JPH02245087A - フロロタンニン類を有効成分とする抗酸化剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、褐藻類の抽出物あるいは該抽出物中に含まれ
るフロロタンニン類を有効成分とする抗酸化剤に関する
。

〔従来の技術〕

油脂類、あるいはこれら油脂類を含む食品、化粧品等の
製品が酸化され、着色、変色、異臭、毒物生成あるいは
栄養価の低下層を引き起こし、品質が劣化することはよ
く知られている。

従来、このような酸化による製品品質の劣化を防止する
ためにＢＨＡ、ＢＩＴ等の合成抗酸化剤が使用されてい
たが、近年、この種の合成抗酸化剤は、発ガン性の問題
により使用量が激減しており、その代替として有効な天
然抗酸化剤が望まれている。

このような状況において、種々の動植物あるいは微生物
から有効な天然の抗酸化剤を探索する試みがなされてい
るが、褐藻類については、褐藻類のザルガザム（Ｓａｒ
ｇａｓｓｕｍ）属からフロロタンニンの存在を確認した
例（Ｋ、Ｗ、ＧＩｏｍｂｉｔｚａ、　Ｍ、Ｆｏｒｓｔｅ
ｒａｎｄ　Ｇ、Ｅ（、ｋｈａｒｄｔ　ｒＰｈｙｔｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ、　ＩＬ　５７９−５８０（１９７Ｂ）
　Ｊ　）はあるものの、その作用について調べられてお
らず、褐藻類に含まれる成分を抗酸化剤として使用した
例は見当らない。

（発明が解決しようとする課題〕 本発明の課題は、油脂類、あるいはこれら油脂類を含む
食品、化粧品等の製品に使用できる、褐藻類由来の安全
かつずくれた抗酸化性を有する天然の抗酸化剤を提供し
ようとするものである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明は、褐藻類の抽出物あるいは該抽出物中に含まれ
るフロロタンニン類を有効成分とする抗酸化剤に関する
ものであって、本発明におりる褐藻類には、例えばウミ
トラノオ、アラ７、フクＩ：ノノリ、アカモク、タマハ
ハキモク等のザルガザム（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ）属に属
する藻類が挙げられるが、特にウミトラノオ、アラメが
好適である。

また、本発明の褐藻類の抽出物は、褐藻類を例えばクロ
ロボルム／メタノール／水からなる混合溶媒系で抽出し
たとき、含水メタノール区分を採取することにより得ら
れるが、この区分を更にクロロホルム、酢酸エチル、ア
セトン、メタノール及び水で抽出した各分画区分も抗酸
化剤として使用できる。

更に本発明においては、該抽出物中の抗酸化性物質を解
明すべく研究を進めた結果、該抗酸化性物質が、例えば
下記式Ｉで表わされるフロロタンニン類であることを見
い出した。

式Ｔ したがって、このフロロタンニン類も抗酸化剤として使
用し得ることはいうまでもない。

本発明の抗酸化剤の適用範囲については、特に限定され
るものではないが、例えばサフラワー油、大豆油等の植
物油のほか、畜肉脂及び魚油等の油脂類、あるいはこれ
らを含有する食品、化粧品等の製品において使用するこ
とができる。

〔発明の効果〕

本発明の抗酸化剤は、食用油脂等の油脂類、あるいはこ
れを含む食品、化粧品等の製品に対し、優れた抗酸化効
果を有し、また、この抗酸化効果は長時間安定に接続す
るものである。しかも、本発明の抗酸化剤は安全上問題
がなく、更に色が薄く、臭いも弱いので本発明により、
上記製品等に配合するのに極めて有用な天然の抗酸化剤
を提供することができた。

〔実施例〕

以下に本発明の実施例を示すが、本発明はこれに限定さ
れるものではない。

（実施例１） （１）抽出物の調製 ウミトラノオの生温１５０ｇにクロロホルム／メタノー
ル（２：１ν／ｖ）　１２５ｍＲと水２５ｍ１を加え、
ホモジネートした。さらにクロロボルム　（５０ｍＮ）
を加え、−晩装置した後、クロロホルム層を含水メタノ
ール層に分配した。含水メタノール区分は凍結乾燥して
粉末化したところ、０．２４８ｇが得られた。

アラメ、アカモク、タマハハキモク、フクロノリについ
ても同様に抽出、粉末化処理を行い、それぞれアラメ０
．２５１ｇ、アカモク０．３０５ｇ、タマハハキモク０
．２３１ｇ、フクロノリ０．１．９２ｇの各抽出物が得
られた。

（２）各抽出物の抗酸化性の判定 溶存酸素計を用いて溶存酸素量の変化から油脂の自動酸
化の程度を測定し、前記（１）の各抽出物の抗酸化性を
判定した。

）エマルジョン溶液の調製 ザフラワー油をナトリウムメチラートでエステル交換し
、尿素付加処理を３回繰り返し非付加区分を減圧・蒸留
してリノール酸メチルを得て、これを基質油とした。

蒸留水とＴｗｅｅｎ４０を９　：　０．１（ｖ八）で混
ぜ、これに基質油であるリノール酸メチルをＩ　：　９
　（ｖ／ｖ）の比率になるように混合し、３分間超音波
処理を行い、エマルジョン溶液とした。

ｉｉ）抗酸化性の判定 牛血端ヘモグロビン（和光純薬）１．７ｍｇを１００ｍ
１の蒸留水に溶解し、触媒とした。

恒温槽内（２８°Ｃ）の反応容器に１）で調製したエマ
ルジョン溶液３　ｒｎｌと、あらかじめ海藻抽出物をｉ
）の蒸留水とＴｗｅｅｎ４０を９　：　０．１（ｖ／ｖ
）で混ぜた溶液に入れておき、（］）の各海藻抽出物が
基質油の０．２％となるように加え、アナライザーの電
極をつけて溶存酸素と予じめ１００％にセットして置き
、スターシーで攪拌して温度を一定にした。２分後、ヘ
モグロビン溶液５０μ尼をシリンジで注入すると、その
接触作用で油脂は象、速に溶存酸素を消費するが、それ
をレコーダーで記録した。そして、当初の溶存酸素の５
０％を消費するまでの時間を測定し、これをＩ’、１．
（Ｐｒｏｔｅｃｔ　Ｉｎｄｅｘ）　とし”６表１に示し
た。なお、溶存酸素計には ＹＳＩ　　ＭＯＤＥＬ　　５３００　　ＢＩＯＬＯＧＯ
Ｃ八１．０ＸＹＧへＮ　　ＭＯＮＩＴＯＲ （Ｙｅｌｌｏｗ　Ｓｐｒｉｎｇｓ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ
ｔ）を用いた。

第１表 ＊　ｃｏｎｔｒｏｌは海藻抽出物を未添加でテス］・第
１表より、ウミトラノオとアランがＰ、１．５０％にな
るまでの時間が著しく長いので、基質油に対して強い抗
酸化性を示していることがわかる。

（実施例２） 反応容器を２２°Ｃの恒温槽内に収容したほかは実施例
１と同様な方法で、基質油に対する実施例１（１）の各
海藻抽出物の濃度を０．０５％に下げて抗酸化評価を行
なったところ第２表の通りになった。

第２表 ＊　ｃｏｎｔｒｏｌは海藻抽出物を未添加でテスト第２
表より、０．０５％の濃度においてもウミトラノオとア
ランがＰ、１．５０％になるまでの時間が著しく長いの
で、基質油に対して強い抗酸化性を示していることがわ
かる。

（実施例３） 実施例１及び２により最も高い抗酸化効果を存するウミ
トラノオの含水メタノール抽出区分における抗酸化性物
質の検索及びその構造の解明を以下の様に行った。

（１）含水メタノール抽出区分の各溶媒による分画、該
各分画区分の抗酸化性及び収率 含水メタノール区分を凍結乾燥した粉末１．４４ｇを１
５ｍ！容共栓遠心管に入れ、最初にクロロホルムを加え
て超音波攪拌した後、３０００ｒ、ｐ、ｍ、、］００ｍ
１ｎ遠し、上澄液をピペットで分取した。以下、酢酸エ
チル、アセトン、メタノール、水で順次、同様の操作を
２度ずつ繰り返し抽出して行った。それぞれの両分につ
いて、実施例２の条件で抗酸化評価を行なったところ表
３のようになった。

また、各溶媒の抽出区分の収率は、分画前の抽出物重量
に対する各溶媒の抽出物重量の割合％で表わした。

第３表（２２°Ｃ） エチル、アセトン、メタノール、水などによる分画前の
もの 本２　ｃｏｎｔｒｏｌ　は海藻抽出物未添加でテスト第
３表より、各抽出区分単独では、５０χＰ、　Ｉ。

（ｍｉｎ）値が、分画前の含水メタノール区分に比べて
小さくなっているので含水メタノール区分の抗酸化活性
は複数成分の相乗効果によって生じていることがわかる
。

（２）フェノールの定性試験 ウミトラノオの含水メタノール区分に含まれる抗酸化性
物質の定性を確認するため、フェノール類の定性試験を
行なった。

Ｆｏｌｉｎ−ｃｉｏｃａｌｔｅｕ’ｓ試薬（ナカライテ
スク製）を蒸留水で１／８に希釈した溶液を噴霧し、続
いて２０％炭酸ナトリウム溶液を噴霧し、スボッ］・の
青変によりフェノール類の存在を確かめた。

（３）　　フェノールの定量試験、 フェノールの還元作用により生成するリンタングステン
酸の還元物量を比色定型するフォーリング法に基づいて
行った。

（１）で抽出したクロロホルム区分、酢酸エチル区分、
アセトン区分、メタノール区分、水区分を濃縮乾固した
後、各画分に再び０．５　ｍＲのメタノールを加え、さ
らに蒸留水を加え、全体を７　ｍｌとした。

これに、０．５　ｍＲのＰｏ１ｉｎ−ｃｉｏｃａｌｔｅ
ｕ’ｓ試薬（ナカライテスク製）を加え、正確に３分後
、飽和炭酸ナトリウム溶液１　ｍｌを添加し、蒸留水で
１０ｍ１とした。そして、１時間後、分光光度計で７２
５ｎｍにおける吸光度を測定した。

また、ブランク溶液は蒸留水８．５　ｍＬ　　Ｆｏｌｉ
ｎｃｉｏｃａｌｔｅｕ’ｓ試薬０．５　ｍ、飽和ナトリ
ウム水溶液Ｉ　ｍｆｌを混ぜた溶液を用い、標準曲線は
、このブランク溶液にクロログルシンを添加して作製し
た。

そして各分画の吸光度について、この標準曲線に基づき
フェノール含量を算出し、第４表の結果を得た。

第４表 ネ含量は、各区分の全抽出物の５０ｍｇ当たりのフェノ
ールの■で表わした。

第４表より、フェノール含量の高いメタノール区分と水
区分が第３表の抗酸化活性も高いため、フェノール性化
合物が抗酸化性物質であると考えられる。

（４）抗酸化性物質の構造の解明 （１）で抽出したウミトラノオのクロロホルム区分の抗
酸化性物質の構造を明らかにするため、０１１基をアセ
チル化した後、’ＩＩ−ＮＭＲ，ＩＲ，ＰＡＢ−ＭＳ、
　ＵＶλｍａｘを調べたところ第５表のような結果を得
た。

第５表 ’ＩＩ−ＮＭＲδｐｐｍ ＩＲ（ｃｍ刊） ＦＡＢ−ＭＳ　（ｍ／ｚ） ２．０６（６１１ｓ”）　　２．２３（６１１ｓ）　　
２．２７（３１１ｓ）　　６．５６−６．９７（５Ｈｍ
”）１７７０　１６００　１．４Ｂ５　１４５５　１．
４３５　１３６５４６１（Ｍ＋１）’　　→４１９　→
３７７　→３３４→２９２　→２５０ ＊　Ｍｕｌｔｉｐｌｆｃｉｔｙ；ｓ＝ｓｉｎｇｌｅｔ　
ｍ＝ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ＊＊　　ｉｎ　　ａｃｅｔｏｎ
ｉｔｒｉｌｅこの第５表の結果からのると、’）Ｉ−Ｎ
ＭＲから、δ２　ｐｐｍ付近にアセチル基に由来するシ
グナルと６６ｐｐｍ付近に芳香環のプロトン由来のシグ
ナルが観察され、また、ＦＡＢ−ＭＳから、　■＋１）
“−４６１のイオンピークが得られたため、分子量４６
０の物質であることが確認でき、クロログルシンの２量
体であることがわかる。なお、 以上により、ウミノトラノオのクロロホルム区分の抗酸
化性物質のアセチル化した化合物の構造は下記式Ｈのも
のであることが確かめられ、式■ 抗酸化性物質の本来の構造は、下記式Ｉに示されるもの
である。

式Ｉ であり、両者の合計は４６０である。

また、離脱を示すフラグメントピークが５本観測される
ことから遊離の０１１基が５個含まれることがわかる。

ＩＲから、１１９０ｃｍ−’の吸収はエーテル結合を示
すことがわかる。

式Ｉの化合物の抗酸化性 実施例２と同様な方法で、式Ｉの化合物をサフラワー油
に対して０．０５％添加して抗酸化評価を行なった。こ
の結果を第６表に示す。

第６表 ＊　ｃｏｎｔｒｏｌは式Ｉ化合物を未添加でテストした
ものである。

第６表、第７表より式Ｉ化合物を添加した区分は未添加
区分に比べてＰ、Ｔ、５０％になるまでの時間が長いの
で、それぞれの油に対して強い抗酸化性を示すことがわ
かる。

以上において、クロロボルム抽出画分の抗酸化性物質の
構造を解明したが、極性の強い溶媒である酢酸エチル、
アセトン、メタノール及び水で抽出される化合物は重合
度の高いフロロタンニン類である。

実施例２と同様な方法で、式Ｉの化合物を魚油に対して
０．０５％添加して抗酸化評価を行なった。この結果を
第７表に示す。

第７表

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、褐藻類の溶媒抽出物を有効成分とする抗酸化剤。 ２、褐藻類がサルガサム（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ）属に属
   する藻類である請求項１記載の抗酸化剤。 ３、サルガサム（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ）属に属する藻類
   がウミトラノオあるいはアラメである請求項２記載の抗
   酸化剤。 ４、溶媒抽出物が褐藻類をクロロホルム、メタノール及
   び水からなる混合溶媒で抽出したとき、含水メタノール
   区分から得られたものである請求項１記載の抗酸化剤。 ５、請求項３記載の含水メタノール区分をさらにクロロ
   ホルム、酢酸エチル、アセトン、メタノール、水から選
   ばれたいずれか１種の溶媒を用いて抽出した溶媒画分を
   有効成分とする抗酸化剤。 ６、フロロタンニン類を有効成分とする抗酸化剤。 ７、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる化合物を有効成分とする請求項６記載の抗
   酸化剤。 ８、フロロタンニン類がサルガサム（Ｓａｒｇａｓｓｕ
   ｍ）属に属する褐藻類由来のものである請求項６記載の
   抗酸化剤。