JP2010142149A - 爪白癬モデルの製造法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ヒトを含む動物より採取した非感染爪の爪床側に、予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分を播種し、水性担体と接することなく、低温高湿度条件で長期間培養し、爪白癬モデルを製造する。前記予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分は、分生子の分散液であることが好ましく、前記低温高湿度条件は、温度25〜30℃、湿度90〜100%の範囲に存することが好ましい。
【選択図】図2
Description
(1)ヒトを含む動物より採取した非感染爪の爪床側に、予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分を播種し、水性担体と接することなく、低温高湿度条件で長期間培養することを特徴とする、爪白癬モデルの製造法。
(2)前記予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分は、分生子の分散液であることを特徴とする、(1)に記載の爪白癬モデルの製造法。
(3)前記低温高湿度条件は、温度25〜30℃、湿度90〜100%の範囲に存することを特徴とする、(1)又は(2)に記載の爪白癬モデルの製造法。
(4)前記長期間の培養条件は、7日間から14日間の培養であることを特徴とする、(1)〜(3)何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法。
(5)前記温湿度条件において、爪床側の湿度が爪甲側の湿度より高いことを特徴とする、(1)〜(4)何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法。
(6)(1)〜(5)何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法で製造されたモデルの爪甲側に抗真菌薬剤を投与し、爪中の真菌の状態をATP産生量を指標に、ATP産生量が大きいときには、生存真菌の量が多く、ATP産生量が低いときには、生存真菌の量が少ないと判別し、投与により生存菌数が減じる程度が高い薬剤ほど抗真菌効果の高い薬剤であると鑑別することを特徴とする、抗真菌薬剤の効果の鑑別法。
(7)(1)〜(5)何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法において、低温高湿度条件で、且つ、爪甲側よりも爪床側の湿度を高く保つための治具であって、爪の水分非透過性に依存して密閉すべき構造を構築する、爪よりも小さい窓部を有する2枚のアタッチメントとアタッチメントと爪とで密閉されるべき空間を有する、水性担体保持可能なチャンバー部とを構成要素とする爪白癬モデル作成用の治具。
(8)前記治具は、爪とアタッチメントとの接触部の間に弾性緩衝体を有することを特徴とする、(7)に記載の治具。
1.爪に著しく着色のないもの,目立つ汚れのないものであること。
2.爪が極端に湾曲していないものであること。
3.長さが5mm以上あり,5mm×5mmが2箇所取れるサイズのものであること。
4.ひび割れや亀裂のないもの、欠けていないものであること。
5.極端に厚かったり薄かったりしないものであること。
28℃に設定したテーハー式デジタル孵卵器で培養されているFSDA培地上のトリコフィトン・メンタグロファイテス(TIMM1189株)について,菌糸および分生子の十分な発育を確認した。50mLチューブに0.05%Tween(登録商標)80含有生理食塩液を適量とり、FSDA培地表面に発育した菌糸および分生子を白金耳で擦り,チューブに入れて分生子を浮遊させた。その後、よくピペッティングして均一な懸濁液にし,セルストレーナーでろ過して菌糸を除去したのち分生子濃度を算出し、最終的に1.0×104conidia(分生子)/mLとなるように調整した。
Claims (8)
- ヒトを含む動物より採取した非感染爪の爪床側に、予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分を播種し、水性担体と接することなく、低温高湿度条件で長期間培養することを特徴とする、爪白癬モデルの製造法。
- 前記予め培養して定量可能な状態に調整した、真菌乃至はその生体構成部分は、分生子の分散液であることを特徴とする、請求項1に記載の爪白癬モデルの製造法。
- 前記低温高湿度条件は、温度25〜30℃、湿度90〜100%の範囲に存することを特徴とする、請求項1又は2に記載の爪白癬モデルの製造法。
- 前記長期間の培養条件は、7日間から14日間の培養であることを特徴とする、請求項1〜3何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法。
- 前記温湿度条件において、爪床側の湿度が爪甲側の湿度より高いことを特徴とする、請求項1〜4何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法。
- 請求項1〜5何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法で製造されたモデルの爪甲側に抗真菌薬剤を投与し、爪中の真菌の状態をATP産生量を指標に、ATP産生量が大きいときには、生存真菌の量が多く、ATP産生量が低いときには、生存真菌の量が少ないと判別し、投与により生存菌数が減じる程度が高い薬剤ほど抗真菌効果の高い薬剤であると鑑別することを特徴とする、抗真菌薬剤の効果の鑑別法。
- 請求項1〜5何れか1項に記載の爪白癬モデルの製造法において、低温高湿度条件で、且つ、爪甲側よりも爪床側の湿度を高く保つための治具であって、爪の水分非透過性に依存して密閉すべき構造を構築する、爪よりも小さい窓部を有する2枚のアタッチメントとアタッチメントと爪とで密閉されるべき空間を有する、水性担体保持可能なチャンバー部とを構成要素とする爪白癬モデル作成用の治具。
- 前記治具は、爪とアタッチメントとの接触部の間に弾性緩衝体を有することを特徴とする、請求項7に記載の治具。
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