JP2013508410A - セリンプロテアーゼ酵素の大環状阻害剤を使用する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、セリンプロテアーゼ酵素に結合し、そして／またはその阻害剤である、新規な大環状化合物およびその塩、ならびに該化合物を使用する方法に関する。本発明は、これらの化合物の中間体、これらの化合物を含有する医薬組成物、およびそれを使用する方法にも関する。これらの化合物は、増殖過剰性障害、詳細には、腫瘍転移、炎症性障害、皮膚および組織障害、心臓血管障害、呼吸器障害ならびにウイルス感染を特徴とするそれらの障害をはじめとする一定範囲の適応症の処置および予防のための治療薬として有用である。
【選択図】図１

Description

［関連出願の相互参照］
本願は、ここに引用することで本明細書の一部をなすもとする２００９年１０月２３日出願の米国特許仮出願第61／254,434の優先権を主張するものである。

［発明の分野］
本発明は、セリンプロテアーゼ酵素に結合し、そして／またはその調整物質、詳細には阻害剤である、新規な大環状化合物および薬学的に許容し得るその塩、ならびに該化合物を使用する方法に関する。本発明は、これらの化合物の中間体、これらの化合物を含有する医薬組成物、およびそれを使用する方法にも関する。該化合物は、増殖過剰性障害、詳細には、腫瘍転移、炎症性障害、皮膚および組織障害、心臓血管障害、呼吸器障害ならびにウイルス感染を特徴とするそれらの障害をはじめとする一定範囲の適応症の処置および予防のための治療薬として有用である。

セリンプロテアーゼ酵素は、ホ乳類、ウイルス、細菌および他の生物体における複数の重要な生理学的プロセスに関与し、組織のホメオスタシスおよび修復、発達、免疫性ならびに生殖能力などのような多様な機能を調節する。これらのプロテアーゼは、生化学的レベルでは、ホルモン、成長因子、サイトカインおよび他の内在性の生理学的送達物質の活性化、イオンチャネルの調節、受容体の活性化ならびに細胞透過性の制御を担う。

この種の作用により、セリンプロテアーゼは、医薬品開発のターゲットとなった(Drews, J.; Ryser, S. Nat. Biotech. 1997, 15, 1318-1319; Imming, P.; Sinning, C.; Meyer, A. Nat. Rev. Drug Disc. 2006, 5, 821-834.)。実際に、新薬開発につながる生物学的ターゲット全体の３〜４％が、この分類の一種と推定された(Hopkins, A.L.; Groom, C.R. Nat. Rev. Drug Disc. 2002, 1, 727-730.)。具体的には、これらの酵素の阻害剤が、効果的心臓血管調整物質、呼吸器疾患処置剤、抗炎症剤、抗ウイルス薬およびＣＮＳ薬として広範囲の薬学的関連活性を有することが立証された。加えて、様々な組織の維持プロセスにおいてセリンプロテアーゼが密接に関与することで、それらが癌(Bialas, A.; Kafarski, P. Anti-cancer Agents Med. Chem. 2009, 9, 728-762) 、ならびに皮膚疾患および障害(Meyer-Hoffert, U. Arch. Immunol. Ther. Exp. 2009, 57, 345-354) の新しいターゲットとなった。

とりわけ、癌細胞のより潜行的特徴は、体内の他の部位へ拡大または転移する能力である。多くの例では、高い転移性を有する腫瘍は転帰が不良であるため、腫瘍の転移能力は予後に相関する。タンパク質分解活性の上昇は、癌の進行および転移に関連づけられてきた。数あるタンパク質分解酵素の中でもセリンプロテアーゼは、細胞構造の分解および組織リモデリングに寄与し、それにより癌浸潤および拡大の一助となる。更にプロテアーゼは、癌細胞の増殖または血管新生を刺激するのに必要となる増殖因子の宿主の活性化に関与する。このプロセスに関与するセリンプロテアーゼの幾つかが、ウロキナーゼ、プラスミン、エラスターゼ、トロンビンおよびカテプシンＧである。癌に関与するプロテアーゼごとに異なる基質特異性が見出され、これらのプロテアーゼの選択的ターゲッティングが可能であることが示唆された(Beliveau, F.; Desilets, A.; Leduc, R. FEBS J. 2009, 276, 2213-2226.)。加えて、II型膜貫通性セリンプロテアーゼ（ＴＴＳＰ）と呼ばれるセリンプロテアーゼの新しい種類が、組織ホメオスタシスおよび癌、詳細には腫瘍転移に重要であることが見出された(Wu, Q. Curr. Top. Develop. Biol. 2003, 54, 167-206; Qui, D.; Owen, K.; Gray, K.; Bass, R.; Ellis, V. Biochem. Soc. Trans. 2007, 35, 583-587.)。ＴＴＳＰファミリーの一種は、消化、心臓機能、血圧調節および聴力と同様に多様な生理学的プロセスにも役割を有する(Bugge, T.H.; Antalis, T.M.; Wu, Q. J. Biol. Chem. 2009, 284, 23177-23181.)。これらの役割では、ＴＴＳＰは、典型的にはホメオスタシスを保持する働きがあり、多くの場合、ホルモンもしくは成長因子の活性化、またはタンパク質分解カスケードの開始に関与する。加えて、より近年の知見で、インフルエンザおよび他の呼吸器系ウイルス、例えばヒトメタニューモウイルスが、ＴＴＳＰを活用してその伝播を促進し、これらのプロテアーゼがウイルス感染に介入する潜在的ターゲットとなることが示唆された(Choi, S.-Y.; Bertram, S.; Glowacka, I.; Park, Y.W.; Pohlmann, S. Trends Mol. Med. 2009, 15, 303-312.)。

ＴＴＳＰは、細胞質、膜貫通領域、Ｃ末端のリガンド結合ドメインおよびセリンプロテアーゼドメイン中に保持される短いＮ末端テールを特徴とする。そのような特性により、それらは他の細胞表面タンパク質および隣接細胞の成分と相互作用するのに理想的である。

この酵素類の一種であるマトリプターゼ（マトリプターゼ−１、ＭＴ−ＳＰ１、ＴＡＤＧ−１５、エピチン、ＳＴ１４）は、上皮の起源細胞により発現され、非常に様々なヒト癌において過剰発現されるトリプシン様セリンプロテアーゼである(US 5,482,848; US 5,792,616; US 5,972,616; US 6,649,741; US 7,030,231; US 7,227,009; US 7,276,364; US 7,291,462; WO 99/42120; WO 00/53232; WO 01/23524; WO 01/29056; WO 01/57194; WO 01/36604; US 2003/0119168; US 2006/0099625; US 2008/0051559; Takeuchi, T.; Shuman, M.A.; Craik, C.S. Proc. Natl. Acad. Sci. 1999, 96, 11054-11061; Lin, C.Y.; Anders, J.; Johnson, M.; Sang, Q.A.; Dickson, R.B.; J. Biol. Chem. 2001, 274, 18231-18236; Oberst, M.; Johnson, M.; Dickson, R.B.; Lin, C.-Y. Recent Res. Develop. Biochem. 2002, 3, 169-190; Lin, C.-Y.; Oberst, M.; Johnson, M.; Dickson, R.B. Handbook of Proteolytic Enzymes, 2^nded., Barrett, A.J.; Rawlings, N.D.; Woessner, J.F., Elsevier: London, 2004, pp 1559-1561; List, K.; Bugge, T.H.; Szabo, R. Mol. Med. 2006, 12, 1-7; Lee, M.-S.; Johnson, M.D.; Lin, C.-Y. J. Cancer Mol. 2006, 2, 183-190; Uhland, K. Cell. Mol. Life Sci. 2006, 63, 2968-2978; List, K. Future Oncol. 2009, 5, 97-104.)。ＴＴＳＰとしてのマトリプターゼは、細胞内から分泌されるか、または細胞内に保持されるほとんどのプロテアーゼとは異なり、細胞表面に容易に接近することができ、このためワクチン、モノクローナル抗体および小分子化合物をはじめとする様々な治療薬の良好なターゲットである。その酵素を阻害すると、腫瘍形成における２種の不可欠な媒介物質、つまり肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）およびウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化物質（ｕＰＡ）の同時阻害が得られる。ＨＧＦおよびｕＰＡは、癌浸潤および転移における、細胞運動性、細胞外マトリックス分解および腫瘍血管分布での役割について関連づけられてきた。

マトリプターゼ活性は、広範囲のトリプシン様セリンプロテアーゼと拮抗する活性を示す上皮クニッツ型膜貫通阻害剤である、内在性物質の肝細胞増殖因子活性化因子阻害因子（ＨＡＩ−１）により調節される(Oberst, M.D.; Chen, L.-Y.L.; Kiyomiya, K.-I.; Williams, C.A.; Lee, M.-S.; Johnson, M.D.; Dickson, R.B.; Lin, C.-Y. Am. J. Physiol. 2005, 289, C462-C470; Kojima, K.; Tsuzuki, S.; Fushiki, T.; Inouye, K. J. Biol. Chem. 2008, 283, 2478-2487.)。

マトリプターゼは、細胞外マトリックスの分解において役割を果たし、腫瘍転移を促進することが見出された(WO 00/53232; WO 01/97794; WO 02/08392; Hooper, J. Biol. Chem. 2001, 276, 857-860.)。この活性は、ストロムテリシンおよびIV型コラーゲナーゼをはじめとする特定のマトリックスメタロプロテアーゼ酵素（ＭＭＰ）で認められるものと類似している。マトリプターゼ−１発現の低下は、マウスモデルの前立腺癌における攻撃性および進行の低下に関連した。(Sanders, A.J.; Parr, C.; Davies, G.; et al. J. Exp. Ther. Oncol. 2006, 6, 39-48.)

加えて、マトリプターゼは、全身の上皮ホメオスタシスおよび末端上皮分化を担う細胞周囲タンパク質分解経路において役割を果たす(List, K.; Kosa, P.; Szabo, R.; et al. Am. J. Pathol. 2009, 175, 1453-1463.)。マトリプターゼは、ＰＡＲ−２の活性化を介した、内皮細胞中の炎症性サイトカインの放出も誘導する。それゆえ阻害剤は、抗炎症薬としての用途を有するであろう。更に該プロテアーゼは、単球中で発現され、それとＰＡＲ−２との相互作用はアテローム性硬化症に寄与する。つまりマトリプターゼの阻害剤は、アテローム性硬化症の処置および予防にも用途を有する(Seitz, I.; Hess, S.; Schulz, H.; Eckl, R.; Busch, G.; et al. Arterioscler. Throm. Vasc. Biol. 2007, 27, 769-775.)。

マトリプターゼの遺伝子発現は、骨関節炎において有意に上昇することが見出され、その酵素は、軟骨マトリックス分解をもたらす多重機構の開始に関与する(Milner, J.A.; Patel, A.; Davidson, R.K.; et al. Arthr. Rheum. 2010, 62, 1955-1966.)。それゆえその酵素の阻害は、この適応症の治療の１つのアプローチとなろう。

マトリプターゼ−２（ＴＭＰＲＳＳ６）は、肝臓により発現されるＴＴＳＰである(WO 2008/009895; Ramsay, A.J.; Reid, J.C.; Velasco, G.; Quigley, J.P.; Hooper, J.D. Front. Biosci. 2008, 13, 569-579.)。マトリプターゼ−２は、正常な状態では、腸における鉄吸収とマクロファージからの鉄放出を阻害するホルモンのヘピシジンをダウンレギュレートする作用がある。この酵素が遺伝子内で突然変異を起こすと、高レベルのへプシジンにより、ヒトにおける鉄不応性鉄欠乏性貧血（ＩＲＩＤＡ）に関連した、異常なタンパク質分解活性をもたらす(Folgueras, A.R.; Martin de Lara, F.; Pendas, A.M.; Garabaya, C.; et al. Blood 2008, 112, 2539-3545; Anderson, G.J.; Frazer, D.M.; McLaren, G.D. Curr. Opin. Gastroenterol. 2009, 25, 129-135; Ramsay, A.J.; Hooper, J.D.; Folgueras, A.R.; Velasco, G.; Lopez-Otin, C. Haematologica 2009, 94, 840-849; Finberg, K.E. Semin. Hematol. 2009, 46, 378-386; Cui, Y.; Wu, Q.; Zhou, Y. Kidney Intl. 2009, 76, 1137-1141; Lee, P. Acta Haematologica 2009, 122, 87-96; deFalco, L.; Totaro, F.; Nai, A.; et al. Human Mut. 2010, 31, e1390-e1405.)。この酵素は、マトリプターゼ−１に対して３５％の配列相同性を有する。

マトリプターゼ−２は、マトリプターゼ−１の作用とは異なり、乳房腫瘍増殖および浸潤を血漿レベルで阻害し、好適な予後に相関する(Parr, C.; Sanders, A.J.; Davies, G.; et al. Clin. Cancer Res. 2007, 13, 3568-3576.)。治療的アプローチとしての、癌の発生および進行ならびに調整能力におけるこの酵素の役割は、依然として活発な研究領域である(Sanders, A.J.; Webb, S.L.; Parr, C.; Mason, M.D.; Jiang, W.G. Anti-cancer Agents Med. Chem. 2010, 10, 64-69.)。マトリプターゼ−２およびそれに由来する薬剤は、前立腺癌の処置薬としても報告された(WO 2009/009895)。

マトリプターゼ−３は、多くの種で保存され、広範囲のセルピン活性を示すが、他のＴＴＳＰに類を見ない発現パターンおよび調節ネットワークを有する(Szabo, R.; Netzel-Arnett, S.; Hobson, J.P.; Antalis, T.M. Bugge, T.H. Biochem. J. 2005, 390, 231-242.)。

マトリプターゼ酵素に加えて、他のＴＴＳＰとしては、非限定的に、ヘプシン（ＴＭＰＲＳＳ１）、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３／ＴＡＤＧ−１２、ＴＭＰＲＳＳ４、モザイクセリンプロテアーゼ大型（ＭＳＰＬ）、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ヒト気道トリプシン（ＨＡＴ）様プロテアーゼ、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ２、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ３、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ４、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ５、ポリセラーゼ−１、スピネシン、エンテロペプチダーゼ、コリンおよび扁平上皮癌における差異的発現遺伝子１（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ １）（ＤＥＳＣ１）が挙げられる。ＴＴＳＰ遺伝子の突然変異は、ヒトにおける複数の遺伝子障害の潜在的原因として確証されており、ＴＴＳＰ遺伝子発現の変化はヒト癌腫に関連する。

プロテアーゼは、様々な有害な皮膚状態の誘発にも関与する。それは、表皮の分化(Zeeuwen, P.L.J.M.; Eur. J. Cell Biol. 2004, 83, 761-773)と、上皮の発育(Bugge, T.H.; List, K.; Szabo, R. Front. Biosci. 2007, 12, 5060-5070)の両方において役割を果たす。セリンプロテアーゼを含むシグナル伝達カスケードは、表皮のホメオスタシスにおいて重大な役割を果たす(Ovaere, P.; Lippens, S.; Vandenabeele, P.; Declercq, W. Trends Biochem. Sci. 2009, 34, 453-463.)。これらには、マトリプターゼ−１に加えて、フリン、プロスタシン、カリクレイン関連ペプチダーゼ４（ＫＬＫ４、プロスターゼ）、角質層トリプシン性酵素（ＳＣＴＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ５、ＫＬＫ５）、カリクレイン関連ペプチダーゼ６（ＫＬＫ６、プロテアーゼＭ）、角質層キモトリプシン性酵素（ＳＣＣＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ７、ＫＬＫ７）、カリクレイン関連ペプチダーゼ８（ＫＬＫ８、ニューロプシン）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１０（ＫＬＫ１０）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１１（ＫＬＫ１１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１３（ＫＬＫ１３）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１４（ＫＬＫ１４）が挙げられる。例えば、疾患発症中にマトリプターゼにより活性化されるプロカリクレイン経路の関与が、ネザートン症候群のマウスモデルで確認された(Sales, K.U.; Masedunskas, A.; Bey, A.L.; et al. Nat. Genetics 2010, 42, 676-683.)。これらのプロテアーゼ酵素が皮膚層を含む保護組織を破壊し始めると、それらは炎症反応を誘発する。加えて、皮膚のタンパク質分解バランスの変化が炎症をもたらして、発赤、鱗屑および痒みが生じる可能性がある。事実、フィラグリン、プロテアーゼ活性化受容体（ＰＡＲ）およびコルネオデスモシンをはじめとするプロテアーゼ、その阻害物質およびターゲットタンパク質は、皮膚組織のための調節ネットワークを含み、皮膚の統合性およびバリア機能に寄与する(Meyer-Hoffert, U. Arch. Immunol. Ther. Exp. 2009, 57, 345-354.)。阻害剤は、これらの炎症事象を低減して、様々な皮膚および組織障害を処置するのに有用となろう。

マトリプターゼは、皮膚に加えて、腸における上皮バリア形成および透過性の調節において重要な役割を果たす(Buzza, M.S.; Netzel-Arnett, S.; Shea-Donohue, T.; et al. Proc. Nat. Acad. Sci. 2010, 107, 4200-4205.)。

プロテアーゼは、上皮ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）の調節も担う(Planes, C.; Caughey, G.H.; Curr. Top. Development. Biol. 2007, 78, 23-46; Frateschi, S.; Charles, R.-P.; Hummler, E. Open Derm. 2010, 4, 27-35.)。ＥＮａＣの調整に関与するチャネル活性化プロテアーゼ（ＣＡＰ）としては、プロスタシン（ＣＡＰ１、ＰＲＳＳ８）、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｂ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、（ＭＴ−ＳＰ２）、ＭＴ−ＳＰ１、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡおよび好中球エラスターゼが挙げられる。ＣＡＰの阻害剤が、図示されたピロリジン塩基骨格の周囲を基盤とする化学構造と共に開示された(WO 2007/137080; WO 2007/140117; WO 2008/085608; WO 2008/097673; WO 2008/097676)。

今日まで、マトリプターゼの阻害剤は、わずかな数しか記載されていない。これらは、小分子、例えば第二級アミノ酸アミドのメタ置換スルホニルアミドを含む(WO 2008/107176; Steinmetzer, T.; Doennecke, D.; Korsonewski, M.; Neuwirth, C.; Steinmetzer, P.; Schulze, A.; Saupe, S.M.; Schweinitz, A. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 67-73; Schweinitz, A.; Doennecke, D.; Ludwig, A.; Steinmetzer, P.; Schulze, A.; Kotthaus, J.;Wein, S.; Clement, B.; Steinmetzer, T. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 1960-1965.)。

マトリプターゼ阻害剤の別の構造類は、Ｎ−スルホニル化アミノ酸誘導体に基づいている(WO 2004/101507; US 2007/0055065; Steinmetzer, T.; Schweinitz, A.; Stuerzbecher, A.; et al. J. Med. Chem. 2006, 49, 4116-4126)。

直鎖状ペプチド(US 6,797,504; US 7,157,596; WO 02/020475)およびペプチド模倣体(US 7,019,019; WO 2004/058688)阻害剤が、開示された。

これらのペプチド模倣体マトリプターゼ阻害剤の一種であるＣＶＳ−３９８３が、腫瘍転移のインビボモデルにおいて活性を示した(Galkin, A.V.; Mullen, L.; Fox, W.D.; Brown, J.; et al. Prostate 2004, 61, 228-235.)。

他の２種のペプチド模倣体阻害剤、ＣＪ−１７３７およびＣＪ−６７２の代謝および分布に関する研究で、この種の分子についての動物とヒトとの重大な代謝的差異が明らかとなった(Kotthaus, J.; Steinmetzer, T.; Kotthaus, J.; Schade, D.; van de Locht, A.; Clement, B. Xenobiotica 2010, 40, 93-101.)。

より近年になり、４−アミジノベンジルアミドを含有するＮ−保護ジペプチドが、マトリプターゼ−１およびマトリプターゼ−２阻害剤として報告された(Sisay, M.T.; Steinmetzer, T.; Stirnberg, M.; Maurer, E.; Hammami, M.; Bajorath, J.; Guetschow, M. J. Med. Chem. 2010, 53, 5523-5535.)。化合物１は、マトリプターゼ−１の阻害に関し、マトリプターゼ−２の５０倍の選択性を示した。これらの、マトリプターゼ−２の最初の小分子阻害剤は、鉄障害、例えば、ヘプシジンレベルが過度に低いヘモクロマトーシスおよび鉄負荷性貧血（ｉｒｏｎ ｌｏａｄｉｎｇ ａｎｅｍｉａｓ）を処置するための潜在的治療薬として示唆される。

エグリンＣ変異体であるより長い直鎖ペプチドも、マトリプターゼ阻害剤として公知である(Desilets, A.; Longpre, J.-M.; Beaulieu, M.-E.; Leduc, R. FEBS Lett. 2006, 580, 2227-2232.)。

アミノ酸残基が１４個の二環式ペプチドであるヒマワリトリプシン阻害剤（ＳＦＴＩ−１）が、マトリプターゼおよびカテプシンＧの阻害剤として同定された。この阻害剤は、エラスターゼ、トロンビンおよびＸａ因子をはじめとする他のプロテアーゼ酵素に対比して選択性を有する。(Luckett, J. Mol. Biol. 1999, 290, 525.)。不幸にもＳＦＴＩ−１は、インビボでは相対的に急速に分解され、重要な生理学的セリンプロテアーゼ、トリプシンおよびキモトリプシンを上回る選択性を示さず、そのため医薬剤としての使用に適さない。

同じく本質的に二環式であるＳＦＴＩ−１類似体および模倣体も、報告された(US 7,439,226; WO 2006/043933; Long, Y.-Q.; Lee, S.-L.; Lin, C.-Y.; Enyedy, I.J.; Wang, S.; Li, P.; Dickson, R.B.; Roller, P.P. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001, 11, 2515-2519; Jiang, S.; Li, P.; Lee, S.-L.L.; Lin, C.-Y.; Long, Y.-Q.; Johnson, M.D.; Dickson, R.B. Roller, P.B. Org. Lett. 2007, 9, 9-12; Li, P.; Jiang, S.; Lee, S.-L.L.; Lin, C.-Y.; Johnson, M.D.; Dickson, R.B.; Michejda, C.J.; Roller, P.J. J. Med. Chem. 2007, 50, 5976-5983.)。

アミノ酸を１１または１４個含有する環状ペプチド、およびマトリプターゼをはじめとするセリンプロテアーゼの阻害により作用する皮膚刺激の予防または処置のための使用方法が、US 7,217,690に開示された。

天然および合成プロテアーゼ阻害剤(Yamasaki, Y.; Satomi, S.; Murai, N.; Tsuzuki, A.; Fushiki, T. J. Nutr. Sci. Vitamin. 2003, 49, 27-32)、ならびに合成クンツ型阻害剤(WO 2007/079096)が、マトリプターゼをはじめとする複数のプロテアーゼ酵素に拮抗する活性を示した。

事実、特定のプロテアーゼ類のうち、該酵素は、共通の化学的および構造的特性を利用してそれらの基質と相互作用し、つまり阻害剤は、多くの場合、その分類の他の酵素も阻害することができる。もちろん酵素間の選択性が、特異的副作用を抑制するなどで重要となる場合、これは克服すべき難題も生じる。

構造を基にした設計から得られる、図示されたアミジンまたは代替物など、２つ以上の重要な塩基性相互作用部分を分離する直鎖構造を有する一連のマトリプターゼを阻害剤が、報告された(US 6,677,377; WO 01/097784; Enyedy, I.J.; Lee, S.-L.; Kuo, A.H.; Dickson, R.B.; Lin, C.-Y.; Wang, S. J. Med. Chem. 2001, 44, 1349-1355)。これらの化合物において、Ｚは、１個以上の酸素または硫黄原子で場合により置換された炭素原子の直鎖、または芳香族もしくは複素環芳香族のスペーサー成分のいずれかを表す。

マトリプターゼを対象とするヒトモノクローナル抗体が、癌の診断、予防または処置に関して開示された(US 7,572,444; WO 2006/068975; Farady, C.J.; Sun, J.; Derragh, M.R.; Miller, S.M.; Craik, C.S. J. Mol. Biol. 2007, 369, 1041-1051; Farady, C.J.; Egea, P.F.; Schneider, E.L.; Darragh, M.R.; Craik, C.S. J. Mol. Biol. 2008, 380, 351-360.)。マトリプターゼマウス抗体を有することから(US 7,355,015)、様々なタイプの癌の処置、スクリーニング、診断、予後および治療に使用される、マトリプターゼタンパク質由来の他の抗体も、記載された(WO 2009/020645; US 2003/270245; US 2009/0155248)。マトリプターゼの検出用抗体キットは、US 7,022,821の主題である。

診断または治療的目的で抗体を生成するのに用いうるマトリプターゼおよび他の癌関連プロテアーゼの部分的配列を含む抗原性ペプチドが、WO 2008/066749に提供されている。

マトリプターゼ発現を刺激する薬剤が、美容目的で有用であるとして開示された(WO 2008/034821)。

今日まで、マトリプターゼ阻害剤で臨床開発に至ったものはなく、そのため薬理学的物質としての追跡で既に研究されたものとは異なる構造を有する新規なマトリプターゼ阻害剤が、依然として求められている。

発明の概要
本発明は、コンホメーションが定義された新規な大環状化合物を提供する。これらの化合物は、セリンプロテアーゼ酵素の調整物質、詳細には阻害剤として機能することができる。

本発明の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ_１は、−Ｈ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３および−ＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群より選択され、
Ｒ_２は、−Ｈ、−ＣＨ_３および−ＣＨ_２ＣＨ_３からなる群より選択され、
Ｒ_３は、任意で存在し、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より選択され、
ｍは、１、２、３、４または５であり、
Ｘ_１は、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、
Ｗは、ＣＲ_４ａＲ_４ｂからなる群より選択され、ここでＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、
Ｚ_１は、ＣＲ_５ａＲ_５ｂからなる群より選択され、ここでＲ_５ａおよびＲ_５ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、
Ｔは、

からなる群より選択され、
ここでＭ_１は、Ｏおよび（ＣＨ_２）_ｑからなる群より選択され、ここでｑは、１、２、３、４または５であり、Ｍ_２は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ_６およびＣＲ_７ａＲ_７ｂからなる群より選択され、ここでＲ_６は、水素、アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、Ｒ_７ａおよびＲ_７ｂは、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、ｐ１およびｐ２は、独立して０、１、２または３であり、そしてｐ３、ｐ４およびｐ５は、独立して０、１または２である。
（Ｗ）は、Ｗの付加された炭素原子への結合部位を示す。
（Ｚ）は、Ｚ_１の付加された炭素原子への結合部位を示す）
による化合物および薬学的に許容し得るその塩に関する。

本発明の更なる態様は、式（II）：

（式中、
Ｒ_１１は、−Ｈ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３および−ＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群より選択され、
Ｒ_１２は、−Ｈ、−ＣＨ_３および−ＣＨ_２ＣＨ_３からなる群より選択され、
Ｒ_１３は、−（ＣＨ_２）_ｒ１ＮＲ_１８ａＲ_１８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｒ２ＣＯＮＲ_１９ａＲ_１９ｂ、

からなる群より選択され、
ここでｒ１は、１、２、３、４または５であり、ｒ２は、１、２または３であり、Ｒ_１８ａ、Ｒ_１９ａおよびＲ_１９ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ｒ_１８ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ホルミル、アシル、アミド、アミジノおよびスルホンアミドからなる群より選択され、Ａ_１、Ａ_４、Ａ_７、Ａ_９、Ａ_１２、Ａ_１４、Ａ_１７、Ａ_１９、Ａ_２３、Ａ_３５、Ａ_３７およびＡ_３９は、それぞれ任意で存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイド、グアニジノ、ヒドロキシル、アルコキシおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２、Ａ_３、Ａ_５、Ａ_６、Ａ_８、Ａ_１０、Ａ_１１、Ａ_１３、Ａ_１５、Ａ_１６、Ａ_１８、Ａ_２０、Ａ_２１、Ａ_２４、Ａ_２５、Ａ_３６、Ａ_３８およびＡ_４０は、それぞれ任意で存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、アルコキシおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２２、Ａ_２６、Ａ_２７、Ａ_２９、Ａ_３１およびＡ_３３は、それぞれ任意で存在し、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイド、グアニジノおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２８、Ａ_３０、Ａ_３２およびＡ_３４は、それぞれ任意で存在し、トリフルオロメチルおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、そしてＢ_１、Ｂ_２、Ｂ_３、Ｂ_４、Ｂ_５およびＢ_７は、独立してＮＲ_２０、ＳまたはＯであり、ここでＲ_２０は、水素、アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、Ｂ_６およびＢ_８は、独立してＮまたはＣＨであり、
Ｒ_１４は、アミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、カルボキシ、ウレイド、アミジノ、またはグアニジンで場合により置換されたＣ_１〜Ｃ_４アルキルと、アルキル、ヒドロキシルまたはアルコキシで場合により置換されたＣ_３〜Ｃ_７シクロアルキルとからなる群より選択され、
Ｒ_１５およびＲ_１６は、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より独立して選択され、
Ｒ_１７は、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
ｎは、１、２、３、４または５であり、
Ｚ_２は、ＣＨＲ_２１ａＣＨＲ_２２ａ、ＣＲ_２１ｂ＝ＣＲ_２２ｂおよびＣ≡Ｃからなる群より選択され、ここでＲ_２１ａおよびＲ_２２ａは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より独立して選択されるか、またはＲ_２１ａとＲ_２２ａとが、結合する炭素と一緒になって、３員環を形成しており、そしてＲ_２１ｂおよびＲ_２２ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、
Ｘ_２は、水素、ハロゲン、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、
Ｘ_３は、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
Ｌ_２は、ＯおよびＣＲ_２３ａＲ_２３ｂからなる群より選択され、ここでＲ_２３ａは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より選択され、そしてＲ_２３ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
Ｌ_３は、ＣＸ_４およびＮからなる群より選択され、ここでＸ_４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、そして
Ｌ_４は、ＣＸ_５およびＮからなる群より選択され、ここでＸ_５は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択される）
による化合物または薬学的に許容し得るその塩に関する。

本発明の新規な大環状化合物は、セリンプロテアーゼ酵素の調整物質、詳細には阻害剤として有用である。この阻害剤により、複数の異なる癌、詳細には腫瘍転移を特徴とする癌に取り組むことができる。加えてセリンプロテアーゼの阻害剤、例えば本発明の化合物を、皮膚障害、例えばアトピー性皮膚炎、酒さ、乾癬、魚鱗癬、濾泡性皮膚委縮、過角化症、減毛症、ネザートン症候群などの処置または予防に用いることができる。

本発明の特定の実施形態において、セリンプロテアーゼ酵素は、マトリプターゼ−１（ＭＴＳＰ−１、ＳＴ１４、ＴＡＤＧ−１５、エピチン）、マトリプターゼ−２（ＴＭＰＲＳＳ６）、マトリプターゼ−３、ＭＴＳＰ−４、ＭＴＳＰ−６、ＭＴＳＰ−７、ＭＴＳＰ−９、ＭＴＳＰ−１０、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｃ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５（スピネシン）、モザイクセリンプロテアーゼ大型（ＭＳＰＬ）、エンテロペプチダーゼ、ポリセラーゼ−１、コリン、ヒト気道トリプシン様プロテアーゼ（ＨＡＴ）、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ２、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ３、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ４、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ５、プロスタシン（ＣＡＰ１、ＰＲＳＳ８）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡ、好中球エラスターゼ、ヘプシン、角質層トリプシン性酵素（ＳＣＴＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ５、ＫＬＫ５）、角質層キモトリプシン性酵素（ＳＣＣＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ７、ＫＬＫ７）、カリクレイン関連ペプチダーゼ４（ＫＬＫ４、プロスターゼ）、カリクレイン関連ペプチダーゼ８（ＫＬＫ８、ニューロプシン）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１１（ＫＬＫ１１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１３（ＫＬＫ１３）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１４（ＫＬＫ１４）、カリクレイン関連ペプチダーゼ６（ＫＬＫ６、プロテアーゼＭ）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１０（ＫＬＫ１０）、グランザイムＢ、カルシウムシグナル伝達物質１、カルシウムシグナル伝達物質２、クローディン３、クローディン４、フリン、ラジニン、ラルニニン、プラスミン、ストラチフィン、ＳＩ００Ａ２、ＣＤ２４、リポカリン２、オステオポンチン、組織型プラスミノーゲン活性化因子、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子または扁平上皮癌における差異的発現遺伝子１（ＤＥＳＣ１）である。

本発明の化合物は、異常な新血管形成または血管新生を特徴とする病的状態にも有用である。そのような状態の例としては、非限定的に、目の新生血管疾患、血管腫、ならびに関節リウマチおよびクローン病をはじめとする慢性炎症を特徴とする障害が挙げられる。

本発明の別の態様において、本発明の化合物は、特定の実施形態において、鉄不応性鉄欠乏性貧血（ＩＲＩＤＡ）、全身鉄過負荷（ヘモクロマトーシス）または鉄負荷性貧血をはじめとする、鉄ホメオスタシスの調節解除を特徴とする病的状態を処置するのに用いることができる。

本発明の更なる態様は、式（Ｉ）で示される化合物または式（II）で示される化合物と、薬学的に許容し得る担体、賦形剤または希釈剤とを含む医薬組成物を更に提供する。

本発明の別の態様は、必要とする対象に有効量の式（Ｉ）または式（II）で示される化合物を投与することを含む、増殖過剰性障害、炎症性障害、組織障害、心臓血管障害、呼吸器障害またはウイルス感染を処置する方法を提供する。

本発明の更なる態様は、使用するための任意の使用説明書と共に包装された有効量の本発明の化合物を１種以上含む医薬投与単位を含有する容器１個以上を含むキットを提供する。

本発明の更なる態様は、式（Ｉ）および式（II）で示される化合物を製造する方法に関する。

本発明の態様は、更に、本明細書に記載された障害、詳細には、病的状態、増殖過剰性障害、組織障害、炎症性障害、呼吸器障害およびウイルス感染を予防および／または処置する方法に関する。

特定の実施形態において、増殖過剰性障害は、ＣＭＬをはじめとする白血病、リンパ腫、乳癌、胃腸癌、食道癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、結腸癌、腸癌、大腸癌、前立腺癌、膀胱癌、精巣癌、卵巣癌、子宮癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、上皮癌、頭頸部癌、脳癌、肺癌、肝臓癌、腎臓癌、気管支癌、膵臓癌、甲状腺癌、骨癌および皮膚癌である。

別の特定の実施形態において、増殖過剰性障害は、腫瘍転移を特徴とし、その腫瘍は、乳房、脳、卵巣、結腸、直腸、胃、肝臓、腎臓、腸、口、喉、食道、前立腺、精巣、膀胱、子宮、子宮頸部、肺、膵臓、骨、甲状腺または皮膚に見出される。

別の特定の実施形態において、増殖過剰性障害は、前立腺癌、卵巣癌腫、子宮頸部新生物、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、腎細胞癌、膵管腺癌、子宮平滑筋肉腫、移行上皮細胞腺癌、非メラノーマ皮膚癌、扁平上皮癌、悪性中皮腫または神経膠芽腫である。

追加の実施形態において、本発明の化合物は、特定の実施形態において、アトピー性皮膚炎、酒さ、乾癬、魚鱗癬、濾泡性皮膚委縮、過角化症、減毛症、ネザートン症候群などをはじめとする組織または皮膚の障害の処置または予防に用いることができる。

更に別の特定の実施形態において、炎症性障害は、関節リウマチ、骨関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎またはアテローム性硬化症である。

更なる特定の実施形態において、病的状態は、上皮細胞増殖または異常な新血管形成を特徴とする。

追加の特定の実施形態において、呼吸器障害は、嚢胞性線維症、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、アレルギー性鼻炎、線毛機能不全、肺癌腫、肺炎または呼吸器感染である。

更に別の特定の実施形態において、ウイルス感染は、インフルエンザウイルスまたはメタニューモウイルスにより誘発される。

本発明は、本明細書に記載された障害の予防および／または処置用の医薬品の調製に使用される式（Ｉ）または（II）で示される化合物にも関する。

本発明の前述および他の態様は、以下に示される記述により詳細に説明される。

代表的な本発明の化合物を合成するための反応スキームを示す。 複数の代表的な本発明の化合物を同時合成するための反応スキームを示す。 複数の代表的な本発明の化合物を同時合成するための別の反応スキームを示す。 テザーＴ３２を合成するための反応スキームを示す。 テザーＴ２０１を合成するための反応スキームを示す。

ここに、本発明の前述および別の態様を、本明細書に記載された別の実施形態に関連させて、より詳細に記載する。本発明を異なる形態で具体化することができ、本明細書に示された実施形態に限定されると解釈してはならないことを、理解しなければならない。むしろこれらの実施形態を提供することで、この開示が徹底され完全となり、それが本発明の範囲を当業者に完全に伝えることになる。

本明細書内の本発明の記載に用いられる用語法は、特定の実施形態のみの記載を目的とし、本発明を限定する意図はない。本発明の記載および添付の特許請求の範囲に用いられる単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、他に明確に示されない限り、複数形も包含するものとする。加えて、本明細書で用いられる用語「および／または」は、関連して列挙された事柄１つ以上とのあらゆる組合せを包含しており、「／」と略されていてもよい。

他に定義されない限り、本明細書で用いられる全ての技術的および科学的用語は、本発明の当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。

本明細書で引用された全ての発行物、米国特許出願、米国特許および他の参考資料は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。

用語「アルキル」は、炭素原子を１〜２０個、幾つかの例において炭素原子を１〜８個有する直鎖または分枝鎖飽和または部分不飽和炭化水素基を指す。用語「低級アルキル」は、炭素原子を１〜６個含有するアルキル基を指す。アルキル基の例としては、非限定的に、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、３−ヘキセニル、および２−ブチニルが挙げられる。「不飽和」とは、二重結合もしくは三重結合またはその２種の組み合わせが１、２または３個存在することを意味する。そのようなアルキル基は、以下に記載される通り、場合により置換されていてもよい。

本明細書に定義されたアルキルまたは他の炭化水素基に関連して下付き文字が用いられる場合、下付き文字は、その基が含みうる炭素原子数を指す。例えば、Ｃ_２〜Ｃ_４アルキルは、炭素原子が２、３または４個のアルキル基を示す。

用語「シクロアルキル」は、環内に炭素原子を３〜１５個、幾つかの例において３〜７個有する飽和または部分不飽和環状炭化水素基、および前記環状炭化水素基を含むアルキル基を指す。シクロアルキル基の例としては、非限定的に、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロペンチル、２−（シクロヘキシル）エチル、シクロヘプチル、およびシクロヘキセニルが挙げられる。本明細書で定義されたシクロアルキルとしては、複数の炭素環を有し、そのそれぞれが飽和または部分不飽和であってもよい基、例えば、デカリニル、［２．２．１］−ビシクロヘプタニルまたはアダマンタニルも挙げられる。そのようなシクロアルキル基は全て、以下に記載されたとおり場合により置換されていてもよい。

用語「芳香族」は、電子を４ｎ＋２個（ここでｎは、１以上の整数である）含む共役π電子系を有する不飽和環状炭化水素基を指す。芳香族分子は、典型的には安定しており、交互の二重結合および単結合からなる共鳴構造を有する原子の平面環、例えばベンゼンまたはナフタレンとして表わされる。

用語「アリール」は、環原子を６〜１５個、幾つかの例において６〜１０個有する単環または縮合環の炭素環系の芳香族基、および前記芳香族基を含むアルキル基を指す。アリール基の例としては、非限定的に、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルおよびベンジルが挙げられる。本明細書で定義されたアリールは、ナフチルおよびアントラセニルと同様に縮合であってもよく、またはビフェニルおよびテルフェニルと同様に非縮合であってもよい、複数のアリール基を有する基も挙げられる。アリールは、環の１つが芳香族であり、その他が飽和、部分不飽和、または芳香族であってもよい、二環式または三環式炭素環、例えば、インダニルまたはテトラヒドロナフチル（テトラリニル）も指す。そのようなアリール基は全て、以下に記載される通り場合により置換されていてもよい。

用語「複素環」または「複素環式」は、原子を３〜１５個、幾つかの例において３〜７個有し、少なくとも１個の環の中にヘテロ原子を少なくとも１個有し、前記ヘテロ原子がＯ、ＳまたはＮから選択される、飽和または部分不飽和単環、二環または三環基を指す。複素環基の各環は、各環内のヘテロ原子数の合計が４個以下であること、そして各環が炭素原子を少なくとも１個含むことを前提に、Ｏ原子を１または２個、Ｓ原子を１または２個、Ｎ原子を１〜４個含むことができる。二環式または三環式複素環基を完成する縮合環は、炭素環のみを含んでいてもよく、飽和または部分不飽和であってもよい。ＮおよびＳ原子は、場合により酸化されていてもよく、Ｎ原子は、場合により第四級化されていてもよい。複素環は、前記単環、二環または三環式複素環基を含むアルキルも指す。複素環の例としては、非限定的に、２−または３−ピペリジニル、２−または３−ピペラジニル、２−または３−モルホリニルが挙げられる。そのような複素環基は全て、以下に記載される通り場合により置換されていてもよい。

用語「ヘテロアリール」は、環原子を５〜１５個、幾つかの例において５〜１０個有し、少なくとも１個の環の中にヘテロ原子を少なくとも１個有し、前記ヘテロ原子がＯ、ＳまたはＮから選択される、単環または縮合環系の芳香族基を指す。ヘテロアリール基の各環は、各環内のヘテロ原子数の合計が４個以下であること、そして各環が炭素原子を少なくとも１個含むことを前提に、Ｏ原子を１または２個、Ｓ原子を１または２個、Ｎ原子を１〜４個含むことができる。二環または三環基を完成させる縮合環は、炭素原子のみを含んでいてもよく、飽和、部分不飽和または芳香族であってもよい。窒素原子の電子の孤立電子対が芳香族π電子系の完成に関与していない構造では、Ｎ原子は場合により第四級化または窒素酸化物に酸化されていてもよい。ヘテロアリールは、前記環状基を含むアルキル基も指す。単環式ヘテロアリール基の例としては、非限定的に、ピロリル、ピラゾリル、ピラゾリニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、およびトリアジニルが挙げられる。二環式ヘテロアリールの例としては、非限定的に、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾピラニル、インドリジニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロモニル、クマリニル、ベンゾピラニル、シンノリニル、キノキサリニル、インダゾリル、プリニル、ピロロピリジニル、フロピリジニル、チエノピリジニル、ジヒドロイソインドリル、およびテトラヒドロキノリニルが挙げられる。三環式ヘテロアリール基の例としては、非限定的に、カルバゾリル、ベンゾインドリル、フェナントロリニル、アクリジニル、フェナントリジニル、およびキサンテニルが挙げられる。そのようなヘテロアリール基は全て、以下に記載される通り場合により置換されていてもよい。

用語「ヒドロキシ」は、基−ＯＨを指す。

用語「アルコキシ」は、基−ＯＲ_ａ（ここでＲ_ａは、アルキル、シクロアルキルまたは複素環である）を指す。例としては、非限定的に、メトキシ、エトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、シクロヘキシルオキシおよびテトラヒドロピラニルオキシが挙げられる。

用語「アリールオキシ」は、基−ＯＲ_ｂ（ここでＲ_ｂは、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。例としては、非限定的に、フェノキシ、ベンジルオキシおよび２−ナフチルオキシが挙げられる。

用語「アシル」は、基−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ_ｃ（ここでＲ_ｃは、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。例としては、非限定的に、アセチル、ベンゾイル、およびフロイルが挙げられる。

用語「アミノアシル」は、アミノ酸から誘導されたアシル基を示す。

用語「アミノ」は、−ＮＲ_ｄＲ_ｅ基（ここでＲ_ｄおよびＲ_ｅは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群より独立して選択される）を指す。あるいはＲ_ｄとＲ_ｅとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。

用語「アミド」は、基−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_ｆＲ_ｇ（ここでＲ_ｆおよびＲ_ｇは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群より独立して選択される）を指す。あるいはＲ_ｆとＲ_ｇとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。

用語「アミジノ」は、基−Ｃ（＝ＮＲ_ｈ）ＮＲ_ｉＲ_ｊ（ここでＲ_ｈは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選択され、Ｒ_ｉおよびＲ_ｊは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールからなる群より独立して選択される）を指す。あるいはＲ_ｉとＲ_ｊとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。

用語「カルボキシ」は、基−ＣＯ_２Ｈを指す。

用語「カルボキシアルキル」は、基−ＣＯ_２Ｒ_ｋ（ここでＲ_ｋは、アルキル、シクロアルキルまたは複素環である）を指す。

用語「カルボキシアリール」は、基−ＣＯ_２Ｒ_ｍ（ここでＲ_ｍは、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。

用語「シアノ」は、基−ＣＮを指す。

用語「ホルミル」は、基−Ｃ（＝Ｏ）Ｈを指し、−ＣＨＯとも示される。

用語「ハロ」、「ハロゲン」または「ハロゲン化物」は、それぞれフルオロ、フッ素またはフッ化物、クロロ、塩素または塩化物、ブロモ、臭素または臭化物、およびヨード、ヨウ素またはヨウ化物を指す。

用語「オキソ」は、同じ炭素上の２個の水素原子の代わりに置換されていてカルボニル基を形成している二価基＝Ｏを指す。

用語「メルカプト」は、基−ＳＲ_ｎ（ここでＲ_ｎは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。

用語「ニトロ」は、基−ＮＯ_２を指す。

用語「トリフルオロメチル」は、基−ＣＦ_３を指す。

用語「スルフィニル」は、基−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ_ｐ（ここでＲ_ｐは、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。

用語「スルホニル」は、基−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｒ_ｑ１（ここでＲ_ｑ１は、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。

用語「アミノスルホニル」は、基−ＮＲ_ｑ２−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｒ_ｑ３（ここでＲ_ｑ２は、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールであり、Ｒ_ｑ３は、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールである）を指す。

用語「スルホンアミド」は、基−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲ_ｒＲ_ｓ（ここでＲ_ｒおよびＲ_ｓは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールからなる群より独立して選択される）を指す。あるいはＲ_ｒとＲ_ｓとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。

用語「カルバモイル」は、式−Ｎ（Ｒ_ｔ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ_ｕ（式中、Ｒ_ｔは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択され、Ｒ_ｕは、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから選択される）で示される基を指す。

用語「グアニジノ」は、式−Ｎ（Ｒ_ｖ）−Ｃ（＝ＮＲ_ｗ）−ＮＲ_ｘＲ_ｙ（式中、Ｒ_ｖ、Ｒ_ｗ、Ｒ_ｘおよびＲ_ｙは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから独立して選択される）で示される基を指す。あるいはＲ_ｘとＲ_ｙとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、複素環または３〜８員を形成している。

用語「ウレイド」は、式−Ｎ（Ｒ_ｚ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ_ａａＲ_ｂｂ（式中、Ｒ_ｚ、Ｒ_ａａおよびＲ_ｂｂは、水素、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールから独立して選択される）で示される基を指す。あるいはＲ_ａａとＲ_ｂｂとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。

用語「場合により置換された」は、任意の置換基が明確に示されていれば、該用語は、特定の基が非置換であるか、または特定の置換基で置換されていることを示すが、その場合を除けば、特定の基が非置換であるか、または適切な置換基１個以上で置換されていることを明確に示すものとする。先に定義された通り、本明細書に他に断りがなければ（例えば、特定の基が非置換であることを示すことにより）、様々な基が非置換であるか、または置換されていてもよい（即ち、それらは場合により置換されている）。

用語アルキル、シクロアルキル、複素環、アリールおよびヘテロアリールと共に用いられる場合の、用語「置換された」は、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、ハロ、オキソ、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノ、ウレイド、および式−ＮＲ_ｃｃＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｄｄ、−ＮＲ_ｅｅＣ（＝ＮＲ_ｆｆ）Ｒ_ｇｇ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ_ｈｈＲ_ｉｉ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｊｊ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ_ｋｋ、−ＮＲ_ｍｍＳＯ_２Ｒ_ｎｎまたは−ＮＲ_ｐｐＳＯ_２ＮＲ_ｑｑＲ_ｒｒ（ここで、Ｒ_ｃｃ、Ｒ_ｄｄ、Ｒ_ｅｅ、Ｒ_ｆｆ、Ｒ_ｇｇ、Ｒ_ｈｈ、Ｒ_ｉｉ、Ｒ_ｊｊ、Ｒ_ｍｍ、Ｒ_ｐｐ、Ｒ_ｑｑおよびＲ_ｒｒは、水素、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリールまたは非置換ヘテロアリールから独立して選択され、Ｒ_ｋｋおよびＲ_ｎｎは、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリールまたは非置換ヘテロアリールから独立して選択される）で示される基から独立して選択される置換基により置換された基の水素原子を１個以上有するアルキル、シクロアルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリール基を指す。あるいはＲ_ｇｇとＲ_ｈｈ、Ｒ_ｊｊとＲ_ｋｋ、またはＲ_ｐｐとＲ_ｑｑとが一緒になって、非置換アルキル、非置換シクロアルキル、非置換複素環、非置換アリール、非置換ヘテロアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アシル、アミノ、アミド、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、メルカプト、スルフィニル、スルホニル、スルホンアミド、アミジノ、カルバモイル、グアニジノまたはウレイドで場合により置換されていて、Ｏ、ＳまたはＮから選択される追加のヘテロ原子１〜３個を場合により含む、３〜８員の複素環を形成している。加えて、アリールおよびヘテロアリール基に関する用語「置換された」は、シアノ、ニトロまたはトリフルオロメチルにより置換された基の水素原子を１個有することを、選択肢として包含する。

任意の原子の通常の原子価を超えないこと、および置換により安定した化合物が得られることを前提として、置換が行われる。一般に、基の置換された形態が存在する場合、そのような置換された基は、好ましくは更に置換されないか、または置換される場合には、置換基が置換された基をわずかな数しか含まず、幾つかの例において１、２、３または４個のそのような置換基を含む。

任意の変数が本明細書の任意の成分または任意の式中に１回を超えて出現する場合、各出現ごとのその定義は、それぞれ他の出現の際の定義とは独立している。同じく置換基および／または変数の組み合わせは、安定した化合物が得られる場合のみ、許容される。

「安定した化合物」または「安定した構造」は、有用な純度への単離、および効能のある治療薬への配合を持続させるのに十分な堅牢性がある化合物を指す。

用語「アミノ酸」は、当業者に公知の、一般的な天然（遺伝子コードされた）または合成アミノ酸およびその一般的誘導体を指す。アミノ酸に適用される「標準の」または「タンパク質原性」は、天然形態の遺伝子コードされた２０種のアミノ酸を指す。同様にアミノ酸に適用される「非天然」または「異常」は、非天然、希少または合成アミノ酸の広範での選択、例えばHunt, S.の Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids, Barrett, G.C., Ed., Chapman and Hall: New York, 1985に記載されたものを指す。

アミノ酸またはアミノ酸誘導体に関連する用語「残基」は、式：

（式中、Ｒ_ＡＡは、アミノ酸側鎖であり、そしてこの例ではｎ＝０、１または２である）
で示される基を指す。

ジペプチド、トリペプチドまたはより高次のペプチド誘導体に関連する用語「フラグメント」は、それぞれ２、３またはそれを超えるアミノ酸残基を含む基を指す。

用語「アミノ酸側鎖」は、標準または非天然アミノ酸からの任意の側鎖を指し、Ｒ_ＡＡで示される。例えば、アラニンの側鎖はメチルであり、バリンの側鎖はイソプロピルであり、トリプトファンの側鎖は３−インドリルメチルである。

用語「アゴニスト」は、タンパク質、受容体、酵素などの内在性リガンドの効果の少なくとも幾つかを複製する化合物を指す。

用語「アンタゴニスト」は、タンパク質、受容体、酵素などの内在性リガンドの効果の少なくとも幾つかを阻害する化合物を指す。

用語「阻害剤」は、タンパク質または酵素の活性を低減する化合物を指す。

用語「癌性状態」は、対象が進行性の癌、例えば、白血病、リンパ腫、メラノーマ、乳癌、胃腸癌、食道癌、胃癌、結腸癌、腸癌、大腸癌、直腸癌、前立腺癌、膀胱癌、精巣癌、卵巣癌、子宮癌、子宮頸癌、脳癌、肺癌、気管支癌、喉頭癌、咽頭癌、膵臓癌、甲状腺癌、骨癌および皮膚癌を有する状態である。

用語「チャネル活性化プロテアーゼ」またはＣＡＰは、典型的には細胞の細胞外膜上に分泌されるが、内部に分泌することもでき、アミロライド感受性上皮ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）の活性を刺激することができる膜結合性プロテアーゼを指す。そのようなＣＡＰの非限定的例は、プロスタシン（ＰＲＳＳ^＊＊）、マトリプターゼ、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４（マトリプターゼ−２）、ＴＭＰＲＳＳ１１、カテプシンＡ、好中球エラスターゼおよびそのアイソフォームである。

用語「腫瘍」は、非制御的細胞複製から得られる組織の異常な増殖を指す。そのような異常な増殖は、多くの場合、癌に関連する。腫瘍は、新生物とも呼ばれる。

用語「転移」は、対象の体内の発生部位から他の一ヶ所以上の場所への癌または腫瘍の拡大を指す。

用語「調整または調整すること」は、化合物を用いる生物学的または化学的プロセスまたはメカニズムへの影響を付与することを指す。例えば調整することで、生物学的または化学的プロセスまたはメカニズムの上昇、促進、アップレギュレート、活性化、阻害、低減、遮断、予防、遅延、脱感作、脱活性化、ダウンレギュレートなどを行ってもよい。したがって、調整する化合物は、「アゴニスト」または「アンタゴニスト」であってもよい。調整することにより影響を受ける例示的な生物学的プロセスまたはメカニズムとしては、非限定的に、受容体活性化、結合および／またはホルモン放出または分泌、鉄チャネル調節、細胞透過性、リン酸化または脱リン酸化、組織ホメオスタシス、セカンドメッセンジャーシグナル伝達ならびに遺伝子調節が挙げられる。調整することにより影響を受ける例示的な化学的プロセスまたはメカニズムとしては、非限定的に、触媒および加水分解が挙げられる。本明細書で用いられる、調整する化合物は、「調整物質」と呼ばれる。

受容体に適用される用語「変異体」は、二量体、三量体、四量体、五量体および複数の成分を含有する他の生物学的複合体の包含を意味する。これらの成分は、同一または異なっていてもよい。

用語「ペプチド」は、互いに共有結合する２個以上のアミノ酸で構成された化学的化合物を指す。

用語「ペプチド模倣体」は、ペプチドを模倣するように設計されているが、活性または他の性質、例えば、溶解度、代謝安定性、経口生物学的利用度、親油性、透過性などを調整するための、ペプチドの官能基を１個以上付加または置換することによる構造的差異を含む化学的化合物を指す。これは、ペプチド結合の置換、側鎖の修飾、トランケーション、官能基の付加などを含んでいてもよい。化学構造がペプチドに由来していないが、その活性を模倣している場合には、それは多くの場合、「非ペプチド性ペプチド模倣体」と呼ばれる。

用語「ペプチド結合」は、個々のアミノ酸が、典型的にはペプチド内で互いに共有結合しているアミド［−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−］官能基を指す。

用語「保護基」は、化学変化が分子内の他の部分で起こる時に、分子上の潜在的に反応性の官能基、例えばアミン、ヒドロキシルまたはカルボキシルが化学反応を受けるのを防ぐために用いられうる任意の化学的化合物を指す。複数のそのような保護基が、当業者に公知であり、例は、“Protective Groups in Organic Synthesis,” Theodora W. Greene and Peter G. Wuts,編 John Wiley & Sons, New York, 3^rdedition, 1999 [ISBN 0471160199]に見出すことができる。アミノ保護基の例としては、非限定的に、フタルイミド、トリクロロアセチル、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、およびアダマンチルオキシカルボニルが挙げられる。幾つかの実施形態において、アミノ保護基は、カルバマートアミノ保護基であり、それは、アミノ基に結合するとカルバマートを形成するアミノ保護基と定義される。他の実施形態において、アミノカルバマート保護基は、アリルオキシカルボニル（ＡｌｌｏｃまたはＡｌｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびα，α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル（Ｄｄｚ）である。より新規な窒素保護基の近年の議論について：Theodoridis, G. Tetrahedron 2000, 56, 2339-2358。ヒドロキシル保護基の例としては、非限定的に、アセチル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリチル（Ｔｒｔ）、ｔｅｒｔ−ブチル、およびテトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）が挙げられる。カルボキシル保護基の例としては、非限定的に、メチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ベンジルエステル、トリメチルシリルエチルエステル、および２，２，２−トリクロロエチルエステルが挙げられる。

用語「固相化学」は、反応成分の１つが高分子材料（以下に定義される固形担体）に共有結合している化学反応の行為を指す。固相上で化学作用を実施するための反応方法は、ペプチドおよびオリゴヌクレオチド化学の伝統的分野以外でより広範に知られ確立されている。

用語「固形担体」、「固相」または「樹脂」は、固相化学を実行するのに用いられる機械的および化学的に安定した高分子マトリックスを指す。これは「樹脂」、「Ｐ−」または以下の記号で示される：

適切な高分子材料の例としては、非限定的に、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリエチレングリコール、ポリスチレンにグラフト化または共有結合されたポリエチレングリコール（ＰＥＧ−ポリスチレン、ＴｅｎｔａＧｅｌ（商標）とも呼ばれる。Rapp, W.; Zhang, L.; Bayer, E.、Innovations and Perspectives in Solid Phase Synthesis. Peptides, Polypeptides and Oligonucleotides; Epton, R., Ed. p 205; 英国バーミンガムのＳＰＣＣ Ｌｔｄ.）、ポリアクリラート（ＣＬＥＡＲ（商標））、ポリアクリルアミド、ポリウレタン、ＰＥＧＡ［ポリエチレングリコールポリ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド）コポリマー、Meldal, M. Tetrahedron Lett. 1992, 33, 3077-3080］、セルロースなどが挙げられる。これらの材料は、架橋結合を形成して構造を機械的に安定化させる追加の化学剤、例えば、ジビニルベンゼン（ＤＶＢ、通常は０．１〜５％、好ましくは０．５〜２％）と架橋したポリスチレンを場合により含有していてもよい。この固形担体は、更なる誘導体化または反応のために、非限定的例として、アミノメチルポリスチレン、ヒドロキシメチルポリスチレン、ベンズヒドリルアミンポリスチレン（ＢＨＡ）、メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）ポリスチレン、および遊離化学的官能基、最も典型的には−ＮＨ_２または−ＯＨを含む他の高分子バックボーンを含むことができる。その用語は、これらの官能基を高率で（増量して）有する「ウルトラレジン（Ｕｌｔｒａｒｅｓｉｎｓ）」、例えばポリエチレンイミンと架橋分子とから調製されたものを含むことも意味する(Barth, M.; Rademann, J. J. Comb. Chem. 2004, 6, 340-349)。合成の最後には、樹脂は典型的には廃棄されるが、Frechet, J.M.J.; Haque, K.E. Tetrahedron Lett. 1975, 16, 3055に記載される通り、再使用し得ることが示されている。

一般に樹脂として用いられる材料は、不溶性高分子であるが、特定の高分子は、溶媒に応じて溶解度差（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ）を有し、固相化学で用いることができる。例えばポリエチレングリコールは、化学反応を実施し得る多くの有機溶媒に可溶性であり、他のもの、例えばジエチルエーテルには不溶性であるため、この手法で用いることができる。つまり、均質に溶解して反応を実施し、その後、ジエチルエーテルの添加により高分子上での生成物を沈殿させて、固体として処理することができる。これは、「液相」化学と呼ばれてきた。

固相化学に関連して用いられる用語「リンカー」は、典型的には固形担体から基質を遊離（切断）させるために、固形担体に共有結合して担体と基質の間を付加させる化学基を指す。しかしそれは、固形担体への結合に安定性を付与するため、または単にスペーサー要素として、用いることもできる。多くの固形担体は、既に付加されたリンカーと共に市販されている。

アミノ酸に用いられる略語およびペプチドの名称は、J. Biol. Chem. 1972, 247, 977-983中のIUPAC-IUB Commission of Biochemical Nomenclatureの規則に従う。この文書は、改訂された：Biochem. J., 1984, 219, 345-373; Eur. J. Biochem., 1984, 138, 9-37; 1985, 152, 1; Internat. J. Pept. Prot. Res., 1984, 24, p 84以降; J. Biol. Chem., 1985, 260, 14-42; Pure Appl. Chem., 1984, 56, 595-624; Amino Acids and Peptides, 1985, 16, 387-410; およびBiochemical Nomenclature and Related Documents, 2nd edition, Portland Press, 1992, pp 39-67。規則の追加分は、JCBN/NC-IUB Newsletter 1985, 1986, 1989に発表されており；Biochemical Nomenclature and Related Documents, 2nd edition, Portland Press, 1992, pp 68-69を参照されたい。

用語「有効量」または「効果的」は、臨床検査および評価、患者観察などを介して記録された疾患もしくは障害の症状を緩和させる用量、ならびに／または生物活性もしくは化学活性の検出可能な変化を起こす用量を示すものとする。関連するメカニズムまたはプロセスについて、検出可能な変化は、当業者により検出され、そして／または更に定量されてもよい。当該技術分野で一般に理解される通り、投与量は、投与経路、症状および患者の体重に応じて変動するが、投与される化合物にも依存する。

２種以上の化合物の「併用」での投与は、一方の存在が他方の生物学的効果を変化させるのに十分、時間的に接近させて２種の化合物を投与することを意味する。２種の化合物を、同時に（同時的に（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｌｙ））または連続して投与することができる。同時投与は、投与前に化合物を混合することにより、または異なる解剖学的部位で、もしくは異なる投与経路を用いて、該化合物を同じ時点で投与することにより、実施することができる。本明細書で用いられる語句「同時的投与」、「併用投与」、「同時投与」または「同時に投与される」は、該化合物を互いに同じ時点で、または互いに直後に投与することを意味する。後者の例では、観察された結果が化合物を同じ時点で投与する場合に実現される結果と識別不能な程、十分に接近した時間に２種の化合物が投与される。

用語「薬学的に活性の代謝産物」は、特定の化合物の体内での代謝を介して生成される薬理学的活性生成物を意味するものとする。

用語「溶媒和物」は、生物学的有効性を保持する特定の化合物の薬学的に許容し得る溶媒和物形態を意味する。溶媒和物の例は、非限定的に、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸またはエタノールアミンと併用される本発明の化合物が挙げられる。

１．化合物
本発明の新規な大環状化合物は、環化を受けて該大環状化合物を形成する、テザー成分を含むビルディングブロック構造を含む大環状化合物を包含する。ビルディングブロック構造は、アミノ酸（標準および非天然）、ヒドロキシ酸、ヒドラジノ酸、アザアミノ酸、特定の部分、例えば、ペプチド代理物およびイソステレスの導入に役割を果たすもの、および本明細書に記載されたテザー成分を含むことができる。

本発明は、単離された化合物を包含する。単離された化合物は、幾つかの実施形態において、混合物の化合物を少なくとも１０％、少なくとも２５％、少なくとも５０％または少なくとも７０％含む化合物を指す。幾つかの実施形態において、該化合物、薬学的に許容し得るその塩または該化合物を含有する医薬組成物は、ヒトグレリン受容体で生物学的アッセイで検査した場合に、統計学的に有意な結合および／またはアンタゴニスト活性を示す。

固体の化合物、塩、または溶媒和物の例では、本発明の化合物、塩、および溶媒和物が異なる血漿または多形形態で存在することができ、その全てが本発明および特定の式の範囲内であることは、当業者に理解されよう。

本明細書に開示された化合物は、不斉中心を有していてもよい。本発明の化合物は、単一の立体異性体、ラセミ体、ならびに／または鏡像異性体および／もしくはジアステレオマーの混合物として存在してもよい。そのような単一の立体異性体、ラセミ体、およびその混合物は全て、本発明の範囲内のものとする。しかし特定の実施形態において、本発明の化合物は、光学的に純粋な形態で用いられる。本明細書で用いられる用語「Ｓ」および「Ｒ」形態は、IUPAC 1974 Recommendations for Section E, Fundamentals of Stereochemistry (Pure Appl. Chem. 1976, 45, 13-30)に定義された通りである。

特定の配向があることが他に示されない限り、本発明は、全ての立体異性体形態で説明される。該化合物は、単一の立体異性体または立体異性体混合物として調製してもよい。非ラセミ形態を、合成または分割のいずれかにより得てもよい。標準的技術、例えば塩形成を介したジアステレオマー対の形成により、該化合物を成分の鏡像異性体に分割してもよい。同じく、キラル部分への共有結合により、該化合物を分割してもよい。その後、クロマトグラフィー分離および／または結晶学的分離により、ジアステレオマーを分割してもよい。キラル補助部分の場合には、その後、それを除去することができる。代替法として、キラルクロマトグラフィーの利用により、該化合物を分割することができる。分割の酵素的方法も、特定の例で用いることができる。

当業者に一般に理解される通り、「光学的に純粋な」化合物は、単一鏡像異性体のみを含むものである。本明細書で用いられる用語「光学活性」は、混合物が平面偏光を回転させるように、１つの鏡像異性体を他のものよりも少なくとも十分に過剰に含む化合物を意味するものとする。光学活性化合物は、偏光の平面を回転する能力を有する。他よりも過剰な１つの鏡像異性体は、典型的には鏡像異性体過剰（ｅ．ｅ．）として表わされる。光学活性化合物を記載する際に、接頭辞ＤとＬ、またはＲとＳは、キラル中心の周りの分子の絶対配置を示すのに用いられる。接頭辞「ｄ」と「ｌ」、または「＋」と（−）は、化合物の回旋（即ち、偏光面が光学活性化合物により回転する方向）を示すのに用いられる。「ｌ」または（−）の接頭辞は、化合物が左旋性（即ち、偏光面を左または反時計回りに回転させる）であることを示し、「ｄ」または（＋）の接頭辞は、化合物が右旋性（即ち、偏光面を右または時計回りに回転させる）であることを意味する。回旋記号（−）および（＋）は、分子の絶対配置ＲおよびＳには関係しない。

所望の薬理学的性質を有する本発明の化合物は、光学活性であり、少なくとも９０％（８０％ｅ．ｅ．）、少なくとも９５％（９０％ｅ．ｅ．）、少なくとも９７．５％（９５％ｅ．ｅ．）または少なくとも９９％（９８％ｅ．ｅ．）の単一異性体で構成させることができる。

同様に、二重結合などの多くの幾何異性体も、本明細書に開示された化合物中に存在することができ、他に断りがなければ、そのような安定した異性体は全て、本発明に包含される。同じく本発明に包含されるのは、該化合物の互変異性体および回転異性体である。

次の右側の記号の使用は、示された環の水素原子１個以上が定義された置換基Ｒで置換されていることを指す。

次の記号の使用は、単結合または任意の二重結合：----を示す。

本発明の実施形態は、本明細書に記載された合成方法により形成されて、式Ｉおよび／またはIIで示される化合物を提供する中間体化合物を更に提供する。中間体化合物は、本明細書に記載された一定範囲の適応症の治療薬として、そして／または更なる方法および反応の試薬としての用途を有していてもよい。

２．合成方法
本発明の化合物を、伝統的な溶液合成技術または固相化学法を用いて合成することができる。いずれかにおいて、構築は４つの相を含み：最初は、コンホメーションの制御および定義のための、生物学的ターゲット受容体の認識要素と１つのテザー部分とを含むビルディングブロックの合成である。これらのビルディングブロックは、標準の化学的変換を用いる第二相において、典型的には連続様式で、一緒に組み立てられる。アセンブリの前駆体を、その後、第三段階で環化して、大環状構造を提供する。最後に、保護基の除去および任意の精製を含む、環化後工程の第四段階は、所望の最終化合物を提供する。この一般的タイプの大環状構造の合成方法は、WO 2004/111077およびWO 2005/012331に記載された精製手順を含み、国際特許出願WO 01/25257、WO 2004/111077、WO 2005/012331、WO 2005/012332、WO 2008/033328およびWO2008/130464に記載されている。米国特許第7,476,653および同第7,491,695も参照されたい。

本発明の幾つかの実施形態において、先に定義された可溶性または不溶性高分子マトリックス上の固相化学を利用して、大環状化合物を合成してもよい。固相化学では、樹脂への「負荷」とも呼ばれる、第一のビルディングブロックの付加を含む予備的段階を、実施しなければならない。本発明で用いられる樹脂は、優先的にリンカー部分Ｌを付加している。これらのリンカーは、該技術分野で公知の標準的反応法、例えばエステルまたはアミド結合の形成のために開発された多数の反応条件のいずれかを介して、塩基樹脂上の適切な遊離化学的官能基、通常はアルコールまたはアミンに付加させるが、他の物質も可能である。本発明のための幾つかのリンカー部分が、一般に「環化遊離（ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ−ｒｅｌｅａｓｅ）」と呼ばれるプロセスで、樹脂から同時に切断されて大環状化合物を形成するように設計されている(van Maarseveen, J.H. Solid phase synthesis of heterocycles by cyclization/cleavage methodologies. Comb. Chem. High Throughput Screen. 1998, 1, 185-214; Ian W. James, Linkers for solid phase organic synthesis. Tetrahedron 1999, 55, 4855-4946; Eggenweiler, H.-M. Linkers for solid-phase synthesis of small molecules: coupling and cleavage techniques. Drug Discovery Today 1998, 3, 552-560; Backes, B.J.; Ellman, J.A. Solid support linker strategies. Curr. Opin. Chem. Biol. 1997, 1, 86-93.本発明の化合物ではこれに関連して特に有用なものが、３−チオプロピオン酸リンカーである (Hojo, H.; Aimoto, S. Bull. Chem. Soc. Jpn. 1991, 64, 111-117; Zhang, L.; Tam, J. J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 3311-3320.)。

そのようなプロセスは、環状生成物のみが固形担体から遊離し、溶液相で起こるような直鎖状前駆体の混入が生じないため、より高い純度の材料を提供する。公知または標準の反応化学を利用してビルディングブロックおよびテザーの全てを直鎖状前駆体に連続して組み立てた後、テザー・ビルディングブロックの一部である適切な求核官能基により、このリンカーに付加されたカルボニル上での塩基介在性の分子内攻撃が、アミドまたはエステル結合を形成して図示された環状構造を完成させる（スキーム１）。溶液相に適合する類似の方法論は、大規模適用に好ましいと思われるため、それを適用することも可能である。

スキーム１．環化−遊離ストラテジー

この記載は、本発明の方法の１つの経路を正確に表わしているが、テザー成分を実際に環化ステップで組み立てる改変経路では、閉環メタセシス（ＲＣＭ）の１種である本発明の別法チオエステルストラテジーが進行する。しかし、ＲＣＭ方法論でも、ビルディングブロックの組立が連続して進行した後、環化される（そして固相であれば樹脂から遊離する）。ＲＣＭ反応の特定の副生成物を除去するのに、追加の環化後処理ステップが必要となるが、次の残りの工程は、チオエステルまたは類似の塩基介在性環化ストラテジーと同様の手法で実施される。

その上、本明細書に提供された方法を含むステップを、独立して実施してもよく、または少なくとも２つのステップを組み合わせてもよいことは、理解されよう。加えて、本明細書に提供された方法を含むステップは、独立して、または組み合わせて実施される場合、同じ温度または異なる温度で実施してもよく、それは本発明の教示から逸脱しない。

本発明の新規な大環状化合物は、ビルディングブロック構造の環化を含む新規なプロセスにより形成されて、本明細書に記載されたテザー成分を含む大環状化合物を形成するものを包含する。したがって本発明は、（ａ）ビルディングブロック構造を組み立てること、（ｂ）ビルディングブロック構造を化学変換すること、（ｃ）テザー成分を含むビルディングブロック構造を環化させること、（ｄ）保護基をビルディングブロックから除去すること、および（ｅ）ステップ（ｄ）から得られた生成物を任意で精製すること、を含む、本発明の化合物を製造する方法を提供する。幾つかの実施形態において、ビルディングブロック構造の組み立ては、連続的であってもよい。更なる実施形態において、合成方法は、伝統的な溶液合成技術または固相化学技術を用いて実施される。

Ａ．概論
他に断りがなければ、試薬および溶媒は、試薬品質以上のものであり、様々な販売業者から得て使用した。用いられたＤＭＦ、ＤＣＭ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）、ＤＭＥ、ＣＨ_３ＣＮおよびＴＨＦは、（ｉ）脱保護、（ii）樹脂キャッピング反応、および（iii）洗浄、以外は、ＤｒｉＳｏｌｖ（登録商標）（ドイツ、ダルムスタットのＭｅｒｃｋ ＫＧａＡの一部であるＥＭＤ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ, Ｉｎｃ.）のものであるか、または合成等級である。アミノ酸（ＡＡ）カップリング反応に用いられるＮＭＰは、分析等級である。ＤＭＦは、使用前に真空下に最短で３０分間配置することにより、適宜、脱気した。Ｓｔｒｅｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ, Ｉｎｃ. （米国マサチューセッツ州、ニューベリーポート）から、均一触媒を得た。Ｎ−メチルおよび非天然アミノ酸のものを含む、Ｃｂｚ−、Ｂｏｃ−およびＦｍｏｃ−保護アミノ酸および側鎖保護誘導体は、販売業者から得るか、または当業者に公知の標準的方法論により合成した。Ｄｄｚアミノ酸は、標準法により合成するか、またはＯｒｐｅｇｅｎ (ドイツ、ハイデルベルグ)もしくはＡｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ (米国ケンタッキー州ルイビル)から市販されていた。Ｂｔｓ−アミノ酸は、確立された手順により合成した。ヒドロキシ酸は、販売業者から得るか、または文献に記載された通り対応するアミノ酸から合成した(Tetrahedron 1989, 45, 1639-1646; Tetrahedron 1990, 46, 6623-6632; J. Org. Chem. 1992, 57, 6239-6256.; J. Am. Chem. Soc. 1999, 121, 6197-6205)。蛍光指示薬を含むシリカゲル６０Ｆ２５４のプレコートプレート（０．２５mm厚）で、分析ＴＬＣを実施し、示された方法および試薬を用いて、例えば紫外線（ＵＶ）および／またはモリブデン酸セリウム（ＣＭＡ）溶液（硫酸１００mL、硫酸セリウムアンモニウム１０ｇおよびモリブデン酸アンモニウム２５ｇを混合することにより調製）を用いて、視覚化した。

用語「減圧濃縮／蒸発／除去」は、除去される溶媒に応じて適宜、水吸引圧下（典型的には１０〜３０トル）、または機械的油圧真空ポンプにより提供されるより強い真空下（「高真空」、典型的には１トル以下）で、ロータリーエバポレータを利用して溶媒および揮発成分を除去することを示す。「真空」または「高真空」下での化合物の乾燥は、低圧（１トル以下）の油圧真空ポンプを用いた乾燥を指す。シリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ、ＥＭＤ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ， Still, W. C.; Kahn, M.; Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925）を用いて「フラッシュクロマトグラフィー」を実施したが、それは当業者に周知の手順である。「ドライパック」は、溶媒での前処理をしていないシリカゲルのクロマトグラフィーを示しており、一般に所望の生成物と任意の不純物の間で、Ｒ_ｆに大きな差が存在する場合の精製に大規模に適用される。固相化学のプロセスでは、「標準的手法で乾燥」は、樹脂を、最初は風乾させ（１時間）、続いて完全な乾燥に至るまで真空乾燥（通常は油圧ポンプ）させる（約３０分〜一晩）ことである。空気および水感受性反応で用いられるガラス製品は、オーブンで少なくとも一晩乾燥させて、使用前にデシケータ内で冷却させた。

Ｂ．アミノ酸
Ｎ−メチルおよび非天然アミノ酸のものを含む、アミノ酸、Ｂｏｃ−およびＦｍｏｃ−保護アミノ酸、ならびに側鎖保護誘導体は、販売業者から得るか[例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ（米国ケンタッキー州ルイビル）、Ａｓｔａｔｅｃｈ (米国ペンシルバニア州ブリストル)、Ｂａｃｈｅｍ(スイス、ブーベンドルフ)、ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ (米国イリノイ州ウッドデール)、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ(Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡの子会社、ドイツのダルムシュタット)、ＰｅｐＴｅｃｈ(米国マサチューセッツ州バーリントン)、 Ｓｙｎｔｈｅｔｅｃｈ (米国オレゴン州アルバニー)]、または当業者に公知の標準的方法論により合成した。Ｄｄｚ−アミノ酸は、Ｏｒｐｅｇｅｎ (ドイツ、ハイデルベルグ)もしくはＡｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ (米国ケンタッキー州ルイビル)から購入するか、またはＤｄｚ−ＯＰｈもしくはＤｄｚ−Ｎ_３を用いて標準法を利用して合成した(Birr, C.; Lochinger, W.; Stahnke, G.; Lang, P. Justus Liebigs Ann. Chem. 1972, 763, 162-172.)。Ｂｔｓ−アミノ酸は、公知の方法により合成した(Vedejs, E.; Lin, S.; Klapara, A.; Wang, J. J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 9796-9797. 同じくWO 01/25257, WO 2004/111077)。加えて、Ｎ−アルキルアミノ酸誘導体を、文献の方法により入手した(Hansen, D. W., Jr.; Pilipauskas, D. J. Org. Chem. 1985, 50, 945-950.)。

Ｃ．テザー
テザーは、過去に国際特許出願WO 01/25257、WO 2004/111077、WO 2005/012331、WO 2008/033328およびWO2008/130464に記載された方法で得た。米国特許第7,476,653および同第7,491,695も参照されたい。更なるテザーは、米国特許仮出願第61/256,727に記載されている。更なるテザーの調製は、実施例に示されている。

以下は、本発明の化合物の合成で用いられる特定のテザー中間体であり、ＰＧは、窒素保護基、例えば非限定的に、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｄｄｚ、ＣｂｚまたはＡｌｌｏｃを示す：

Ｄ．固相および溶液相技術
本発明の大環状化合物を合成するための特定の固相技術は、WO 01/25257、WO 2004/111077、WO 2005/012331、WO 2005/012332、WO 2008/033328、WO 2008/130464および米国特許仮出願61/256,727に記載された。大規模製造を受け入れられる方法を含む溶液相合成経路は、米国特許出願第2006/025566およびUS 2007/0021331に記載された。

以下の表は、標準法を用いた代表的な本発明の化合物の合成に使用されるビルディングブロックに関する情報を提供している。これらは、固相合成に直接適用可能である。溶液相合成では、典型的には例示のものからの改変された保護ストラテジーにより、収束的アプローチの使用が可能になる。代表的な本発明の大環状化合物を溶液相で構築するための追加的な合成の詳細を、実施例に示している。

表の合成では、実施例９Ｂに概説された方法論を用いた。テザー上にアミジン部分を有する化合物では、実施例８Ｈに記載された通り例示された代替的なストラテジーを用いることもできる。

３．分析法
他に断りがなければ、^１Ｈおよび^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ３００ＭＨｚ分光計(カリフォルニア州パロアルトのＶａｒｉａｎ, Ｉｎｃ.)で記録し、溶媒の残留プロトンシグナルに関して内部参照する。以下の通り、標準的な略語を用いて、^１Ｈ ＮＭＲデータを表す：ppmでの化学シフト（δ）（多重度、積分値、結合定数）。シグナルの多重度を示すために、以下の略語を用いた：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎｔ＝五重線、ｂまたはｂｒ＝ブロード、およびｍ＝多重線。溶液中の分子のコンホメーションについての情報は、当業者に公知の適切な二次元ＮＭＲ技術を用いて決定することができる(Martin, G.E.; Zektzer, A.S. Two-Dimensional NMR Methods for Establishing Molecular Connectivity: A Chemist's Guide to Experiment Selection, Performance, and Interpretation, John Wiley & Sons: New York, 1988, ISBN 0471187070.)。

ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ Ｃ１８カラム（または同等物）４．６×５０mm（３．５μm）および指定の勾配法を用いて、１mL/分で運転したＷａｔｅｒ Ａｌｌｉａｎｃｅ（登録商標）システム２６９５で、ＨＰＬＣ分析を実施した。Ｗａｔｅｒｓ ９９６ ＰＤＡにより、純度評価用のＵＶデータを提供した(マサチューセッツ州ミルフォードのＷａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ)。特定の分析では、ＬＣＰａｃｋｉｎｇｓ(カリフォルニア州サニーベールのＤｉｏｎｅｘ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ)スプリッタ（５０：４０：１０）により、流れを３つの部分に分離させた。第一の部分（５０％）は、同一性を確認するために質量分析計(ＡＰＣＩプローブを備えたＭｉｃｒｏｍａｓｓ（登録商標）Ｐｌａｔｆｏｒｍ II ＭＳ)へ給送した。第二の部分（４０％）は、純度評価のために、蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ, Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ, 現在はカリフォルニア州パロアルトのＶａｒｉａｎ Ｉｎｃ.,の一部、ＰＬ−ＥＬＳ−１０００（商標）)へ送られ、最後の部分（１０％）は、定量および純度評価のために、化学発光窒素検出器(ＣＬＮＤ， Ａｎｔｅｋ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ ８０６０、テキサス州ヒューストンのＡｎｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（ジョージア州ドゥルースのＲｏｐｅｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ, Ｉｎｃ.,の一部）)へ送られた。必要とされる分析の性質に応じて、各検出器を別個に用いることもできる。最も新しいバージョンのＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ（登録商標）ソフトウエアパッケージを用いて、データを獲得および処理した。

本発明の化合物の分析に用いられた代表的な標準ＨＰＬＣ条件を、以下に表わす：
典型的なクロマトグラフィー条件
カラム： ＸＴｅｒｒａ ＰＲ１８、３．５μm、４．６×１００mm（または同等物）
検出（ＰＤＡ）： ２２０〜３２０nm
カラム温度： ３５±０℃
注入容量： １０μL
流速： １mL/分
運転時間： ２０．０分
データ獲得時間：１７．０分
移動相Ａ： メタノール（またはアセトニトリル）
移動相Ｂ： 水
移動相Ｃ： 水中の１０％ＴＦＡ
勾配Ａ４

勾配Ｂ４

以下の表は、代表的な本発明の化合物のＨＰＬＣ保持時間を要約している。

鏡像異性体およびジアステレオマーの純度を、Ｗａｔｅｒｓ Ｂｒｅｅｚｅシステム（または同等物）を用いた適切なキラルＨＰＬＣカラムを用いて評価した。他のパッキング材料を用いることができるが、これらの分析に特に有用なカラムは、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−ＲＨおよびＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−ＲＨ (米国ペンシルバニア州ウエストチェスターのＣｈｉｒａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ)である。

ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＭＳ Ｃ１８カラム（または同等物）１９×１００mm（５μm）でのＷａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ（登録商標）システムを用いて、最終的な脱保護大環状化合物で分取ＨＰＬＣ精製を実施した。２mL/分で運転するＷａｔｅｒｓ ２７６７インジェクタ／コレクタおよびＷａｔｅｒｓ ５１５ポンプを有するアットカラム希釈構成を利用して、注入を実施した。質量分析計、ＨＰＬＣ、および質量分析指向（ｍａｓｓ ｄｉｒｅｃｔｅｄ）フラクションコレクションを、ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ （登録商標）を含むＭａｓｓＬｙｎｘ（登録商標）ソフトウエアバージョン３．５で制御する。ＭＳ分析により示された、生成物を含むフラクション（１３×１２５mm試験管）を、最も典型的には遠心エバポレータシステム(Ｇｅｎｅｖａｃ（登録商標）ＨＴ−４ (ニューヨーク州バレーコテージのＧｅｎｅｖａｃ Ｉｎｃ), ＴｈｅｒｍｏＳａｖａｎｔ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（登録商標）、ＳｐｅｅｄＶａｃ（登録商標）もしくは同等物 (マサチューセッツ州ウォルサムのＴｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ)で、減圧蒸発するか、または別法として凍結乾燥させた。その後、化合物を、同一性確認、純度および定量評価のために、ＬＣ−ＭＣ−ＵＶ−ＥＬＳＤ−ＣＬＮＤ分析により完全に分析した。

試料１６本まで同時に運転することが可能なディスポーザブルシリカまたはＣ１８カートリッジを有するＩｓｃｏ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）１６ｘシステム (ネブラスカ州リンカーンのＴｅｌｅｄｙｎｅ Ｉｓｃｏ, Ｉｎｃ.)で、自動中圧クロマトグラフィー精製を実施した。Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ（登録商標）Ｐｌａｔｆｏｒｍ ＩＩまたはＺＱ（商標）システムで、ＭＳスペクトルを記録した。ＶＧ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＡＢ−ＺＦ分光計で、ＨＲＭＳスペクトルを記録した。ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅ（登録商標）データベースソフトウエア (英国サリー州ギルフォードのＩＤ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ｌｔｄ.)を用いて、化学的および生物学的情報を保存および分析した。

下表は、代表的な本発明の化合物の分析データを表す。

３．生物学的方法
本発明の化合物を、セリンプロテアーゼ酵素と相互作用する能力に関して評価することができる。そのような方法は十分に確立されており、当業者に公知である。加えて、マトリプターゼの活性を、時間領域近赤外蛍光（ＮＩＲＦ）イメージングを用いて特異的に検査して、阻害活性のインビトロおよびインビボ評価を実施することができる(Napp, J.; Dullin, C.; Mueller, F.; et al. Int. J. Cancer 2010, 127, 1958-1974.)。腫瘍中のマトリプターゼ−１の活性をイメージングする類似の方法は、蛍光顕微鏡法および標識抗体の使用を含む(Darragh, M.R.; Schneider, E.L.; Lou, J.; et al. Canc. Res. 2010, 70, 1505-1512.)。マトリプターゼ−１をコードするＳｔ１４遺伝子を欠損した遺伝子変性マウスは、該酵素の調整の効果を検討するための動物モデルを提供する。List, K.; Kosa, P.; Szabo, R.; Bey, A.L.; Wang, C.B.; Molinolo, A.; Bugge, T.H. Am. J. Pathol. 2009, 175, 1453-1463.)。

Ａ．阻害アッセイ
セリンプロテアーゼ酵素の阻害レベルを研究するのに、複数の文献での方法を利用することができる。一例として(Sisay, M.T.; Steinmetzer, T.; Stirnberg, M.; et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 5523-5535)、ＨＥＫ−ＭＴ２細胞のコンディション培地中のマトリプターゼ−１またはマトリプターゼ−２の活性、マトリプターゼ−２の精製された触媒ドメインの活性、および組換えマトリプターゼの活性（触媒ドメイン；ドイツ、レラハのＥｎｚｏ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、Ｃａｒｙ １００ＵＶ−ＶＩＳ分光光度計(ドイツダルムスタットのＶａｒｉａｎ)を用いて、３７℃のＴｒｉｓ生理食塩緩衝液（５０mM Ｔｒｉｓ、１５０mM ＮａＣｌ、pH８．０）中で、色素生成基質Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−パラニトロアニリド(スイス、ブッベンドルフのＢａｃｈｅｍ)からのパラニトロアニリンの遊離を４０５nmでモニタリングすることによりアッセイする。三重実験での８種の異なる基質濃度で、Ｋ_ｍ値を決定する。３種（マトリプターゼ−２の場合）または少なくとも５種（他の実験）の異なる阻害剤濃度での二重また三重測定で、阻害アッセイを実施する。式ｖ ＝ ｖ_０／（１＋［Ｉ］／ＩＣ_５０）による非線形回帰により、ＩＣ_５０値を得た。その後、１〜４およびレイペプチン(ドイツ、ダルムスタットのＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ) の１０mM阻害剤原液ならびにＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−パラニトロアニリドの１００mM原液をＤＭＳＯ中で調製し、アプロチニン (ドイツ、カールスルーエのＣａｒｌ Ｒｏｔｈ) の１mM原液をＨ_２Ｏ中で調製する。基質の最終濃度は４００μMであり、ＤＭＳＯの最終濃度は１．５％であった。予め加温したアッセイ緩衝液９７９μLを含むキュベットに、検査試料溶液１１μLおよび基質溶液４μLを添加して、完全に混合する。酵素溶液（ＨＥＫ−ＭＴ２細胞のコンディション培地の総タンパク質 ５μg/６μL；マトリプターゼ−２の精製された触媒ドメイン ２８ng/６μL；マトリプターゼ ３ng/６μL）６μLを添加することにより反応を開始させて、２０分間追跡した。

代表的な本発明の化合物による、代表的なセリンプロテアーゼのマトリプターゼ−１の阻害を決定する別の方法の使用が、以下の実施例に示されている。

Ｂ．代表的な本発明の化合物の薬物動態分析
本発明の化合物の薬物動態的挙動を、当業者に周知の方法により確認することができる(Wilkinson, G. R. “Pharmacokinetics: The Dynamics of Drug Absorption, Distribution, and Elimination” in Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, Tenth Edition, Hardman, J.G.; Limbird, L.E., Eds., McGraw Hill, Columbus, OH, 2001, Chapter 1.)。以下の方法を用いて、本発明の化合物の静脈内、皮下および経口投与の薬物動態パラメータ（排出半減期、総血漿クリアランスなど）を検査した。国際特許出願WO 2008/033328およびWO 2008/130464 ならびに米国特許第7,476,653および同第7,491,695も参照されたい。

Ｃ．癌および転移モデル
全てのタイプの癌を処置する本発明の化合物のインビボ有効性を決定するのに、莫大な数の異なる動物モデルを入手することができる。これらには、非限定的に、マウスモデル(Cespedes, M.V.; Casanova, I.; Parreno, M.; Mangues, R. Clin. Transl. Oncol. 2006, 8, 318-329)、ヒト異種移植片モデル(Kerbel, R.S. Cancer Biol. Ther. 2003, 2, S134-S139)、遺伝子組換えマウスモデル(Walrath, J.C.; Hawes, J.J.; Van Dyke, T.; Reilly, K.M. Adv. Cancer Res. 2010, 106, 113-164)およびげっ歯類の転移モデル(Eccles, S.A.; Box, G.; Court, W.; Sandle, J.; Dean, C.J. Cell. Biophys. 1994, 279-291; Hoffman, R.M. Invest. New Drugs 1999, 17, 343-359.Man, S.; Munoz, R.; Kerbel, R.S. Cancer Metastasis Rev. 2007, 26, 737-747)が挙げられる。本発明の化合物に適用可能な幾つかの特定の方法を、実施例に表わす。

Ｄ．皮膚疾患モデル
皮膚および組織障害を処置する本発明の化合物の効果を研究するための動物モデル、詳細にはげっ歯類を、入手することができる（Magin, T.M. Exp. Dermatol. 2004, 13, 659-660.)。炎症性皮膚疾患の遺伝子修飾マウスモデルは開発されており、該化合物の有効性を検証しうる他の系を提供する(Haase, I.; Pasparakis, M.; Krieg, T. J. Dermatol. 2004, 31, 704-719.)。

Ｅ．炎症性疾患モデル
炎症性障害の処置における本発明の化合物の用途を決定するために、それらを適切な動物疾患モデルで試験することができる(Brodmerkel, C.M.; Vaddi, K. Curr. Opin. Biotechnol. 2003, 14, 652-658.)。関節リウマチ用(Hegen, M.; Keith, J.C. Jr.; Collins, M.; Nickerson-Nutter, C.L. Ann. Rheum. Dis. 2008, 67, 1505-1515)、骨関節炎用(Bendele, A.M. J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2001, 1, 363-376; van den Berg, W.B. Curr. Rheumatol. Rep. 2008, 10, 26-29)、炎症性腸疾患、例えばクローン病および潰瘍性大腸炎用(Wirtz, S.; Neurath, M.F. Int. J. Colorectal. Dis. 2000, 15, 144-160; Wirtz, S.; Neurath, M.F. Adv. Drug Deliv. Rev. 2007, 59, 1073-1083)ならびにアテローム性硬化症用(Russell, J.C.; Proctor, S.D. Cardiovasc. Pathol. 2006, 15, 318-330; Zadelaar, S.; Kleemann, R.; Verschuren, L.; et al. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2007, 27, 1706-1721)のものなど、そのようなモデルの宿主は公知である。

Ｆ．呼吸器疾患モデル
ＣＯＰＤ(Fox, J.C.; Fitzgerald, M.F. Curr. Opin. Pharmacol. 2009, 9, 231-242.)、喘息(Nials, A.T.; Uddin, S. Dis. Model Mech. 2008, 1, 213-220)、嚢胞性線維症(Carvalho-Oliveira, I.; Scholte, B.J.; Penque, D. Expert Rev. Mol. Diagn. 2007, 7, 407-417)、気管支炎(Nikula, K.J.; Green, F.H. Inhal. Toxicol. 2000, 12, 123-153)、慢性呼吸器感染(Kukavica-Ibrulj, I.; Levesque, R.C. Lab. Anim. 2008, 42, 389-412)、および呼吸器アレルギー (Pauluhn, J.; Mohr, U. Exp. Toxicol. Pathol. 2005, 56, 203-234)の処置における本発明の化合物の有効性を評価するのに用いうる複数の動物モデル系が、公知である。

ヒツジモデルが、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎および嚢胞性線維症をはじめとする複数の呼吸器障害に効果的であることが、立証された。(Abraham, W.M. Pulm. Pharmacol. Ther. 2008, 21, 743-754.)。

Ｇ．鉄ホメオスタシスモデル
動物モデルが、鉄輸送障害(Andrews, N.C. Adv. Exp. Med. Biol. 2002, 509, 1-17)および鉄代謝を含む疾患の研究(Latunde-Dada, G.O.; McKie, A.T.; Simpson, R.J. Biochim. Biophys. Acta 2006, 1762, 414-423)に向けて開発された。

４．医薬組成物
本発明の大環状化合物または本発明によるその薬理学的に許容し得る塩を、様々な投与形態の医薬組成物に配合させてもよい。本発明の医薬組成物を調製するために、有効成分としての、光学異性体、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体もしくは立体化学混合物を含む１種以上の化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、医薬配合剤の当業者に公知の技術により、適切な担体および添加剤と細密に混合する。

薬学的に許容し得る塩は、医薬品としての使用または配合を可能にするための、特定の化合物の遊離酸および塩基の生物学的効果を保持し、生物学的にも他についても不適当でない、本発明の化合物の塩形態を指す。そのような塩の例は、Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wermuth, C.G. and Stahl, P.H. (編), Wiley-Verlag Helvetica Acta, Zurich, 2002 [ISBN 3-906390-26-8]に記載されている。そのような塩の例としては、遊離酸および塩基のアルカリ金属塩および付加塩が挙げられる。非限定的な薬学的に許容し得る塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオン酸塩、ヘキシン−１，６−ジオン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、およびマンデル酸塩が挙げられる。

本発明の化合物が塩基である場合、所望の塩を、例えば非限定的に塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、炭酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、または非限定的にギ酸、酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、ステアリン酸、アスコルビン酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸、例えばグルクロン酸もしくはガラクツロン酸、α−ヒドロキシ酸、例えばクエン酸もしくは酒石酸、アミノ酸、例えばアスパラギン酸もしくはグルタミン酸、芳香族酸、例えば安息香酸もしくは桂皮酸、スルホン酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シクロヘキシルアミノスルホンなどをはじめとする有機酸、での遊離塩基の処理をはじめとする、当業者に公知の任意で適切な方法により調製してもよい。

本発明の化合物が酸である場合、所望の塩は、無機または有機塩基、例えばアミン（第一級、第二級、または第三級）；アルカリ金属またはアルカリ土類金属水酸化物などでの遊離酸の処理をはじめとする、当該技術分野で公知の任意の適切な方法により調製してもよい。適切な塩の例示としては、アミノ酸、例えばグリシン、リシンおよびアルギニン；アンモニア；第一級、第二級および第三級アミン、例えばエチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエタノールアミン、コリン、および環状アミン、例えばピペリジン、モルホリン、およびピペラジンから得られる有機塩；ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウム、およびリチウムから得られる無機塩が挙げられる。

そのような医薬組成物に用いられる担体および添加剤は、予測される投与様式に応じて、様々な形態をとることができる。つまり経口投与用の組成物は、例えば、デンプン、糖、結合剤、希釈剤、造粒剤、滑剤、崩壊剤などの適切な担体および添加剤を含む、固体調製物、例えば錠剤、糖衣錠、ハードカプセル、ソフトカプセル、顆粒、粉末などであってもよい。錠剤およびカプセルは、使用が容易であり患者の服薬遵守が高いことから、多くの医療条件で最も有利な経口投与形態を示す。

同様に、液体調製物用の組成物としては、水、アルコール、油、グリコール、保存剤、着香剤、着色剤、懸濁剤などの適切な担体および添加剤を含む、溶液、エマルジョン、分散体、懸濁物、シロップ、エリキシルなどが挙げられる。非経口投与用の典型的な調製物は、有効成分を、担体、例えば滅菌水または非経口的に許容し得る油、例えばポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、落花生油またはゴマ油と共に含み、溶解度または防腐性を補助する他の添加剤を含んでいてもよい。溶液の場合、それを粉末に凍結乾燥し、その後、使用直前に再構成させることができる。分散体および懸濁物では、適切な担体および添加剤としては、水性ゴム、セルロース、ケイ酸塩または油が挙げられる。

本発明の実施形態による医薬組成物としては、経口、経直腸、局所、吸入（例えば、エアロゾルを介して）、口腔（例えば、舌下）、経膣、局所（即ち、気道表面を含む、皮膚および粘膜表面の両方）、経皮投与および非経口投与（例えば、皮下、筋肉内、皮膚内、関節内、肋膜内、腹腔内、髄腔内、脳内、頭蓋内、動脈内または静脈内）に適したものが挙げられるが、任意の所定の例に最も適した経路は、処置される状態の性質および重症度、ならびに用いられる特定の活性剤の性質に依存する。

注射用の組成物は、有効成分を、プロピレングリコール−アルコール−水、等張水、注射用滅菌水（ＵＳＰ）、Ｅｍｕｌｐｈｏｒ（商標）−アルコール−水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ−ＥＬ（商標）または当業者に公知の他の適切な担体をはじめとする適切な担体と共に含む。これらの担体は、単独で、または他の従来の可溶化剤、例えば、エタノール、プロピレングリコール、もしくは当業者に公知の他の薬剤と併用で使用してもよい。

本発明の大環状化合物が、溶液または注射の形態で適用される場合、該化合物を、任意の従来の希釈剤に溶解または懸濁させることにより用いてもよい。希釈剤は、例えば、生理食塩水、リンガー液、水性グルコース溶液、水性デキストロース溶液、アルコール、脂肪酸エステル、グリセロール、グリコール、植物または動物供給源から得られる油、パラフィンなどを含んでいてもよい。これらの調製物は、当業者に公知の任意の従来法により調製してもよい。

経鼻投与用の組成物は、エアロゾル、滴下剤、粉末およびゲルとして配合させてもよい。エアロゾル配合剤は、典型的には生理学的に許容し得る水性または非水性溶媒中の有効成分の溶液または微細懸濁物を含む。そのような配合剤は、典型的には密閉容器中に滅菌形態の単回投与量または反復投与量で存在する。密閉容器は、噴霧装置で使用されるカートリッジまたはレフィルであってもよい。あるいは密閉容器は、単回使用の経鼻吸入器などの単回分注装置、または治療上効果的な量を送達するように設定されていて、内容物が完全に使用されると廃棄される調量弁付きのポンプ式アトマイザもしくはエアロゾルディスペンサであってもよい。投与形態がエアロゾルディスペンサを含む場合、それは噴射剤、例えば圧縮気体、例として空気、またはフルオロクロロ炭化水素もしくはフルオロ炭化水素をはじめとする有機噴射剤を含むであろう。

口腔または舌下投与に適した組成物としては、錠剤、トローチおよび香剤が挙げられ、その有効成分は、担体、例えば糖と、アカシア、トラガカントまたはゼラチンと、グリセリンと配合される。

経直腸投与用の組成物としては、従来の坐剤ベース、例えばココアバターを含む坐剤が挙げられる。

経皮投与に適した組成物は、軟膏、ゲルおよび貼付薬が挙げられる。

当業者に公知の他の組成物を、例えば膏薬など、経皮または皮下投与に適用することができる。

更に、組成物の配合に必要な成分と混和される単一または複数の有効成分を含むそのような医薬組成物を調製する際に、他の従来の薬理学的に許容し得る添加剤を、例えば賦形剤、安定化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、滑剤、甘味剤、着色剤、着香剤、等張剤、緩衝剤、抗酸化剤などを組み込んでもよい。添加剤として、例えば、デンプン、スクロース、フルクトース、デキストロース、ラクトース、グルコース、マンニトール、ソルビトール、沈降炭酸カルシウム、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ゼラチン、アカシア、ＥＤＴＡ、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタ重亜硫酸ナトリウムなどを挙げることができる。

幾つかの実施形態において、該組成物は、単位投与形態、例えば錠剤またはカプセル中で提供される。

更なる実施形態において、本発明は、有効量の本発明の化合物１種以上を含む医薬投与単位を含む容器を１個以上含むキットを提供する。

本発明は、本明細書に記載された化合物を含むプロドラッグを更に提供する。用語「プロドラッグ」は、生理学的条件下で、または加溶媒分解により、または代謝的に、薬学的に活性のある特異的化合物に変換される化合物を意味するものとする。「プロドラッグ」は、化学的に誘導体化されることで、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の幾つか、もしくは全てを保持するか、または全く保持しなくなり、そして（ii）対象において代謝されて親薬物化合物を生成する、本発明の化合物であってもよい。本発明のプロドラッグは、化合物が化学的に誘導体化されることで、（ｉ）親薬物化合物の生物活性の幾つか、もしくは全てを保持するか、または全く保持しなくなり、そして（ii）対象において代謝されて該化合物の生物活性誘導体を生成する、「部分プロドラッグ」であってもよい。化合物を誘導体化してプロドラッグを提供するための公知の技術を、用いることができる。そのような方法を利用して、化合物の加水分解可能なカップリングを形成してもよい。

本発明は、本発明の化合物が代謝および／もしくは内分泌障害、胃腸障害、心臓血管障害、肥満および肥満関連障害、中枢神経系障害、骨障害、遺伝子障害、増殖過剰性障害ならびに炎症性障害を予防ならびに／または処置するのに用いられる治療剤と併用して投与してもよいことを更に提供する。例示的な薬剤としては、鎮痛剤（オピオイド系鎮痛剤を含む）、麻酔剤、抗真菌剤、抗生物質、抗炎症剤（非ステロイド系抗炎症剤を含む）、駆虫薬、鎮吐薬、抗ヒスタミン剤、血圧降下剤、抗精神病薬、抗関節炎薬、鎮咳薬、抗ウイルス薬、心臓作用薬、下剤、化学療法剤（例えば、ＤＮＡ相互作用薬、代謝拮抗薬、チューブリン相互作用薬、ホルモン剤、およびアスパラギナーゼまたはヒドロキシ尿素などの薬剤）、コルチコイド（ステロイド）、抗うつ剤、抑制薬、利尿薬、催眠薬、ミネラル物質、栄養補助剤、副交感神経興奮薬、ホルモン（例えば、コルチコトロピン放出ホルモン、アドレノコルチコトロピン、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン、チロトロピン放出ホルモンおよび甲状腺刺激ホルモン）、鎮静剤、スルホンアミド、興奮剤、交感神経興奮薬、睡眠薬、血管収縮剤、血管弛緩剤、ビタミン剤およびキサンチン誘導体が挙げられる。

本発明により処置されるのに適した対象としては、非限定的に、鳥類およびホ乳類対象が挙げられ、好ましくはホ乳類である。本発明のホ乳類としては、非限定的に、イヌ科、ネコ科、ウシ属、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ブタ、げっ歯類（例えば、ラットおよびマウス）、ウサギ、霊長類、ヒトなど、および子宮内のホ乳類が挙げられる。本発明により処置される必要がある任意のホ乳類対象が、適している。ヒト対象が、好ましい。両方の性および発達の任意段階のヒト対象（即ち、新生児、幼児、児童、青年、成人）を、本発明により処置することができる。

本発明による例示的鳥類としては、ニワトリ、アヒル、七面鳥、ガン、ウズラ、ギジ、平胸類（例えば、オーストリッチ）および家庭で飼育される鳥（例えば、オウムおよびカナリア）、ならびに卵内の鳥が挙げられる。

本発明は、第一に、ヒト対象の処置に関係するが、本発明は獣医学的目的ならびに薬物スクリーニングおよび薬物開発目的で、動物対象、詳細にはホ乳類対象、例えば、マウス、ラット、イヌ、猫、家畜およびウマで実施することもできる。

グレリン受容体の調整物質、例えばアゴニストが効果的となるホ乳類（即ち、ヒトまたは動物）の状態を処置するための治療的使用において、本発明の化合物またはその適切な医薬組成物を、有効量で投与してもよい。該化合物の活性および治療効果の程度が変動するため、投与される実際の投与量は、一般に認識された因子、例えば年齢、対象の状態、送達経路および対象の体重に基づいて決定されるであろう。投与量は、１日あたり１〜４回の経口投与で約０．１〜約１００mg/kgであってもよい。加えて、１日あたり１〜４回の投与で、化合物を注射により投与あたりにおよそ０．０１〜２０mg/kg投与してもよい。処置を数週間、数ヶ月またはそれを超えて継続することができる。特定の状況での最適投与量の決定は、当業者の能力内である。

５．使用方法
本発明の化合物は、本明細書に記載されたものおよび更に非限定的に増殖過剰性障害、炎症性障害、組織障害、心臓血管障害、呼吸器障害、ウイルス感染およびそれらの組み合わせをはじめとする一定範囲の医療状態の予防および処置に用いることができ、その障害は、複数の病気に罹患した結果であってもよい。特定の実施形態において、疾患または障害は、癌である。

本発明の更なる態様によれば、増殖過剰性障害、例えば腫瘍、癌および新生物障害、ならびに前悪性および非新生物または非悪性の増殖過剰性障害の処置の方法が提供される。詳細には、本発明により処置されうる腫瘍、癌、および新生物組織としては、非限定的に、悪性障害、例えば乳癌、骨肉腫、血管肉腫、線維肉腫および他の肉腫、白血病、リンパ腫、洞腫瘍、卵巣癌、子宮癌、膀胱癌、前立腺癌および他の泌尿生殖器癌、結腸癌、食道癌、胃癌および他の胃腸癌、肺癌、骨髄腫、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、内分泌癌、皮膚癌、ならびにグリオーマおよび神経芽細胞腫をはじめとする悪性または良性の脳または中枢（ＣＮＳ）および末梢神経系の腫瘍が挙げられる。

本明細書で用いられる「処置」は、それに関連する障害または症状の治癒または完全な消滅を付与することを必ずしも意味していない。

本発明の化合物は、更に非限定的に、増殖過剰性障害、炎症性障害、呼吸器障害およびウイルス感染をはじめとする一定範囲の医療状態の処置のための医薬品を調製するために使用することができる。

本発明の更なる実施形態を、ここに以下の実施例を参照して記載する。これらの実施形態が本発明の実施形態の例示を目的とするもので、本発明の範囲を限定するものではないことを理解しなければならない。

実施例１
代表的なセリンプロテアーゼの阻害のためのアッセイ
以下に、代表的なセリンプロテアーゼとしてマトリプターゼのアッセイを記載するが、それは報告された方法に基づいている(Desilets, A.; Longpre, J.-M.; Beaulieu, M.-E.; Leduc, R. FEBS Lett. 2006, 580, 2227-2232.)。類似のアッセイを、他のセリンプロテアーゼ用に適用および入手することができる。

ＦＬＸ−８００ ＴＢＥマイクロプレートリーダー(米国バーモント州ウィヌースキのＢｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ)においてＡＭＣ−結合ペプチドからの蛍光の放出を測定することにより（励起：３６０nm、発光：４４１nm）、酵素活性をモニタリングした。精製ヒトマトリプターゼを、バースト滴定試薬（ｂｕｒｓｔ ｔｉｔｒａｎｔ）４−メチルウンベリフェリル−ｐ−グアニジノ安息香酸塩（ＭＵＧＢ）で活性部位滴定した。５００lg/mL ＢＳＡ、pH９を含有する１００mM Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中で、マトリプターゼを用いた酵素的アッセイを実施した。文献に記載された通り、ヒト可溶性フリンを発現させ、精製、滴定およびアッセイした(Denault, J.B.; Lazure, C.; Day, R; Leduc, R. Protein Expr. Purif. 2000, 19, 113-124.)。精製されたＨＡＴタンパク質を、ＭＵＧＢで活性部位滴定した。pH８．６の５０mM Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中で、ＨＡＴでのアッセイを実施した。

酵素を、フリンでは４〜１２．５nMの範囲の濃度、マトリプターゼでは２〜７nMの範囲の濃度、そしてＨＡＴでは２０pMの濃度に希釈して、１０μMと共に３７℃でインキュベートするか（初期スクリーニングの場合）、または被験化合物を適切に希釈して（反応速度分析の場合）、例えば０、５００、１０００、２０００nMとして、もしくは０、２５０、５００、１０００、２５００、５０００nMで室温で１５分間インキュベートした。蛍光発生基質（フリンでは４μM Ｂｏｃ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、マトリプターゼではＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、そしてＨＡＴで４μg Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＡＭＣ）の加水分解を追跡することにより、残留する酵素活性を測定した(米国ペンシルバニア州キングオブプリシアのＢａｃｈｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ)。濃度を上昇させる被験化合物の存在下で、飽和曲線を作成した。３回以上の独立した実験のデータを、典型的には平均化して、残留速度を、被験化合物濃度の関数としてプロットした。Ｅｎｚｆｉｔｔｅｒソフトウェア(米国ミズーリ州ファーガソンのＢｉｏｓｏｆｔ)を用いた式（１）への非線形回帰分析により、データを適合させた(Bieth, J.G. Methods Enzymol. 1995, 248, 59-84.)。
式（１）：

（式中、ｖ_０およびｖ_ｉは、それぞれ阻害剤の非存在下および存在下での基質加水分解の定常状態速度であり、［Ｅ］_０は酵素の初期濃度、［Ｉ］_０は阻害剤の初期濃度、そしてＫ_{ｉ（ａｐｐ）}は基質依存性の平衡解離定数である）。基質依存性定数Ｋ_ｉは、式（２）を用いて計算した(Bieth, J.G. Methods Enzymol. 1995, 248, 59-84.)。
式（２）：

（式中、［Ｓ］_０は基質の初期濃度であり、Ｋ_ｍは、酵素−基質相互作用でのミカエリス・メンテン定数である）。被験化合物の安定性を調査するために、１０μM被験化合物を特定濃度のマトリプターゼまたはＨＡＴと共に室温で特定時間インキュベートした。その後、タンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分解して、Ｇｅｌ Ｃｏｄｅ青色染色試薬を用いて明らかにした(米国イリノイ州ロックフォードのＰｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ)。

表に、代表的な本発明の化合物のマトリプターゼ阻害の結果を表す。

Ｋ_ｉは、非線形回帰分析を用いた速度から計算することができる。用いられたモデルは、競合酵素阻害式、Ｋ_ｍ０ｂｓ＝Ｋ_ｍ ^＊（１+［Ｉ］/Ｋ_ｉ）およびＹ＝Ｖ_ｍａｘ ^＊Ｘ/（Ｋ_ｍＯｂｓ＋Ｘ）である。Ｘは、基質濃度である。Ｙは、速度である（Copeland, R.A. Enzymes, 2nd edition, Wiley, 2000の式８．１１）。Ｋ_ｉは、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５ソフトウェア(米国カリフォルニア州サンディエゴのＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ)を用いて計算した。例えば化合物４５１は、Ｋ_ｉ＝１．４６μMを有し、化合物４５９は、Ｋ_ｉ＝２４５nMを有する。

阻害の選択性を決定するために、ＴＴＳＰおよび他のセリンプロテアーゼを、蛍光発生ペプチドＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣの存在下で被験化合物とインキュベートした。活性を３７℃で２０分間測定した。

実施例２
プロテアーゼ阻害アッセイ
(Li, P.; Jiang, S.; Lee, S.-L.; et al. J. Med. Chem. 2007, 50, 5976-5983.)。ウシトロンビン、ボーマン・バーク型阻害剤（ＢＢＩ）、および蛍光基質は、市販されていた(ミズーリ州セントルイスのＳｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ.)。プロテアーゼに対する本発明の化合物の阻害活性を、２種の異なる系で室温で測定した。第一のアッセイ系では、１００mg/mL ウシ血清アルブミンを含有する１００mMＴｒｉｓ−ＨＣｌ（pH８．５）の反応緩衝液を用いた。反応緩衝液１７０μLを含有するキュベットに、酵素溶液１０μLおよび阻害剤溶液１０μLを添加した。プレインキュベーションの後、蛍光ペプチド基質の溶液（１０μL）を添加して、キュベットの内容物を完全に混合した。蛍光分光光度計（日立Ｆ４５００）を励起波長３６０nmおよび発光波長４８０nmで用いて、基質の加水分解により放出された蛍光の変化を追跡することにより、残留酵素活性を決定した。例えば蛍光ペプチドＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣを、マトリプターゼ用の基質として用いた。ペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣを、トロンビン用の基質として用いた。６〜７種の異なる濃度の被験化合物の存在下で、加水分解速度を記録した。異なる基質濃度での２組のデータからのディクソンプロットにより、Ｋ_ｉ値を決定した。

７０kDa活性化マトリプターゼを、記載された通り単離した(Lin, C.-Y.; Anders, J.; Johnson, M.D.; Dickson, R.B. J. Biol. Chem. 1997, 272, 27558-27564; Lin, C.-Y.; Anders, J.; Johnson, M.; Sang, Q. A.; Dickson, R. B. J. Biol. Chem. 1999, 274, 18231-18236.)。第二のアッセイ系は、本質的に同一の結果をもたらし、１００mg/mL ＢＳＡを含有する１００mM Ｔｒｉｓ（pH８．３）の緩衝液中のマトリプターゼ用の基質としてＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＦＣペプチドを使用した。Ｔｅｃａｎ Ｕｌｔｒａ蛍光分光計(ノースカロライナ州ダーラムのＴｅｃａｎ)を用いて黒色９６穴プレート中で、合計容量２００μL中の精製マトリプターゼでアッセイを実施した。

実施例３
代表的なセリンプロテアーゼの阻害に関する細胞培養アッセイ
マトリプターゼｃＤＮＡでトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞中でのマトリプターゼ活性を阻害する能力について、被験化合物を検査した。被験化合物をモック細胞およびマトリプターゼをトランスフェクトした細胞と共に１８時間インキュベートした。溶媒中のタンパク質分解活性を、蛍光発生ペプチドＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣを用いて測定した。

実施例４
腫瘍転移についてのインビトロアッセイ
(Galkin, A.V.; Mullen, L.; Fox, W.D.; Brown, J.; et al. Prostate 2004, 61, 228-235)。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞を、ＡＴＣＣ(メリーランド州ロックビル)から得て、７％ウシ胎仔血清（カリフォルニア州タルザナのＯｍｅｇａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ)、１％ペニシリン−ストレプトマイシンおよび１％Ｌ−グルタミン(ニューヨーク州グランドアイランドのＧｉｂｃｏ)を補足したＲＰＭＩ−１６４０培地中で培養する。ＣＷＲ２２ＲＶ１細胞増殖速度に対する本発明の化合物の影響を試験するために、播種された細胞を４群に分割して、最初の播種後１、３、および５日目に、１、１０、または２５mM濃度の被験化合物またはビヒクル溶液で処置する。実験では、１日および１群あたり三枚ずつプレートを使用する。３、５、および７日目に、血球測定装置で細胞を計数する。細胞浸潤性アッセイ（カリフォルニア州テメキュラのＣｈｅｍｉｃｏｎ）を利用して、タンパク質の組換え基底膜マトリックス（ＥＣＭａｔｒｉｘ、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ）を介したＣＷＲ２２ＲＶ１細胞浸潤に対する本発明の化合物の影響を評価する。ＥＣＭａｔｉｘの再水和の後、２５mM被験化合物を含む、または含まない無血清培地０．４mL中のＣＷＲ２２ＲＶ１細胞（２×１０^５）を上のチャンバーに添加して、１０％ウシ胎仔血清を含有し２５mM被験化合物を含む、または含まない培地０．７５mLを予め充填した下のチャンバーに入れて、３７８℃で４８時間インキュベートする。インキュベーションの終了時に、培地および任意の非浸潤細胞を除去して、供給したクリスタルバイオレット溶液で膜を染色する。その後、膜をスライドガラスに載せて、細胞を光学顕微鏡で検査する。一群あたり膜６枚（±被験化合物処置）を倍率１００倍で分析する。膜あたり５ヶ所のフィールドを無作為に選択して、利用可能な孔の合計数のうちの平均浸潤細胞数を計数する。観察されたフィールドあたりの浸潤細胞の割合を計算する。実験は、二重測定で実施する。

実施例５
(Galkin, A.V.; Mullen, L.; Fox, W.D.; Brown, J.; et al. Prostate 2004, 61, 228-235.)。４〜６週齢雌無胸腺ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス(Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ)を、病原体フリーの条件下で飼育する。確立されたアンドロゲン非依存性（ＡＩ）の３種のＣＷＲ２２ＲおよびＣＷＲＳＡ６異種移植片細胞系から得た組換え基底膜 (Ｍａｔｒｉｇｅｌ；マサチューセッツ州ベッドフォードのＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ)と共に、細かく刻んだ腫瘍組織をマウスに皮下接種する。４〜１０日後に、およそ５×５mm^３の腫瘍を生成したマウスに、生理食塩水中の被験化合物（５０または２５mg/kgを１日２回、１週間に７回、腹腔内）またはビヒクルのみのいずれかを、同一の投与スケジュールで投与する。腫瘍を週２回、ノギスで計測し、腫瘍容積を式（π／６）×（大径）×（小径）^２により計算する(Press, M.F.; Bernstein, L.; Thomas, P.A.; Meisner, L.F.; Zhou, J.Y.; Ma, Y.; Hung, G.; Robinson, R.A.; Harris, C.; El-Naggar, A.; Slamon, D.J.; Phillips, R.N.; Ross, J.S.; Wolman, S.R.; Flom, K.J. J. Clin. Oncol. 1997, 15, 2894-2904.)。腫瘍接種の１８〜２５日後に動物を殺処分して、腫瘍組織を分析のために急速冷凍する。

実施例６
腫瘍転移のインビボアッセイ
６週齢ケラチン−５−マトリプターゼ・トランスジェニックマウスおよび同腹子対照マウス(List, K.; Szabo, R.; Molinolo, A.; Sriuranpong, V.; Redeye, V.; Murdock, T.; Burke, B.; Nielsen, B.S.; Gutkind, J.S.; Bugge, T.H. Genes Dev. 2005, 19, 1934-1950.)を、１種以上の濃度の被験化合物で処置する。その後、腰部中央の表皮ケラチノサイトの増殖速度に対する被験化合物の影響を、ビヒクル対照での処理結果と比較することにより決定する。

実施例７
鶏卵尿漿膜モデル
文献の方法を用いて、本発明の化合物の血管形成を阻害する能力を測定することができる(Ghiso, J.A.A.; et al. J. Cell. Biol. 1999, 147, 89-104.)。

実施例８
テザーの合成
Ａ．テザーＴ５の合成に関する標準的手順

ステップ５−１． 蒸留水（５Ｌ）中の３−メチル安息香酸エチル（５−０、３００ｇ、１．８３mol、１当量）の溶液に、臭素（２９２．５ｇ、１．８３mol）を一度に添加した。この混合物に、２００Ｗのランプ２台を照射した。ランプをフラスコ中央の外側に置いて、フラスコの周りに箱を置いた。照射の間、溶液を激しく撹拌した。温度を４５℃に上昇させると、溶液が反応の間に橙色から黄色へ、そしてほとんど無色へ変色した。４時間後に（本質的に無色の溶液）、ランプを消灯して、混合物を室温まで放冷した。混合物をＤＣＭ ２Ｌで希釈し、その後、水相をＤＣＭ ５００mLで抽出した。ひとまとめにした有機相をブラインで、その後、１０％チオ硫酸ナトリウム溶液で、そして最後に再度ブライン（pH＝５）で洗浄した。橙色の相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮して、次のステップで用いるのに十分な品質の５−１を液体として収率９６％で得た。
ＴＬＣ（１５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）： Ｒ_ｆ：０．５８、検出：ＵＶ

ステップ５−２． 室温で撹拌したエタノール（９５％、１Ｌ）中の５−１（１４９ｇ、０．６１１mol）の混合物に、蒸留水（３００mL）中のシアン化カリウム（６８ｇ、１．７当量）の溶液を、滴加漏斗を用いて滴加した（警告：毒物あり！ シアン化カリウムは公知の毒物であり、十分に喚起されたドラフトチャンバー内で適切に保護しながら取り扱わなければならない。ＨＣＮ検出器の存在下で反応を実施する。ガラス製品は全て反応後に水およびアセトンで洗浄し、洗浄溶液は、「シアン化物」であり「危険」であることが明確に判別される容器に入れて、正しく廃棄しなければならない）。溶液は、添加の間に黄色になった。添加が完了した後、反応混合物を６０℃まで２時間加熱し、その後、室温で一晩撹拌した（ＴＬＣ：１０％ＥｃＯＡｃ／９０％ヘキサン；検出：ＵＶ、ＣＭＡにより反応をモニタリング）。溶液を水（９００mL）で希釈し、その後、Ｅｔ_２Ｏで抽出した（９００mLで３回）。ひとまとめにした有機相をブラインで２回洗浄し（２回）、ＭｇＳＯ_２で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧蒸発させて、橙色油状物を与えた。油状残渣をシリカゲルのドライパックにより、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて精製して（勾配、５／９５から１５／８５へ）、５−２を黄色固体として得た（６６ｇ、２段階で５９％）。
ＴＬＣ（３０/７０ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ：０．４５、検出： ＵＶ；
^１Ｈ ＮＭＲ： δ １．６ ppm （２Ｈ, 三重線）, ３．８ ppm （３Ｈ, ｓ）, ４．４ ppm （２Ｈ, 四重線）,７．４−７．６ ppm （２Ｈ, ｍ）, ８．０−８．１ ppm （２Ｈ, ｍ）

ステップ５−３．室温のＴＨＦ／水（４．６Ｌ／２．３Ｌ）中の５−２（２２０ｇ、１．１７mol）の溶液に、塩化コバルト（５４．７ｇ、０．２３mol）を添加して、水素化ホウ素ナトリウム（１３２ｇ、３．５mol）を少しずつ添加した。水素発生が、観察される。添加後に、反応物を室温で一晩撹拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）でろ過して、ＴＨＦ １Ｌで洗浄した。ＴＨＦを減圧蒸発により除去し、その後、水酸化ナトリウムの溶液（０．５Ｎ、２Ｌ）を添加して、混合物をＥｔ_２Ｏで抽出した（３回）。ひとまとめにした有機相をブラインで洗浄し（２回）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮して、次のステップで直接使用されるのに適切な品質の粗液を５−２から５２％得た。
ＴＬＣ（５０/５０ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ：ベースライン、検出：ＵＶ、ニンヒドリン

ステップ５−４． 脱気したＤＭＦ（２００mL）中の５−３（１１８ｇ、０．６１mol）、Ｄｄｚ−ＯＰｈ（２１３ｇ、０．６７mol）およびトリエチルアミン（８５mL、０．６１mol）の溶液を、窒素雰囲気下、５０℃で２日間撹拌した。その後、混合物を水２．５Ｌで希釈した。水相をＥｔ_２Ｏで抽出した（３回）。ひとまとめにした有機相を水、水酸化ナトリウム（０．５Ｎ、２回）およびブライン（２回）で引き続き洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮して、褐色油状物を得た。粗材料をドライパック（勾配、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、０．５％Ｅｔ_３Ｎから２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、０．５％Ｅｔ_３Ｎへ；検出：ＵＶ＋ＣＭＡ）で精製して、５−４を１５６ｇ（６２％）得た。
ＴＬＣ（２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ：０．２３、検出：ＵＶ ＋ ＣＭＡ

ステップ５−５の還元と適合性のある他の保護基をこの段階で用い、標準的反応条件を用いて付加させることもできる。

ステップ５−５． −７８℃のＤＣＭ（２．１Ｌ）中の５−４（２９１．５ｇ、０．７mol）の溶液に、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ、ＤＣＭ中に１．０Ｍ、２．１Ｌ、２．１mol）を滴加漏斗で添加した。添加が完了したら、溶液を−７８℃で２時間撹拌するか、またはＴＬＣのモニタリング（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；検出：ＵＶ、ニンヒドリン）により完了が示されるまで撹拌した。その後、反応混合物を酒石酸の溶液（１．０Ｍ、４Ｌ）に緩やかに滴加することにより、クエンチした。得られた混合物をＤＣＭで抽出した（３回）。ひとまとめにした有機相をＥＤＴＡ四ナトリウム塩の０．６Ｍ溶液（２Ｌで１回）およびブライン（２Ｌで１回）で引き続き洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮して、生成物Ｄｄｚ−Ｔ５を黄色油状物（２５１．４ｇ、９６％）として得た。
ＴＬＣ（５０/５０, ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ：０．２５、検出： ＵＶ、ニンヒドリン;
^１Ｈ ＮＭＲ： δ （１．７ ppm （ｓ, ６Ｈ, ２ ｘ ＣＨ_３）, ２．８ ppm （ｔ, ２Ｈ，２ ｘ ＣＨ_２）, ３．４ ppm （四重線, ２Ｈ， ２ ｘ ＣＨ_２）, ３．８ ppm （ｓ, ６Ｈ， ２ ｘ ＯＣＨ_３）, ４．７ ppm （ｓ, ２Ｈ， ＣＨ_２）, ６．３−６．５ ppm （ｍ, ３Ｈ， ３ ｘ ＣＨ）, ７．０−７．４ ppm （ｍ, ４Ｈ， ４ ｘ ＣＨ）。

Ｂ．テザーＴ−２８の合成の標準的手順
米国特許第7,521,420も参照されたい。

ステップ２８−１． (Tius, M.A. J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 5959.)。酢酸（１１５mL）中のサリチルアルデヒド（２８−０、２３．４ｇ、０．１９mol、１．０当量）の溶液に、酢酸アンモニウム（１７ｇ、０．２２mol、１．１５当量）およびニトロメタン（３９．５mL、０．７３mol、３．８当量）を添加した。混合物を１１０℃で４．５時間加熱し、その後室温で冷却した。溶媒を真空除去してＤＣＭで希釈し、ブラインで洗浄して（３回）、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して（勾配、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを１０％、その後２０％、その後２５％）、２８−１を１４．５ｇ（４５．８％）得た。
ＴＬＣ （２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．２１,検出 ＵＶ, ＣＭＡ；
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_： δ８．１６−８．１１ （ｄ、 １Ｈ）, ７．９８−７．９３ （ｄ、 １Ｈ）, ７．４４ （ｄ、 １Ｈ）, ７．４３−７．３２ （ｍ, １Ｈ）, ７．３２−６．９８ （ｔ, １Ｈ）, ６．８７ （ｄ， １Ｈ）。

ステップ２８−２． ０℃のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（７／１、５００mL）中の２８−１（１４．５ｇ、０．０８８mol、１．０当量）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１０．０ｇ、２６．０mol、３．０当量）を少しずつ添加した。反応物を室温で温めて、完了するまでＴＬＣによりモニタリングした。水を緩やかに添加することにより、反応物をクエンチした。pHを１Ｍ ＨＣｌでpH７〜８に調整した。ＴＨＦを真空除去し、その後、残りの混合物をエーテルで抽出した（３回）。有機相をブラインで洗浄し（１回）、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させて、次のステップで使用されるのに十分な純度の２８−２を９．６ｇ（６６％）得た。
ＴＬＣ （２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．２３, 検出： ＵＶ, ＣＭＡ

ステップ２８−３． ９５％ＥｔＯＨ（２００mL）中の２８−２（９．６ｇ、０．０５８mol、１．０当量）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃを添加して、水素ガスを一晩バブリングした。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）でろ過して、溶媒を減圧蒸発させた。生成物のＥｔＯＡｃを同時蒸発させた。残渣（７．９ｇ）の２８−３は、任意の更なる精製を行わずに次にステップで使用した。
ＴＬＣ （２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．０,検出： ＵＶ, ＣＭＡ。

ステップ２８−４． ０℃のＤＣＭ中の２８−３（７．９ｇ、０．０５８mol、１．０当量）およびＥｔ_３Ｎ（１６．２mL、０．１２mol、２．０当量）の溶液に、ＤＣＭ中のＢｏｃ_２Ｏ（１２．７ｇ、０．０５８mol、１．０当量）の溶液を滴加した。反応混合物を、一晩撹拌した。反応混合物をクエン酸緩衝液（２回）およびブライン（２回）で洗浄して、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させた。粗残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを２０％、その後２５％）、２８−４（７．４ｇ、５４％、２段階）を得た。
ＴＬＣ （２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．３６, 検出： ＵＶ, ＣＭＡ

ステップ２８−５． ＴＨＦ（２００mL）中の２−ブロモエタノール（２．２９ｇ、４２．３mmol、１．０当量）の溶液に、イミダゾール（７．２ｇ、１０５．８mmol、２．５当量）を、その後ＴＢＤＭＳＣＩ（６．７ｇ、４４．４mmol、１．０５当量）を添加した。反応混合物を４時間撹拌すると、白色沈殿物が２〜５分後に形成し始めた。エーテル（２００mL）を添加して、有機相を塩化アンモニウムの飽和溶液（２回）、重炭酸ナトリウムの飽和溶液（１回）およびブライン（１回）で引き続き洗浄して、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させた。こうして得られた生成物（２８−Ａ、８．７ｇ、８６％）を、次の反応に直接使用した。
ＴＬＣ （２５/７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．８０,検出： ＵＶ, ＣＭＡ

ＤＭＦ（４０mL）中の２８−４（４．２ｇ、１７．８mmol、１．０当量）、２８−Ａ（６．４ｇ、２６．７mmol、１．５当量）およびヨウ化カリウム（５９１mg、３．６mmol、０．２当量）の溶液に、炭酸カリウム（２．７ｇ、１９．６mmol、１．１当量）を添加して、混合物を７５℃で一晩加熱した。その期間の後、ＴＬＣで反応が完了していないことが示され、そのため２８−Ａおよび炭酸カリウムを更に１当量添加して、混合物を追加で一晩撹拌した。ＤＭＦを真空除去した（油圧ポンプ）。油状残渣を水で希釈して、生成物をエーテルで抽出した（３回）。有機相をブラインで洗浄し（２回）、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、２８−５を５．２ｇ（７４％）得た。
ＴＬＣ （３５/６５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．７９, 検出： ＵＶ, ニンヒドリン
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_： δ ７．０５ （ｍ, ２Ｈ）, ６．７８ （ｍ, ２Ｈ）, ４．６ （ｂｓ, １Ｈ）, ３．９５ （ｍ, ２Ｈ）, ３．８８ （ｍ, ２Ｈ）, ３．２８ （ｂｑ, ２Ｈ）, ２．７２ （ｔ, ２Ｈ）, １．３ （ｓ, ９Ｈ）, ０．８ （ｓ, ９Ｈ）, ０．０ （ｓ, ６Ｈ）。

ステップ２８−６． ＴＨＦ（２０mL）中の２８−５（２．５ｇ、１３．３mmol、１．０当量）の溶液に、ＴＨＦ中の１．０Ｍ ＴＢＡＦ（１５．９mL、１５．９mmol、１．２当量）を添加して、反応物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物をエーテル（１５０mL）で希釈し、その後、塩化アンモニウムの飽和溶液（２回）およびブライン（１回）で洗浄して、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して溶媒を減圧蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを２５％から４０％へ）、Ｂｏｃ−Ｔ２８を３．５ｇ（９４．６％）を得た。
ＴＬＣ （５/６５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ＝ ０．２１,検出： ＵＶ,ニンヒドリン；
^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）_：δ ７．３ （ｔｄ, １Ｈ）, ７．１ （ｄｄ, １Ｈ）, ６．８６ （ｍ, ２Ｈ）, ４．９ （ｂｓ, １Ｈ）, ４．１ （ｍ, ２Ｈ）, ４．０ （ｍ, ２Ｈ）, ３．３ （ｂｓ, ２Ｈ）, ２．８ （ｔ, ２Ｈ）, １．４ （ｍ, ９Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_：δ １５７．２, １５６．６, １３０．８, １２８．０, １２７.６, １２０．９, １１１．４, ７９．７, ６９．８, ６１．４, ４０．９, ３２．６, ２８．６；
ＬＣ−ＭＳ （勾配 Ａ４）： ｔ_Ｒ： １０．２ 分; （Ｍ＋Ｈ）^＋ ２８１, （Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ）^＋ ３０４

Ｃ．テザーＴ２９の合成の標準的手順

ステップ２９−１： ０℃のＴＨＦ（ＤｒｉＳｏｌｖ等級）中の水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ、３mol当量）の溶液に、３−シアノベンゾアルデヒド（２９−０、１当量）を少しずつ添加した。混合物を０℃で１時間（または出発原料が消失するまで）撹拌し、その後、窒素雰囲気下のオイルバス中で一晩、加熱還流した（７０℃）。反応をクエンチするために、溶液を窒素下で０℃に冷却し、次のものを引き続き添加した：水、ＮａＯＨ（１５％）、その後、水（それぞれＬＡＨ ５ｇに対して５mL：５mL：１５mLの比で用いなければならない）（警告：水素ガス発生）。溶液をろ過し、塩をＴＨＦで洗浄し、ひとまとめにしたろ液を減圧濃縮して、粗アミノアルコールを、典型的には次のステップで用いられるのに十分な純度で得た（Ｒ_ｆ:ベースライン, ３０／７０, ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，検出: ＵＶ,ニンヒドリン）。

ステップ２９−２： 窒素雰囲気下、０℃で脱気されたＤＭＦ中のステップ２９−１の生成物（１当量）およびＤｄｚ−Ｎ_３（１．０５当量）の溶液に、テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ、１．０５当量）を添加した。１０分後に、ＤＩＰＥＡ（１．０５当量）を添加し、その後、混合物を５０℃のオイルバスで一晩撹拌した。混合物を減圧濃縮して（油圧ポンプ）、ＤＭＦを除去し、その後、残渣をＤＣＭに溶解して、クエン酸緩衝液（２回）、飽和重炭酸ナトリウム（１回）、およびブライン（２回）で引き続き洗浄し、その後、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮した。こうして得られた粗材料をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、０．５％Ｅｔ_３Ｎから６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、０．５％Ｅｔ_３Ｎへ；ＤＣＭを混合物に添加して、開始時に残渣を溶解した）、所望の化合物、ＤｄＺ−Ｔ２９（ＴＬＣ：５０％ヘキサン／ＥｔＯＡｃ；検出：ＵＶ，ニンヒドリン）を得た。

他の典型的な窒素保護基、例えば、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｃｂｚを、標準の反応条件を用いてステップ２９−２で配置することもできる。別法として、水素化ホウ素ナトリウムを塩化コバルトと共に用い、その後、第一級アミンをＢｏｃ（図示しない）または他の適切なＮ−保護基で選択的に保護することにより、ステップ２９−１における還元を実施することができる。

Ｄ． テザーＴ−３０の合成の標準的手順

ステップ３０−１． ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ（１：１）１２５mL中の２−ブロモフェネチルアミン（３０−０、５．０ｇ、２５．０mmol、１．０当量）の溶液に、重炭酸ナトリウム（２．３ｇ、１７．５mmol、１．１当量）を添加した。その後、混合物を０℃に冷却し、Ｂｏｃ無水物（５．５ｇ、２５．０mmol、１．０当量）を一度に添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、その後、室温まで昇温させて、一晩撹拌した。溶媒を減圧蒸発させて、残渣をＥｔＯＡｃ／Ｈ_２Ｏ（１：１）に溶解した。分離された有機相をＨ_２Ｏ（２回）および飽和塩化ナトリウム（２回）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過してろ液を減圧蒸発させた。得られた黄色油状物をＤＣＭで希釈し、減圧蒸発させて（手順を３回繰り返した）、３０−１ ７．５ｇ（１００％）を白色固体として得た。
ＴＬＣ （ヘキサン/ＥｔＯＡｃ, ７:３）: Ｒ_ｆ＝ ０．７５,検出:ＵＶ,ニンヒドリン

ステップ３０−２． アルゴン雰囲気下で火力乾燥させたフラスコに、３０−１（６．３ｇ、２１．０mmol、１．０当量）、再結晶化ヨウ化銅（Ｉ）（８０．０mg、０．４２mmol、０．０２当量、Organometallics in Synthesis, 2^ndedition, Manfred Schlosser, Ed., 2002, p 669の手順を参照）およびジクロロビス（ベンゾニトリル）パラジウム（II）（２４２mg、０．６３mmol、０．０３当量）を添加した。フラスコをアルゴンでパージし（５〜１０分間）、無水１，４−ジオキサン ２０mLを添加した後、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン（ヘキサン中の１０％（w/w）溶液、３８５μL、１．２６mmol、０．０６当量）およびジイソプロピルアミン（３．６mL、２５．２mmol、１．２当量）を添加した。その後、混合物をアルゴンで再度パージして（５〜１０分間）、３−ブチノール（３０−Ａ、２．４mL、３１．５mmol、１．５当量）を混合物に滴加して、ＴＬＣモニタリングを行いながら、アルゴン下、室温で２４時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルパッドでろ過して、ＴＬＣにより更なる材料溶出が示されなくなるまでＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液を減圧蒸発させて、残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ，７：３）、３０−２を薄黄色油状物として５．５ｇ（９０％）得た。
ＴＬＣ （ヘキサン/ＥｔＯＡｃ, ７:３）: Ｒ_ｆ= ０．２０,検出: ＵＶ, ＣＭＡ

ステップ３０−３． 窒素下、９５％ＥｔＯＨ中のＢｏｃ−アミノアルコール３０−２（６．１ｇ、２１．１mmol、１．０当量）の溶液に、酸化白金（IV）（４４５mg、２．１１mmol、０．１当量）を添加した。混合物を８０psi Ｈ_２で１６時間撹拌した（引き続き反応を１気圧Ｈ_２の室温で２４〜３６時間実施した）。少量のアリコットを取り出して、^１Ｈ ＮＭＲにより反応をモニタリングした。反応が完了したら、窒素を混合物に１０分間バブリングして過剰な水素を除去した。溶媒を減圧蒸発させて、ＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルパッドでろ過して、ＴＬＣにより更なる材料溶出が示されなくなるまでＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液を減圧蒸発させて、残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ，７：３）、Ｂｏｃ−Ｔ３０を薄黄色油状物として４．５ｇ（７５％）得た。
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）: d ７．１８-７．１１, （ｍ, ４Ｈ）, ４．６５, （ｂｓ, １Ｈ）, ３．７２-３．６５, （ｔ, ２Ｈ）, ３．３２ （ｂｓ, ２Ｈ）, ２．８５-２．８０, （ｔ, ２Ｈ）, ２．７０-２．６５, （ｔ, ２Ｈ）, １．７１-１．６６ （ｍ, ４Ｈ）, １．４４ （ｓ, ９Ｈ）

ステップ３０−２および３０−３の反応系列に適合性のある他のＮ−保護基を、用いることもできる。

Ｅ．テザーＴ−３２の合成の標準的手順
Ｔ−３２の反応スキームを、図４に表わす。

ステップ３２−１． −３０℃のＣＨ_３ＣＮ（５００mL）中の４−ヒドロキシベンゾニトリル（３２−０、１５．０ｇ、１０９mmol、１．０当量）の溶液に、トリフリン酸（１１．６mL、１３１mmol、１．２当量）を添加した。ＮＢＳ（２０．３ｇ、１１７mmol、１．０５当量）を少しずつ添加することで、温度が−１０℃を超えないようにした。懸濁物が得られ、その溶液が数分後に均質になった。反応混合物を室温に保持し、一晩撹拌した。溶液を水性飽和ＮａＨＣＯ_３で処理して、水相をＥｔＯＡｃで抽出した（１回）。水相を６Ｍ ＨＣｌで酸性化して、ＥｔＯＡｃで抽出した。その後、有機相を水性飽和ＮＨ_４Ｃｌで抽出した（２回）。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過してろ液を減圧濃縮した。最終化合物が過剰の（^１Ｈ ＮＭＲで１０％を超える）スクシンイミド副生成物を含有することが見出されれば、固形残渣を水中で一晩撹拌し、沈殿物をろ過して、一晩真空乾燥させた（油圧ポンプ）。^１Ｈ ＮＭＲにより、所望の化合物３２−１の同一性を確証した。生成物は、更に精製せずに次のステップで使用するのに適していた（収率：９４％）。
ＴＬＣ （８０％ＥｔＯＡｃ, ２０％ヘキサン）: Ｒ_ｆ= ０．４７，検出:ＵＶおよびＫＭｎＯ_４

ステップ３２−２． ＤＭＦ（３００mL）中の３２−１（１１．３ｇ、５７．１mmol、１．０当量）の溶液に、炭酸カリウム（８．７ｇ、６２．８mmol、１．１当量）、ヨウ化カリウム（１．９ｇ、１１．４mmol、０．２当量）およびＴＢＤＭＳ−ブロモエタノール（３２−Ａ、２０．５ｇ、８５．７mmol、１．５当量）を添加した。得られた混合物７０℃で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、ブラインを添加して、相を分離した。水相をエーテルで抽出して、ひとまとめにした有機相をブラインで抽出した（２回）。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させて、減圧濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（２０％ＥｔＯＡｃ、６０％ヘキサン）、３２−２を黄色固体として得た（収率１００％）。
ＴＬＣ （４０％ＥｔＯＡｃ, ６０％ヘキサン）: Ｒ_ｆ= ０．６３，検出: ＵＶおよびＫＭｎＯ_４

ステップ３２−３． ０℃のＴＨＦ（１０mL）中の３２−２（５４８mg、１．５mmol、１当量）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ、ＴＨＦ中の１Ｍ、３．０mL、３．０mmol、２．０当量）を添加し、その後、混合物を室温で２時間撹拌した。クエン酸（１Ｍ、５mL）を添加して、混合物を１時間撹拌した。エーテルを添加して、相を分離し、その後、有機相を１Ｍクエン酸で抽出した（２回）。ひとまとめにした水相を３Ｍ ＮａＯＨでpH＝１４に調整し、その後、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した（４回）。有機相をＫ_２ＣＯ_３で乾燥させて、減圧濃縮した。こうして得られた３２−２を、次のステップで直接使用した。
ＴＬＣ （２０％ ＥｔＯＡｃ, ８０％ヘキサン）: Ｒ_ｆ=ベースライン；検出:ＵＶおよびＫＭｎＯ_４

ステップ３２−４． ＴＨＦ（６mL）中の３２−３（１．５mmol、１．０当量）の溶液に、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（３７１mg、１．７mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（１８mg、０．１５mmol、０．１当量）を添加して、混合物を３時間撹拌した。ブラインを添加して、水相をエーテルで抽出した（３回）。ひとまとめにした有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させて、減圧濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（３０％ＥｔＯＡｃ、７０％ヘキサン）、白色固体の３２−４を得た（収率：６７％、２段階）。ジオキサン中の水性水酸化ナトリウム（１Ｎ）を、このステップで基剤として用いて、同等の収率を得ることもできる。
ＴＬＣ （３０％ ＥｔＯＡｃ, ７０％ヘキサン）: Ｒ_ｆ= ０．３７；検出： ＵＶおよびＫＭｎＯ_４

ステップ３２−５． ジイソプロピルアミン（１００mL）中の３２−４（８．２ｇ、１７．３mmol、１．０当量）の溶液に、Ｄｄｚ−プロパルギルアミン（３２−Ｂ、９．６ｇ、３４．６mmol、２．０当量）を添加して、混合物をＡｒで２０〜３０分間脱気した。ＰＰｈ_３（５４６mg、２．０８mmol、０．１２当量）、ＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２（７３０mg、１．０４mmol、０．０６当量）およびＣｕＩ（１３１mg、０．６９mmol、０．０４当量）を添加して、得られた混合物を７０℃で一晩撹拌した。溶液をシリカゲルパッドでろ過して、ＥｔＯＡｃですすぎ、その後、溶媒を減圧蒸発させた。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して（４０％ＥｔＯＡｃ、６０％ヘキサン）、３２−５を橙色固体として得た（収率１００％）。
ＴＬＣ （４０％ＥｔＯＡｃ, ６０％ヘキサン）：Ｒ_ｆ= ０．２７；検出:ＵＶおよびＣＭＡ

ステップ３２−６． ９５％エタノール（１００mL）中の３２−５（１５．０ｇ、２２．２mmol、１．０当量）の溶液に、ＰｔＯ_２（５００mg、２．２mmol、０．１当量）を添加して、水素ガスを溶液に１時間バブリングした。得られた混合物を、室温で一晩撹拌した。その時点で反応が終了していなければ（^１Ｈ ＮＭＲ）、ＰｔＯ_２を更に０．１当量添加して、水素ガスを溶液にバブリングし、混合物を再度一晩撹拌した。Ａｒを反応物にバブリングして過剰の水素を排出させ、溶液をシリカゲルパッドでろ過して、パッドをＥｔＯＡｃですすいだ。ひとまとめにした溶媒を、減圧蒸発させた。得られた３２−６を次のステップで用いた（収率１００％）。

ステップ３２−７． ＴＨＦ（１００mL）中の３２−６（１４．５ｇ、２１．５mmol、１．０当量）の溶液に、ＴＨＦ中の１Ｍ ＴＢＡＦ（３２．３mL、３２．３mmol、１．５当量）を添加して、混合物を１時間撹拌した。ブラインを添加して、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。ひとまとめにした有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させて、ろ過してろ液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（１００％ＥｔＯＡｃ）、Ｄｄｚ−Ｔ３２（Ｂｏｃ）を得た（収率：８８％）。
ＴＬＣ （１００％ ＥｔＯＡｃ）：Ｒ_ｆ= ０．２４；検出：ＵＶおよびＣＭＡ。
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_: δ ７．７４ （１Ｈ， ｄｄ）, ７．３５ （１Ｈ， ｄ）, ６．７２ （１Ｈ， ｄ）, ６．５３-６．４９ （２Ｈ， ｍ）, ３．６１-３．２９ （１Ｈ， ｍ）, ５.０６ （１Ｈ， ｔ）, ４．２５-４．０１ （２Ｈ， ｍ）, ３．９１-３．８９ （２Ｈ， ｍ）, ３．７３ （３Ｈ， ｓ）, ２．９９ （２Ｈ， ｄｄ）, ２．６３ （２Ｈ， ｔ）, １．７１ （８Ｈ， ブロード）, １．５３ （９Ｈ， ｓ）;
^１３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３, ppm）： δ １６３．８, １６２．２, １６１．０, １５９．７, １５５．９, １４９．４, １３０．０, １２９．１, １２８．０, １２６．８, １１０．８, ９８．１, ８０．９, ７９．３, ６９．７, ６１．３, ５５．５, ３９．１, ２９．３, ２８．５, ２６．７。

Ｆ．テザーＴ５２およびテザーＴ５３の合成の標準的手順

ステップＴ５２−１． ＤＭＦ（ＤｒｉＳｏｌｖ（登録商標））中の３−ヨードフェノール（５２−０、１．０当量）の溶液に、水素化ナトリウム（鉱物油中の６０％、０．１当量）を少しずつ添加する（警告！水素ガスが発生すると思われる）。反応物を窒素下、１００℃で１時間加熱し、その後、炭酸エチレンを添加して、反応混合物を１００℃で一晩加熱する。反応をＴＬＣでモニタリングする（条件：２５／７５ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。反応混合物を放冷し、その後、溶媒を減圧蒸発させる。残渣の油状物をＥｔ_２Ｏ（１．５Ｌ）で希釈し、その後、１Ｎ水酸化ナトリウム（３回）およびブライン（２回）で引き続き洗浄して、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて、ろ過してろ液を減圧蒸発させる。粗生成物を真空蒸留するか、またはフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、５２−１を得る。

ステップＴ５２−２． ＣＨ_３ＣＮ中の５２−１（１．０当量）およびＢｏｃ−アリルアミン（１．３当量）の溶液に、アルゴンを２０〜３０分間バブリングする。新たに蒸留されたＥｔ_３Ｎ（ＣａＨ_２と共に４時間還流し、その後蒸留したもの、３．６当量）を添加して、アルゴンを１０〜１５分間バブリングする。その後、トリス（ｏ−トリル）ホスフィン（０．０３当量）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（０．０３当量）を添加する。反応物をＴＬＣでモニタリングしながら、還流雰囲気で２時間撹拌する。反応が完了しなければ、より長時間利用することができる。揮発物を減圧除去して、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、Ｂｏｃ−Ｔ５２を得る。

ステップＴ５２−３． Ｂｏｃ−Ｔ５２（１．０当量）を１０％Ｐｄ／Ｃ（１５重量％）および９５％ＥｔＯＨを添加する。混合物を水素ガスの圧力下、水素添加装置（例えば、Ｐａｒｒ）内に２４時間配置する。ＬＣ−ＭＳまたは１Ｈ ＮＭＲにより、モニタリングを実施することができる。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでろ過し、その後減圧濃縮して、Ｂｏｃ−Ｔ５３を得て、それをフラッシュクロマトグラフィーにより精製することができる。

Ｇ．テザーＴ２０１の標準的手順
Ｔ２０１の反応スキームを、図５に表わす。

ステップ２０１−１． −３０℃のトルエン（３２０mL）中のｔ−ブチルアミン（４０mL、３７８mmol、３．０当量）の溶液に、Ｂｒ_２（７．１mL、１３９mmol、１．１当量）を緩やかに添加した（１０分間）。混合物を−７８℃に冷却して、２−ヒドロキシベンゾニトリル（２０１−０、１５．０ｇ、１２６mmol、１．０当量）をＣＨ_２Ｃｌ_２（８０mL）中で添加した。２−ヒドロキシベンゾニトリルは、ＤＣＭにあまり溶解されず、懸濁物としての反応物にピペットで添加した。不均質混合物を緩やかに室温で冷却して、一晩撹拌した。ブラインを添加し、相を分離して、水相を酢酸エチルで抽出した。有機相をひとまとめにして、１０％ＮａＯＨで抽出した（２回）。水相を６Ｎ ＨＣｌで酸性化して、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させて、減圧濃縮し、２０１−１を得た（収率：９０％）。
ＴＬＣ （６０％ ＥｔＯＡｃ, ４０％ヘキサン）: Ｒ_ｆ= ０．３２；検出:ＵＶおよびＫＭｎＯ_４。

ステップ２０１−２． ＴＢＤＭＳ−ブロモエタノール（３２−Ａ）でのアルキル化による２０１−１から２０１−２への変換を、本質的にはステップ３２−２の３２−２の合成で記載された通り実施した。

ステップ２０１−３． ＬＨＭＤＳ ３当量が変換に用いられ、反応時間が２〜３日であったこと以外は、本質的にはステップ３２−３の２０１−３の合成に記載された通り、２０１−２からのアミジン２０１−３の形成を実施した。

ステップ２０１−４． Ｂｏｃによる２０１−３のアミジン基の保護を、本質的にはステップ３２−４の３２−４の合成に記載された通り実行した。

ステップ２０１−５． ２０１−５を得るための、２０１−４とＤｄｚ−プロパルギルアミン（３２−Ｂ）との薗頭カップリング反応を、本質的にはステップ３２−５の３２−５の合成に記載された通り実施した。しかしカップリング反応は完了せず、出発原料を２回目に同条件下で処理して、生成物を得た。

ステップ２０１−６． ２０１−５の水素化および脱保護を、本質的にはステップ３２−６のＤｄｚ−Ｔ３２（Ｂｏｃ）の合成に記載された通り実施して、Ｄｄｚ−Ｔ２０１（Ｂｏｃ）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_： δ ７．８７ （１Ｈ， ｄ）, ７．２８−７．２５ （１Ｈ， ｍ）, ７．１０ （１Ｈ， ｔ）, ６．５１−６．４６ （２Ｈ， ｍ）, ６．３１ （１Ｈ， ｔ）, ５．３０−５．２０ （１Ｈ， ｍ）, ３．９０−３．８５ （２Ｈ， ｍ）, ３．８５−３．８０ （２Ｈ， ｍ）, ３．７４ （６Ｈ， ｓ）, ３．１５−３．０５ （２Ｈ， ｍ）, ２．６７ （２Ｈ， ｔ）, １．８５−１．７１ （２Ｈ， ｍ）, １．７１ （６Ｈ， ｓ）, １．５３ （９Ｈ， ｓ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）_：δ １６０．８, １５５．６, １５５．５, １３５．６, １３３.９, １２９．９, １２７．９, １２５．０, １０３．３, ９８．２, ８０．８, ７９．８, ６１．９, ６０．６, ５５．５, ４０．２, ３１．３, ２９．５, ２８．５, ２７．１, １４．４。

Ｈ．テザーＴ２０２およびＴ２０３の標準的手順
アミジン部分をテザーに組み入れた後で、テザーＴ３２およびＴ２０１に関して既に記載された通り分子の残り部分に付加するか、またはマスキングされたアミジン基としてニトリルを用い、その後、ニトリルをアミジンに変換することにより、これらのテザーを調製することができる。前者のアプローチでは、２−ブロモ−５−シアノフェノールから出発すればＴ２０２に到達することができ、２−ブロモ−３−シアノフェノールから出発すればＴ２０３に到達することができる。

後者では、化合物４５１に関して記載された変換を、以下に例示する適切な大環状ニトリル上で用いることができる。

実施例９
大環状化合物の合成
Ａ．代表的な本発明の大環状化合物を合成するための標準的手順
化合物４５１の反応スキームを、図１に表わす。

ステップ４５１−１． Ｈ−Ｐｈｅ（４ＣＮ）−ＯＢｎの合成 Ｈ−Ｐｈｅ（４ＣＮ）−ＯＨ（２．８５ｇ、１５mmol、１．０当量）のトルエン（７５mL）溶液に、ｐ−ＴＳＡ（３．４２ｇ、１８mmol、１．２当量）、ＢｎＯＨ（７．８mL、７５mmol、５．０当量）を添加した。Ｈ_２Ｏをディーンスタークトラップで除去しながら、混合物を４時間加熱還流した。混合物を室温まで放冷し、Ｅｔ_２Ｏで希釈して０℃（アイスバス）で４５分間撹拌した。得られた白色沈殿物をろ過して、低温Ｅｔ_２Ｏですすいだ。白色固体を１Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３溶液に溶解し、その後、室温で３０分間撹拌した。得られた水相をＥｔＯＡｃで洗浄した（４回）。ひとまとめにした有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して減圧蒸発させ、薄橙色油状物を得た（３．１０ｇ、収率７０％）。
^１Ｈ ＮＭＲ： δ １．６０ （ｂｒ ｓ, ２Ｈ）, ３．０２ （ｄｑ, ２Ｈ）, ３．７７ （ｔ, １Ｈ）, ５．１３ （ｑ, ２Ｈ）, ７．２１−７．５２ （ｍ, ９Ｈ）。

ステップ４５１−２ ジペプチドの形成． ＴＨＦ−ＤＣＭ混合物（１：１、２５mL）中のＨ−Ｐｈｅ（４ＣＮ）−ＯＢｎ（２．９ｇ、１０．２７mmol、１．０当量）の溶液に、Ｂｏｃ−ＮＭｅＡｌａ（２．１５ｇ、１０．６mmol、１．０３当量）、６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ（１．７４ｇ、１０．３mmol、１．１当量）を０℃（アイスバス）で添加した。ＤＩＰＥＡ（８，９４mL、５１．３５mmol、５．０当量）およびその後、ＥＤＣＩ（２．１７ｇ、１１．３mmol、１．１当量）を添加して、混合物を室温で一晩撹拌した。揮発物を減圧蒸発させて、得られた粗油状物をＥｔＯＡｃに溶解した。その溶液を１Ｍクエン酸緩衝液（pH＝３．５、２回）、Ｈ_２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで引き続き洗浄し、その後、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して減圧蒸発させた。ひとまとめにした有機相をＨ_２Ｏ、飽和ＮＨ_４Ｃｌ、ブラインで洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して真空蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで４０％その後、５０％）、保護されたジペプチド４．５０ｇ（９３％）を得た。
ＴＬＣ（５０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）：Ｒ_ｆ： ＝ ０．１５, 検出： ＵＶ,ニンヒドリン。

保護されたジペプチド（４．４６ｇ、９．６mmol、１．０当量）を、ＭｅＯＨ中の３．３Ｎ ＨＣｌ溶液（３０mL、９６mmol、１０当量）に溶解した。混合物を室温で１時間撹拌した。その後、揮発物を減圧蒸発させ、得られた粗油状物を真空乾燥させて（油圧ポンプ）、所望の化合物を非晶質固体として得た（３．５０ｇ、１００％）。

ステップ４５１−３ Ｂｏｃ−Ｔ６９−ＯＴｓの合成． Ｂｏｃ−Ｔ６９（４．９４ｇ、１４．７mmol、１．０５当量）のＤＣＭ（３６mL）溶液に、ＤＭＡＰ（３４２mg、２．８mmol、０．２当量）およびＥｔ_３Ｎ（９．８mL、７０mmol、５．０当量）を添加して、混合物を０℃（アイスバス）で１５分間撹拌した。その後、ＴｓＣｌ（２．６７ｇ、１４mmol、１．０当量）のＤＣＭ溶液（２４mL）を０℃で少しずつ添加した。混合物を０℃で４５分間、その後、室温で一晩撹拌した。ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液を添加して、二相に分離させて、水相をＤＣＭで洗浄した（３回）。ひとまとめにした有機相を、１Ｍ ＨＣｌ（2回）およびブラインで洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して減圧蒸発させた。粗生成物を、更に精製せずに次のステップで用いた（６．９０ｇ、１００％）。
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３）： δ１．３４ （ｓ， ９Ｈ）， １．６０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４４ （ｍ, ２Ｈ）, ２．９９ （ｍ, ３Ｈ）, ４．０４ （ｍ, ２Ｈ）, ４．３０ （ｍ, ２Ｈ）, ４．５９ （ｂｒ ｓ, １ Ｈ）, ６．３５ （ｍ, １Ｈ）, ６．５０ （ｍ, １Ｈ）, ６．９４ （ｍ, １Ｈ）, ７．２６ （ｄ、 Ｊ＝８．４ Ｈｚ, ２Ｈ）, ７．７２ （ｄ、 Ｊ＝８．４ Ｈｚ, ２Ｈ）。

ステップ４５１−４ Ｂｏｃ−Ｔ６９−Ｃｐｇ−ＯＭｅの合成． ＥｔＣＮ／ＤＭＦ混合物（３：１、２０mL）中のＢｏｃ−Ｔ６９−ＯＴｓ（６．９ｇ、１４．７mmol、１当量）の溶液に、Ｈ−Ｃｐｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（３．６５ｇ，２２．１mmol，１．５当量）、ＫＩ（オーブンで一晩乾燥させたもの、６．０９ｇ、３６．７mmol、２．５当量）およびＤＩＰＥＡ（７．７mL、４４．１mmol、３．０当量）を室温で添加した。ＬＣ−ＭＳによりモニタリングしながら、反応混合物を１０８℃で３０時間撹拌した。反応物を室温まで放冷し、その後、Ｈ_２Ｏでクエンチした。混合物をＥｔＯＡｃで希釈して、水相をＥｔＯＡｃで洗浄した（３回）。ひとまとめにした有機相を、１Ｍクエン酸緩衝液（pH＝３．５）、Ｈ_２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで引き続き洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して減圧蒸発させた。粗生成物を、更に精製せずに次にステップで用いた（５．９８ｇ、９６％）。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ６．２４分（Ａ４ｂ）,［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４２５

ステップ４５１−５ Ｂｏｃ−Ｔ６９−Ｃｐｇ−ＯＨの合成．ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物（９：１、９０mL）中のＢｏｃ−Ｔ６９−Ｃｐｇ−ＯＭｅ（５．９８ｇ、１４．０mmol、１．０当量）の溶液に、ＭｅＯＨ中の２Ｍ ＮａＯＨ溶液（１４．１mL、２８．２mmol、２．０当量）を添加した。混合物を室温で４８〜７２時間撹拌した。揮発物を減圧蒸発させて、残渣を水で希釈した。水相をＥｔ_２Ｏで洗浄し、その後、pH＝１〜２に酸性化した。酸性相をＥｔＯＡｃで洗浄した（３回）。ひとまとめにした有機相を飽和ＮＨ_４Ｃｌおよびブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して減圧蒸発させた。粗固体をヘキサン／ＤＣＭ混合物（９：１）と共に磨砕して、白色固体を得た（３．７６ｇ、６５％）。
ＬＣ−ＭＳ： ｔ_Ｒ ＝ ６．１２分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４１１

ステップ４５１−６ フラグメントのカップリング． ＤＣＭ／ＴＨＦ混合物（１：１、９０mL）中のＢｏｃ−Ｔ６９−Ｃｐｇ−ＯＨ（３．６０ｇ、９．２mmol、１．０当量）の溶液に、Ｈ−ＮＭｅＡｌａ−Ｐｈｅ（４ＣＮ）−ＯＢｎ・ＨＣｌ（３．３６ｇ、９，２０mmol、１．０５当量）を添加して、混合物を０℃（アイスバス）で１５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（９．２３mL、５３mmol、６．０当量）と、その後、ＨＡＴＵ（３．５０ｇ、９．２０mmol、１．０５当量）を添加して、ＬＣ−ＭＳでモニタリングしながら、混合物を室温で４８〜７２時間。混合物をＥｔＯＡｃで希釈して、１Ｍクエン酸緩衝液（pH＝３．５）、Ｈ_２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブラインで引き続き洗浄した。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させてろ過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、その後１００％ＥｔＯＡｃ）、カップリングされた生成物を得た（４．３５ｇ、６２％）。
ＴＬＣ （５０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）： Ｒ_ｆ： ＝ ０．１０,検出： ＵＶ,ニンヒドリン
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ７．９５分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ７５８

ステップ４５１−７ 脱保護． トリペプチド−テザー（４．０ｇ、５．２８mmol、１．０当量）のＤＣＭ（５３mL）溶液に、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（６０mg、０．２６４mmol、０．０５当量）、Ｅｔ_３Ｎ（９５μL、０．６８mmol、０．１３当量）を添加した。混合物をＡｒ／真空のサイクルで３０分間脱気し、アルゴン下、室温で一晩撹拌した。揮発物を減圧下で蒸発させて、暗色の粗油状物をＦｌｏｒｉｓｉｌ（登録商標）の短いパッドにより、最初ＥｔＯＡｃで、その後ＭｅＯＨで溶出してろ過し、ひとまとめにしたろ液を減圧濃縮した。粗生成物を薄黄色油状物として得た（３．１１ｇ、９０％）。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ６．６４分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ６６８

ＤＣＭ／ＴＦＡ／ＴＥＳ混合物（６４；３３；３、３０mL）中の粗油状物（３．１ｇ、４．５７mmol、１．０当量）の溶液を、室温で４５分間撹拌した。揮発物を減圧下で蒸発させた。残渣をＤＣＭ／トルエン混合物（１：１、１５mL）に溶解して、減圧濃縮した。得られた油状物を更に精製せずに次のステップで用いた。

ステップ４５１−８ 大環状化． 先の粗油状物（３．１ｇ、４．５７mmol、１．０当量）を含有するＴＨＦ（４５７mL、ｃ＝０．０１Ｍ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（５．６０mL、３２．０mmol、７．０当量）および最後にＤＥＰＢＴ（１．５ｇ、５．０３mmol、１．１当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。揮発物を減圧蒸発させて、得られた粗油状物をＥｔＯＡｃ／ＮａＨＣＯ_３（飽和）（１：１）の混合物に溶解した。水相をＥｔＯＡｃで洗浄した（３回）。ひとまとめにした有機相をブラインで洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過して減圧蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（勾配、０．５％／３％／９６．５％ ＡｃＯＨ／ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ，１００％ＥｔＯＡｃ、その後、０．５％／３％／９６．５％ ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ））、環状生成物を得た（２．０ｇ、８０％）。ＴＬＣ（３％ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）：Ｒ_ｆ：＝０．７５，検出：ＵＶ，ニンヒドリン
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ５．５９分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ５５０

ステップ４５１−９ Ｂｏｃ保護． ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ混合物（１：１、４０mL）中の大環状化合物（２．０ｇ、３．６４mmol、１．０当量）の溶液に、Ｎａ_２ＣＯ_３（１．９３ｇ、１８．２mmol、５．０当量）およびＢｏｃ_２Ｏ（５．０１mL、２１．８４mmol、６．０当量）を添加して、混合物を室温で４８〜７２時間撹拌した。混合物をＮＨ_４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、その後、水相をＥｔＯＡｃで洗浄した（３回）。ひとまとめにした有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させてろ過し、減圧蒸発させた。Ｂｏｃ−保護大環状化合物を得られた状態で次のステップで用いた。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ９．１４分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ６５０

ステップ４５１−１０；Ｎ−ヒドロキシアミジンの形成． 絶対ＥｔＯＨ（３５mL）中の大環状化合物（２．２ｇ、３．３５mmol、１．０当量）の溶液に、ＮＨ_２ＯＨ・ＨＣｌ（０．７５０ｇ、１０．７４mmol、３．２当量）およびＤＩＰＥＡ（２．０４mL、１１．７２mmol、３．５当量）を添加して、得られた混合物を一晩、加熱還流した。混合物を室温まで放冷し、その後、揮発物を減圧蒸発させた。得られた黄色透明油状物を次のステップで直接用いた。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ７．２０分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ６８３

ステップ４５１−１１ Ｎ−アセトキシアミジンの形成． １０分間撹拌したＡｃＯＨ（３５mL）中の大環状化合物（２．２ｇ、３．３５mmol、１．０当量）の溶液に、Ａｃ_２Ｏ（２mL、１６．７５mmol、５．０当量）を添加した。得られた混合物を室温で２．５時間撹拌した。揮発物を減圧蒸発させた。得られた粗油状物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して（１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）、所望の生成物を得た（１．８０ｇ、３ステップ全体で７４％）。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ １３．１２分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ７２５；［Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ］^＋６２５

ステップ４５１−１２ アミジンの形成． ＡｃＯＨ（３５mL）中の先のステップからの大環状化合物（１．４０ｇ、１．９３mmol、１．０当量）の溶液に、亜鉛末（１．２６ｇ、１９．３mmol、１０．０当量）を添加した。得られた混合物を５５℃で一晩撹拌した。混合物を室温まで放冷し、その後、混合物を綿の短いパッドでろ過した。綿をＡｃＯＨで、そして最後にＥｔＯＡｃで溶出した。揮発物を減圧蒸発させた。得られた黄色透明油状物は、次のステップで直接用いることができた。

ステップ４５１−１３ Ｂｏｃの切断． 大環状化合物（１．４０ｇ、１．９３mmol、１．０当量）をＤＣＭ−ＴＦＡ−ＴＥＳ混合物（６４％−３３％−３％、２０mL）に溶解して、室温で１．５時間撹拌した。混合物を真空濃縮した。粗油状物をＴＨＦに溶解し、その後、溶媒を減圧蒸発させた。この手順を、溶媒としてトルエンを用い、その後、ＥｔＯＡｃを用いて繰り返した。得られた粗油状物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭおよび０．５％ＴＦＡ、その後、３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭおよび０．５％ＴＦＡ）。
ＴＬＣ （３０％ ＭｅＯＨ/ＤＣＭおよび０．５％ ＴＦＡ）：Ｒ_ｆ： ０．６１,検出：ＵＶ，ニンヒドリン

大環状化合物・ＴＦＡ塩をＥｔＯＡｃに溶解し、その後、水性１Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３溶液を添加した。水相をＥｔＯＡｃで抽出した（３回）。ひとまとめにした有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、ろ過して減圧蒸発させた。所望の大環状化合物を、白色固体として得た（０．９０ｇ、８２％）。１種のジアステレオマーのみを、^１Ｈ ＮＭＲにより観察した。不純物がＬＣ−ＭＳに見出されれば、ＴＨＦまたはＣＨ_３ＣＮでの磨砕を利用して、純度を改善することができた。
ＬＣ−ＭＳ： ｔ_Ｒ ＝ ４．４９分（Ａ４ｂ）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ５６７

脱保護は、ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌで処理することにより実現することもできた。その場合の粗大環状化合物を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した（３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭおよび０．５％ＴＦＡ）。１２０mgの規模で、２段階全体で６６％の収率が得られた。

ステップ４５１−１４ ＨＣｌ塩の形成：化合物をアセトニトリルに溶解し、その後、０．１Ｎ ＨＣｌ（４当量）を添加して、溶液を一晩凍結乾燥した。得られた固体をＴＨＦと共に摩砕した。
ＬＣ−ＭＳ：ｔ_Ｒ＝ ６．１４分（Ｂ４）, ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ５６７

あるいはアミジノ基は、図示された通り大環状化合物の第二級アミン上のＢｏｃ−保護を利用せずに、合成することができた。

追加の代替的なアプローチは、以下の条件を利用して対応するシアノ前駆体から直接アミジノ含有大環状化合物を合成することである(Garigipati, R. S. Tetrahedron Lett. 1990, 31, 1969.)。

Ｂ．複数の代表的な本発明の化合物を同時合成するための標準的手順
標準的反応スキームを、図２および３に表わす。

以下の手順は、複数の個々の化合物で同時に実施する多重反応の追跡を容易にする、無線周波数タグを含む特定の技術を利用する。しかしこれは必要ではなく、固相合成を個々の反応容器内で同時に実施することもできる。

ステップＢ−１ ＡＡ_３負荷． 塩化２−クロロトリチル樹脂をＭｉｎｉＫａｎ（または他の適切な分離可能な反応容器）に加えて、ＤＣＭで１５分間洗浄した。ＤＣＭを除去して、ＤＩＰＥＡ（４当量）およびＦｍｏｃ−ＮＨ−ＡＡ_３（２当量）の溶液を添加した（別個のＡＡ_３それぞれに、ＭｉｎｉＫａｎを含む別個の容器を用いた）。反応混合物を、オービタルシェーカで室温で一晩かき混ぜた。ＭｉｎｉＫａｎを以下のサイクルで２回洗浄した：ＤＣＭ、ｉＰｒＯＨ、ＤＣＭ、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ＭｉｎｉＫａｎ（ＱＣ用）１個、またはＭｉｎｉＫａｎ１個から取り出した樹脂の一部を、ＨＦＩＰ：ＤＣＭ（１：４、５mL）混合物中で反応させてオービタルシェーカで室温で少なくとも３０分間かき混ぜた。樹脂をＤＣＭで洗浄し、揮発物を減圧蒸発させた。そのようにして得られた粗油状物を、その後、負荷効率の推定のために、定量的ＱＣ分析に供した。

ステップＢ−２ Ｆｍｏｃ−脱保護． ＭｉｎｉＫａｎをＮＭＰ中の２０％ピペリジン溶液（３．５mL／ＭｉｎｉＫａｎ）で処理し、その後、オービタルシェーカで３０分間かき混ぜた。その後、この処理を繰り返した。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＤＣＭ、ＩＰＡ、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−３ ＡＡ_２カップリング． Ｆｍｏｃ−ＮＲ−ＡＡ_２−ＯＨ（２．５当量）を、ＮＭＰに溶解し、その後、ＤＩＰＥＡ（５当量）、続いてＨＡＴＵ（２．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌し、その後、適切な組み合わせのＭｉｎｉＫａｎに移し（ＡＡ_２により別個の容器に分離し）、オービタルシェーカで室温で一晩かき混ぜた。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＤＣＭ、ＩＰＡ、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−４ Ｆｍｏｃ−脱保護． ＭｉｎｉＫａｎをＮＭＰ中の２０％ピペリジン溶液（３．５mL／ＭｉｎｉＫａｎ）で処理し、その後、オービタルシェーカで３０分間かき混ぜた。その後、この処理を繰り返した。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＤＣＭ、ＩＰＡ、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−５ ＡＡ_１カップリング． Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＡＡ_１−ＯＨ（２．５当量）を、ＮＭＰに溶解し、その後、ＤＩＰＥＡ（５当量）、続いてＨＡＴＵ（２．５当量）を添加した。混合物を室温で１０分間撹拌し、その後、適切な組み合わせのＭｉｎｉＫａｎに移して（ＡＡ_１により別個の容器に分離した）、オービタルシェーカで室温で一晩かき混ぜた。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＤＣＭ、ＩＰＡ、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−６Ａ テザーの酸化． テザーのＤＭＳＯ溶液に、ＩＢＸ（１．５当量）を添加した。不均質混合物を室温で５分間撹拌し、その後、Ｈ_２Ｏを添加して、室温で一晩撹拌し続けた。混合物を水でクエンチし（白色沈殿物が形成された）、その溶液を室温で２０分間撹拌した。固体をろ過により除去し、ＥｔＯＡｃで洗浄して、得られた溶液を水性ＮａＨＣＯ_３およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、その後、減圧濃縮した。粗アルデヒドを真空乾燥させて、構造を^１Ｈ ＮＭＲにより確認し、その後、その状態で次のステップで用いた。

ステップＢ−６Ｂ 還元アミノ化． ＭｉｎｉＫａｎをＮＭＰ中の２０％ピペリジン溶液（３．５mL／ＭｉｎｉＫａｎ）で処理し、その後、オービタルシェーカで３０分間かき混ぜた。その後、この処理を繰り返した。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＤＣＭ、ＩＰＡ、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。ステップ６Ａからの粗テザーアルデヒドをＴＭＯＦ−ＭｅＯＨの混合物（１：３）に溶解した。得られた溶液を、適切なＭｉｎｉＫａｎを含む容器に移し（テザーにより分離）、オービタルシェーカで室温で１０分間かき混ぜた。ＢＡＰ試薬（２当量）を添加して、室温で一晩かき混ぜ続けた。［気体が発生することに注意し、容器をしっかりと密閉して（または開孔して）溶媒の損失を回避しなければならない］。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＤＣＭ（２回）、ＴＨＦ−ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３：１）、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（３：１）、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−７ Ｎ−ヒドロキシアミジンの形成 最初に、ＮＭＰ中のＮＨ_２ＯＨの１Ｍ溶液を、以下の通り調製した：ＮＨ_２ＯＨ・ＨＣｌ ３．５１ｇをＤＩＰＥＡ（９．２mL）に溶解し、その後、ＮＭＰを用いて容量を５０mLに調整した。残留する塩が完全に解離するまで、不均質混合物を室温で撹拌した。ＭｉｎｉＫａｎをＮＭＰ（４mL／ＭｉｎｉＫａｎ）で処理して、溶液をＮ_２／真空サイクルで脱気し（３０分間）、その後、ＮＨ_２ＯＨの１Ｍ ＮＭＰ溶液を添加して（２mL／ＭｉｎｉＫａｎ）、混合物を５０℃（オイルバス）で２４時間撹拌した。溶液を室温まで放冷した。ＭｉｎｉＫａｎを以下の順序で洗浄した：ＮＭＰ（２回）、ＩＰＡ、ＮＭＰ、ＩＰＡ、ＴＨＦ−ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（３：１）、ＤＣＭ（３回）、その後、Ｎ_２気流の下で乾燥させた。

ステップＢ−８ 樹脂からの開裂 樹脂を個々のＭｉｎｉＫａｎから除去して、別個の２０mL反応器に導入した。ＨＦＩＰ／ＤＣＭ（１；４）の溶液を添加して、得られた赤色溶液をオービタルシェーカで１時間かき混ぜた。樹脂をろ過により除去して、ＤＣＭで洗浄し、揮発物を真空蒸発させた（複数の試料のためにＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレータを用いた）。

ステップＢ−９ Ｎ−アセトキシアミジンの形成 ステップＢ−９〜Ｂ−１１に表わされた反応速度が、２５０μmolトリペプチド（理論的収量）に基づいていて、他の量の場合には比例的に調整し得ることに留意されたい。ステップ８からの個々の油状物をＡｃＯＨ（２．５mL）に溶解し、溶液を室温で１０分間撹拌し、その後、Ａｃ_２Ｏを添加して（０．１５mL、１．２５mmol、５当量）、４５分間撹拌し続けた。揮発物を真空蒸発させた（複数の試料のためにＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレータを用いた）。

ステップＢ−１０ テザーの脱保護および大環状化． ステップＢ−９からの個々の残渣を、ＴＥＳ−ＴＦＡ−ＤＣＭ混合物に溶解し（３：３３：６４、５mL）、溶液を室温で４５分間撹拌した。揮発物を真空蒸発させ（複数の試料のためにＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレータを用いた）、その後、残渣をトルエンに溶解して、再度、真空濃縮した（ＳｐｅｅｄＶａｃによる）。

Ｄｄｚ保護されたテザーでは、ＴＦＡ−ＴＥＳ−ＤＣＭ（２：３：９５）の混合物を脱保護ステップに用いた。Ｂｏｃ側鎖の脱保護が起こる可能性があるため、Ｄｄｚの脱保護が１時間を超えないことが重要である。

個々の油状物をＴＨＦ（２５mL）に溶解し、その後、ＤＩＰＥＡ（３００μL、１．７５mmol、７当量）、続いてＤＥＰＢＴ（０．１５０ｇ、０．５０mmol、２当量）を添加した。黄色溶液をオービタルシェーカで室温で一晩かき混ぜた。Ｓｉ−Ｔｒｉｓアミン樹脂を導入し（３．５ｇ／反応）、得られた混合物をオービタルシェーカで室温で２時間かき混ぜた。樹脂をろ過により除去してＴＨＦで洗浄し、揮発物を真空蒸発させた（複数の試料のためにＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレータを用いた）。

ステップＢ−１１ アミジンの形成． ステップ１０からの油状物をＡｃＯＨ（３mL）に溶解し、その後、亜鉛末（０．１６３ｇ、２．５mmol、１０当量）を添加して、溶液をオービタルシェーカで室温で一晩かき混ぜた。綿の短いパッドを用いて過剰の亜鉛末を除去し、その後、ＡｃＯＨで溶出した。揮発物を真空蒸発させ（複数の試料のためにＳｐｅｅｄＶａｃ遠心エバポレータを用い）、その後、残渣をＦｒａｃｔｉｏｎ Ｌｙｎｘでの精製に供して、所望の生成物を得た。

所望の大環状化合物がアミジノ基を有さない場合には、ステップＢ−９およびＢ−１１を省略した。他の特定の順序では、ＡＡ_３位のＢｏｃ側鎖脱保護を、ＴＦＡ−ＴＥＳ−ＤＣＭ系を用いた標準条件下で実施した。加えてＡＡ_１位のＴｒｔ側鎖脱保護は、ＴＦＡ−ＴＥＳ（９５：５）を用いた標準条件下で実施した。

前述は本発明の例示であり、その限定と解釈すべきではない。本発明は以下の特許請求の範囲と本明細書に包含される特許請求の範囲の均等物により定義される。

Claims (22)

1. セリンプロテアーゼ酵素の活性を調整する方法であって、この酵素を式（Ｉ）：
   

   

   （式中、
   Ｒ_１は、−Ｈ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３および−ＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群より選択され、
   Ｒ_２は、−Ｈ、−ＣＨ_３および−ＣＨ_２ＣＨ_３からなる群より選択され、
   Ｒ_３は、任意で存在し、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より選択され、
   ｍは、１、２、３、４または５であり、
   Ｘ_１は、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、
   Ｗは、ＣＲ_４ａＲ_４ｂからなる群より選択され、ここでＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、
   Ｚ_１は、ＣＲ_５ａＲ_５ｂからなる群より選択され、ここでＲ_５ａおよびＲ_５ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、
   Ｔは、
   

   

   からなる群より選択され、
   ここでＭ_１は、Ｏおよび（ＣＨ_２）_ｑからなる群より選択され、ここでｑは、１、２、３、４または５であり、Ｍ_２は、Ｏ、Ｓ、ＮＲ_６およびＣＲ_７ａＲ_７ｂからなる群より選択され、ここでＲ_６は、水素、アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、Ｒ_７ａおよびＲ_７ｂは、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立して選択され、ｐ１およびｐ２は、独立して０、１、２または３であり、そしてｐ３、ｐ４およびｐ５は、独立して０、１または２であり、
   （Ｗ）は、Ｗの付加された炭素原子への結合部位を示し、
   （Ｚ）は、Ｚ_１の付加された炭素原子への結合部位を示す）、
   もしくは式（II）：
   

   

   （式中、
   Ｒ_１１は、−Ｈ、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３および−ＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群より選択され、
   Ｒ_１２は、−Ｈ、−ＣＨ_３および−ＣＨ_２ＣＨ_３からなる群より選択され、
   Ｒ_１３は、−（ＣＨ_２）_ｒ１ＮＲ_１８ａＲ_１８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｒ２ＣＯＮＲ_１９ａＲ_１９ｂ、
   

   

   からなる群より選択され、
   ここでｒ１は、１、２、３、４または５であり、ｒ２は、１、２または３であり、Ｒ_１８ａ、Ｒ_１９ａおよびＲ_１９ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ｒ_１８ｂは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、アシル、アミド、アミジノ、スルホンアミドからなる群より選択され、Ａ_１、Ａ_４、Ａ_７、Ａ_９、Ａ_１２、Ａ_１４、Ａ_１７、Ａ_１９、Ａ_２３、Ａ_３５、Ａ_３７およびＡ_３９は、それぞれ任意で存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイド、グアニジノ、ヒドロキシル、アルコキシおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２、Ａ_３、Ａ_５、Ａ_６、Ａ_８、Ａ_１０、Ａ_１１、Ａ_１３、Ａ_１５、Ａ_１６、Ａ_１８、Ａ_２０、Ａ_２１、Ａ_２４、Ａ_２５、Ａ_３６、Ａ_３８およびＡ_４０は、それぞれ任意で存在し、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、アルコキシおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２２、Ａ_２６、Ａ_２７、Ａ_２９、Ａ_３１およびＡ_３３は、それぞれ任意で存在し、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイド、グアニジノおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、Ａ_２８、Ａ_３０、Ａ_３２およびＡ_３４は、それぞれ任意で存在し、トリフルオロメチルおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、そしてＢ_１、Ｂ_２、Ｂ_３、Ｂ_４、Ｂ_５およびＢ_７は、独立してＮＲ_２０、ＳまたはＯであり、ここでＲ_２０は、水素、アルキル、ホルミル、アシル、カルボキシアルキル、カルボキシアリール、アミド、スルホニルおよびスルホンアミドからなる群より選択され、Ｂ_６およびＢ_８は、独立してＮまたはＣＨであり、
   Ｒ_１４は、アミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、カルボキシ、ウレイド、アミジノ、またはグアニジンで場合により置換されたＣ_１〜Ｃ_４アルキルと、アルキル、ヒドロキシルまたはアルコキシで場合により置換されたＣ_３〜Ｃ_７シクロアルキルとからなる群より選択され、
   Ｒ_１５およびＲ_１６は、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より独立して選択され、
   Ｒ_１７は、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
   ｎは、１、２、３、４または５であり、
   Ｚ_２は、ＣＨＲ_２１ａＣＨＲ_２２ａ、ＣＲ_２１ｂ＝ＣＲ_２２ｂおよびＣ≡Ｃからなる群より選択され、ここでＲ_２１ａおよびＲ_２２ａは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より独立して選択されるか、またはＲ_２１ａとＲ_２２ａとが、結合する炭素と一緒になって、３員環を形成しており、そしてＲ_２１ｂおよびＲ_２２ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より独立して選択され、
   Ｘ_２は、水素、ハロゲン、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、
   Ｘ_３は、水素、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、トリフルオロメチルおよびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
   Ｌ_２は、ＯおよびＣＲ_２３ａＲ_２３ｂからなる群より選択され、ここでＲ_２３ａは、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、ヒドロキシルおよびアルコキシからなる群より選択され、そしてＲ_２３ｂは、水素およびＣ_１〜Ｃ_４アルキルからなる群より選択され、
   Ｌ_３は、ＣＸ_４およびＮからなる群より選択され、ここでＸ_４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ハロゲン、トリフルオロメチル、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択され、及び
   Ｌ_４は、ＣＸ_５およびＮからなる群より選択され、ここでＸ_５は、水素、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アミジノ、ウレイドおよびグアニジノからなる群より選択される）
   で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩と接触させることを含む方法。
2. 前記調整が、セリンプロテアーゼ酵素の阻害を含む請求項１記載の方法。
3. 前記調整が、セリンプロテアーゼ酵素の活性化を含む請求項１記載の方法。
4. 前記セリンプロテアーゼ酵素が、II型膜貫通性セリンプロテアーゼである請求項１記載の方法。
5. 前記セリンプロテアーゼ酵素が、マトリプターゼ−１（ＭＴＳＰ−１、ＳＴ１４、ＴＡＤＧ−１５、エピチン）、マトリプターゼ−２（ＴＭＰＲＳＳ６）、マトリプターゼ−３、ＭＴＳＰ−４、ＭＴＳＰ−６、ＭＴＳＰ−７、ＭＴＳＰ−９、ＭＴＳＰ−１０、ＰＲＳＳ２２、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｃ、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５（スピネシン）、モザイクセリンプロテアーゼ大型（ＭＳＰＬ）、エンテロペプチダーゼ、ポリセラーゼ−１、コリン、ヒト気道トリプシン様プロテアーゼ（ＨＡＴ）、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ２、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ３、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ４、ＨＡＴ−ｌｉｋｅ５、プロスタシン（ＣＡＰ１、ＰＲＳＳ８）、ＣＡＰ２、ＣＡＰ３、トリプシン、カテプシンＡ、好中球エラスターゼ、ヘプシン、角質層トリプシン性酵素（ＳＣＴＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ５、ＫＬＫ５）、角質層キモトリプシン性酵素（ＳＣＣＥ、カリクレイン関連ペプチダーゼ７、ＫＬＫ７）、カリクレイン関連ペプチダーゼ４（ＫＬＫ４、プロスターゼ）、カリクレイン関連ペプチダーゼ８（ＫＬＫ８、ニューロプシン）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１１（ＫＬＫ１１）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１３（ＫＬＫ１３）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１４（ＫＬＫ１４）、カリクレイン関連ペプチダーゼ６（ＫＬＫ６、プロテアーゼＭ）、カリクレイン関連ペプチダーゼ１０（ＫＬＫ１０）、グランザイムＢ、カルシウムシグナル伝達物質１、カルシウムシグナル伝達物質２、クローディン３、クローディン４、フリン、ラジニン、ラルニニン、プラスミン、ストラチフィン、ＳＩ００Ａ２、ＣＤ２４、リポカリン２、オステオポンチン、組織型プラスミノーゲン活性化因子、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子および扁平上皮癌における差異的発現遺伝子１（ＤＥＳＣ１）からなる群より選択される請求項１記載の方法。
6. 前記化合物が、以下の構造：
   

   

   

   

   

   を有する請求項１記載の方法。
7. 対象におけるセリンプロテアーゼ酵素を含む病的状態を処置する方法であって、治療上効果的な量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしくは（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、対象に投与することを含む方法。
8. 前記病的状態が、上皮細胞増殖、血管新生、異常な新血管形成または鉄ホメオスタシスの調整解除を特徴とする請求項７記載の方法。
9. 前記鉄ホメオスタシスの調整解除を特徴とする病的状態が、鉄不応性鉄欠乏性貧血（ＩＲＩＤＡ）、全身鉄過負荷（ヘモクロマトーシス）または鉄負荷性貧血である請求項８記載の方法。
10. 増殖過剰性障害を処置する方法であって、有効量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしく式（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、必要とする対象に投与することを含む方法。
11. 前記増殖過剰性障害が、白血病、リンパ腫、乳癌、胃腸癌、頭頸部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、胃癌、腸癌、大腸癌、前立腺癌、膀胱癌、精巣癌、卵巣癌、子宮癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、脳癌、肺癌、肝臓癌、腎臓癌、気管支癌、膵臓癌、甲状腺癌、骨癌および皮膚癌からなる群より選択される請求項１０記載の方法。
12. 前記増殖過剰性障害が、腫瘍転移を特徴とする請求項１０記載の方法。
13. 前記腫瘍が、乳房、脳、卵巣、結腸、直腸、胃、肝臓、腎臓、腸、口、喉、食道、前立腺、精巣、膀胱、子宮、子宮頸部、肺、膵臓、骨、甲状腺または皮膚に見出される請求項１２記載の方法。
14. 皮膚または組織障害を処置する方法であって、有効量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしく式（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、必要とする対象に投与することを含む方法。
15. 前記皮膚または組織障害が、乾癬、魚鱗癬、過角化症、減毛症、濾泡性皮膚委縮、アトピー性皮膚炎、酒さ、およびネザートン症候群からなる群より選択される請求項１４記載の方法。
16. 炎症性障害を処置する方法であって、有効量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしく式（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、必要とする対象に投与することを含む方法。
17. 前記炎症性障害が、関節リウマチ、骨関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎およびアテローム性硬化症からなる群より選択される請求項１６記載の方法。
18. 呼吸器障害を処置する方法であって、有効量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしく式（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、必要とする対象に投与することを含む方法。
19. 前記呼吸器障害が、嚢胞性線維症、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、アレルギー性鼻炎、原発性線毛機能不全、肺癌腫および呼吸器感染により誘発される障害からなる群より選択される請求項１８記載の方法。
20. ウイルス感染を処置する方法であって、有効量の本明細書に記載された式（Ｉ）もしく式（II）で示される化合物、または薬学的に許容し得るその塩を、必要とする対象に投与することを含む方法。
21. 前記ウイルス感染が、インフルエンザウイルスまたはメタニューモウイルスにより誘発される請求項２０記載の方法。
22. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    

    

    

    を有する請求項７、１０、１４、１６、１８または２０記載の方法。

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