JP2010090164A - 酵素含有組成物、かかる組成物を製造する方法およびその使用 - Google Patents
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Abstract
簡単かつ痛みがない方法で毎日実施することにより、カリエスに感染した歯組織を除去することができる組成物が必要であった。さらに、保存する価値のある健全な歯材料が攻撃および損傷を受けないかまたは少なくとも回避することができるカリエスを除去するための組成物が必要であった。さらに、カリエス治療後に、本質的に細菌残渣が残留しないことを確実にするカリエスを除去するための組成物が必要であった。さらに、痛みがなくかつ簡単なカリエスの治療のための方法が必要であった。
【解決手段】
本発明は、少なくとも1種の生物学的に活性なプロテアーゼと、少なくとも1種の生物学的に活性なグリコシダーゼと、を含む組成物であって、プロテアーゼとグリコシダーゼの活性比が、1,000,000:1〜1:1,000,000であり、総酵素活性が少なくとも2U/mlである組成物に関する。さらに、本発明は、そのような酵素を含む組成物を製造する方法およびカリエスを除去する方法に関する。さらに、本発明は、カリエスを除去するための治療剤を製造するための1種もしくはそれ以上の酵素を含む組成物の使用に関する。
【選択図】なし
Description
プロナーゼ:1単位は、基質としてカゼインを使用する場合、40℃、pH7.5で1分間あたり25μgのチロシンへの変換に対応する。
コラゲナーゼ:1単位は、基質としてコラーゲンを使用する場合、37℃およびpH7.5で5時間で1mmolのL−ロイシンへの変換に対応する。
ペプシン:1単位は、TCAによる変換されたヘモグロビンのA280nm、37℃での0.01のΔEに対応する。
リゾチーム:1単位は、pH6.24、25℃で1分間あたり0.001の活性を生じる。2.6mlの検出容積で、基質としてM.リソデイクチス(M.lysodeikticus)細胞を使用する。
デキストラナーゼ:基質としてデキストランを使用する場合、37℃、pH6.0で1分間あたり25μmolのイソマルトースへの変換に対応する。
α−アミラーゼ:1単位は、基質としてデンプンを使用する場合、20℃、pH6.9で3分間における1mgのマルトースの変換に対応する。
プロテイナーゼK:1Anson単位は、基質としてヘモグロビンを使用する場合、pH7.5、35℃での1μmolのフォリン陽性アミノ酸に対応する。
・5,000〜200,000U/ml溶媒、好ましくは、10,000〜150,000U/ml溶媒、より好ましくは、70,000〜100,000U/ml溶媒の範囲のリゾチーム、ならびに
・10〜1,000U/ml溶媒、好ましくは50〜500U/ml溶媒、およびより好ましくは90〜250U/ml溶媒の範囲のデキストラナーゼ
を有する。
i. 錯化剤
ii. 酵素基質
iii. 酵素エフェクター
iv. 増粘剤
v. 保存剤
vi. 安定化剤
の1種もしくはそれ以上から選択されるアジュバントを少なくとも1種含む。
ペプシン:約0.1〜約1.0重量%
リン酸二水素ナトリウム:約0.6〜約2.4重量%
水酸化ナトリウム:約0.001〜約0.5重量%
ヒドロキシエチルセルロース:約0.2〜約1.0重量%
メチルパラベン:約0.005〜約0.05重量%
プロピルパラベン:約0.005〜約1.0重量%
水:添加して100重量%とする。
リン酸二水素ナトリウム:約10〜約20重量%
リン酸:約5〜約10重量%
ポリエチレングリコール:約2〜約5重量%
ヒドロキシエチルセルロース:約0.2〜約1.0重量%
水:添加して100重量%とする。
pH値:約1.5〜約3.5
粘度:約10〜約50mPas
ペプシン活性:約1,000〜約10,000
緩衝能:約0.5〜約2.0。
酵素ペプシン、コラゲナーゼ、リゾチーム、プロナーゼ、デキストラナーゼ、およびα−アミラーゼは、SIGMA社から購入した。酵素プロテイナーゼKは、ICN社から購入した。
本発明に従う溶液の効力の決定に関する試験を、抽出したカリエス歯によりインビトロで行った。
必要であれば、カリエス領域を被覆するエナメル質層を、高速回転ドリルで除去した。
概略的浄化は必ずしも必要ではないが、歯科医師の治療の効果の試験を容易にする。エキスカベーターまたはカリエススプーンにより、カリエス病巣の概略的浄化を実施した。
a)20秒間 100μlの溶液1
b)リンス
c)20秒間 100μlの溶液1
d)リンス
e)20秒間 100μlの溶液2
f)リンス
g)以後、必要に応じて充填療法
カリエス病巣の感染した硬い歯質を除去するための酵素溶液を、要件に従って適用した後、抽出および治療した歯を通気し、包埋塊(サイトフィックス(cytofix)、シュトルヤーズ(Struers)社)に固定した。内部ホールソーにより、カリエス病巣を介する歯セクションを段階的に作製した。歯セクションを被覆包埋材料から解放し、それぞれを細菌に対する1mlの生/死染料溶液(ライブ/デッド・バックライト(Live/Dead BacLight)、モレキュラー・プローブス(Molecular Probes)社)中にインキュベートした。インキュベーション中、歯セクションを光から保護して、貯蔵した。蛍光顕微鏡(ツァイス(Zeiss)社、アキシオプラン(Axioplan)2)により、反射光下、24FITCフィルター、630および1000の拡大倍数で注目した細菌について研究した。同じ条件下の非治療サンプルにおいて細菌ベッドを観察したところ、本発明に従って治療したサンプルは、細菌が全く認められなかった。より低い程度で、カリエスにより崩壊した歯材料の場合、本発明に従うただ1種の溶液または1種のペプシン含有溶液のそれまでの1回の適用により、カリエスに先に冒された歯の細菌が認められない領域が生じ得る。
本発明に従う2成分系を以下の通りに調製した。
a)20秒間 100μlの溶液
b)濯ぐ
c)20秒間 100μlの溶液
d)濯ぐ
e)20秒間 100μlの溶液
f)濯ぐ
g)以後、必要に応じて充填療法
カリエス病巣の感染した硬い歯質を除去するための酵素溶液を、要件に従って適用した後、抽出および治療した歯を通気し、包埋塊(サイトフィックス(cytofix)、シュトルヤーズ(Struers)社)に固定した。内部ホールソーにより、カリエス病巣を介する歯セクションを段階的に作製した。歯セクションを被覆包埋材料から解放し、それぞれを細菌に対する1mlの生/死染料溶液(ライブ/デッド・バックライト(Live/Dead BacLight)、モレキュラー・プローブス(Molecular Probes)社)中にインキュベートした。インキュベーション中、歯セクションを光から保護して、貯蔵した。蛍光顕微鏡(ツァイス(Zeiss)社、アキシオプラン(Axioplan)2)により、反射光下、24FITCフィルター、630および1000の拡大倍数で注目した細菌について研究した。同じ条件下の非治療サンプルにおいて細菌ベッドを観察したところ、本発明に従って治療したサンプルは、細菌が全く認められなかった。より低い程度で、カリエスにより崩壊した歯材料の場合、上記の本発明に従う溶液のそれまでの1回の適用により、カリエスに先に冒された歯の細菌が認められない領域が生じ得る。
Claims (11)
- カリエスに感染した歯組織を歯から除去するための治療剤を製造するために使用される歯科用組成物であって、
前記組成物は4.0もしくはそれ以下のpH値を有し、
前記組成物は、
水と、
酸と、
ペプシンと、
流動性添加物と、を含み、
前記ペプシンの濃度は、500〜60,000U/mlであり、
前記組成物の粘度は、10〜1000mPasである、
歯科用組成物。 - 前記流動性添加物は、多糖である、請求項1に記載の歯科用組成物。
- 前記組成物は、ポリエーテル、もしくは両性イオン界面活性剤、またはポリエーテルおよび両性イオン界面活性剤の混合物をさらに含む、請求項1または2に記載の歯科用組成物。
- 前記組成物は、阻害剤、もしくは緩衝液、または阻害剤および緩衝液を含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載の歯科用組成物。
- 前記組成物は、2種の成分AおよびBを含む組成物として提供され、
a)成分Aは、水と、ペプシンと、ペプシンの活性が最も高いpH値より大きなpH値を提供する緩衝系と、流動性添加物とを含み、
b)成分Bは、水と、ペプシンの活性が無いpH値より小さなpH値を提供する酸と、流動性添加物と、ポリエーテル、もしくは両性イオン界面活性剤、またはポリエーテルおよび両性イオン界面活性剤の混合物と、を含む、
請求項1〜4のいずれか1項に記載の歯科用組成物。 - 前記成分Aおよび成分Bの混合物は、以下の特性:
pH値:1.5〜3.5
粘度:10〜50mPas
ペプシン活性:1,000〜10,000U/ml
緩衝能:0.5〜2.0mol/l
を有する、請求項5に記載の歯科用組成物。 - 成分Aは、20mg/ml未満のペプシンを含有する、請求項6に記載の歯科用組成物。
- 前記組成物は、0.001〜0.5mlの適用容積で提供される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の歯科用組成物。
- 前記感染した歯組織への前記組成物の暴露時間は、5秒間〜5分間である、請求項1〜8のいずれか1項に記載の歯科用組成物。
- 液体を貯蔵および分配するためのマルチチャンバデバイスであって、少なくとも1種のチャンバは成分Aを含有し、少なくとも1種のチャンバは成分Bを含有し、成分Aおよび成分Bは請求項6に記載したものである、マルチチャンバデバイス。
- カリエスを除去するための治療剤を製造するための、pH7未満の範囲でタンパク質分解活性を有する酵素の使用であって、前記酵素はペプシンまたはグリコシダーゼから選択される、酵素の使用。
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