JP2014240398A - ニトリル誘導体ならびにそれらの薬学的使用および組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染等の過剰増殖性疾患を治療する薬学的組成物の提供。【解決手段】式Ｉで示される特定のニトリル誘導体からなる薬学的組成物。［ＺはＳ；ｎ及びｍは、０〜８の整数；Ｒ１〜Ｒ３は、Ｈ、−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、及びＣ２−６アルキニル；Ｗは非存在、−ＣＨＲ４−ＣＨＲ５−，−ＣＲ４＝Ｒ５−又は−Ｃ≡Ｃ−；Ｒ４及びＲ５は−ＣＨ２−シクロヘキシル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルケニル、Ｃ１−６アルキニル又はＣ１−６アルキルエーテル；Ｒ１及びＲ２は、窒素を含む５員以上の複素環を形成してもよい］【選択図】なし

Description

本発明は、ニトリル誘導体およびニトリル誘導体を含む薬学的組成物に関する。本発明
は、そのような化合物の薬学的に許容される塩、そのような化合物を調製するための過程
、そのような化合物の調製に使用される中間体、ならびに過剰増殖性疾患、炎症性疾患、
およびウイルスおよび細菌感染の治療におけるそのような化合物の使用にも関する。

前述される誘導体およびそれらの薬学的に許容される塩は、ＡＫＴ阻害、細胞周期過剰
増殖の阻害、癌細胞におけるアポトーシスの細胞周期特異的誘導、ＬＴＢ_４活性の阻害、
および抗血管形成活性のうちの１つまたは複数の特性を有し、実験動物において、腫瘍の
大きさの著しい減少を示す。したがって、これらの化合物は、過剰増殖性疾患、例えば、
神経膠腫を含む頭頸部癌、薬物耐性肺癌、ヒトにおけるエストロゲン依存性または非依存
性癌、非小細胞肺癌、および結腸癌を含むが、これらに限定されない、哺乳動物における
広範な疾患の治療に有用である。エストロゲン依存性癌の非限定例は、乳癌および卵巣癌
である。それらのＬＴＢ_４活性の阻害の結果として、これらの化合物は、炎症性疾患、例
えば、アレルギー、喘息、および関節炎等の炎症性疾患の治療に有用であり、それらのＡ
ＫＴ阻害およびサイトカイン活性の結果として、これらの化合物は、ウイルスおよび細菌
感染の治療にも有用である。現在、前述の疾患に対する新しい治療法を見出すことに大き
な関心が寄せられている。

置換イソチオ尿素化合物の塩は、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＪＡＣＳ，Ｖｏｌ．６
２，２０９９−２１０３（１９４０）、Ｓｈａｐｉｒｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｒａｄｉａｔｉ
ｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．１，２２−３４（１９５７）、Ｋｉｎｇ
ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．８，１４９９−１５０
６（１９７８）、Ｂａｕｅｒ ａｎｄ Ｗｅｌｓｈ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２
６，Ｎｏ．５，１４４３−１４４５（１９６１）、Ｓｏｕｔｈａｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ
．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，Ｖｏｌ．１１４，５１０−５１６（１９９５）、およびＧ
ｅｒｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌ．７７，１８
６（２０００）において言及されている。

特定の実施形態において、本発明は、ヒトを含むが、これに限定されない哺乳動物にお
いて、癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を含むが、これらに限定されな
い過剰増殖性疾患を治療するための薬学的組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗
ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、

式中、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺは、ＣｌＯ_２、
ＢｒＯ_２、およびＩＯ_２から選択されるハロゲン含有部分であり、
式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ
_２−Ｃ_６アルケニル、およびＣ_２−Ｃ_６アルキニルから独立して選択され、アルキル、ア
ルケニル、およびアルキニル基のアルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直
鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであ
ってもよく、基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル
、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、および
Ｏ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
Ｒ^１およびＲ^２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素
に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、

式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには
、Ｒ^３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ_２基は、２個の水素ではなく１個の水
素を有するか、
またはＲ^２およびＲ^３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員
以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、

Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、

、または−ＣＨＲ^４−ＣＨＲ^５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−、ｃｉｓ−ＣＲ^４＝Ｃ
Ｒ^５−から選択され、Ｒ^４およびＲ^５は、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキ
ル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、およびＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテル
（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択されるか、または
Ｗは、二置換部分であり、二置換という用語は、Ｗが、
（ａ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和
または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしく
は２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換
５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−また
は１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，
２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、

式中、破線は、任意の二重結合を示す、環と、

（ｂ）以下の式によって示されるように、１、２、もしくは３個の二重結合を有し、飽和
または不飽和であり得る、１，２−、１，３−、または１，４−二置換６員環、１もしく
は２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−または１，３−二置換
５員環、１もしくは２個の二重結合を有し、飽和または不飽和であり得る、１，２−また
は１，３−二置換４員環、あるいは二重結合を有し、飽和および不飽和であり得る、１，
２−二置換３員環であって、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり、二置
換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９を有し
てもよく、

式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、およびＲ^９は、水素、−ＣＨ
_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニ
ル、またはＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテルから独立して選択され、６員環は、飽和であり得
るか、または１、２、もしくは３個の二重結合を有してもよく、５員環および４員環は、
飽和であり得るか、または１もしくは２個の二重結合を有してもよく、３員環は、飽和で
あり得るか、または１個の二重結合を有してもよく、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄であ
る、環と、

（ｃ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示され
るように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、または１
，７−二置換飽和および不飽和９員環から選択される環であって、環は、以下に記載され
る２〜１３番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり
、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、およ
びＲ^１０を有してもよく、

式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、およびＲ^１０は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ
_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、またはＣ_１−Ｃ_６アルキル
エーテルから独立してから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環
と、

（ｄ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示され
るように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−
、または１，８−二置換飽和および不飽和ナフタレン環から選択される環であって、環は
、以下に記載される２〜６番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結
合する基であり、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ
^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、およびＲ^１１を有してもよく、

式中、破線は、任意の二重結合を示し、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、およびＲ^１１
は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ
_２−Ｃ_６アルキニル、またはＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテルから独立してから独立して選択
され、Ｙは、窒素、酸素、または硫黄である、環と、

（ｅ）１個または複数の二重結合を有し、環位置に、以下に記載される最初の環に示され
るように番号を付けた、１，２−、１，３−、１，４−、１，５−、１，６−、１，７−
、１，８−、１，９−、１，１０−、２，５−、３，５−、４，５−、または５，１０−
二置換飽和および不飽和アントラセン環から選択される環であって、環は、以下に記載さ
れる２〜９番目の環から選択され、二置換環上の置換基は、式ＩのＷに結合する基であり
、二置換環は、以下の式に示されるように、追加の置換基Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１
０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、およびＲ^１３を有してもよく、

式中、破線は、任意の二重結合を示し、
Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、およびＲ^１３は、水素、−ＣＨ_２−
シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、
またはＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテルから独立して選択され、Ｙは、窒素、酸素、または硫
黄である、環と、
から成る二置換部分の群から選択される、基（ＣＨ_２）_ｍおよび（ＣＨ_２）_ｎにどのよう
に結合するかを示すために使用される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む。

一実施形態において、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ_２−シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−
ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ_２−シクロブチル、ｎ−
ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−
ＣＨ_２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ_２
−シクロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イ
ル、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選
択され、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ
、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブ
チルから選択される１つまたは複数の置換基を担持し得る。

発明の一実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ

の化合物であり、式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、上記で定義される
とおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である。一実施形態において、酸は、ＨＣｌ
である。別の実施形態において、酸は、ＨＢｒである。

発明の一実施形態において、Ｚは、硫黄、銅、銀、金、または白金である。発明の別の
実施形態において、Ｚは硫黄である。発明の別の実施形態において、Ｚは銅である。発明
の別の実施形態において、Ｚは金である。発明の別の実施形態において、Ｚは、上記で定
義されるようなハロゲン含有部分である。発明の別の実施形態において、Ｒ^１、Ｒ^２、お
よびＲ^３は、それぞれ水素である。発明の一特定化合物において、Ｚは銅であり、Ｒ^１、
Ｒ^２、およびＲ^３は、それぞれ水素であり、ｍは１であり、ｎは１であり、ＷはＣＨ_２で
ある。

発明の一実施形態において、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、
Ｒ^１２、およびＲ^１３は、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロ
プロピル、−ＣＨ_２−シクロプロピル、ビニル、アリール、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル
、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ_２−シクロブチル、ｎ−ペンチ
ル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ_２
−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、−ＣＨ_２−シク
ロヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル、エ
チニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルから独立して選択され
、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エト
キシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルか
ら選択される、１つまたは複数の置換基を担持し得る。

発明の一実施形態において、Ｗは、アリールまたはビニルである。

本発明の一実施形態は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細
菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的組成物に関
し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の４−イソチオウレイド
ブチロニトリル（Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−（γ−シアノプロ
ピル）イソチオ尿素とも称される）またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許
容される担体を含む。特定の実施形態において、組成物は、「Ｋｅｖｅｔｒｉｎ」として
も知られる、４−イソチオウレイドブチロニトリルの塩酸酸付加塩を含む。この塩は、以
下の式を有する。

別の実施形態において、組成物は、４−イソチオウレイドブチロニトリルの臭化水素酸
酸付加塩を含む。

別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイル
スおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的
組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（２−
シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シア
ノペンチル）イソチオ尿素から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩、お
よび薬学的に許容される担体を含む。

別の実施形態において、本発明は、哺乳動物における癌、炎症性疾患、ならびにウイル
スおよび細菌感染を含むが、これらに限定されない過剰増殖性疾患の治療のための薬学的
組成物に関し、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量のＳ−（４−
シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］
フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイ
ソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩
酸塩、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノ
メチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩から選択される化合物、またはそ
の異なる薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む。別の実施形態に
おいて、薬学的組成物は、以下に記載される実施例１１で説明されるように調製される化
合物から選択される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩
基、および薬学的に許容される担体を含む。

発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを
含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿
素ＨＣｌまたはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明の別の実施形態に
おいて、薬学的組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含ま
ない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、遊離塩基または塩として、Ｓ−シ
アノメチルイソチオ尿素を含まない。

発明の一実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素
ＨＣｌ、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒ、およびＳ−シアノメチルイソチオ尿素Ｈ
Ｃｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチ
ル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−シアノメ
チルイソチオ尿素ＨＣｌ、またはＳ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含まない。発明
の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、お
よびＳ−シアノメチルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の別の実施
形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素を遊離塩基また
は塩として含まず、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素を遊離塩基または塩として含まない。

発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素Ｈ
Ｃｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿
素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イ
ソチオ尿素ｐ−トルエンスルホネート、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ
、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジ
ルイソチオ尿素ＨＣｌを含まない。発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−
（３−シアノプロピル）イソチオ尿素またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭
化水素酸塩も含まない。

発明の別の実施形態において、薬学的組成物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、ま
たはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩を含まない。発明の
別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シア
ノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−
シアノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。

式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、その酸付加および塩基塩（二塩を含む）を含
む。適切な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例には、酢酸塩、アスパ
ラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩
、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセ
プチン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、
塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、
乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル
酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、オキサル酸塩、パルミ
チン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素／リン酸二水素、サッカラート、ステアリン
酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。適
切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例には、アルミニウム、アルギ
ニン、ベンザチン、カルシウム、塩素、ジエチルアミン、ジオラミン、グリシン、リシン
、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および
亜鉛塩が挙げられる。適切な塩に関する考察は、″Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍ
ａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ
Ｕｓｅ″ｂｙ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎ
ｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照されたい。

式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物の溶液および所望の酸または塩
基を、必要に応じて一緒に混合することによって容易に調製され得る。塩は、溶液から沈
殿し、ろ過によって収集され得るか、または溶媒の蒸発によって回収され得る。塩中のイ
オン化の程度は、完全なイオン化からほぼ非イオン化まで異なり得る。

式Ｉの化合物およびその薬学的に許容される塩（以降、活性化合物とも称される）は、
非溶媒および溶媒形態で存在し得る。活性化合物（塩、遊離塩基、遊離酸、および中性化
合物の形態のものを含む）は、水和物および他の溶媒を形成し得る。「溶媒和物」とう用
語は、本明細書において、発明の化合物、および１つまたは複数の薬学的に許容される溶
媒分子、例えば、エタノールを含む、分子複合体を説明するために使用される。「水和物
」という用語は、当該溶媒が水である場合に用いられる。薬学的に許容される溶媒は、水
和物および他の溶媒を含み、結晶化の溶媒は、同位体置換、例えば、Ｄ_２Ｏ、ｄ_６−アセ
トン、ｄ_６−ＤＭＳＯであり得る。活性化合物は、クラスレートまたは他の複合体として
存在し得る。一般に、溶媒、水和等の形態は、非溶媒、非水和／無水等の形態と同等であ
り、本明細書において請求される化合物、組成物、および用途は、これらの形態、ならび
に異性体、結晶、および非晶質形態、ならびに以下に論じられる同位体標識化合物を、本
発明の範囲内に包含することが意図される。

１つまたは複数の非対称炭素原子を含有する式Ｉの化合物は、２つ以上の立体異性体と
して存在し得る。式Ｉの化合物がアルケニルまたはアルケニレン基、あるいはシクロアル
ケニル基を含有する場合、幾何ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ（またはＺ／Ｅ）異性体が可能である
。化合物が、例えば、ケトまたはオキシム基、あるいは芳香族部分を含有する場合、互変
異性異性（「互変異性」）が起こり得る。単一の化合物が、１種類より多くの互変異性を
呈し得るということになる。式Ｉの化合物は、それらが酸付加または塩基塩を形成する場
合、異性体としても存在し得、そこでは対イオンは、光学的に活性な、例えば、Ｄ−乳酸
またはＬ−リシン、あるいはラセミ、例えば、ＤＬ−酒石酸またはＤＬ−アルギニンであ
る。

立体異性体の混合物は、当業者に知られている従来技術によって分離され得る。例えば
、″Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ″ｂ
ｙ Ｅ．Ｌ．．Ｅｌｉｅｌ（Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４）を参照されたい
。

Ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体は、当業者によく知られている従来技術、例えば、クロマト
グラフィおよび分別結晶によって分離され得る。

一般に、本発明の鏡像異性的に純粋な化合物は、当該技術分野において知られている過
程、例えば、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成およびラセミ化合物（または
塩あるいは誘導体のラセミ化合物）の溶解に従って、調製および単離され得る。例えば、
ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、キラル高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）
を使用して分離され得る。代替として、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、適切な
光学的に活性な化合物、例えば、アルコールと反応し得るか、または式Ｉの化合物が酸性
または塩基性部分を含有する場合は、酸または塩基、例えば、酒石酸または１−フェニル
エチルアミンと反応し得る。得られるジアステレオ異性体混合物は、クロマトグラフィま
たは分別結晶、あるいはそれらの両方によって分離され得、両方のジアステレオ異性体は
、当業者によく知られている手段によって、１つまたは複数の対応する純粋な鏡像異性体
に変換され得る。

本発明のキラル化合物（およびそのキラル前駆体）は、クロマトグラフィ、通常、ＨＰ
ＬＣを使用して、鏡像異性的に富化された形態で、非対称固定相および移動相を有する樹
脂上で取得されてもよく、それは炭化水素、通常、ヘプタンまたはヘキサンから成り、０
〜５０％のイソプロパノール、通常、２〜２０％、および０〜５％のアルキルアミン、通
常０．１％のジエチルアミンを含有する。溶出液の濃縮は、富化混合物をもたらす。

固体の状態において、本発明の化合物は、結晶または非晶質形態で存在し得る。

本発明は、本明細書において請求される式Ｉの薬学的に許容されるすべての同位体標識
化合物を含み、そこでは１つまたは複数の原子が、同一の原子番号を有するが、原子質量
または質量番号が、自然界で通常見出される原子質量または質量番号とは異なる原子と置
換される。

発明の化合物に含有するために適した同位体の例には、水素の同位体、例えば^２Ｈおよ
び^３Ｈ、炭素の同位体、例えば^１１Ｃ、^１３Ｃ、および^１４Ｃ、塩素の同位体、例えば^３
６Ｃｌ、フッ素のの同位体、例えば^１８Ｆ、ヨウ素の同位体、例えば^１２３Ｉおよび^１２
５Ｉ、窒素の同位体、例えば^１３Ｎおよび^１５Ｎ、酸素の同位体、例えば^１５Ｏ、^１７Ｏ
、および^１８Ｏ、リンの同位体、例えば^３２Ｐ、および硫黄の同位体、例えば、^３５Ｓが
挙げられる。式Ｉの特定の同位体的標識化合物、例えば、放射性同位体を組み込むものは
、薬物および／または基質組織分布研究において有用である。放射性同位体のトリチウム
、すなわち^３Ｈ、および炭素１４、すなわち^１４Ｃは、それらの組み込みの容易さ、およ
び検出の容易な手段を考慮すると、この目的で特に有用である。より重い同位体、例えば
、ジウテリウム、すなわち^２Ｈによる置換は、優れた代謝安定性、例えば、インビボ半減
期の増加または用量要件の減少によって生じる特定の治療利益をもたらし得、したがって
、いくつかの状況において好適であり得る。陽電子放出同位体、例えば、^１１Ｃ、^１８Ｆ
、^１５Ｏ、および^１３Ｎによる置換は、陽電子放出トポグラフィ（ＰＥＴ）研究において
、置換基受容体の占有を調べるために有用であり得る。

式Ｉの同位体的標識化合物は、一般に、当業者に知られている従来技術によって、また
は添付の実施例に記載されるものに類似する過程によって、以前に用いられた非標識試薬
の代わりに、適切な同位体的標識試薬を使用して、調製され得る。

本発明は、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、およ
び薬学的に許容される担体を含む、細胞過剰増殖の治療のための薬学的組成物にも関する
。別の実施形態において、本発明は、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許
容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学的組成物に関す
る。別の実施形態において、本発明は、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、または
その薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌治療のための薬学
的組成物に関する。他の実施形態において、上述される薬学的組成物から除外される化合
物の１つまたは複数は、この段落で参照される薬学的組成物からも同様に除外され得る。

本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖
または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許
容される担体を含む、用量単位形態の薬学的組成物にも関する。他の実施形態において、
上述される薬学的組成物から除外される化合物の１つまたは複数は、前述の薬学的組成物
からも同様に除外され得る。

本発明は、癌を含むが、それに限定されない細胞過剰増殖の治療のための、抗過剰増殖
または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許
容される担体を含む、非経口薬学的組成物にも関する。医薬品は、所望される量の製品を
、滅菌等張液に溶解することによって得ることができ、任意の所望される経路で容易に投
与され得る。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除外される化合物の１つまた
は複数は、前述の薬学的組成物からも同様に除外され得る。

本発明は、ヒトを含む哺乳動物において、癌を含むが、これらに限定されない過剰増殖
性疾患、炎症性疾患、ならびにウイルスおよび細菌感染を治療する方法にも関し、そのよ
うな治療を必要とする患者に、抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルスまたは抗菌有効量
の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。一実施形態に
おいて、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル
）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）
イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［
２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）
メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素
、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチ
ルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択
される。別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩
酸塩から選択される。別の実施形態において、化合物は、以下の実施例１１に記載される
ように調製される化合物、またはその異なる薬学的に許容される塩、またはその遊離塩基
から選択される。

本発明は、過剰増殖性疾患を治療する方法にも関し、そのような治療を必要とする患者
に、抗過剰増殖有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与すること
を含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのような治療を
必要とする患者に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与
することを含む。別の実施形態において、本発明は、癌を治療する方法に関し、そのよう
な治療を必要とする患者に、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的
に許容される塩を投与することを含む。他の実施形態において、上述薬学的組成物から除
外される化合物の１つまたは複数は、この段落で参照される方法からも同様に除外され得
る。

本発明は、哺乳動物において、頭頸部癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型の肺およ
び任意の女性癌、卵巣癌、乳癌、または結腸癌を治療する方法にも関し、そのような治療
を必要とする哺乳動物に、抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩
を投与することを含む。本発明の一実施形態において、癌は、頭頸部癌、非小細胞肺癌、
卵巣癌、および結腸癌から選択される。本発明の一実施形態において、頭部癌は、神経膠
腫である。

本発明は、アポトーシスの誘導に応答する過剰増殖性疾患の治療を、そのような治療を
必要とする哺乳動物において行う方法にも関し、それを必要とする哺乳動物に、個別に、
同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容
される塩である、活性化合物の量、および少なくとも１つの二次化合物または放射線の量
を投与することを含み、二次化合物は、化学療法抗癌剤および標的特異的抗癌剤から成る
群から選択される抗癌剤であり、活性化合物および当該二次化合物または放射線の量は、
治療効果をもたらす。発明の一実施形態において、当該二次化合物は、（ｉ）アルキル化
／カルバミル化剤、（ｉｉ）白金誘導体、（ｉｉｉ）抗有糸分裂剤／チューブリン阻害剤
、（ｉｖ）トポイソメラーゼ阻害剤、（ｖ）ピリミジン拮抗薬、（ｖｉ）プリン拮抗薬、
（ｖｉｉ）葉酸拮抗薬、および（ｖｉｉｉ）注入放射性物質から成る群から選択される。
発明の一実施形態において、当該標的特異的抗癌剤は、（ｉ）キナーゼ阻害剤、（ｉｉ）
プロテアソーム阻害剤、（ｉｉｉ）ヒストン脱アセチル化阻害剤、（ｉｖ）熱衝撃タンパ
ク質９０阻害剤、（ｖ）血管標的剤（ＶＡＴ）抗血管新生薬、およびＫＤＲチロシンキナ
ーゼ阻害剤、（ｖｉ）モノクローナル抗体および変異体、およびモノクローナル抗体と抗
体フラグメントの複合体、（ｖｉｉ）オリゴヌクレオチド系治療薬、（ｖｉｉｉ）トール
様受容体／ＴＬＲ９作動薬、ＴＬＲ７作動薬およびその類似体、またはＴＬＲ７／８作動
薬およびＴＬＲ７／８作動薬としての免疫刺激性ＲＮＡ、（ｉｘ）プロテアーゼ阻害剤、
（ｘ）ホルモン治療薬、（ｘｉ）ブレオマイシン、（ｘｉｉ）レチノイド、（ｘｉｉｉ）
ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｘｉｖ）アラノシン、（ｘｖ）サイトカイン
、（ｘｖｉ）インターフェロン、および（ｘｖｉｉ）細胞死受容体作動薬から成る群から
選択される。発明の一実施形態において、当該式Ｉの化合物またはその薬学的に許容され
る塩は、抗癌有効量の放射線と個別に、同時に、一斉に、順次、または経時的にずらして
投与される。本明細書で使用される、用語「有効量」は、それ自体で投与される場合に有
効な活性化合物の量、および別の治療剤と併せて投与される場合に有効な活性化合物の量
を含むことは、前述から明らかである。

本発明の方法によって治療され得る過剰増殖性疾患には、これらに限定されないが、乳
房、膀胱、骨、脳、中枢および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞
、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、肛
門、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、お
よびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性および急性骨髄性白血病、
急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形
成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、
およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍が挙げられ、疾患は、そのような治療を必要とする哺乳動物
に、抗過剰増殖または抗癌有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投
与することによって治療される。発明の一実施形態において、過剰増殖性疾患は、頭頸部
癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、耐性型肺癌および任意の女性癌、乳癌、卵巣癌、および
結腸癌から成る群から選択される。

本発明は、上記で定義されるような式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩で
あるが、但し、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチ
オ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル
）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸
塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソ
チオ尿素 ピクリン酸、およびＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌではないこ
とを条件とする、化合物にも関する。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（
３−シアノプロピル）イソチオ尿素、またはＳ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の臭
化水素酸塩でもない。

本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−
（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、または
Ｓ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素の薬学的に許容される塩ではない。本発明の別の
実施形態において、化合物は、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエ
チル）イソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、およびＳ−パラ−シア
ノベンジルイソチオ尿素、およびその薬学的に許容される塩から選択されない。

Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノメチルエステルとも
称され、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチオ酸，シアノエチ
ルエステルとも称され、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素は、カルバムイミドチ
オ酸，シアノプロピルエステルとも称され、Ｓ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素は、
カルバムイミドチオ酸，（４−シアノフェニル）メチルエステルとも称されることに留意
されたい。

本発明の一実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、お
よびＳ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、ならびにその薬学的に許容される塩から
選択される。本発明の別の実施形態において、化合物は、Ｓ−（４−シアノメチルフェニ
ル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイ
ソチオ尿素メシレート、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、
Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（３−シ
アノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−
イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩、またはその異なる薬学的に許容される塩から選択さ
れる。別の実施形態において、化合物は、以下に記載される実施例１１で説明されるよう
に調製される化合物、またはの異なる薬学的に許容される塩、もしくはその遊離塩基から
選択される。

本発明は、Ｚが硫黄である、式Ｉの化合物の塩酸塩付加塩を調製するための過程にも関
し、チオ尿素または式

のチオ尿素誘導体であって、式中、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、式Ｉに関して上
記で定義されるとおりである、チオ尿素誘導体を、式ＮＣ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｗ−（ＣＨ_２
）_ｍＣｌの適切なニトリル誘導体であって、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して
上記で定義されるとおりである、ニトリル誘導体と、水または水／アルコール溶媒中、あ
るいは極性溶媒中、還流温度で反応させて、Ｚが硫黄である式Ｉの化合物を得ること、お
よび必要に応じて、遊離塩基または異なる酸付加塩を調製することを含む。発明の一実施
形態において、溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノールから選択されるアル
コール、および前述のアルコールの１つまたは複数と水との混合液から選択される。

本発明は、式Ｉの化合物の塩酸付加塩を調製するための過程にも関し、Ｚは、銅、銀、
金、白金、およびＣｌＯ_２、ＢｒＯ_２、およびＩＯ_２から選択されるハロゲン含有部分か
ら選択され、式ＮＣ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｗ−（ＣＨ_２）_ｍＣｌの化合物であって、ｎ、ｍ、
およびＷは、式Ｉの化合物に関して上記で定義されるとおりである、化合物を、それぞれ
の金属の塩またはハロゲン含有部分の塩と反応させて、中間化合物を形成すること、およ
び次に、中間化合物を、チオ尿素または式

のチオ尿素誘導体であって、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、式Ｉに関して上記で定義される
とおりである、チオ尿素誘導体と反応させて、Ｚが銅、銀、金、白金、またはＣｌＯ_２、
ＢｒＯ_２、およびＩＯ_２から選択されるハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物を得るこ
とであって、中間物の形成および酸付加塩の形成は、水または水／アルコール溶媒または
極性溶媒中、還流温度で行われることと、および必要に応じて、遊離塩基または異なる酸
付加塩を調製することを含む。発明の一実施形態において、溶媒は、メタノール、エタノ
ール、イソプロパノールから選択されるアルコール、および前述のアルコールの１つまた
は複数と水との混合液から選択される。本発明は、式Ｉの化合物の臭化水素酸酸付加塩、
および式Ｉの化合物のメシレート塩の調製にも関する。臭化水素酸酸付加塩は、上述の過
程において、開始物質を含有する臭素を置換することによって調製される。メシレート塩
は、上述の過程において、メシレート開始物質を置換することによって調製される。本発
明の二塩は、塩を開始物質として使用することによって同様に調製され得る。遊離塩基が
２つの塩基中心を有する場合、そのような塩を形成することが可能であり得る。

Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性を示す。ヒト癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、５、１０、２０、３０、あるいは４５分間、または１、２、６、２４、または１２０時間曝露した。ＩＣ_５０として表される細胞生存能力を、ＭＴＴ分析を使用して測定して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎ曝露の時間に対してプロットした。 Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトルを示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが、表示腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響を、３倍増時間Ｋｅｖｅｔｒｉｎに連続曝露した後、ＭＴＴ分析を使用して測定した。表示値は、以下のように計算する：ログ（ＩＣ_５０個別の細胞株−ＩＣ_５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも感受性が高いことを示すが、正の値は、細胞株が平均よりも耐性が高いことを示す。試験したすべての細胞株の平均ＩＣ_５０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０^−７Ｍ、シスプラチンの場合、２．１ｘ１０^−６Ｍであった。 Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因するマウスの体重変化を示す。０日目にＫｅｖｅｔｒｉｎ ＩＶ１００ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ／ｋｇのいずれかで処置した後のマウスの動物体重が示される。 哺乳動物癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌を持つマウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入で処置し、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇタキソールの静脈内注入と比較した。 結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたは５−ＦＵの有効性を示す。ＨＴ−２９腫瘍を持つ裸マウスを、７、９、および１１日目に、２００ｍｇ／ｋｇのＫｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または５−ＦＵのいずれかで処置した。 前立腺癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはシスプラチンの有用性を示す。ＰＣ−３腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または７日目に１０ｍｇ／ｋｇのシスプラチンのいずれかで処置した。 ヒトＰ−糖タンパク質媒介耐性結腸癌におけるＫｅｖｅｔｒｉｎまたはタキソールの有効性を示す。ＨＣＴ−１５腫瘍を有する裸マウスを、７、９、および１１日目に２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの静脈内注入または腫瘍後７、９、１１、および１３日目に２２ｍｇ／ｋｇタキソールのいずれかで処置した。 Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および７、９、１１、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。 ＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における７、９、および１１日目のＫｅｖｅｔｒｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ、および１３日目のタキソール２２ｍｇ／ｋｇの有効性を示す。

Ｚが硫黄である、本発明において有用な化合物は、チオ尿素を、式ＮＣ−（ＣＨ_２）_ｎ
−Ｗ−（ＣＨ_２）_ｍＣｌの適切なニトリル誘導体と反応させることによって、水中で調製
され、式中、ｎ、ｍ、およびＷは、式Ｉの化合物に関して上で定義されるとおりである。
等量のチオ尿素およびニトリルを、１０倍量の水または水／アルコール溶媒、または極性
溶媒に添加し、加熱して、約４時間、大気圧で還流させる。水およびアルコールの混合液
を調製するため、または極性溶媒として使用するために適したアルコールの非限定例には
、メタノール、エタノール、およびイソプロパノールが挙げられる。反応混合液を蒸発さ
せて、所望の生成物を得る。この生成物は、エタノールまたは別の適切な溶媒、例えば、
イソプロパノールまたはメタノール、あるいは前述のアルコールの１つとアセトンとの混
合液からの再結晶化によって精製される。結晶物質は、ろ過によって収集され、高真空下
で乾燥される。Ｚが、銅、銀、金、および白金から選択されるか、またはＺが、ＣｌＯ_２
、ＢｒＯ_２、およびＩＯ_２から選択される、ハロゲン含有部分である、式Ｉの化合物は、
同様に調製される。

Ｗ部分のＹが、硫黄、酸素、または窒素である、式Ｉの化合物は、硫黄、酸素、または
窒素が、Ｗ部分の環上の所望の位置にある、適切なニトリル誘導体を選択することによっ
て調製される。

当業者であれば、関心対象の特定の化合物を形成するために、上述のものから条件を選
択する方法、またはそこに修正を行う方法が分かる。

患者の疾患および状態に応じて、本明細書で使用される、用語「治療」は、治療、緩和
、および予防的治療の１つまたは複数を含み得る。活性化合物は、患者の治療において、
放射線と一緒に、または他の抗過剰増殖化合物、例えば、シクロホスファミド、シスプラ
チン、カルボプラチン、タキソール、およびアービタックス、ならびに他の認可された抗
過剰増殖化合物と一緒に、複合または連続的に投与され得る。特定の疾患および患者の状
態に応じて、そのような治療は、化合物単独または放射線単独のいずれよりも有効であり
得る。抗過剰増殖、抗炎症、抗菌、または抗ウイルス用途の各活性化合物の正確な投与量
は、患者のタイプ、治療される疾患状態のタイプ、患者の年齢、および投与経路が挙げら
れるが、これらに限定されない多数の因子に応じて異なる。

ヒト患者に投与する場合、活性化合物の総日量は、投与方法に応じて、体重１ｋｇ当り
１ｍｇ〜３００ｍｇの範囲であることが予想される。例えば、経口投与は、体重１ｋｇ当
り１００ｍｇ〜３００ｍｇの総日量を必要とし得るが、静脈内用量は、体重１ｋｇ当り２
０ｍｇ〜２００ｍｇだけを必要とし得る。総日量は、単一または分割用量で投与されても
よい。体重約７０ｋｇの平均的ヒト対象の場合、用量は、経口投与で約１４００ｍｇ〜２
１０００ｍｇ、静脈内投与で約１４０ｍｇ〜１４００ｍｇとなるであろう。医師は、体重
がこの範囲外である対象、例えば、幼児および高齢者に対する用量を容易に決定すること
ができるであろう。獣医は、他の哺乳動物に対する用量を容易に決定することができるで
あろう。

一実施形態において、発明は、体重１ｋｇ当り２００ｍｇの活性化合物を含む、静脈内
溶液または懸濁液の投与を含む。上述の治療用途の場合、投与される用量は、当然のこと
ながら、用いられる化合物、投与方法、所望される治療、および示される疾患によって異
なる。総日量は、単一または分割用量で投与されてもよい。本発明は、持続放出組成物も
包含する。

薬学的組成物は、例えば、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、持続放出製剤、懸濁液として
経口投与に適した形態、滅菌溶液、懸濁液、または乳剤として非経口注入に適した形態、
軟膏またはクリームとして局所投与に適した形態、または坐薬として肛門投与に適した形
態であり得る。薬学的組成物は、精密用量の単一投与に適した単位用量形態であってもよ
い。薬学的組成物は、従来の薬学的担体または賦形剤、および活性化合物を含む。さらに
、他の医薬剤、担体、アジュバント等を含んでもよい。

典型的な非経口投与形態は、滅菌水溶液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデ
キストロース溶液中の活性化合物の溶液または懸濁液を含む。そのような投与形態は、必
要に応じて、適切に緩衝され得る。

適切な薬学的担体は、不活性希釈剤または充填剤、水、および種々の有機溶媒を含む。
薬学的組成物は、必要に応じて、追加の成分、例えば、香味剤、結合剤、賦形剤等を含有
し得る。したがって、経口投与の場合、種々の賦形剤、例えば、クエン酸を含有する錠剤
は、種々の崩壊剤、例えば、スターチ、アルギニン酸、および特定の複合ケイ酸と一緒に
、およびスクロース、ゼラチン、およびアカシア等の結合剤と一緒に用いられてもよい。
さらに、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびタルク等の滑沢剤
は、錠剤化目的で有用な場合が多い。類似型の固形組成物は、軟および硬ゼラチンカプセ
ルで用いられてもよい。これらの組成物の有用な成分は、ラクトース、乳糖、および高分
子量ポリエチレングリコールを含む。水性懸濁液またはエリキシルが、経口投与に所望さ
れる場合、そこでの活性化合物は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン
、またはそれらの組み合わせと一緒に、種々の甘味剤または香味剤、着色物質または染料
、および必要に応じて、乳化剤または懸濁剤と組み合わされてもよい。

種々の薬学的組成物を特定量の活性化合物で調製する方法は、既知であるか、または当
業者に明らかとなるであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ
ｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａ
ｓｔｅｒ，Ｐａ．，１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７５）を参照されたい。

本明細書に記載される用量範囲は、単なる例証であり、請求される組成物の範囲または
実践を限定することを意図しない。例えば、用量は、毒性作用および／または検査値等の
臨床効果を含み得る、薬物動態または薬力学的パラメータに基づいて調整されてもよい。
したがって、本発明は、熟練者によって決定されるように、患者内用量上昇を包含する。
化学療法剤の投与に適した用量およびレジメンを決定することは、関連技術においてよく
知られており、本明細書に開示される教示が一旦提供されると、熟練者によって包含され
ることが理解される。

発明の薬学的組成物は、単一単位用量、または複数の単一単位用量として、バルクで調
製、包装、または販売されてもよい。本明細書で使用される、「単位用量」は、規定量の
活性化合物を含む、個別量の薬学的組成物である。活性化合物の量は、概して、対象に投
与される、活性化合物の用量、またはそのような用量の便宜的分数、例えば、そのような
用量の１／２または１／３に等しい。

発明の薬学的組成物中の活性化合物、薬学的に許容される担体、および任意の追加成分
の相対量は、治療される対象が何であるが、その大きさ、および状態に応じて、さらに組
成物が投与される経路に応じて異なる。例として、組成物は、０．１％〜１００％（ｗ／
ｗ）の活性成分を含み得る。

活性化合物に加えて、本発明の薬学的組成物は、上述のように、１つまたは複数の追加
の治療上有効な化合物をさらに含み得る。

本明細書で使用される、薬学的組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的な切れ
目を入れることによって特徴付けられる任意の投与経路、および組織内の切れ目を通して
の薬学的組成物の投与を含む。したがって、非経口投与には、非経口投与には、組成物の
注入、外科的切開を通る組成物の適用、組織関数非外科的創傷を通る組成物の適用による
、薬学的組成物の投与が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、活性化合物
は、血流、筋肉、または内臓に直接投与され得る。非経口投与に適した手段には、静脈内
、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、および皮下、お
よび腎透析注入技術が挙げられる。そのような非経口投与に適したデバイスには、針（極
微針を含む）、注射器、無針注射器、および注入装置が挙げられる。

非経口製剤は、通常、塩、炭水化物、および緩衝剤（好ましくは、ｐＨ３〜９）等の賦
形剤を含有し得る、水溶液であるが、いくつかの適用の場合、それらは、滅菌非水溶液ま
たはピロゲンを含まない滅菌水等適切な媒体と併せて使用される乾燥形態として、より適
切に製剤され得る。

滅菌条件下、例えば、凍結乾燥による非経口製剤の調製は、当業者によく知られている
標準薬学的技術を使用して、容易に達成され得る。

非経口投与に適した薬学的組成物の製剤は、薬学的に許容される担体、例えば、滅菌水
または滅菌等張食塩水と組み合わされる、活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス
投与または連続投与に適した携帯で、調製、包装、または販売され得る。注入可能な製剤
は、単位用量形態、例えば、アンプルまたは保存量を含有する複数回投与容器で調製、包
装、または販売され得る。非経口投与のための製剤には、懸濁液、溶液、油性または水性
媒体中の乳剤、ペースト、および以下に論じられるような移植可能な持続放出または生分
解性製剤が挙げられるが、これらに限定されない。そのような製剤は、懸濁剤、安定剤、
または分散剤を含むが、これらに限定されない１つまたは複数の追加成分をさらに含んで
もよい。非経口投与用製剤の一実施形態において、活性成分は、再構成成分の非経口投与
に先立って、適切な媒体（例えば、ピロゲンを含まない滅菌水）による再構成のために、
乾燥（すなわち、粉末または粒状）形態で提供される。

薬学的組成物は、滅菌注入可能な水性または油性の懸濁液または溶液の形態で、調製、
包装、または販売され得る。懸濁液または溶液は、周知の技術に従って製剤され得、活性
成分に加えて、本明細書に記載される分散剤、湿潤剤、または懸濁剤等の追加成分を含ん
でもよい。そのような滅菌注入可能な製剤は、非毒性の非経口投与可能な希釈剤または溶
媒、例えば、水または１，３−ブタンジオール等を使用して調製され得る。他の許容され
る希釈剤および溶媒には、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム溶液、および固定油、例
えば、合成モノ−またはジ−グリセリドが挙げられるが、これらに限定されない。有用な
他の非経口投与可能な製剤には、活性成分を、微結晶形態で、リポソーム調製物中、また
は生分解性ポリマー系化合物として含むものが挙げられる。持続放出または移植用の組成
物は、薬学的に許容されるポリマーまたは疎水性物質、例えば、乳剤、イオン交換樹脂、
難溶性ポリマー、または難溶性塩を含み得る。

活性化合物は、細胞過剰増殖の阻害剤であるか、または癌細胞におけるアポトーシスの
細胞周期特異的誘導体であるか、または両方である。したがって、これらの化合物は、過
剰増殖疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用であり、アポトーシスの誘導に
応答性である疾患および障害、例えば、癌を治療するために有用である。細胞周期特異的
モードの作用を有することによって、これらの化合物は、ＤＮＡ複製等の基本細胞過程を
標的とするか、またはＤＮＡ等の基本細胞分子を干渉する標準化学療法薬と比較して、治
療指数が高いはずである。したがって、例えば、本明細書において論じられる活性化合物
は、目標とされる癌治療において有用となることが期待される。活性化合物は、血管形成
に対しても有効であり得る。

本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常または非調節、あるいは
異常および非調節細胞成長、癌等の疾患の特徴を説明するために使用される。細胞増殖の
阻害および類似する用語は、本明細書において、化合物が、その化合物と接触されない細
胞と比較して、その化合物と接触される細胞の成長を遅延させる、および／または殺傷す
る能力を示すために使用される。最も好ましくは、この細胞増殖の阻害は、１００％であ
り、すべての細胞の増殖が停止される、および／または細胞がプログラム化細胞死を経る
ことを意味する。いくつかの実施形態において、接触される細胞は、腫瘍細胞である。腫
瘍細胞は、異常細胞増殖のある細胞として定義される。良性腫瘍細胞は、攻撃的な転移腫
瘍をインビボで形成することができない細胞の過剰増殖によって説明される。対照的に、
悪性腫瘍は、例えば、腫瘍転移を形成することができる、異なる細胞および生化学的異常
のある細胞によって説明される。悪性腫瘍細胞の後天的機能異常（「癌の特徴」とも定義
される）は、複製能（「過剰増殖」）、成長シグナルの自給、抗成長シグナルに対する非
感受性、アポトーシスからの回避、持続的血管形成、組織侵襲、および転移である。

アポトーシスの誘導体および類似する用語は、本明細書において、その化合物と接触さ
れる細胞においてプログラム化細胞死を実行する、化合物を特定するために使用される。
アポトーシスは、接触される細胞内の複雑な生化学的事象、例えば、システイン特異的プ
ロテイナーゼ（「カスパーゼ」）の活性、およびクロマチンのフラグメント化によって定
義される。化合物と接触される細胞におけるアポトーシスの誘導は、必ずしも細胞増殖の
阻害を伴うとは限らない。好ましくは、細胞増殖の阻害および／またはアポトーシスの誘
導は、異常細胞成長（過剰増殖）のある細胞に特異的である。したがって、異常細胞成長
のある細胞と比較して、正常な増殖または停止細胞は、化合物の増殖阻害またはアポトー
シス誘導活性に対して感受性が低いか、または非感受性でさえある。最後に、細胞毒性は
、細胞周期依存または細胞周期独立の様式で、アポトーシス／プログラム化細胞死の誘導
を含む、種々の機序によって細胞を殺傷する化合物を特定するために、より一般的な意味
で使用される。

細胞周期特異的および類似する用語は、本明細書において、化合物を、静止している非
分割細胞内ではなく、細胞周期の特定の相を活発に通過する連続的増殖細胞内でのみアポ
トーシスを誘導するものとして特定するために使用される。連続増殖細胞は、疾患様癌に
典型的であり、細胞分割周期のすべての相、つまりＧ（「ギャップ」）１、Ｓ（「ＤＮＡ
合成」）、Ｇ２およびＭ（「有糸分裂」）相によって特徴付けられる。

ＡＫＴ（タンパク質キナーゼＢ（ＰＫＢ）としても知られる）、およびその遺伝子族生
成物は、セリン／トレオニンタンパク質キナーゼとして特定されている。Ｔｅｓｔａ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２００１，９８，１０９８３−
１０９８５、Ｌａｗｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，２００１，１１４
，２９０３−２９１０、Ｄｕａｎ，Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．，２０００，８６，１５−２３。
ＰＫＢは、細胞増殖、アポトーシス、およびインスリン応答において重要な役割を果たす
。したがって、ＰＫＢの調節は、腫瘍形成、異常細胞増殖、および糖尿病の治療において
感心対象である。本発明の文脈において、過剰増殖および類似する用語は、異常／非調節
細胞成長、疾患様癌の特徴を説明するために使用される。

ＰＫＢ分析
ＰＫＢ活性を評価するためのキナーゼ分析は、活性ＰＫＢ酵素、ＰＰＫＢ特定基質、お
よびＰ^３３標識ＡＴＰを含む。ＰＫＢ酵素の２つの形態、全長ＰＫＢαおよびプレクスト
リンドメイン（アミノ酸１〜１１７）が削除された、ＰＫＢαのキナーゼドメインを使用
する。両方のＰＫＢ酵素は、Ｕｐｓｔａｔｅ Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｓｏｌｕ
ｔｉｏｎｓ（カタログ番号１４〜２７６および１４〜３４１）から入手することができる
。使用されるＰＫＢ基質は、Ｏｂａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０
００，２７５，３６１０８−３６１１５に記載されるような合成ペプチド（ＡＲＫＲＥＲ
ＴＹＳＦＧＨＨＡ）である。リン酸化基質は、ホスホセルロース膜フィルタプレート（Ｍ
ｉｌｌｉｐｏｒｅ）によって捕捉され、Ｗａｌｌａｃ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ液体シンチレ
ーションカウンタ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）によって測定される。

細胞中のＰＫＢ活性は、ＰＴＥＮヌルヒト乳房主要細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−４６８におい
て分析される。ＰＫＢ基質ＦＫＨＲＬ１、ＧＳＫ３ａ／ｂ、およびツベリンのリン酸化状
態は、ホスホ特異的抗体（細胞シグナリング技術）を利用する免疫分析によって測定され
る。

ＰＫＢ阻害が細胞生存能力に及ぼす影響は、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＭＤＡ−ＭＢ−２
３１、Ｕ８７−ＭＧ、ＬＮ−２２９、ＰＣ−３、ＤＵ１４５が挙げられるが、これらに限
定されない、一連のヒト主要細胞株において測定される。細胞は、通常の成長培地におい
て７２時間処理し、細胞生存能力は、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ，Ｕ
Ｋ）によって測定する。

以下の非限定実施例は、活性化合物の調製を説明する。^１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ、Ｍｅ
ｒｃｕｒｙ−３００）スペクトルは、提案される構造と一致した。特徴的な化学シフト（
δ）は、主要なピークの指定のための従来の省略形（例えば、ｓ単項、ｄ二重項、ｔ三重
項、ｑ四重項、ｍ多項、ｂｒ広範）を使用して、テトラメチルシランから１００万分の１
ダウンフィールドで示される。質量スペクトル（ｍ／ｚ）は、エレクトロスプレイイオン
化（ＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）のいずれかを使用して、Ａｇｉｌｅ
ｎｔモデル１１００質量分析計で記録した。以下の略語を、一般的な溶媒に対して使用す
る：ＣＤＣｌ_３：デウテロクロロホルム、Ｄ_６−ＤＭＳＯ：デウテロメチルスルホキシド
、ＣＤ_３ＯＤ：デウテロメタノール。

実施例１
Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素塩酸塩（Ｋｅｖｅｔｒｉｎとしても知られる）

γ−クロロブチロニトリル（５．０ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０４ｇ
、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水に混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流さ
せた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発させた
。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトンを添
加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて
、５．４４ｇ（３０．３ｍｍｏｌ、収率６２．７％）の生成物を、白い結晶として、融点
１３４〜１３５℃、９７％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ_６Ｄ
ＭＳＯ）δ１．８９（ｍ，２Ｈ）、２．６３（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．２３（
ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．３８（ｓ，３Ｈ）。
^１３Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ）δ１５．３，２５．０，２８．８，１１９．８，１６９．
７

式： Ｃ_５Ｈ_１０ＣｌＮ_３Ｓ
精密質量： １７９．０３
分子量： １７９．６７
ｍ／ｅ： １７９．０３（１００．０％），１８１．０３（３２．１％），１８０．０
３（７．４％），１８１．０２（４．５％），１８２．０３（２．０％），１８３．０２
（１．５％）．Ｃ，３３．４２、Ｈ，５．６１、Ｃｌ，１９．７３、Ｎ，２３．３９、Ｓ
，１７．８５
解析計算値： ３３．４２ ５．６１ ２３．３９ １７．８５
実測値： ３３．４４ ５．４８ ２３．４０ １８．３１

実施例２
Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩

３−クロロプロパンニトリル（４．３２ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０
４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還
流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発さ
せた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセトン
を添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥さ
せて、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。

実施例３
Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩

５−クロロペンタンニトリル（５．６８ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０
４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間
還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発
させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセト
ンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥
させて、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。

実施例４
Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩

６−クロロヘキサンニトリル（６．３６ｇ、４８．３ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（４．０
４ｇ、５３．１ｍｍｏｌ）を、４０ｍｌの水中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間
還流させた。反応混合液を蒸発させて、２０ｍｌのエタノールを添加した後、同様に蒸発
させた。これを３回繰り返した。その後、１０ｍｌのメタノールおよび３０ｍｌのアセト
ンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥
させて、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素塩酸塩を得た。

実施例５
Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩

４−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ
尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を
加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノール
および４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物
を高真空下で一晩乾燥させて、２１９ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ、収率７５％）の生成物を
、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨ
ｚ、ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ４．０３（ｓ，２Ｈ）、４．５０（ｓ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，
２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、７．４５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２３Ｈｚ）、９．２２（ｓ，
４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００

式： Ｃ_１０Ｈ_１２ＣｌＮ_３Ｓ
精密質量： ２４１．０４ （２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ：２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０５（
１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０４（
１．５％）

実施例６
Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素メシレート

メシレート（２００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（６６ｍｇ、０．８７ｍｍ
ｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加熱し、３〜４時間還流させた。
反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し
、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２
０３ｍｇ（０．６２ｍｍｏｌ、収率７８％）の生成物を、オフホワイトの結晶として、９
５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ２．３５
（ｓ，３Ｈ）、２．８０（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｍ，２Ｈ）、２．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ
＝７．４）、３．４２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．４）、７．２４（ｓ，４Ｈ）、９．０４（ｓ
，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２３４．０７

式： Ｃ_１３Ｈ_１９Ｎ_３Ｏ_３Ｓ_２
精密質量： ３２９．０９（２３３．１０）
分子量： ３２９．４４
ｍ／ｅ： ３２９．０９（１００．０％）、３３０．０９（１６．０％）、３３１．０
８（９．１％）、３３１．０９（１．９％）、３３２．０９（１．４％）、３３０．０８
（１．１％）

実施例７
Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩

２−クロロメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）およびチオ
尿素（１０１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を
加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノール
および４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物
を高真空下で一晩乾燥させて、２３１ｍｇ（０．９５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を
、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨ
ｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ４．１４（ｓ，２Ｈ）、４．５６（ｓ，２Ｈ）、７．３７（ｍ，
２Ｈ）、７．４５（ｍ，２Ｈ）、９．２３（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０５．９７

式： Ｃ_１０Ｈ_１２ＣｌＮ_３Ｓ
精密質量： ２４１．０４（２０５．０７）
分子量： ２４１．７４
ｍ／ｅ： ２４１．０４（１００．０％）、２４３．０４（３６．６％）、２４２．０
５（１１．０％）、２４４．０４（４．６％）、２４２．０４（１．９％）、２４５．０
４（１．５％）

実施例８
Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素塩酸塩

６−クロロメチル−２−ピリジルアセトニトリル（２００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）および
チオ尿素（１０１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合
液を加熱し、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノ
ールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生
成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１６ｍｇ（０．８９ｍｍｏｌ、収率７４％）の生成
物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００
ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ４．２９（ｓ，２Ｈ）、４．６４（ｓ，２Ｈ）、７．４１（
ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７８）、７．９１（ｔ，１Ｈ
，Ｊ＝７．７８）、９．４６（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０７．００

式： Ｃ_９Ｈ_１１ＣｌＮ_４Ｓ
精密質量： ２４２．０４（２０６．０６）
分子量： ２４２．７３
ｍ／ｅ： ２４２．０４（１００．０％）、２４４．０４（３６．７％）、２４３．０
４（１２．０％）、２４５．０４（３．９％）、２４６．０３（１．５％）

実施例９
Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素塩酸塩

３−ブロモメチルフェニルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）およびチオ
尿素（８０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合液を加
熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタノール
および４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、生成物
を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ、収率７９％）の生成物を
、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨ
ｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ４．０８（ｓ，２Ｈ）、４．５３（ｓ，２Ｈ）、７．３１（ｍ，
２Ｈ）、７．４０（ｍ，２Ｈ）、９．２５（ｓ，４Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２０６．００

式： Ｃ_１０Ｈ_１２ＢｒＮ_３Ｓ
精密質量： ２８４．９９（２０５．０７）
分子量： ２８６．１９
ｍ／ｅ： ２８６．９９（１００．０％）、２８４．９９（９８．１％）、２８７．９
９（１２．７％）、２８６．００（１０．７％）、２８８．９９（４．５％）、２８５．
９９（１．９％）

実施例１０
Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素塩酸塩

２−ブロモメチル−１−ナフチルアセトニトリル（２００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）およ
びチオ尿素（６４ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を、１ｍｌのメタノール中で混合した。混合
液を加熱して、３〜４時間還流させた。反応混合液を蒸発させた。その後、１ｍｌのメタ
ノールおよび４ｍｌのアセトンを添加し、混合液を１時間攪拌した。結晶物質をろ過し、
生成物を高真空下で一晩乾燥させて、２１５ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ、収率８３％）の生
成物を、オフホワイトの結晶として、９５％よりも高い純度で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（３０
０ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ４．５７（ｓ，２Ｈ）、４．８３（ｓ，２Ｈ）、７．６３
（ｍ，２Ｈ）、７．７２（ｍ，１Ｈ）、８．０５（ｍ，２Ｈ）、８．２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝
８．２４）、９．１（ｓ，２Ｈ）、９．２８（ｓ，２Ｈ）。（Ｍ＋Ｈ）２５６．００。

式： Ｃ_１４Ｈ_１４ＢｒＮ_３Ｓ
精密質量： ３３５．０１（２５５．０８）
分子量： ３３６．２５
ｍ／ｅ： ３３５．０１（１００．０％）、３３７．０１（９７．６％）、３３６．０
１（１７．１％）、３３８．０１（１６．４％）、３３７．００（４．５％）、３３９．
００（４．４％）、３３９．０１（１．４％）、３３８．００（１．１％）、３３７．０
２（１．１％）

実施例１１
本発明の化合物の調製を示す、化学反応が以下に表される。示されるように、これらの
化合物は、適切なニトリル誘導体をチオ尿素と反応させることによって、実施例１のそれ
に類似する方法で調製され得る。チオ尿素は、窒素原子上の４個の置換基のうちの１、２
、もしくは３個が、水素以外であり、式Ｉの他の化合物を提供する、誘導体によって置換
されてもよい。

この実施例で表される反応において、ｎおよびｍは、ゼロであるか、または独立して、
１〜８の整数であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、例えば、メチル、エチル、ｎ−
プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ_２−シクロプロピル、ビニル、アリー
ル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−Ｃ
Ｈ_２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペン
チル、シクロペンチル、−ＣＨ_２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、
シクロヘキシル、−ＣＨ_２−シクロヘキシル部分等であり、これらも１つまたは複数の置
換基を有し得る。Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、アルケニルおよびアルキニルでもあ
り得る。アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２
−ブテン−１−イル等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的なアルキニル基に
は、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、および１−プロピニルが挙げられる。

上述のとおり調製される塩酸塩は、対応する遊離塩基または他の薬学的に許容される塩
に、既知の方法によって変換され得る。他の薬学的に許容される塩は、上記反応のそれぞ
れにおいて、ニトリルを適切な開始物質（例えば、ニトリルを含有するクロリンではなく
、ニトリルを含有するブロミン）を置換することによって、調製されてもよい。

実施例１２−Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有効性研究
化学物質、細胞および培地
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように合成した。シスプラチン、ビンクリ
スチン、５−ＦＵ、およびタキソールは、Ｓｉｇｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入し
た。Ｈ４６０およびＨ５２２肺癌細胞、ＨＴ−２９、ＳＷ−６２０、およびＣｏｌｏ２０
５、およびＨＣＴ−１５結腸癌細胞、ＯｖＣａｒ−３、およびＳＫＯｖ−３卵巣癌細胞、
ＤＵ−１４５、およびＰＣ−３前立腺癌細胞、ならびにＳＮＢ−１９およびＵ−２５１グ
リオーマ細胞、ＨＴ−１０８０線維肉腫、およびＳＷ−４８０結腸癌細胞は、Ａｍｅｒｉ
ｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）（Ｒｏｃｋｖｉ
ｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。Ａ２７８０卵巣癌細胞およびそれらのシスプラチン耐性変
異型Ａ２７８０／ＣＰ１およびＡ２７８０／ＣＰ２は、社内で生成した。Ｃｏｌｏｎ Ｈ
ＣＴ−１１６結腸癌細胞、それらのｐ５３−／−、およびｐ２１−／−亜株は、Ｃｅｎｔ
ｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｓａｌｅｎ，Ｏｈｉｏ）のＧａｎｇａ
ｄｈａｒａｎ博士から厚意で提供されたが、染色体３が補充されたＨＣＴ−１１６は、Ｔ
ｈｅ Ｒａｊｉｖ Ｇａｎｄｈｉ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒ
ｃｈ（Ｒｏｈｉｎｉ，Ｄｅｌｈｉ，Ｉｎｄｉａ）から入手した。特に指示のない限り、媒
体および他の試薬は、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎから購入した。Ｂｉｏ Ｗｈｉ
ｔｔａｋｅｒ製の基礎培養培地（ＲＰＭＩ−１６４０）は、０．２２μｍ Ｍｉｌｌｅｘ
−ＧＶフィルタ装置（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を通して滅菌した。調製された培地は、小ア
リコート中、５℃で、暗所保管した。基礎培養培地は、培養培地として使用するために、
１０％ウシ胎仔血清を補充し（ＦＣＳ−５６０で３０分間熱不活性化される）、ミトゲン
、すなわち、リポ多糖類（ＬＰＳ、１０〜５０μｇ／ｍＬ）を添加して、細胞を増殖させ
た。

成長阻害分析
細胞毒性は、Ｍａｘｉｍｕｍ Ｔｏｌｅｒａｔｅｄ Ｔｉｔｅｒ（ＭＴＴ）分析によっ
て決定した。簡潔に述べると、細胞を２４ウェル組織培養プレートに、１０，０００〜１
５，０００細胞／ウェルで播種し、一晩培養した。指数関数的に成長する細胞を、次に、
異なる薬物濃度に３〜４世代時間曝露した。細胞生存性は、細胞をＭＴＴテトラゾリウム
塩に４ 時間、３７℃で曝露することによって決定し、ホルマザンの形成は、マイクロプ
レートリーダによって５６０ｎｍで測定した。未処理対照と比較した、５０％細胞成長を
阻害する濃度は、用量の関数として、生存率をプロットする曲線から決定した。すべての
値は、それぞれ重複して行われた少なくとも３つの独立実験の平均である。

細胞増殖分析
ＭＴＴ溶液（１０μＬ）を、４８時間培養したリンパ球のすべてのウェルに添加し、４
時間３７℃で培養した。２つの培養セットを調製し、ＬＰＳを１つのセットのみに添加し
た。この期間中、ホルマザン結晶が、各ウェルの底に形成した。消費された媒体を、培養
細胞の懸濁液とともにピペットで除去した。次に、酸性化イソプロパノール（無水イソプ
ロパノール中１００μＬの０．１Ｎ ＨＣｌ）を、すべてのウェルに添加し、完全に混合
して、紺青色の結晶を溶解した。数分後、室温で、プレートアナライザを使用して、二波
長測定システムによってプレートを読み取った（試験波長５４０ｎｍ、参照波長６３０ｎ
ｍ）。プレートは、酸性化イソプロパノールの添加から１時間以内に読み取った。細胞増
殖は、刺激指数として以下のように計算した。

ｐ５３の免疫学的局在決定
細胞の増殖をもたらすタンパク質である、ｐ５３の局在を決定するために、免疫細胞化
学分析を行った。簡潔に述べると、ＨＣＴ−１１６細胞（ＡＴＣＣ）を、ガラススライド
に一晩付着させ、イソ毒性濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプ
ラチン（１１μｇ／ｍｌ）に６時間曝露した。薬物曝露後に、細胞を３．７％ホルムアル
デヒドで固定し、０．２５％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で透過処理し、１％ ＢＳＡ（
ウシ血清アルブミン）で遮断した。次に、細胞を１時間、抗ｐ５３ポリクローナル抗体（
Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃａｌｉｆｏｒ
ｎｉａ）、続いて、二次抗ウサギＦＩＴＣ結合抗体（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃ
ｉｅｎｃｅｓ，Ｕ．Ｋ．）と共に培養した。カバースリップをＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄに
載置し（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｖｅｃｔｏｒ，Ｕ．Ｋ．）、プラン
Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ ｘ６３対物レンズ（Ｚｅｉｓｓ）を使用することによって、適切
なフィルタおよびレーザー共焦点走査システムＬＳＭ５１０を備える、落射蛍光顕微鏡Ａ
ｘｉｏｖｅｒｔ１００Ｍで分析した。

ウェスタンブロット分析
ウェスタンブロット分析を行った。全体細胞溶解物を、イソ毒性濃度のＫｅｖｉｔｒｅ
ｎ（３００ｎｇ／ｍｌ）、またはシスプラチン（１１ｎｇ／ｍｌ）で６時間処理された細
胞から調製した。タンパク質（５０μｇ／レーン）を、４〜１２％ポリアクリルアミドＳ
ＤＳゲル上で分離し、ＰｏｌｙＳｃｒｅｅｎ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，
ＭＡ）に移した。ｐ５３、ｐ２１、およびβ−アクチンの存在を、それぞれ抗ｐ５３抗体
（Ｓｃ−６２４３、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、抗ｐ２１抗
体（Ｓｃ−３９７６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、および抗
アクチン抗体（Ｓｃ−１６１６、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）
によって明らかにした後、ペルオキシダーゼ共役二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎ
ｏＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ）で培養し、強化された化学発光（Ｎ
ｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｈｅｂｒｏｎ，ＣＴ）によって検出した。

Ｋｅｖｅｔｒｉｎがヒト腫瘍細胞株の生存能力に及ぼす影響
Ｋｅｖｅｔｒｉｎが、肺、結腸、乳房、卵巣、前立腺の癌、肉腫、神経膠腫、および白
血病を含む、１０種類の異なるヒト腫瘍細胞の生存能力に及ぼす影響を、上述の細胞増殖
分析を使用して決定した。細胞生存能力は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増期間、連続曝露し
た後に測定した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの指示濃度は、平均ＩＣ_５０に対応する。結果は、以
下に記載される。一般に、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、上皮起源のヒト腫瘍細胞に対して、強力
な活性を有する。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用は、非小細胞肺、結腸、および卵巣癌
に対して最も顕著であり、ＩＣ_５０は、１１〜６８ｎｇ／ｍｌの範囲であった。興味深い
ことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、悪性神経膠腫細胞に対しても強力な活性を示した（ＩＣ_５
０〜３０ｎｇ／ｍｌ）。

Ｋｅｖｅｔｒｉｎ細胞毒性の時間依存性
曝露時間がＫｅｖｅｔｒｉｎの細胞毒性作用に及ぼす影響を決定するために、ＤＵ−１
４５、ＨＣＴ−１１６、またはＨＴ−２９癌細胞を、異なる濃度のＫｅｖｅｔｒｉｎに、
５、１０、２０、３０、または４５分、あるいは１、２、６、２４、または１２０時間曝
露した。長い曝露時間が細胞毒性の増加と関連する、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの明白な時間依存
の細胞毒性作用が、３つの細胞株すべてに認められた。結果を、図１に示す。時間依存性
は、曝露時間が３０〜４５分以下の場合に特に劇的であった。対照的に、薬物曝露時間を
２４時間を超えて延長することは、細胞毒性に影響しなかった。

Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンの活性スペクトラム
Ｋｅｖｅｔｒｉｎおよびシスプラチンが指示腫瘍株の生存能力に及ぼす影響を、ＭＴＴ
分析を使用して、Ｋｅｖｅｔｒｉｎに３倍増時間、連続曝露した後に測定し、結果を、図
２に示す。示される値は、以下のように計算される：ログ（ＩＣ_５０個別の細胞株−ＩＣ
_５０平均）。負の値は、細胞株が、平均よりも敏感であることを示すのに対して、正の値
は、細胞株が平均よりも耐性があることを示す。試験されたすべての細胞株の平均ＩＣ_５
０は、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの場合、４．９ｘ１０^−７Ｍ、およびシスプラチンの場合、２．
１ｘ１０^−６Ｍであった。ＭＴＴ分析結果を考慮すると、図２の１０種類の異なるヒト腫
瘍細胞に対するシスプラチンおよびＫｅｖｅｔｒｉｎの活性スペクトラムの比較は、２つ
の薬物間の明らかな相違を示す。Ｋｅｖｅｔｒｉｎの活性は、肺、頭頸部、乳房、卵巣、
および結腸細胞株に対して、シスプラチンのそれよりも顕著であった。興味深いことに、
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、一般に、特定の腫瘍細胞型内で高い異種反応を呈する、シスプラチ
ンとは対照的に、試験された頭頸部、非小細胞肺、卵巣、結腸、および神経膠腫全てに対
して活性を示した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎとシスプラチンとの間の差異は、３つの頭頸部癌細
胞株に対して特に顕著であったが、そこでＫｅｖｅｔｒｉｎは、すべての細胞株に対して
活性を示したが、シスプラチンは、３つの細胞株のうちの１つに対して活性であったこと
である。驚くべきことに、Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、シスプラチンの場合に認められたものと
は異なる、アルキル化剤に敏感である、白血病に対して比較的制限された活性を有した。

ヒト腫瘍異種移植片を有する裸マウスにおけるＫｅｖｅｔｒｉｎのインビボ有効性研究
動物および動物ケア
マウスは、１２時間／１２時間の明暗サイクルで、室温１８〜２６℃、および比較的高
い湿度３０〜７０％で飼育した。動物の飼料および水は、不断で付与した。この順応期間
中、各動物は、少なくとも１日１回、任意の異常または感染性疾患の発症に関して観察さ
れた。使用に適していると決定された動物のみをこの研究に割り当てた。本研究での使用
に許容されないと考えられるいかなる動物も、同一業者からの類似する年齢および体重の
動物と置き換えた。腫瘍質量が、平均、約１００ｍｍ^３に達すると、腫瘍の大きさに従っ
て、無作為化し、グループに分けた。

ヒト腫瘍細胞株
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌（ＨＴＢ−２６）、ＨＴ−２９結腸癌（ＨＴＢ−３８）
、ＰＣ−３前立腺癌（ＣＲＬ−１４３５）、ＨＣＴ−１５Ｐ−糖タンパク質耐性結腸癌は
、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｒｏｃｋｖｉ
ｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。

ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株は、最初に、乳腺腺癌の５１歳白人女性の胸水から単離さ
れた。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。

ＨＴ−２９細胞株は、最初に、結腸直腸腺癌の４４歳白人女性から１９６４年に単離さ
れた。これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。

ＰＣ−３細胞株は、最初に、グレードＩＶ転移性前立腺腺癌の６２歳白人男性の骨転移
から単離された。これらの細胞は、低い酸ホスファターゼおよびテストステロン−５−ア
ルファ還元酵素活性を呈し、形態学的に上皮の性質であると考えられる。

ＨＣＴ−１５親細胞株は、最初に、デュークＣ型結腸直腸腺癌の男性から単離された。
これらの細胞は、形態学的に上皮の性質であると考えられる。

Ａ５４９およびＮＣＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌株は、Ｄａｎａ Ｆａｒｂｅｒ
Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）からの寄贈であった。

試験システム
細胞は、１０％ＦＢＳ ＲＰＭＩ培地中で培養した。細胞は、本有用性研究に対して、
さらなる拡張のために、５代継代で取得した。裸マウス（Ｎｕ／Ｎｕ）の雄（２０〜２４
ｇ）および雌（１９〜２２ｇ）の両方を、６〜８週齢で、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは、研究の開始時においてナイ
ーブであり、耳の穿孔によって識別された。マウスは、５日間放置して、新しい環境に順
化させた。ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中のヒト腫瘍細胞を、各マウスの右脇腹
に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ^３に達したときに、投与を開始した。

生存中の観察および測定
任意の悪影響について、マウスを毎日観察した。処置前、処置中の隔日、および処置後
に、マウスの体重を測定した。動物の状態が悪化した場合は、その動物のいかなる処置を
も中断した。回復しない場合は、動物を犠牲死させた。１５％を超える体重喪失を示すい
かなる動物も、状態が悪化していると見なした。２０％を超える体重喪失を示すいかなる
動物も、犠牲死させた。腫瘍部位上に皮膚の持続的潰瘍化を呈するいかなる動物も、犠牲
死させた。マウスの腫瘍の大きさの測定値を、処置前、処置中の隔日、および処置後に取
った。同一の科学者が、研究を通して、腫瘍測定値の測定を担当した。

終末手順
媒体群からの腫瘍が１０００ｍｍ^３に到達すると、すべての群からのすべての動物を、
ＣＯ_２窒息により犠牲死させた。犠牲死時に、腫瘍を除去し、測量した。

研究スケジュール
ＲＰＭＩ：マトリゲル５０：５０混合中の５ｘ１０^６腫瘍細胞を、各裸マウスの右脇腹
に皮下的に移植した。腫瘍が平均容積１００ｍｍ^３に到達したときに（通常、移植後１４
日目までに達した）、投与を開始し、投与は８日間行った。剖検は、治療の終了後、４１
日目に行った。

材料
Ｋｅｖｅｔｒｉｎは、実施例１に記載されるように調製した。周囲温度（または−２０
℃以下）で保存し、光から保護した。試験動物に投与するために、Ｋｅｖｅｔｒｉｎをリ
ン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に懸濁させた（滅菌、ｐＨ＝７．４）。使用する前に、Ｐ
ＢＳを周囲温度で保存した。各懸濁液を調製した後、−２０℃以下で保存し、光から保護
した。

投与
投与手順は、マウスを無作為化し、グループ分けした日に開始した。以下の段落におい
て論じられるように、腫瘍移植後７、９、および１１日目に用量を投与した。各用量は、
尾静脈を介して投与した。

Ｋｅｖｅｔｒｉｎに起因する体重喪失
Ｋｅｖｅｔｒｉｎを、腫瘍を持つ動物に静脈内注入（ＩＶ）した場合、化合物の投与に
起因する体重喪失は、許容可能な範囲内であった。７、９、および１１日目に静脈内投与
された１００ｍｇ／ｋｇは、体重の６．８％の喪失をもたらし、同一スケジュールで投与
された２００ｍｇ／ｋｇは、９．３％の体重喪失をもたらした。これらの濃度はいずれも
、Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性を確立するために使用され得る。これらの結果を、図３に示
す。

ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋ
ｇ タキソール静脈内注入と比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋ
ｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト乳癌ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化
合物を静脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、タキソール治療した動物よ
りも高い有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物よりも１２日、未治療の
対照よりも３２日遅延した。結果を、図４に示す。

ＨＴ−２９結腸癌における、７〜１２日目の５−ＦＵと比較した、７、９、および１１日
目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト結腸癌ＨＴ−２９を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静
脈内注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、５−ＦＵ治療した動物よりも高い有
用性を示した。腫瘍成長は、５−ＦＵ治療した動物よりも１０日、未治療の対照よりも３
３日遅延した。結果を、図５に示す。

ＰＣ−３ヒト前立腺癌における、７日目の１０ｍｇ／ｋｇシスプラチンと比較した、７、
９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ静脈内注入の有用性
動物に、ヒト前立腺癌ＰＣ−３を皮下的に移植した。スケジュールに従って、Ｋｅｖｅ
ｔｒｉｎを静脈内注入し、シスプラチンを腹腔内（ＩＰ）注入した。Ｋｅｖｅｔｒｉｎを
投与した動物は、シスプラチン治療した動物よりも高い有用性を示した。腫瘍成長は、シ
スプラチン治療した動物よりも８日、未治療の対照よりも３４日遅延した。結果は、図６
に示される。

Ｐ−糖タンパク質媒介耐性を有するＨＣＴ−１５ヒト結腸癌における、７、９、１１、お
よび１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２０
０ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、Ｐ−糖タンパク質耐性細胞モデルである、ヒト結腸癌ＨＣＴ−１５を皮下的に
移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内注入した。タキソールは、そのような癌
に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において
有用性を示した。腫瘍成長は、タキソール治療した動物、および未治療の対照よりも１５
日遅延した。結果を、図７に示す。

Ａ５４９多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２ｍｇ／ｋｇ
タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅｖｅｔｒｉｎ
の有用性
動物に、多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静脈内
注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖｅｔ
ｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、未治療の対
照よりも２６日遅延した。結果を、図８に示す。

ＮＣｌＩ−Ｈ１９７５多剤耐性ヒト肺癌における、７、９、１１、および１３日目の２２
ｍｇ／ｋｇ タキソールと比較した、７、９、および１１日目の２００ｍｇ／ｋｇ Ｋｅ
ｖｅｔｒｉｎの有用性
動物に、別の多剤耐性ヒト肺癌を皮下的に移植し、スケジュールに従って、化合物を静
脈内注入した。タキソールは、そのような癌に対してほとんど作用しなかったが、Ｋｅｖ
ｅｔｒｉｎを投与した動物は、動物において強力な有用性を示した。腫瘍成長は、タキソ
ール治療した動物よりも約９日、および未治療の対照よりも約２４日遅延した。結果を、
図９に示す。

書籍および学術論文を含むが、これらに限定されない、本出願において引用されるすべ
ての出版物は、それぞれ参照することによりそれら全体が本明細書に組み込まれる。

発明は、開示される実施形態を参照して上述されたが、当業者であれば、詳述される特
定の実験が、発明の単なる例証に過ぎないことを容易に理解するであろう。発明の精神か
ら逸脱することなく、種々の修正を行うことができることを理解されたい。したがって、
発明は、以下の請求項によってのみ制限される。

Claims (13)

1. 以下の式Ｉの化合物であって
   

   

   
   式中、Ｚは、硫黄であり、
   式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
   Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、およびＣ_２−Ｃ_６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
   Ｒ^１およびＲ^２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
   

   

   
   
   式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ^３は、非存在であり、前記二重結合に隣接するＣＨ_２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
   またはＲ^２およびＲ^３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
   

   

   
   
   Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
   −ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
   

   

   、
   または−ＣＨＲ^４−ＣＨＲ^５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−、ｃｉｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−から選択され、ここでＲ^４およびＲ^５は、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、およびＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテル（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択される、化合物、
   またはその薬学的に許容される塩、例えば塩酸塩もしくは臭化水素酸塩を含む、過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための薬物。
2. 前記式Ｉの化合物は、式ＩＩの化合物であり、
   

   

   
   
   式中、ｎ、ｍ、Ｗ、Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、請求項１に定義されるとおりであり、Ｘは、薬学的に許容される酸である、請求項１に記載の薬物。
3. 
   前記組成物は、Ｓ−シアノメチルイソチオ尿素ＨＢｒを含有しないことを条件とする、請求項１または２に記載の薬物。
4. 前記化合物は、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（１−シアノメチルナフト−２−イル））メチルイソチオ尿素から選択される化合物及びその薬学的に許容される塩から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の薬物。
5. 前記過剰増殖性疾患は、細胞過剰増殖であり、例えば、乳房、膀胱、骨、脳、中枢神経系および末梢神経系、結腸、内分泌腺、食道、子宮内膜、生殖細胞、頭頸部の癌、例えばグリオーマ、腎臓、肝臓、肺、咽頭および下咽頭、中皮腫、肉腫、卵巣、膵臓、前立腺、直腸、小腸、柔組織、睾丸、胃、皮膚、尿管、膣および外陰の癌、遺伝性癌、網膜芽腫、およびウィルムス腫瘍、白血病、リンパ腫、非ホジキン病、慢性ならびに急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、ホジキン病、多発性骨髄腫、およびＴ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群、形質細胞新生組織形成、腫瘍随伴症候群、未知の原発部位の癌、薬物耐性癌、およびＡＩＤＳ関連悪性腫瘍等の癌である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬物。
6. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を含む、薬学的組成物。
7. 前記組成物は、癌の治療用のものであり、かつ、アポトーシス誘導有効量の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、請求項６に記載の薬学的組成物。
8. 前記組成物は、用量単位形態にあるか、又は非経口投与用のものである、請求項６又は７に記載の薬学的組成物。
9. 抗過剰増殖性疾患、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の式Ｉの化合物であって、
   

   

   
   
   式中、Ｚは、硫黄であり、
   式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
   Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、およびＣ_２−Ｃ_６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
   Ｒ^１およびＲ^２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
   

   

   
   
   式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ^３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ_２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
   またはＲ^２およびＲ^３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
   

   

   
   
   Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
   −ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
   

   

   、
   または−ＣＨＲ^４−ＣＨＲ^５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−、ｃｉｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−から選択され、ここでＲ^４およびＲ^５は、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、およびＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテル（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択される、化合物、
   またはその薬学的に許容される塩を含む、請求項６〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
10. 式Ｉの化合物であって、
    

    

    
    
    式中、Ｚは、硫黄であり、
    式中、ｎは、ゼロまたは１〜８の整数であり、ｍは、ゼロまたは１〜８の整数であり、
    Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３は、水素、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、およびＣ_２−Ｃ_６アルキニルから独立して選択され、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニル基の前記アルキル部分は、直鎖、分岐、および環状、ならびに直鎖、分岐、および環状のアルキル、アルケニル、およびアルキニル部分の組み合わせであってもよく、前記基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、Ｏ−ｎ−プロピル、Ｏ−イソプロピル、Ｏ−ｎ−ブチル、およびＯ−ｔ−ブチルから選択される基で置換され得るか、または
    Ｒ^１およびＲ^２は、以下に示されるように、それらが直接結合する窒素、および前記窒素に結合する炭素と一緒に、５員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり
    

    

    
    
    式中、破線は、任意の二重結合を表すが、但し、そのような二重結合が存在するときには、Ｒ^３は、非存在であり、二重結合に隣接するＣＨ_２基は、２個の水素ではなく１個の水素を有するか、
    またはＲ^２およびＲ^３は、以下に示されるように、それらが結合する窒素と一緒に、３員以上の環を形成し、ｐは、１〜７の整数であり、
    

    

    
    
    Ｗは、非存在であるか、またはＷは、
    −ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、
    

    

    、
    または−ＣＨＲ^４−ＣＨＲ^５−、ｔｒａｎｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−、ｃｉｓ−ＣＲ^４＝ＣＲ^５−から選択され、ここでＲ^４およびＲ^５は、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、およびＣ_１−Ｃ_６アルキルエーテル（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｏ−とも称される）から独立して選択される、化合物、
    またはその薬学的に許容される塩であるが、但し、前記化合物は、［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チオ］アセトニトリル、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（シアノメチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ＨＢｒ、Ｓ−（２−シアノエチル）イソチオ尿素ｐ−トルエンスルホン酸塩、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ＨＣｌ、Ｓ−（３−シアノプロピル）イソチオ尿素ピクリン酸塩、Ｓ−パラ−シアノベンジルイソチオ尿素ＨＣｌ、［（４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）チオ］アセトニトリル・ＨＣｌおよび２−シアノ−３−シクロヘキシル−１−メチルイソチオ尿素ではないことを条件とする、化合物。
11. Ｓ−（４−シアノブチル）イソチオ尿素、Ｓ−（５−シアノペンチル）イソチオ尿素、Ｓ−（４−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−２（４−［２−シアノエチル］フェニル）エチルイソチオ尿素、Ｓ−（２−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（６−シアノメチルピリジン−２−イル）メチルイソチオ尿素、Ｓ−（３−シアノメチルフェニル）メチルイソチオ尿素、およびＳ−（１−シアノメチルナフチ−２−イル））メチルイソチオ尿素、およびそれらの薬学的に許容される塩から選択される、請求項１０に記載の化合物。
12. 前記式Ｉの化合物は、以下の化合物
    

    

    
    およびそれらの薬学的に許容される塩から選択され、式中、ｎおよびｍは、ゼロまたは独立して１〜８の整数であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、−ＣＨ_２−シクロプロピル、ビニル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロブチル、−ＣＨ_２−シクロブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、シクロペンチル、−ＣＨ_２−シクロペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、シクロヘキシル、および−ＣＨ_２−シクロヘキシル部分であり得、これらは請求項１１において定義されるような１つまたは複数の置換基を有し得、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４はまた、アルケニルおよびアルキニルであってもよく、前記アルケニル基は、エテニル、プロペニル、ブテニル、または１−メチル−２−ブテン−１−イルであり、前記アルキニル基は、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、または１−プロピニルでもあり得る、請求項１０に記載の化合物。
13. 抗過剰増殖、抗炎症、抗ウイルス、または抗菌有効量の請求項１０〜１２に記載の化合物、および薬学的に許容される担体を含む、哺乳類において過剰増殖性疾患、炎症性疾患、ウイルス感染、または細菌感染を治療するための、薬学的組成物。
    

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