JP2011516067A5 - - Google Patents

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  1. (a)配列番号2および配列番号4からなる群から選択されるΔ4デサチュラーゼ酵素をコードする単離されたヌクレオチド配列;
    (b)0.1×SSC、0.1%SDSで65℃、および2×SSC、0.1%SDSで洗浄後、0.1×SSC、0.1%SDSというハイブリダイゼーション条件下で(a)とハイブリダイズする単離されたヌクレオチド配列;
    (c)Δ4デサチュラーゼ酵素をコードする配列番号1および配列番号3からなる群から選択される単離された核酸分子;
    (d)(a)または(b)と完全に相補的な単離されたヌクレオチド配列;および
    (e)配列番号2に記載の配列を有するポリペプチドとの比較でアラインメントのクラスタルW法に基づいて少なくとも68%の同一性を有する少なくとも514個のアミノ酸のΔ4デサチュラーゼ酵素をコードする第1のヌクレオチド配列、または第1のヌクレオチド配列の相補体を含む第2のヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子
    からなる群から選択される単離された核酸分子。
  2. 配列番号2および配列番号4からなる群から選択される、Δ4デサチュラーゼ酵素をコードするポリペプチド。
  3. (a)配列番号2および配列番号4からなる群から選択されるΔ4デサチュラーゼ酵素をコードする単離されたヌクレオチド配列;
    (b)0.1×SSC、0.1%SDSで65℃、および2×SSC、0.1%SDSで洗浄後、0.1×SSC、0.1%SDSというハイブリダイゼーション条件下で(a)とハイブリダイズする単離されたヌクレオチド配列;
    (c)Δ4デサチュラーゼ酵素をコードする配列番号1および配列番号3からなる群から選択される単離された核酸分子;および
    (d)配列番号2に記載の配列を有するポリペプチドとの比較でアラインメントのクラスタルW法に基づいて少なくとも68%の同一性を有する少なくとも514個のアミノ酸のΔ4デサチュラーゼ酵素をコードする第1のヌクレオチド配列、または第1のヌクレオチド配列の相補体を含む第2のヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子
    からなる群から選択される単離された核酸分子
    を含む宿主細胞であって、酵母、藻類、細菌、ユーグレナ属、ストラメノパイル、真菌および植物からなる群から選択される、上記宿主細胞。
  4. a)(i)アラインメントのクラスタルW法に基づいて、配列番号2に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドと比較したとき、少なくとも68%の同一性を有するΔ4デサチュラーゼポリペプチドをコードする単離されたヌクレオチド分子;および
    (ii)all−cis−7,10,13,16,19−ドコサペンタエン酸(22:5、ω−3)およびドコサテトラエン酸からなる群から選択される原料脂肪酸
    を含む宿主細胞を備えるステップと、
    b)Δ4デサチュラーゼポリペプチドをコードする核酸断片が発現して、all−cis−7,10,13,16,19−ドコサペンタエン酸(22:5、ω−3)が原料脂肪酸である場合ドコサヘキサエン酸が生産される多価不飽和脂肪酸であり;ドコサテトラエン酸が原料脂肪酸である場合all−cis−4,7,10,13,16−ドコサペンタエン酸(22:5、ω−6)が生産される多価不飽和脂肪酸であるように、原料脂肪酸をall−cis−7,10,13,16,19−ドコサペンタエン酸(22:5、ω−3)およびドコサテトラエン酸からなる群から選択される多価不飽和脂肪酸に変換する条件下でステップ(a)の宿主細胞を成長させるステップと;
    c)任意に、ステップ(b)で生産された多価不飽和脂肪酸を回収するステップと
    を含む、ドコサヘキサエン酸およびall−cis−4,7,10,13,16−ドコサペンタエン酸(22:5、ω−6)からなる群から選択される多価不飽和脂肪酸を製造する方法。
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