JP2010533661A

JP2010533661A - 新しい抗微生物化合物、それらの合成および哺乳類の感染症の処置のためのそれらの使用

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Publication number: JP2010533661A
Application number: JP2010516390A
Authority: JP
Inventors: モールマン，ウテ; マカロフ，ヴァディム; スチュワート，ティー．，コウル
Priority date: 2007-07-16
Filing date: 2008-06-25
Publication date: 2010-10-28
Anticipated expiration: 2028-06-25
Also published as: CN101809009A; ZA201000491B; KR101588064B1; CN101809009B; ECSP109962A; EP2176248A1; WO2009010163A1; BRPI0813828A2; ATE482939T1; EA017806B1; EP2020406A1; KR20100043071A; NI201000012A; MX2010000672A; AU2008278056B2; UA99300C2; US8440842B2; TN2010000023A1; CA2693088A1; DE602008002843D1

Abstract

本発明は、新しい抗微生物化合物、それらの合成および哺乳類の感染症の処置のためのそれらの使用に関する。本発明の課題は、耐性および薬物不耐性に関係する問題を克服するために、新しい結核治療薬候補として、マイコバクテリウムに対する活性を有する、新しい化合物を生成することである。この課題は、式Ｉの化合物を提供することにより、解決される（式中、Ｒ^１およびＲ^２は、互いに独立して、ＮＯ_２、ＮＲ^７Ｒ^８、ＮＨＯＲ^９、ＣＯＯＲ^９、ＣＮ、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１１、ＣＨＯ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＳＯ_２ＮＲ^１２Ｒ^１３、低級アルコキシ、ＯＣＦ_３、モノ、ジまたはトリフルオロメチルであり、Ｒ^３およびＲ^４は、互いに独立して、Ｈ、１〜３個の鎖員を有する、飽和または不飽和、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、低級アルコキシであり、Ｒ^５は、Ｈ、１〜７個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基であり、Ｒ^６は、Ｘが、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基である基である、または、Ｒ^５とＲ^６は一緒になって、ｎが１〜４の２価基を表し、Ｒ^７からＲ^１３は、互いに独立して、Ｈまたは１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基、フェニル、ベンジルであるか、またはＲ^７とＲ^８は一緒になって、Ｒ^１０とＲ^１１は一緒になって、Ｒ^１２とＲ^１３は一緒になって、１〜７個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族２価の基を表し、Ｒ^１４およびＲ^１５は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＯ_２、ＮＨ₂、ＣＦ_３である）。

Description

本発明は、ベンゾチアジン誘導体、および細菌によって引き起こされる哺乳類（ヒトおよび動物）の感染症、特にマイコバクテリウムによって引き起こされる結核（ＴＢ）およびハンセン病のような疾患における抗菌剤としてのそれらの使用に関する。

チアジノン、チアジノン誘導体およびそれらの抗菌剤としての使用、特にマイコバクテリウム（ＴＢ）に対する使用は、例えば、ＡＲ２４２５６７Ａ１、ＡＵ３７０４４００Ａ１、ＣＡ１３２２５５１Ｃ１またはＥＰ０２４５９０１Ｂ１で公開されている。

周知の通り、利用できる治療薬に対する耐性を獲得したマイコバクテリウムによる結核感染の世界的増加は脅威である（Ｂ．Ｒ．Ｂｌｏｏｍ、Ｊ．Ｌ．Ｍｕｒｒａｙ、「Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ：ｃｏｍｍｅｎｔａｒｙｏｎａｒｅｅｍｅｒｇｅｎｔｋｉｌｌｅｒ」、Ｓｃｉｅｎｃｅ１９９２、２５７、１０５５〜１０６４）。多剤耐性（ＭＤＲ）マイコバクテリウムの出現は、極めて危険である。これらは、少なくとも、最も有効な結核治療薬２種、イソニアジドおよびリファンピシンに対してだけでなく、ストレプトマイシン、ピラジナミドおよびエタンブトールに対しても耐性のあるマイコバクテリウムである。一部の国で、ＭＤＲ−ＴＢの割合は既に２０％を超えている。昨年、南アフリカでＸＤＲ−ＴＢ（超多剤耐性ＴＢ）の最初の症例群が診断されて以来、状況は一層脅威を増している。ＸＤＲ−ＴＢは既に、全ての大陸に広がっている。ＸＤＲ−ＴＢを引き起こすマイコバクテリウムは、第一選択のＴＢ薬である、リファンピシン、イソニアジド、ピラジナミド、エタンブトールに対して耐性であり、さらに、第二選択のキノロン系およびアミノグリコシド系にも耐性である。（ＮａｔｕｒｅＭｅｄ．２００７、１３、２９５〜２９８）。世界中で全体的にＴＢ疾患が増加していることとあいまって、ＸＤＲ−ＴＢは、年間約２，０００，０００件の死亡の原因となっている。

（ＴＢ）またはハンセン病のような疾患の処置には、特に薬剤耐性を克服し、入手可能な薬剤の既知の劇的な副作用を克服するために、新しい作用機序を有する新しい薬剤が緊急に必要とされている。

本発明の課題は、耐性および薬物不耐性に関係する問題を克服するために、新しい結核治療薬候補として、マイコバクテリウムに対する活性を有する、新しい化合物を生成することである。

この課題は、式Ｉの化合物を提供することにより、解決される：
［式中、Ｒ^１およびＲ^２は、互いに独立して、ＮＯ_２、ＮＲ^７Ｒ^８、ＮＨＯＲ^９、ＣＯＯＲ^９、ＣＮ、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１１、ＣＨＯ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＳＯ_２ＮＲ^１２Ｒ^１３、低級アルコキシ、ＯＣＦ_３、モノ、ジまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ^３およびＲ^４は、互いに独立して、Ｈ、１〜３個の鎖員を有する、飽和または不飽和、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、低級アルコキシであり、
Ｒ^５は、Ｈ、１〜７個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基であり、
Ｒ^６は以下の基：
（式中、Ｘは、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基である）であるか、または
Ｒ^５とＲ^６は一緒になって、以下の２価の基（ｎは１〜４）を表し、
Ｒ^７〜Ｒ^１３は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基、フェニル、ベンジルであるか、またはＲ^７とＲ^８は一緒になって、Ｒ^１０とＲ^１１は一緒になって、Ｒ^１２とＲ^１３は一緒になって、１〜７個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族２価の基を表し、
Ｒ^１４およびＲ^１５は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＦ_３である］。

好ましい実施形態において、本発明は、以下から成る群から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する：
２−［４−（２−Ｒ^１４，５−Ｒ^１５−フェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［４−（２−Ｒ^１４，６−Ｒ^１５−フェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［４−（３−Ｒ^１４，５−Ｒ^１５−フェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（メチル）アミノ］−８−ニトロ−６−Ｒ^２−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−ニトロ−６−Ｒ^２−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−ニトロ−６−クロロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−ニトロ−６−フルオロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−Ｒ^１−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
式中、Ｒ^１、Ｒ^５、Ｒ^１４およびＲ^１５は、上記の意味を有する。本発明は、より具体的には、以下から成る群から選択される少なくとも１つの化合物に関する：
２−［４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−６，８−ジニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［４−（５−クロロ−２−メチルフェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−２−｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（エチル）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチア−ジン−４−オン、
２−［ベンジル（メチル）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチア−ジン−４−オン、
２−［４−（２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−（４−ベンジルピペラジン−１−イル）−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾ−チアジン−４−オン、
２−（ベンジルアミノ）−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−｛メチル［（１Ｒ）−１−フェニルエチル］アミノ｝−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン、
２−［ベンジル（メチル）アミノ］−６−クロロ−８−ニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン。

我々は、新しいおよび新規な１，３−ベンゾチアジン−４−オン誘導体の合成のために４つの異なる方法を使用した。Ａ、ＢおよびＣの方法は、出発物質として、十分に知られている多置換２−クロロ（ブロモ）−ベンゾカルボキサミドを使用したが、それらの多くは、文献に記載されているか、類似の方法により、容易に調製することができる（ＩｓａｅｗＳ．Ｇ．、「Ｆａｒｍ．Ｚｈ．」、（Ｋｉｅｖ）、２０００、５２、ＭａｋｏｓｚａＭ．、ＮｉｚａｍｏｖＳ．、「Ｏｒｇ．Ｐｒｅｐ．ａｎｄＰｒｏｃｅｄ．Ｉｎｔ．」、１９９７、２９、７０７、ＮｅｒｉｎＣ．、ＴｏｒｎｅｓＡ．Ｒ．、ＤｏｍｅｎｔｏＣ．、ＣａｃｈｏＪ．、「Ｊ．Ａｇｒ．ａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍ．」、１９９６、４４、４００９、ＴｈｉｅｌＷ．、ＭａｙｅｒＲ．、ＪａｕｅｒＥ．−Ａ．、ＭｏｄｒｏｗＨ．、ＤｏｓｔＨ．、「Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．」、１９８６、３２８、４９７、ＹｏｋｏｙａｍａＭ．、ＹｏｓｈｉｄａＳ．、ＩｍａｍｏｔｏＴ．、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、１９８２、５９１、ＲｏｍａｎｏｗｓｋｉＪ．、ＥｃｋｓｔｅｉｎＺ．、「Ｐｏｌ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．」、１９８４、５８、２６３、ＮｉｓａｔｏＤ．、ＳａｃｉｌｏｔｔｏＲ．、ＦｒｉｇｅｒｉｏＭ．、ＢｏｖｅｒｉＳ．、ＰａｌｍｉｓａｎｏＧ．、ＬｅｓｍａＧ．、「Ｏｒｇ．Ｐｒｅｐ．Ｐｒｏｃｅｄ．Ｉｎｔ．」、１９８５、１７、７５、ＯｉｋａｗａＮ．、ＮａｋａｇａｗａＹ．、ＮｉｓｈｉｍｕｒａＫ．、ＵｅｎｏＴ．、ＦｕｊｉｔａＴ．、「Ｐｅｓｔｉｃ．Ｓｃｉ．」、１９９４、４１、１３９、ＷｅｌｃｈＤ．Ｅ．、ＢａｒｏｎＲ．Ｒ．、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ」、１９６９、１２、２９９、ＦｕｌｌｅｒＲ．Ｗ．、ＭｏｌｌｏｙＢ．Ｂ．、ＤａｙＷ．Ａ．、ＲｏｕｓｈＢ．Ｗ．、ＭａｒｃｈＭ．Ｍ．、「Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．」、１９７３、１６、１０１およびその他多数）。

方法Ａ
出発物質の２−クロロベンゾカルボキサミドを、約１５分から約２４時間の期間、０〜５０℃において、アルコール、アセトンまたはそれらの混合物中で、１．０〜１．２等モル量のジチオカルバメートの金属塩を使って処理した。好ましくは、この反応は室温下において、アルコール中で実施される。反応混合物を水で希釈し、固体の２−ジチオカルバモイルベンゾカルボキサミドを濾別した。次のステップには、粗製生成物を使用するか、または適切な有機溶媒から、再結晶させることが可能である。２−ジチオカルバモイルベンゾカルボキサミドは、２〜３６時間、５０〜１００℃の温度において、水、アルコールまたは水／アルコールの混合液中で、弱アルカリ（例えば、Ｎａ_２ＨＰＯ_４、ＮａＨＣＯ_３、Ｎａ_２ＣＯ_３など）を使って処理した。好ましくは、この反応は、約２４時間、５０〜７５℃において、水／アルコールの混合液中で実施される。反応が完了すると、２−置換−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンが、従来の回収手順、例えば、酢酸エチルによる粉砕または水による希釈、濾過および適切な有機溶媒からの再結晶化などにより得られる。

方法Ｂ
この方法は、過剰の金属ジチオカルバメートを、ベンゾチアジノン環化における弱アルカリとして使用し、２−ジチオカルバモイルベンゾカルボキサミドを単離しないことを提案している。そこで、出発物質の２−クロロベンゾカルボキサミドを、約３〜３６時間の期間、２０〜８０℃において、アルコール、アセトンまたはそれらの混合液中で、１．２〜２．５等モル量のジチオカルバメートの金属塩を使って処理することができる。好ましくは、この反応は、約２４時間、５０〜７５℃において、アルコール中または水／アルコールの混合液中で実施される。目的の２−置換−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンが、方法Ａからの回収手順により得られる。

方法Ｃ
この方法は、出発物質として、２−クロロベンゼンカルボキサミドを使用する。これらの化合物を、１．１〜２．０倍過剰のキサントゲン酸アルキルの金属塩、例えば、市販のキサントゲン酸エチルカリウムを使って、２０〜１００℃の温度において、種々のアルコール、アセトン、アセトニトリルまたは他の適切な有機溶媒中で、約３０分から約２４時間の期間、処理した。好ましくは、この反応は、約２４時間、室温において、アルコール中で実施される。単離した２−アルコキシ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンを、酢酸、アルコール、酢酸エチル、ＤＭＦ、アセトンまたはアセトニトリル中の対応するアミンＨＮＲ^５Ｒ^６で、最高４８時間の期間、アルコキシ基の対応するアミンへの完全交換のために処理した。処理の完了後、反応混合物を蒸発させて、水で希釈するか、または水で直接希釈することができる。目的の２−ＮＲ^５Ｒ^６−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンを、通常の単離手順、例えば、濾過および適切な有機溶媒からの再結晶化により、回収する。

方法Ｄ
チオシアン酸塩と２−クロロアリールクロロ無水物との反応を利用した後、反応塊を対応するアミンを使って処理するという、１，３−ベンゾチアジン−４−オン合成の古典的な方法も利用可能である。この方法は、例えば、以下のような、科学文献に十分に記述されている：Ｊ．Ｉｍｒｉｃｈ、Ｐ．Ｋｒｉｓｔｉａｎ、「Ｃｏｌｌ．Ｃｚｅｃｈ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．」、１９８２、４７、３２６８〜３２８２、Ｄ．Ｋｏｓｃｉｋ、Ｐ．Ｋｒｉｓｔｉａｎ、Ｊ．Ｇｏｎｄａ、Ｅ．Ｄａｎｄａｒｏｖａ、「Ｃｏｌｌ．Ｃｚｅｃｈ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．」、１９８３、４８、３３１５〜３３２８、Ｄ．Ｋｏｓｃｉｋ、Ｐ．Ｋｒｉｓｔｉａｎ、Ｏ．Ｆｏｒｇａｃ、「Ｃｏｌｌ．Ｃｚｅｃｈ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．」、１９８３、４８、３４２７〜３４３２、Ｔ．Ｈ．Ｃｒｏｎｉｎ，Ｈ．−Ｊ．Ｅ．Ｈｅｓｓ、米国特許第３５２２２４７。

驚くべきことに、本発明の化合物は、発育の速いマイコバクテリウムに対して、＜０．００００１２〜０．７８μｇ／ｍｌの範囲、古典的な方法で判定された多剤耐性株も含め、エム・ツベルクローシス（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に対して、＜０．３９〜３．１２μｇ／ｍｌの範囲およびアラマーブルー法で判定されたエム・ツベルクローシスＨ３７Ｒｖに対して、２．０〜５０．０ｎｇ／ｍｌの範囲の、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）でマイコバクテリウムに対して、特に、強力な抗菌作用を示した。驚くべきことに、本発明の化合物は、マイコバクテリウムに対してのみ高いレベルの選択性を示し、有害な副作用の潜在性を劇的に減少させる。

本発明の化合物は、ＳＯＳクロモテストにおいて、５ｍｇ／ｍｌで、非突然変異誘発性である（Ｍ．Ｉｓｉｄｏｒｉ、Ｍ．Ｌａｖｏｒｇｎａ、Ａ．Ｎａｒｄｅｌｌｉ、Ｌ．Ｐａｓｃａｒｅｌｌａ、Ａ．Ｐａｒｅｌｌａ、「Ｓｃｉ．ＴｏｔａｌＥｎｖｉｒｏｎ」、２００５、３４６、８７〜９８、Ｍ．Ｂｏｍｂａｒｄｉｅｒ、Ｎ．Ｂｅｒｍｉｎｇｈａｍ、Ｒ．Ｌｅｇａｕｌｔ、Ａ．Ｆｏｕｑｕｅｔ、「Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ」、２００１、４２、９３１〜４４、Ｄ．Ａ．Ｗｉｄｄｉｃｋ、Ｄ．Ｉ．Ｅｄｗａｒｄｓ、「Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．」、１９９１、２５９、８９〜９３）。

したがって、本発明の化合物は、ヒトおよび動物において、結核感染症およびその他のマイコバクテリウム感染症の処置に有用である。

そのため、本発明は式Ｉの化合物を含む、医薬組成物に関する。

本発明は、さらに、哺乳類の細菌感染症の処置の方法における使用を目的とした、式Ｉの化合物に関する。このような方法での使用に好ましい式Ｉの化合物は、具体的に上に挙げられている化合物である。

本発明の化合物は、静脈注射、皮下注射もしくは筋肉注射による局所投与もしくは非経口投与用、または鼻腔内投与用に、薬学的に許容可能な水性、有機性または水性−有機性媒質中の希釈溶液または懸濁液を調製することにより、使用向けに製剤されるか、または、経口投与用の慣用の賦形剤と一緒に、錠剤、カプセルもしくは水性懸濁液の形でまたは坐剤として調製される。

該化合物は、体重１ｋｇ当たり０．００１〜１０００ｍｇの投与量で用いることができる。

後述する実験の実施例は、本発明を説明するためのものであるが、本発明を制限するものとしてみなしてはならない。

本発明の化合物の構造は、合成ならびに元素分析の様式によって、ならびに核磁気共鳴および質量スペクトルによって確定された。

出発物質
化学薬品および溶媒は、Ａｌｆａ−Ａｅｓａｒ（イギリス）またはＡｌｄｒｉｃｈ社（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、アメリカ、セントルイス州）から購入し、それ以上精製せずに、合成に使用した。融点は、ＢＰ手順（ＢＰｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）に従って測定し、補正はしなかった（Ｅｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒｍａｌ９００１、イギリス）。分析が元素記号によってのみ示されている場合、解析結果は、理論値の±０．３％の範囲内である（Ｃａｒｌｏ−Ｅｒｂａ５５００、イタリア）。ＮＭＲスペクトルは、ＶａｒｉａｎＵｎｉｔｙＰｌｕｓ４００（アメリカ）を使用して測定した。^１ＨＮＭＲのシフトは、ＴＭＳ（δ）からの低磁場側（ｄｏｗｎｆｉｅｌｄ）でのｐｐｍ単位で報告される。質量スペクトルは、直接導入により、ＦｉｎｎｉｇａｎＳＳＱ−７００（アメリカ）器具を使用して得た。化合物の反応および純度は、Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｆ_２５４アルミニウムシート（Ｍｅｒｃｋ社、ドイツ）を使用して、ＴＬＣにより制御した。

２−［４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−６，８−ジニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物１）
２−クロロ−３，５−ジニトロベンゾカルボキサミド０．５ｇを、エタノール２５ｍｌに溶解した。反応混合物を、４−（４−クロロフェニル）−ピペラジンジチオカルバメートナトリウム塩二水和物０．３９ｇで処理し、室温で６時間保管した。反応混合物を冷却した水５０ｍｌに注ぎ、生じた黄色の沈殿を濾別した。エタノールからの再結晶化後、純粋の最終生成物を得た。２−アミノカルボニル−４，６−ジニトロフェニル−４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボジチオアートは、薄黄色の結晶性固体である。収率 68%. 融点 178-180℃. MS m/z 481 (M⁺).
分析: C₁₈H₁₆ClN₅O₅S₂の計算値: C, 44.86; H, 3.35; N, 14.53; S, 13.31
実測値: C, 44.71; H, 3.36; N, 14.62; S, 13.35

２−アミノカルボニル−４，６−ジニトロフェニル−４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボジチオアート０．５ｇを、エタノール２５ｍｌに溶解した。反応混合物を、０．２ｇのＮａ_２ＨＰＯ_４×１２Ｈ_２Ｏで処理し、６時間還流した。反応混合物を冷蔵庫で冷却し、薄黄色の沈殿を濾別し、水５０ｍｌおよびメタノール３０ｍｌで洗浄した。エタノールからの２度の再結晶化後、純粋の最終生成物を得た。２−（１，４−２−［４−（４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イル］−６，８−ジニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンは、薄黄色の結晶性固体である。収率 38%. 融点 279-281℃(EtOH)
MS m/z 447 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 9.08および8.95 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 6.88および6.71 (2Hが2個, d, C₆H₄Cl), 3.68および3.30 (4Hが2個, m, N(CH₂CH₂)₂N) ppm.
分析: C₁₈H₁₄ClN₅O₅Sの計算値: C, 48.27; H, 3.15; N, 15.04; S, 7.16
実測値: C, 48.34; H, 3.22; N, 14.97; S, 7.23

２−［４−（５−クロロ−２−メチルフェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物２）
２−クロロ−３−ニトロ−５−トリフルオロメチルベンゾカルボキサミドを出発物質として使用し、実施例１の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 44%. 融点 158-161℃(DMF/水)
MS m/z 484 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.80および8.77 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.32 (1H, s, CH), 9.95および6.73 (1Hが2個, d, CHが2個), 3.65および3.29 (4Hが2個, m, N(CH₂CH₂₎₂N), 2.29 (3H, s, CH₃) ppm.
分析: C₂₀H₁₆ClF₃N₄O₃Sの計算値: C, 49.54; H, 3.33; N, 11.55; S, 6.61
実測値: C, 49.45; H, 3.40; N, 11.47; S, 6.83

８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−２−｛４−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ピペラジン−１−イル｝−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物３）
２−クロロ−３−ニトロ−５−トリフルオロメチルベンゾカルボキサミドを出発物質として使用し、実施例１の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 33%. 融点 201-203℃(EtOH).
MS m/z 504 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.80および8.77 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.61 (1H, s, CH), 7.39および7.03 (1Hが2個, d, CHが2個), 3.66および3.31 (4Hが2個, m, N(CH₂CH₂₎₂N) ppm.
分析: C₂₀H₁₄F₆N₄O₃Sの計算値: C, 47.62; H, 2.80; N, 11.11; S, 6.36
実測値: C, 47.74; H, 2.91; N, 11.29; S, 6.53

２−［ベンジル（エチル）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物４）
エタノール４５ｍｌ中２−クロロ−３−アミノ−５−トリフルオロメチルベンゾカルボキサミド１．２ｇの懸濁液を、ベンジル（エチル）ジチオカルバメートナトリウム塩二水和物２．０ｇで処理し、１４時間還流した。暗赤色の反応混合物を、水７０ｍｌで希釈し、６時間冷蔵庫で冷却し、薄黄色の沈殿を濾別し、エステル５０ｍｌで洗浄した。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／アセトン３：１）後、純粋の最終生成物を得た。２−［ベンジル（エチル）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンは、薄黄色の結晶性固体である。収率 40%. 融点 94-97℃.
MS m/z 409 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.80および8.77 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.41-7.25 (5H, m, C₆H₅), 4.62 (2H, s, CH₂), 3.43 (2H, q, CH₂), 1.01 (3H, t, CH₃) ppm.
分析: C₁₈H₁₄F₃N₃O₃Sの計算値: C, 52.81; H, 3.45; N, 10.26; S, 7.83
実測値: C, 52.73; H, 3.38; N, 10.44; S, 7.89

２−［ベンジル（メチル）アミノ］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物５）
実施例４の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 47%. 融点 120-124℃ (EtOH/水).
MS m/z 395 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.81および8.77 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.40-7.25 (5H, m, C₆H₅), 4.64 (2H, s, CH₂), 2.87 (3H, s, CH₃) ppm.
分析: C₁₇H₁₂F₃N₃O₃Sの計算値: C, 51.64; H, 3.06; N, 10.63; S, 8.11
実測値: C, 51.76; H, 3.13; N, 10.41; S, 8.34

２−［４−（２−フルオロフェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物６）
実施例１の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 37%. 融点 164-168℃ (i-PrOH).
MS m/z 454 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.81および8.77 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 6.76 (3H, m, 3CH), 6.11 (1H, m, CH), 3.68および3.30 (4Hが2個, m, N(CH₂CH₂)₂N) ppm.
分析: C₁₉H₁₄F₄N₄O₃Sの計算値: C, 50.22; H, 3.11; N, 12.33; S, 7.06
実測値: C, 50.08; H, 3.21; N, 12.46; S, 7.09

２−（４−ベンジルピペラジン−１−イル）−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物７）
実施例４の手順に従う。黄色の結晶性固体。収率 51%. 融点 161-163℃ (EtOH/DMF).
MS m/z 450 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.80および8.76 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.19-7.28 (5H, m, Ph), 3.48 (2H, s, CH₂), 3.38および3.09 (4Hが2個, m, N(CH₂CH₂)₂N) ppm.
分析: C₁₇H₁₈N₄O₇Sの計算値: C, 53.33; H, 3.80; N, 12.44; S, 7.12
実測値: C, 53.29; H, 4.01; N, 12.48; S, 7.06

２−（ベンジルアミノ）−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物８）
エタノール２５ｍｌ中２−クロロ−３−ニトロ−５−トリフルオロメチルベンゾカルボキサミド２．５ｇの懸濁液を、キサントゲン酸エチルナトリウム１．７５ｇで処理し、室温で２４時間保管した。反応混合物を冷却した水５０ｍｌに注ぎ、生じた黄色の沈殿を濾別した。エタノール／水からの再結晶後、純粋の２−エトキシ−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンを、白色の結晶性固体として得た。収率 58%. 融点 146-148℃.
MS m/z 320 (M⁺).
分析: C₁₁H₇F₃N₂O₄Sの計算値: C, 41.26; H, 2.20; N, 8.75; S, 10.01
実測値: C, 41.34; H, 2.22; N, 8.87; S, 10.27

酢酸１５ｍｌ中の２−エトキシ−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン０．７ｇ溶液を、ベンジルアミン０．４ｍｌで処理し、１４時間還流した。反応混合物を蒸発させ、残渣を水１０ｍｌで処理し、黄色の沈殿を濾過し、水５０ｍｌで洗浄した。エタノール／ＤＭＦからの２度の再結晶化後、純粋の最終生成物を得た。２−（ベンジルアミノ）−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンは、薄黄色の結晶性固体である。収率 73%. 融点 192-194℃.
MS m/z 381 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 9.27 (1H, 広幅 s, NH), 8.80および8.75 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.74-7.49 (5H, m, Ph), 4.49 (2H, s, CH₂) ppm.
分析: C₁₆H₁₀F₃N₃O₃Sの計算値: C, 50.39; H, 2.64; N, 11.02; S, 8.41
実測値: C, 50.42; H, 2.61; N, 10.89; S, 8.64

２−｛メチル［（１Ｒ）−１−フェニルエチル］アミノ｝−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物９）
実施例１の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 54%. 融点 110-113℃ (カラムクロマトグラフィーによる精製アセトン/ヘキサン 5:1).
MS m/z 409 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.82および8.76 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.84, 7.43, 7.15 (5H, 3 m, Ph), 4.84 (H, m, CH), 3.07 (3H, s, NCH₃), 1.39 (3H, d, CH₃) ppm.
分析: C₁₈H₁₄F₃N₃O₃Sの計算値: C, 52.81; H, 3.45; N, 10.26; S, 7.83
実測値: C, 52.73; H, 3.46; N, 10.19; S, 7.92

２−［ベンジル（メチル）アミノ］−６−クロロ−８−ニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン（化合物１０）
実施例８の手順に従う。薄黄色の結晶性固体。収率 64%. 融点 138-141℃ (カラムクロマトグラフィーによる精製アセトン/ヘキサン 4:1).
MS m/z 361 (M⁺).
¹H NMR (DMSO-d₆/CDCl₃) δ 8.37および8.23 (1Hが2個, sが2本, 2CH), 7.45-7.35 (5H, m, Ph), 4.62 (2H, 2, CH₂), 2.87 (3H, s, CH₃) ppm.
分析: C₁₆H₁₂ClN₃O₃Sの計算値: C, 53.11; H, 3.34; N, 11.61; S, 8.86
実測値: C, 53.19; H, 3.30; N, 11.52; S, 8.89

本発明の化合物のマイコバクテリウムに対するｉｎｖｉｔｒｏでの阻止活性の測定。

マイコバクテリウム・スメグマチス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｍｅｇｍａｔｉｓ）ＳＧ９８７、エム・アウラム（Ｍ．ａｕｒｕｍ）ＳＢ６６、エム・ヴァケエ（Ｍ．ｖａｃｃａｅ）ＩＭＥＴ１０６７０およびエム・フォーチュイタム（Ｍｆｏｒｔｕｉｔｕｍ）Ｂに対する該化合物の抗菌活性を、ＮＣＣＬＳのガイドライン［ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｉｔｔｅｅｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｔａｎｄａｒｄｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｄｉｌｕｔｉｏｎａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｓｆｏｒｂａｃｔｅｒｉａｔｈａｔｇｒｏｗａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ、第５版、Ｖｉｌｌａｎｏｖａ版、ＡｐｐｒｏｖｅｄｓｔａｎｄａｒｄＤｏｃｕｍｅｎｔＭ７−Ａ５。ＮＣＣＬＳ、（２０００）］に従って、ミューラーヒントン培養液（Ｄｉｆｃｏ）中、ブロスマイクロ希釈法を用いて、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定によりテストした。

エム・ツベルクローシス（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）Ｈ３７Ｒｖを、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）および最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の測定のための下記の方法によりテストした：
菌株をローエンシュタイン−ジェンセン（Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ−Ｊｅｎｓｅｎ）固体培地に接種した。２１日後、増殖した培養物を使用して、微生物細胞数５×１０^８／ｍｌに相当する接種懸濁液を調製した。その懸濁液０．２ｍｌを、試験対象化合物を対応する濃度、すなわち、１００．０から０．１９５μｇ／ｍｌ含む、シュコルニコヴァ（Ｓｈｋｏｌｎｉｋｏｖａ）液体培地２ｍｌを入れたチューブに接種した。３７℃で１４日間インキュベートした後、液体培地の入ったチューブを３０００ＲＰＭで１５分間遠心分離した。上清を廃棄した後、沈殿物を無菌の０．８ｍｌの０．９％ＮａＣｌに再度懸濁した。懸濁液０．１ｍｌを使用して、塗抹標本を作製し、その後、チール法で染色した。残りの標本を、薬物を含まないローエンシュタイン−ジェンセン固体培地を入れた３本のチューブに、容量０．２ｍｌで接種し、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）を測定した。３７℃で２１〜２８日間培養後、測定結果を読み取った。対照は、試験対象薬剤で処理されていないテスト菌株を入れて培養したチューブであった。
薬剤の最小殺菌濃度（ＭＢＣ）は、固体培地上でのマイコバクテリウムの発育を完全に抑止する薬剤濃度と考えられている。静菌効果（ＭＩＣ）は、塗抹標本中の個々のマイコバクテリウムのみの存在および対照と比較した、固体培地上で発育したコロニーの数の大きな減少によって特徴づけられた。測定結果を表２に示す。

エム・ツベルクローシスＨ３７Ｒｖに対する活性を、レサズリン減少アッセイ（ＭＩＣ_９６）によっても測定した。この方法については、以下に詳しく記載されている：Ｐ．Ｑｕｉｌｌａｒｄｅｔ、Ｏ．Ｈｕｉｓｍａｎ、Ｒ．Ｄ‘Ａｒｉ、Ｍ．Ｈｏｆｎｕｎｇ、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．」、アメリカ、１９８２、７９、５９７１〜５９７５、Ｊ．Ｃ．Ｐａｌｏｍｉｎｏ、Ａ．Ｍａｒｔｉｎ、Ｍ．Ｃａｍａｃｈｏ、Ｈ．Ｇｕｅｒｒａ、Ｊ．Ｓｗｉｎｇｓ、Ｆ．Ｐｏｒｔａｅｌｓ、「Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．ＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒ．」、２００２、４６、２７２０〜２７２２。測定結果を表３に示す。

Claims

式Ｉの化合物
［式中、Ｒ^１およびＲ^２は、互いに独立して、ＮＯ_２、ＮＲ^７Ｒ^８、ＮＨＯＲ^９、ＣＯＯＲ^９、ＣＮ、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１１、ＣＨＯ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＳＯ_２ＮＲ^１２Ｒ^１３、低級アルコキシ、ＯＣＦ_３、モノ、ジまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ^３およびＲ^４は、互いに独立して、Ｈ、１〜３個の鎖員を有する、飽和または不飽和、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、低級アルコキシであり、
Ｒ^５は、Ｈ、１〜７個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基であり、
Ｒ^６は以下の基：
（式中、Ｘは、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基である）であるか、または
Ｒ^５とＲ^６は一緒になって、以下の２価の基（ｎは１〜４）を表し、
Ｒ^７〜Ｒ^１３は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基、フェニル、ベンジルであるか、またはＲ^７とＲ^８は一緒になって、Ｒ^１０とＲ^１１は一緒になって、Ｒ^１２とＲ^１３は一緒になって、１〜７個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族２価の基を表し、
Ｒ^１４およびＲ^１５は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＦ_３である］。
式（Ｉ）の化合物の塩。
Ｒ^１４が、Ｈを表し、Ｒ^１５がハロゲンを表す、請求項１に記載の式（Ｉ）の２−［４−（２−Ｒ^１４，５−Ｒ^１５−フェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン。
Ｒ^１４が、Ｈを表し、Ｒ^１５がＦまたはＣｌを表す、請求項１に記載の式（Ｉ）の２−［４−（３−Ｒ^１４，５−Ｒ^１５−フェニル）ピペラジン−１−イル］−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン。
Ｒ^２が、ＣＦ_３、ＣｌまたはＦを表す、請求項１に記載の式（Ｉ）の２−［ベンジル（メチル）アミノ］−８−ニトロ−６−Ｒ^２−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン。
Ｒ^１が、ＣＦ_３、ＮＯ_２、ＮＨＯＨ、ＮＲ^７Ｒ^８を表し、Ｒ^７およびＲ^８が、請求項１で定義された意味を有する、請求項１に記載の式（Ｉ）の２−［ベンジル（Ｒ^５）アミノ］−８−Ｒ^１−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オン。
２−｛メチル［（１Ｒ）−１−フェニルエチル］アミノ｝−８−ニトロ−６−（トリフルオロメチル）−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンから成る群から選択される、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
６−Ｒ^２−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−８−ニトロ−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンから成る群から選択される、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
６−トリフルオロメチル−２−［メチル（２−フェニルエチル）アミノ］−８−Ｒ^１−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンから成る群から選択される、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
請求項１に記載の式Ｉの化合物を含む、医薬組成物。
哺乳類における微生物感染、特に結核感染およびハンセン病感染の治療的または予防的処置のための方法に使用するための式Ｉの化合物
［式中、Ｒ^１およびＲ^２は、互いに独立して、ＮＯ_２、ＮＲ^７Ｒ^８、ＮＨＯＲ^９、ＣＯＯＲ^９、ＣＮ、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１１、ＣＨＯ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＳＯ_２ＮＲ^１２Ｒ^１３、低級アルコキシ、ＯＣＦ_３、モノ、ジまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ^３およびＲ^４は、互いに独立して、Ｈ、１〜３個の鎖員を有する、飽和または不飽和、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、低級アルコキシであり、
Ｒ^５は、Ｈ、１〜７個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基であり、
Ｒ^６は以下の基：
（式中、Ｘは、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基である）であるか、または
Ｒ^５とＲ^６は一緒になって、以下の２価の基（ｎは１〜４）を表し、
Ｒ^７〜Ｒ^１３は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、飽和または不飽和、ハロゲン化または非ハロゲン化、直鎖状または分枝状の脂肪族基、フェニル、ベンジルであるか、またはＲ^７とＲ^８は一緒になって、Ｒ^１０とＲ^１１は一緒になって、Ｒ^１２とＲ^１３は一緒になって、１〜７個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族２価の基を表し、
Ｒ^１４およびＲ^１５は、互いに独立して、Ｈ、１〜５個の鎖員を有する、直鎖状または分枝状の脂肪族基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＦ_３である］。
種々のアルコール、アセトン、水、アセトニトリルまたは他の適切な有機溶媒の中で、２０〜１００℃の温度において、約３０分から約２４時間、２−クロロベンゾカルボキサミドを、１．１〜２．５倍過剰のキサントゲン酸アルキルの金属塩と反応させた後、酢酸、アルコール、水またはアセトニトリル中で、対応するアミンＮＲ^５Ｒ^６により、２０〜１００℃の温度で処理することにより、式Ｉの２−ＮＲ^５Ｒ^６−４Ｈ−１，３−ベンゾチアジン−４−オンを調製する方法。