JP2010094111A - 高度不飽和脂肪酸の製造方法 - Google Patents
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
【解決手段】 幅広い温度域で安定な増殖能および脂質生産能を有するシゾキトリウム属(Schizochytorium)に属する微生物を用いることを特徴とする、高度不飽和脂肪酸の製造方法。特に、Schizochytrium sp. M-8株(FERM P-19755)を用いることを特徴とする、前記製造方法。当該微生物は15〜35℃の温度域において安定した増殖能および脂質生産能を有し、従って他の海洋真核微生物のような厳密な温度コントロールを必要とせず、工業的に安定的且つ効率的な高度不飽和脂肪酸の製造が可能である。
【選択図】 図1
Description
近年、これら動植物の他に、微生物を用いた高度不飽和脂肪酸の製造方法に関する研究開発が進み、実用化された例も複数知られている。モルティエレラ属(Mortierella)に属する糸状菌を用いたアラキドン酸(以下、ARAという)生産(特許文献1、2)や、クリプテコディニウム属(Crypthecodinium)に属する渦鞭毛藻を用いたDHA生産(非特許文献1)が代表的な例として挙げられる。また、海洋真核微生物であるラビリンチュラ類もDHAを高濃度に含有する脂肪酸組成により注目されてきた微生物であり(非特許文献2)、シゾキトリウム属(Schizochytrium)やウルケニア属(Ulkenia)に属するラビリンチュラ類を用いたDHA生産が行われている(非特許文献3、4)。
すなわち本発明は、下記(1)〜(3)に記載の製造方法を要旨とする。
(1)15〜35℃の範囲で安定した増殖および脂質生産性を示すシゾキトリウム属(Schizochytorium)に属する微生物を用いることを特徴とする、高度不飽和脂肪酸の製造方法。
(2)微生物がSchizochytrium sp. M-8(FERM P-19755)である、前記(1)記載の高度不飽和脂肪酸の製造方法。
(3)高度不飽和脂肪酸が炭素数18以上の高度不飽和脂肪酸である、前記(1)又は(2)記載の高度不飽和脂肪酸の製造方法。
培地は調製後、pHを3.0〜8.0の範囲内に調整した後、オートクレーブ等により殺菌して用いる。
本発明微生物であるSchizochytrium sp. M-8株(FERM P-19755)をGY培地(グルコース30g、酵母エキス10gを50%濃度の人工海水1Lに溶解し、pH7.0に調整したもの)にて培養した。培養は50mL三角フラスコに40mLのGY培地を入れ、100rpmで振とうしながら5、10、15、20、25、30、35、40℃の各温度で4日間培養した。培養開始から24時間毎に、分光光度計(V-530、JASCO社製)にて660nmにおける濁度を測定し、増殖状態を確認した。結果を図1に示す。
また培養終了後、遠心分離により菌体を回収し、蒸留水で菌体を洗浄した後、凍結乾燥してバイオマス量および脂質量(総脂質)を測定した。総脂質はFolchらの方法(Folch J. et al., J. Biol. Chem., 195, pp.833-841 (1951))に従い、クロロホルム:メタノール(2:1)で凍結乾燥菌体から抽出し、定量した。結果を図2(バイオマス量)および図3(総脂質量)にそれぞれ示す。
また、10〜35℃の各温度における各温度における培養液1Lあたりのバイオマス量を図2に示す。この結果、15〜35℃において極めて安定したバイオマス量が得られることが確認された。
また、10〜35℃の各温度における乾燥菌体1gあたりの総脂質量を図3に示す。この結果、15〜35℃の範囲で極めて安定した総脂質量が得られることが確認された。
以上の結果より、Schizochytrium sp. M-8株は15〜35℃にて安定した増殖能および脂質生産能を有することが明らかとなった。
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