JP2011506570A

JP2011506570A - スフィンゴシン−１−リン酸（ｓ１ｐ）に対して活性なオキサジアゾール誘導体

Info

Publication number: JP2011506570A
Application number: JP2010538742A
Authority: JP
Inventors: ジャグ、ポール、ヘール; トーマス、ダニエル、ハイトマン
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2007-12-21
Filing date: 2008-12-19
Publication date: 2011-03-03
Also published as: WO2009080728A1; US20100298373A1; EP2222671A1; US8263620B2; GB0725105D0

Abstract

本願は、特に紅斑性狼瘡の処置に有用な、スフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）に対して活性な式（Ｉ）のオキサジアゾールに基づく化合物を開示する。Ａはフェニルまたは５員もしくは６員のヘテロアリール環であり；Ｂは下式（ａ）、（ｂ）、（ｃ）の１つから選択される。

Description

発明の背景

本発明は、薬理活性を有する新規なオキサジアゾール誘導体、それらの製造のための方法、それらを含有する医薬組成物および種々の障害の処置におけるそれらの使用に関する。

スフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）は、スフィンゴシンキナーゼによるスフィンゴシンのリン酸化により形成される生物活性脂質性メディエーターであり、血中に高レベルで見られる。それは血小板および肥満細胞などの造血系起源のものを含むいくつかの細胞種により産生および分泌される(Okamoto et al 1998 J Biol Chem 273(42):27104; Sanchez and Hla 2004, J Cell Biochem 92:913)。それは、細胞増殖、分化、運動、血管新生および炎症性細胞および血小板の活性化の調節を含む広範な生物学的作用を有する(Pyne and Pyne 2000, Biochem J. 349:385)。受容体のＧタンパク質共役内皮分化遺伝子ファミリーの一部をなすＳ１Ｐ応答性受容体の５つのサブタイプ、Ｓ１Ｐ１（Ｅｄｇ−１）、Ｓ１Ｐ２（Ｅｄｇ−５）、Ｓ１Ｐ３（Ｅｄｇ−３）、Ｓ１Ｐ４（Ｅｄｇ−６）およびＳ１Ｐ５（Ｅｄｇ−８）が記載されている(Chun et al 2002 Pharmacological Reviews 54:265, Sanchez and Hla 2004 J Cellular Biochemistry, 92:913)。これら５つの受容体は異なるｍＲＮＡ発現を示し、Ｓ１Ｐ１−３が広く発現され、Ｓ１Ｐ４はリンパ組織および造血組織で、そして、Ｓ１Ｐ５は主に脳で、また、程度は低いが脾臓で発現される。それらはＧタンパク質の異なるサブセットを介してシグナルを伝達し、種々の生物学的応答を誘発する(Kluk and Hla 2002 Biochem et Biophysica Acta 1582:72, Sanchez and Hla 2004, J Cellular Biochem 92:913)。

Ｓ１Ｐ１受容体に関して提案されている役割としては、リンパ球の輸送、サイトカイン誘導／抑制、および内皮細胞への作用が挙げられる(Rosen and Goetzl 2005 Nat Rev Immunol. 5:560)。Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストが、ＭＳの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを含むいくつかの自己免疫および移植動物モデルで、誘導された疾患の重篤度を軽減するために使用されている(Brinkman et al 2003 JBC 277:21453; Fujino et al 2003 J Pharmacol Exp Ther 305:70; Webb et al 2004 J Neuroimmunol 153:108; Rausch et al 2004 J Magn Reson Imaging 20:16)。この活性はリンパ系のリンパ球循環に対するＳ１Ｐ１アゴニストの作用により媒介されることが報告されている。Ｓ１Ｐ１アゴニストによる処置は、動物モデルにおける可逆的末梢リンパ球減少症(lymphopoenia)を含む、リンパ節などの二次的リンパ器官内でのリンパ球の隔離をもたらす(Chiba et al 1998, J Immunology 160:5037, Forrest et al 2004 J Pharmacol Exp Ther 309:758; Sanna et al 2004 JBC 279:13839)。アゴニストに関して発表されているデータは、化合物処置が、インターナリゼーションを介した細胞表面からのＳ１Ｐ１受容体の消失を誘導し(Graler and Goetzl 2004 FASEB J 18:551; Matloubian et al 2004 Nature 427:355; Jo et al 2005 Chem Biol 12:703)、リンパ節から血流中へ戻るＴ細胞の移動の減少に寄与するのは免疫細胞に対するこのＳ１Ｐ１受容体の減少であることを示唆している。

Ｓ１Ｐ１遺伝子の欠損は胎児致死をもたらす。リンパ球の移動および輸送におけるＳ１Ｐ１受容体の役割を調べるための実験には、照射された野生型マウスへの標識Ｓ１Ｐ１欠陥Ｔ細胞の養子免疫伝達が含まれた。これらの細胞は、二次的リンパ器官からの移出の減少を示した(Matloubian et al 2004 Nature 427:355)。

Ｓ１Ｐ１はまた、内皮細胞接合の調節における役割も記載されている(Allende et al 2003 102:3665, Blood Singelton et al 2005 FASEB J 19:1646)。この内皮作用について、Ｓ１Ｐ１アゴニストが、免疫障害の調節における役割に寄与している可能性がある単離されたリンパ節に対して作用を有することが報告されている。Ｓ１Ｐ１アゴニストは、リンパ節を排液し、リンパ球移出を防ぐリンパ洞の内皮間質「ゲート」の閉鎖を引き起こした(Wei wt al 2005, Nat. Immunology 6:1228)。

免疫抑制化合物ＦＴＹ７２０（ＪＰ１１０８００２６−Ａ）は、動物およびヒトにおいて循環リンパ球を減少させ、免疫障害の動物モデルにおいて疾患調節活性を有し、緩解中の多発性硬化症の再発において緩解率を引き下げることが示されている(Brinkman et al 2002 JBC 277:21453, Mandala et al 2002 Science 296:346, Fujino et al 2003 J Phrmacology and Experimental Therapeutics 305:45658, Brinkman et al 2004 American J Transplantation 4:1019, Webb et al 2004 J Neuroimmunology 153:108, Morris et al 2005 EurJ Immunol 35:3570, Chiba 2005 Phrmacology and Therapeutics 108:308, Kahan et al 2003, Transplantation 76:1079, Kappos et al 2006 New Eng J Medicine 335:1124)。この化合物は、in vivoでスフィンゴシンキナーゼによりリン酸化されて、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体においてアゴニスト活性を有する分子を与えるプロドラッグである。臨床試験では、ＦＴＹ７２０による処置が、処置して最初の２４時間に徐脈をもたらすことが示されている(Kappos et al 2006 New Eng J Medicine 335:1124)。この徐脈は、いくつかの細胞に基づく実験および動物実験に基づけば、Ｓ１Ｐ３受容体における促進作用によるものであると思われる。これらには、野生型マウスとは違ってＦＴＹ７２０投与の後に徐脈を示さないＳ１Ｐ３ノックアウト動物の使用およびＳ１Ｐ１選択的化合物の使用が含まれる(Hale et al 2004 Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 14:3501, Sanna et al 2004 JBC 279:13839, Koyrakh et al 2005 American J Transplantation 5:529)。

ゆえに、低い徐脈誘発傾向を示すと思われるＳ１Ｐ３を超える選択性を備えたＳ１Ｐ１受容体アゴニスト化合物の必要がある。

以下の特許出願にはＳ１Ｐ１アゴニストとしてのオキサジアゾール誘導体が記載されている：ＷＯ０３／１０５７７１、ＷＯ０５／０５８８４８、ＷＯ０６／０４７１９５、ＷＯ０６／１００６３３、ＷＯ０６／１１５１８８、ＷＯ０６／１３１３３６、ＷＯ０７／０２４９２２およびＷＯ０７／１１６８６６。

以下の特許出願にはＳ１Ｐ受容体アゴニストとしてのテトラヒドロイソキノリニル−オキサジアゾール誘導体が記載されている：ＷＯ０６／０６４７５７、ＷＯ０６／００１４６３、ＷＯ０４／１１３３３０。

今般、Ｓ１Ｐ１受容体のアゴニストとなる構造的に新規な化合物種が見つかった。

よって、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩：

［式中、
Ａはフェニルまたは５員もしくは６員のヘテロアリール環であり；
Ｒ_１は、ハロゲン、Ｃ_{（１−３）}アルコキシ、Ｃ_{（１−３）}フルオロアルキル、シアノ、Ｃ_{（１−３）}フルオロアルコキシ、Ｃ_{（１−６）}アルキルおよびＣ_{（３−６）}シクロアルキルから独立に選択される２個までの置換基であり；
Ｒ_２は水素、ハロゲンまたはＣ_{（１−４）}アルキルであり；
Ｂは以下：

の１つから選択され；
Ｒ_３は水素またはＣ_{（１−３）}アルキルであり；
Ｒ_４は（ＣＨ_２）_１−３ＣＯ_２Ｈであり；
Ｒ_２またはＲ_４がアルキルである場合、それは酸素が挿入されていてもよい］
を提供する。

本発明の一つの実施態様では、
Ａはフェニルであり；かつ／または
Ｒ_１は、クロロ、イソプロポキシおよびシアノから独立に選択される２個までの置換基でり；かつ／または
Ｒ_２は水素であり；かつ／または
Ｂは（ａ）であり；かつ／または
Ｒ_３は水素であり；かつ／または
Ｒ_４はＣＨ_２ＣＯ_２Ｈである。

本発明の一つの実施態様では、
Ａはフェニルまたはピリジルであり；
Ｒ_１は、クロロ、イソプロポキシおよびシアノから独立に選択される２個までの置換基であり；
Ｒ_２は水素またはメチルであり；
Ｂは（ａ）であり；
Ｒ_３は水素であり；
Ｒ_４は（ＣＨ_２）_１−３ＣＯ_２Ｈである。

一つの実施態様では、Ａはフェニルまたはピリジルである。別の実施態様では、Ａはフェニルである。別の実施態様では、Ａは３，４−二置換フェニルである。

一つの実施態様では、Ｒ_１は２個の置換基であり、その一方はＣ_{（１−３）}アルコキシであり、他方はハロゲンまたはシアノから選択される。別の実施態様では、Ｒ_１は２個の置換基であり、その一方はイソプロポキシであり、他方はクロロまたはシアノから選択される。別の実施態様では、Ｒ_１はクロロ、イソプロポキシおよびシアノから選択される２個の置換基である。別の実施態様では、Ｒ_１はクロロおよびイソプロポキシである。さらなる実施態様では、Ａがフェニルである場合、Ｒ_１は３位がクロロであり、４位がイソプロポキシであり、あるいはＡがピリジルである場合、Ｒ_１は５位がクロロであり、６位がイソプロポキシである。別の実施態様では、Ｒ_１はイソプロポキシおよびシアノである。さらなる実施態様では、Ａがフェニルである場合、Ｒ_１は３位がシアノであり、４位がイソプロポキシであり、あるいはＡがピリジルである場合、Ｒ_１は５位がクロロであり、６位がイソプロポキシである。

一つの実施態様では、Ｒ_２は水素である。

一つの実施態様では、Ｂは（ａ）である。

一つの実施態様では、Ｒ_４は（ＣＨ_２）_１−３ＣＯ_２Ｈである。別の実施態様では、Ｒ_４はＣＨ_２ＣＯ_２Ｈまたは（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈである。さらなる実施態様では、Ｒ_４は（ＣＨ_２）ＣＯ_２Ｈである。
基または基の一部（例えば、アルコキシまたはヒドロキシアルキル）としての「アルキル」とは、総ての異性形の直鎖または分枝アルキル基を意味する。「Ｃ_{（１−６）}アルキル」とは、少なくとも１個、多くて６個の炭素原子を含む、上記で定義されたアルキル基を意味する。このようなアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。このようなアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソ−プロポキシ、ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。

好適なＣ_{（３−６）}シクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。

本明細書において「ハロゲン」とは、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）またはヨウ素（Ｉ）を意味し、「ハロ」とは、ハロゲン：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）およびヨード（−Ｉ）を意味する。

「ヘテロアリール」とは、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでなる不飽和環を表す。５員または６員ヘテロアリール環の例としては、ピロリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、フラザニル、フラニル、チエニル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニルおよびトリアジニルが挙げられる。

式（Ｉ）の化合物のある特定のものでは、置換基の性質によってキラル炭素原子が存在し、従って、式（Ｉ）の化合物は立体異性体として存在し得る。本発明は、鏡像異性体、ジアステレオ異性体およびラセミ体などのその混合物を含む式（Ｉ）の化合物の立体異性形などの総ての光学異性体に及ぶ。異なる立体異性形は慣例の方法によってあるものを他から分離または分割することができ、あるいはある異性体を慣例の選択的または非対称合成によって得ることもできる。

本明細書において化合物のある特定のものは種々の互変異性形で存在する場合があり、本発明はこのような総ての互変異性形を包含すると理解すべきである。
本発明のある特定の化合物は酸基と塩基基の双方を含み、従って、ある特定のｐＨ値において両性イオンとして存在し得ると理解される。

本発明の好適な化合物は、
［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［５−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
４−［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
４−［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
４−［６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
またはその薬学上許容される塩である。

式（Ｉ）の化合物の薬学上許容される誘導体には、レシピエントに投与された際に式（Ｉ）の化合物または活性代謝物もしくはその残基を（直接または間接的に）提供し得る式（Ｉ）の化合物の薬学上許容される塩、エステルまたはそのようなエステルの塩のいずれもが含まれる。

式（Ｉ）の化合物は塩を形成し得る。当然のことながら、医薬において使用するためには、式（Ｉ）の化合物は薬学上許容されなければならない。好適な薬学上許容される塩は当業者には明らかであり、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸などの無機酸；および例えばコハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸などの有機酸とともに形成される酸付加塩のような、J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載されているものが含まれる。式（Ｉ）の化合物のある特定のものは、１当量以上の酸とともに酸付加塩を形成し得る。本発明はその範囲に可能性のある総ての化学量論的および非化学量論的形態を含む。塩はまた、無機塩基および有機塩基を含む薬学上許容される塩基からも製造され得る。無機塩基に由来する塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩＩ）塩、マンガン（ＩＩ）、カリウム、ナトリウム、亜鉛などが挙げられる。薬学上許容される有機塩基に由来する塩としては、第一級、第二級および第三級アミンの；天然置換アミンを含む置換アミン；ならびに環状アミンが挙げられる。特定の薬学上許容される有機塩基としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ、トロメタモール）などが挙げられる。塩はまた、例えばポリアミン樹脂などの塩基性イオン交換樹脂からも形成され得る。本発明の化合物が塩基性である場合、無機酸および有機酸を含む薬学上許容される酸からも塩が製造され得る。このような酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。

薬学上許容される酸付加塩は、慣例的に適当な酸または酸誘導体との反応により製造され得る。塩基との薬学上許容される塩は、慣例的に適当な無機または有機塩基との反応により製造され得る。

式（Ｉ）の化合物は結晶形態または非結晶形態で製造可能であり、結晶性であれば、所望により水和または溶媒和されていてもよい。本発明はその範囲に化学量論的水和物または溶媒和物ならびに種々の量の水および／または溶媒を含有する化合物を含む。

本発明の範囲には、式（Ｉ）の化合物のあらゆる塩、溶媒和物、水和物、複合体、多型、プロドラッグ、放射性標識誘導体、立体異性体および光学異性体が含まれる。

Ｓ１Ｐ１受容体に対する本発明の化合物の能力および効力は、ヒトにクローニングされた受容体に対して行われるＧＴＰγＳアッセイにより測定することができる。式（Ｉ）の化合物は、本明細書に記載の機能的アッセイを用い、Ｓ１Ｐ１受容体におけるアゴニスト活性を示した。

よって、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される症状または障害の処置に用いられる。特に、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡(lupus erythematosis）、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病（本発明では以下「本発明の障害」と呼ぶ）の処置に用いられる。

従って、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)の処置に用いられる。

従って、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は乾癬の処置に用いられる。

従って、式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は多発性硬化症の処置に用いられる。

本明細書において「処置」は確立された症状の予防ならびに緩和を含むと理解すべきである。

よって、本発明はまた、特に、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される症状または障害の処置において治療物質として使用するための式（Ｉ）の化合物または薬学上許容される塩を提供する。特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病の処置において治療物質として使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を提供する。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)の処置において治療物質として用いられる。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は乾癬の処置において治療物質として用いられる。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は多発性硬化症の処置において治療物質として用いられる。

本発明はさらに、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介され得る、ヒトを含む哺乳類における症状または障害の処置方法であって、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる方法を提供する。特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病の処置方法であって、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる方法を提供する。

本発明は、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)の処置方法を提供する。

本発明は、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる乾癬の処置方法を提供する。

本発明は、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる多発性硬化症の処置方法を提供する。

別の態様において、本発明は、Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される症状または障害の処置において使用するための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩の使用を提供する。

特に、本発明は、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病の処置において使用するための薬剤の製造において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を提供する。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は、紅斑性狼瘡(lupus erythematosis)の処置において使用するための薬剤の製造において用いられる。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は、乾癬の処置において使用するための薬剤の製造において用いられる。

式（Ｉ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩は、多発性硬化症の処置において使用するための薬剤の製造において用いられる。

療法において式（Ｉ）の化合物およびその薬学上許容される塩を使用するためには、それらを通常標準的な薬務に従って医薬組成物へと処方する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩と薬学上許容される担体または賦形剤とを含んでなる医薬組成物を提供する。

さらなる態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩と薬学上許容される担体または賦形剤とを混合することを含んでなる、医薬組成物の製造方法を提供する。

適切には周囲温度および大気圧での混合により製造され得る本発明の医薬組成物は、通常、経口投与、非経口投与または直腸投与に適合され、それ自体、錠剤、カプセル剤、経口用液体製剤、粉末、顆粒、トローチ剤、再構成用粉末、注射もしくは注入溶液もしくは懸濁液または坐剤の形態であり得る。経口投与可能な組成物が通常好ましい。

経口投与用の錠剤およびカプセル剤は単位用量形であってよく、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤（例えば、ラクトース、微晶質セルロースまたはリン酸水素ナトリウム）；錠剤化滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプンまたはグリコール酸ナトリウムデンプン）；および許容される湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などの慣例の賦形剤を含み得る。これらの錠剤は通常の薬務において周知の方法に従ってコーティングしてもよい。

経口液体製剤は例えば、水性または油性懸濁液、溶液、エマルション、シロップ剤またはエリキシル剤の形態であってもよく、あるいは使用前に水または他の好適なビヒクルで再構成するための乾燥製品の形態であってもよい。このような液体製剤は、沈殿防止剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水素化食用油脂）、乳化剤（例えば、レシチンまたはアラビアガム）、非水性ビヒクル（食用油、例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコールまたは精留植物油を含み得る）、保存剤（例えば、メチルまたはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸）、および所望により適当であれば慣例の香味剤または着色剤、バッファー塩および甘味剤を含み得る。経口投与用製剤は、有効化合物の制御放出を得るために適宜処方してもよい。

非経口投関しては、本発明の化合物またはその薬学上許容される塩および無菌ビヒクルを用いた液体単位投与形が製造される。注射用処方物は、本発明の化合物またはその薬学上許容される誘導体および無菌ビヒクルを所望により保存剤を添加して用いた単位投与形、例えば、アンプルまたは多用量で製造され得る。これらの組成物は油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルションの形態をとってもよく、沈殿防止剤、安定剤および／または分散剤などの処方剤を含んでもよい。あるいは、有効成分は、使用前に好適なビヒクル、例えば、無菌パイロジェンフリー水で構築するための粉末形態であってもよい。化合物は、用いるビヒクルおよび濃度によって、ビヒクル中に懸濁するかまたは溶解するかのいずれかが可能である。溶液を製造する際には、化合物を注射用に溶解し、濾過除菌した後に好適なバイアルまたはアンプルに充填し、密閉することができる。有利には、局部麻酔薬、保存剤および緩衝剤などのアジュバントをビヒクルに溶解させる。安定性を高めるためには、組成物をバイアルに充填した後に凍結させ、真空下で水を除去することができる。非経口懸濁液も、化合物をビヒクルに溶解させる代わりに懸濁させること、および滅菌が濾過によって行えないこと以外は、実質的に同様に製造される。この化合物は、無菌ビヒクルに懸濁させる前にエチレンオキシドに曝すことにより滅菌することができる。有利には、化合物の一様な分布を助けるために組成物に界面活性剤または湿潤剤を含める。

ローションは水性または油性基剤を用いて処方することができ、一般に、１以上の乳化剤、安定剤、分散剤、沈殿防止剤、増粘剤または着色剤の含む。滴剤は、１以上の分散剤、安定剤、可溶化剤または沈殿防止剤も含んでなる水性または非水性基剤を用いて処方することができる。それらはまた保存剤も含み得る。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩はまた、例えば、ココアバターまたは他のグリセリドなどの慣例の坐剤基剤を含有する坐剤または保留浣腸などの直腸組成物に処方してもよい。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩はまたデポー製剤として処方してもよい。このような持続性処方物は移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射により投与することができる。よって、例えば、本発明の化合物は、好適なポリマー材料もしくは疎水性材料（例えば、許容される油中のエマルションとして）またはイオン交換樹脂を用いて、あるいは難溶性誘導体として、例えば、難溶性の塩として処方することができる。

鼻腔内投与に関しては、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩は、好適な定量または単位用量デバイスを介した投与のための溶液、あるいはまた好適な送達デバイスを用いた投与のために好適な担体と混合した粉末として処方することができる。よって、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩は、経口、口内、非経口、局所的（眼用および鼻腔用を含む）、デポーまたは直腸投与用に、あるいは吸入または吹送（口または鼻のいずれかを介する）による投与に好適な形態で処方することができる。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩は、軟膏、クリーム、ゲル、ローション、ペッサリー、エアゾールまたは滴剤（例えば、眼、耳または鼻用滴剤）の形態での局所投与用に処方することができる。軟膏およびクリームは、例えば、水性または油性基剤を用い、好適な増粘剤および／またはゲル化剤を添加して処方することができる。眼への投与のための軟膏は、無菌成分を用いて無菌的に製造すればよい。

本組成物は、投与方法に応じて、０．１〜９９重量％、好ましくは１０〜６０重量％の有効物質を含み得る。上述の障害の処置に用いられる化合物の用量は、通常、障害の重篤度、罹患者の体重および他の同様の因子によって異なる。しかしながら、一般的な指針としては、好適な単位用量は０．０５〜１０００ｍｇ、１．０〜５００ｍｇまたは１．０〜２００ｍｇであり得、このような単位用量を１日１回より多く、例えば、１日２回または３回投与することができる。

式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩は、他の有効成分と組み合わせて、組合せ製剤として使用してもよい。例えば、本発明の化合物は、シクロスポリンＡ、メトトレキサート、ステロイド類(steriods)、ラパマイシン、炎症性サイトカイン阻害剤、免疫調節剤（生物製品または他の治療有効化合物を含む）と組み合わせて使用可能である。

本発明は、１以上の原子が、自然界で通常に見られる原子量または質量数と異なる原子量または質量数を有する原子で置換されていること以外は、式Ｉで示されているものと同一であり従う、同位元素標識された化合物も含む。本発明の化合物に組み込むことができる同位元素の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素および塩素の同位元素、例えば、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１４Ｃ、^１８Ｆ、^１２３Ｉおよび^１２５Ｉが挙げられる。

上述の同位元素および／または他の原子の他の同位元素を含む本発明の化合物および該化合物の薬学上許容される塩も本発明の範囲内にある。同位元素標識された本発明の化合物、例えば、^３Ｈ、^１４Ｃなどの放射性銅元素が組み込まれているものは、薬剤および／または基質組織分布アッセイに有用である。トリチウム化、すなわち^３Ｈ、および炭素−１４、すなわち^１４Ｃ、同位元素はそれらの製造の容易さおよび検出性のために特に好ましい。^１１Ｃおよび^８Ｆ同位元素はＰＥＴ（陽電子放射型断層撮影法）に特に有用であり、^１２５Ｉ同位元素はＳＰＥＣＴ（単光子放射コンピューター断層撮影法）に特に有用であり、いずれも脳の画像化に有用である。さらに、重水素、すなわち^２Ｈなどのより重い同位元素での置換は、より高い代謝安定性、例えばin vivo半減期の延長または用量要求の低減から来るある特定の治療的利益を与えることができ、ゆえに、いくつかの状況で好ましい場合がある。同位元素標識された、本発明に従う式（Ｉ）の化合物は一般に、以下のスキームおよび／または実施例に開示されている手順を行うことにより、非同位元素標識試薬を容易に入手可能な同位元素標識された試薬に置き換えることによって製造することができる。

さらなる態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供する。

Ｂが

であり、Ｒ_４がテトラヒドロイソキノリン環系の１位における−ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈであり、Ｒ_２およびＲ_３が水素であり、Ｒ_１およびＡが式（Ｉ）に関して定義された通りである式（Ｉ）の化合物は、スキーム１（ここで、Ｐは保護基である）に従って製造することができる。

式（ｉｉ）の化合物（例えば、Fluorochemから入手可能）を、ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネートなどの好適な試薬を用いて、Ｐがｔ−ブトキシカルボニルなどの好適な保護基を表す式（ｉｉｉ）の化合物に変換した後、重炭酸ナトリウムなどの好適な塩基の存在下でヒドロキシルアミンと反応させることができる。式（ｉｉｉ）の化合物は、水素化ナトリウムなどの好適な塩基の存在下で式（ｉｖ）の化合物と反応させることにより、式（ｖｉ）の化合物に変換することができる。あるいは、式（ｉｉｉ）の化合物は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミンなどの好適な塩基の存在下、所望により、４−ジメチルアミノピリジンなどの触媒の存在下で式（ｖ）の化合物と反応させることにより、式（ｖｉ）の化合物に変換することができる。式（ｉｖ）および（ｖ）の化合物は既知の化合物であるか、または当技術分野で公知の標準的な方法により製造することができる。式（ｖｉ）の化合物は、好適な条件下、例えば、Ｐがｔ−ブトキシカルボニルである場合には１，４−ジオキサン中の塩化水素などの酸で脱保護することにより、式（ｖｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｖｉｉ）の化合物は、例えば、Ｎ−ブロモスクシンイミドなどの好適な臭素化剤と反応させた後、炭酸カリウムなどの好適な塩基の存在下でモノ−ｔｅｒｔ−ブチルマロネートなどの好適な試薬と反応させることにより、式（ｖｉｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｖｉｉｉ）の化合物は、塩化水素などの好適な酸で処理することによりある特定の式（Ｉ）の化合物に変換することができる。

Ｂが

であり、Ｒ_４がテトラヒドロイソキノリン環系の１位における−ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈであり、Ｒ_２が５位にあり、Ｒ_３が水素であり、オキサジアゾール環が６位にあり、Ｒ_１、Ｒ_２およびＡが式（Ｉ）に関して定義された通りである式（Ｉ）の化合物は、スキーム２（ここで、Ｒはアルキル基、例えば、ｎ−ブチルを表す）に従って製造することができる。

式（ｉｘ）の化合物（スキーム４に記載のように製造）は、重炭酸ナトリウムなどの好適な塩基の存在下でヒドロキシルアミンと反応させることにより、式（ｘ）の化合物に変換することができる。式（ｘ）の化合物は、トリエチルアミンなどの好適な塩基の存在下で式（ｖ）の化合物と反応させることにより、式（ｘｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｉ）の化合物は、水酸化ナトリウムなどの好適な塩基で加水分解することにより、式（ｘｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｉｉ）の化合物は、トリフルオロ酢酸などの好適な酸で脱保護することにより、式（Ｉ）のある特定の化合物に変換することができる。

Ｂが

であり、Ｒ_４がテトラヒドロイソキノリン環系の１位における（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈであり、Ｒ_２が５位にあり、Ｒ_３が水素であり、オキサジアゾール環が６位にあり、Ｒ_１、Ｒ_２およびＡが式（Ｉ）に関して定義された通りである式（Ｉ）の化合物は、スキーム３（ここで、Ｒはアルキル基、例えば、エチルを表す）に従って製造することができる。

式（ｉｘ）の化合物（スキーム４に記載のように製造）は、水素化ホウ素リチウムなどの好適な還元剤で還元することにより、式（ｘｉｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｉｉｉ）の化合物は、ジメチルスルホキシド／塩化オキサリルなどの好適な酸化剤で酸化した後、エチル（トリフェニル−λ^５−ホスファニリデン）アセテートなどの好適なウィッティヒ(Wittig)試薬と反応させることにより、式（ｘｉｖ）の化合物に変換することができる。式（ｘｉｖ）の化合物は、好適な条件下での還元、例えば、パラジウム／炭素などの好適な触媒の存在下での水素化により、式（ｘｖ）の化合物に変換することができる。式（ｘｖ）の化合物は、スキーム２に記載されているものと同様の条件下で、ある特定の式（Ｉ）の化合物に変換することができる。

Ｒ_２が上記で式（Ｉ）に関して定義された通りであり、Ｒがアルキル基、例えば、ｎ−ブチルである式（ｉｘ）の化合物は、スキーム４に示されるように製造することができる。

式（ｘｖｉｉｉ）の化合物は、酢酸アンモニウムなどの好適な試薬の存在下でニトロメタンと反応させることにより、式（ｘｉｘ）の化合物に変換することができる。式（ｘｉｘ）の化合物は、好適な条件下での還元、例えば、クロロトリメチルシランの存在下で水素化ホウ素リチウムを用いることにより、式（ｘｘ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘ）の化合物は、臭素などの好適な臭素化試薬で臭化することにより、式（ｘｘｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｉ）の化合物は、ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネートなどの好適な試薬と反応させることにより、式（ｘｘｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｉｉ）の化合物は、酢酸パラジウム（ＩＩ）などの好適な触媒の存在下、トリス（２−メチルフェニル）ホスファンなどの好適なリガンドとトリエチルアミンなどの好適な塩基の存在下で、Ｒがアルキル基、例えば、ｎ−ブチルを表す式（ｘｘｉｉｉ）の化合物と反応させることにより、式（ｘｘｉｖ）の化合物に変換することができる。

式（ｘｘｉｖ）の化合物は、トリフルオロ酢酸などの好適な酸の存在下での環化により、式（ｘｘｖ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｖ）の化合物は、三臭化ホウ素などの好適な脱メチル化剤と反応させることにより、式（ｘｘｖｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｖｉ）の化合物は、ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネートなどの好適な試薬と反応させることにより、式（ｘｘｖｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｖｉｉ）の化合物は、ピリジンなどの好適な塩基の存在下で無水トリフルオロメタンスルホン酸などの好適なトリフルオロメタンスルホニル化試薬と反応させることにより、式（ｘｘｖｉｉｉ）の化合物に変換することができる。式（ｘｘｖｉｉｉ）の化合物は、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）などの好適な触媒の存在下でシアン化亜鉛などの好適なシアン化物と反応させることにより、式（ｉｘ）の化合物に変換することができる。

限定されるものではないが特許および特許出願を含む、本明細書に引用されている刊行物は総て、それぞれ個々の刊行物が完全に示されているかのように引用することにより本明細書の一部とされることが具体的かつ個々に示されている場合と同様に、引用することにより本明細書の一部とされる。

以下の説明および実施例は本発明の化合物の製造を示す。
略号：
ｇ − グラム
ｍｇ − ミリグラム
ｍｌ − ミリリットル
μｌ − マイクロリットル
ＭｅＣＮ − アセトニトリル
ＭｅＯＨ − メタノール
ＥｔＯＨ − エタノール
Ｅｔ_２Ｏ − ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ − 酢酸エチル
ＤＣＭ − ジクロロメタン
ＤＩＡＤ − ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
ＤＭＥ −１，２−ビス（メチルオキシ）エタン
ＤＭＦ − Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ − ジメチルスルホキシド
ＥＤＡＣ − Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣ − Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣＩ − Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＨＯＢＴ／ＨＯＢｔ − ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＩＰＡ − イソプロピルアルコール
ＮＣＳ − Ｎ−クロロスクシンイミド
ＰｙＢＯＰ − ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＨＦ − テトラヒドロフラン
ｄｂａ − ジベンジリデンアセトン
ＲＴ − 室温
℃ − セ氏度
Ｍ − モル
Ｈ − プロトン
ｓ − 一重線
ｄ − 二重線
ｔ − 三重線
ｑ − 四重線
ＭＨｚ − メガヘルツ
ＭｅＯＤ − 変性メタノール
ＬＣＭＳ − 液体クロマトグラフィー質量分析
ＬＣ／ＭＳ − 液体クロマトグラフィー質量分析
ＭＳ − 質量分析
ＥＳ − エレクトロスプレー
ＭＨ^＋ − マスイオン＋Ｈ^＋
ＭＤＡＰ − 質量指示自動分取液体クロマトグラフィー
ｓａｔ． − 飽和
Ｂｏｃ − ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＳＣＸ固相に固定されたベンゼンスルホン酸残基を用いる固相抽出（ＳＰＥ）カラム（例えば、ＩＳＴＩｓｏｌｕｔｅ（商標）カラム）

一般化学の節
下記の方法は例示目的で示されるものであり、これらの実施例の製法における中間体は、必ずしも、記載されている特定のバッチから製造されたものでなくてもよい。

調製例１
５−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

１，２，３，４−テトラヒドロ−５−イソキノリンカルボニトリル塩酸塩（Fluurochemから入手可能、５．０ｇ／２５．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）と２ＮＮａＯＨとで分液した。ＤＣＭ層を回収し、乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させた。遊離塩基１，２，３，４−テトラヒドロ−５−イソキノリンカルボニトリルを乾燥ＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解させ、ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネート（１．１当量、６．１７ｇ）で処理した。この反応物をアルゴン下、室温で１８時間攪拌し、２ＮＮａＯＨ（１００ｍＬ）、２ＮＨＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させて、粗１，１−ジメチルエチル−５−シアノ−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボキシレートを得、これをそれ以上精製せずに用いた（ＬＣＭＳ１００％、ＮＭＲｔＢｕＯＨとの２：１混合物）。単離収量７．５８ｇ。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d (特に) 7.52 (1H, d), 7.35-7.16 (2H, m), 4.60 (2H, br.s), 3.71 (2H, t), 3.04 (2H, t), 1.5 (9H, s); m/z (API-ES) 203 [M+H-56]⁺

上記からの粗材料、ヒドロキシルアミン．ＨＣｌ（１４．３１ｇ、２０６ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（２１．６３ｇ、２５７ｍｍｏｌ）を、エタノール（２００ｍＬ）を含む５００ｍＬ丸底フラスコに加えた。この反応混合物を６５℃で２４時間加熱した。冷却した反応物を蒸発させ、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）とで分液した。合わせたＤＣＭ層を回収し、乾燥させた。ＬＣ／ＭＳによる分析はこの材料が〜８０％の純度であることを示した。この材料をエタノール（１００ｍＬ）に溶解させ、濾過して不溶解不純物を除去した。ＬＣ／ＭＳによる分析は、この材料が９２％の純度であることを示した。５−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチルはそれ以上精製せずに用いた。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 7.82 (1H, br.s), 7.36-7.16 (3H, m), 4.80 (2H, br.s), 4.58 (2H, br.s), 3.59 (2H, br.t), 2.98 (2H, t), 1.49 (9H, s); m/z (API-ES) 292 [M+H]⁺.

調製例２
３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸メチル

３−クロロ−４−ヒドロキシ安息香酸メチル（Pfalz % Bauerから入手可能、５０ｇ、０．２７モル）、Ｋ_２ＣＯ_３（７４ｇ、０．５４モル）およびヨードプロパン（２９．５ｍｌ、０．２３モル）を室温、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中で攪拌した。１８時間後、溶媒を真空蒸発により除去し、残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）中、シリカ６０のカラムでクロマトグラフィーに付し、標題化合物を油状物として得た（５５ｇ、９０％）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 8.05 (1H, d), 7.89 (1H, dd), 6.94 (1H, d), 4.60-4.72 (1H, m), 3.89 (3H, s), 1.41 (6H, d); m/z (API-ES) 229 [M+H]⁺.

調製例３
５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

５−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１）（２ｇ、６．８６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１００ｍＬ）に溶解させ、アルゴン下、室温で３０分間、水素化ナトリウム（６０％分散物、０．３０２ｇ、７．５５ｍｍｏｌ）とともに攪拌した。次に、３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸メチル（調製例２、２．３５５ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を還流温度で１．５時間加熱した。冷却した反応物を蒸発させ、ＤＣＭ（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）とで分液した。水層をＤＣＭ（５０ｍＬ）で洗浄し、合わせたＤＣＭ層を乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させた。粗生成物を、ＤＣＭで溶出する小シリカパッドでのクロマトグラフィーにより精製し、５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（２．５７ｇ、５．４７ｍｍｏｌ、収率８０％）を得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 8.23 (1H, s), 8.05 (1H, d), 7.95 (1H, d), 7.34 (1H, t), 7.27 (1H, d), 7.06 (1H, d), 4.76-4.63 (1H, m), 4.66 (2H, br.s), 3.67 (2H, br.t), 3.25 (2H, br.t), 1.51 (9H, s), 1.45 (6H, d); m/z (API-ES) 414, 416 [M+H-56]⁺.

調製例４
５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩

５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例３）（２．５７ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン中４ＭのＨＣｌ（１００ｍＬ）中で攪拌した。１時間後、反応物は曇りを生じ、さらに１６時間攪拌を続けた。蒸発させ、５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩（２．２３ｇ）を得た。¹H NMR (400 MHz, d₆-DMSO) d 9.43 (2H, s), 8.19 (1H, s), 8.11 (1H dd), 8.03-8.00 (1H, m), 7.51-7.45 (3H, m), 4.89 (1H, sept.), 4.38 (2H, s), 3.43 (2H, t), 3.35-3.32 (2H, m), 1.37 (6H, d); m/z (API-ES) 370, 372 [M+H]⁺.

調製例５
［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸１，１−ジメチルエチル

５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩（調製例４、１００ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）と２ＮＮａＯＨ（１０ｍＬ）とで分液した。ＤＣＭ層を回収し、乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させた。遊離塩基をＤＣＭ（３ｍＬ）に懸濁させ、５ｍＬマイクロ波バイアル中、Ｎ−ブロモスクシンイミド（４３．８ｍｇ、０．２４６ｍｍｏｌ）とともに１００℃で５分間加熱した。この反応混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）とＮａＯＨ（２Ｎ、１０ｍＬ）とで分液した。ＤＣＭ層を回収し、乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させた。残渣を５ｍＬマイクロ波反応バイアル中、アセトニトリル（３．０ｍＬ）に再溶解させた。モノ−ｔｅｒｔ−ブチル−マロネート（１１８ｍｇ、０．７３８ｍｍｏｌ）、次いで、炭酸カリウム（１０２ｍｇ、０．７３８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物をマイクロ波にて１００℃で１０分間加熱した。冷却した反応物を蒸発させた。残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）とで分液した。ＤＣＭ層を回収し、乾燥させ（疎水性フリット）、蒸発させた。得られた残渣をＭＤＡＰにより精製した。ＭＤＡＰ画分を蒸発させ、粗生成物をＤＣＭ（２０ｍＬ）と２ＮＮａＯＨ（２０ｍＬ）とで分液した。ＤＣＭ画分を蒸発させて遊離塩基［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸１，１−ジメチルエチル（６１ｍｇ）を得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 8.23 (1H, s), 8.05 (1H, d), 7.95-7.91 (1H, m), 7.33-7.27 (2H, m), 7.05 (1H, d), 4.74-4.68 (1H, m), 4.53-4.5 (1H, m), 3.76-3.73 (1H, m), 3.30-3.03 (3H, m), 2.84-2.72 (2H, m), 2.27 (1H, br.s), 1.45-1.44 (15H, m); m/z (API-ES) 484, 486 [M+H]⁺.

調製例６
５−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

ＤＣＭ（２０ｍＬ）中、３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸（ＷＯ２００５／５８８４８に記載のように製造することができる、７３７ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）および塩化オキサリル（３６０μｌ）の溶液にＤＭＦ（２０μｌ）を加えた。この溶液を室温で９０分間攪拌した後、真空濃縮し、乾燥ＤＭＦ（６ｍＬ）に再溶解させた。別途、５−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１、１．０５ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．３１ｍｌ、７．５０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。第一のＤＭＦ溶液５ｍＬを第二の溶液に加え、その黄色溶液を室温で１時間、次いで、９５℃で１８時間１８攪拌した。この反応物を真空濃縮した後、ＤＣＭ（５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）とで分液した。有機液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した後、合わせた水溶液をＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機液を真空濃縮して粗褐色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ中［０．５〜４％］ＭｅＯＨの勾配）および真空濃縮により、標題化合物を淡黄色固体として得た（５１２ｍｇ）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 8.42 (1H, d), 8.34 (1H, dd), 7.96 (1H, d), 7.34 (1H, t), 7.29 (1H, d), 7.13 (1H, d), 4.80 (1H, sept), 4.67 (2H, s), 3.68 (2H, t), 3.24 (2H, t), 1.51 (9H, s), 1.48 (6H, d); m/z (ES) 361 [M+H-100]⁺.

調製例７
２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［３−（１，２，３，４−テトラヒドロ−５−イソキノリニル）−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル］ベンゾニトリル

ジオキサン（２０ｍｌ）中、５−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例６、５１２ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）と４ＭＨＣｌの混合物を室温で１８時間攪拌した。この混合物を真空濃縮して淡黄色固体を得、これをＭｅＯＨに再溶解させた。この溶液をＳＣＸ−３カートリッジ（１０ｇ）に適用し、生成物をＭｅＯＨ中１％のＮＨ_３で溶出させた。濃縮により黄色油状物を得、これは一晩放置すると固体となった（３６６ｍｇ）。 ¹H NMR (400 MHz, d₆-DMSO) d 8.38 (1H, d), 8.32 (1H, dd), 7.94 (1H, d), 7.32-7.17 (2H, m), 7.13 (1H, m), 4.80 (1H, sept), 4.10 (2H, s), 3.20-3.14 (4H, m), 1.48 (6H, d); m/z (ES) 361 [M+H]⁺.

調製例８
５−［３−（３，４−ジヒドロ−５−イソキノリニル）−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル

ＤＣＭ（５ｍｌ）中、２−［（１−メチルエチル）オキシ］−５−［３−（１，２，３，４−テトラヒドロ−５−イソキノリニル）−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル］ベンゾニトリル（調製例７、５０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）とＮ−ブロモスクシンイミド（２９．６ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）の溶液を還流下で３時間加熱した後、室温まで冷却した。２ＭＮａＯＨ水溶液（５ｍｌ）を加え、層に分けた。水層をＤＣＭ（５ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせた。真空濃縮により、標題化合物を黄色固体として得た（４７．８ｍｇ）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 8.52 (1H, t), 8.43 (1H, d), 8.34 (1H, dd), 8.23 (1H, dd), 7.55-7.51 (2H, m), 7.14 (1H, d), 4.81 (1H, sept), 3.86 (2H, td), 3.31 (2H, t), 1.48 (6H, d); m/z (ES) 359 [M+H]⁺.

調製例９
２−メチル−１−（メチルオキシ）−３−［（Ｅ）−２−ニトロエテニル］ベンゼン

ニトロメタン（４００ｍｌ）中、２−メチル−３−（メチルオキシ）ベンズアルデヒド（Allichem Product Listから入手可能；２０．０ｇ；１３３ｍｍｏｌ）の溶液に酢酸アンモニウム（６．１６ｇ；８０．０ｍｍｏｌ）を加え、得られた橙色の混合物を１００℃で１時間攪拌した後、室温まで冷却し、真空濃縮した。残渣を酢酸エチル（×２）とブラインとで分液し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、真空濃縮した。ジクロロメタン／エーテルでの摩砕により、標題化合物を黄色固体として得た（６．６０ｇ）。¹H NMR (CHLOROFORM-d) d: 8.35 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.33 (s, 3H).

調製例１０
｛２−［２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミン

水素化ホウ素リチウム（ＴＨＦ中２Ｍ；２．００ｍｌ；４．００ｍｍｏｌ）に０．５分かけてクロロトリメチルシラン（１．０２ｍｌ；８．００ｍｍｏｌ）を滴下した。沈殿が形成され、およそ３分後にＴＨＦ（４ｍｌ）中、２−メチル−１−（メチルオキシ）−３−［（Ｅ）−２−ニトロエテニル］ベンゼン（調製例９、１９３ｍｇ；１．００ｍｍｏｌ）を、温度が確実におよそ２５℃に維持されるようにしつつ（水冷浴を使用）、５分かけてシリンジで滴下した。この溶液を室温で一晩攪拌した。この混合物を氷浴で冷却し、メタノールをゆっくり加え、溶媒を除去した。残渣を２５％水酸化ナトリウム水溶液とジクロロメタンとで分液し（３回抽出）、溶媒を蒸発させた。残渣を固相抽出（ＳＣＸカラム）により精製し、標題化合物を得た（８０ｍｇ）。¹H NMR (CHLOROFORM-d) d: 7.10 (t, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.91 (t, 2H), 2.77 (t, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.76 (br. s., 2H).

調製例１１
｛２−［６−ブロモ−２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミンＮ９２１８−９２−Ｂ１

０℃にて、ジクロロメタン（１５０ｍｌ）中、｛２−［２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミン（調製例１０；２．７３ｇ；１６．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジクロロメタン（１０ｍｌ）中、臭素（２．３８ｇ；１４．９ｍｍｏｌ）を、３分かけて滴下した。溶媒を除去し、ジエチルエーテルで摩砕し、濾過し、真空下で乾燥させ、標題化合物（４．１７ｇ）を淡黄色固体として得た。MS m/z 244 [MH⁺]

調製例１２
｛２−［６−ブロモ−２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル

室温で、ジクロロメタン（１５ｍｌ）中、｛２−［６−ブロモ−２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミン（調製例１１；５００ｍｇ；１．５４ｍｍｏｌ）の懸濁液にトリエチルアミン（０．６４３ｍｌ；４．６１ｍｍｏｌ）、次いで、ビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネート（３６９ｍｇ；１．６９ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルとブラインとで分液した。水層を酢酸エチルでさらに抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、真空濃縮し、粗生成物を得た（６００ｍｇ）。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を無色の油状物として得た（２９０ｍｇ）（システム漏れのためいくらかのサンプル損失があったことを注記しておく）。MS m/z 344 [MH⁺]

調製例１３
（２Ｅ）−３−［２−［２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）エチル］−３−メチル−４−（メチルオキシ）フェニル］−２−プロペン酸ブチル

ＤＭＦ（１５ｍｌ）中、｛２−［６−ブロモ−２−メチル−３−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１２；１．０５ｇ；３．０５ｍｍｏｌ）の溶液を真空下で脱気した後、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１３７ｍｇ：０．６１０ｍｍｏｌ）およびトリス（２−メチルフェニル）ホスファン（３７１ｍｇ：１．２２ｍｍｏｌ）、次いで、トリエチルアミン（２．１３ｍｌ；１５．２５ｍｍｏｌ）およびアクリル酸ブチル（７８２ｍｇ；６．１０ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この黄色溶液を１００℃で一晩攪拌した。この混合物を室温まで冷却した後、セライト（登録商標）カートリッジ（１０ｇ）を用いてパラジウム黒を除去し、酢酸エチル（１００ｍｌ）で十分洗浄した。有機相をブラインで２回洗浄し、合わせた水層を酢酸エチルで２回再抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、油状物（２ｇ）を得た。シクロヘキサン中、３％〜２０％の酢酸エチルで溶出するクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を黄色油状物として得（１．０６ｇ）、これはゆっくり固化した。MS m/z 392 [MH⁺]

調製例１４
［５−メチル−６−（メチルオキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸ブチル

０℃で、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中、（２Ｅ）−３−［２−［２−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）エチル］−３−メチル−４−（メチルオキシ）フェニル］−２−プロペン酸ブチル（調製例１３；９５０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（２０．０ｍｌ）を滴下した。０℃で１時間後、溶媒を除去し、ジクロロメタン、次いで、メタノール中２Ｎのアンモニアで溶出するスルホン酸イオン交換カートリッジ（ＳＣＸ；２０ｇ）を用いて精製し、メタノール／アンモニア相を蒸発させ、褐色固体（１．５ｇ）を得た。この固体をトルエンで摩砕し、混合物を濾過し、母液を真空濃縮し、真空下で乾燥させ、標題化合物を褐色油状物として得た（９６０ｍｇ）。MS m/z 292 [MH⁺]

調製例１５
（６−ヒドロキシ−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸ブチル

窒素下、０℃で、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中、［５−メチル−６−（メチルオキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸ブチル（調製例１４；７０７ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下、三臭化ホウ素（１．１５ｍｌ；１２．１ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を０℃で３０分間攪拌し、この混合物にエタノール（３ｍｌ）をゆっくり加えた。１０分後、溶媒を真空下で除去し、残渣を、ジクロロメタン、次いで、メタノール中２Ｎのアンモニアで溶出するスルホン酸イオン交換カートリッジ（ＳＣＸ；２０ｇ）を用いて精製した。メタノール相を蒸発させ、残渣をエーテルとメタノールの混合物で摩砕した。エーテル／メタノール母液を蒸発させ、標題化合物を褐色油状物として得た（６４３ｍｇ）。MS m/z 278 [MH⁺]

調製例１６
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−ヒドロキシ−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

室温で、ジクロロメタン（１５ｍｌ）およびエタノール（５ｍｌ）中、（６−ヒドロキシ−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸ブチル（調製例１５；６７３ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．６７７ｍｌ、４．８５ｍｍｏｌ）およびビス（１，１−ジメチルエチル）ジカーボネート（０．６２０ｍｌ、２．６７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で２５分間攪拌し、大部分の溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチルとブラインとで分液した。層に分け、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮した。シクロヘキサン中、５〜２５％の酢酸エチルで溶出するクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を無色の油状物として得た（７６０ｍｇ）。MS m/z 378 [MH⁺]

調製例１７
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−５−メチル−６−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

−３０℃で、ジクロロメタン（２０ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−ヒドロキシ−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１６；６２０ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（０．２６６ｍｌ、３．２８ｍｍｏｌ）を加え、次いで、無水トリフルオロメタンスルホン酸（０．３０５ｍｌ、１．８１ｍｍｏｌ）を滴下した。温度を３０分間−２０℃未満に保ち、この混合物を室温まで温め、真空濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。この溶液を１Ｎ塩酸、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（９００ｍｇ）を深橙色の油状物として得た。MS m/z 510 [MH⁺]

調製例１８
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−シアノ−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−５−メチル−６−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチルの溶液（調製例１７；８３７ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）の溶液を真空下で１５分間脱気した。次に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１９０ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）およびシアン化亜鉛（２５１ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を加え、得られた橙色の混合物を１００℃で４時間攪拌した。この混合物を室温まで冷却し、不溶性材料を濾去し、酢酸エチルで洗浄した。母液を真空濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。溶液を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、水相をさらに酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮した。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（６００ｍｇ）を無色の油状物として得た。MS m/z 387 [MH⁺]

調製例１９
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

フラスコに１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−シアノ−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１８；５９０ｍｇ；１．５３ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（６３７ｍｇ；９．１６ｍｍｏｌ）（７６９ｍｇ；９．１６ｍｍｏｌ）、次いで、エタノール（１５ｍｌ）を仕込み、得られた懸濁液を８０℃で一晩攪拌した。塩酸ヒドロキシルアミンおよび重炭酸ナトリウム（各３当量）を追加し、この混合物を８０℃でおよそ１４時間攪拌した。この混合物を室温まで冷却し、沈殿を濾去し、残渣をエタノールで洗浄した。合わせた濾液と洗液を真空下で蒸発させ、残渣を水とエーテルとで分液した。相に分け、水相をエーテルで２回抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物を得た（５４７ｍｇ）。MS m/z 420 [MH⁺]

調製例２０
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

ジオキサン（４ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１９；２６４ｍｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．２６３ｍｌ、１．８９ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ジオキサン（２ｍｌ）中、３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド（調製例３３；１７６ｍｇ、０．７５５ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で９０分間攪拌した後、１００℃で２４時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、大部分の溶媒を真空下で除去し、残渣を酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウムとで分液した。層に分け、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。合わせた有機をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮した。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を淡黄色の油状物として得た（８０ｍｇ）。MS m/z 598 [MH⁺]

調製例２１
１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

ジオキサン（４ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１９；２６４ｍｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．２６３ｍｌ、１．８９ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ジオキサン（２ｍｌ）中、３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド（ＷＯ２００８１２８９５１に記載されている調製例；１６９ｍｇ、０．７５５ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で９０分間攪拌した後、１００℃で２４時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、大部分の溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウムとで分液した。層に分け、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮した。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物を淡黄色の油状物として得た（４１ｍｇ）。MS m/z 589 [MH⁺]

調製例２２
（６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチルＪオキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸

エタノール（３ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２０；９２ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム（０．１５４ｍｌ、０．３０８ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温でおよそ３．５時間攪拌した。大部分の溶媒を除去し、残渣をエーテルと水とで分液した（混合物を塩基性に維持するために２Ｎ水酸化ナトリウムを滴下しながら）。層に分け、水層を２Ｎ塩酸水溶液で酸性化し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチル画分をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（７５ｍｇ）を淡黄色の油状物として得た。MS m/z 542 [MH⁺]

調製例２３
（６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニス｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸

エタノール（２ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２１；４１ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）の溶液に、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．０７０ｍｌ、０．１３９ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温でおよそ３．５時間攪拌した。大部分の溶媒を除去し、残渣をエーテルと水とで分液した（混合物を塩基性に維持するために２Ｎ水酸化ナトリウムを滴下しながら）。層に分け、水層を２Ｎ塩酸水溶液で酸性化すると白色沈殿が生じ、これを酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチル画分をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物を得た（３８ｍｇ）。MS m/z 533 [MH⁺]

調製例２４
６−シアノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

窒素下、２５℃で、エタノール（１０ｍｌ）およびジエチルエーテル（４０ｍｌ）中、１−［２−（ブチルオキシ）−２−オキソエチル］−６−シアノ−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例１８；２．１５ｇ、５．５６ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素リチウム（テトラヒドロフラン中２Ｍ溶液、４．１７ｍｌ；８．３４ｍｍｏｌ）を加えた。２５℃で１．５時間後、溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。この溶液を１Ｎ塩酸で洗浄し、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。合わせた有機相を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（１．７０ｇ）を白色泡沫として得た。MS m/z 317 [MH⁺]

調製例２５
６−シアノ−１−［（２Ｅ）−４−（エチルオキシ）−４−オキソ−２−ブテン−１−イル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

窒素下、−７８℃で、ジクロロメタン（５ｍｌ）中、塩化オキサリル（０．１０７ｍｌ、１．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジクロロメタン（２ｍｌ）中、ジメチルスルホキシド（０．１００ｍｌ、１．４１ｍｍｏｌ）を２分かけて滴下した。１５分間後、ジクロロメタン（４ｍｌ）中、６−シアノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２４；２９７ｍｇ、０．９３９ｍｍｏｌ）を５分かけて加え、得られた混合物を−７８℃で１時間攪拌した。次に、トリエチルアミン（０．３９３ｍｌ、２．８２ｍｍｏｌ）を加え、５分間後に得られた混合物を３０分かけて室温まで温め、白色沈殿を得た。次に、（トリフェニル−１５−ホスファニリデン）酢酸エチル（Aldrichから入手可能、３９２ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で４０分間攪拌した。溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルとブラインとで分液した。水層を酢酸エチルでさらに抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮した。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（２７２ｍｇ）を無色の油状物として得た。MS m/z 402 [MH⁺]

調製例２６
６−シアノ−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

窒素下、エタノール（２０ｍｌ）中、６−シアノ−１−［（２Ｅ）−４−（エチルオキシ）−４−オキソ−２−ブテン−１−イル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２５；５３０ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、パラジウム／炭素（１０６ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を水素（１バール）雰囲気下で１０５分攪拌した。触媒をセライト（登録商標）で濾去し、濾液を真空濃縮し、標題化合物を得た（５３０ｍｇ）。MS m/z 387 [MH⁺]

調製例２７
１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

エタノール（１５ｍｌ）中、６−シアノ−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２６；５３３ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、塩酸ヒドロキシルアミン（５７５ｍｇ、８．２７ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（６９５ｍｇ、８．２７ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃で３２時間攪拌した。塩酸ヒドロキシルアミンおよび重炭酸ナトリウム（各３当量）を追加し、８０℃で一晩加熱を続けた。塩酸ヒドロキシルアミンおよび重炭酸ナトリウム（各３当量）を追加し、８０℃で５．５時間加熱を続けた。塩酸ヒドロキシルアミンおよび重炭酸ナトリウム（各３当量）を追加し、８０℃で一晩加熱を続けた。この混合物を室温まで冷却し、固体を濾去し、エタノールで洗浄した。濾液および洗液を合わせ、大部分の溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。この溶液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（５００ｍｇ）を淡黄色の泡沫として得た。MS m/z 420 [MH⁺]

調製例２８
６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（５ｍｌ）中、６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−１−（４−オキソヘプチル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２７；２３０ｍｇ、０．５５１ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．１１５ｍｌ、０．８２６ｍｍｏｌ）を加え、次いで、窒素下、室温で、ＤＭＦ（２ｍｌ）中、３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド（調製例３３；１５４ｍｇ、０．６６１ｍｍｏｌ）を１分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間攪拌した後、１２０℃でおよそ２．５時間加熱した。大部分の溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルに溶解させた。この溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液、次いで、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、粗生成物（およそ３５０ｍｇ）を得た。シクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（１１０ｍｇ）を無色の油状物として得た。MS m/z 598 [MH⁺]

調製例２９
６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（４ｍｌ）中、１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２７；２４０ｍｇ、０．５７２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．１１９ｍｌ、０．８５８ｍｍｏｌ）を加え、次いで、窒素下、室温で、ＤＭＦ（２ｍｌ）中、３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド（ＷＯ２００８１２８９５１；１４１ｍｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）を１分かけて滴下した。得られた混合物を室温で１時間攪拌した後、１２０℃まで温めた。１２０℃で２時間後、大部分の溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルで希釈した。この溶液を重炭酸ナトリウム、次いで、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、粗生成物を得た（およそ３００ｍｇ）。シクロヘキサン中８〜３８％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（１２０ｍｇ）を白色泡沫として得た。MS m/z 589 [MH⁺]

調製例３０
６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル

室温で、ジクロロメタン（５．００ｍｌ）中、５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジンカルボン酸（例えば、UkrOrgSynthesis Building Blocksから入手可能；２６４ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、塩化オキサリル（０．２９２ｍｌ、３．３３ｍｍｏｌ）、次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１滴を加え、得られた混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をトルエンとともに共蒸発させた後、真空下で５分間放置した。ＤＭＦ（５ｍｌ）中、６−［（ヒドロキシアミノ）（イミノ）メチル］−５−メチル−１−（４−オキソヘプチル）−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２７；２３２ｍｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．１１６ｍｌ、０．８３３ｍｍｏｌ）、次いで、半量の酸塩化物（すなわち、それを溶解させるのに用いた４ｍｌのＤＭＦのうち２ｍｌ）を加えた。この混合物を室温で１時間攪拌し、１２０℃で１００分間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、大部分の溶媒を真空濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、溶液を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮して残渣（およそ３１０ｍｇ）を得、これをシクロヘキサン中５〜２５％の酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（１０２ｍｇ）を白色泡沫として得た。MS m/z 599 [MH⁺]

調製例３１
４−（６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸

エタノール（３ｍｌ）中、６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２８；１１０ｍｇ、０．１８４ｍｍｏｌ）の溶液に、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．１８４ｍｌ、０．３６８ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で１００分間攪拌した。２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．１ｍｌ）を追加し、室温で５．５時間攪拌を続けた。大部分の溶媒を除去し、残渣をエーテルと水とで分液した。この相を確実に塩基性とするために２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加えたところ、カルボン酸塩の沈殿が生じた。水層を２Ｎ塩酸水溶液で酸性化し、酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（９５ｍｇ）を白色泡沫として得た。MS m/z 570 [MH⁺]

調製例３２
４−（６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸

エタノール（５ｍｌ）中、６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例２９；１１１ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）の溶液に、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．１８９ｍｌ、０．３７７ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で３時間攪拌した。２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２当量）を追加し、室温でさらに３時間攪拌を続けた。大部分の溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルと水とで分液した。水層を２Ｎ塩酸水溶液で酸性化し、層に分け、水層を酢酸エチルでさらに抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮し、標題化合物（１０２ｍｇ）を白色泡沫として得た。MS m/z 561 [MH⁺]

調製例３３
３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾイルクロリド

丸底フラスコに３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］安息香酸（Paragos Product Listから入手可能、１０．２ｇ、４７．５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１５８ｍｌ）および塩化オキサリル（８．２９ｍｌ、９５ｍｍｏｌ）を仕込んだ。この反応混合物を氷ｉｃｅ／水浴中で０℃に冷却した後、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１５８ｍｌ）を加えた。この溶液を周囲温度まで一晩温めた。溶媒を蒸発させ、標題化合物をクリーム色の固体として得た（１１．４ｇ）。¹H NMR (CHLOROFORM-d) d: 8.14 (d, 1H), 8.00 (dd, 2.5 Hz, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.73 (spt, 1H), 1.44 (d, 6H)

調製例３４
４−（６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸

エタノール（１ｍｌ）および２Ｍ水酸化ナトリウム（１ｍｌ）を６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１−［４−（エチルオキシ）−４−オキソブチル］−５−メチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリンカルボン酸１，１−ジメチルエチル（調製例３０；１００ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）に加え、この混合物を室温で３時間攪拌した。エタノールを蒸発させ、残渣を氷酢酸で酸性化した。この混合物を酢酸エチル（２×２ｍｌ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ、蒸発させた。残渣をイソ−ヘキサンで摩砕し、標題化合物（５１ｍｇ）を無色のガラス質固体として得た。MS m/z 571 [MH⁺]

実施例１
［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸塩酸塩

［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸１，１−ジメチルエチル（調製例５、６１ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）を、室温で１８時間、１，４−ジオキサン中４ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）中で攪拌した。蒸発させ、標題化合物を得た（５４ｍｇ）。¹H NMR (400 MHz, d₆-DMSO) ) d 8.19 (1H, s), 8.11 (1H, d), 8.00 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.54 (1H, t), 7.46 (1H, d), 4.96-4.86 (2H, m), 1.37 (6H, d), 他の脂肪族シグナルは溶媒ピークにより隠されていた。; m/z (API-ES) 428, 430 [M+H]⁺.

実施例２
［５−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸塩酸塩

ＴＨＦ（２ｍＬ）中、５−［３−（３，４−ジヒドロ−５−イソキノリニル）−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル］−２−［（１−メチルエチル）オキシ］ベンゾニトリル（調製例８、９６．２ｍｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）およびモノエチルマロネート（９５μｌ、０．８０５ｍｍｏｌ）の溶液に１０分間１２０℃までマイクロ波照射を行った。濃縮して黄色油状物を得、これをＭＤＡＰにより、双方とも所望のカルボン酸と対応するエチルエステルを含有する２画分に精製した。これらの画分を合わせ、ＭｅＯＨ−ＴＨＦ−水（１：１：１、１．５ｍＬ）に再溶解させた。ＬｉＯＨ（９．７ｍｇ、０．４０３ｍｍｏｌ）を加え、この溶液に１８分間１００℃まで照射を行った。ＬｉＯＨ（４．２ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）および水（３００μｌ）を追加し、この溶液に３分間１００℃まで照射を行った。この反応混合物を２ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ２に酸性化し、得られた沈殿を濾過し、白色固体を得た。これをＤＭＳＯ−ＭｅＯＨに溶解させ、メタノール性アンモニアで溶出するＳＣＸカートリッジに加えた。濃縮して白色固体を得、これを１ＭＨＣｌ水溶液に懸濁させ、１００℃で５．５時間照射を行った。この白色沈殿を濾過し、一晩真空乾燥させ、標題化合物を白色固体として得た（２５．５ｍｇ）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 9.56 (2H, br. S), 8.52 (1H, d), 8.41 (1H, dd), 8.00 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.57 (1H, d), 7.52 (1H, t), 5.01-4.94 (2H, m), 1.39 (6H, d), 残りの脂肪族シグナルは溶媒ピークにより隠されていた; m/z (ES) 419 [M+H]⁺.

実施例３
［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸トリフルオロ酢酸塩

窒素下、２５℃で、ジクロロメタン（３ｍｌ）中、（６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸（調製例２２；７５ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ、１３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、この混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をトルエンとともに共蒸発させ、真空下で２０分間乾燥させた後、ジエチルエーテルで摩砕し、淡褐色固体を得た（４５ｍｇ）。ＭＤＡＰにより精製し、標題化合物（８．２ｍｇ）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) d 9.56 (2H, br. S), 8.52 (1H, d), 8.41 (1H, dd), 8.00 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.57 (1H, d), 7.52 (1H, t), 5.01-4.94 (2H, m), 1.39 (6H, d), 残りの脂肪族シグナルは溶媒ピークにより隠されていた; m/z (ES) 419 [M+H]⁺.

実施例４
［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸トリフルオロ酢酸塩

窒素下、２５℃で、ジクロロメタン（３．０ｍｌ）中、（６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酢酸（調製例２３；４２ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ、１３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、この混合物を室温でおよそ２時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をトルエンとともに共蒸発させ、真空下で２０分間乾燥させた後、ジエチルエーテルで摩砕し、標題化合物（２０ｍｇ）を白色固体として得た。
MS m/z 433 [MH⁺]
¹H NMR (DMSO-d₆) d: 8.58 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.46 (dd, J = 9.0, 2.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.05 (spt, J = 6.0 Hz, 1H), 4.87 - 4.92 (m, 1H), 3.49 - 3.56 (m, 1H), 3.43 - 3.49 (m, 1H), 2.96 - 3.07 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 1.45 (d, J = 6.0 Hz, 6H)

実施例５
４−［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸トリフルオロ酢酸塩

窒素下、２５℃で、ジクロロメタン（４．０ｍｌ）中、４−（６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸（調製例３１；９５ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ、１３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、得られた混合物を２５℃で４５分間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をトルエンとともに共蒸発させた後、ジエチルエーテルで摩砕し、標題化合物（７０ｍｇ）を白色固体として得た。
MS m/z 470 [MH⁺]
¹H NMR (DMSO-d₆) d: 12.07 (br. s., 1H), 9.19 (br. s., 1H), 8.68 (br. s., 1H), 8.05 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 9.0, 2.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.76 (spt, J = 6.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.54 (m, 1H), 3.36 - 3.44 (m, 1H), 3.26 - 3.34 (m, 1H), 2.82 - 2.90 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.13 - 2.28 (m, 2H), 1.79 - 1.91 (m, 2H), 1.50 - 1.63 (m, 2H), 1.23 (d, J = 6.0 Hz, 6H)

実施例６
４−［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸トリフルオロ酢酸塩

窒素下、２５℃で、ジクロロメタン（４．０ｍｌ）中、４−（６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸（調製例３２；１０２ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ、１３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、得られた混合物を２５℃で１時間攪拌した。溶媒を除去し、残渣をトルエンとともに共蒸発させた後、ジエチルエーテルで摩砕し、標題化合物（７６ｍｇ）を白色固体として得た。
MS m/z 461 [MH⁺]
¹H NMR (DMSO-d₆) d: 12.18 (br. s., 1H), 9.31 (br. s., 1H), 8.81 (br. s., 1H), 8.51 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 9.0, 2.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.99 (spt, J = 6.0 Hz, 1H), 4.59 - 4.67 (m, 1H), 3.49 - 3.58 (m, 1H), 3.37 - 3.44 (m, 1H), 2.91 - 3.07 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.26 - 2.42 (m, 2H), 1.89 - 2.07 (m, 2H), 1.62 - 1.77 (m, 2H), 1.39 (d, J = 6.0 Hz, 6H)

実施例７
４−［６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸

乾燥ジクロロメタン（３ｍｌ）中、４−（６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）酪酸（調製例３４；５０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１．０ｍｌ）を加え、この反応混合物を室温で２時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をトルエンとともに共蒸発させた。残渣をジエチルエーテルで摩砕してガム質固体を得、これをＭＤＡＰにより精製し、標題化合物（２６ｍｇ）を無色の固体として得た。MS m/z 471 [MH⁺]

Ｓ１Ｐ１ＧＴＰγＳアッセイのための膜調製物
膜調製物に関しては、総ての工程を４℃で行った。ヒトＳ１Ｐ１受容体を安定発現するラット肝細胞腫細胞またはヒトＳ１Ｐ３受容体を安定発現するラット好塩基球性白血病細胞（ＲＢＬ）を集密度８０％まで増殖させた後、１０ｍｌリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に採取し、１２００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を除去した後、ペレットを再懸濁させ、細胞をガラスワーリングブレンダー内、２００ｍｌのバッファー（５０ｍＭＨＥＰＥＳ、１ｍＭロイペプチン、２５μｇ／ｍｌバシトラシン、１ｍＭＥＤＴＡ、１ｍＭＰＭＳＦ、２μＭペプスタチンＡ）中、１５秒２バーストでホモジナイズした。最初のバースト後に５分間と最後のバースト後に１０〜４０分間、ブレンダーを氷中に差し込んで消泡した。その後、この材料を５００ｇで２０分間回転させ、上清を４８，０００ｇで３６分間回転させた。このペレットを、ＰＭＳＦとペプスタチンＡを含まないこと以外は上記と同じバッファーに再懸濁させた。次に、この材料を０．６ｍｍのニードルに通して必要な容量とし（通常、元の細胞ペレットの容量の４倍）、アリコートに分けて−８０℃で冷凍保存した。

Ｓ１Ｐ１ＧＴＰγＳアッセイのためのもう１つの膜調製物
総ての工程を４℃で行った。細胞をガラスワーリングブレンダー内、２００ｍｌのバッファー（５０ｍＭＨＥＰＥＳ、１ｍＭロイペプチン、２５μｇ／ｍｌバシトラシン、１ｍＭＥＤＴＡ、１ｍＭＰＭＳＦ、２μＭペプスタチンＡ）中、１５秒２バーストでホモジナイズした。最初のバースト後に５分間と最後のバースト後に１０〜４０分間、ブレンダーを氷中に差し込んで消泡した。その後、この材料を５００ｇで２０分間回転させ、上清を４８，０００ｇで３６分間回転させた。このペレットを、ＰＭＳＦとペプスタチンＡを含まないこと以外は上記と同じバッファーに再懸濁させた。次に、この材料を０．６ｍｍのニードルに通して必要な容量とし（通常、元の細胞ペレットの容量の４倍）、アリコートに分けて−８０℃で冷凍保存した。

Ｓ１Ｐ１ＧＴＰγＳアッセイ
ヒトＳ１Ｐ１ラット肝細胞腫膜（１．５μｇ／ウェル）を、アッセイバッファー（ＨＥＰＥＳ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ_２１０ｍＭ、ＮａＣｌ１００ｍＭ、ｐＨはＫＯＨ５Ｍを用いて７．４に調整、ＧＤＰ１０μＭＦＡＣ（最終アッセイ濃度）およびサポニン９０μｇ／ｍｌＦＡＣも添加）中、麦芽凝集素（ＷＧＡ）コーティングシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズ（０．１２５ｍｇ／ウェル）に接着させた。

３０分氷上でプレカップリングさせた後、ビーズおよび膜懸濁液を、０．１μｌの化合物を含有する白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４ウェルプレートに分散させた（５μｌ／ウェル）。その後、アッセイバッファーで構成した５μｌ／ウェル［^３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（最終放射性リガンド濃度０．５ｎＭ）をアゴニストプレートに加えた。次に、最終アッセイカクテル（１０．１μｌ）を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離した後、すぐにＶｉｅｗｌｕｘリーダーで読み取った。

総ての試験化合物をＤＭＳＯに１０ｍＭの濃度で溶解させ、１００％ＤＭＳＯで１／４希釈系を用いて調製し、１１点用量応答曲線を作製した。これらの希釈液を、総てのアッセイに関してプレート間でＤＭＳＯ濃度が一定となるように、アッセイプレートに移した。
データは総て、各プレートについて高い対照ウェル１６と低い対照ウェル１６の平均値に対してノーマライズした。その後、４パラメーター曲線の当てはめを行った。

Ｓ１Ｐ１ＧＴＰγＳアッセイの別法
Ｓ_１Ｐ_１発現ＲＨ７７７７膜（１．５μｇ／ウェル）膜（１．５μｇ／ウェル）を、２３Ｇニードルを通すことによりホモジナイズした。次に、これらをアッセイバッファー（ＨＥＰＥＳ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ_２１０ｍＭ、ＮａＣｌ１００ｍＭ、ｐＨはＫＯＨ５Ｍを用いて７．４に調整）中、ＷＧＡコーティングＳＰＡビーズ（０．１２５ｍｇ／ウェル）に接着させた。ＧＤＰ１０μＭＦＡＣおよびサポニン９０μｇ／ｍｌＦＡＣも加えた。

３０分氷上でプレカップリングさせた後、ビーズおよび膜懸濁液を、０．１μｌの化合物を含有する白色ＧｒｅｉｎｅｒポリプロピレンＬＶ３８４ウェルプレートに分散させた（５μｌ／ウェル）。その後、アッセイバッファーで構成した５μｌ／ウェル［^３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（最終放射性リガンド濃度は、Ｓ_１Ｐ_１の場合０．５ｎＭ、Ｓ_１Ｐ_３の場合０．３ｎＭ）をこれらのプレートに加えた。次に、最終アッセイカクテル（１０．１μｌ）を密閉し、遠心機で回転させた後、すぐにＶｉｅｗｌｕｘ装置で読み取った。

実施例１、２および４〜６はｐＥＣ５０＞７を有した。

Ｓ１Ｐ３
ラット好塩基球性白血病細胞（ＲＢＬ−２Ｈ３）（１．５μｇ／ウェル）からのＳ１Ｐ３膜を、アッセイバッファー（ＨＥＰＥＳ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ_２３ｍＭ、ＮａＣｌ１００ｍＭ、ｐＨはＫＯＨ５Ｍを用いて７．４に調整、ＧＤＰ１０μＭＦＡＣおよびサポニン９０μｇ／ｍｌＦＡＣも添加）中、ＷＧＡコーティングＳＰＡビーズに接着させた（０．１２５ｍｇ／ウェル）。

総ての試験化合物をＤＭＳＯに１０ｍＭの濃度で溶解させ、１００％ＤＭＳＯで１／４希釈系を用いて調製し、１１点用量応答曲線を作製した。これらの希釈液を、総てのアッセイに関してプレート間でＤＭＳＯ濃度が一定となるように、アッセイプレートに移した。

データは総て、各プレートについて高い対照ウェル１６と低い対照ウェル１６の平均値に対してノーマライズした。その後、４パラメーター曲線の当てはめを行った。

Ｓ１Ｐ３ＧＴＰγＳアッセイの別法
Ｓ_１Ｐ_３発現ＲＢＬ膜（１．５μｇ／ウェル）を、２３Ｇニードルを通すことによりホモジナイズした。次に、これらをアッセイバッファー（ＨＥＰＥＳ２０ｍＭ、ＭｇＣｌ_２１０ｍＭ、ＮａＣｌ１００ｍＭ、ｐＨはＫＯＨ５Ｍを用いて７．４に調整）中、ＷＧＡコーティングＳＰＡビーズ（０．１２５ｍｇ／ウェル）に接着させた。ＧＤＰ１０μＭＦＡＣおよびサポニン９０μｇ／ｍｌＦＡＣも加えた。

実施例１〜６はｐＥＣ５０＜６を有した。実施例３〜６はｐＥＣ５０＜５を有した。

Claims

式（Ｉ）：

［式中、
Ａはフェニルまたは５員もしくは６員のヘテロアリール環であり；
Ｒ_１は、ハロゲン、Ｃ_{（１−３）}アルコキシ、Ｃ_{（１−３）}フルオロアルキル、シアノ、Ｃ_{（１−３）}フルオロアルコキシ、Ｃ_{（１−６）}アルキルおよびＣ_{（３−６）}シクロアルキルから独立に選択される２個までの置換基であり；
Ｒ_２は水素、ハロゲンまたはＣ_{（１−４）}アルキルであり；
Ｂは以下：

の１つから選択され；
Ｒ_３は水素またはＣ_{（１−３）}アルキルであり；
Ｒ_４は（ＣＨ_２）_１−３ＣＯ_２Ｈであり；
Ｒ_２またはＲ_４がアルキルである場合、それは酸素が挿入されていてもよい］
の化合物またはその薬学上許容される塩。
Ａがフェニルまたはピリジルであり；
Ｒ_１が、クロロ、イソプロポキシおよびシアノから独立に選択される２個までの置換基であり；
Ｒ_２が水素またはメチルであり；
Ｂが（ａ）であり；
Ｒ_３が水素であり；
Ｒ_４が（ＣＨ_２）_１−３ＣＯ_２Ｈである、
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩。
［５−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［５−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酢酸、
４−［６−（５−｛３−クロロ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
４−［６−（５−｛３−シアノ−４−［（１−メチルエチル）オキシ］フェニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
４−［６−（５−｛５−クロロ−６−［（１−メチルエチル）オキシ］−３−ピリジニル｝−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−５−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−イソキノリニル］酪酸、
およびそれらの薬学上許容される塩
から選択される化合物。
Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される症状または障害の処置のための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
症状または障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病である、請求項４に記載の使用。
症状が紅斑性狼瘡である、請求項４に記載の使用。
Ｓ１Ｐ１受容体により媒介される症状または障害の処置において使用するための薬剤の製造のための、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
症状または障害が、多発性硬化症、自己免疫疾患、慢性炎症疾患、喘息、炎症性神経障害、関節炎、移植、クローン病、潰瘍性大腸炎、紅斑性狼瘡、乾癬、虚血再潅流傷害、固形腫瘍および腫瘍転移、脈管形成に関連する疾患、血管疾患、疼痛症状、急性ウイルス性疾患、炎症性腸症状、インスリン依存性および非インスリン依存性糖尿病である、請求項７に記載の使用。
症状が紅斑性狼瘡である、請求項７に記載の使用。
請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、医薬組成物。
Ｓ１Ｐ１受容体により媒介され得る、ヒトを含む哺乳類における症状または障害の処置方法であって、罹患者に治療上安全かつ有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容される塩を投与することを含んでなる、方法。
症状が紅斑性狼瘡である、請求項１１に記載の処置方法。