JP2008308630A

JP2008308630A - キク科植物由来の抗酸化剤及びその製造方法並びに２，４−ヘキサジエナール誘導体

Info

Publication number: JP2008308630A
Application number: JP2007159809A
Authority: JP
Inventors: Tomotada Dougasaki; 知格堂ヶ崎
Original assignee: Azabu Veterinary Medical School
Current assignee: Azabu Veterinary Medical School
Priority date: 2007-06-18
Filing date: 2007-06-18
Publication date: 2008-12-25

Abstract

【課題】ポリフェノール類とは異なる化学構造を有し、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体やこれらを含む抽出物からなり、飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料等の抗酸化剤としての用途に、及び／又は、活性酵素消去作用を有する健康飲食品等の用途に有用なキク科植物由来の抗酸化剤及びその製造方法を提供する。
【解決手段】キク科植物の塊根又は塊茎に酸含有アルコール水溶液を接触させて溶剤抽出を行い、得られた溶剤抽出物にエステル系溶剤を接触させて抽出し、次いで得られたエステル系溶剤抽出液からエステル系溶剤を除去して得られた抗酸化活性を有する下記の化学式（１）

を有する2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナール等の2,4-ヘキサジエナール誘導体やこれらを含む抽出物からなる抗酸化剤及びその製造方法である。
【選択図】なし

Description

この発明は、フラクトオリゴ糖を豊富に含有して健康食品としても注目されているヤーコン（Samallathus sonchifolius）の塊根等のキク科植物の塊根又は塊茎から抽出され、優れた抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含むキク科植物由来の抗酸化剤及びその製造方法、並びに、キク科植物由来の抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体に関する。

飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料、又はこれらの原料等においては、酸化による品質低下を防止する目的で古くから抗酸化剤が用いられており、例えば、ブチルヒドロキシアニソール（BHA）、ブチルヒドロキシトルエン（BHT）等の合成抗酸化剤や、α-トコフェロール（ビタミンＥ）、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、エリソルビン酸ナトリウム、クエン酸イソプロピル、没食子酸プロピル等の天然抗酸化剤が用いられている。

また、近年、フリーラジカルや活性酸素が生体組織に有害な作用を発現し、老化や発癌等とも関連する様々な疾患を引き起こすことが明らかになってきたことから、抗酸化活性を有する物質において、このようなフリーラジカルや活性酸素を消去し、及び／又は、その生成を抑制する作用（以下、単に「活性酸素消去作用」という。）を有するものが注目されてきており、このような活性酸素消去作用を有する天然由来の物質、例えばフラボノイド誘導体等を始めとするポリフェノール類等の研究も盛んに行われている（例えば、特許文献１〜６を参照）。

更に、本発明が対象としているキク科植物に関しては、南米アンデス原産の農産物であるヤーコンに関する研究が知られており、特に特許文献７においては、ヤーコン塊根のメタノール抽出物からアルダル酸の１種であってアルトラル酸とカフェ酸とがエステル結合した化合物を単離し、この化合物が抗酸化活性を有することを突き止め、食品産業分野や化学産業分野等において食品用の抗酸化剤等として有用であることが開示されている。
特許第2,817,809号公報特開平08-225,783号公報特開平09-078,061号公報特開平10-121,044号公報特開2001-139,945号公報特開2002-275,184号公報特許第3,039,864号公報

本発明者は、キク科植物であるヤーコンの塊根中に含まれる生理活性成分を究明すべく研究を進めてきたが、その過程で、ポリフェノール類とは異なる化学構造を有して優れた抗酸化活性を有する物質が存在することを突き止め、このポリフェノール類以外であって抗酸化活性を有する物質の単離とその化学構造の解析を進めてきた。

この結果、本発明者は、ヤーコン塊根から抽出され、ポリフェノール類とは異なる化学構造を有して抗酸化活性を有する物質が2,4-ヘキサジエナール骨格を有し、文献未記載の新規化学物質であることを突き止め、本発明を完成した。

従って、本発明の目的は、キク科植物由来の物質であって、ポリフェノール類とは異なる化学構造を有し、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含む抽出物からなり、飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料等の抗酸化剤としての用途に、及び／又は、活性酵素消去作用を有する健康飲食品等の用途に有用なキク科植物由来の抗酸化剤及びその製造方法を提供することにある。

また、本発明の他の目的は、種々の目的で使用可能な抗酸化剤としての用途、及び／又は、活性酵素消去作用を有する健康飲食品等の用途に有用なキク科植物由来の抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体、更には、抗酸化剤や活性酵素消去作用を有する健康飲食品等の用途以外に、2,4-ヘキサジエナール骨格を有して種々の物質の合成原料、合成樹脂原料等としての用途についても期待される新規化学物質の2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールを提供することにある。

すなわち、本発明は、キク科植物の塊根又は塊茎に酸含有アルコール水溶液を接触させて溶剤抽出を行い、得られた溶剤抽出物にエステル系溶剤を接触させて抽出し、次いで得られたエステル系溶剤抽出液からエステル系溶剤を除去して得られた抽出物であって、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含むことを特徴とするキク科植物由来の抗酸化剤である。

また、本発明は、キク科植物の塊根又は塊茎に酸含有アルコール水溶液を接触させて溶剤抽出を行い、次いで得られた溶剤抽出物にエステル系溶剤を接触させて抽出し、得られたエステル系溶剤抽出液からエステル系溶剤を除去することにより、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含む抽出物を得ることを特徴とするキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法である。

更に、本発明は、キク科植物の塊根又は塊茎から抽出され、塩酸含有メタノール水溶液及び酢酸エチルにそれぞれ可溶性であって、2,4-ヘキサジエナール骨格を有する化合物であり、かつ、ロダン鉄法により測定される抗酸化活性を有することを特徴とする抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体である。

更にまた、本発明は、下記の化学式（１）

を有する2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールである。

本発明で用いるキク科植物については、基本的には、それが塊根又は塊茎を有すると共にこの塊根又は塊茎中に抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含むものであればよいが、その用途との関係で、好ましくは食用として利用可能な塊根又は塊茎を形成するキク科植物であるのがよく、特に好ましくは、ヤーコン、キクイモ（Helianthus tuberosus）、ゴボウ（Arctium lappa）、ダリヤ（Dahlia）等を例示することができる。

また、本発明で用いるキク科植物の塊根又は塊茎については、それが抽出溶剤の酸含有アルコール水溶液と効率良く接触して固液抽出操作可能な形態のものであれば、どのような形状や大きさ、あるいは、性状に処理されたものであってもよいが、酸含有アルコール水溶液による抽出効果を考慮すると、好ましくは乾燥して水分含有量を５重量%以上２０重量%以下、好ましくは５重量%以上１５重量%以下程度にまで低減したものであるのがよく、また、酸含有アルコール水溶液との接触効率を高めるために細かに裁断され、あるいは、粉砕されたものであるのがよい。

そして、この固液抽出操作に用いる酸含有アルコール水溶液についても、酸を含有して配糖体を糖とアグリコンとに加水分解したり、あるいは、塩類化合物を酸性化合物に変換する等の作用を有するものであればよいが、固液抽出操作の操作性等の観点から、好ましくは、酸としては強酸性の塩酸、燐酸、有機酸等、特に除去し易いことから塩酸であるのがよく、また、アルコールとしては炭素数１〜６の水溶性アルコール、特にメタノールやエタノールであるがよい。

そして、この酸含有アルコール水溶液中の酸濃度については、使用される酸の種類によっても異なり、特に制限されるものではないが、例えば酸として塩酸が用いられる場合、塩酸濃度が４重量%以上１５重量%以下、好ましくは６重量%以上１２重量%以下であるのがよい。また、この酸含有アルコール水溶液を構成するアルコール水溶液のアルコール濃度についても、使用する酸やアルコールによって異なるが、通常は４０体積%以上８０体積%以下、好ましくは４５体積%以上６０体積%以下の範囲であるのがよい。このアルコール濃度が４０体積%より低くてアルコールの割合が低くなるとアルコール可溶成分の抽出効率が減少するという問題が生じ、反対に、８０体積%より高くなってアルコールの割合が高くなりすぎると水可溶成分の抽出効率が減少するという問題が生じる。

また、特に限定するものではないが、キク科植物がヤーコン塊根である場合に抽出溶剤として用いる酸含有アルコール水溶液は、好ましくは塩酸濃度４〜１５重量%、好ましくは６〜１２重量%に調整されたアルコール濃度４０〜８０体積%、好ましくは４５〜６０体積%のメタノール水溶液であるのがよく、このような酸含有アルコール水溶液を用いることにより、ヤーコン塊根から目的成分の抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を効率良く抽出することができる。

この酸含有アルコール水溶液を用いる固液抽出操作については、特に制限されるものではなく、常法により行うことができ、例えば、回分操作、多回操作、半回分操作、向流多段操作、多重操作、向流微分操作等の接触様式を挙げることができ、また、その固液抽出操作の操作条件については、接触様式やキク科植物の種類やその塊根又は塊茎から調製された抽出原料の形状や大きさ等によっても異なるが、５重量%以上２０重量%以下程度にまで乾燥した抽出原料１重量部に対して抽出溶剤の酸含有アルコール水溶液を、複数回に分けて固液抽出操作を行なう場合にはその合計で、２０重量部以上２００重量部以下、好ましくは３０重量部以上１００重量部以下の割合で使用し、常温又はその付近の温度（概ね15℃以上25℃以下の範囲）で接触時間０．１時間以上３時間以下、好ましくは０．５時間以上１．０時間以下の条件で実施される。

酸含有アルコール水溶液による固液抽出操作で得られ、次にエステル系溶剤と接触される溶剤抽出物については、それが固液分離して得られた溶剤除去前の抽出溶液であっても、また、この抽出溶液から抽出溶剤の酸含有アルコール水溶液の一部又は全部を除去した後の濃縮抽出溶液又は抽出物であってもよいが、その後の抽出・分離操作を考慮すると、好ましくは、抽出溶液を所定の体積まで濃縮する濃縮処理を行った後の濃縮抽出溶液である。このような濃縮処理後の濃縮抽出溶液を用いることにより、エステル系溶剤を添加して液液分配抽出を行う際に、目的の成分を効率良くエステル系溶剤層（エステル系溶剤抽出液）中に移行させることができる。

そして、溶剤抽出物が抽出溶液又は濃縮抽出溶液である場合に液液分配抽出に用いるエステル系溶剤としては、接触させた際にこれら抽出溶液又は濃縮抽出溶液とは混合せずにエステル系溶剤層を形成し、目的成分の2,4-ヘキサジエナール誘導体を溶解して効率良く液液分配抽出可能なものであればよく、例えば酢酸エチル、酢酸ブチル、プロピオン酸エチル等を例示できるが、液液抽出操作の操作性等の観点から、特に好ましくは酢酸エチルである。

上記の抽出溶液又は濃縮抽出溶液とエステル系溶剤とを用いた液液抽出操作についても、特に制限されるものではなく、常法により行うことができ、例えば、向流微分操作や向流多段操作等の接触様式を挙げることができ、また、その液液抽出操作の操作条件についても、特に制限されるものではなく、常法により行うことができ、例えば、抽出溶液又は濃縮抽出溶液の１体積部に対して酢酸エチルを０．１体積部以上１０体積部以下、好ましくは０．５体積部以上２．０体積部以下の割合で使用し、常温（概ね１５℃以上２５℃以下）又はその付近の温度で接触時間０．１時間以上１０時間以下程度の条件で実施される。

上記エステル系溶剤を用いた抽出操作で得られたエステル系溶剤抽出液については、次に、好ましくは無水硫酸ナトリウム、ＩＰＳ（silicon treated filter paper）等を用いて脱水処理し、更に減圧濃縮等の手段でエステル系溶剤を除去し、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含む抽出物を得る。また、更に必要により、得られた抽出物をメタノール、エタノール等のアルコールやこのアルコールと水との混合溶剤等のアルコール系溶剤に再溶解し、得られたアルコール系溶剤溶液をメンブランフィルター等の手段で濾過して溶剤不溶物を分離除去した後、再び減圧濃縮等の手段でアルコール系溶剤を除去し、精製抽出物としてもよい。

このようにして得られた抽出物については、例えばキク科植物がヤーコン塊根である場合には、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）による分析によって５つの主要なピークが観察され、その保持時間の小さい方から順に、フマル酸（ピークＡ）、2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナール（ピークＢ）、クロロゲン酸（ピークＣ）、2,4-ヘキサジエナール誘導体（化学構造の詳細不明）（ピークＤ）、及び2,4-ヘキサジエナール誘導体（化学構造の詳細不明）（ピークＥ）であり、ピークＢ物質は、その¹H-NMR及びC¹³-NMRによる分析結果から、文献未知の新規化学物質2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールであることが確認され、また、上記ピークＤ物質は、これまでの分析結果から、ピークＢの2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールに極めて近い2,4-ヘキサジエナール骨格を有する物質であると推定され、更に、上記ピークＥ物質は、そのHPLC分析の結果から、時間の経過と共に2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールに変化する2,4-ヘキサジエナール骨格を有する物質であることが判明した。

そして、上記の５つのピークＡ〜Ｅを示す物質のうち、ピークＡのフマル酸及びピークＣのクロロゲン酸は既知の物質であって、クロロゲン酸がポリフェノール類の１種で抗酸化活性を有することは知られている。これに対して、ピークＢの2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールはロダン鉄法による優れた抗酸化活性を示し、また、ピークＥの2,4-ヘキサジエナール骨格を有する物質は、ピークＢの2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールと同様に、ロダン鉄法による優れた抗酸化活性を示す。

それ故、これら５つのピークＡ〜Ｅの物質を含むヤーコン塊根の抽出物は、全体として優れた抗酸化活性を発現し、しかも、ヤーコンそれ自体が容易に栽培可能な食用植物であることから、飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料等の抗酸化剤としての用途への応用が、及び／又は、活性酸素消去作用を有する健康飲食品等の用途への応用が期待され、また、ピークＢの2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールは、新規化学物質であって、それ自体で抗酸化剤や活性酸素消去剤としての用途が期待される。

本発明のキク科植物由来の抗酸化剤は、ポリフェノール類以外の物質である2,4-ヘキサジエナール誘導体を含む、若しくはかかる2,4-ヘキサジエナール誘導体を主成分として含む抽出物からなるものであって優れた抗酸化活性を有するものであり、飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料等の抗酸化剤としての用途に、及び／又は、活性酸素消去作用を有する健康飲食品等の用途に用いることができる。

また、本発明の2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールは、優れた抗酸化活性を有する新規化学物質であり、それ自体で飲食品、医薬品、化粧料、動物飼料等の抗酸化剤や活性酸素消去剤として使用できるほか、種々の物質の合成原料、合成樹脂原料等としての用途も期待される。

以下、実施例に基いて、本発明の好適な実施の形態を具体的に説明する。
なお、以下の実施例において、抗酸化活性の測定は、以下に示すロダン鉄法及びDPPHラジカル捕捉活性法により行った。

［ロダン鉄法］
超純水０．５ml、0.2M-リン酸緩衝液２．５ml、1.3wt%-リノール酸／エタノール溶液２．５ml、及び46.6mM-AAPH｛2,2-アゾビス(2-アミジノプロパン)二塩酸塩｝水溶液０．２５mlと、ヤーコン抽出物又はHPLC各ピーク物質１０mgを80vol%-エタノール水溶液５ml中に溶解して得られた試料１mlとを混合し、遮光下に４０℃で保存して反応液とした。その後、反応液１mlに対し、75%-エタノール溶液９．４ml、30%-チオシアン酸アンモニウム水溶液０．２ml、及び0.02M-FeCl₂／3.5%-塩酸溶液０．２mlを添加し、３日後に吸光度測定装置（日立社製製品名：U-2000）にて５００nmにおける吸光度を測定し、ピーク物質無添加のコントロールと比較して吸光度の増大抑制を脂質酸化率(%)として評価し、その値を抗酸化活性とした。測定は何れも３連としてその平均値を用いた。

［DPPHラジカル捕捉活性法］
ヤーコン抽出物又はHPLC各ピーク物質４mgをエタノール２０ml中に溶解して得られた試料２mlと、200μM-DPPH[1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl]-エタノール溶液２mlとを試験管内で混合し、３０分後に吸光度測定装置（日立社製製品名：U-2000）にて５１７nmにおける吸光度を測定し、ピーク物質無添加のコントロールと比較して吸光度の増大抑制をラジカル捕捉活性率(%)として評価し、その値を抗酸化活性とした。測定は何れも３連としてその平均値を用いた。

［固液抽出操作］
約２cm角の大きさのチップ状ヤーコン乾燥物（水分含有量約1〜3重量%）をミルミキサーで粉状に粉砕し、得られた粉砕ヤーコン乾燥物を抽出原料とした。また、35wt%-塩酸を50vol%-メタノール水溶液で、塩酸濃度が１０重量%となるように、希釈して塩酸含有メタノール水溶液を調製し、抽出溶剤とした。

このようにして調製された抽出原料（粉砕ヤーコン乾燥物）３０gを容量１Lの三角フラスコ内に入れ、次いで９００mlの抽出溶剤を入れて、室温（25℃）下に約３０分間マグネチックスターラーで攪拌下に固液接触させた後、抽出溶液を分取した。また、この三角フラスコ内に新たな抽出溶剤９００mlを入れて上記と同じ条件で固液接触させた後に抽出溶液を分取する操作を２度繰り返し、合計で約２７００mlの抽出溶液を得た。

［液液分配抽出操作］
このようにして得られた抽出溶液約２７００mlを、エバポレータを用いて４０℃以下で減圧濃縮し、メタノールを除去して約８００mlの濃縮抽出溶液（略水溶液）を得た。次いで得られた濃縮抽出溶液約２００mlと酢酸エチル２００mlとを分液ロートに入れて、室温（25℃）下に約５分間振盪し液液接触させて液液分配抽出を行い、静置して酢酸エチル層約２００mlを分取した。このようにして液液分配抽出操作を行った濃縮抽出溶液約２００mlに対して、更に同様の操作を２回繰り返し、３回の操作の合計で濃縮抽出溶液約２００ml当り酢酸エチル抽出液約６００mlを得た。このような液液分配抽出操作を全ての濃縮抽出溶液約８００mlについて行い、合計で約２４００mlの酢酸エチル抽出液を得た。

得られた酢酸エチル抽出液については、無水硫酸ナトリウム１００gを添加して室温（25℃）下に０．５時間放置することにより脱水し、次いでエバポレータを用いて４０℃以下で減圧濃縮して乾固させ、ヤーコン抽出物を得た。

［HPLC分析用試料の調製］
次に、得られたヤーコン抽出物を70vol%-メタノール水溶液５ml中に再溶解させ、得られたメタノール溶液を０．４５μmメンブランフィルターでろ過し、得られた溶剤不溶物除去後のヤーコン抽出物メタノール溶液を高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分析用試料とした。

［化学分析用試料の調製］
上記のHPLC分析用試料について、フラクショクコレクター（日本分光工業製SF-212N）を用いてHPLC分析で観察された各ピークＡ〜Ｅの物質を分取し（１００回程度繰返して分取）、減圧濃縮及び凍結乾燥して溶剤を除去して、各ピークＡ〜Ｅ毎に化学分析用の試料（HPLC各ピーク物質：ピークＡ〜Ｅ物質）を調製した。

［HPLC分析］
上で調製されたHPLC分析用試料について、ODSカラム（Mihtysil RP-18GP 250-10.0）を用い、検出器としてフォトダイオードアレイ検出器（日本分光工業製MD-1510）を用い、溶離液として0.05wt%-ＴＦＡ（trifluoroacetic acid）／メタノール＝１０／９０の混合液を用い、流速２．０ml/分、注入量１００μl、及びカラム温度３５℃の条件でHPLC分析を行った。結果を図１に示す。

［ピークＡ物質］
化学分析用試料として調製されたピークＡ物質について、ＮＭＲ分析装置（日本電子社製JNM-A500）を用い、NMR分析用の試料を0.2wt%-DCl/CD₃ODに溶解して、¹H-NMR（500MHz）スペクトル及びC¹³-NMR（125MHz）スペクトルの測定を行った。
結果を表１に示す。

また、フマル酸及びマレイン酸の標準試薬を用い、ＵＶ吸収スペクトルを測定してピークＡ物質と比較した結果、このピークＡ物質のＵＶ吸収スペクトルはフマル酸標準試薬のそれとよく一致し、ピークＡ物質がフマル酸であることが判明した。

［ピークＢ物質］
化学分析用試料として調製されたピークＢ物質について、ピークＡの場合と同様にして¹H-NMR（500MHz）スペクトル及びC¹³-NMR（125MHz）スペクトルの測定を行った。結果を表１に示す。

この¹H-NMR（500MHz）分析の結果から１つのカルボニル基、２つのアルケン、酸素結合型アルケンのシグナルが観察され、また、C¹³-NMR（125MHz）分析の結果から１つのカルボニル基、２つのアルケン、２つの酸素結合型アルケンのシグナルが観察され、このピークＢ物質が以下の化学式（１）

を有する2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールであることが判明した。

［ピークＣ物質］
化学分析用試料として調製されたピークＣ物質とクロロゲン酸標準試薬（分子量：354）とについて、ODSカラム（Inertsil ODS-3 150-2.1）と質量分析計（サーモエレクトロン社製Finnigan LCQ Advantage MAX）とを用い、また、HPLCの分析条件として、移動相のＡ液を0.1０．１wt%-ギ酸とし、Ｂ液をアセトニトリルとする10%Ｂ（５分）→30%Ｂ（５５分）→10%Ｂ（５６分）を採用し、また、質量分析の分析条件として、イオンモードNegative ESI、キャピラリー温度３５０℃、プロダクトイオン検出：MS分析m/z３５３．２付近及びMS/MS分析m/z１９１．４付近を中心とする条件を採用し、LC/MS分析を行ってその結果を比較した。結果は、図２に示すように、このピークＣ物質（Sample）のLC/MS分析の結果がクロロゲン酸標準試薬（Standard）の結果とよく一致し、ピークＣ物質がクロロゲン酸であることが判明した。

［ピークＤ物質］
化学分析用試料として調製されたピークＤ物質について、ピークＡの場合と同様にして¹H-NMR（500MHz）スペクトル及びC¹³-NMR（125MHz）スペクトルの測定を行った結果、化学式（１）で示されるピークＢの2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールとその基本構造が類似していることが推定された。

［ピークＥ物質］
化学分析用試料として調製されたピークＥ物質について、フラクショクコレクターによりHPLC分析用試料から化学分析用試料として分取した直後のものと分取して１日経過後のものとについて、それぞれ上記と同様にして、HPLC分析を行った。結果を図３（ａ）（分取直後のもの）及び図３（ｂ）（分取後１日経過のもの）にそれぞれ示す。

この図３（ａ）及び図３（ｂ）の結果から明らかなように、ピークＥ物質は、極めて不安定であり、常温で１日放置するだけでピークＢ物質（2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナール）に変化する物質であることが判明した。

［抗酸化活性の測定］
上で調製されたHPLC分析用試料（ヤーコン抽出物）、ピークＢ物質、ピークＣ物質（クロロゲン酸）、ピークＥ物質、及び食品添加物として一般に用いられている酸化防止剤のブチルヒドロキシアニソール（BHA）とについて、それぞれロダン鉄法（脂質酸化率：%）及びDPPHラジカル捕捉活性法（ラジカル捕捉率：%）により抗酸化活性を測定した。結果を表２に示す。

本発明のHPLC分析用試料（ヤーコン抽出物）、ピークＢ物質、及びピークＥ物質は、DPPHラジカル捕捉活性法においては酸化防止剤のＢＨＡと比較してそのラジカル捕捉率が明らかに低くて抗酸化活性を示さなかったが、ロダン鉄法においては、特にHPLC分析用試料（ヤーコン抽出物）とピークＢ物質とが酸化防止剤のＢＨＡと比較してその脂質酸化率が顕著に高い値を示しており、酸化の過程で発生するラジカルの捕捉・消去作用は低いが、精製した過酸化物の分解促進作用が高いことが判明した。

図１は、ヤーコン抽出物のHPLC分析結果を示すグラフ図である。

図２は、このピークＣ物質（Sample）とクロロゲン酸標準試薬（Standard）とのLC/MS分析結果を比較したグラフ図である。

図３は、ピークＥ物質について、分取直後のもの（ａ）と分取後１日経過のもの（ｂ）とを比較したHPLC分析結果を示すグラフ図である。

Claims

キク科植物の塊根又は塊茎に酸含有アルコール水溶液を接触させて溶剤抽出を行い、得られた溶剤抽出物にエステル系溶剤を接触させて抽出し、次いで得られたエステル系溶剤抽出液からエステル系溶剤を除去して得られた抽出物であって、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含むことを特徴とするキク科植物由来の抗酸化剤。
キク科植物がヤーコン（Samallathus sonchifolius）である請求項１に記載のキク科植物由来の抗酸化剤。
酸含有アルコール水溶液中のアルコールが炭素数１〜６の水溶性アルコールである請求項１又は２に記載のキク科植物由来の抗酸化剤。
酸含有アルコール水溶液が、塩酸濃度４〜１５重量%に調整されたアルコール濃度４０〜８０体積%の塩酸含有メタノール水溶液である請求項３に記載のキク科植物由来の抗酸化剤。
エステル系溶剤が酢酸エチルである請求項１〜４のいずれかに記載のキク科植物由来の抗酸化剤。
抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体が2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールである請求項１〜５のいずれかに記載のキク科植物由来の抗酸化剤。
キク科植物の塊根又は塊茎に酸含有アルコール水溶液を接触させて溶剤抽出を行い、次いで得られた溶剤抽出物にエステル系溶剤を接触させて抽出し、得られたエステル系溶剤抽出液からエステル系溶剤を除去することにより、抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体を含む抽出物を得ることを特徴とするキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
溶剤抽出物が固液分離後の抽出溶液を所定の体積まで濃縮して得られた濃縮抽出溶液であり、この濃縮抽出溶液にエステル系溶剤を添加して液液分配抽出を行い、この液液分配抽出で得られたエステル系溶剤層からエステル系溶剤を除去して抽出物を得る請求項７に記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
キク科植物がヤーコン（Samallathus sonchifolius）である請求項７又は８に記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
酸含有アルコール水溶液中のアルコールが炭素数１〜６の水溶性アルコールである請求項７〜９のいずれかに記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
酸含有アルコール水溶液が、塩酸濃度４〜１５重量%に調整されたアルコール濃度４０〜８０体積%の塩酸含有メタノール水溶液である請求項１０に記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
エステル系溶剤が酢酸エチルである請求項７〜１１のいずれかに記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
抗酸化活性を有する2,4-ヘキサジエナール誘導体が2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールである請求項７〜１２のいずれかに記載のキク科植物由来の抗酸化剤の製造方法。
キク科植物の塊根又は塊茎から抽出され、塩酸含有メタノール水溶液及び酢酸エチルにそれぞれ可溶性であって、2,4-ヘキサジエナール骨格を有する化合物であり、かつ、ロダン鉄法により測定される抗酸化活性を有することを特徴とする抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体。
キク科植物がヤーコン（Samallathus sonchifolius）である請求項１４に記載の抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体。
2,4-ヘキサジエナール骨格を有する化合物が下記の化学式（１）

を有する2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナールである請求項１４又は１５に記載の抗酸化剤用2,4-ヘキサジエナール誘導体。
下記の化学式（１）

を有する2,5,6-トリヒドロキシ-2,4-ヘキサジエナール。