) | 2013-03-20 | 2017-12-05 | Cj Cheiljedang Corporation | Method for producing bio-based homoserine lactone and bio-based organic acid from O-acyl homoserine produced by microorganisms |
KR101555749B1 (ko) * | 2013-10-23 | 2015-09-25 | 씨제이제일제당 (주) | O-숙시닐호모세린 생산 미생물 및 이를 이용한 o-숙시닐호모세린의 생산방법 |
KR101565213B1 (ko) * | 2013-10-23 | 2015-11-03 | 씨제이제일제당 (주) | O-숙시닐호모세린 생산 미생물 및 이를 이용한 o-숙시닐호모세린의 생산방법 |
AU2014386892B2 (en) * | 2014-03-20 | 2017-11-23 | Cj Cheiljedang Corporation | Method for preparing biobased homoserine lactone hydrochloride and biobased organic acid from microorganism-derived O-acyl homoserine |
KR101641770B1 (ko) * | 2014-06-23 | 2016-07-22 | 씨제이제일제당 (주) | O-아세틸 호모세린을 생산하는 미생물 및 상기 미생물을 이용하여 o-아세틸 호모세린을 생산하는 방법 |
ES2906229T3 (es) * | 2015-06-04 | 2022-04-13 | Cj Cheiljedang Corp | Microorganismo productor de O-acetil-homoserina, y método para producir O-acetil-homoserina mediante el uso de este |
WO2017089077A1 (en) | 2015-11-27 | 2017-06-01 | Evonik Degussa Gmbh | Method for producing l-methionine |
US20200370058A1 (en) * | 2017-06-06 | 2020-11-26 | Zymergen Inc. | A htp genomic engineering platform for improving escherichia coli |
RU2747493C1 (ru) * | 2017-06-30 | 2021-05-05 | СиДжей ЧеилДжеданг Корпорейшн | Новый вариант О-сукцинилгомосеринтрансферазы и способ получения О-сукцинилгомосерина с использованием этого варианта |
CN110129294B (zh) * | 2018-02-02 | 2021-12-24 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 高丝氨酸乙酰基转移酶突变体及其宿主细胞和应用 |
KR101947959B1 (ko) * | 2018-05-28 | 2019-02-13 | 씨제이제일제당 (주) | 변이형 호모세린 디하이드로게나제 및 이를 이용한 호모세린 또는 호모세린 유래 l-아미노산의 생산 방법 |
KR101996769B1 (ko) | 2018-12-21 | 2019-10-01 | 씨제이제일제당 (주) | 변이형 호모세린 디하이드로게나제 및 이를 이용한 호모세린 또는 호모세린 유래 l-아미노산의 생산 방법 |
CA3213902A1 (en) | 2021-04-01 | 2022-10-06 | Markus Potter | Enzymatic method for producing l-glufosinate and its phosphoesters |
WO2024061455A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Evonik Operations Gmbh | Enzymatic method for producing l-glufosinate and its phosphoesters |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009060791A (ja) * | 2006-03-30 | 2009-03-26 | Ajinomoto Co Inc | L−アミノ酸生産菌及びl−アミノ酸の製造法 |
JP2009247354A (ja) * | 2008-04-04 | 2009-10-29 | Cj Cheiljedang Corp | L−メチオニン前駆体生産菌株およびこれを用いたl−メチオニン前駆体の生産方法 |
JP2010523145A (ja) * | 2007-04-11 | 2010-07-15 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | 組成物およびメチオニン生産方法 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4110641B2 (ja) * | 1998-11-17 | 2008-07-02 | 味の素株式会社 | 発酵法によるl−メチオニンの製造法 |
DE10239073A1 (de) * | 2002-08-26 | 2004-03-11 | Basf Ag | Verfahren zur fermentativen Herstellung schwefelhaltiger Feinchemikalien |
DE10249642A1 (de) * | 2002-10-24 | 2004-05-13 | Consortium für elektrochemische Industrie GmbH | Feedback-resistente Homoserin-Transsuccinylasen mit modifiziertem C-Terminus |
MXPA05008857A (es) | 2003-02-18 | 2006-03-09 | Metabolic Explorer Sa | Procedimiento de preparacion de microorganismos evolucionados que permite la creacion o la modificacion de vias metabolicas. |
US20040199941A1 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-07 | Rice University | Increased bacterial CoA and acetyl-CoA pools |
AU2004245988A1 (en) | 2003-05-30 | 2004-12-16 | Microbia, Inc. | Methods and compositions for amino acid production |
WO2005111202A1 (en) | 2004-05-12 | 2005-11-24 | Metabolic Explorer | Recombinant enzyme with altered feedback sensitivity |
KR100620092B1 (ko) | 2004-12-16 | 2006-09-08 | 씨제이 주식회사 | 코리네박테리움 속 세포로부터 유래된 신규한 프로모터서열, 그를 포함하는 발현 카세트 및 벡터, 상기 벡터를포함하는 숙주 세포 및 그를 이용하여 유전자를 발현하는방법 |
EP1741881B1 (de) | 2005-06-30 | 2009-04-01 | Muhr und Bender KG | Ventilfederteller mit radialer Stützkraftverstärkung |
JP2009501550A (ja) * | 2005-07-18 | 2009-01-22 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | メチオニン生産組換え微生物 |
KR101136248B1 (ko) * | 2008-04-04 | 2012-04-20 | 씨제이제일제당 (주) | L-메치오닌 전구체 생산 균주 및 이를 이용한 l-메치오닌 전구체의 생산 방법 |
US9005952B2 (en) * | 2008-04-04 | 2015-04-14 | Cj Cheiljedang Corporation | Microorganism producing L-methionine precursor and the method of producing L-methionine precursor using the microorganism |
US8283152B2 (en) | 2009-08-28 | 2012-10-09 | Cj Cheiljedang Corporation | Microorganism producing O-acetyl-homoserine and the method of producing O-acetyl-homoserine using the microorganism |
US8609396B2 (en) * | 2009-08-28 | 2013-12-17 | Cj Cheiljedang Corporation | Microorganism producing O-acetyl-homoserine and the method of producing O-acetyl-homoserine using the microorganism |
DK2634193T3 (en) * | 2012-02-29 | 2015-03-02 | Enzypep B V | Condensation of the side-chain protected oligopeptidfragmenter using subtilisins in organic solvents |
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2011
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009060791A (ja) * | 2006-03-30 | 2009-03-26 | Ajinomoto Co Inc | L−アミノ酸生産菌及びl−アミノ酸の製造法 |
JP2010523145A (ja) * | 2007-04-11 | 2010-07-15 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | 組成物およびメチオニン生産方法 |
JP2009247354A (ja) * | 2008-04-04 | 2009-10-29 | Cj Cheiljedang Corp | L−メチオニン前駆体生産菌株およびこれを用いたl−メチオニン前駆体の生産方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6014039846; 'A single amino acid change is responsible for evolution of acyltransferase specificity in bacterial' J Biol Chem. 283(12), 2008, p.7561-7567 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10072293B2 (en) | 2011-03-31 | 2018-09-11 | The Procter And Gamble Company | Systems, models and methods for identifying and evaluating skin-active agents effective for treating dandruff/seborrheic dermatitis |
US9920357B2 (en) | 2012-06-06 | 2018-03-20 | The Procter & Gamble Company | Systems and methods for identifying cosmetic agents for hair/scalp care compositions |
JP2017516485A (ja) * | 2014-06-05 | 2017-06-22 | シージェイ チェイルジェダング コーポレイション | O−アセチル−ホモセリンを生産する微生物及びこれを用いてo−アセチル−ホモセリンを生産する方法 |
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