JP2013532729A - Ｓｔ−２４６液体製剤および方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、難溶性ＳＴ−２４６をシクロデキストリン中で可溶化するための新規液体製剤および本製剤を作製する新規プロセスを提供する。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１０年８月５日に出願された米国仮特許出願第６１／３７０，９７１号および２０１１年３月８日に出願された米国仮特許出願第６１／４５０，３５９号の優先権および利益を主張するものであり、それらの内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、ＳＴ−２４６の新規液体製剤および本液体製剤を作製するためのプロセスに関する。

連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
本発明は、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ＡｕｔｈｏｒｉｔｙおよびＮａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ （ＮＩＨ）によって付与された契約番号ＨＨＳＮ２７２２００８０００４１Ｃの下、米国政府の支援によりなされた。米国政府は、本発明において特定の権利を有する。

本出願の全体を通して、文中で種々の出版物が言及される。これらの出版物の開示は、本明細書に記載および請求される本発明の日付で当業者に既知である技術水準をより完全に説明するために、それらの全体が参照により本出願に組み込まれる。

歴史的に、天然痘の病原体である痘瘡ウイルスは、根絶するまでに人口のほぼ１０％を死滅させるか、障害を与えるか、または外観に損傷を与えてきたと推定される（１）。天然痘は、伝染性が高く、非常に罹患率が高い。誰かが天然痘に罹患した家庭におけるワクチン接種を受けていない家族間の二次罹患率は、３０％〜８０％の範囲であると報告されている。死亡率は、小痘瘡の１％から大痘瘡の３０％にまで及ぶ。テロリズムの手段としての生物兵器の出現により、もはや、天然痘は歴史的影響を与えた疾患であるに過ぎないと考えることはできない。

現在のところ、天然痘に曝露された集団において、疾患の転帰を変化させるか、または潜在的に疾患を予防する早期ワクチン接種以外に治療法はない。ワクチン接種は、特定の免疫抑制レシピエントにとって、また、たとえ健常なレシピエントにとっても、本質的な有害事象のリスクを有する（２）。さらに、ワクチン接種は、曝露後４日以内に投与された場合にのみ有効である。したがって、単独で、または潜在的にワクチン接種と組み合わせて使用される抗ウイルス薬は、防御免疫の獲得前に生じる脆弱性の窓の期間中に個人を治療するために使用することができる。また、抗ウイルス薬は、サル痘等の人畜共通のポックスウイルス疾患のヒトにおける治療においても使用することができる。

ＳＴ−２４６（４−トリフルオロメチル−Ｎ−（３，３ａ，４，４ａ，５，５ａ，６，６ａ−オクタヒドロ−１，３−ジオキソ−４，６−エテノシクロプロプ［ｆ］イソインドール−２（１Ｈ）−イル）−ベンズアミド）は、オルソポックスウイルスに対する強力な候補として最近出現した。オルソポックスウイルスに対する活性についてＳＴ−２４６を評価するいくつかの試験により、インビトロおよびインビボでの優れた有効性が示されている（３、４）。ワクシニアウイルス（ＶＶ）、牛痘ウイルス（ＣＶ）、奇肢症ウイルス（ＥＣＴＶ）、サル痘、ラクダ痘、および痘瘡ウイルスに対してインビトロで評価したところ、ＳＴ−２４６は、０．０７μＭ以下の濃度でウイルス複製を５０％阻害した（５０％有効濃度［ＥＣ５０］）。ＥＣＴＶ、ＶＶ、またはＣＶの致死量感染を用いた動物モデルでは、ＳＴ−２４６は、無毒性であり、たとえウイルス接種後７２時間まで治療が遅延された場合であっても、予防においてまたは死亡率を減少させる上で非常に有効であると報告された（３、４）。また、静注用ＶＶを用いて、非致死性マウス尾病変モデルを用いたＳＴ−２４６の評価も行った。５日間、１５または５０ｍｇ／体重１ｋｇで１日２回ＳＴ−２４６を経口投与したところ、尾病変が有意に減少した（４）。ごく最近、両親の軍隊配備前の天然痘予防接種に曝露された後に発症したワクチニア性湿疹に対するＦＤＡ承認の緊急処置として、乳児にＳＴ−２４６が与えられた（５）。

天然痘に対するＳＴ−２４６抗ウイルス療法の高い有効性、および天然痘感染の治療のためのＦＤＡ承認薬の欠如を考慮すると、種々の投与経路によって投与され得る安全かつ有効なＳＴ−２４６製剤の開発の必要性が明らかに存在する。しかしながら、水中および医薬的に許容されるｐＨ緩衝液中においてＳＴ−２４６が難溶性であることが、安全かつ有効なＳＴ−２４６液体製剤の作製に対する障害となっている。

したがって、医薬品産業および他の生物学に基づく産業において、経口、非経口、または局所投与のために、液体製剤中に難水溶性のＳＴ−２４６を配合する重大な必要性がある。

Ｆｒｏｍｍｉｎｇ andＳｚｅｊｔｌｉ，Ｊ．（１９９４）

本発明は、治療的に有効な量のＳＴ−２４６およびシクロデキストリンを含み、１つ以上の医薬的に許容される成分をさらに含む、液体医薬製剤を提供する。

また、本発明は、オルソポックスウイルス感染および／またはワクチニア性湿疹を治療する方法であって、それを必要とする対象に、本発明による液体医薬製剤を投与することを含む、方法も提供する。

本発明は、ａ）医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合するステップと、ｂ）任意で、ステップａ）の混合物を濾過するステップと、を含む、本発明による液体製剤を作製するプロセスをさらに提供する。

また、本発明は、ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６含有量と、ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含む、単位投与量の液体製剤も提供する。

本発明は、ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６と、ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含む、単位投与量の液体製剤をさらに提供する。

また、本発明は、ａ）医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合することと、ｂ）任意で、ステップａ）の混合物を濾過することと、ｃ）前記混合物を凍結乾燥させることと、を含む、水溶性の固体ＳＴ−２４６医薬製剤を調製するためのプロセスも提供する。

賦形剤の水溶液中におけるＳＴ−２４６の可溶性を示す。 賦形剤の水溶液中におけるＳＴ−２４６の可溶性を示す。 賦形剤の水溶液中におけるＳＴ−２４６の可溶性を示す。 ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）の構造を示す。 ２５℃のＨＰ−β−ＣＤのＳＴ−２４６水溶液を示す。 ＳＴ−２４６の濃度を２５℃のＨＰ−β−ＣＤの関数として示す。 ＳＴ−２４６の可溶性をＨＰ−β−ＣＤ濃度の関数として示す。 共溶媒の存在下におけるＳＴ−２４６の可溶性を様々な温度の関数として示す。 ２５℃および５℃でｐＨがＳＴ−２４６の可溶性に与える影響を示す。 ＨＰ−β−ＣＤを含有する静注用製剤の希釈安定性の影響を示す。 ＳＴ−２４６の経口投与と比較したＳＴ−２４６の静脈内投与の薬物動態プロファイルを示す。 （３つの異なる試料からの）ＩＩ型の３つのＸ線粉体回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す。 （２つの異なる試料からの）ＩＶ型の２つのＸ線粉体回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す。 Ｖ型のＸ線粉体回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す。 （２つの異なる試料からの）ＶＩ型のＸ線粉体回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す。 マウスにおけるＳＴ−２４６の経口および静脈内投与の血漿中濃度時間曲線を示す。メスのＢＡＬＢ／ｃマウスに３０、１００、３００、および１０００ｍｇ／ｋｇの用量でＳＴ−２４６を経口投与した後の経時的な血漿中濃度の平均値および標準偏差が示される。メスのＣＤ−１マウスに対する３、１０、３０、および７５ｍｇ／ｋｇの１０分間の静脈内注入後の経時的な血漿中濃度平均値および標準偏差。各時点は、３匹の個々のマウスからの平均値である。 ニュージーランド白ウサギにおける静脈内および経口投与後の経時的な血漿中濃度を示す。１００ｍｇ／ｋｇの経口投与、１ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス投与、または３、３０、もしくは６０ｍｇ／ｋｇの５分間の緩徐な静脈内プッシュ後の経時的なＳＴ−２４６の血漿中濃度が示される。１５分間の３ｍｇ／ｋｇの静脈内注入も示される。各曲線は、２羽のオスウサギおよび２羽のメスウサギからの標準偏差を含む平均値である。 カニクイザルにおける４時間の静脈内注入と比較した経口投与後のＳＴ−２４６の経時的な血漿中濃度を示す。カニクイザルにおける１、３、１０、または３０ｍｇ／ｋｇの４時間の静脈内注入後の血漿中濃度時間曲線と比較した、３、１０、または３０ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後のＳＴ−２４６の血漿中濃度。各曲線は、平均値および標準偏差を示す。経口投与では、各用量群に３匹のオスおよび３匹のメスを用い、静脈内注入では、各用量群に２匹のオスおよび２匹のメスを用いた。 静注試験から計算されたクリアランス値を示す。４時間または６時間のいずれかの静脈内注入としてカニクイザルに投与した各用量群の計算されたクリアランス値の平均値および標準偏差。 ２０または３０ｍｇ／ｋｇのいずれかのＳＴ−２４６のカニクイザルに対する異なる投与計画についての血漿中濃度時間曲線を示す。２０ｍｇ／ｋｇ（図２０Ａ）または３０ｍｇ／ｋｇ（図２０Ｂ）の異なる投与計画について経時的な血漿中濃度の平均値および標準偏差値が示される。投与計画は、経口投与（各用量群に３匹のオスおよび３匹のメス）、４時間の静脈内注入（各用量群に２匹のオスおよび２匹のメス）、６時間の静脈内注入（各用量群に２匹のオスおよび２匹のメス）、および１２時間の間を空けて開始した４時間の静脈内注入を２回／ＢＩＤ（各用量群に４匹のオスおよび４匹のメス）を含んでいた。

本発明は、治療的に有効な量のＳＴ−２４６およびシクロデキストリンと、任意で、担体、賦形剤、希釈剤、添加剤、増量剤、滑沢剤、可溶化剤、保存剤、および結合剤からなる群から選択される１つ以上の医薬的に許容される成分とをさらに含む、安全かつ有効な液体医薬製剤を提供する。一実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである。別の実施形態において、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約４〜約８の置換度を有する。さらに別の実施形態において、前記シクロデキストリンは、スルホブチル−エーテル−β−シクロデキストリンである。

本発明の一態様において、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約１０重量％〜約５０重量％の量で存在し、より好ましくは約２０重量％〜約４０重量％の量で存在する。本発明のさらに別の態様において、液体医薬製剤は、約３〜１２、より好ましくは約３〜１０のｐＨを有するように調整される。本発明のさらに別の態様において、本発明の液体医薬製剤は、経口、非経口、粘膜、経皮、または局所投与に好適である。

また、本発明は、オルソポックスウイルス感染を治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療的に有効な量のＳＴ−２４６およびシクロデキストリンを含み、担体、賦形剤、希釈剤、添加剤、増量剤、滑沢剤、および結合剤からなる群から選択される１つ以上の医薬的に許容される成分をさらに含む液体医薬製剤を投与することを含む、方法も提供する。一実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである。別の実施形態において、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約４〜約８の置換度を有する。さらに別の実施形態において、シクロデキストリンは、スルホブチル−エーテル−β−シクロデキストリンである。

また、本発明の方法は、ワクチニア性湿疹を治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療的に有効な量の本発明の液体製剤を投与することを含む、方法も含む。本発明によれば、本発明の液体医薬製剤は、経口、非経口、粘膜、経皮、または局所投与経路を介して投与することができる。

また、本発明は、ａ）ＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合するステップと、ｂ）任意で、ステップａ）の混合物を濾過するステップとを含む、本発明の液体製剤を作製するプロセスも提供する。本発明のプロセスは、多形Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、Ｖ型、およびＶＩ型からなる群から選択されるＳＴ−２４６を含む。

一実施形態において、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである。別の実施形態において、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約４〜約８の置換度を有する。さらに別の実施形態において、シクロデキストリンは、スルホブチル−エーテル−β−シクロデキストリンである。

本発明の一態様において、本発明のプロセスは、医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと約１５分〜７２時間混合するステップを含む。本発明の別の態様において、本発明のプロセスは、約２８℃〜約７０℃の温度範囲で、医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合することを含む。一実施形態において、医薬的に許容される液体担体は、水である。

本発明のさらに別の態様において、ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６含有量と、ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含み、ｃ）任意で、液体製剤の全体積が約１００ｍｌになるように、マンニトール、トレハロース二水和物、ラクトース一水和物、および精製水を含む、単位投与量の液体製剤が提供される。一実施形態において、０．１ＨＣＬ／ＮａＯＨを用いて約３．０〜約５．０の範囲にｐＨが調整される。別の実施形態において、クエン酸塩緩衝液を用いて約３．０〜約５．０の範囲にｐＨが調整される。

本発明のさらに別の態様において、ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６と、ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含み、ｃ）任意で、好ましくは、液体製剤の全体積が約１００ｍｌになるように、ポリエチレングリコール４００、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール３００、および精製水からなる群から選択される１つ以上の医薬的に許容される成分を含む、単位投与量の液体製剤が提供される。一実施形態において、０．１ＨＣＬ／ＮａＯＨを用いて３．０〜５．０の範囲にｐＨが調整される。別の実施形態において、クエン酸塩緩衝液を用いて約３．０〜約５．０の範囲にｐＨが調整される。

定義
この詳細な説明に従って、以下の省略形および定義が適用される。単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈によって明らかにそうではないと指示のない限り、複数形の指示対象を含むことに留意されたい。

「医薬組成物」または「医薬製剤」という用語は、有効成分（複数可）と、担体を構成する医薬的に許容される賦形剤と、成分のうちのいずれか２つ以上の組み合わせ、錯体形成、または凝集から直接的または間接的に生じるあらゆる生成物とを含む製剤を包含することが意図される。したがって、本発明の医薬組成物は、有効成分、有効成分の分散体もしくは複合体、追加の有効成分（複数可）、および医薬的に許容される賦形剤を混合することによって作成されるあらゆる組成物を包含する。

「半減期」という用語は、体内に存在する薬物の残量の５０％を排除するために必要な時間の長さを示す薬物動態用語である。

「ＡＵＣ」（すなわち、「曲線下面積」、「血中濃度曲線下面積」、または「血中濃度時間曲線下面積」）という用語は、頻繁な間隔で試料採取された個々のまたはプールした個々の血漿中濃度のプロットに基づくバイオアベイラビリティまたは薬物吸収の程度の測定方法を指して用いられる薬物動態用語である：ＡＵＣは、患者の血漿中の未変化薬物の全量に正比例する。例えば、ＡＵＣ対用量のプロットの線形曲線（すなわち、上向きの直線）は、薬物が血流中に徐々に放出されており、患者に安定した薬物の量を提供していることを示唆し、ＡＵＣ対用量が直線的関係である場合、それは、一般的に、患者の血流中への薬物の最適な送達を意味する。対照的に、非線形のＡＵＣ対用量曲線は、薬物の急速な放出のために、薬物のうちのいくらかが吸収されていないか、または薬物が血流に進入する前に代謝されることを示唆する。

「Ｃ−_ｍａｘ」（すなわち、「最高血中濃度」）という用語は、患者の血漿中の特定の薬物ピーク濃度を示すために用いられる薬物動態用語である。

「Ｔ_ｍａｘ」（すなわち、「最高血中濃度到達時間」または「Ｃ_ｍａｘ到達時間」）という用語は、薬物投与の時間的経過の間にＣ_ｍａｘが観察される時間を示すために用いられる薬物動態用語である。予想されるように、即時放出性および胃保持性の構成要素を含む剤形は、即時放出性剤形のためのＣ_ｍａｘよりも高いが、純粋に胃保持性である剤形のためのＴ_ｍａｘよりも低いＴ_ｍａｘを有する。

本明細書で用いられる場合、治療を目的とする「対象」という用語は、あらゆる対象を含み、好ましくは、オルソポックスウイルス感染または関連する状態の治療を必要とする対象である。対象は、典型的には動物であり、より典型的には哺乳動物である。好ましくは、哺乳動物はヒトである。

「化学修飾されたシクロデキストリン」という用語は、独立して、約０．５〜約１０．０と様々であり得る１つより多くのの置換度が存在する１つ以上のの化学修飾されたシクロデキストリンを指す。化学修飾されたシクロデキストリンの置換度（グルコース単位当たりの官能基の平均数）は、ＳＴ−２４６の必要な可溶性および安定性を提供するために必要に応じて異なり得る。例えば、置換度は、約０．５〜約１０．０であり得る。２−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン等の化学修飾されたシクロデキストリンの場合、（グルコース単位当たりの置換されたヒドロキシ官能基の）置換度は、例えば、約４．０〜８．０であり得る。置換度は、既知の技術を用いて質量分析法（ＭＳ）または核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析法によって決定することができる。

「難溶性の治療剤」という用語は、２０℃、２５℃、および３７℃のｐＨ１．２〜７の緩衝液中で、約１ｍｇ／ｍＬ未満の生物学的活性および水溶性を有する化合物を指す。特定の実施形態において、難溶性の治療剤は、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、好ましくは５００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量を有する有機化合物である。特定の実施形態において、難溶性の治療剤は、化合物、例えば、ｐＨ７および２０℃で約０．５ｍｇ／ｍＬ未満、約０．３ｍｇ／ｍＬ未満、または約０．１ｍｇ／ｍＬ未満の水溶性を有する有機化合物である。

本明細書で用いられる場合、「治療的に有効な量」とは、無毒性であるが、オルソポックスウイルス感染または関連する状態の重症度を予防するかまたは寛解させる上で十分であるＳＴ−２４６の量を指す。

本明細書で用いられる場合、「パーセント」、「パーセンテージ」、または記号「％」とは、いずれか特定の構成要素に関して示される場合に、重量／重量（ｗ／ｗ）、重量／体積（ｗ／ｖ）、または体積／体積（ｖ／ｖ）で、組成物中に存在する担体の量に基づいた組成物中に示される構成要素の割合を意味し、これらは全て組成物中に存在する担体の量に基づいている。したがって、異なる種類の担体が、示されるように１００％までの量で存在してもよく、これはＡＰＩの存在を排除するものではなく、その量は％として、または組成物中に存在する特定のｍｇ数、またはは存在する特定のｍｇ／ｍＬ数として示されてもよく、この場合の％またはｍｇ／ｍＬは、組成物中に存在する全担体の量に基づいている。担体の１００％を構成するように特定の種類の担体が組み合わされて存在してもよい。

本明細書で用いられる「医薬的に許容される担体」という用語は、必要とされる投与量および濃度では無毒性であるかまたはレシピエントに対する治療上の利点を達成するために用量制限的ではない特定の毒性の性質を有し、製剤の他の成分との適合性を有する。

「医薬的に許容される賦形剤」という用語は、ビヒクル、アジュバントもしくは希釈剤、または他の補助物質、例えば、一般に容易に入手可能であり、用いられる投与量および濃度では無毒性であるかまたはレシピエントに対して許容可能な毒性を有し、製剤の他の成分との適合性を有する、当該技術分野における従来の補助物質を含む。例えば、医薬的に許容される補助物質は、ｐＨ調整剤および緩衝剤、浸透圧調整剤、安定化剤、保存剤、可溶化剤、湿潤剤等を含む。

シクロデキストリン
シクロデキストリンは、水溶性の糖オリゴマーである。多くの異なるシクロデキストリンが存在し、グルコピラノース単位の数によって互いに識別される。最も一般的なシクロデキストリンは、６つ、７つ、または８つのα−Ｄ−グルコース単位からなる。シクロデキストリンは、外側が親水性であり、内側が親油性である空洞を有する構造を形成する。グルコース単位の数が、空洞のサイズを決定する。親水性の外部がシクロデキストリンに水溶液中での可溶性を付与し、親油性の内部または空洞が、しばしば他の疎水性分子を引きつける環境を提供する。疎水性コア内に薬物を封鎖することによって、薬物は、シクロデキストリン分子によって可溶化され、水溶性の錯体を形成する。シクロデキストリンは、分子の全体を占めてもよいか、または空洞内でその一部を占めてもよい。得られた錯体の安定性は、薬物がシクロデキストリンの空洞にいかに良好に適合するかに依存する。

シクロデキストリンが、特定の薬物、例えば、ＳＴ−２４６等の可溶性を向上させるかどうかに関して、未だに高程度の予測不能性が存在する。ＳＴ−２４６の十分な可溶性を提供することが示され、安全かつ有効な様式で対象に送達され得る、シクロデキストリンを含む新規液体製剤が、予期せずに同定された。

本明細書に開示される組成物、製剤、および方法における使用に好適なシクロデキストリンは、通常、円錐様形状を有する環状オリゴ糖である。円錐の内部が疎水性の空洞として機能し、円錐の外部は親水性である。前者の特性は、シクロデキストリンが、空洞に「適合」する多様な親油性分子またはその一部との包接錯体を形成することを可能にし、後者の特性は水溶性を促進する。シクロデキストリン誘導体は、水溶性が高く、毒性が低いことから、非経口薬物担体としての使用のために広く研究されてきた（Ｆｒｏｍｍｉｎｇ＆Ｓｚｅｊｔｌｉ，Ｊ．（１９９４）。

化学修飾されたシクロデキストリン
本明細書に開示される組成物、製剤、および方法における使用に好適なシクロデキストリンは、好ましくは化学修飾されたシクロデキストリンである。化学修飾されたシクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γシクロデキストリン、またはδ−シクロデキストリンの誘導体を含み得る。化学修飾されたシクロデキストリンは、限定されないが、メチル‐β−シクロデキストリン、２−６−ジ−Ｏ−メチル−β−シクロデキストリン、ランダムにメチル化されたβ−シクロデキストリン、エチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、ジエチルアミノエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−βシクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン、およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンを含み得る。好ましくは、化学修飾されたシクロデキストリンは、２−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン、２，３−ジヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン、およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンである。より好ましくは、化学修飾されたシクロデキストリンは、２−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンまたはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンである、好ましくは、２−ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンの置換度は、４〜８である。

本明細書に開示されるような医薬製剤の調製は、好適な体積の水性担体媒体（例えば、注射用水）中に化学修飾されたシクロデキストリンを溶解し、酸素を除去し（例えば、窒素、不活性ガスを用いて、または真空下での凍結融解）、その後、本質的に全てのＳＴ−２４６が錯体を形成して溶液中に溶解するまで、活発な撹拌下、シクロデキストリン溶液にＳＴ−２４６を徐々に添加することを伴う。シクロデキストリン溶液の温度は、０℃〜８０℃であり得る。好ましくは、シクロデキストリン溶液の温度は、約２℃〜７０℃で維持される。

ＳＴ−２４６の添加後、脱酸素化した水性担体媒体を用いて溶液を最終体積とすることができる。次いで、濾過によっておよび／またはバイアルもしくはアンプルに無菌的に移すことによって、溶液を滅菌することができる。溶液は、高圧蒸気殺菌法または照射による滅菌のために直接アンプルに移すことができる。バイアルまたはアンプルは、窒素等の不活性ガス下で密封することができる。ＳＴ−２４６の化学修飾されたシクロデキストリンに対するモル比は、例えば約０．０３ｍｏｌ／ｍｏｌであり得る。好ましくは、ＳＴ−２４６の化学修飾されたシクロデキストリンに対するモル比は、約０．０１〜約１．０である。より好ましくは、ＳＴ−２４６の化学修飾されたシクロデキストリンに対するモル比は、約０．０３〜０．１５ｍｏｌ／ｍｏｌである。

医薬組成物
本発明の化合物、またはその医薬的に許容される多形、プロドラッグ、塩、溶媒和化合物、水和物、もしくは包接体を含む医薬組成物および単回単位剤形も、本発明に包含される。本発明の個々の剤形は、経口、粘膜（舌下、頬側、直腸内、または経鼻を含む）、非経口（皮下、筋肉内、ボーラス注射、動脈内、または静脈内を含む）、経皮、および局所投与に好適であり得る。

本発明の医薬組成物および剤形は、本発明の化合物、またはその医薬的に許容されるプロドラッグ、多形、塩、溶媒和化合物、もしくは水和物を含む。具体的には、米国特許出願第６１／３１６，７４７号（参照により本明細書に組み込まれる）に、ＳＴ−２４６が、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、Ｖ型、およびＶＩ型と命名された異なる結晶形態で存在することが以前に示されている。また、Ｉ型が、約７．６３、１０．０４、１１．４７、１４．７３、１５．２１、１５．４７、１６．０６、１６．６７、１６．９８、１８．９３、１９．９６、２０．５２、２０．７９、２２．８０、２５．１６、２６．５３、２７．２０、２７．６０、２９．６０、３０．２３、３０．４９、３０．６８、３１．１４、３３．６５、３４．３３、３５．２９、３５．５６、３６．３０、３７．３６、３８．４２、３８．６６度の２θ反射角で特性ピークを有するＸ線粉体回折パターンを示す、ＳＴ−２４６の一水和物結晶形態であることも発見されている。

また、ＩＩ型が、ＳＴ−２４６の無水結晶形態であることも示されている。ＩＩ型は、図１２に記載の特性を有するＸ線粉体回折パターンを示す。

ＩＩＩ型が、約６．７１、９．０５、１２．４９、１３．０３、１３．７９、１４．８７、１５．７２、１６．２６、１６．７４、１８．１０、１８．４３、１９．９４、２１．０４、２１．５１、２３．１５、２３．５１、２５．３２、２６．２４、２６．８７、２７．３２、２７．７２、２８．５５、２９．０８、２９．５０、２９．８４、３１．２７、３３．４８、３５．３６、３９．５６度の２θ反射角で特性ピークを有するＸ線粉体回折パターンを示す、ＳＴ−２４６の一水和物結晶形態であることがさらに示されている。

ＩＶ型が、ＳＴ−２４６の無水結晶形態であることがさらに示されている。ＩＶ型は、図１３に記載の特性を有するＸ線粉体回折パターンを示す。

さらに、Ｖ型が、ＳＴ−２４６の半水和物結晶形態であることが示されている。ＶＩ型は、図１４に記載の特性を有するＸ線粉体回折パターンを示す。

また、ＶＩ型が、ＳＴ−２４６の一水和物結晶形態であることも示されている。ＶＩ型は、図１５に記載の特性を有するＸ線粉体回折パターンを示す。

ＳＴ−２４６のＩ型は、ＳＴ−２４６の好ましい多形である。他の型が全てＩ型に変換されることから、熱力学的に最も安定した形態であると考えられる。

ＳＴ−２４６のＩ型は、安定しているため、周囲条件で保存することができる。Ｉ型は、製造および保存の種々の段階において薬物が経験し得るいくつかの環境およびプロセス条件下において、別の多形型に変換することが示されていない。検査した条件のうちのいくつかは、高温多湿での保管、室温多湿、低湿、最高６０℃、湿式造粒法および乾燥を用いたカプセル製造、製粉または微粒子化の間、懸濁液中、室温での長期保管を含む。さらに、Ｉ型は、非吸湿性であるため、たとえ９０％の相対湿度条件であっても水分を吸収しない。Ｉ型は、９９．０％を超える純度および０．１５％未満の任意の単一不純物を伴う商業的な結晶化プロセスによって確実に製造される。本発明の例は、ＳＴ−２４６のＩ型を用いた実験について説明する。しかしながら、ＳＴ−２４６のＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、およびＶ型も、同様に安定な液体ＳＴ−２４６製剤を得るために使用することができる。

経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、限定されないが、カプセルおよび液体（例えば、香味シロップ）等の個別の剤形として提示することができる。そのような剤形は、所定量の有効成分を含有し、当業者に周知である薬学の方法によって調製することができる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ Ｐａ．（１９９０）を一般的に参照のこと。

本発明の典型的な経口剤形は、従来の医薬品配合技術に従って、密接な混合物中で有効成分（複数可）を少なくとも１つの賦形剤と組み合わせることによって調製される。賦形剤は、投与に望ましい調製の形態に依存して多様な形態をとることができる。例えば、経口液体剤形またはエアロゾル剤形における使用に好適な賦形剤は、限定されないが、水、グリコール、油、アルコール、香味剤、保存剤、および着色剤を含む。経口投与のための液体調製物は、例えば、溶液、シロップ、もしくは懸濁液の形態をとることができるか、またはそれらは、使用前に水または他の好適なビヒクルで構築するための乾燥生成物として提示されてもよい。そのような液体調製物は、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体、または水素添加食用油脂）、乳化剤（例えば、レシチンまたはアカシア）、非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール、または分画植物油）、および保存剤（例えば、メチルもしくはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエート、またはソルビン酸）等の医薬的に許容される添加剤を用いて、従来の手段によって調製することができる。また、調製物は、必要に応じて、緩衝塩、香味剤、着色剤および甘味剤も含有し得る。

本発明の医薬組成物および剤形に使用され得る崩壊剤は、限定されないが、寒天、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルファ化デンプン、他のデンプン、白土、他のアルギン、他のセルロース、ガム、およびそれらの混合物を含む。

本発明の医薬組成物および剤形に使用され得る滑沢剤は、限定されないが、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱物油、軽鉱物油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、滑石、水素添加植物油（例えば、ピーナッツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリル酸エチル、寒天、ならびにそれらの混合物を含む。

非経口剤形は、限定されないが、皮下、静脈内（ボーラス注射を含む）、筋肉内、および動脈内を含む種々の経路によって患者に投与することができる。これらの投与は、典型的に、患者の異物に対する自然の防御を迂回するため、非経口剤形は、滅菌されているか、または患者への投与前に滅菌され得ることが好ましい。非経口剤形の例として、限定されないが、注射できる状態の溶液、注射用の医薬的に許容されるビヒクルに溶解または懸濁できる状態の乾燥生成物、注射できる状態の懸濁液、およびエマルションが挙げられる。

本発明の非経口剤形を提供するために使用され得る好適なビヒクルは、当業者に周知である。例として、限定されないが、注射用水（ＵＳＰ）；水性ビヒクル、例えば、限定されないが、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、ブドウ糖注射液、ブドウ糖および塩化ナトリウム注射液、ならびに乳酸化リンゲル注射液等；水混和性ビヒクル、例えば、限定されないが、エチルアルコール、ポリエチレングリコール、およびポリプロピレングリコール等；非水性ビヒクル、例えば、限定されないが、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、および安息香酸ベンジル等が挙げられる。

本明細書に開示される有効成分のうちの１つ以上の可溶性を増加させる化合物も、本発明の非経口剤形に組み込むことができる。

本発明の経皮的および局所剤形は、限定されないが、クリーム、ローション、軟膏、ゲル、溶液、エマルション、懸濁液、または当業者に既知である他の形態を含む。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄｓ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ Ｐａ．（１９９０）；およびＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ，４ｔｈ ｅｄ．，Ｌｅａ＆Ｆｅｂｉｇｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９８５）を参照のこと。経皮剤形は、皮膚に適用し、所望の量の有効成分の浸透を許容するための特定の期間装着することができる「リザーバー型」または「マトリックス型」のパッチを含む。

本発明に包含される経皮および局所剤形を提供するために使用され得る好適な賦形剤（例えば、担体および希釈剤）ならびに他の材料は、医薬品分野の当業者に周知であり、所与の医薬組成物または剤形が適用される特定の組織に依存する。このことを考慮して、典型的な賦形剤は、限定されないが、無毒性であり、医薬的に許容されるローション、チンキ剤、クリーム、エマルション、ゲル、または軟膏を形成するための水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱物油、およびそれらの混合物を含む。また、保湿剤または湿潤剤も、必要に応じて医薬組成物および剤形に添加することができる。そのような追加成分の例は当業者に周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄｓ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ Ｐａ．（１９９０）を参照のこと。

また、１つ以上の有効成分の送達を向上させるために、医薬組成物もしくは剤形のｐＨ、または医薬組成物もしくは剤形が適用される組織のｐＨも調整することができる。同様に、溶媒担体の極性、そのイオン強度、または浸透圧も、送達を向上させるために調整することができる。また、送達を向上させるために、１つ以上の有効成分の親水性または親油性を有利に変更するために、ステアリン酸塩等の化合物が医薬組成物または剤形に添加されてもよい。この点において、ステアリン酸塩は、乳化剤または界面活性剤として、また送達促進剤または浸透促進剤として、製剤のための脂質ビヒクルとしての役割を果たすことができる。得られた組成物の特性をさらに調整するために、有効成分の異なる塩、水和物、または溶媒和化合物が使用されてもよい。

静脈内投与、投与量、および持続時間
後に実施例４に示すように、オスおよびメスの未感染カニクイザルにおける静脈内注入後にＳＴ−２４６の体内動態を評価するための母集団ＰＫモデルを開発した。用量を共変数とする３区画モデルにより、静注用ＳＴ−２４６の非線形ＰＫ（より高い用量でクリアランスが減少される）を説明した。診断プロットおよび視覚的な予測確認により、観察されたデータが提唱されるモデルによって適度に十分に説明されたことが確認された。ヒトのＰＫパラメータを決定するために、サルのＰＫパラメータの非比例的スケーリングを行った。

経口ＳＴ−２４６で処置したヒト対象において観察された濃度‐時間プロファイルに基づいて、標的とする曝露量の範囲を演繹的に決定した。モンテカルロシミュレーションを行い、４００および６００ｍｇのＳＴ−２４６の反復経口投与後に健常な未感染のヒトにおいて以前に観察されたものと同様のＡＵＣ、Ｃ_ｍａｘ、およびＣ_ｍｉｎ値が得られるであろう静注用ＳＴ−２４６の候補用量レベルを決定した。多数の異なる可能な投与計画をシミュレートした。予測されたＡＵＣ値およびＣ_ｍａｘ値を、経口投与後に観察された値と最初に比較した。その後、Ｃ_ｍｉｎ値を比較した。概して、等価のＣ_ｍｉｎをもたらす投与計画は、等価のＡＵＣおよびＣ_ｍａｘをもたらす投与計画よりも高いＡＵＣ値のより長い注入時間が必要であった。

５時間にわたる１１５ｍｇＱＤまたは１時間にわたる６５ｍｇＢＩＤの反復静注により、４００ｍｇの経口投与後に観察されたものと非常に類似する安定した状態でＡＵＣ値およびＣ_ｍａｘ値がもたらされた。２時間にわたる８０ｍｇＢＩＤの反復静注により、１２および２４時間目に、健常な未感染のヒトにおける４００ｍｇＱＤ経口投与後に観察されたものと類似するＣ_ｍｉｎ値が得られた。同様に、４時間にわたる１４５ｍｇＱＤまたは１時間にわたる９５ｍｇＢＩＤの反復静注により、６００ｍｇの経口投与後に観察されたものと非常に類似する安定した状態でＡＵＣ値およびＣ_ｍａｘ値がもたらされた。最後に、１時間にわたる８５ｍｇＢＩＤの反復静注により、１２および２４時間目に、健常な未感染のヒトにおける６００ｍｇＱＤの経口投与後に観察されたものと類似するＣ_ｍｉｎ値が得られた。

このように、本発明の一実施形態において、本発明の液体医薬製剤は静脈内に投与することができる。好ましくは約５０〜約５００ｍｇ、より好ましくは約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、最も好ましくは約３００ｍｇのＳＴ−２４６が、１回の静脈内投与セッションで注入される。別の実施形態において、治療は、約７〜約３０日、好ましくは約７〜約１５日の範囲の期間実施される。さらに別の実施形態において、静脈内投与の各セッションの持続時間は、約２〜約２４時間である。さらなる実施形態において、治療は、１日当たり約５０〜約５００ｍｇのＳＴ−２４６の投与量で治療期間にわたって継続的に実施される。代替として、治療は、１日当たり２セッションの間に実施されてもよく、その場合の各セッションの持続時間は、約２〜約１２時間である。

実施例１−種々の賦形剤中におけるＳＴ−２４６の可溶性試験−水、油性ヒビクル、界面活性剤、および共溶媒中での可溶性
抗天然痘小分子であり、種々の投与経路により投与されることが企図されるＳＴ−２４６は、水中および２〜１１の範囲の医薬的に許容されるｐＨ緩衝液中で難溶性である。注射用製剤として好ましい製剤は、医薬的に許容される添加剤を用いて調製される液体製剤である。液体製剤を得るために、薬物の可溶性は、治療的に有効な量の薬物が安全に送達され得るようでなければならない。さらに、製剤は、生理食塩水等の一般的に使用される静注用希釈液中での希釈、および注射時の血液中での希釈に耐え得るべきである。ＳＴ−２４６は不溶性薬物であるため、安全かつ有効な静注用溶液製剤を開発する上での障害となる。

ＳＴ−２４６の十分な可溶性を提供し、安全かつ有効な様式で対象に送達され得る組成物が、予期せずに同定された。

これらの実験では、ＳＴ−２４６の可溶化のための種々の共溶媒および界面活性剤を調べた。これらの実験にはＳＴ−２４６多形Ｉ型を用いた。共溶媒の溶液は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）４００、プロピレングリコール、エタノールを含み、界面活性剤の溶液は、ポリオキシエチレン化ヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬおよびＲＨ４０）、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）シリーズの界面活性剤）およびＳｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ、ポリオキシエチレン脂肪アルコールおよびポリグリコール化グリセリド、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）を含んでいた。さらに、ゴマ油、ダイズ油、およびトウモロコシ油を含むいくつかの油中でのＳＴ−２４６の可溶性を調べた。可溶化実験の結果を表１に示して以下に要約する。

表１に示すように、ＰＥＧ４００がＳＴ−２４６の最大の可溶化を示し、その後にＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）、エタノール、プロピレングリコール、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ−４０が続いた：これらは全て、潜在的な静注用製剤の候補として同定された。こうして、可溶性データに基づいて、ＰＥＧ４００およびエタノールを共溶媒の組み合わせ分析のために選択した。油中でのＳＴ−２４６の絶対可溶性は５ｍｇ／ｍｌ未満であったため、考えられる静注用製剤の候補としてそれらを除外した。

これらの実験の結果に基づいて、選択された賦形剤を様々な濃度で含有する多数の製剤を作製した。つまり、本発明の製剤を静注用希釈液、５％ブドウ糖、および０．０５ｍＭ、ｐＨ７．５のリン酸緩衝液で希釈し、少なくとも１２時間、確実に希釈に耐えるようにした。得られた結果から、検査した組み合わせの全てが長期の静脈内注入に準最適であることが確立された。たとえＳＴ−２４６の量を１０ｍｇ／ｍＬから５ｍｇ／ｍＬに減少した場合でも、溶液安定性は２時間未満だけ延長され、共溶媒および界面活性剤がＳＴ−２４６に好適な静注用製剤を生じる可能性は低いことが示唆された。これらの結果は表２に見ることができる。

実施例２−水中の種々の濃度の共溶媒／界面活性剤中のＳＴ−２４６組成物
実施例１に記載した希釈されていない製剤から得られた可溶性データに基づいて、種々の濃度に希釈した選択された賦形剤を用いてＳＴ−２４６のさらなる製剤試験を行った。これらの結果を表３に要約する。これらの実験で分析した賦形剤は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ−４０、エタノールおよびＰＥＧ ４００を含んでいた。２４時間および４８時間後のＨＰＬＣ分析により濃度を決定した。

さらに、調べた追加の賦形剤は、２種類のシクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤおよびＳＢＥＣＤ）、異なる分子量の２種類のペグ化リン脂質（すなわち、ＰＥＧ−リン脂質−２０００およびＰＥＧリン脂質−５０００）、ならびに界面活性剤Ｔｗｅｅｎ８０およびＳｏｌｕｔｏｌ ＨＳ、溶媒プロピレングリコールおよびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）を含んでいた。これらの賦形剤の水溶液を水中で０．５〜１０％ｗ／ｖの濃度範囲で調製し、これらの溶液中でのＳＴ−２４６の可溶性を２４時間および４８時間後のＨＰＬＣ分析により決定した。これらの実験の結果を表４ならびに図１、２、および３に要約する。

さらに、水中の種々のビヒクル中でのＳＴ−２４６の可溶性から得られたデータを、各賦形剤の可溶化効率を分析するために用いた。下の表５は、水中の賦形剤の％ｗ／ｖに対してプロットしたＳＴ−２４６の濃度の傾向線の傾きによって測定した可溶化効率の概要である：傾きが大きいほど可溶化効率が高い。賦形剤を用いた場合の可溶化効率の大きさによって賦形剤を順番にランク付けした：水溶液中で最も高いＳＴ−２４６可溶化効率を１番にランク付けした。カラム５は、純粋な（希釈されていない１００％の）賦形剤のｍｇ／ｍｌで決定したＳＴ−２４６の可溶性を表す。

表５のカラム４および５の比較により、ＳＴ−２４６が最も高い可溶性を有する賦形剤（カラム５）は、水で希釈したその賦形剤のＳＴ−２４６の可溶性（カラム４）と必ずしも対応していないことが明らかになった。可溶化実験から得られたデータは、２つのシクロデキストリンによって最も高い可溶化効率が示されたことを示した：ＨＰ−β−ＣＤが最も効率がよく、その後にＳＢＥＣＤが続いた。検査した全ての界面活性剤の中で、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬおよびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ−４０が最大可溶化能力を呈し、その後にポリソルベート ８０が続いた。２つのＰＥＧリン脂質の間では、ＰＥＧリン脂質−２０００がＰＥＧリン脂質−５０００よりも優れた可溶化剤であった。

実施例３−錯体形成剤によるＳＴ−２４６の可溶性
さらなる実験により、シクロデキストリン中でのＳＴ−２４６の可溶性について調べた。シクロデキストリンは、極性で親水性の外側と、無極性で疎水性の空洞とを有するトーラス形状のリングを含む。図４は、一種のシクロデキストリンであるヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）を示しており、表６は、シクロデキストリンの特徴の概要を提供する。

さらに、表７は、種々の等級のシクロデキストリンの水溶液（２０〜４０％の範囲の濃度）中でのＳＴ−２４６の可溶性を要約したものである。表７に示すように、シクロデキストリンによって可溶化されたＳＴ−２４６の範囲は、３７℃で１．５〜１１ｍｇ／ｍｌであり、ＨＰ−β−ＣＤがスルホブチルエーテル由来のシクロデキストリン（ＳＢＥＣＤ）より優れていた。錯体形成実験から得られたデータは、ＨＰ−β−ＣＤが静注用製剤のための潜在的な候補であることを支持した。

さらに、図５は、ＳＴ−２４６の可溶性をシクロデキストリンの濃度の関数として要約したものである。図５に示すように、ＨＰ−β−ＣＤの濃度を増加するとＳＴ−２４６の可溶性が増加する。さらに、ＨＰ−β−ＣＤは、ＳＢＥＣＤと比較してより高いＳＴ−２４６の可溶性を提供した。したがって、可溶化実験から得られたデータは、ＳＢＥＣＤおよびＨＰ−β−ＣＤの両方によってＳＴ−２４６の最も高い可溶化効率が達成されたが、ＳＴ−２４６の可溶化効率の観点から、ＨＰ−β−ＣＤがＳＢＥＣＤよりも優れていたことを示した。

室温で様々な濃度のＨＰ−β−ＣＤ中でのＳＴ−２４６の可溶性を決定するために、さらなる実験を行った。これらの実験では、回転撹拌機上でバイアルの内容物を混合しながら、２５℃の一定温度でバイアルの内容物を溶解平衡に到達させた。さらに、７２時間の混合後、バイアルの内容物を濾過し、ＲＰ−ＨＰＬＣを用いて、ＳＴ−２４６の濃度について得られた濾液を分析した。この試験に用いたＨＰ−β−ＣＤの濃度を表９に列挙する。さらに、ＨＰＬＣ分析後にＨＰ−β−ＣＤの濃度を変化させたことによるＳＴ−２４６の可溶性も表９に列挙する。

次の一連の実験は、４０％ｗ／ｖのＨＰ−β−ＣＤ組成物中でのＳＴ−２４６の可溶性を温度の関数として決定するために行った。これらの実験により、温度の上昇とともに組成物中のＳＴ−２４６の濃度が増加したことが分かった。図７に要約されるように、７０℃、濃度４０％ｗ／ｖのＨＰ−β−ＣＤで最大可溶性２１．２３ｍｇ／ｍＬが得られた。

次の一連の実験により、共溶媒／界面活性剤の存在下におけるＨＰ−β−ＣＤ組成物中でのＳＴ−２４６の可溶性を調べた。これらの実験の結果を表１０および図８に要約する。実験の結果から明白であるように、共溶媒／界面活性剤の存在は、希釈時にＨＰ−β−ＣＤ中の薬物の溶液特性を向上させることが可能であり、また、ＨＰ−β−ＣＤ中にはるかに迅速に薬物を溶解させる上でも役立つ。

表１０に示す可溶性データから、共溶媒（ＰＥＧ４００）または非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ８０）の存在は、ＨＰ−β−ＣＤ中でのＳＴ−２４６の可溶性を向上させないことが示唆されるため、三元錯体形成を評価するためのさらなる実験は行わなかった。

ＨＰＢＣＤ組成物中でのＳＴ−２４６の最大可溶性のためのｐＨ範囲を同定するために、さらなる一連の実験を実施した。これらの実験のために、４．０〜１０．５のｐＨを有する、４０％ＨＰＢＣＤ中の種々のＳＴ−２４６組成物を調整した。組成物は、２５℃および２℃〜８℃で調製した。下の表は、試験を行った組成物および４．０〜１０．５のｐＨ範囲で評価した緩衝液から構成される。これらの実験の結果を表１１に要約する。

これらの実験では、５ｍＬのｐＨ緩衝化ＨＰ−β−ＣＤ溶液を収容するバイアルに過剰なＳＴ−２４６を添加した。試料バイアルを７２時間を超えて、２〜８℃および２５℃で回転撹拌した。０．２ｕｍのＰＶＤＦ膜フィルタを用いて試料を濾過し、濾液を適切に希釈し、ＲＰ−ＨＰＬＣを用いてＳＴ−２４６含有量について分析した。さらに、可溶性試験の開始前および後に試料のｐＨをモニタリングした。ｐＨ測定値は、試料が平衡に達する前と後で有意な変化が見られなかったことを示した。４０％ＨＰＢＣＤ組成物中で達成されたＳＴ−２４６の可溶性を様々なｐＨの関数として図９に示す。

図９に示すように、２℃〜８℃および２５℃の両方でｐＨが４．０から１０．５に増加すると、可溶性の増加が観察された。次の一連の実験では、バッチサイズがＳＴ−２４６のＨＰ−β−ＣＤとの錯体形成に与える影響を理解するために、注射用ＳＴ−２４６のスケールアップ試験を開始した。これらの実験のために、非経口グレードのＨＰ−β−ＣＤを用いて製剤を調製した。これらの試験からの試料を、冷却保存温度（２℃〜８℃）、制御下の室温（２５℃）、および加温温度（４０℃）で安定に配置した。一定の間隔で試料を除去し、何らかの物理的変化（沈殿、色の変化等）があるか観察し、ＨＰＬＣを用いて純度を評価して、ＳＴ−２４６のあらゆる分解を検出した。

液体投与のためにＳＴ−２４６のＩ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、Ｖ型、およびＶＩ型を配合した。好適な剤形は、約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６および約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のＨＰＢＣＤを含む。任意で、製剤は、液体製剤の全体積が約１００ｍｌになるように、マンニトール、トレハロース二水和物、ラクトース一水和物、および精製水をさらに含む。これらの製剤は、ＨＣＬ／ＮａＯＨ、クエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液、および限定されないが、酢酸塩、酒石酸塩、グリシン、グルクロン酸を含む他の緩衝液を用いてｐＨを２．５〜６．０に調整し維持することができる。上記液体製剤を表１２〜１６に要約する。

ＳＴ−２４６のＩ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型、Ｖ型、およびＶＩ型を含むさらなる液体製剤を表１７〜２１に要約する。好適な剤形は、約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６および約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のＨＰＢＣＤを含む。任意で、製剤は、ポリエチレングリコール４００、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール３００、および精製水を１００ｍｌまで含む。これらの製剤は、ＨＣＬ／ＮａＯＨ、クエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液、および限定されないが、酢酸塩、酒石酸塩、グリシン、グルクロン酸を含む他の緩衝液を用いてｐＨを２．５〜６．０に調整し維持することができる。

さらに、種々の製剤におけるＳＴ−２４６およびＨＰＢＣＤの範囲を表２２に要約する。

さらに、これらの実験では、ＳＴ−２４６のプロトタイプ製剤と、一般的に使用される注入液である０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌとの適合性を評価した。４０％（ｗ／ｖ）ＨＰ−β−ＣＤを用いて、種々の濃度のＳＴ−２４６の製剤を５つ調製した。０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌを用いて１：１、１：２、１：５、および１：１０の比率で製剤を希釈した。希釈した溶液を室温および５℃で保存し、一定の時間間隔で目視、顕微鏡によって、およびＵＳＰガイドラインに従って、それらの物理的な安定性をモニタリングした。これらの実験の結果を表２３に要約する。

５〜２０ｍｇ／ｍＬのＳＴ−２４６の静注用製剤は、室温および冷蔵条件で保存した場合に、少なくとも４８時間の間、１：２の希釈度（臨床設定において予想される希釈度）で０．９％ＮａＣｌと適合性があることが分かった。

得られた結果は、５〜２０ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度のＳＴ−２４６を含有する１：１および１：２に希釈された溶液を室温および冷蔵条件で保存した場合、少なくとも４８時間の間０．９％ＮａＣｌと適合性があることを示した。

マウス、ウサギ、およびヒト以外の霊長類（ＮＨＰ）におけるＳＴ−２４６静注用製剤の薬物動態
ＨＰＢＣＤを含むＳＴ−２４６製剤の静脈内（ＩＶ）投与を、マウス、ウサギ、およびＮＨＰにおいて評価した。得られた薬物動態パラメータを経口投与後に得られたパラメータと比較した。これらの試験の結果は、静注用ＳＴ−２４６製剤がそれを必要とする対象に投与されたときに、経口ＳＴ−２４６製剤と比較して同様の薬物動態パラメータを示すことを示唆するものであった。さらに、ＨＰ−β−ＣＤを含有するＳＴ−２４６製剤は安全であると考えられ、薬物動態パラメータは許容されるものであった。

マウスにおける薬物動態（ＰＫ）プロファイル：マウスを用いた３つの予備試験（ＡＳＭ２４６、ＡＳＭ２５０、およびＡＳＭ２５７）は、ＳＴ−２４６静注用製剤の短時間の注入により、ＳＴ−２４６の経口投与後に得られたものと同様の曝露量が得られたが、はるかに少ない用量であったことを明確に示した。具体的には、メスのＣＤ−１マウスにおいて４つの用量（３、１０、３０、および７５ｍｇ／ｋｇ）で１０分間のＳＴ−２４６の注入を評価し、これらの注入の終了時に血漿中濃度を測定した。さらに、これらの濃度は、予想されたようにピーク血漿中濃度であり、７５ｍｇ／ｋｇの１０分間の注入が終了した時点での平均血漿中濃度は、２３８，３３３ｎｇ／ｍＬであった。表２４は、ＳＴ−２４６静注用製剤のＣ_ｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）血漿中濃度およびＡＵＣ_０−２４（時^＊ｎｇ／ｍＬ）、ならびに極めて重要な経口製剤のパラメータを要約したものである。

結果は、ＨＰ−β−ＣＤの配合を含むＳＴ−２４６組成物が、安全かつ有効であり、ＳＴ−２４６の経口投与後に得られたプロファイルを密接に模倣する血漿中濃度時間プロファイルを提供することを明確に示した。

ウサギにおけるＰＫプロファイル：ＨＰ−β−ＣＤを含む静注用ＳＴ−２４６製剤をウサギに投与した。さらに、オス２羽およびメス２羽の未処置ニュージーランド白ウサギの耳翼辺縁静脈を介して、３、３０、および６０ｍｇ／ｋｇの用量でＳＴ−２４６を５分間の緩徐な静脈内プッシュにより注射した後、忍容性および薬物動態パラメータを評価した。

表２５に示すように、３ｍｇ／ｋｇで１５分間の注入を用いたピーク血漿中濃度は、オスおよびメスのウサギでそれぞれ７２２５ｎｇ／ｍＬおよび４３４５ｎｇ／ｍＬであった。概して、観察されたＣ_ｍａｘ血漿中濃度およびＡＵＣ値は、経口投与の場合により高く、血漿排出半減期はより長かった。経口および静脈内投与後のウサギにおける薬物動態パラメータの要約を表２５に示す。

カニクイザルにおけるＰＫプロファイル：試験デザインは、オス２匹およびメス２匹のサルの３つの群を含んでいた。これらの実験では、植え込み型の血管アクセスポート（ＶＡＰ）を介して、４時間の静脈内注入期間にわたって１、３、および１０ｍｇ／ｋｇでＳＴ−２４６を投与した。これらの実験では、注入液中のＨＰ−β−ＣＤの濃度は１３．３％ｗ／ｖであった。投与前、注入開始の０．５、１、および２時間後、ならびに注入終了時（ＥＯＩ）（４．０時間±１０分）、ＥＯＩから０．２５時間後、０．５時間後、および１時間後、そして注入開始の６時間後、８時間後、１２時間後、１６時間後、２０時間後、２４時間後、および４８時間後に血漿試料を回収し、最終排出半減期を正確に決定した。

カニクイザルにおける１、３、および１０ｍｇ／Ｋｇ、ならびに経口製剤における３、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇでの経時的な薬物動態パラメータ（Ｃ_ｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）血漿中濃度およびＡＵＣ_０−２４（時^＊ｎｇ／ｍＬ））を表２６に示す。

ＳＴ−２４６の４時間の静脈内注入は用量比例的であり、血漿中濃度時間曲線は二相性を示すと考えられ、最終排出半減期は１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で６．６時間〜８．６時間の範囲であった。見かけの分布容積（ＶｚおよびＶｓｓ）の値は、用量範囲にわたって有意に変化せず、またクリアランスも同様であり、用量範囲にわたって約０．５Ｌ／時間／ｋｇに留まった。

さらに、図１１に示すように、静注用ＳＴ−２４６および経口製剤は、同程度の薬物動態プロファイルを示す。その上、これらの結果は、ＳＴ−２４６投与の静脈内経路が、潜在的な治療的用量範囲にわたって安定したかつ予測される薬物動態を提供し得ることを示唆するものである。

実施例４−マウス、ウサギ、およびサルにおける静脈内注入または経口投与後のＳＴ−２４６（登録商標）の安全性および薬物動態の比較
水溶液中にヒドロキシプロピルβシクロデキストリンを含有するＳＴ−２４６の静脈内投与のための液体製剤が開発された。最適な投与ストラテジーを決定するために、マウス、ウサギ、およびＮＨＰにおいて、この製剤の忍容性および薬物動態を評価した。その結果を経口投与後に観察された薬物動態と比較した。

試験デザインおよび動物生体内試験
経口試験
ＢＡＬＢ／ｃマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）、ニュージーランド白（ＮＺＷ）ウサギ（Ｈａｒｌａｎ）、およびカニクイザル（ＮＨＰ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）に、１％のＴｗｅｅｎ８０を含むメチルセルロース懸濁製剤として、経口経管栄養によりＳＴ−２４６を投与した。ＮＨＰには、バイオアベイラビリティを増加させるために、摂食直後にＳＴ−２４６を投与した（６）。メスのＢＡＬＢ／ｃマウスには、３０、１００、３００、および１０００ｍｇ／ｋｇの用量で経口経管栄養により懸濁製剤を投与した。以下の各時点で３匹のマウスから血液試料を採取することによってＳＴ−２４６の濃度を測定した：投与後０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、および２４時間。オス３羽およびメス３羽のＮＺＷウサギには、ＳＴ−２４６を１００ｍｇ／ｋｇの用量で懸濁製剤として経口的に投与した。ＳＴ−２４６の濃度を決定するために、以下の時点で血液を採取した：投与後０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、８時間、１２時間、および２４時間。用量群当たり３匹のオスおよび３匹のメスのＮＨＰに、摂食状態で以下の経口用量のＳＴ−２４６を投与した：０．３、３、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇ。ＳＴ−２４６の濃度を測定するために、投与前、ならびに投与後０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、および２４時間に血液試料を採取した。

静注試験
静脈内注入によって投与したＳＴ−２４６の溶液製剤の薬物動態および忍容性を３つの動物種において評価した：メスのＢＡＬＢ／ｃ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）およびＣＤ−１マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）、ＮＺＷウサギ（Ｈａｒｌａｎ）、ならびにカニクイザル（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）。

カテーテルを挿入した少数のメスのＢＡＬＢ／ｃマウスに、ＳＴ−２４６の溶液製剤の緩徐なプッシュ（５分）による静脈内注射を３、３０、および１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。１０および３０ｍｇ／ｋｇの用量の場合、静脈内投与の５分後、１５分後、３０分後ならびに１時間後、２時間後、４時間後、８時間後、および２４時間後に血液試料を採取したが、１００ｍｇ／ｋｇの用量の場合には、投与の２および４時間後のみに採取した。カテーテルの開存性の問題のために、時点当たりのマウスの数が最高２匹までに限定された。カテーテルを挿入した未処置のメスのＣＤ−１マウスに、外科的に植え込まれた頸静脈カニューレを介して、３、１０、３０、および７５ｍｇ／ｋｇの用量でＳＴ−２４６の１０分間の静脈内注入を行った。投与後５分、１０分（注入終了）、２０分、３０分、および１時間、２時間、４時間、８時間、２４時間に血液試料を採取した。各時点の血液試料を３匹の動物から最終血液として採取した。

ウサギには、耳翼辺縁静脈を介して、５分間の期間にわたって３、３０、および６０ｍｇ／ｋｇの用量で、また１５分間の期間にわたって３ｍｇ／ｋｇでＳＴ−２４６を注入し、その後、完全な血漿中濃度時間曲線を作成するために複数時点で血液試料の採取を行った。各用量群に２羽のオスウサギおよび２羽のメスウサギを用いた。５分間の緩徐なプッシュによる静脈内注射では、投与後１０分（注射終了から５分後）、２０分、および３０分、１時間、２時間、４時間、８時間、および２４時間に血液試料を採取した。１５分の静脈内注入の血液試料は、注入終了時（１５分）、注入開始の２５分、および４５分、ならびに１時間、２時間、４時間、８時間、および２４時間後に採取した。

皮下ポートへと送られる大腿静脈内カテーテルの外科的な植え込みにより、ヒト以外の霊長類（ＮＨＰ）をＳＴ−２４６の投与のために調製した。２匹のオスおよび２匹のメスのＮＨＰからなる群に、４時間にわたって１ｍｇ、３ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、および３０ｍｇ／ｋｇの用量を注入した。２つの追加の群には、６時間にわたって２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量を投与した。４時間の静脈内注入群の場合、以下の時点でＳＴ−２４６の分析のために血液を採取した：注入開始の０．５時間後、１時間後、２時間後、４時間後（注入終了）、４．２５時間後、４．５時間後、５時間後、６時間後、８時間後、１２時間後、１６時間後、２０時間後、２４時間後、および４８時間後。６時間の静脈内注入の場合、以下の時点で試料を採取した：投与開始の１時間後、２時間後、４時間後、６時間後（注入終了）、６．２５時間後、６．５時間後、８時間後、１０時間後、１２時間後、１６時間後、２０時間後、２４時間後、および４８時間後。血漿中濃度時間曲線の完全な特徴付けを可能にし、薬物動態パラメータを推定するために、複数時点で血液試料を採取した。１０日間の休薬期間後に行った第2の試験では、４匹のオスおよび４匹のメスの２つの群を用いた。第２相において、１２時間の間を空けて開始した２回の４時間の注入期間にわたる１０および１５ｍｇ／ｋｇの用量の１日２回（ＢＩＤ）の投与計画の過程にわたって薬物動態パラメータを特徴付けた。１日の用量の合計は２０および３０ｍｇ／ｋｇであり、４時間および６時間の両方の静脈内注入の間に評価された２つの最高用量と等しかった。ＢＩＤ試験では、ＳＴ−２４６の濃度を決定するために以下の時点で血液を採取した。：最初の用量の注入開始の０．５時間後、２時間後、４時間後（最初の注入終了）、４．５時間後、６時間後、８時間後、１２時間後、１２．５時間後、１４時間後、１６時間後（第２の注入終了）、１６．５時間後、１８時間後、２０時間後、２４時間後、３２時間後、３６時間後、および６０時間後。

忍容性および毒物学的評価

これらの全ての試験を通して、外観、挙動、死亡率、および瀕死についてケージサイド観察を行った。ＮＨＰにおける試験の間中、バイタルサイン測定、理学的検査、および神経学的検査等の有害事象（ＡＥ）に関する前臨床評価を査定した。

生物分析法
液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析法（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いて、マウス、ウサギ、およびＮＨＰの血漿中のＳＴ−２４６濃度を測定した。較正曲線のためのブランク血漿および精度管理用試料は、Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹ）から購入した。これらの試験の間に、２つの異なる抽出方法を用いた。ＦＤＡの生物分析バリデーションガイドラインに従って両方の方法を検証した（７）。１つの方法において、血漿からのＳＴ−２４６の抽出は、１部（５０μＬ）の血漿試料に対して、同位体内部標準を含有する９部のメタノール（４５０μＬ）を添加することによる単純なタンパク質沈殿によって実施される。高速遠心分離の後、１００μＬの上清を２００μＬの補償溶液（０．０５％水酸化アンモニウム中の０．０５％酢酸：メタノール；３６：５５、ｖ／ｖ）に添加し、ＬＣ−ＭＳに直接注射した。

第２の抽出方法は、液液抽出（ＬＬＥ）であった。内部標準を含有するメタノールで血漿試料を１：１に希釈し、３体積分の水を添加した。これらの混合物をボルテックスし、全体積を抽出プレート（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＬＥ、２００ｍｇ）上に移した。試料を負荷するために最小限の真空を印加し、次いで５分間放置した。全てのウェル（５００μＬ／ｗｅｌｌ）にメチル‐ｔ‐ブチルエーテルを添加し、最小限の真空で溶出した。溶媒を窒素下（５０℃および３０〜４０Ｌ／分に設定）で蒸発乾固させた。その後、プレートを緩やかにボルテックスすることにより試料を再構築した（メタノール／水中の０．０５％酢酸および０．０５％水酸化アンモニウム；６５：３５、ｖ／ｖ）。

移動相に４００μＬ／分の流速でＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ中の０．０５％水酸化アンモニウムおよび０．０５％酢酸（６５：３５、ｖ／ｖ）を用いて、ＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄカラムを含むフェニル−ヘキシルカラム（５０ｘ２．０ｍｍ、５μｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）を使用して、クロマトグラフィーによる分離を行った。陰イオンモードで、ＳＴ−２４６のｍ／ｚ推移３７５．０／２８３．２、内部標準のｍ／ｚ３４１．１／２４８．８をモニタリングするために、３２００（または４０００）Ｑｔｒａｐ（ＡＢ Ｓｃｉｅｘ）質量分析計を多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードに合わせた。ＭＳ／ＭＳの反応には、５．００〜２０００ｎｇ／ｍＬの範囲の濃度にわたって（１／ｘ^２）の線形重み付けを行った。本方法の正確性および精度は、定量下限（５．０ｎｇ／ｍＬ）で±２０％、他の濃度で±１５％と許容範囲内であった。

薬物動態分析
最初に非区画分析を用いて、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ Ｐｈｏｅｎｉｘ６．１版（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ）ソフトウェアで薬物動態パラメータを分析し、いくつかの試験のために後に区画分析を行った。以下のパラメータを予測した：最終排出半減期（ｔ_１／２）、曲線下面積（ＡＵＣ_ｌａｓｔ）、無限時間まで外挿された曲線下面積（ＡＵＣ_{０−ｉｎｆ}）、クリアランス（ＣＬ）、および定常状態の分布容積（Ｖ_ｓｓ）。ピーク血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）およびピーク血漿中濃度到達時間（Ｔ_ｍａｘ）は、実験値からグラフを作成して決定した。

統計分析
用量直線性および用量比例性を評価するために、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）回帰モデルに基づくＪＭＰ８．０プログラム（ＳＡＳ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いてＣ_ｍａｘおよびＡＵＣ_{０−ｉｎｆ}の未変換の用量正規化データを分析した。スチューデントｔ検定を用いて同じ用量群内の性差を評価した。値ｐ＜０．０５を統計的に有意であると見なした。

マウス試験
ＢＡＬＢ／ｃマウスにおけるＳＴ−２４６の予備的な静脈内ボーラス注射は、最高用量である３４ｍｇ／ｋｇで、いくらかの用量関連毒性および死亡率をもたらした。より緩徐な（５分間のプッシュ）静脈内注射は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で、いくらかの呼吸困難および嗜眠の臨床症状をもたらしたが、３ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇの両方では良好な忍容性を示した。これらの観察から、毒性はピーク血漿中濃度と関連しており、より緩徐な注入によって、より高い用量の安全な投与が可能になることが示唆された。ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて相当数のカテーテルが開存性を維持することができなかったため、マウスへの投与の持続時間をさらに増加させるためには、ＢＡＬＢ／ｃから若干大きめのＣＤ−１系統にマウスの系統を変更する必要があった。試験により、マウスの系統におけるこの変更が、曝露量または薬物動態に有意な変更をもたらさなかったことが確認された後（データは示さず）、カテーテルを挿入したメスのＣＤ−１マウスに３、１０、３０、および７５ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間の静脈内注入を投与した。最高用量である７５ｍｇ／ｋｇを投与したマウスには、注入終了後に不安定歩行が見られたが、それらは２〜３時間以内に回復した。他の全ての用量は、１０分間の静脈内注入として投与された場合に良好な忍容性を示した。臨床症状と注入終了の相関から、高いＣ_ｍａｘ濃度が、より高い用量での静脈内投与後にマウスに認められた臨床症状の原因であることが示唆されたが、証明はされなかった。

結果（表２７および図１６）は、１０分間にわたる静脈内注入が、ＳＴ−２４６の非常に高いＣ_ｍａｘ血漿中濃度をもたらしたことを示している。メスのＣＤ−１マウスにおける７５ｍｇ／ｋｇの１０分間の静脈内注入後の平均Ｃ_ｍａｘ濃度は２３８μｇ／ｍＬであり、メスのＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて、１３倍高い用量である１０００ｍｇ／ｋｇの単回経口投与の後に観察されたＣ_ｍａｘよりも３．６倍高かった。これらの短時間の静脈内注入後の最大血漿中濃度は、はるかに高い経口用量の投与後よりもはるかに高かったが（表２７）、２つの同じ用量群の曝露量（ＡＵＣ_{０−２４時}）はわずか１．５倍高いだけであった。３０ｍｇ／ｋｇの経口用量での曝露量と同じ用量の１０分間の静脈内注入との比較により、その用量では、ＳＴ−２４６が約４１％のバイオアベイラビリティを有することが示された。経口投与後の用量正規化した曝露量は、用量の増加とともに減少したが、静脈内投与後に同じ傾向は観察されなかった。

静脈内注入および経口投与の排出半減期は類似していた：静脈内注入投与の排出半減期は２．５〜４．５時間の範囲、経口投与の排出半減期は２．２〜４．５時間の範囲であった。これらの値は、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける経口的な非臨床安全性・毒物動態試験を通して一貫して観察された値に非常に近かった。３〜７５ｍｇ／ｋｇの用量範囲にわたる静脈内注入後のクリアランスは比較的一定であったが、経口投与後の見かけのクリアランスは、約３０倍の用量範囲にわたって約１０倍増加した。図１は、マウスにおけるたとえ短時間の静脈内注入であっても、より高い最大血漿中濃度にもかかわらず、経時的に経口投与後に観察されたものと同様の血漿曝露量が提供されたことを明確に示している。

ウサギ試験
ＮＺＷウサギにおいて、ＳＴ−２４６の静脈内投与の忍容性および薬物動態を経口投与の忍容性および薬物動態と比較した。予備試験では、１ｍｇ／ｋｇの静脈内ボーラス投与が良好な忍容性を示すことが示されたが、静注試験は、最高用量の急速な静脈内投与後に、マウスが潜在的な忍容性の欠如を示したという結果をもたらした。したがって、ＮＺＷウサギの耳翼辺縁静脈を介して、３、３０、および６０ｍｇ／ｋｇの用量で、５分間の緩徐なプッシュによる静脈内注射としてＳＴ−２４６を投与した。３および３０ｍｇ／ｋｇの用量が良好な忍容性を示したのに対して、６０ｍｇ／ｋｇの用量を投与したウサギは、注射の直後に嗜眠、呼吸困難、および昏睡を呈した。これらの動物は、注射後３０〜６０分で完全に回復したようであった。また、３ｍｇ／ｋｇ用量のより緩徐な（１５分）注入も、良好な忍容性を示した。

３ｍｇ／ｋｇの１５分間の静脈内注入は、１００ｍｇ／ｋｇの経口投与後に観察された２．８６μｇ／ｍＬよりもわずか２倍高いだけの５．７９μｇ／ｍＬの平均Ｃ_ｍａｘ濃度をもたらした（表２）。しかしながら、３ｍｇ／ｋｇの静脈内投与のＡＵＣ_０−２４値がわずか２．３８時間^＊μｇ／ｍＬであったのに対し、１００ｍｇ／ｋｇの経口投与のＡＵＣ_０−２４値は１９．８時間^＊μｇ／ｍＬであり、３３倍高い用量での曝露量よりわずかに８．３倍高いだけであった。ウサギにおける臨床症状は、平均Ｃ_ｍａｘ血漿ＳＴ−２４６濃度が９４．１μｇ／ｍＬであった６０ｍｇ／ｋｇの用量でのみ観察された一方で、良好な忍容性を示した３０ｍｇ／ｋｇの用量のＳＴ−２４６で観察された平均最大血漿中濃度はより低く、３８．５μｇ／ｍＬであった。短時間の静脈内注入のＣ_ｍａｘ値は、はるかに高い経口用量である１００ｍｇ／ｋｇのＣ_ｍａｘ値よりもはるかに高かったが、ＡＵＣ測定値によって決定される曝露量ははるかに低かった。両方の性別において緩徐なプッシュを介した３０ｍｇ／ｋｇの投与後に観察されたＡＵＣ_０−２４値は、高いＣ_ｍａｘにもかかわらず、１００ｍｇ／ｋｇの経口投与で記録された値に相当するものであった：ケージサイド観察から、この用量での被験物質および送達速度は、ウサギにおいて良好な忍容性を示したことは明白であった。マウスで観察されたように、ウサギにおける短時間の静脈内注入は、非常に高い最大ＳＴ−２４６濃度を生成し、それは、動物において観察された臨床症状の時間に対応していた。ＡＵＣ値は、対応する経口投与よりも高かったものの、これらの試験において観察された臨床症状との相関は認められなかった。３ｍｇ／ｋｇのＳＴ−２４６の１５分間の静脈内注入を用いて、ウサギにおける薬物動態パラメータを評価した。１５分間の静脈内注入試験において、最初の静注試験におけるように注入終了の５分後ではなく、注入終了時に迅速に血液試料を採取した。したがって、第２の試験からのＣ_ｍａｘは、最初の５分間の静注試験のＣ_ｍａｘよりもＣ_ｍａｘをより正確に反映するものであり、実際に、Ｃ_ｍａｘ値は実質的により高かった（表２を参照）。より長時間の単回注入の結果は、短時間の静脈内注入後のＣ_ｍａｘ値は、同等の経口投与後に観察された値よりもはるかに高かったという、反復投与試験において観察されたことを裏付けるものであった。

ウサギ静注試験における血漿中濃度時間曲線の片対数グラフは、二相性の分布および排出を示す（図１７）。最初の急速な分布相の後に、より緩やかな最終排出相があると考えられた。ウサギにおける静脈内注入後の排出半減期において、明らかな用量関連性の傾向は認められなかった。静注用量群の排出半減期は約１時間〜１２．２時間の範囲であったのに対し、１００ｍｇ／ｋｇの経口投与の排出半減期は、３．７時間であった（表２８）。

ＮＨＰ試験
ＮＨＰに外科的に植え込まれた血管アクセスポートを介して、１、３、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇの用量で、４時間にわたって静脈内注入によりＳＴ−２４６を投与した。４時間のＳＴ−２４６の静脈内注入の間中、血漿中濃度が増加し、注入終了時には最大濃度に達した（表２９、図１８）。最大血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）は、同等用量の経口投与後よりも静脈内注入後により高かった（表２９）。より高い用量では、経口投与と静脈内注入のＣ_ｍａｘ濃度の差が増加した。経口投与後のＣ_ｍａｘ濃度が用量に比例するよりも少なく増加したのに対し、静脈内注入後のピーク血漿中濃度は、用量比例性に基づいて予想されるよりも多く増加した。

用量を０．３ｍｇ／ｋｇから３０ｍｇ／ｋｇに１００倍増加した場合、ＳＴ−２４６の経口投与後の最大血漿中濃度は、わずか３７倍増加したのみであったのに対し、曝露量（ＡＵＣ_{ｉｎｆ−ｏｂｓ}）は、用量の比例的増加に近く、つまり８４倍増加した。また、経口投与後の排出も二相性であり、血漿中濃度時間曲線は、ウサギの場合に観察されたものと類似していた。

静脈内注入後の血漿排出は、注入終了時に観察された急速な分布相と、その後のはるかに緩やかな最終排出相の、少なくとも２つの異なる相を有すると考えられた（図１８）。１ｍｇ／ｋｇ用量群の動物の大半の血漿中濃度が、２４時間前に定量下限（ＬＬＯＱ＝５．０ｎｇ／ｍＬ）よりも低くなったが、より高い用量群の全ての他の動物では、ＳＴ−２４６は、４８時間の最終時点までＬＬＯＱよりも高かった。

個々の動物について、非区画分析を用いて薬物動態（ＰＫ）パラメータを算出した。静脈内注入の場合、各用量群は２匹のオスおよび２匹のメスから構成されていたのに対し、経口投与の場合、各用量群は３匹のオスおよび３匹のメスを有していた。Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ_ｉｎｆのＰＫパラメータに対する潜在的な性差を評価するためにスチューデントｔ検定を行った。９５％信頼区間で検査した各用量レベルでは、Ｃ_ｍａｘ値またはＡＵＣ_ｉｎｆ値に関して統計的に有意な性差（ｐ＞０．０５）は認められなかった。したがって、各用量群の両方の性別から全ての動物を包含することによって平均値および標準偏差値を算出した。各用量群内の個々のＣ_ｍａｘ値またはＡＵＣ_ｉｎｆ値の可変性は非常に低かったが、例外として、１匹または２匹の動物に偶発的および明白な皮下注射が行われ、その値は群平均から除外された。

４時間の静脈内注入用量を１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇに増加すると、Ｃ_ｍａｘ値およびＡＵＣ値が用量比例的に増加したが、これらの値の増加は、２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量では用量に比例するよりも大きかった（表２９）。３および１０ｍｇ／ｋｇの用量でのＣ_ｍａｘ値は、１ｍｇ／ｋｇの用量でのＣ_ｍａｘ値よりもそれぞれ２．７倍および１１．５倍高かったのに対し、２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量での対応する値は、それぞれ３１倍および５２倍高かった。ＡＵＣ_ｉｎｆ値は、１ｍｇ／ｋｇの用量と比較すると、３、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇの用量で、それぞれ、３．０、１１．０、３２、および５３倍高かった。４時間にわたって注入される用量を増加すると、用量比例性を上回る曝露量の増加も、クリアランスの減少の強い傾向に反映され（Ｃｌ＝用量／ＡＵＣ）、分布機構または排出機構のいずれかの飽和が示唆された（図１９）。２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量の静脈内注入の長さを６時間に延長することにより、より短時間の注入と比較してクリアランスが増加した（そして、曝露量が減少した）。しかしながら、より高い用量のより長い注入でのクリアランス値は、なおも１、３、および１０ｍｇ／ｋｇの用量よりも低かった。４時間の注入では、用量群についてＡＮＯＶＡにより評価したとき、クリアランス値は統計的に有意に異ならなかった。

Ｃ_ｍａｘ血漿中濃度は、４時間の注入では、６時間の注入と比較して約５０％高く、また、より短時間の注入について算出した曝露量も、わずか約２０％ではあるが、より高かった。注入終了後の血漿中濃度は、全ての静脈内注入において、ＥＯＩ直後に明らかに観察された急速な分布相と、その後のより緩やかな最終排出相の、少なくとも２つの異なる相を有すると考えられた。血漿中濃度時間曲線は、Ｔ_ｍａｘおよび実際の血漿中濃度を除いて、２つの注入速度および用量で同様であると考えられた。

静脈内注入後の排出半減期は、用量範囲および異なる長さの注入にわたって６．６〜９．１時間と比較的一定であった（表２９）。経口投与された３ｍｇ／ｋｇの用量での９．９時間の半減期と比較して、３０ｍｇ／ｋｇの用量の経口投与は１７．７時間の最終排出半減期をもたらした。２０ｍｇ／ｋｇまでの経口投与も同様の排出半減期を有し、これらの排出半減期は、静脈内注入後に観察された半減期と非常に類似していた（表２９）。

２４時間の単一期間にわたって１２時間の間を空けて開始した２回の４時間の静脈内注入により、２つの最高総１日用量の１日２回（ＢＩＤ）投与試験を行った（図２０Ａおよび２０Ｂ）。２つの用量群の総１日用量が、それぞれ２０および３０ｍｇ／ｋｇ／日となるように、個々の用量は１０および１５ｍｇ／ｋｇとした。４時間の静脈内注入期間の各々にわたって血漿中濃度が増加し、Ｃ_ｍａｘは、ほとんどの動物で注入終了時に起こった。最初の注入終了後、第２の４時間静脈内注入を開始した１２時間の時点まで、血漿ＳＴ−２４６濃度が減少した。最初の注入と同様に、血漿中濃度は、注入終了時まで増加し、次いで、試験の残りにかけて減少した。最初の静脈内投与開始から６０時間後である最終時点には、両方の用量群の全ての動物のＳＴ−２４６濃度が定量下限（５ｎｇ／ｍＬ）未満に非常に近づいた。片対数グラフ（図２０Ａおよび２０Ｂ）は、両方の用量で、明らかに観察されたＴ_ｍａｘ後の急速な分布、そしてより緩やかな最終排出相を伴い、第２の注入終了後の血漿からのＳＴ−２４６の排出が少なくとも二相性であったことを示唆している。

ＢＩＤ投与試験は、各用量群に４匹のオスおよび４匹のメスを有し、静脈内注入後の薬物動態パラメータにおけるあらゆる潜在的な性差を評価するためにより多くの数を提供した。ＰＫパラメータ（Ｃ_ｍａｘ、ＡＵＣ_ｌａｓｔまたはＡＵＣ_ｉｎｆ、ＣｌおよびＶ_ｓｓ）のスチューデントｔ検定による分析は、１０ｍｇ／ｋｇ／用量レベルで投与した（ｐ＜０．０５）第１相の間に観察されたＣ_ｍａｘを除いて、２つの性別に対する同等性を示した。２つの性別間の薬物動態パラメータに一貫した差が認められなかったため、各用量群の両方の性別からのデータを合わせることによってＳＴ−２４６の最終平均値および標準偏差値を算出した。

１５ｍｇ／ｋｇの用量でのＣ_ｍａｘ値およびＡＵＣ_ｌａｓｔ値は、最初の４時間の静脈内注入の間の１０ｍｇ／ｋｇの用量での値よりも１．６倍高かった。第２の静脈内注入の間の増加は若干高く、Ｃ_ｍａｘ値およびＡＵＣ_ｌａｓｔ値の両方で約１．８倍であった。第２の注入から算出した最終排出半減期は、２つの用量でそれぞれ８．９および９．１時間と、本質的に同一であった。また、クリアランスもこれらの２つの用量で本質的に同等であり、単回静脈内注入で観察された範囲内であった。

マウスおよびウサギの静注試験において観察されたように、ＮＨＰにおける最高用量の急速注入である４時間にわたる３０ｍｇ／ｋｇの注入は、注入終了時と一致する臨床症状をもたらした。４時間の注入持続時間にわたって３０ｍｇ／ｋｇの用量のＳＴ−２４６を投与した４匹の動物のうち３匹が、若干の全身性振戦を呈した。これらの振戦は、投与日の注入終了の１３分以内に観察され、注入終了の約２時間後に回復したことから、この毒性の可逆性が示唆された。６時間にわたって３０ｍｇ／ｋｇを投与した動物、またはいずれかの注入持続時間で２０ｍｇ／ｋｇの用量を投与した動物のいずれにも、振戦は観察されなかった。さらに、ＮＨＰのうちのいずれにも、ＢＩＤ試験全体にわたって臨床症状は観察されなかった。３０ｍｇ／ｋｇ４時間注入群の平均ピーク血漿中濃度は２０．０μｇ／ｍＬであり、６時間にわたって注入された同じ用量での平均ピーク血漿中濃度は約１３．０μｇ／ｍＬであった。どちらの２０ｍｇ／ｋｇ用量群およびＢＩＤ試験においても、ピーク血漿中濃度ははるかに低かった（表２９）。

考察
マウス、ウサギ、地リス、プレーリードッグ、およびＮＨＰにおける経口投与後に、ポックスウイルスに対するＳＴ−２４６の抗ウイルス有効性が実証された（３、８〜１３）。マウス、ＮＨＰ、およびヒトにおける経口投与後のＳＴ−２４６の薬物動態を徹底的に特徴付けたが、ウサギ、ラットおよびイヌにおける情報は限られていた。ヒトにおける評価可能なオルソポックス疾患がないことから、ヒト向けの治療的用量の選択は、必然的に動物のＰＫ／ＰＤ関係に基づいて選択されるため、有効性も評価される種における薬物動態についての完全な理解が重要となる。ヒト向けの用量算出に最も関連性のある動物種はＮＨＰである。

見かけ上の吸収の延長によって１００ｍｇ／ｋｇの単回経口投与後に比較的高い濃度の長期最終排出相が提供された経口投与後に観察された血漿中濃度時間曲線と比較して、ウサギの血漿中濃度時間曲線は、注入終了後に急速に降下した（図１７）。興味深いことに、静脈注入用量を３０ｍｇ／ｋｇから６０ｍｇ／ｋｇに増加したところ、最終排出相の間に観察された濃度が増加し、ＮＨＰにおいて観察されたように、より高い用量が何らかのクリアランスの機構を飽和させた可能性があることが示唆された。投与される用量とウサギにおけるクリアランスとの間の潜在的関係を裏付けるためには、さらなる注入試験が必要であろう。

ＮＨＰにおける経口ＳＴ−２４６試験により、有効性試験に用いられた０．３〜３０ｍｇ／ｋｇの用量範囲を包含する用量範囲にわたって薬物動態を評価した。結果は、経口投与される用量が増加すると、吸収が飽和すると考えられ、それがＣ_ｍａｘ濃度および曝露量の両方に反映されたことを示した。Ｃ_ｍａｘおよび曝露量は、この経口用量範囲にわたって増加したが、それらは用量に比例するよりも少なく増加した。Ｃ_ｍａｘが１００倍の用量増加にわたって３７倍増加したのみであったのに対し、ＡＵＣ_ｉｎｆによって測定される曝露量は、１００倍の用量増加にはるかに近い８４倍増加した。

経口用量の増加による、血漿中濃度および曝露量の減少を引き起こす吸収の飽和は、同様の用量での静脈内注入後には観察されなかった。同一の経口および静脈内用量の比較に基づいたＮＨＰにおけるＳＴ−２４６のバイオアベイラビリティは、３ｍｇ／ｋｇで７７％〜２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量で３１％の範囲であった。静脈内注入後、これらの高用量での曝露量は、用量比例的な曝露量に基づいて予想されるよりも実際に高かった。２０および３０ｍｇ／ｋｇの４時間静脈内注入の曝露量は、１ｍｇ／ｋｇを静脈内に注入投与した後に観察された曝露量よりも、それぞれ３０倍および５０倍高かった（表２９）。より長時間の注入により、Ｃ_ｍａｘ値が、２０および３０ｍｇ／ｋｇの用量で用量に比例する値の近くまで減少された一方で、ＡＵＣ値は、４時間の１ｍｇ／ｋｇの静脈内注入で観察された曝露量よりも２５倍および４５倍高い値まで減少した（表２９）。ＢＩＤ投与計画は、より緩徐な注入が、Ｃ_ｍａｘを減少させただけではなく、全体的な曝露量の値を用量に比例する値の近くまで減少させたという観察を裏付けた。これらの結果は、ＳＴ−２４６の急速な注入が、何らかのクリアランス機構を飽和させたことを示唆するものである。同様の用量範囲にわたって、用量の増加に伴って経口吸収が減少した可能性があり、そのため、クリアランスが比較的一定な状態を維持したか、または若干増加さえした。

ＳＴ−２４６の経口投与後の血漿中濃度時間曲線の目視は、吸収が延長され、見かけの排出半減期に何らかの影響を及ぼし得ることを示唆している。しかしながら、３つの種を用いた試験のうちのいずれにおいても、排出半減期は、経口投与と静脈内投与との間で有意に変化しなかった。経口および静脈内注入によって調べた、３つ全ての種に及ぶこれらの同様の排出半減期を考慮すると、経口試験において現在用いられている１日１回の投与計画を継続する一方で、高い血漿中濃度を減少させ、同時に発生する毒性を回避するためには、より長い静脈内注入が施されるべきであると考えられる。

[参考文献]

Claims (40)

1. 治療的に有効な量のＳＴ−２４６およびシクロデキストリンを含み、１つ以上の医薬的に許容される成分をさらに含む、液体医薬製剤。
2. 前記医薬的に許容される成分は、担体、賦形剤、希釈剤、添加剤、増量剤、滑沢剤、および結合剤からなる群から選択される、請求項１に記載の液体医薬製剤。
3. 前記シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである、請求項１に記載の液体医薬製剤。
4. 前記ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約２０重量％〜約４０重量％の量で存在する、請求項３に記載の液体医薬製剤。
5. 前記シクロデキストリンは、スルホブチル−エーテル−β−シクロデキストリンである、請求項１に記載の液体医薬製剤。
6. 約３〜１０のｐＨを有する、請求項１に記載の液体医薬製剤。
7. 前記ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約４．０〜約８．０の置換度を有する、請求項３に記載の液体医薬製剤。
8. オルソポックスウイルス感染および／またはワクチニア性湿疹を治療する方法であって、それを必要とする対象に、請求項１に記載の液体医薬製剤を投与することを含む、方法。
9. 前記液体製剤は、非経口投与によって投与される、請求項８に記載の方法。
10. 前記液体製剤は、経口投与によって投与される、請求項８に記載の方法。
11. 前記液体製剤は、局所投与によって投与される、請求項８に記載の方法。
12. 前記液体製剤は、静脈内投与によって投与される、請求項８に記載の方法。
13. １回の静脈内投与セッション当たり約５０ｍｇ〜約５００ｍｇのＳＴ−２４６が注入される、請求項１２に記載の方法。
14. １回の静脈内投与セッション当たり約２００ｍｇ〜約４００ｍｇのＳＴ−２４６が注入される、請求項１２に記載の方法。
15. １回の静脈内投与セッション当たり約３００ｍｇのＳＴ−２４６が注入される、請求項１２に記載の方法。
16. 前記治療は、約７日〜約３０日の範囲の期間で実施される、請求項１２に記載の方法。
17. 前記治療は、約７日〜約１５日の範囲の期間で実施される、請求項１２に記載の方法。
18. 静脈内投与の各セッションの持続時間は、約２時間〜約２４時間である、請求項１２に記載の方法。
19. 前記治療は、１日当たり約５０ｍｇ〜約５００ｍｇのＳＴ−２４６の投与量で、治療期間にわたって継続的に実施される、請求項１２に記載の方法。
20. 前記静脈内投与は、１日当たり２セッションの間実施される、請求項１２に記載の方法。
21. 各セッションの持続時間は、約２時間〜約１２時間である、請求項２０に記載の方法。
22. ａ）医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合するステップと、
    ｂ）任意で、前記ステップａ）の混合物を濾過するステップと、を含む、請求項１に記載の液体製剤を作製するプロセス。
23. 前記ＳＴ−２４６は、ＳＴ−２４６多形Ｉ型、ＳＴ−２４６多形ＩＩ型、ＳＴ−２４６多形ＩＩＩ型、ＳＴ−２４６多形ＩＶ型、ＳＴ−２４６多形Ｖ型、およびＳＴ−２４６多形ＶＩ型からなる群から選択される、請求項２２に記載のプロセス。
24. 前記シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである、請求項２２に記載のプロセス。
25. 前記ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約２０重量％〜約４０重量％の量で存在する、請求項２２に記載のプロセス。
26. 前記液体製剤は、約３〜１０のｐＨに調整される、請求項２２に記載のプロセス。
27. 前記ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンは、約４．０〜約８．０の置換度を有する、請求項２４に記載のプロセス。
28. 前記ステップ（ａ）の混合は、温度約２５℃で溶解平衡に達する、請求項２２に記載のプロセス。
29. 前記ステップ（ａ）の混合は、温度約３７℃で溶解平衡に達する、請求項２２に記載のプロセス。
30. 前記ＳＴ−２４６は、約７２時間、医薬的に許容される担体と混合される、請求項２２に記載のプロセス。
31. ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６含有量と、
    ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含む、単位投与量の液体製剤。
32. マンニトール、トレハロース二水和物、ラクトース一水和物、および精製水からなる群から選択される１つ以上の医薬的に許容される成分をさらに含む、請求項３１に記載の単位投与量の液体製剤。
33. 約３．０〜約１０．０のｐＨ範囲を有する、請求項３１に記載の単位投与量の液体製剤。
34. 約１００ｍｌの全体積を有する、請求項３１に記載の単位投与量の液体製剤。
35. ａ）約２ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの範囲のＳＴ−２４６と、
    ｂ）約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌの範囲のヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリン含有量と、を含む、単位投与量の液体製剤。
36. ポリエチレングリコール４００、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール３００、および精製水からなる群から選択される１つ以上の医薬的に許容される成分をさらに含む、請求項３５に記載の単位投与量の液体製剤。
37. 約１００ｍｌの全体積を有する、請求項３５に記載の単位投与量の液体製剤。
38. 約３．０〜約１０．０のｐＨ範囲を有する、請求項３５に記載の単位投与量の液体製剤。
39. ａ）医薬的に許容される液体担体中でＳＴ−２４６をシクロデキストリンと混合することと、
    ｂ）任意で、前記ステップａ）の混合物を濾過することと、
    ｃ）前記混合物を凍結乾燥させることと、を含む、水溶性の固体ＳＴ−２４６医薬製剤を調製するためのプロセス。
40. 前記シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピル‐β‐シクロデキストリンである、請求項１に記載のプロセス。