JP2010054308A - 検出器具、分析装置および検出方法 - Google Patents

検出器具、分析装置および検出方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2010054308A
JP2010054308A JP2008218831A JP2008218831A JP2010054308A JP 2010054308 A JP2010054308 A JP 2010054308A JP 2008218831 A JP2008218831 A JP 2008218831A JP 2008218831 A JP2008218831 A JP 2008218831A JP 2010054308 A JP2010054308 A JP 2010054308A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
detection
antibody
detection instrument
flow path
temperature
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2008218831A
Other languages
English (en)
Other versions
JP4722977B2 (ja
Inventor
Ai Tsutsui
藍 筒井
Junko Mikata
準子 三方
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sharp Corp
Original Assignee
Sharp Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sharp Corp filed Critical Sharp Corp
Priority to JP2008218831A priority Critical patent/JP4722977B2/ja
Priority to EP09010883A priority patent/EP2158968A1/en
Priority to US12/547,897 priority patent/US20100055716A1/en
Publication of JP2010054308A publication Critical patent/JP2010054308A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP4722977B2 publication Critical patent/JP4722977B2/ja
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2200/00Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
    • B01L2200/10Integrating sample preparation and analysis in single entity, e.g. lab-on-a-chip concept
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2200/00Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
    • B01L2200/14Process control and prevention of errors
    • B01L2200/143Quality control, feedback systems
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
    • B01L2300/06Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0636Integrated biosensor, microarrays
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
    • B01L2300/06Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0645Electrodes
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
    • B01L2300/06Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0654Lenses; Optical fibres
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
    • B01L2300/08Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0816Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00Additional constructional details
    • B01L2300/18Means for temperature control
    • B01L2300/1805Conductive heating, heat from thermostatted solids is conducted to receptacles, e.g. heating plates, blocks
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00Moving or stopping fluids
    • B01L2400/06Valves, specific forms thereof
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01LCHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L7/00Heating or cooling apparatus; Heat insulating devices

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

【課題】同一流路内において多種類の検出対象物質を検出することができる検出器具を提供する。
【解決手段】本発明に係る検出器具1は、被検試料を通すための主流路26を備えており、主流路26内に、被検試料中の検出対象物質を検出するための検出領域27〜29が形成されており、検出領域27〜29は、それぞれ、電極部38〜40と、抗体を固定するための固定化部41〜43とを備えており、複数の上記検出領域の間がバルブ34〜37で隔てられている。
【選択図】図1

Description

本発明は、試料中の複数の異なる物質を検出するための検出器具、分析装置および検出方法に関する。
血液等の生体試料に関する様々な項目を同時に測定するための器具として、例えば、酵素反応を利用する検出器具が知られている。このような検出器具としては、検出するための複数の電極系が基板の同一面上に形成されているものがあるが、これでは、検出に用いられる酵素、または酵素反応により生じる電子受容体が、近接する他の電極系へと拡散してしまい、測定結果に影響を与えることが知られている。それを防ぐために流路を複数に分割し、各電極系を隔離する構造にする場合は、必要となる試料の量が多くなるという問題、および構造が複雑になるため大型化するという問題が生じる。
これらの問題への解決策として、1つの流路において複数の層流が形成されるために試料を分ける必要がなく、かつそれぞれの層流中において独立に測定結果を得ることができる検出素子について公開されている(特許文献1参照)。
また、親水性高分子からなる反応層が形成され、物質拡散が抑制されているバイオセンサについて公開されている(特許文献2参照)。
特開2005−207938号公報(2005年8月4日公開) 特開平5−196596号公報(1993年8月6日公開)
しかし、上記特許文献1に記載の検出素子においては、1つの流路に形成できる層流の数には限界があり、多種類の物質を検出する場合には適さない。
また、上記特許文献2に記載のバイオセンサにおいても、検出対象物質の性質および検出方法によって材質を考慮する必要があり汎用性に欠けるため、多種類の物質を検出する目的には適さない。
本発明は、上記の従来技術が有する問題に鑑みてなされたものであり、その目的は、同一流路内において多種類の検出対象物質を検出することができる検出器具を提供することにある。
上記課題を解決するために、本発明に係る検出器具は、被検試料を通すための流路を備えており、上記流路内に、被検試料中の検出対象物質を検出するための検出領域が複数形成されており、上記検出領域は、検出部と、抗体を固定するための固定化部とを備えており、複数の上記検出領域の間がバルブで隔てられていることを特徴としている。
上記の構成によれば、被検試料を通すための流路内に、バルブで隔てられた複数の検出領域が形成されているため、少量の被検試料で複数の異なる検出対象物質を、抗体を用いて同時に検出することが可能となる。また、それぞれの検出領域の間がバルブで隔てられているため、複数の検出部が基板の同一面上に形成されているにもかかわらず、検出する際に試薬、反応生成物等が他の検出部上へと移動しない。そのため、検出部同士での干渉がなく正確な測定が可能となる。
また、本発明の検出器具において、上記固定化部の各々には、それぞれ異なる抗体が固定されていることがより好ましい。
上記の構成により、それぞれの抗体が捕捉し得る、被検試料中の複数の異なる検出対象物質を同時に検出することができる。
また、本発明の検出器具において、上記流路の下流に固定されている抗体ほど、被検試料中における濃度がより低い検出対象物質を捕捉する抗体であることがより好ましい。
上記の構成によれば、被検試料を流路に導入する工程において、バルブの開閉により下流の検出領域ほど被検試料と抗体との反応時間を長くすることによって、濃度がより低い検出対象物質をも効率よく捕捉することができる。そのため、被検試料中における各検出対象物質の濃度に差がある場合でも、検出部に、例えば同種の電極等を用いることができることにより、多数の検出対象物質のための検出器具であっても、容易に製造できる。
また、本発明の検出器具において、上記抗体の量は、各々の抗体が結合する検出対象物質の被検試料中における濃度が高いものほど、多いことがより好ましい。
上記の構成によれば、被検試料中における各検出対象物質の濃度に差がある場合でも、同一の反応時間を用いることができるため、短時間での測定が可能になる。また、検出部に、例えば同種の電極を用いることができるため、多数の検出対象物質のための検出器具であっても、容易に製造できる。
また、本発明の検出器具において、上記流路の内壁が親水性であることがより好ましい。
上記の構成によれば、被検試料および他の試薬の流れを滑らかにすることができる。そのため、正確な測定がより可能になる。
本発明に係る分析装置は、上記検出器具に接続する接続手段と、上記バルブの開閉条件を入力する入力手段と、上記入力手段に入力された条件に従ってバルブを開閉する開閉手段とを備えていることを特徴としている。
上記の構成によれば、検出器具におけるバルブを自動で開閉することができ、検出器具の操作が容易となる。また、バルブの開閉条件をあらかじめ入力しておくことによって、複雑なプログラムを用いる検出方法にも対応することができる。
また、本発明に係る分析装置は、上記検出部により検出された検出値から、検出対象物質の濃度を表す値に変換する変換手段をさらに備えていることがより好ましい。
上記の構成によれば、検出器具における検出部において検出した値を、被検試料中の検出対象物質の濃度を表す値に変換して、把握することができる。
また、本発明に係る分析装置において、上記入力手段は、温度条件の入力をも受け付けるものであり、上記温度条件に従って検出器具の温度を調整する温度調整手段をさらに備えていることがより好ましい。
上記の構成によれば、検出器具の温度を調整することができるので、各検出工程において最適な温度に調整することにより、より正確かつ迅速な測定ができる。さらに、後述するように、検出時において標識付き抗体と標識認識物質との反応活性を調整することができる。また、分析装置に温度調整手段を備えることにより、検出器具には温度調整手段を備える必要がなく、検出器具をより小型化できる。
また、本発明に係る分析装置において、上記検出器具が平板状であって、上記温度調整手段は、上記検出器具の長さ方向に平行な面に接触することがより好ましい。
上記の構成によれば、検出器具への熱伝導性がよくなるため、検出器具の温度を効率的に調整することが可能になる。
また、本発明に係る分析装置において、上記温度調整手段は、上記検出器具と熱伝導性シートを介して接触することがより好ましい。
上記の構成によれば、検出器具に熱を均一に伝えることができ、検出器具の温度をさらに効率的に短時間において調整することが可能になる。また、検出時間を短くすることが可能になる。
また、本発明に係る分析装置は、上記検出器具の温度を測定するための温度感知手段をさらに備えていることがより好ましい。
上記の構成によれば、検出器具の正確な温度を把握することができる。また、把握される温度に基づいて、即時かつ緻密に温度を調整することができ、その結果精密な測定が可能になる。
本発明に係る検出方法は、被検試料中の複数の異なる検出対象物質を検出するための検出方法であって、上記検出対象物質の各々を捕捉するための複数の異なる抗体が固定された流路に、上記被検試料を導入し、上記検出対象物質の各々を捕捉する第1工程と、上記検出対象物質と複合体を形成させるための標識付き抗体を流路に導入し、上記検出対象物質と結合させる第2工程と、上記標識付き抗体に反応させるための標識認識物質を流路に導入する第3工程と、上記標識付き抗体と上記標識認識物質とを反応させる第4工程とを有する検出方法において、上記標識付き抗体と上記標識認識物質との反応活性は、上記第3工程では抑制されており、上記第4工程において活性化されることを特徴としている。
上記の構成によれば、標識認識物質を流路に導入する第3工程では標識付き抗体と標識認識物質との反応活性が抑制されており、反応生成物の生成が抑制されるので、他の検出領域への反応生成物の拡散を防ぐことができ、正確な測定を行うことが可能になる。なお、標識認識物質とは、検出対象物質を検出するための標識物質(例えば標識付き抗体等)を認識する物質である。
また、本発明に係る検出方法において、上記標識付き抗体と上記標識認識物質との反応活性が目的の活性となるように、温度条件を変化させることによって、当該反応活性を調整することがより好ましい。
上記の構成によれば、標識付き抗体と標識認識物質との反応活性が低い温度条件と、上記反応活性が最適となる温度条件とを利用することで、上記反応活性の抑制および活性化を容易に行うことができる。また、温度条件の変化による調整は、どのような標識付き抗体と標識認識物質との反応活性にも適用することができる。
本発明に係る検出器具は、以上のように、被検試料を通すための流路を備えており、上記流路内に、被検試料中の検出対象物質を検出するための検出領域が複数形成されており、上記検出領域は、検出部と、抗体を固定するための固定化部とを備えており、複数の上記検出領域の間がバルブで隔てられているので、同一流路内において多種類の物質を検出できるという効果を奏する。
<実施の形態1>
本発明の一実施形態について、図面を参照して以下に説明する。
〔検出器具の構造〕
本実施の形態における検出器具1の構成について、図1を用いて説明する。図1は、本実施の形態における検出器具1の構成を模式的に示す図である。
図1に示すように、検出器具1には、導入部21、排出部22、液留め部23〜25、主流路(流路)26、バルブ31〜37、および検出領域27〜29が形成されている。
導入部21は、検液(被検試料)を主流路26に導入するためのものである。
排出部22は、検出済みの検液を主流路26から排出するためのものである。また、排出部22には、吸収体30が設けられている。吸収体30は、排出部22に排出される検出済みの検液等を吸収するためのものである。吸収体30を設けることにより、検液の導入後における全ての操作を検出器具1内で行うことができる。吸収体30に用いられる材料としては、例えばコットン等が挙げられる。
液留め部23〜25は、検出に用いるための試薬をそれぞれ貯留しておくためのものであり、主流路26に対して、主流路26から分岐した分岐流路によってつながれている。なお、本実施の形態では、3つの液留め部を設ける場合について説明するが、本発明に係る検出器具に設けられる液留め部の数は特に限定されない。
主流路26は、本発明に係る検出器具が備える流路として機能するものである。主流路26は、導入部21と排出部22とを結ぶ1本の流路であり、導入部21に導入された検液を排出部22まで導く流路である。本実施の形態では、主流路は直線状に形成されているが、本発明に係る検出器具が備える流路の形状は、導入部から排出部までを結ぶ形状であればよく、例えば湾曲していてもよい。
バルブ31〜37は、その開閉によって流路内の検液または試薬等の流れを開始または停止させる構造のバルブであり、検出器具1内の流路中に形成される。上記のバルブのうち、バルブ31〜33は、液留め部23〜25と主流路26とを結ぶ分岐流路中に形成されている。また、バルブ34〜37は、主流路26中に設けられており、主流路26を区切っている。
検出領域27〜29は、バルブ34〜37によって区切られることにより形成される主流路26内の空間である。つまり、バルブ34〜37によって1本の流路(主流路26)を隔てることで、検出領域27〜29が形成されている。それゆえ、検出する際に試薬、反応生成物等が他の検出領域内へと移動せず、正確な測定が可能となる。ここで「1本の流路」とは、導入部21のような検液の導入口に入れた検液が分岐することなく排出部22のような検液の排出口まで到達する流路を意味する。
なお、本実施の形態における検出器具1には3つの検出領域27〜29が形成されているが、本発明に係る検出器具には、検出対象物質の数に基づいて検出領域をいくつでも形成することができる。従って、それぞれの検出領域を区切っているバルブに関しても、本発明に係る検出器具に形成される検出領域の数に基づいて適切な数のバルブが形成される。
また、検出領域27〜29内には、それぞれ電極部(検出部)38〜40が形成されている。電極部38〜40では、検出対象物質の濃度を示す電流(検出値)を検出する。電極部38〜40の構造については、後述する。
なお、本発明に係る検出器具は、検出部が各検出領域内にそれぞれ形成されるため、形成される検出領域の数に基づいて適切な数の検出部が形成される。本発明に係る検出器具が備える検出部としては、本実施の形態のような電極には限定されず、本発明に用いられる検出の方法に適する部材が選択される。例えば、本発明に用いられる検出の方法としては、特に限定されないが、電気的な方法、光学的な方法などが挙げられ、検出部としては、特に限定されないが、電気的な信号を受信する電極、光の強度を認識するセンサ、発色の強度を認識するセンサなど、選択された検出の方法に適した部材が用いられる。また、検出部により検出される検出値としては、本実施の形態にて検出値として用いられる電流に限らず、例えば、電気的な信号、光の強度、発色の強度などを用いることができる。
本実施の形態における検出器具1は、上層部2および下層部3を張り合わせて形成される。図2は、本実施の形態における上層部2の構成を模式的に示す図であり、図3は、本実施の形態における下層部3の構成を模式的に示す図であり、図3の(a)は下層部3の全体の構成を模式的に示し、図3の(b)は下層部3における電極部38の構成をより詳細に示す図である。
上層部2の構造について、図2を用いて詳細に説明する。図2に示すように、上層部2には、導入部21、排出部22、液留め部23〜25、および主流路26が形成されている。
導入部21および排出部22は、上層部2に開口して設けられている。従って、検液を導入部21から主流路26へと導入し、また排出部22から検出済みの検液を排出することができる。
また、液留め部23〜25、主流路26、およびこれらを結ぶ分岐流路は、それぞれの側壁が上層部2から下層部3の方向に突出するように設けられることによって凹部が形成されて、凹部を閉じるように下層部3に張り合わせられることにより、空間が形成されている。従って、液留め部23〜25に、検出のために用いられる試薬を貯留することができる。また、導入部21または液留め部23〜25から主流路26に導入される検液または試薬は、主流路26内を通って排出部22へと導かれる。
なお、本発明に係る検出器具が備える流路および液留め部の幅および高さは、特に限定されないが、被検試料が濡れと毛細管力とによって浸透していくことが可能な寸法であることが好ましい。高さは1μm〜5mmの範囲であることが好ましく、幅は1μm〜5mmの範囲であることが好ましい。また、本発明に係る検出器具が備える流路は、バルブによる流れの開始および停止を適切に行うために最適な幅、高さ等の条件を有する形状であることが好ましい。
また、本発明に係る検出器具が備える導入部、排出部、液留め部、流路等を、検出器具に用いるガラス等の基板に形成する方法は、例えば、基板を直接加工する方法、機械加工による方法、レーザー加工による方法、薬品またはガスによるエッチングを用いる方法、金型を用いる射出成型による方法、プレス成型による方法、鋳造による方法等が挙げられる。なかでも、エッチングを用いる方法、および金型を用いる射出成型による方法は、形状寸法の再現性が高いため好ましい。
次に下層部3の構造について、図3を用いて詳細に説明する。図3の(a)に示すように、下層部3には、バルブ31〜37、電極部38〜40、吸収体30および外部接続端子51が設けられている。
外部接続端子51は、後述する分析装置6と電気的に接続するための端子である。
バルブ31〜37および電極部38〜40は、それぞれ外部接続端子51と接続される。外部接続端子51から供給されるバルブの開閉信号によって、バルブ31〜37の開閉は制御される。つまり、バルブ31〜37が、外部接続端子51からバルブを開けることを指示する信号を受信するとバルブ31〜37は開き、バルブを閉じることを指示する信号を受信するとバルブ31〜37は閉じる。外部接続端子51は、後述する分析装置6の処理部82からバルブの開閉信号を受信する。
バルブ31〜37の構造については後述する。下層部3は上層部2に張り合わされたとき、閉じているバルブ34〜37が流路26を区切る位置に、バルブ34〜37は下層部3上に設けられている。このような位置にバルブ34〜37が設けられていることによって、上述のように検出領域27〜29が形成され、電極部38〜40はそれぞれ検出領域27〜29内に位置するように下層部3上に設けられている。
電極部38について、図3の(b)を参照して詳細に説明する。なお、電極部39および40は、電極部38と同様の構成になっている。
図3の(b)に示すように、電極部38は、作用電極91、参照電極92および対向電極93の3端子で構成されている。作用電極91、参照電極92および対向電極93は、それぞれ外部接続端子51と接続されている。検出の際、作用電極91および対向電極93には、外部接続端子51を介して後述する分析装置6の処理部82から電圧が印加される。その結果作用電極91および対向電極93の間に流れる電流を、外部接続端子51が後述の分析装置6に送信する。参照電極92は、電位の基準点を与える電極である。
なお、本発明に係る検出部に電極を用いる場合には、例えば特開2004−294231号公報に記載されるような酵素電極を用いてもよい。また電極は、測定極および対極の2端子を含む構成であってもよいし、測定極と、対極と、参照電極との3端子を含む構成であってもよい。測定極は、櫛型電極であってもよい。
本実施の形態においては、上層部2および下層部3の材料としてガラスを用いた場合について説明するが、本発明に係る検出器具において上層部、下層部等の検出器具本体の材料はこの限りではない。本発明に係る検出器具を構成する材料としては、例えば特開2003−149252号公報において提案されているように、透明または半透明の材料を用いることが好ましい。透明または半透明の材料を用いれば、本発明に係る検出器具に形成された流路内を流れる標識認識物質に励起光を照射し、検出領域を通過する標識認識物質からの蛍光やUVの検出を行うためのチップシステム等へ応用することができる。透明または半透明の材料として、例えばガラス、石英、熱硬化性樹脂、熱可塑性樹脂、フィルム等が好ましい。なかでも透明性および成型性の観点から、シリコン系樹脂、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂等がより好ましい。
また、本発明に係る検出器具において、検出器具の流路内で電気的な制御または測定を行う場合には、上層部2、下層部3またはその両方に相当する部材は、電極形成可能な材料であることが好ましい。このような材料として、生産性および再現性の観点から、ガラス、石英またはシリコン等の基板材料がより好ましい。
従って、上層部2に用いる材料としては、透明性がありかつ加工性が高いものが好ましく、例えばPDMS(ポリジメチルシロキサン)等を用いて形成することが好ましい。また下層部3に用いる材料としては、電気的制御等を行うための電極を形成し得る材料としてシリコン基板等を用いることが好ましい。
さらに、上層部2および下層部3における、検液と接する面は、検液が通り易いように親水性であることが好ましい。上層部2および下層部3に用いられる材料を親水性に加工するために施す処理としては、酸素プラズマ処理、UV処理等が挙げられる。また、界面活性剤または親水性の官能基を持つ試薬等を表面に塗布する方法によっても、親水性を高めることができる。
〔固定化部〕
本実施の形態における検出器具1が有する固定化部41〜43について、図4および図5を用いて説明する。図4および図5は、本実施の形態における検出器具1の断面図であり、特に図1の線分A−A’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図1の矢印方向にみた断面図である。図4および図5に示す検出器具1において、上側が上層部2であり、下側が下層部3を示す。また、図4はバルブ34〜37が閉じられている状態を示し、図5はバルブ34〜37が全て開かれている状態を示す。
図4に示すように、バルブ34〜37に区切られることにより形成される検出領域27〜29のそれぞれの上部である、上層部2の壁面に、固定化部41〜43が設けられている。
固定化部41〜43は、抗体を固定するための部位である。固定化部41〜43には、それぞれ異なる抗体が固定され、各抗体はそれぞれ検液中の検出対象物質を特異的に捕捉することが可能である。なお、固定化部は各検出領域にそれぞれ設けられるので、本発明に係る検出器具において形成される検出領域の数に基づいて、適切な数の固定化部が設けられる。
本明細書で用いられる用語「抗体」とは、検出対象物質と特異的に結合して捕捉できるものを意味し、例えばモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体等に加え、インプリンティングポリマー、アプタマー等の、人工抗体と呼ばれるもの等を含む。固定化方法には、物理的な吸着、光架橋剤を用いる化学結合等、一般的な固定化方法を用いることができる。
〔バルブの構造〕
本実施の形態における検出器具1が有するバルブ31〜37は、図4に示されるバルブ34〜37のように、主流路26および分岐流路を遮断して検液、試薬等の流れを停止することができる構造であり、また図5に示されるように、開かれた状態では流れを開始させることができる構造である。
本発明に係る検出器具が有するバルブは、被検試料の浸入を停止または開始させることができるものであればよい。従って、図4にバルブ34〜37として示される構造に限定されない。例えば、エレクトロウェッティングバルブを用いてもよい。また、例えばMEMS技術を用いて微細に形成されるダイヤフラム型バルブ等であってもよい。
エレクトロウェッティングバルブの一例について、図6を用いて説明する。図6は、エレクトロウェッティングバルブの一例を示す図である。図6の(a)は電圧が印加されている場合を示しており、検液の流れる方向を矢印で示している。また、図6の(b)は電圧が印加されていない場合を示している。
図6の(a)および(b)に示されるように、エレクトロウェッティングバルブは微小流路71に備えられ、参照電極72および作用電極73を有している。または、対極を含む3端子としてもよい。作用電極73は疎水性かつ絶縁性の膜により被覆されており、電圧が印加されていない場合には、液体との接触角は60〜70度と大きい。また、微小流路71の幅および高さは50μmである。そのため、電圧が印加されていない場合(図6の(b)参照)には、検液が微小流路71を左から右へと流入し、作用電極73に達すると、検液が微小流路71より受ける抵抗、および検液の表面張力によって、検液の液面は図6の(b)に示すような形状となって停止する。
一方、電圧が印加されている場合(図6の(a)参照)には、液体は、参照電極72に接すると負に帯電する。そのため液体は、作用電極73との間に疎水性かつ絶縁性の膜を介した仮想的なキャパシタを形成し、作用電極73に引き寄せられるため、作用電極73との接触角が小さくなる。このため、微小流路71による抵抗の影響が減り、液体は微小流路71を通過できる。
〔分析装置の構造〕
本実施の形態における分析装置6の構成について、図7および図8を用いて説明する。
図7は、本実施の形態に係る分析装置6の外観図を示す。図8は、図7に示される分析装置6の、線分B−B’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図7に示す矢印方向にみた断面図を示す。
図7に示すように、分析装置6は、接続口61、入力部(入力手段)62、表示部63を有している。また、図8に示すように、分析装置6の内部には、外部入出力端子(接続手段)81、処理部82、温度調整装置(温度調整手段)83、温度感知装置(温度感知手段)84、熱伝導性シート85が設けられている。
接続口61とは、本実施の形態における検出器具1を挿入する部位である。
入力部62とは、検出器具1におけるバルブの開閉条件、温度条件等の様々な検出条件を入力するための部位である。
表示部63とは、検出対象物質の濃度等の測定結果、検出器具1の温度等を表示するための部位である。
外部入出力端子81とは、本実施の形態の検出器具1における外部接続端子51と電気的に接続できる端子であり、接続口61の奥に設けられている。
温度調整装置83とは、検出器具1の温度を調整する装置であり、検出器具1の下側に接するように設けられている。
温度感知装置84とは、検出器具1の表面温度を測定する装置であり、検出器具1の近傍に設けられている。
熱伝導性シート85とは、温度調整装置83からの熱の伝導が均一かつ迅速に検出器具1に伝わるように設けられる、熱伝導性に優れたシートであり、温度調整装置83と検出器具1との間に設けられている。具体的には検出器具1の長さ方向に平行な面に接触するように設けられている。この構成のため、温度調整装置83からの熱は、検出器具1に均一かつ迅速に伝えられる。
処理部82とは、様々な情報を処理するものであり、入力条件処理部86、バルブ開閉処理部(開閉手段)87、電圧印加処理部(電圧印加手段)88、変換部(変換手段)89、温度制御部90を備えている。
入力条件処理部86は、入力部62に入力された検出条件からバルブの開閉条件を算出し、バルブ開閉処理部87に供給する。また、入力条件処理部86は、入力部62に入力された条件から電圧の印加条件を算出し電圧印加処理部88に供給する。また、入力条件処理部86は、入力部62に入力された条件から温度条件を算出し温度制御部90に供給する。
バルブ開閉処理部87は、入力条件処理部86から供給されたバルブの開閉条件に基づいてバルブの開閉信号を生成して、外部入出力端子81を介して、検出器具1の外部接続端子51に供給する。これにより検出器具1のバルブ31〜37は開閉される。
電圧印加処理部88は、入力条件処理部86から供給された電圧の印加条件に基づいて電圧の印加信号を生成して、外部入出力端子81を介して、検出器具1の外部接続端子51に供給する。これにより検出器具1の電極部38〜40に電圧が供給される。
変換部89は、検出器具1の外部接続端子51から受信した電極部38〜40の電流を、検出対象物質の濃度を表す値に変換する。変換した値は、表示部63に出力して表示させる。
なお、本発明に係る検出器具が備える変換手段は、検出部により検出された検出値から、検出対象物質の濃度を表す値に変換する手段であり、当該検出値としては、例えば、電気的な信号、光の強度、発色の強度などを用いることができる。
温度制御部90は、入力条件処理部86に入力される温度条件に基づいて、温度調整装置83を介して検出器具1の温度の調整を行う。さらに処理部82は、温度感知装置84が測定した検出器具1の表面温度と、入力部62に入力される温度条件とに基づいて、温度調整装置83を介して検出器具1の温度を修正する。
なお、本発明に係る分析装置が有する処理部は、入力手段において入力される情報、および検出結果などの出力情報を処理することのできる、CPUまたはI/O論理回路等の情報処理システムであることが好ましい。
処理部82は、外部入出力端子81、温度調整装置83、温度感知装置84、入力部62、および表示部63に電気的に接続されている。また、接続口61に本実施の形態に係る検出器具1が挿入されると、分析装置6の外部入出力端子81と検出器具1の外部接続端子51とが接続され、その結果、処理部82は、検出器具1内のバルブ31〜37および電極部38〜40に電気的に接続される。
本実施の形態における検出器具1および分析装置6を用いる検出工程について、簡単に説明する。検出器具1の導入部21および液留め部23〜25に、あらかじめ検液および試薬をそれぞれ導入し、バルブ31〜37を閉じておく。検出器具1を分析装置6に接続させ、バルブの開閉条件、温度条件、電圧印加条件等の、検出工程に必要な情報を入力部62に入力する。次に入力部62にある測定開始ボタンを押して測定を開始させると、入力された情報に基づいて、バルブ31〜37、電極部38〜40および温度調整装置83が処理部82により操作され、検出工程が行われる。その結果、検出対象物質の濃度を表す値が表示部63に表示される。検出工程に用いられる検出方法については後述する。
〔検出方法〕
次に、本実施の形態における検出器具1を用いた検出方法について説明する。
(検液導入ステップ)
検出器具1における導入部21から検液を導入し、主流路26内に浸入させる。なお、バルブ34〜37は開いておく。主流路26内の各検出領域27〜29における固定化部41〜43に固定される抗体が、検液中の検出対象物質とそれぞれ特異的に結合し、複合体を形成する。各固定化部41〜43に固定される抗体はそれぞれ異なっており、各抗体はそれぞれ対応する検出対象物質を捕捉するため、それぞれ異なった複合体を形成する。
(第1洗浄ステップ)
その後、緩衝液(洗浄液)を主流路26内に導入し、排出部22から排出することで、未反応の検出対象物質を検出領域27〜29および主流路26から洗い流す。
上記の検液導入ステップおよび第1洗浄ステップは、本発明に係る検出方法における第1工程に相当する。
(標識付き抗体導入ステップ)
次に、標識付き抗体を含む緩衝液を主流路26内に導入し、抗体−検出対象物質の複合体に結合させ、抗体−検出対象物質−標識付き抗体の複合体を生成させる。本実施の形態では、基質(標識認識物質)を電極活性物質に変換する活性を持つ酵素を標識として用いた場合について説明する。標識として用いる酵素、およびその基質には、公知のものを用いることができる。
(第2洗浄ステップ)
その後、緩衝液(洗浄液)を主流路26内に導入し、排出部22から排出することで、未反応の標識付き抗体を検出領域27〜29および主流路26から洗い流す。
上記の標識付き抗体導入ステップおよび第2洗浄ステップは、本発明に係る検出方法の第2工程に相当する。
(基質導入ステップ)
次に、標識として用いた酵素と反応する基質を含む緩衝液(キャリア液)を主流路26内に導入する。本ステップは、本発明に係る検出方法の第3工程に相当する。
(検出ステップ)
電極部38〜40における作用電極91および対向電極93に所定の電圧を印加し、電極表面において酸化還元反応を起こさせる。その結果として生じる電流を測定することにより、検出対象物質の量を測定できる。本ステップは、本発明に係る検出方法の第4工程に相当する。
本実施の形態では、標識として、基質を電極活性物質に変換する酵素を用いた場合を説明したが、これに限定されるものではない。
本発明に係る検出方法においては、固定された抗体と検出対象物質との反応、標識付き抗体と固定された抗体−検出対象物質の複合体との反応、および標識と標識認識物質との反応を行う際には、被検試料の流れを所定の時間止めてもよい。上記所定の時間は、好ましくは数マイクロ秒から数十分である。反応時に被検試料の流れを止めることにより、反応の再現性がよくなる。
本発明に係る検出方法に用いられる洗浄液およびキャリア液としては、検出対象物質、抗体、標識付き抗体、標識認識物質等を失活させないもの等、検出工程に影響を与えないものであることが好ましく、例えば緩衝液を用いることができる。
〔制御方法〕
次に、本実施の形態に係る検出方法を実施する際の、検出器具1および分析装置6の制御方法について、図9および図10を用いて説明する。図9および図10は検出器具1および分析装置6の制御方法のフローを示す図であり、図10は図9をより模式的に示している。
本制御方法における各ステップについては、あらかじめ入力部62に入力され、処理部82により行われる。また、検出器具1において、液留め部23には洗浄液を、液留め部24には標識付き抗体を含む緩衝液を、液留め部25には基質を含む緩衝液をそれぞれ導入しておく。標識としては、基質を電極活性物質に変換する酵素を用いる。また、本実施の形態において、標識および基質の反応における最適な温度は37℃である。
まず、検液導入を行う。図9のステップS1およびS2は、図10に示す検液導入工程(ステップS21)に相当する。
ステップS1においてバルブ34〜37を開く。
ステップS2において、検液を導入部21から主流路26に導入する。ここで、検出領域27〜29が検液で満たされ、固定されている抗体と検液中の検出対象物質とが特異的に結合し、抗体−検出対象物質の複合体が形成される。
次に、洗浄液の導入を行う。図9のステップS3〜S5は、図10に示す洗浄液の導入工程(ステップS22)に相当する。
ステップS3においてバルブ31を開く。
ステップS4において、液留め部23に貯留されている洗浄液を主流路26に導入する。ここで、未反応の検出対象物質は、検出領域27〜29および主流路26から洗い流される。所定の容量の洗浄液を導入した後、次のステップに移る。
ステップS5においてバルブ31を閉じる。
次に、標識付き抗体の導入を行う。図9のステップS6〜S8は、図10に示す標識付き抗体の導入工程(ステップS23)に相当する。
ステップS6においてバルブ32を開く。
ステップS7において、液留め部24に貯留されている標識付き抗体を含む緩衝液を主流路26に導入する。ここで、標識付き抗体は抗体−検出対象物質の複合体と特異的に結合し、その結果抗体−検出対象物質−標識付き抗体の複合体が形成される。所定の容量の標識付き抗体を導入した後、次のステップに移る。
ステップS8においてバルブ32を閉じる。
次に、洗浄液の導入を行う。図9のステップS9〜S11は、図10に示す洗浄液の導入工程(ステップS24)に相当する。
ステップS9においてバルブ31を開く。
ステップS10において、液留め部23に貯留されている洗浄液を主流路26に導入する。ここで、未反応の標識付き抗体は、検出領域27〜29および主流路26から洗い流される。所定の容量の洗浄液が導入された後、次のステップに移る。
ステップ11においてバルブ31を閉じる。
次に、基質の導入を行う。図9のステップS12〜S16は、図10に示す基質の導入工程(ステップS25)に相当する。
ステップS12において、温度調整装置83を用いて検出器具1を冷却する。これは、標識および基質を反応させないためである。温度は低いほどよいが、基質を凍結させないために0℃とする。
ステップS13においてバルブ33を開く。
ステップS14において、液留め部25に貯留されている基質を含む緩衝液を主流路26に導入する。ここでは、検出器具が0℃であるため、標識と基質との反応はほとんど起こらない。主流路26に基質が満たされた後、次のステップに移る。なお、このように、標識付き抗体と標識認識物質との反応活性が目的の活性となるように、温度条件を変化させることによって、当該反応活性を調整することが好ましい。例えば反応活性を向上させることを目的とする場合、その反応に最適な温度となるように温度を調整すればよいし、反応活性を低下させることを目的とする場合、反応に最適な温度との差が大きくなるように温度を調整すればよい。当業者であればこのような最適な温度を容易に見出すことができる。
ステップS15においてバルブ37を閉じる。
ステップS16においてバルブ33を閉じる。
最後に、検出工程を行う。図9のステップS17〜S19は、図10に示す検出工程(ステップS26)に相当する。
ステップS17においてバルブ34〜36を閉じる。
ステップS18において検出器具1を標識および基質の反応における最適な温度である37℃まで加熱する。ここで、標識および基質の酵素基質反応が起こり、基質は電極活性物質に変換される。バルブ34〜36が閉じられているため、電極活性物質は隣接する検出領域へ拡散しない。
ステップS19において、電極部38〜40の作用電極91および対向電極93に電圧を印加し、電流値、電圧の変化等を測定することにより、検出対象物質を定量する。
本実施の形態における制御方法では、標識および基質の反応における最適な温度は37℃であり、冷却する温度を0℃、加熱する温度を37℃としたが、この温度に限定されない。用いられる標識、基質または電極活性物質における最適な温度に対応した温度設定を行うことが好ましい。
なお、以上の制御方法により本発明に係る検出方法が好適に実施される。本発明に係る検出方法とは被検試料中の複数の異なる検出対象物質を検出するための検出方法であって、上記検出対象物質の各々を捕捉するための複数の異なる抗体が固定された流路に、上記被検試料を導入し、上記検出対象物質の各々を捕捉する第1工程と、上記検出対象物質と複合体を形成させるための標識付き抗体を流路に導入し、上記検出対象物質と結合させる第2工程と、上記標識付き抗体に反応させるための検出対象物質を流路に導入する第3工程と、上記標識付き抗体と上記検出対象物質とを反応させる第4工程とを有する検出方法において、上記標識付き抗体と上記検出対象物質との反応活性は、上記第3工程では抑制されており、上記第4工程において活性化される方法である。
<実施の形態2>
本発明の実施の他の形態について以下に説明する。なお、説明の便宜上、実施の形態1にかかる構成要素と同様の機能を有する構成要素には同一の番号を付し、その説明を省略する。本実施の形態では、主に、実施の形態1との相違点について説明するものとする。
〔検出器具の構造〕
本実施の形態に係る検出器具1においては、主流路26の下流に固定されている抗体ほど、検液(被検試料)中における濃度がより低い検出対象物質を捕捉する抗体である。従って、固定化部41は、図4に示すように主流路26の最も上流に位置するので、検液中における濃度が最も高い検出対象物質を捕捉する抗体が固定されている。一方、固定化部43は、主流路26の最も下流に位置するので、検液中における濃度が最も低い検出対象物質を捕捉する抗体が固定されている。
〔制御方法〕
本実施の形態における検出器具1の制御方法について、図9および図11を用いて説明する。図11は、本実施の形態に係る検出器具1および分析装置6の制御方法のフローの一部を示す図である。図11に示されるステップS101〜S109は、図9に示されるステップS2およびS3の間に挿入される。
まず図9に示されるステップS1およびS2において検出器具1に検液(被検試料)を導入した後、直ちに次のステップに移る。
次に、図11に示されるステップS101においてバルブ37を閉じる。このとき、検出領域27〜29は、検液が満たされている状態である。
ステップS102において、3分間そのまま静置する。このとき、固定されている抗体と検液中の検出対象物質とが特異的に結合し、抗体−検出対象物質の複合体が形成される。3分が経過した後、次のステップに移る。
ステップS103においてバルブ37を開ける。検液が所定の量流れた後、直ちに次のステップに移る。
ステップS104においてバルブ37を閉じる。検液は、検出領域28〜29のみに満たされている。
ステップS105において、3分間そのまま静置する。3分が経過した後、次のステップに移る。
ステップS106においてバルブ37を開ける。検液が所定の量流れた後、直ちに次のステップに移る。
ステップS107においてバルブ37を閉じる。検液は、検出領域29のみに満たされている。
ステップS108において、3分間そのまま静置する。3分が経過した後、次のステップに移る。
ステップS109においてバルブ37を開ける。その後、直ちにステップS3に移り、ステップS3〜S19を行い、検出対象物質を定量する。
本実施の形態においては、静置する時間を3分としたが、本発明に係る制御方法においては、任意の時間を設定することができる。
本実施の形態における制御方法によれば、検液と抗体との反応時間は、主流路26の下流に位置する検出領域ほど長くなる。一方、本実施の形態における検出器具1は、上述するように、主流路26の下流に位置する検出領域ほど、検液中における濃度がより低い検出対象物質を捕捉する抗体が固定されている。従って、本実施の形態によれば、検液中における濃度がより低い検出対象物質を捕捉する抗体を固定されている検出領域ほど、検液との反応時間が長くなるため、各検出領域間における抗体−検出対象物質の複合体の量を同程度とすることができる。
同種の電極において検出できる物質の濃度範囲は限られているため、検液中における濃度に差がある複数の物質の量を測定する場合、それぞれの電極部において、検出する物質の濃度に対応した電極を用いる必要がある。しかし、本実施の形態に係る制御方法を用いることによって、各電極部に同種の電極を用いることができる。
<実施の形態3>
本発明の実施の他の形態について以下に説明する。なお、説明の便宜上、実施の形態1にかかる構成要素と同様の機能を有する構成要素には同一の番号を付し、その説明を省略する。本実施の形態では、主に、実施の形態1との相違点について説明するものとする。
〔検出器具の構造〕
本実施の形態に係る検出器具1の構造について、図12を用いて説明する。図12は、本実施の形態に係る検出器具1の断面図であり、特に図1の線分A−A’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図1の矢印方向にみた断面図である。
図12に示すように、本実施の形態に係る検出器具1においては、固定化部41〜43に固定される抗体の量はそれぞれ異なっており、各々の抗体が結合する検出対象物質の検液中における濃度が高いものほど多くなっている。つまり、固定化部41に固定される抗体は、その抗体が捕捉する検出対象物質の検液中における濃度が他の検出対象物質と比べて低いため、他の固定化部42〜43に固定される抗体に比べて多い。一方、固定化部43に固定される抗体は、その抗体が捕捉する検出対象物質の検液中における濃度が他の検出対象物質と比べて高いため、他の固定化部41〜42に固定される抗体に比べて少ない。
本実施の形態によれば、検液中の濃度の差が大きい複数の検出対象物質を検出する場合にも、それぞれの検出対象物質の濃度に対応した量の抗体が固定されているため、各検出領域において抗体と反応する検出対象物質の量が同程度になるため、各電極部に同種の電極を用いることができる。
本発明は、上述した各実施の形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施の形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施の形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
本発明に係る検出器具、分析装置および検出方法は、血液などの試料中に含まれる複数の物質を同時にかつ正確に検出することができるので、臨床検査などの用途に広く好適に使用できる。
本発明の一実施形態に係る検出器具1の構成を模式的に示す図である。 本発明の一実施形態に係る上層部2の構成を模式的に示す図である。 本発明の一実施形態に係る下層部3の構成を模式的に示す図である。 図1の線分A−A’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図1の矢印方向にみた断面図である。 図1の線分A−A’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図1の矢印方向にみた断面図である。 エレクトロウェッティングバルブの一例を示す図である。 本発明の一実施形態に係る分析装置6の外観図である。 図7に示される分析装置6の、線分B−B’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図7に示す矢印方向からみた断面図である。 本発明の一実施形態に係る検出器具1および分析装置6の制御方法のフローを示す図である。 本発明の一実施形態に係る検出器具1および分析装置6の制御方法のフローを示す図である。 本発明の一実施形態に係る検出器具1および分析装置6の制御方法のフローの一部を示す図である。 図1の線分A−A’を通り、検出器具1の面方向に垂直な面における断面図であって、図1の矢印方向にみた断面図である。
符号の説明
1 検出器具
6 分析装置
26 主流路(流路)
27〜29 検出領域
31〜37 バルブ
38〜40 電極部(検出部)
41〜43 固定化部
51 外部接続端子
62 入力部(入力手段)
81 外部入出力端子(接続手段)
82 処理部
83 温度調整装置(温度調整手段)
84 温度感知装置(温度感知手段)
85 熱伝導性シート
87 バルブ開閉処理部(開閉手段)
88 電圧印加処理部(電圧印加手段)
89 変換部(変換手段)

Claims (13)

  1. 被検試料を通すための流路を備えており、
    上記流路内に、被検試料中の検出対象物質を検出するための検出領域が複数形成されており、
    上記検出領域は、検出部と、抗体を固定するための固定化部とを備えており、
    複数の上記検出領域の間がバルブで隔てられていることを特徴とする検出器具。
  2. 上記固定化部の各々には、それぞれ異なる抗体が固定されていることを特徴とする請求項1に記載の検出器具。
  3. 上記流路の下流に固定されている抗体ほど、被検試料中における濃度がより低い検出対象物質を捕捉する抗体であることを特徴とする請求項2に記載の検出器具。
  4. 上記抗体の量は、各々の抗体が結合する検出対象物質の被検試料中における濃度が高いものほど、多いことを特徴とする請求項2または3に記載の検出器具。
  5. 上記流路の内壁が親水性であることを特徴とする請求項1から4のいずれか1項に記載の検出器具。
  6. 上記請求項1から5のいずれか1項に記載の検出器具に接続する接続手段と、
    上記バルブの開閉条件を入力する入力手段と、
    上記入力手段に入力された条件に従ってバルブを開閉する開閉手段とを備えていることを特徴とする分析装置。
  7. 上記検出部により検出された検出値から、検出対象物質の濃度を表す値に変換する変換手段をさらに備えていることを特徴とする請求項6に記載の分析装置。
  8. 上記入力手段は、温度条件の入力をも受け付けるものであり、
    上記温度条件に従って検出器具の温度を調整する温度調整手段をさらに備えていることを特徴とする請求項6または7に記載の分析装置。
  9. 上記検出器具が平板状であって、
    上記温度調整手段は、上記検出器具の長さ方向に平行な面に接触することを特徴とする請求項8に記載の分析装置。
  10. 上記温度調整手段は、上記検出器具と熱伝導性シートを介して接触することを特徴とする請求項8または9に記載の分析装置。
  11. 上記検出器具の温度を測定するための温度感知手段をさらに備えていることを特徴とする請求項8から10のいずれか1項に記載の分析装置。
  12. 被検試料中の複数の異なる検出対象物質を検出するための検出方法であって、
    上記検出対象物質の各々を捕捉するための複数の異なる抗体が固定された流路に、上記被検試料を導入し、上記検出対象物質の各々を捕捉する第1工程と、
    上記検出対象物質と複合体を形成させるための標識付き抗体を流路に導入し、上記検出対象物質と結合させる第2工程と、
    上記標識付き抗体に反応させるための標識認識物質を流路に導入する第3工程と、
    上記標識付き抗体と上記標識認識物質とを反応させる第4工程とを有する検出方法において、
    上記標識付き抗体と上記標識認識物質との反応活性は、上記第3工程では抑制されており、上記第4工程において活性化されることを特徴とする検出方法。
  13. 上記標識付き抗体と上記標識認識物質との反応活性が目的の活性となるように、温度条件を変化させることによって、当該反応活性を調整することを特徴とする請求項12に記載の検出方法。
JP2008218831A 2008-08-27 2008-08-27 検出器具、分析装置、検出方法および検出器具の制御方法 Expired - Fee Related JP4722977B2 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008218831A JP4722977B2 (ja) 2008-08-27 2008-08-27 検出器具、分析装置、検出方法および検出器具の制御方法
EP09010883A EP2158968A1 (en) 2008-08-27 2009-08-25 Detection instrument, analysis device, and detection method
US12/547,897 US20100055716A1 (en) 2008-08-27 2009-08-26 Detection instrument, analysis device, and detection method

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008218831A JP4722977B2 (ja) 2008-08-27 2008-08-27 検出器具、分析装置、検出方法および検出器具の制御方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2010054308A true JP2010054308A (ja) 2010-03-11
JP4722977B2 JP4722977B2 (ja) 2011-07-13

Family

ID=41354095

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2008218831A Expired - Fee Related JP4722977B2 (ja) 2008-08-27 2008-08-27 検出器具、分析装置、検出方法および検出器具の制御方法

Country Status (3)

Country Link
US (1) US20100055716A1 (ja)
EP (1) EP2158968A1 (ja)
JP (1) JP4722977B2 (ja)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013053897A (ja) * 2011-09-02 2013-03-21 Seiko Epson Corp 液体吸収部材及び生体反応検出システム
JP2013148582A (ja) * 2012-01-20 2013-08-01 Ortho-Clinical Diagnostics Inc 制御可能なサンプル量を有するアッセイ装置
WO2015099123A1 (ja) * 2013-12-26 2015-07-02 京セラ株式会社 センサ
WO2019131606A1 (ja) * 2017-12-25 2019-07-04 大日本印刷株式会社 検査デバイス

Citations (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0588786B2 (ja) * 1986-11-07 1993-12-24 Kogyo Gijutsuin
JPH1183856A (ja) * 1997-07-25 1999-03-26 Bayer Corp 臨床的に重要な分析対象物比を得るための装置及び方法
JP2002514764A (ja) * 1998-05-12 2002-05-21 ヴィロフェム ディアグノスチカ ゲーエムベーハー 血清中の抗体を検出するための指示片
JP2002282682A (ja) * 2001-03-26 2002-10-02 National Institute Of Advanced Industrial & Technology 微小化学反応装置
JP2003227824A (ja) * 2002-02-01 2003-08-15 Fuji Photo Film Co Ltd リセプター・リガンド会合反応方法およびそれに用いるリアクタ
JP2004081019A (ja) * 2002-08-23 2004-03-18 Jsr Corp 細胞反応検査用装置および細胞反応検査方法
US20040115838A1 (en) * 2000-11-16 2004-06-17 Quake Stephen R. Apparatus and methods for conducting assays and high throughput screening
JP2005531001A (ja) * 2002-06-24 2005-10-13 フルイディグム コーポレイション 再循環流体ネットワークおよびその使用法
JP2006006274A (ja) * 2004-06-29 2006-01-12 Hitachi Ltd 遺伝子検査方法
JP2006197906A (ja) * 2005-01-24 2006-08-03 Shimadzu Corp 反応容器、遺伝子多型検出方法及び装置、並びに診断方法及び装置
JP2006234791A (ja) * 2005-01-26 2006-09-07 Seiko Instruments Inc 反応器、マイクロリアクタチップ、及びマイクロリアクタシステム、並びに反応器の製造方法
JP2006234590A (ja) * 2005-02-25 2006-09-07 Shimadzu Corp 反応容器
JP2006308332A (ja) * 2005-04-26 2006-11-09 Moritex Corp 固定反応物質と液体反応物質との反応用フローセル及び反応装置並びに反応装置の運転方法
JP2007139658A (ja) * 2005-11-21 2007-06-07 Sharp Corp アレルゲン検出方法及びアレルゲン検出装置
JP2007155398A (ja) * 2005-12-01 2007-06-21 Canon Inc 濃縮素子、及び、それを用いた化学分析装置
JP2007255717A (ja) * 2007-06-25 2007-10-04 Toshiba Corp 化学分析装置
JP2008503722A (ja) * 2004-06-17 2008-02-07 マイクロニクス, インコーポレイテッド 流体操作および分析のためのマイクロ流体デバイス
JP2008045897A (ja) * 2006-08-11 2008-02-28 Yokogawa Electric Corp 化学処理用カートリッジおよびその使用方法
WO2008047875A1 (fr) * 2006-10-19 2008-04-24 Sekisui Chemical Co., Ltd. Appareil de mesure de microanalyse et procédé de mesure de microanalyse utilisant cet appareil
JP2008096341A (ja) * 2006-10-13 2008-04-24 Kawamura Inst Of Chem Res ポンプ機構を有するマイクロ流体デバイス、その製造方法、及び液体移送方法
JP2008539419A (ja) * 2005-04-30 2008-11-13 シェーン ユウ、ジャエ バイオディスクおよびバイオドライバ装置、これを用いた分析方法

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5264103A (en) * 1991-10-18 1993-11-23 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Biosensor and a method for measuring a concentration of a substrate in a sample
JP2658769B2 (ja) 1991-10-21 1997-09-30 松下電器産業株式会社 バイオセンサ
US6074827A (en) * 1996-07-30 2000-06-13 Aclara Biosciences, Inc. Microfluidic method for nucleic acid purification and processing
WO2001066245A2 (en) * 2000-03-07 2001-09-13 Symyx Technologies, Inc. Parallel flow process optimization reactor
US20080261220A1 (en) * 2000-11-30 2008-10-23 Third Wave Technologies, Inc. Nucleic Acid Detection Assays
US6729352B2 (en) * 2001-06-07 2004-05-04 Nanostream, Inc. Microfluidic synthesis devices and methods
JP2003149252A (ja) 2001-11-16 2003-05-21 Starlite Co Ltd 化学マイクロデバイス
JP3991034B2 (ja) * 2004-01-23 2007-10-17 キヤノン株式会社 検出方法
US20080153169A1 (en) * 2004-07-14 2008-06-26 Kazuya Hirata Microchannel Chip Reaction Control System, Micro Total Reaction System Including the Control System, and Micro Total Analysis System
EP1828746B1 (en) * 2004-10-18 2016-12-28 Life Technologies Corporation Fluid processing device including composite material flow modulator
EP1902143A1 (en) * 2005-03-29 2008-03-26 Applera Corporation Nanowire-based system for analysis of nucleic acids
US20070106275A1 (en) * 2005-11-09 2007-05-10 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Reaction device controlled by RF control signal
EP2458382B1 (en) * 2006-11-22 2017-12-20 CLONDIAG GmbH Assay device with mutiple test zones and method using it
US8058630B2 (en) * 2009-01-16 2011-11-15 Fluidigm Corporation Microfluidic devices and methods

Patent Citations (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0588786B2 (ja) * 1986-11-07 1993-12-24 Kogyo Gijutsuin
JPH1183856A (ja) * 1997-07-25 1999-03-26 Bayer Corp 臨床的に重要な分析対象物比を得るための装置及び方法
JP2002514764A (ja) * 1998-05-12 2002-05-21 ヴィロフェム ディアグノスチカ ゲーエムベーハー 血清中の抗体を検出するための指示片
US20040115838A1 (en) * 2000-11-16 2004-06-17 Quake Stephen R. Apparatus and methods for conducting assays and high throughput screening
JP2002282682A (ja) * 2001-03-26 2002-10-02 National Institute Of Advanced Industrial & Technology 微小化学反応装置
JP2003227824A (ja) * 2002-02-01 2003-08-15 Fuji Photo Film Co Ltd リセプター・リガンド会合反応方法およびそれに用いるリアクタ
JP2005531001A (ja) * 2002-06-24 2005-10-13 フルイディグム コーポレイション 再循環流体ネットワークおよびその使用法
JP2004081019A (ja) * 2002-08-23 2004-03-18 Jsr Corp 細胞反応検査用装置および細胞反応検査方法
JP2008503722A (ja) * 2004-06-17 2008-02-07 マイクロニクス, インコーポレイテッド 流体操作および分析のためのマイクロ流体デバイス
JP2006006274A (ja) * 2004-06-29 2006-01-12 Hitachi Ltd 遺伝子検査方法
JP2006197906A (ja) * 2005-01-24 2006-08-03 Shimadzu Corp 反応容器、遺伝子多型検出方法及び装置、並びに診断方法及び装置
JP2006234791A (ja) * 2005-01-26 2006-09-07 Seiko Instruments Inc 反応器、マイクロリアクタチップ、及びマイクロリアクタシステム、並びに反応器の製造方法
JP2006234590A (ja) * 2005-02-25 2006-09-07 Shimadzu Corp 反応容器
JP2006308332A (ja) * 2005-04-26 2006-11-09 Moritex Corp 固定反応物質と液体反応物質との反応用フローセル及び反応装置並びに反応装置の運転方法
JP2008539419A (ja) * 2005-04-30 2008-11-13 シェーン ユウ、ジャエ バイオディスクおよびバイオドライバ装置、これを用いた分析方法
JP2007139658A (ja) * 2005-11-21 2007-06-07 Sharp Corp アレルゲン検出方法及びアレルゲン検出装置
JP2007155398A (ja) * 2005-12-01 2007-06-21 Canon Inc 濃縮素子、及び、それを用いた化学分析装置
JP2008045897A (ja) * 2006-08-11 2008-02-28 Yokogawa Electric Corp 化学処理用カートリッジおよびその使用方法
JP2008096341A (ja) * 2006-10-13 2008-04-24 Kawamura Inst Of Chem Res ポンプ機構を有するマイクロ流体デバイス、その製造方法、及び液体移送方法
WO2008047875A1 (fr) * 2006-10-19 2008-04-24 Sekisui Chemical Co., Ltd. Appareil de mesure de microanalyse et procédé de mesure de microanalyse utilisant cet appareil
JP2007255717A (ja) * 2007-06-25 2007-10-04 Toshiba Corp 化学分析装置

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013053897A (ja) * 2011-09-02 2013-03-21 Seiko Epson Corp 液体吸収部材及び生体反応検出システム
JP2013148582A (ja) * 2012-01-20 2013-08-01 Ortho-Clinical Diagnostics Inc 制御可能なサンプル量を有するアッセイ装置
US10712340B2 (en) 2012-01-20 2020-07-14 Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. Assay device having controllable sample size
US11921107B2 (en) 2012-01-20 2024-03-05 Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. Assay device having controllable sample size
WO2015099123A1 (ja) * 2013-12-26 2015-07-02 京セラ株式会社 センサ
JPWO2015099123A1 (ja) * 2013-12-26 2017-03-23 京セラ株式会社 センサ
US10976326B2 (en) 2013-12-26 2021-04-13 Kyocera Corporation Sensor
WO2019131606A1 (ja) * 2017-12-25 2019-07-04 大日本印刷株式会社 検査デバイス

Also Published As

Publication number Publication date
US20100055716A1 (en) 2010-03-04
EP2158968A1 (en) 2010-03-03
JP4722977B2 (ja) 2011-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2378144C (en) Detection article having fluid control film
AU746051B2 (en) Analyzer
KR100968524B1 (ko) 생체 시료 분석용 마이크로-나노 플루이딕 바이오칩
EP2282190B1 (en) Flow cell and liquid delivery method
WO2012081361A1 (ja) 分析装置および分析方法
AU2004204362A1 (en) Multi-layered electrochemical microfluidic sensor comprising reagent on porous layer
KR20090011557A (ko) 미세유로형 센서 복합 구조물
JP4722977B2 (ja) 検出器具、分析装置、検出方法および検出器具の制御方法
EP3433605A1 (en) Surface enhanced raman spectroscopy (sers) microfluidics biosensor for detecting single and/or multiple analytes
Ibarlucea et al. Self-validating lab-on-a-chip for monitoring enzyme-catalyzed biological reactions
IE20170055A1 (en) Surface plasmon resonance sensor device using microfluidic channel and system comprising the same
IE87076B1 (en) Surface plasmon resonance sensor device using microfluidic channel and system comprising the same
US9863941B2 (en) Microchip and method for detecting molecules and molecular interactions
WO2012090960A1 (ja) 検体検出用チップ、それを用いたセンサ、及び検体検出方法
AU2010322751B2 (en) Nanofluidic biosensor and its use for rapid measurement of biomolecular interactions in solution and methods
JP2000002675A (ja) キャピラリー光熱変換分析装置
US20160025667A1 (en) Apparatus for the detection of liquids or substances from liquids
JP5086493B2 (ja) 生体物質を測定する装置及びその製造方法
CN111157728A (zh) 光波导微流体检测系统
US8753582B2 (en) Apparatus and method comprising a sensor array and a porous plunger and use thereof
TWI354547B (en) Continuous testing device and continuous testing s
KR102470156B1 (ko) 유체의 채널 유입이 용이한 바이오 센서
US20230020979A1 (en) Device for detecting presence or absence of a chemical or biological target within a sample comprising an electrode functionalised with an antibody and corresponding detection method
KR20180080396A (ko) 바이오 센서
US20220074889A1 (en) Device and Method for Biomolecule Measurement

Legal Events

Date Code Title Description
A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20100518

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100525

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20100705

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100831

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20101020

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20101214

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20110201

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20110315

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20110406

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140415

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees