JP2011088839A - 精製アピゲニン含有抽出物の製造方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】アピゲニンを従来に比して高純度で含有する精製アピゲニン含有抽出物を収率よく得ることの可能な製造方法を提供すること。
【解決手段】有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に吸着させる吸着工程、及び合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、合成吸着剤からアピゲニンを溶出させる溶出工程を含む、精製アピゲニン含有抽出物の製造方法。
【選択図】なし
【解決手段】有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に吸着させる吸着工程、及び合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、合成吸着剤からアピゲニンを溶出させる溶出工程を含む、精製アピゲニン含有抽出物の製造方法。
【選択図】なし
Description
本発明は、精製アピゲニン含有抽出物の製造方法に関する。
アピゲニンは、キク科植物、ジンチョウゲ科植物、イネ科植物、ヒノキ科植物、ムクロジ科植物、イワヒバ科植物、シソ科植物等の植物に含まれるフラボノイドの一種であり、ウレアーゼ活性阻害作用（特許文献１）、抗酸化作用（特許文献２）及びメラニン生成促進作用（特許文献３）等を有するため、化粧品、医薬品及び医薬部外品の成分として有用である。
アピゲニン等のポリフェノール類は植物から抽出により得ることができる。例えば、植物原料を水やアルカリ水溶液で抽出処理を行い、得られた抽出液を吸着剤処理し、該吸着剤を含水エタノールで接触処理してポリフェノール類を溶出させる方法が知られている（特許文献４）。
しかしながら、医薬部外品原料規格に記載のローマカミツレのブチレングリコール溶液及びプロピレングリコール溶液など（非特許文献１）、市販のアピゲニン含有抽出物はアピゲニン含有量が５０ｐｐｍ程度であり、当該抽出物の不揮発分中の純度は高々１％程度に過ぎない。
医薬部外品原料規格ｐ.１８３４
このように、従来の製造方法においては、アピゲニン含有抽出物の高純度化に限界があった。そのため、アピゲニンを高純度で含有するアピゲニン含有抽出物を高収率で得ることの可能な製造方法の創製が望まれていた。
したがって、本発明の課題は、アピゲニンを従来に比して高純度で含有する精製アピゲニン含有抽出物を収率よく得ることの可能な製造方法を提供することにある。
したがって、本発明の課題は、アピゲニンを従来に比して高純度で含有する精製アピゲニン含有抽出物を収率よく得ることの可能な製造方法を提供することにある。
そこで、本発明者らは、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニン純度を向上させるべく検討した結果、特定の有機溶媒濃度の有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させた後、合成吸着剤に有機溶媒水溶液を通液してアピゲニンを溶出させることにより、アピゲニンを従来に比して高純度でかつ高収率で回収できることを見出した。
すなわち、本発明は、有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、上記アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを上記合成吸着剤に吸着させる吸着工程、及び上記合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、上記合成吸着剤から上記アピゲニンを溶出させる溶出工程を含む、精製アピゲニン含有抽出物の製造方法を提供するものである。
本発明はまた、上記製造方法により得られた精製アピゲニン含有抽出物を提供するものである。
本発明はまた、上記製造方法により得られた精製アピゲニン含有抽出物を提供するものである。
本発明によれば、アピゲニンを従来に比して高純度で含有する精製アピゲニン含有抽出物を収率よく回収することができる。本発明の製造方法は、簡便な操作で効率よく行うことができるため、製造に要する労力及びコストを大幅に軽減することが可能であり、工業的規模での生産に適するものである。
また、本発明の精製アピゲニン含有抽出物は、アピゲニンを従来に比して高純度で含有するため、化粧品、医薬品及び医薬部外品の用途に極めて有用である。
また、本発明の精製アピゲニン含有抽出物は、アピゲニンを従来に比して高純度で含有するため、化粧品、医薬品及び医薬部外品の用途に極めて有用である。
先ず、本明細書で使用する用語について説明する。
本明細書において「アピゲニン」とは、フラボン類に属するフラボノイドの一種であり、「アピゲニン濃度」は後掲の実施例の記載の方法より定量することができる。
本明細書において「アピゲニン含有抽出物」とは、アピゲニン含有植物から得られた抽出物をいう。
本明細書において「平均粒子径」とは、ミー（Ｍｉｅ）散乱理論に基づくレーザー回折・散乱法により測定したものをいう。具体的には、レーザー回折・散乱法粒度分布測定装置により合成吸着剤の粒度分布を個数基準で作成して得られたメディアン径（ｄ50）を平均粒子径としたものである。また、「最大粒子径」及び「最小粒子径」とは、上記装置で測定された各粒子径の頻度（％）のうち、頻度（％）が０．１％となる粒子径の最小値を最大粒子径（ｄmax）とし、頻度（％）が０．１％となる粒子径の最大値を最小粒子径（ｄmin）と定義する。そして、最大粒子径と最小粒子径との差「ｄmax−ｄmin」を「Δｄ」と定義する。
本明細書において「アピゲニン」とは、フラボン類に属するフラボノイドの一種であり、「アピゲニン濃度」は後掲の実施例の記載の方法より定量することができる。
本明細書において「アピゲニン含有抽出物」とは、アピゲニン含有植物から得られた抽出物をいう。
本明細書において「平均粒子径」とは、ミー（Ｍｉｅ）散乱理論に基づくレーザー回折・散乱法により測定したものをいう。具体的には、レーザー回折・散乱法粒度分布測定装置により合成吸着剤の粒度分布を個数基準で作成して得られたメディアン径（ｄ50）を平均粒子径としたものである。また、「最大粒子径」及び「最小粒子径」とは、上記装置で測定された各粒子径の頻度（％）のうち、頻度（％）が０．１％となる粒子径の最小値を最大粒子径（ｄmax）とし、頻度（％）が０．１％となる粒子径の最大値を最小粒子径（ｄmin）と定義する。そして、最大粒子径と最小粒子径との差「ｄmax−ｄmin」を「Δｄ」と定義する。
次に、本発明の精製アピゲニン含有抽出物の製造方法について説明する。
本発明の精製アピゲニン含有抽出物の製造方法は、上記のとおり、吸着工程と、溶出工程とを含むことを特徴とするものである。
本発明の精製アピゲニン含有抽出物の製造方法は、上記のとおり、吸着工程と、溶出工程とを含むことを特徴とするものである。
〔準備工程〕
本発明においては、吸着工程及び溶出工程に先立ち、有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を準備する。アピゲニン含有抽出物は、アピゲニン含有植物を後掲の抽出工程により取得しても、市販品を使用してもよい。
本発明においては、吸着工程及び溶出工程に先立ち、有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を準備する。アピゲニン含有抽出物は、アピゲニン含有植物を後掲の抽出工程により取得しても、市販品を使用してもよい。
（抽出工程）
本工程は、アピゲニン含有植物を抽出して原料アピゲニン含有抽出物を得る工程である。
抽出に使用する「アピゲニン含有植物」としては、アピゲニンを含有すれば植物の種類は特に限定されないが、例えば、キク科植物、ジンチョウゲ科植物、イネ科植物、ヒノキ科植物、ムクロジ科植物、イワヒバ科植物、シソ科植物が例示される。
本工程は、アピゲニン含有植物を抽出して原料アピゲニン含有抽出物を得る工程である。
抽出に使用する「アピゲニン含有植物」としては、アピゲニンを含有すれば植物の種類は特に限定されないが、例えば、キク科植物、ジンチョウゲ科植物、イネ科植物、ヒノキ科植物、ムクロジ科植物、イワヒバ科植物、シソ科植物が例示される。
キク科植物としては、例えば、カミツレ（Matricaria recutita L.）、ローマカミツレ（Anthemis nobilis L.）、ダリア（Dahlia pinnata）が例示され、カミツレはジャーマン・カモミール、ジャーマン・カミツレとも称される。また、ジンチョウゲ科植物としては、例えばフジモドキ（Daphne genkwa）が例示され、イネ科植物としては、例えばコウリョウ（Sorghum nervosum Bess）が例示される。更に、ヒノキ科植物としては、例えばイブキ（Sabina chinensis (L.)Antone）が例示され、ムクロジ科植物としては、例えばムクロジ（Sapindus mukorossi Gaertn）が例示され、イワヒバ科植物としては、例えばイワヒバ（Selaginella tamariscina (Beauv.)Spring）が例示される。更にまた、シソ科植物としては、例えば、シソ（Perilla frutescens Britton var. acuta Kudo）が例示される。これらは1種又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
これらの中でも、アピゲニンの抽出効率の点から、キク科植物が好ましく、カミツレ、ローマカミツレがより好ましく、ローマカミツレが特に好ましい。
これらの中でも、アピゲニンの抽出効率の点から、キク科植物が好ましく、カミツレ、ローマカミツレがより好ましく、ローマカミツレが特に好ましい。
抽出に使用するアピゲニン含有植物の部位は特に限定されず、植物の種類に応じて適宜選択することが可能であるが、例えば、全草、葉、茎、芽、花、蕾、木質部、樹皮、地衣体、根、根茎、仮球茎、球茎、塊茎、種子、果実、果皮、菌核、樹脂が例示される。これらは１種又は２種以上を組み合わせて使用することができる。また、カミツレ及びローマカミツレの場合、花、蕾が好適に使用されるが、花冠等の特定部位のみを使用してもよい。更に、抽出する際には、これらをそのまま使用しても、粉砕、切断、乾燥等の前処理を行ってもよい。
抽出方法としては、当該技術分野において通常適用される方法であれば特に限定されないが、例えば、アピゲニン含有植物を水、有機溶媒、又は有機溶媒水溶液で抽出する方法が例示される。
有機溶媒としては植物からアピゲニンを抽出できれば特に限定されず、極性溶媒でも、非極性溶媒であってもよい。具体的には、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル、ポリエチレングリコール等のポリエーテル、スクワラン、ヘキサン、シクロヘキサン、トルエン、石油エーテル等の炭化水素、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素が例示される。これらは１種又は２種以上を組み合わせて使用することができる。中でも、アルコール、ケトン、エステル等の水溶性有機溶媒が好ましく、アルコール、特にエタノールが好ましい。
有機溶媒としては植物からアピゲニンを抽出できれば特に限定されず、極性溶媒でも、非極性溶媒であってもよい。具体的には、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル、ポリエチレングリコール等のポリエーテル、スクワラン、ヘキサン、シクロヘキサン、トルエン、石油エーテル等の炭化水素、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素が例示される。これらは１種又は２種以上を組み合わせて使用することができる。中でも、アルコール、ケトン、エステル等の水溶性有機溶媒が好ましく、アルコール、特にエタノールが好ましい。
抽出に有機溶媒水溶液を用いる場合の有機溶媒濃度は、アピゲニンの抽出効率の観点から、その下限が４６質量％、更に４８質量％、特に５０質量％であることが好ましい。他方、上限は、吸着工程前に行う後掲の濃度調整工程における粘調性析出物の発生抑制の観点から、９９．５質量％、更に９０質量％、より更に８０質量％、より更に７０質量％、特に６０質量％であることが好ましい。
また、水としては、例えば、水道水、精製水、イオン交換水が例示される。
また、水としては、例えば、水道水、精製水、イオン交換水が例示される。
抽出条件は使用する植物の種類や部位により適宜選択することが可能であるが、抽出倍率（溶媒質量／植物質量）は通常１０〜４０であり、抽出時間は通常１日〜１ヶ月であり、抽出温度は通常５〜８０℃である。
アピゲニン含有抽出物の形態としては、例えば、液体、スラリー、半固体、固体が例示される。
アピゲニン含有抽出物の形態としては、例えば、液体、スラリー、半固体、固体が例示される。
（濃度調整工程）
本工程は、必要に応じ、吸着工程で使用するアピゲニン含有抽出物に含まれる有機溶媒水溶液中の有機溶媒濃度を１０〜４５質量％に調整する工程である。このように濃度調整することにより、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に効率よく吸着させることができる。
本工程は、必要に応じ、吸着工程で使用するアピゲニン含有抽出物に含まれる有機溶媒水溶液中の有機溶媒濃度を１０〜４５質量％に調整する工程である。このように濃度調整することにより、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に効率よく吸着させることができる。
例えば、アピゲニン含有抽出物に含まれる有機溶媒水溶液中の有機溶媒濃度が４５質量％を超える場合、アピゲニン含有抽出物から有機溶媒を除去して有機溶媒濃度を上記範囲内に低減する方法、あるいは水又は有機溶媒水溶液で希釈して有機溶媒濃度を上記範囲内に調整する方法が例示される。なお、有機溶媒を除去する方法としては、例えば、蒸留、減圧蒸留、精留、薄膜蒸留、膜濃縮が例示される。また、希釈する際に使用する水及び有機溶媒水溶液としては、上記と同様のものが例示される。
また、市販のアピゲニン含有抽出物を使用し、それが有機溶媒を含まない場合には、所望の有機溶媒水溶液を用いて有機溶媒濃度が上記範囲内となるようにアピゲニン含有抽出物を希釈すればよい。さらに、後掲の吸着工程において、アピゲニン含有抽出物中の有機溶媒とは異なる有機溶媒を使用する場合には、所望の有機溶媒に置換し濃度調整することができる。
また、市販のアピゲニン含有抽出物を使用し、それが有機溶媒を含まない場合には、所望の有機溶媒水溶液を用いて有機溶媒濃度が上記範囲内となるようにアピゲニン含有抽出物を希釈すればよい。さらに、後掲の吸着工程において、アピゲニン含有抽出物中の有機溶媒とは異なる有機溶媒を使用する場合には、所望の有機溶媒に置換し濃度調整することができる。
一般には、合成吸着剤への通液量の低減化が可能な濃縮により濃度調整する方が生産効率の観点から有利であると考えられる。しかしながら、意外なことに、水又は有機溶媒水溶液で希釈して濃度調整する方がアピゲニン含有抽出物の純度、色相、及び回収率をより一層向上させることが可能であることが見出された。
有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物中の有機溶媒濃度は、アピゲニンの純度及び回収率の向上、並びに色相の改善の観点から、その下限が１０質量％、更に１５質量％、より更に２０質量％、より更に２５質量％、特に３０質量％であることが好ましく、他方上限が４５質量％、更に４４質量％、より更に４３質量％、より更に４２質量％、特に４１質量％であることが好ましい。
有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物中のアピゲニン濃度は、アピゲニンの純度及び回収率の向上の観点から、その下限が０．０１質量％、更に０．０１５質量％、より更に０．０２質量％、特に０．０２５質量％であることが好ましく、他方上限が０．２質量％、０．１５質量％、更に０．１質量％、特に０．０５質量％であることが好ましい。
有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物中のアピゲニン濃度は、アピゲニンの純度及び回収率の向上の観点から、その下限が０．０１質量％、更に０．０１５質量％、より更に０．０２質量％、特に０．０２５質量％であることが好ましく、他方上限が０．２質量％、０．１５質量％、更に０．１質量％、特に０．０５質量％であることが好ましい。
〔吸着工程〕
本工程は、有機溶媒濃度が上記範囲内に調整された有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、該アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に吸着させる工程である。
本工程は、有機溶媒濃度が上記範囲内に調整された有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、該アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを合成吸着剤に吸着させる工程である。
本工程で使用する合成吸着剤としては、疎水性であることが好ましく、またイオン交換能が１ｍｅｑ／ｇ未満であるものが好ましい。合成吸着剤は、一般に不溶性の三次元架橋構造を有するポリマーから構成されるが、その母体としてはスチレン系、メタクリル系、アクリル系、ポリビニル系が好ましく、中でも、アピゲニンと夾雑物との分離の観点から、スチレン系、特にスチレン−ジビニルベンゼン共重合体が好ましい。
合成吸着剤としては、公知の方法により製造したものを使用しても、次の市販品を使用してもよい。市販の合成吸着剤として、例えば、アンバーライトＸＡＤ４、ＸＡＤ１６ＨＰ、ＸＡＤ１１８０、ＸＡＤ２０００（供給元：米国ローム＆ハース社）、ダイヤイオンＨＰ２０、ＨＰ２１（三菱化学社製）、セパビーズＳＰ−８５０、ＳＰ−８２５、ＳＰ−７００、ＳＰ−７０（三菱化学社製）、ＶＰＯＣ１０６２（Ｂａｙｅｒ社製）等のスチレン系；セパビーズＳＰ２０５、ＳＰ２０６、ＳＰ２０７（三菱化学社製）等の芳香環に臭素原子を導入して吸着能を高めた置換スチレン系；ダイヤイオンＨＰ１ＭＧ、ＨＰ２ＭＧ（三菱化学社製）等のメタクリル系；アンバーライトＸＡＤ７６１（ロームアンドハース社製）等のフェノール系；アンバーライトＸＡＤ７ＨＰ（ロームアンドハース社製）等のアクリル系；ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ、ＨＷ-４０Ｃ（東ソー社製）等のポリビニル系；ＳＥＰＨＡＤＥＸ、ＬＨ−２０（ファルマシア社製）等のデキストラン系が例示される。
合成吸着剤の粒子形状は、球形、不均一形状等のいずれの形状であってもよいが、分離効率の観点から、球形が好ましい。
合成吸着剤の粒子形状は、球形、不均一形状等のいずれの形状であってもよいが、分離効率の観点から、球形が好ましい。
平均粒子径（ｄ50）は、純度及び色相の向上という観点からは大きいものが好ましい。一方、収率の向上という観点からは小さいものが好ましい。かかる観点から、平均粒子径（ｄ50）の下限は１００μｍ、更に１５０μｍ、より更に２００μｍ、特に２５０μｍであることが好ましく、他方上限は７００μｍ、更に６００μｍ、より更に５００μｍ、特に４００μｍであることが好ましい。
また、最大粒子径（ｄmax）と最小粒子径（ｄmin）との差（Δｄ）は、上記と同様の観点から、その下限が３０μｍ、更に４０μｍ、より更に５０μｍ、特に６０μｍであることが好ましく、他方上限が９００μｍ、更に８５０μｍ、より更に７００μｍ、より更に６００μｍ、より更に５００μｍ、特に４００μｍであることが好ましい。
更に、平均粒子径（ｄ50）に対する、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）の比（Δｄ／ｄ50）は平均粒子径で規格化された粒度の幅、すなわち粒径の分散度を表す。収率の向上という観点より、かかる値は２以下が好ましく、１．６以下がより好ましく、１以下が更に好ましく、０．８以下が特に好ましい。かかる値が小さいほどシャープな分布を表すため下限は特に定められるものではないが、製造コスト等の兼ね合いで適宜選択することができ、例えば０．０１以上である。
このような性状を有する合成吸着剤は公知の方法により製造してもよいが、例えば、市販の合成吸着剤を篩にかけて所望の平均粒子径及び粒度分布を有するものを採取してもよい。
なお、吸着工程前においては、合成吸着剤中の不純物の除去、アピゲニンの吸着能の向上の観点から、合成吸着剤を洗浄することが好ましい。洗浄方法としては、例えば、次の方法が例示される。先ず、通液速度（空間速度、以下「ＳＶ」という）が０．５〜１０［ｈ-1］であり、かつ合成吸着剤の全容量に対する通液倍数（以下「ＢＶ」という）が２〜１０［Ｌ／Ｌ］である有機溶媒水溶液を合成吸着剤が充填されたカラムに通液して合成吸着剤中の不純物を除去する。次いで、ＳＶが０．５〜１０［ｈ-1］であり、かつＢＶが２〜１０［Ｌ／Ｌ］である水をカラムに通液してカラム内の有機溶媒を水に置換する方法が例示される。有機溶媒としては、例えば、水溶性有機溶媒が好ましく、中でもアルコール、特にエタノールが好ましい。有機溶媒水溶液中の有機溶媒の濃度の下限は８５質量％、特に９０質量％が好ましい。なお、有機溶媒の濃度の上限は、９９質量％、特に９８質量％であることが好ましい。
吸着工程においては、アピゲニン含有抽出物に合成吸着剤を添加し撹拌して吸着させた後、ろ過操作により合成吸着剤を回収するバッチ方法、あるいは合成吸着剤を充填したカラムを用いて連続的に吸着処理を行なうカラム方法を採用することができるが、生産性の点からカラムによる連続処理方法が好ましい。
合成吸着剤の使用量としては、アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンの全質量と、合成吸着剤の全容量との比が０．０５〜１５ｇ／Ｌ、更に０．２〜１０ｇ／Ｌ、特に０．４〜５ｇ／Ｌとなる量を選択することが、夾雑物の除去効率、アピゲニンの純度及び回収率向上、樹脂の耐久性の観点から好ましい。
アピゲニン含有抽出物を、合成吸着剤を充填したカラムに通液する条件としては、ＳＶが０．５〜１０[ｈ-1]であり、かつＢＶが０．５〜２０[Ｌ／Ｌ]、更にＳＶが１．０〜５．０[ｈ-1]であり、かつＢＶが１〜１０[Ｌ／Ｌ]であることが好ましい。このような通液速度及び通液量であると、アピゲニンを合成吸着剤に十分吸着させることができる。
〔洗浄工程〕
アピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に通液した後、合成吸着剤を水又は有機溶媒水溶液で洗浄してもよい。合成吸着剤の洗浄に使用する水としては、上記と同様のものが例示される。有機溶媒としては、上記と同様のものが例示されるが、水溶性有機溶媒が好ましく、アルコール、特にエタノールが好ましい。有機溶媒の濃度は、夾雑物除去の観点から、その下限が１０質量％、更に１５質量％、特に２０質量％であること好ましく、他方上限が５０質量％、更に４５質量％、特に４０質量％であること好ましい。有機溶媒の濃度は、吸着工程の有機溶媒水溶液濃度と同じ濃度が特に好ましい。洗浄の回数は１回、又は複数回行ってもよく、複数回行う場合、有機溶媒濃度が上記範囲内であれば、異なる濃度の有機溶媒を使用してもよい。
アピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に通液した後、合成吸着剤を水又は有機溶媒水溶液で洗浄してもよい。合成吸着剤の洗浄に使用する水としては、上記と同様のものが例示される。有機溶媒としては、上記と同様のものが例示されるが、水溶性有機溶媒が好ましく、アルコール、特にエタノールが好ましい。有機溶媒の濃度は、夾雑物除去の観点から、その下限が１０質量％、更に１５質量％、特に２０質量％であること好ましく、他方上限が５０質量％、更に４５質量％、特に４０質量％であること好ましい。有機溶媒の濃度は、吸着工程の有機溶媒水溶液濃度と同じ濃度が特に好ましい。洗浄の回数は１回、又は複数回行ってもよく、複数回行う場合、有機溶媒濃度が上記範囲内であれば、異なる濃度の有機溶媒を使用してもよい。
この洗浄工程における通液条件としては、好ましくはＳＶが０．５〜１０[ｈ-1]であり、かつＢＶが１〜１０[Ｌ／Ｌ]であり、更に好ましくはＳＶが１〜５[ｈ-1]であり、かつＢＶが１．５〜８[Ｌ／Ｌ]であり、特に好ましくはＳＶが１．５〜３[ｈ-1]であり、かつＢＶが２〜５[Ｌ／Ｌ]である。これにより、合成吸着剤に付着した夾雑物を効率よく除去することができる。
〔溶出工程〕
溶出工程は、合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、合成吸着剤からアピゲニンを溶出させる工程である。
本工程で使用する有機溶媒水溶液中の有機溶媒としては、上記と同様の水溶性有機溶媒が好ましく、中でも、アピゲニンの純度及び回収率の向上の観点から、アルコール、特にエタノールが好ましい。有機溶媒水溶液中の水溶性有機溶媒の濃度は、同様の観点から、その下限が５０質量％、更に５５質量％、特に６０質量％であることが好ましく、他方上限が９５質量％、更に９０質量％、より更に８５質量％、特に８０質量％であることが好ましい。
溶出工程は、合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、合成吸着剤からアピゲニンを溶出させる工程である。
本工程で使用する有機溶媒水溶液中の有機溶媒としては、上記と同様の水溶性有機溶媒が好ましく、中でも、アピゲニンの純度及び回収率の向上の観点から、アルコール、特にエタノールが好ましい。有機溶媒水溶液中の水溶性有機溶媒の濃度は、同様の観点から、その下限が５０質量％、更に５５質量％、特に６０質量％であることが好ましく、他方上限が９５質量％、更に９０質量％、より更に８５質量％、特に８０質量％であることが好ましい。
有機溶媒水溶液の通液条件としては、好ましくはＳＶが０．５〜１０[ｈ-1]であり、かつＢＶが１〜１０[Ｌ／Ｌ]であり、更に好ましくはＳＶが１〜５[ｈ-1]であり、かつＢＶが１．５〜８[Ｌ／Ｌ]であり、特に好ましくはＳＶが１．５〜３[ｈ-1]であり、かつＢＶが２〜５[Ｌ／Ｌ]である。これにより、アピゲニンを高収率で回収するとともに、夾雑物を低減化して純度のより高い精製アピゲニン含有抽出物を得ることができる。
なお、本発明においては、溶出工程を１回又は複数回行うことができる。溶出工程を１回行う場合には、より純度の高い精製アピゲニン含有抽出物を回収することができる。一方、溶出工程を複数回行う場合には、各溶出工程で得られた溶出液を混合することで、精製アピゲニン含有抽出物を高収率で回収することができる。溶出工程を複数回行う場合、各溶出工程で使用する有機溶媒水溶液の濃度は、有機溶媒水溶液の疎水性を順次高めることが好ましい。例えば、第１及び第２の溶出工程を順次行う場合、第２の溶出工程で使用する有機溶媒水溶液中の有機溶媒濃度は、第１の溶出工程よりも高い濃度のものがアピゲニンの回収率向上の観点から好ましい。各溶出工程における有機溶媒濃度の差の下限は１質量％、更に３質量％、特に５質量％であることが好ましく、他方上限は２０質量％、１８質量％、１５質量％であることが好ましい。
精製アピゲニン含有抽出物の形態として溶液が好ましい場合には、溶出工程により得られた溶出液を濃縮又は希釈してもよく、また粉体が望ましい場合には、噴霧乾燥や凍結乾燥等の方法により粉体化してもよい。
このようにして、本発明の精製アピゲニン含有抽出物を得ることができる。得られた精製アピゲニン含有抽出物はアピゲニンを好ましくは０．００１〜０．１質量％、より好ましくは０．００３〜０．０３質量％、特に０．００６〜０．０２質量％という濃度で含有することができる。また、アピゲニンの純度は好ましくは２０〜６０質量％、より好ましくは３０〜５５質量％、特に３２〜５０質量％とすることができる。また、アピゲニンを７０質量％以上、特に８０質量％以上という高収率で回収することが可能である。なお、アピゲニンの純度は、後掲の実施例に記載の方法により定量することが可能である。
また、本発明の精製アピゲニン含有抽出物は、色相にも優れている。具体的には、アピゲニン濃度を０．０１質量％になるようにイオン交換水で希釈したときの４５０ｎｍにおける吸光度を０．１以下、更に０．０６以下、より更に０．０５以下、特に０．０４以下とすることができる。なお、吸光度の下限は０．００１であることが好ましい。なお、色相の測定方法は、後掲の実施例に記載のとおりである。
１．アピゲニンの濃度測定
試料をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、高速液体クロマトグラフ（ＥｚＣｈｒｏｍ Ｅｌｉｔｅ、日立製作所製）を用い、カラム（Ｓｈｉｍｐａｃｈ ＶＰ ＯＤＳカラム、４．６ｍｍφ×１５０ｍｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法で分析した。移動相Ａ液は０．０５％リン酸を含有する蒸留水溶液、Ｂ液はメタノール溶液とし、試料注入量は１０μＬ、流量は１．０ｍＬ／ｍｉｎ、ＵＶ検出器波長は３８０ｎｍの条件で行った。あらかじめ試薬のアピゲニンを用いて検量線を作成し、クロマトグラムの面積より試料中のアピゲニン濃度を定量した。
試料をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、高速液体クロマトグラフ（ＥｚＣｈｒｏｍ Ｅｌｉｔｅ、日立製作所製）を用い、カラム（Ｓｈｉｍｐａｃｈ ＶＰ ＯＤＳカラム、４．６ｍｍφ×１５０ｍｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法で分析した。移動相Ａ液は０．０５％リン酸を含有する蒸留水溶液、Ｂ液はメタノール溶液とし、試料注入量は１０μＬ、流量は１．０ｍＬ／ｍｉｎ、ＵＶ検出器波長は３８０ｎｍの条件で行った。あらかじめ試薬のアピゲニンを用いて検量線を作成し、クロマトグラムの面積より試料中のアピゲニン濃度を定量した。
２．アピゲニンの純度測定
試料約８ｇを１０５℃の電気恒温乾燥機で６時間乾燥して得られた固形分の質量を測定し、当該固形分の質量と、上記試料８ｇ中のアピゲニンの質量とから下式（Ａ）より求めた。
試料約８ｇを１０５℃の電気恒温乾燥機で６時間乾燥して得られた固形分の質量を測定し、当該固形分の質量と、上記試料８ｇ中のアピゲニンの質量とから下式（Ａ）より求めた。
３．色相（ＯＤ４５０）の測定
アピゲニン濃度が０．０１質量％になるように試料をイオン交換水で希釈し、それを光路長１０ｍｍの角型プラスチックセルに入れて分光光度計（UVmini 1240、島津製作所製）により４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。
アピゲニン濃度が０．０１質量％になるように試料をイオン交換水で希釈し、それを光路長１０ｍｍの角型プラスチックセルに入れて分光光度計（UVmini 1240、島津製作所製）により４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。
４．合成吸着剤の粒子径の測定
合成吸着剤の粒子径測定には、レーザー回折・散乱法粒度分布測定装置（ＬＳ １３ ３２０、ＢＥＣＫＭＡＮ ＣＯＵＬＴＥＲ）を用いた。そして、本装置により粒子分布を個数基準で作成し、平均粒子径（ｄ50）、最大粒子径（ｄmax）及び最小粒子径（ｄmin）を求めた。
合成吸着剤の粒子径測定には、レーザー回折・散乱法粒度分布測定装置（ＬＳ １３ ３２０、ＢＥＣＫＭＡＮ ＣＯＵＬＴＥＲ）を用いた。そして、本装置により粒子分布を個数基準で作成し、平均粒子径（ｄ50）、最大粒子径（ｄmax）及び最小粒子径（ｄmin）を求めた。
製造例１
ローマカミツレ（Anthemis nobilis L.）の花４０８．１ｇを５０質量％エタノール水溶液８１６１ｇに浸漬して２５℃にて７日間抽出し、その後２号ろ紙によるろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。このアピゲニン含有抽出物中のアピゲニン濃度は０．０３４質量％であり、アピゲニン純度は２．４％であり、色相は０．２４５であった。
ローマカミツレ（Anthemis nobilis L.）の花４０８．１ｇを５０質量％エタノール水溶液８１６１ｇに浸漬して２５℃にて７日間抽出し、その後２号ろ紙によるろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。このアピゲニン含有抽出物中のアピゲニン濃度は０．０３４質量％であり、アピゲニン純度は２．４％であり、色相は０．２４５であった。
実施例１
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」４０１ｇを、一旦減圧濃縮によりエタノールを除去して７８ｇにした後、９９質量％エタノール溶液を１９．６ｇ添加して、１３０．３ｇの「アピゲニン濃度調整液」を得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．１０５％、アピゲニン純度は２．５％、色相（ＯＤ４５０）は０．５４９、エタノール濃度は４０質量％であった。
合成吸着剤ＨＰ−２０（三菱化学（株）製）の袋を開封し、平らな容器に均等に合成吸着剤を分散した後、２日間自然乾燥した。本合成吸着剤は、平均粒子径（ｄ50）が５５０μｍ、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が８３０μｍ、Δｄ／ｄ50が１．５１であった。
本合成材吸着剤５５ｍＬを、ステンレスカラム（内径２２ｍｍ×高さ１４５ｍｍ、容積５５ｍＬ）に充填した。次いで、カラムに充填された合成吸着剤を、通液速度（ＳＶ）＝１．５（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝１０（Ｌ／Ｌ）の条件で９２質量％エタノール水溶液を通液後、通液速度（ＳＶ）＝１．５（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝１０（Ｌ／Ｌ）の条件で水を通液して洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」３４．９ｇ（３８．０ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝０．６９Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３７ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６７ｇ／Ｌ）を、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」４０１ｇを、一旦減圧濃縮によりエタノールを除去して７８ｇにした後、９９質量％エタノール溶液を１９．６ｇ添加して、１３０．３ｇの「アピゲニン濃度調整液」を得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．１０５％、アピゲニン純度は２．５％、色相（ＯＤ４５０）は０．５４９、エタノール濃度は４０質量％であった。
合成吸着剤ＨＰ−２０（三菱化学（株）製）の袋を開封し、平らな容器に均等に合成吸着剤を分散した後、２日間自然乾燥した。本合成吸着剤は、平均粒子径（ｄ50）が５５０μｍ、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が８３０μｍ、Δｄ／ｄ50が１．５１であった。
本合成材吸着剤５５ｍＬを、ステンレスカラム（内径２２ｍｍ×高さ１４５ｍｍ、容積５５ｍＬ）に充填した。次いで、カラムに充填された合成吸着剤を、通液速度（ＳＶ）＝１．５（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝１０（Ｌ／Ｌ）の条件で９２質量％エタノール水溶液を通液後、通液速度（ＳＶ）＝１．５（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝１０（Ｌ／Ｌ）の条件で水を通液して洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」３４．９ｇ（３８．０ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝０．６９Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３７ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６７ｇ／Ｌ）を、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で４０質量％エタノール水溶液２４２ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度がＳＶ＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、『精製アピゲニン含有抽出物１（以下、「精製物１」という）』２２９．７ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度がＳＶ＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、『精製アピゲニン含有抽出物２（以下、精製物２という）』２２１．７ｇを回収した。
次いで、溶出工程１として、通液速度がＳＶ＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、『精製アピゲニン含有抽出物１（以下、「精製物１」という）』２２９．７ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度がＳＶ＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、『精製アピゲニン含有抽出物２（以下、精製物２という）』２２１．７ｇを回収した。
「精製物１」中のアピゲニン濃度は０．０１２質量％。アピゲニン純度は３２％、色相（ＯＤ４５０）は０．０５８であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は７５％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００６質量％。アピゲニン純度は２５％、色相（ＯＤ４５０）は０．０６４であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は７７％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００６質量％。アピゲニン純度は２５％、色相（ＯＤ４５０）は０．０６４であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は７７％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
実施例２
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」１５０ｇに、イオン交換水１９５．２ｇ添加して、３４５ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０１５質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．１８３、エタノール濃度は２０質量％であった。
合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）の袋を開封し、平らな容器に均等に合成吸着剤を分散させた後、２日間自然乾燥した。次いで、４２５μｍの篩下の回収物を１８０μｍの篩にかけ、１８０μｍの篩上の粒子のみを回収した。この回収した合成吸着剤は、平均粒子径（ｄ50）が３３３μｍ、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が２１６μｍ、Δｄ／ｄ50が０．６５であった。
次いで、採取された合成吸着剤５５ｍＬを、実施例１と同様のステンレスカラムに充填し、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」２５８．１ｇ（２７０．０ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝４．９１Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３９ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．７１ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」１５０ｇに、イオン交換水１９５．２ｇ添加して、３４５ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０１５質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．１８３、エタノール濃度は２０質量％であった。
合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）の袋を開封し、平らな容器に均等に合成吸着剤を分散させた後、２日間自然乾燥した。次いで、４２５μｍの篩下の回収物を１８０μｍの篩にかけ、１８０μｍの篩上の粒子のみを回収した。この回収した合成吸着剤は、平均粒子径（ｄ50）が３３３μｍ、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が２１６μｍ、Δｄ／ｄ50が０．６５であった。
次いで、採取された合成吸着剤５５ｍＬを、実施例１と同様のステンレスカラムに充填し、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」２５８．１ｇ（２７０．０ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝４．９１Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３９ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．７１ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で２０質量％エタノール水溶液２５８．１ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、洗浄工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で４０質量％エタノール水溶液２４２ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２８．４ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２０．９ｇを回収した。
次いで、洗浄工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で４０質量％エタノール水溶液２４２ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２８．４ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２０．９ｇを回収した。
「精製物１」中のアピゲニン濃度は０．０１３％。アピゲニン純度が４０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０２６であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は７４％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は３８％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３１であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８０％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は３８％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３１であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８０％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
実施例３
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」５００ｇに、イオン交換水７５．７ｇ添加して、５７６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．２２８、エタノール濃度は４０質量％であった。
合成吸着剤としてＨＰ−２０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン重量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」５００ｇに、イオン交換水７５．７ｇ添加して、５７６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．２２８、エタノール濃度は４０質量％であった。
合成吸着剤としてＨＰ−２０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン重量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で４０質量％エタノール水溶液２４２ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２８．３ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２１．２ｇを回収した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２８．３ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２１．２ｇを回収した。
「精製物１」中のアピゲニン濃度は０．０１４質量％。アピゲニン純度は４４％、色相（ＯＤ４５０）は０．０１３であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８３％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は４５％、色相（ＯＤ４５０）は０．０１９であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８４％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は４５％、色相（ＯＤ４５０）は０．０１９であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８４％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
実施例４
実施例３と同様な方法で得た「アピゲニン濃度調整液」を使用した。各成分の分析値は、実施例３と同様であった。
合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン重量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、実施例３と同様の方法でエタノール水溶液をカラムに通液し、「精製物１」２３２．３ｇ、「精製物２」２２６．６ｇを回収した。
実施例３と同様な方法で得た「アピゲニン濃度調整液」を使用した。各成分の分析値は、実施例３と同様であった。
合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン重量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、実施例３と同様の方法でエタノール水溶液をカラムに通液し、「精製物１」２３２．３ｇ、「精製物２」２２６．６ｇを回収した。
得られた「精製物１」は、アピゲニン濃度は０．０１４質量％であり、アピゲニン純度は３９％であり、色相（ＯＤ４５０）は０．０１９であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８４％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は４０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３２であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８９％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は４０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３２であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８９％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
実施例５
実施例３と同様な方法で得た「アピゲニン濃度調整液」を使用した。各成分の分析値は、実施例３と同様であった。
実施例３と同様な方法で得た「アピゲニン濃度調整液」を使用した。各成分の分析値は、実施例３と同様であった。
合成吸着剤として、ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）の粒度分布が異なるもの（ＳＰ−７０Ｓと呼ぶ）を用いた。本合成吸着剤は、平均粒子径（ｄ50）が３０５μｍ、最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が８３μｍ、Δｄ／ｄ50が０．２７であった。
合成吸着剤ＳＰ−７０Ｓ ５５ｍＬを、実施例１と同様のステンレスカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、実施例３と同様の方法でエタノール水溶液をカラムに通液し、「精製物１」２３２．０ｇ、「精製物２」２２４．８ｇを回収した。
合成吸着剤ＳＰ−７０Ｓ ５５ｍＬを、実施例１と同様のステンレスカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２３．５ｇ（１３４．８ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．４５Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、実施例３と同様の方法でエタノール水溶液をカラムに通液し、「精製物１」２３２．０ｇ、「精製物２」２２４．８ｇを回収した。
得られた「精製物１」は、アピゲニン濃度が０．０１２質量％。アピゲニン純度が３２％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３７であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は８７％であった。
「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は２９％、色相（ＯＤ４５０）は０．０５０であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は９５％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は２９％、色相（ＯＤ４５０）は０．０５０であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は９５％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
実施例６
製造例１で得られた「アピゲニン含有抽出物」５７００ｇに、イオン交換水８４７．４ｇ添加して、６５４７ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．２２８、エタノール濃度は４０質量％であった。
製造例１で得られた「アピゲニン含有抽出物」５７００ｇに、イオン交換水８４７．４ｇ添加して、６５４７ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．２２８、エタノール濃度は４０質量％であった。
合成吸着剤としてＳＰ−７０Ｓを用い、合成吸着剤２３２６ｍＬを、ステンレスカラム（内径７０ｍｍ×高さ６８５ｍｍ、容積２７８８ｍＬ）に充填したこと以外は、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」５６８５ｇ（６２００ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．６７Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は１．７６ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．７６ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」５６８５ｇ（６２００ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．６７Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は１．７６ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．７６ｇ／Ｌ）を通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で４０質量％エタノール水溶液１０２４０ｇ（１１１６５ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液９８３３ｇ（１１１６５ｍＬ）を通液して、「精製物１」９６６０ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液９２９０ｇ（１１１６５ｍＬ）を通液して、「精製物２」９４４０ｇを回収した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液９８３３ｇ（１１１６５ｍＬ）を通液して、「精製物１」９６６０ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液９２９０ｇ（１１１６５ｍＬ）を通液して、「精製物２」９４４０ｇを回収した。
得られた「精製物１」は、アピゲニン濃度が０．０１９質量％。アピゲニン純度が３６％、色相（ＯＤ４５０）は０．０４０であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は９８％であった。
「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．０１０質量％。アピゲニン純度は３０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０４４であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は１００％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．０１０質量％。アピゲニン純度は３０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０４４であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は１００％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表１に示す。
比較例１
ローマカミツレの花２０ｇを２０質量％エタノール水溶液２００ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン抽出液」のアピゲニン濃度は０．００３質量％、アピゲニン純度は０．１４％、色相（ＯＤ４５０）は０．３３０であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
ローマカミツレの花２０ｇを２０質量％エタノール水溶液２００ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン抽出液」のアピゲニン濃度は０．００３質量％、アピゲニン純度は０．１４％、色相（ＯＤ４５０）は０．３３０であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
比較例２
ローマカミツレの花１３５ｇを５０質量％エタノール水溶液１３５０ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン含有抽出物」のアピゲニン濃度は０．０５３質量％、アピゲニン純度は２．１％、色相（ＯＤ４５０）は０．３８７であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
ローマカミツレの花１３５ｇを５０質量％エタノール水溶液１３５０ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン含有抽出物」のアピゲニン濃度は０．０５３質量％、アピゲニン純度は２．１％、色相（ＯＤ４５０）は０．３８７であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
比較例３
ローマカミツレの花９２ｇを５０質量％エタノール水溶液１８４０ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン含有抽出物」のアピゲニン濃度は０．０３４質量％、アピゲニン純度は２．４％、色相（ＯＤ４５０）は０．２４５であった。
次いで、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」６２１ｇを一旦減圧濃縮によりエタノールを除去して４６．８ｇにした後、遠心分離（１５℃、６０００ｒｐｍ、１５分）にて固液分離を行い、「遠心分離の上清液」を回収した。得られた「遠心分離の上清液」のアピゲニン濃度は０．０７０質量％、アピゲニン純度は０．４９％、色相（ＯＤ４５０）は０．２３０であった。また、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」からのアピゲニンの回収率は１４％であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
ローマカミツレの花９２ｇを５０質量％エタノール水溶液１８４０ｇに浸漬して２５℃にて７日間静置抽出した後、２号ろ紙でろ過を行い、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」を得た。得られた「アピゲニン含有抽出物」のアピゲニン濃度は０．０３４質量％、アピゲニン純度は２．４％、色相（ＯＤ４５０）は０．２４５であった。
次いで、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」６２１ｇを一旦減圧濃縮によりエタノールを除去して４６．８ｇにした後、遠心分離（１５℃、６０００ｒｐｍ、１５分）にて固液分離を行い、「遠心分離の上清液」を回収した。得られた「遠心分離の上清液」のアピゲニン濃度は０．０７０質量％、アピゲニン純度は０．４９％、色相（ＯＤ４５０）は０．２３０であった。また、「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」からのアピゲニンの回収率は１４％であった。
本比較例における製造条件、アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
比較例４
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」２５０ｇを一旦濃縮し、その濃縮液に６質量％のエタノール水溶液２００ｇ添加して、２４６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３０質量％、アピゲニン純度は２．２％、色相（ＯＤ４５０）は０．２４９、エタノール濃度は５質量％であった。
次いで、合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２６．１ｇ（１２７．６ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．３２Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」２５０ｇを一旦濃縮し、その濃縮液に６質量％のエタノール水溶液２００ｇ添加して、２４６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３０質量％、アピゲニン純度は２．２％、色相（ＯＤ４５０）は０．２４９、エタノール濃度は５質量％であった。
次いで、合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１２６．１ｇ（１２７．６ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．３２Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３８ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６９ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で５質量％エタノール水溶液２６１ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２３０．７ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２０．５ｇを回収した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２３０．７ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８（Ｌ／Ｌ）の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２２０．５ｇを回収した。
「精製物１」中のアピゲニン濃度は０．００７質量％。アピゲニン純度は３．６％、色相（ＯＤ４５０）は０．２４９であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は４５％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００５質量％。アピゲニン純度は４．０％、色相（ＯＤ４５０）は０．２１６であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は５６％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」中のアピゲニン濃度は０．００５質量％。アピゲニン純度は４．０％、色相（ＯＤ４５０）は０．２１６であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は５６％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
比較例５
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」２５０ｇを一旦濃縮し、その濃縮液に８５．０質量％のエタノール水溶液１１６．９ｇ添加して、２３６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．１％、色相（ＯＤ４５０）は０．３１２、エタノール濃度は５０質量％であった。
次いで、合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１１２．７ｇ（１２５．４ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．２８Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３５ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６４ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
製造例１で得られた「エタノール水溶液を含むアピゲニン含有抽出物」２５０ｇを一旦濃縮し、その濃縮液に８５．０質量％のエタノール水溶液１１６．９ｇ添加して、２３６ｇの「アピゲニン濃度調整液」得た。得られた「アピゲニン濃度調整液」のアピゲニン濃度は０．０３１質量％、アピゲニン純度は２．１％、色相（ＯＤ４５０）は０．３１２、エタノール濃度は５０質量％であった。
次いで、合成吸着剤として実施例２と同様の方法により採取したＳＰ−７０を用い、これを実施例１と同様のカラムに充填した後、実施例１と同様の操作により合成吸着剤を洗浄した。
次いで、「アピゲニン濃度調整液」１１２．７ｇ（１２５．４ｍＬ、通液倍数（ＢＶ）＝２．２８Ｌ／Ｌ、アピゲニン質量は０．０３５ｇ、アピゲニンの全質量と合成吸着剤の全容量との比は０．６４ｇ／Ｌ）を通液速度ＳＶ＝２．４（ｈ-1）でカラムに通液し、その透過液を廃棄した。
吸着後、洗浄工程として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８(Ｌ／Ｌ)の条件で５０質量％エタノール水溶液２３７ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、その透過液を廃棄した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８(Ｌ／Ｌ)の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２６．４ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８(Ｌ／Ｌ)の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２１９．２ｇを回収した。
次いで、溶出工程１として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８(Ｌ／Ｌ)の条件で６０質量％エタノール水溶液２３３ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物１」２２６．４ｇを回収した。
次いで、溶出工程２として、通液速度（ＳＶ）＝２．４（ｈ-1）、通液倍数（ＢＶ）＝４．８(Ｌ／Ｌ)の条件で７０質量％エタノール水溶液２２０ｇ（２６４ｍＬ）を通液して、「精製物２」２１９．２ｇを回収した。
「精製物１」中のアピゲニン濃度は０．００６質量％。アピゲニン純度は３０％、色相（ＯＤ４５０）は０．０２８であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は４１％であった。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」のアピゲニン濃度は０．００３質量％。アピゲニン純度は２４％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３５であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は４２％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
また、「精製物１」と「精製物２」とを混合した「混合精製物」のアピゲニン濃度は０．００３質量％。アピゲニン純度は２４％、色相（ＯＤ４５０）は０．０３５であった。また、「アピゲニン濃度調整液」からのアピゲニンの回収率は４２％であった。
本実施例における製造条件、精製アピゲニン含有抽出物の分析結果を表２に示す。
表１及び２から明らかなように、所定の有機溶媒濃度を有する有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に通液した後、合成吸着剤に吸着されたアピゲニンを有機溶媒水溶液で溶出することにより、アピゲニンを高純度で含有する精製アピゲニン含有抽出物が高収率で得られることが確認された。
Claims (8)
- 有機溶媒濃度が１０〜４５質量％である有機溶媒水溶液を含むアピゲニン含有抽出物を合成吸着剤に接触させて、前記アピゲニン含有抽出物中のアピゲニンを前記合成吸着剤に吸着させる吸着工程、及び
前記合成吸着剤に有機溶媒水溶液を接触させて、前記合成吸着剤から前記アピゲニンを溶出させる溶出工程
を含む、精製アピゲニン含有抽出物の製造方法。 - 前記アピゲニン含有抽出物中のアピゲニン濃度が０．０１〜０．２質量％である、請求項１記載の製造方法。
- 前記アピゲニン含有抽出物は、有機溶媒濃度が４６〜９９．５質量％である有機溶媒水溶液を用いてアピゲニン含有植物から抽出した原料アピゲニン含有抽出物を、水又は有機溶媒水溶液で希釈して有機溶媒水溶液中の有機溶媒濃度を１０〜４５質量％に調整したものである、請求項１又は２記載の製造方法。
- 吸着工程後かつ溶出工程前において、前記合成吸着剤を有機溶媒水溶液で洗浄する洗浄工程を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記溶出工程において使用する前記有機溶媒水溶液の有機溶媒濃度が５０〜９５質量％である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記合成吸着剤の平均粒子径（ｄ50）が１００〜７００μｍであり、かつ最大粒子径と最小粒子径との差（Δｄ）が３０〜９００μｍである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記合成吸着剤の平均粒子径（ｄ50）に対する、最大粒子径と最小粒子径の差（Δｄ）の比（Δｄ／ｄ50）が２以下である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の製造方法。
- 請求項１〜７のいずれか１項に記載の製造方法により得られた精製アピゲニン含有抽出物。
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