JP2013226127A5 - - Google Patents
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Claims (10)
- 未分化のヒト多能性幹細胞から分化を誘導し肝前駆細胞を得る方法であって、
分化用培地中で基質に接着して単層培養される前記ヒト多能性幹細胞に分化誘導用転写因子の組合せとして、ＦＯＸＡ２と、ＧＡＴＡ４と、ＨＥＸと、Ｃ／ＥＢＰαの組合せを発現させるステップを含むことを特徴とする、方法。 - 前記方法は、さらに、前記分化用培地に増殖促進剤の組合せとして、オンコスタチンＭと、上皮成長因子と、レチノイン酸と、デキサメタゾンと、インシュリンと、トランスフェリンと、亜セレン酸イオンからなる群から選択される１または２以上の前記増殖促進剤の組合せを含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
- 前記ヒト多能性幹細胞に請求項１に記載された前記分化誘導用遺伝子産物の組合せを発現させるステップにおいて、前記分化誘導用遺伝子産物の組合せは繰り返し前記ヒト多能性幹細胞内で一過性発現をさせられることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
- 前記ヒト多能性幹細胞は、ヒト人工多能性幹細胞であることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の方法。
- 請求項１ないし４のいずれか１項に記載の方法で得られるヒト多能性幹細胞由来肝前駆細胞を含むことを特徴とする、肝臓への移植用細胞組成物。
- ヒト人工多能性幹細胞（ヒトｉＰＳ細胞）から分化を誘導しヒト肝前駆細胞を得る方法であって、ヒトｉＰＳ細胞に転写因子ＦＯＸＡ２、ＧＡＴＡ４、ＨＥＸおよびＣ／ＥＢＰαの各遺伝子を３日毎にトランスフェクションし、増殖促進剤の組合せとしてオンコスタチンＭ、上皮成長因子、レチノイン酸、デキサメタゾン、インシュリンとトランスフェリンと亜セレン酸イオンとを含む培地中で分化誘導を行い、トランスフェクション後８日目に、ヒトｉＰＳ細胞から分化を誘導しヒト肝前駆細胞を得る方法。
- ヒト人工多能性幹細胞（ヒトｉＰＳ細胞）から分化を誘導されて得られるヒト肝前駆細胞であって、ヒトｉＰＳ細胞に転写因子ＦＯＸＡ２、ＧＡＴＡ４、ＨＥＸおよびＣ／ＥＢＰαの各遺伝子を３日毎にトランスフェクションし、増殖促進剤の組合せとしてオンコスタチンＭ、上皮成長因子、レチノイン酸、デキサメタゾンと、インシュリンおよびトランスフェリンを含む培地中で分化誘導を行い、トランスフェクション後８日目に得られることを特徴とするヒト肝前駆細胞。
- 請求項７記載のヒト肝前駆細胞を含むことを特徴とする、肝臓への移植用細胞組成物。
- ＦＯＸＡ２と、ＧＡＴＡ４と、ＨＥＸと、Ｃ／ＥＢＰαとの遺伝子産物の、ヒト多能性幹細胞に発現させるシステムのヒト多能性幹細胞由来肝前駆細胞を調製するための使用。
- オンコスタチンＭ、上皮成長因子、レチノイン酸、デキサメタゾン、インシュリン、トランスフェリンおよび亜セレン酸イオンを含む培養液の、ヒト多能性幹細胞由来肝前駆細胞を調製するための使用。
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