JP2011521216A5 - - Google Patents
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Description
例えば、サンドイッチアッセイ技術の多くの変形のいずれかを用いて免疫アッセイを行うことができる。簡潔に述べると、本発明に従ったＲＡ特異的自己抗体の検出に適用される典型的なサンドイッチアッセイにおいて、標識されていない自己抗原マーカーは固体基質上に固定化されており、試験される試料を、結合した自己抗原マーカーと、抗原抗体複合体の形成を可能にする時間および条件下で接触させる。インキュベーションの後、検出可能な部分構造で標識された、試験される種から得られる抗体を特異的に認識する抗体（例えば、ヒト対象では抗ヒトＩｇＧ）を添加し、任意の抗原結合自己抗体と標識抗体との間の三重複合体の形成を可能にする条件下でインキュベートする。任意の結合していない材料を洗浄して取り除き、試料内の任意のＲＡ特異的自己抗体の存在を、検出可能な部分構造から直接的にまたは間接的に生じたシグナルの観察によって決定する。このアッセイの変形には、固定化された自己抗原マーカーに生物学的試料および標識抗体の両方が同時に添加されるアッセイが含まれる。
さらに、本発明のキットは、通常、キット内に含まれる自己抗原マーカーと生物学的試料内に存在する自己抗体との間で形成される抗原抗体複合体の検出のための少なくとも１つの試薬も含む。このような試薬は、例えば、上記の、試験される種から得られる抗体を特異的に認識する標識抗体（例えば、ヒト対象では抗ヒトＩｇＧ）であり得る。
Claims (19)
- 対象における関節リウマチのインビトロ診断のために、抗原抗体複合体の存在または不存在を検出する方法であって、
ＢＲＡＦ触媒ドメインまたはその抗体結合断片を含む自己抗原マーカーを提供するステップと、
対象から得られる生物学的試料を、自己抗原マーカーと、抗原抗体複合体の形成を可能にする時間および条件下で接触させるステップと、
形成された抗原抗体複合体の存在または不存在を検出するステップと
を含み、前記抗原抗体複合体の存在が対象における関節リウマチの指標となる方法。 - 対象がＣＣＰ陰性である、請求項１に記載の方法。
- 生物学的試料が、全血、血清、血漿、尿、および滑液からなる群から選択される、請求項１または請求項２に記載の方法。
- 自己抗原マーカーが固体の担体または支持体上に固定化される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
- 抗原抗体複合体の存在または不存在の検出が免疫アッセイによるものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
- ＢＲＡＦ触媒ドメインがヒト由来のものである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
- ＢＲＡＦ触媒ドメインが、配列番号２のアミノ酸４１６からアミノ酸７６６にわたるアミノ酸配列を有する、請求項６に記載の方法。
- 前記対象から得られる生物学的試料における抗ＰＡＤ４抗体を検出するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
- 前記対象から得られる生物学的試料においてＣ反応性タンパク質、血清アミロイドＡ、インターロイキン６、Ｓ１００タンパク質、オステオポンチン、リウマチ因子、マトリクスメタロプロテアーゼ１、マトリクスメタロプロテアーゼ３、ヒアルロン酸、ｓＣＤ１４、血管新生マーカー、および骨、軟骨、または滑膜の代謝産物からなる群から選択される少なくとも１つのマーカーの濃度を測定することをさらに含む、請求項１または請求項８に記載の方法。
- 対象から得られる生物学的試料における抗ＢＲＡＦ自己抗体を検出するためのキットであって、
ＢＲＡＦ触媒ドメインまたはその抗体結合断片を含む自己抗原マーカーと、
自己抗原マーカーと生物学的試料内に存在する自己抗体との間で形成される抗原抗体複合体を検出するための試薬であって、前記自己抗体が、関節リウマチの指標となる抗ＢＲＡＦ自己抗体であり、前記試薬がヒト抗体を特異的に認識する標識抗体である、試薬と
を含むキット。 - 試薬が標識抗ヒトＩｇＧである、請求項１０に記載のキット。
- 自己抗原マーカーが固体の担体または支持体上に固定化される、請求項１０または１１に記載のキット。
- 請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法を実施するための指示をさらに含む、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載のキット。
- ＰＡＤ４またはその抗体結合断片を含む第２の自己抗原マーカーと、
第２の自己抗原マーカーと生物学的試料内に存在する自己抗体との間で形成される抗原抗体複合体を検出するための第２の試薬であって、前記自己抗体が、関節リウマチの指標となる抗ＰＡＤ４自己抗体であり、前記第２の試薬がヒト抗体を特異的に認識する第２の標識抗体である、試薬と
をさらに含む、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載のキット。 - 第２の試薬が標識抗ヒトＩｇＧである、請求項１４に記載のキット。
- 対象における関節リウマチを診断するためのアレイであって、その表面に付着した、
ＢＲＡＦ触媒ドメインもしくはその抗体結合断片を含む自己抗原マーカー、または
ＢＲＡＦ触媒ドメインもしくはその抗体結合断片を含む自己抗原マーカー、およびＰＡＤ４もしくはその抗体結合断片を含む第２の自己抗原マーカー
を含むアレイ。 - その表面に付着した、生物学的試料におけるＲＡ特異的自己抗体の存在を検出するための少なくとも１つのさらなる自己抗原マーカーをさらに含む、請求項１６に記載のアレイ。
- ＲＡ特異的自己抗体が抗核抗体および抗ＣＣＰ抗体より選択される、請求項１７に記載のアレイ。
- 関節リウマチのマーカーとしての、ＢＲＡＦ触媒ドメインまたはその抗体結合断片を含む自己抗原マーカーの使用。
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