JP2013537046A

JP2013537046A - 動脈瘤の血管内コイリング後の器質化を促進するためのスタチン担持コイル

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Publication number: JP2013537046A
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Inventors: 博夫岩田; 智信児玉
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Priority date: 2010-09-16
Filing date: 2011-09-15
Publication date: 2013-09-30
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Abstract

本発明は、安全性が高く、かつ高い器質化促進効果を発揮することができる血管治療材料を提供する。更に、製造が容易であり、容易に滅菌でき、長期保存が可能で市販可能な血管治療材料を提供する。
スタチンを担持したコイルを含む血管用治療材料である。コイルを形成する線は、白金、タングステン、金、コバルト、クロム、チタン、タングステン、ニオブ、アルミニウム、タンタル、鉄、ニッケル等から選択される少なくとも１種の金属でできていることが好ましい。本発明の血管治療材料は、血管内に留置する塞栓治療用、器質化を促進する瘤の再開通防止用又は瘤の破裂防止用に特に有用である。

Description

本発明は、スタチンを担持したコイルを含む血管治療材料に関する。本発明に係る血管治療材料は、製造が容易であり、特に、優れた血管内器質化（又は組織化）効果を発揮するので、塞栓治療材料として好ましく利用することができる。

動脈瘤、動静脈奇形及び動静脈瘻等の血管障害や、腫瘍への栄養動脈の塞栓治療等において、塞栓材料を用いて血管内治療が行われる。即ち、カテーテルの先端を処置部位近傍へと導き、この先端から塞栓材料を処置部に注入する。又は、先端に塞栓材料を有するガイドワイヤーをこのカテーテルを通じて処置部に挿入して、塞栓材料部を離脱させて処置部に留置する。塞栓材料自体と塞栓材料上に形成される血栓により、処置部への血流が遮断され、治療が行われる。このような塞栓材料として、白金合金製の微細なコイルが好適に用いられている。

本治療法の有効性と安全性は明らかであり、近年、急速に塞栓材料としてコイルが適用された症例が増加したが、その限界も徐々に明らかになってきた。例えば、動脈瘤の治療では、瘤内への血液の流れ込みを防止するために、瘤内へ留置するコイルの体積分率を３０％以上とすることにより、瘤内で血栓が形成され、その後、線維芽細胞、平滑筋細胞等が増殖して、動脈瘤内で血栓が器質化され、更に動脈瘤の入り口が、血管内皮細胞で覆われ、治癒すると期待された。しかし、動物実験モデルや剖検例の処置部を観察すると、コイル留置後長期間経過後もコイルの周囲は器質化されず、場合により、動脈瘤の再開通が起こり治療効果が上がらず、瘤内へ流入する血流により瘤が破裂することがある。また、動脈瘤の開口部ではコイルが直接に血流に接している状態であることが多く、このような状態では、開口部のコイル上に血栓が形成され、これが剥離して、血管が閉塞されて脳梗塞を起こし得る。このため、コイルの周囲の血栓の器質化と動脈瘤の開口部の内皮化を促進するコイルの開発が望まれていた。

非特許文献１及び２は、器質化を促進するコイルとして、イオン注入を行った白金コイル、及びイオン注入を行った白金コイル上にコラーゲンを吸着させたコイルを開示し、動物実験では効果があると報告する。しかし、これらのコイルは、単にコイルの表面への細胞の接着性を向上させたものであり、積極的に器質化を促進するものではない。また、高コストのイオン注入法を用いるので、高価であり、普及していない。

これに対し特許文献１は、細胞増殖因子又は細胞増殖因子の遺伝子を含むベクターが、表面に固定化されたコイルを開示する。これは、細胞増殖因子又はその遺伝子を含むベクターをコイル表面に固定化することによって、コイルから細胞増殖因子を徐々に放出させることで、又は、細胞増殖因子の遺伝子を含むベクターを周囲の細胞に感染させて、細胞から細胞増殖因子を徐々に放出させることで、処置部で細胞の増殖を促進し、器質化を促進すると考えられる。このようなコイルを用いることで、より確実に塞栓治療を行うことができると同時に、器質化を促進して瘤の破裂防止を図ることができると期待される。

しかし、特許文献１に開示されたコイルが有効に機能するために、細胞増殖因子又はその遺伝子を含むベクターは、血流で流されない程度に強固にコイルの表面に固定することが必要である。そのために、コイルの表面に極性基を有する膜を形成後、細胞増殖因子やその遺伝子を含むベクターをイオン間相互作用により結合させる等の手間のかかる処理が必要である。他の固定化方法、例えば化学的な結合を行った場合、細胞増殖因子又はその遺伝子を含むベクターの多くは失活するという問題がある。更に、たとえ、細胞増殖因子又はその遺伝子を含むベクターを化学的に結合させることができたとしても、不安定で失活しやすいので、滅菌することが困難である、又は保存性に劣るという問題もある。

JP 2001-299769 A Y. Murayama, Y. Suzuki, F. Vinuela, et al., Developement of a Biologically active Guglielmi Detachable Coil for the Treatment of Cerebral Aneurysms. Part I: InVitro Study, AJNR Am J.Neuroradiol, 20, 1986-1991 (1999) Y. Murayama, F. Vinuela，, Y. Suzuki, Developement of a Biologically active Guglielmi Detachable Coil for the Treatment of Cerebral Aneurysms. Part II: An Experimental Study in a Swine Aneurysm Model, AJNR Am J.Neuroradiol, 20, 1992-1999 (1999)

本発明は、安全性が高く、かつ高い器質化促進効果を発揮することができる血管治療材料を提供することを目的とする。更に、製造が容易であり、容易に滅菌でき、長期保存が可能で市販可能な血管治療材料を提供することを目的とする。

本発明者らは、鋭意検討した結果、驚くべきことに、人へ投与された長い歴史を有しその安全性が担保されているスタチンの溶液をコイルに塗布し、乾燥させることで、安全性の高いスタチン担持コイルを簡単に作成でき、従来と同じ方法でこれを血管内に留置することで塞栓治療を行うことができると同時に、驚くべくことに著しく器質化を促進して瘤の再開通防止及び瘤の破裂防止等に利用できることを見出して、本発明を完成するに至った。

本発明の一の要旨において、スタチンを担持した（又はスタチンで少なくとも一部を被覆した）コイルを含む血管治療材料を提供する。
本発明の一の態様において、コイルを形成する線は、白金、タングステン、金、コバルト、クロム、チタン、タングステン、ニオブ、アルミニウム、タンタル、鉄、ニッケルから選択される少なくとも１種の金属でできている治療材料を提供する。
本発明の他の態様において、コイルを作成するために用いる金属線の素線径は、２０〜１２０μｍであり、コイルの径の寸法は、１００〜５００μｍである治療材料を提供する。
本発明の更なる態様において、コイルの長軸方向の長さは、１０〜３００ｍｍである治療材料を提供する。

本発明の好ましい態様において、スタチンは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン及びロスバスタチンから選択される少なくとも一種を含む治療材料を提供する。
本発明の更に他の態様において、血管内に留置する塞栓治療用、器質化を促進する瘤の再開通防止用又は瘤の破裂防止用の治療材料を提供する。
本発明の他の要旨において、スタチン含有溶液に、コイルを浸漬後、乾燥する工程、又はスタチン溶液をコイルに塗布後、コイルを乾燥する工程を含む、血管治療材料の製造方法を提供する。

本発明に係る血管治療材料は、スタチンを担持したコイルを含むので、安全性が高く、高い器質化促進効果を発揮することができる。特に、塞栓治療材料として優れる。更に、スタチン含有溶液に、コイルを浸漬すること、又はスタチン含有溶液を、コイルを塗布することで製造することができるので、製造も容易である。

本発明の血管治療材料を血管の動脈瘤内に留置した状態を説明する模式図である。血管治療材料の電子顕微鏡写真及び頸動脈への挿入を示す。（ａ−１）は、比較例１の血管治療材料の電子顕微鏡写真を示し、（ａ−２）は、実施例１の血管治療材料の電子顕微鏡写真を示す。いずれの血管治療材料も、その直径は、約３００μｍである。（ｂ−１）は、ウィスターラットの頸動脈分岐部を模式的に示す。総頸動脈は、まず内頸動脈（左）と外頸動脈（右）に分岐する。外頸動脈から左に上行咽頭動脈が分岐し、更に、上甲状腺動脈が右に分岐する。（ｂ−２）は、切開した頸動脈分岐部の目視での写真を示す。（ｂ−３）は、血管治療材料を挿入後の頸動脈分岐部を示す。矢印は、血管治療材料を挿入した外頸動脈を示す。スケールバーは、４ｍｍである。血管治療材料の留置から１４日後に、解剖した頸動脈の分岐部(動脈瘤モデル)の写真である。（ａ−１）は、比較例１の血管治療材料を留置した分岐部であり、（ａ−２）は、実施例１の血管治療材料を留置した分岐部である。（ｂ−１）は、比較例１の血管治療材料を留置した外頸動脈入口部の写真であり、（ｂ−２）は、実施例１の血管治療材料を留置した外頸動脈入口部の写真である。血管治療材料の留置から１４日後における切開部分断面のエオシン・ヘマトキシリン（ＨＥ）染色及びマッソントリクローム（ＭＴ）染色像である。（ａ）は比較例１の治療材料を埋め込んだ時の病理写真である。（ｂ）は実施例１の治療材料を埋め込んだ後の病理写真である。（ａ）及び（ｂ）を比べると、実施例１の治療材料では、明らかに動脈瘤内を塞ぐように細胞成分が占めている。病理評価から内部は平滑筋細胞と細胞外マトリックスで埋め尽くされている事が分かる。実施例１の血管治療材料を埋め込んだ動脈瘤モデルに対して、血管治療材料留置から１４日後における切開部分断面をαＳＭＡ（α Smooth Muscle Actin）とｖＷＦ（von Willebrand Factor）に関する免疫染色を行った。上段はｖＷＦが染色されており、動脈瘤の入口部が内皮細胞で覆われている事が分かる。下段はαＳＭＡが染色されており、動脈瘤内部に平滑筋細胞が存在している事を示す。動脈瘤内部を軸位で切片を作製した。（ａ）は比較例１の血管治療材料を、（ｂ）は実施例１の血管治療材料を用いた。（１）は埋め込み後、２週間経過したもの、（２）は４週間経過したものである。ともに実施例１の血管治療材料を埋め込んだ症例について、動脈瘤内部の著明な器質化を認めた。動脈瘤内部の器質化割合を％で表示した。白は比較例１の血管治療材料、黒は実施例１の血管治療材料である。埋め込み後、２週間目及び４週間目の両方とも、実施例１の血管治療材料を用いると、有意に器質化が促進されている事が分かる。実施例２〜７の血管治療材料を用いた場合の動脈瘤内部の器質化割合を、左から％で表示した。いずれも埋め込み後、２週間目を示す。図７に示した比較例１と比較すると、実施例２〜７の血管治療材料を用いると、有意に器質化が促進されている事が分かる。実施例２〜７の血管治療材料を用いた場合に、埋め込みから２週間目に、動脈瘤開口部から２ｍｍの位置で、動脈瘤をコイルごと切断した断面を示す写真。左上から左下へ、実施例２〜４を示し、右上から右下へ実施例５〜７を示す。図３（ｂ−１）に示した比較例１と比較すると、いずれもコイルの周囲が白色の組織で囲まれ、有意に器質化が促進されていることがわかる。

本発明に係る血管治療材料は、スタチンとコイルを含んで成り、スタチンがコイルに担持されている。
本発明において、「スタチン（statin）」とは、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の働きを阻害することによって、血液中のコレステロール値を低下させる薬物を意味し、本発明が目的とする血管治療材料を得られる限り、特に制限されるものではない。

本発明に係る「スタチン」には、薬理学的に許容されるスタチン類化合物が含まれる。そのようなスタチン類として、具体的には、例えば、シンバスタチン（simvastatin：万有製薬／メルクから市販：又は(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-hydroxy-6-oxotetrahydro-2H-pyran-2-yl]ethyl}-3,7-dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl 2,2-dimethylbutanoate）、プラバスタチン（pravastatin：第一三共／ブリストル・マイヤーズスクイブから市販：又は(3R,5R)-3,5-dihydroxy-7-((1R,2S,6S,8R,8aR)-6-hydroxy-2-methyl-8-{[(2S)-2-methylbutanoyl]oxy}-1,2,6,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl)-heptanoic acid）、ロバスタチン（lovastatin：塩野義製薬／アストラゼネカから市販：又は(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl}-3,7-dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl (2S)-2-methylbutanoate）、フルバスタチン（fluvastatin：ノバルティスファーマ／田辺三菱製薬から市販：又は(3R,5S,6E)-7-[3-(4-fluorophenyl)-1-(propan-2-yl)-1H-indol-2-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid）、メバスタチン（mevastatin：又は(1S,7R,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-hydroxy-6-oxotetrahydro-2H-pyran-2-yl]ethyl}-7-methyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl (2S)-2-methylbutanoate）、セリバスタチン（cerivastatin：又は(3R,5S,6E)-7-[4-(4-fluorophenyl)-5-(methoxymethyl)-2,6-bis(propan-2-yl)pyridin-3-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid）、アトルバスタチン（atorvastatin：アステラス製薬／ファイザーから市販：又は(3R,5R)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid）、ピタバスタチン（pitavastatin：興和創薬から市販：又は(3R,5S,6E)-7-[2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid）及びロスバスタチン（rosuvastatin：メルクから市販：又は(3R,5S,6E)-7-[4-(4-fluorophenyl)-2-(N-methylmethanesulfonamido)-6-(propan-2-yl)pyrimidin-5-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid）を例示できる。
スタチンは、シンバスタチン、プラバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン及びロスバスタチンを含むことがより好ましい。
これらのスタチンは、市販のものを使用することができ、各々単独で又は組み合わせて使用することができる。

本発明において「コイル」とは、各種断面の線をらせん状に巻いたものを意味し、上記スタチンを担持でき、本発明が目的とする血管治療材料を得られる限り、特に制限されるものではない。
上記コイルの大きさや形状は、従来から塞栓治療に使用される塞栓材料のコイルと同様であってよい。
コイルの長軸と垂直方向の断面の直径（以下、「コイルの直径」ともいう）と長軸方向の長さは、使用する血管の部位の大きさに対応して、適宜調整することができる。
コイルの直径は、一般的には例えば、１００〜５００μｍであり、コイルの長軸方向の長さは、一般的には例えば、１０〜３００ｍｍである。

このようなコイルは、素線材から、適切に製造することができる。具体的には、例えば、素線材の直径は、２０〜１２０μｍであることが好ましく、３０〜６０μｍであることがより好ましい。この素線材を、例えば、直接巻いて、「コイル」を製造してもよい。また、一旦、例えば、直径１００〜２０００μｍの「一次コイル」を作成し、更に、適用しようとする血管の治療部位の内径に合うような直径になるように巻き直して、本発明に係る「コイル」を得ることができる。更に場合により、「一次コイル」から、直径２〜３０ｍｍの「二次コイル」を作成した後、「コイル」を製造してもよい。

素線材は、何らかの方法で体外から視認することができ、ある程度の生体適合性を有し、コイルを形成することができる機械的特性を有するものであって、本発明に係る血管治療材料を得ることができるものであれば、特に制限されるものではない。
そのような素線材として、例えば、金属、高分子材料等を例示することができる。手術中に利用されるＸ−線透視下で良好に視認できる、金属が好ましい。

「金属」として、例えば、白金、タングステン、金、コバルト、クロム、チタン、タングステン、ニオブ、アルミニウム、タンタル、鉄、ニッケルから選択される少なくとも１種の金属及びこれらの金属の組み合わせでできる合金を例示することができ、好ましい。「金属」は、白金、ステンレス鋼、タンタル、タンタル合金、白金−タングステン合金、白金−金合金、金、金合金、コバルトベースクロム合金からなる群から選択される少なくとも一種であることがより好ましい。なかでも、生体内での反応性が少なくほとんど毒性を示さない、また、血管内での操作に適切な機械特性を有するので、白金−タングステン合金、ステンレス鋼、白金−金合金が特に好ましく、白金−タングステン合金及び白金−金合金が最も好ましい。

本発明に係るコイルは、例えば、生体適合材料、生分解性材料、合成樹脂等の高分子材料及びセラミックス材料等の他の材料によって、少なくとも一部が被覆されていてもよいが、被覆されていなくてもよい。かかる他の材料は、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができる限り、特に制限されるものではないが、特に従来から臨床で、生体内埋め込み材料として用いられてきた材料がより好ましい。

そのような他の材料として、例えば、エチレン酢酸ビニル共重合体、ポリエステル、シリコーンゴム（ＲＴＶゴム）、熱可塑性ポリウレタン、フッ素樹脂（例えば、ＰＴＦＥ、ＥＴＦＥ、熱可塑性フッ素樹脂等）、ポリオレフィン（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、低密度ポリエチレン、低密度ポリプロピレン等）、ポリエステル、ポリカプロラクトン、ポリ酢酸ビニル、ポリカーボネート、ポリイミドカーボネート、脂肪族ポリカーボネート、シリコーン、ポリエーテル型ポリウレタンとジメチルシリコンの混合物及びブロック共重合体、セグメント化ポリウレタン等のポリウレタン、ポリアクリルアミド、ポリエチレンオキサイド、ポリエチレンカーボネート、ポリプロピレンカーボネート等のポリカーボネート、ポリメチルメタクリレート, ポリブチルメタクリレート、ポリメトキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシエチルメタアクリレート、ヒドロキシエチルメタアクリレートとスチレンの共重合体（例えば、ＨＥＭＡ−Ｓｔ−ＨＥＭＡブロック共重合体）、及びこれらの混合物等を例示することができる。

上記高分子材料として生体内で酵素的又は非酵素的に分解され、分解物が毒性を示さない生分解性材料を用いることが出来る。そのような生分解性材料として、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリα−アミノ酸、ポリリンゴ酸、及びそれらの共重合体（例えば、ポリ乳酸−ポリグリコール酸共重合体、ポリ乳酸−ポリカプロラクトン共重合体等）、糖類、フィブリン、コラーゲン、ゼラチン、ラミニン、ヘパラン硫酸、フィブロネクチン、ビトロネクチン、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、キチン、キトサン、及びそれらの混合物等を例示できる。

本発明の血管治療材料は、スタチンを担持したコイルの部分が、高分子材料で被覆されていても被覆されていなくてもよく、更に、スタチンと高分子材料の混合物で被覆されていても、されていなくてもよい。スタチンをコイルに担持する方法は、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができる限り限定されることはないが、コイルの表面に、スタチンを溶解した溶液を調製して、該溶液をコイルの表面に塗布後、乾燥する方法、該溶液中にコイルを浸漬後、乾燥する方法等を例示することができる。

スタチンを溶解した溶液は、溶媒とスタチンを適宜混合して製造することができる。溶媒は、スタチンと反応せず、スタチンを不安定化させず、スタチンを安定に溶解し、後ほど容易に蒸発する適度な沸点を有し、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができる限り特に限定されることはない。そのような溶媒として、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール類、アセトン等のケトン類、ジオキサン、テトラフラン等のエーテル類、アセトニトリル等のニトリル類等を例示することができる。

スタチンの溶液のスタチンの濃度は、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができる限り特に限定されることはないが、コイルへのスタチンの担持量を考慮すると、比較的高濃度であることが好ましく、５〜４５重量％であることが好ましく、１５〜３５重量％であることがより好ましい。

上記コイル表面に担持されるスタチンの量は、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができる限り限定されることはないが、０．１μｇ〜５００μｇ／１０ｍｍ・ｃｏｉｌであることが好ましく、５〜６０μｇ／１０ｍｍ・ｃｏｉｌであることがより好ましい。０．１μｇ／１０ｍｍ・ｃｏｉｌ未満の場合、器質化促進効果が不十分と成り得る。５００μｇ／１０ｍｍ・ｃｏｉｌを超える場合、非効率的と成り得る。尚、「１０ｍｍ・ｃｏｉｌ」とは、コイルの長軸方向の１０ｍｍの長さ当たりとの意味を有する。
スタチンの担持された量は、コイルにスタチンを担持する前後で、コイルの重さを秤量し、その重さの増加量で求めることができる。

尚、本明細書において、「担持」とは、コイルにスタチンが載っている状態を意味し、スタチンがコイルに付着して、コイルの少なくとも一部を被覆していることを意味する。
担持は、本発明が目的とする血管治療材料を得ることができれば、物理的に行われても化学的に行われてもよく、その担持方法及び担持後の状態は、特に制限されるものではない。

本発明の血管治療材料を血管内に、特に血管傷害部位に、留置することで、血管治療材料の周囲の器質化を促進できる。ここで「血管障害部位」とは、血管に発生した何らかの障害を有する部位をいい、本発明の血管治療材料を利用することができる部位であれば特に制限されるものではない。例えば、動脈瘤、動静脈奇形、動静脈瘻等を例示することができる。尚、本発明の血管治療材料は、腫瘍に通じる栄養動脈の塞栓治療にも有用である。

本発明の血管治療材料の血管内での、作用を、図１を参照して説明する。
図１は、本発明の血管治療材料を血管の動脈瘤内に留置した状態を説明する模式図である。血管２に動脈瘤３が生じている。その動脈瘤３の内部に血管治療材料１が留置されている。血管治療材料１を留置することで、動脈瘤３内に、線維芽細胞又は平滑筋細胞４が増殖して、動脈瘤３内が器質化される。更に、動脈瘤３の開口部が、新たな血管内皮細胞５で覆われる。その結果、動脈瘤３が血管２から、実質的に遮断されて、動脈瘤３で生ずる血栓の飛散、動脈瘤３の破裂を効果的に防止することができる。

本発明が、優れた効果を奏する理由は、以下のように考えられるが、本発明は以下の理由によって何ら制限されるものではない。
シンバスタチン等のスタチンは、血清脂質低下作用を示し、高脂血症治療に使用されている。更に、シンバスタチン等のスタチンは、血清脂質低下作用のみならず、外科的切開、胃潰瘍、火傷、裂傷等の創傷を治癒する創傷治癒促進剤作用を有すること（非特許文献：J Biol Chem. 2008 May 30;283(22):15479-90. Epub 2008 Apr 3. Biphasic regulation of HMG-CoA reductase expression and activity during wound healing and its functional role in the control of keratinocyte angiogenic and proliferative responses.Schiefelbein D, Goren I, Fisslthaler B, Schmidt H, Geisslinger G, Pfeilschifter J, Frank S.）、サイトカインの一種である形質転換増殖因子（ＴＧＦ−β）の産生を誘導することも知られている（非特許文献：Nyan M, Miyahara T, Noritake K, Hao J, Rodriguez R, Kuroda S, Kasugai S.: Molecular and tissue responses in the healing of rat calvarial defects after local application of simvastatin combined with alpha tricalcium phosphate. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2010 Apr;93(1):65-73.）。

一方、シンバスタチン等のスタチンは、細胞増殖因子又はその遺伝子を含むベクターと比較して極めて安定である。更に、エタノール、メタノール及びアセトニトリル等の有機溶剤に失活することなく容易に溶解する。従って、コイルに担持されたスタチンは、非常に安定であるので、取り扱いや使い勝手等に優れる。

従って、シンバスタチン等のスタチンは、血管内部に留置されるまで、安定に容易に取り扱うことができるので、有効に血管内部に配置することができる。そして、スタチンは、該当薬剤が直接的又は間接的に血小板やマクロファージ等の細胞に作用することにより、細胞からのＴＧＦ−β１等を誘導することができると考えられる。その結果、誘導されたＴＧＦ−β１が器質化を促進し、上述の効果を奏すると考えられる。

以下、実施例及び比較例を例示して本発明を更に詳細かつ具体的に説明するが、これらの実施例は単なる例にすぎず、本発明はこれら実施例によって何ら限定されるものではない。

実施例１
シンバスタチンをエタノールに溶解して、２６．５重量％エタノール溶液を調製した。一方、素線径４５μｍの白金−タングステン（８％）合金線を巻回させ、直径３００μｍ、長さ１０ｍｍの白金コイルを得た。得られた白金コイルをシンバスタチン（万有製薬から市販）のエタノール溶液に浸漬後、乾燥して、実施例１の血管治療材料を得た。なお、精密天秤を用いて測定したところ、白金コイル上のシンバスタチンの担持量は約５０μｇ／１０ｍｍ・ｃｏｉｌであった。

比較例１
実施例１と同様に素線径４５μｍの白金−タングステン（８％）合金線を巻回させ、直径３００μｍ、長さ１０ｍｍの白金コイルを得た。これにシンバスタチン担持しないでそのまま比較例１の血管治療材料として用いた。

図２に実施例１と比較例１の血管治療材料の電子顕微鏡写真（ＳＥＭ）を示す。（ａ−１）が、比較例１の血管治療材料であり、（ａ−２）が、実施例１の血管治療材料である。（ａ−２）については、シンバスタチンの結晶が、コイルに付着している様子が認められた。

評価方法
ウィスターラット（オス、体重３００〜３５０ｇ）の外頚動脈を頚動脈分岐部より５ｍｍのところで結紮し、この盲端にした外頚動脈を動脈瘤のモデルとした。この動脈瘤モデル内に実施例１及び比較例１で作製した血管治療材料を留置した。各々の血管治療材料について、６匹ずつのウィスターラットを用いた。血管治療材料の留置から１４日後又は２８日後に犠牲死させて該当する血管を取り出した。

図２の（ｂ−１）は、ウィスターラットの頸動脈分岐部を模式的に示す。総頸動脈は、内頸動脈（左）と外頸動脈（右）に分岐する。この分岐する外頸動脈を利用して動脈瘤モデルとした。（ｂ−２）は、切開した頸動脈分岐部の写真を示す。（ｂ−３）は、血管治療材料を挿入後の頸動脈分岐部を示す。血管治療材料は、外頸動脈に挿入した。

図３に、頸動脈分岐部の写真を示す。外頸動脈嚢の直径は、実施例１の血管治療材料を留置した（ａ−２）の方が大きいことが判る。外頸動脈入口部は、元の外頸動脈のものであり、（ｂ−１）比較例１の血管治療材料の一端は、明確に血流に曝されており、血管治療材料の周囲は、透明感があるのに対し、（ｂ−２）実施例１の血管治療材料の一端は、輝く組織に覆われており、周囲に白色の組織が存在することが明確に理解できる。

取り出した血管を、分岐部より２ｍｍのところで切開して、切開部分の断面のエオシン・ヘマトキシリン（ＨＥ）染色及びマッソントリクローム（ＭＴ）染色して、その像を図４〜６に示した。

図４〜６より、実施例１の血管治療材料を用いた群では、動脈瘤内に血流の残存と見られる腔が少なくなり、１４日後には動脈瘤内の器質化が進んでいることが判った。２８日後には充分な器質化が確認された。また、内頚動脈、総頚動脈の血管壁障害や閉塞は認められなかった。
一方、比較例１の血管治療材料を用いた群では、１４日後でも動脈瘤内に血流の残存と見られる腔が認められた。そのような腔は、特に図６（ａ−１）及び（ａ−２）に明確に認められた。比較例１の血管治療材料のコイルの表面に薄い器質化は認められるが、全体として血管内膜の肥厚化が生じたのみであり、閉塞率は不充分であった。

図４〜６において、器質化された部位はＨＥ染色では細胞核が集まって見え、ＭＴ染色では青く染色される。一方、血液が凝固した部位はＨＥ染色では細胞核が乏しく見え、ＭＴ染色では赤又は橙に染色される。これを利用して、コンピュータを用いた画像解析により、器質化された部位の占める割合を算出した。結果を図７に示した。

図７に示すように、実施例１の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、７３．６±１９．４％であった。これに対し、比較例１の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、２０．５±１０．７％であった。従って、実施例１の血管治療材料を用いると、著しく高い器質化割合を得た。実施例１の血管治療材料を留置から２８日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、８３．４±１１．１％であった。これに対し、比較例１の血管治療材料を留置から２８日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、３７．４±２０．６％であり、実施例１の血管治療材料を用いる方が、著しく高い器質化割合を与えた。

実施例２
シンバスタチンの代わりにプラバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例２の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いる画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例２の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、８３．５±１７．６％であった。

実施例３
シンバスタチンの代わりにロバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例３の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いた画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例３の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、９２．５±８．２％であった。

実施例４
シンバスタチンの代わりにフルバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例４の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いた画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例４の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、９０．０±６．７％であった。

実施例５
シンバスタチンの代わりにアトルバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例４の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いた画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例５の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、９５．４±３．５％であった。

実施例６
シンバスタチンの代わりにピタバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例４の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いた画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例６の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、９０．２±５．３％であった。

実施例７
シンバスタチンの代わりにロスバスタチンを用いた以外は、実施例１と同様の方法を用いて、実施例４の血管治療材料を得た。その後ウィスターラットの外頚動脈を頚動脈分岐部モデルとして用いて、その器質化能を評価した。ＨＥ染色とＭＴ染色像を、コンピュータを用いた画像解析により評価した。器質化された部位の占める割合は比較例１のものより有意に高かった。図８に示すように、実施例７の血管治療材料を留置から１４日後に、外頸動脈嚢を占める器質化割合は、８９．２±７．５％であった。

更に、実施例２〜７の血管治療材料を用いた場合に、動脈瘤開口部から２ｍｍの位置で、動脈瘤をコイルごと切断した断面の写真を、図９に示す。左上から左下の写真は、実施例２〜４を用いた場合の断面を示し、右上から右下の写真は、実施例５〜７を用いた場合の断面を示す。いずれも埋め込み後、２週間目の断面を示す。図３（ｂ−１）に示した比較例１と比較すると、実施例２〜７の血管治療材料を用いると、いずれもコイルの周囲が明らかに白色の組織で囲まれ、有意に器質化が促進されていることがわかった。

本発明によれば、製造がきわめて容易であり、かつ、高い器質化促進効果を発揮することができる血管治療材料を提供することができる。
［関連出願］
本願は、パリ条約又は米国特許法に基づいて、２０１０年９月１６日に出願した米国仮出願第６１／３８３，４４３号を基礎とする優先権を主張する。本引用により、基礎出願の全ての記載内容は、本明細書に組み込まれる。

１血管治療材料
２血管
３動脈瘤
４線維芽細胞、平滑筋細胞
５血管内皮細胞

Claims

スタチンを担持したコイルを含む血管用治療材料。
コイルを形成する線は、白金、タングステン、金、コバルト、クロム、チタン、タングステン、ニオブ、アルミニウム、タンタル、鉄、ニッケルから選択される少なくとも１種の金属でできている請求項１に記載の治療材料。
スタチンは、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、セリバスタチン、アトルバスタチン、ピタバスタチン及びロスバスタチンから選択される少なくとも一種を含む請求項１又は２に記載の治療材料。
血管内に留置する塞栓治療用、器質化を促進する瘤の再開通防止用又は瘤の破裂防止用の請求項１〜３のいずれかに記載の治療材料。
スタチン含有溶液に、コイルを浸析後、コイルを乾燥する工程、又はスタチン溶液をコイルに塗布後、コイルを乾燥する工程を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の治療材料の製造方法。