JP2009527468A - タイトジャンクション・エフェクター用製剤 - Google Patents

Abstract

【課題】１以上のタイトジャンクション・アゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを含む腸溶組成物が提供される。
【解決手段】本発明の組成物は、不活性コア上に配置することのできるタイトジャンクション・アゴニスト層および／またはタイトジャンクション・アンタゴニスト層の上に配置される遅延放出コーティングを含むことができる。遅延放出コーティングは、胃液中で実質的に安定であり、腸液中で実質的に不安定であることができ、したがって、十二指腸または小腸の空腸内での、組成物からのタイトジャンクション・アゴニストおよび／またはタイトジャンクション・アンタゴニストの実質的な放出を提供する。
【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本願は、その全体の内容が、参照により本明細書に具体的に組み込まれる、２００６年２月９日に出願された、米国仮特許出願第６０／７７１４５４号の優先権を主張する。

本発明は、ある特定のタイトジャンクション・アンタゴニスト(tight junction antagonist)またはタイトジャンクション・アゴニスト(tight junction agonist)および腸溶コーティングを含む、医薬剤形を含む。

腸のタイトジャンクション機能障害は、食物アレルギー、消化管の感染症、自己免疫疾患、および炎症性腸疾患を含む、様々な臨床症状において起こる。無傷のタイトジャンクションを有する健康で成熟した腸粘膜は、巨大分子の通過に対する主なバリアーとして作用する。健康な状態の間には、少量の免疫学的に活性なタンパク質が、腸の宿主バリアーを通過する。これらのタンパク質は、少なくとも２つの経路を通じて粘膜を越えて吸収される。吸収されたタンパク質の大部分（最大９０％）は、経細胞経路を介して腸バリアーを通過し、次いでリソソーム分解され、これは、タンパク質をより小さな非免疫原性のペプチドに変換する。他のタンパク質は、傍細胞経路を通じて無傷のタンパク質として輸送され、この経路は、タンパク質（抗原）の耐容性を導く、細胞間タイトジャンクションの繊細だが洗練された調節を伴う。未熟である、または放射線、化学療法、および／もしくは毒素への曝露後のように、タイトジャンクション系の完全性が損なわれる場合、環境抗原への有害応答（自己免疫疾患および食物アレルギーを含めて）が起こり得る。

上皮が受ける多くの多様な生理的および病理学的攻撃に対処するため、タイトジャンクションまたは閉鎖帯（ＺＯ）は、複雑な調節系の存在が要求される、迅速、生理的、可逆的、一過性、エネルギー依存性、かつ協調された応答ができる必要がある。

コレラ菌(Vibrio cholerae)によって産生される閉鎖帯毒素(Zonula occludens toxin)は、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、ＵＳＡ、８：５２４２〜５２４６（１９９１）において、Ｆａｓａｎｏらによって特徴づけられ、その配列が決定された（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ａ４３８６４）。コレラ菌ファージＣＸＴΦのＺＯＴタンパク質は、タイトジャンクション調節の生理的機構を利用する。ＺＯＴは、コレラ菌ファージＣＸＴΦのための形態形成ファージ・ペプチドとして、および腸のタイトジャンクションを調節するエンテロトキシンとしての、タンパク質の２つの機能を可能にする複数のドメインを有する。ウサギの回腸粘膜で試験した場合、ゾヌリン・オックルデンス毒素（ＺＯＴ）は、細胞間タイトジャンクションの構造を調節することによって、腸の透過性を増大させた。

ＺＯＴは、腸の粘膜におけるタイトジャンクションを可逆的に開放することができ、したがって、ＺＯＴは、治療剤と共投与される場合、腸薬物送達用の経口投与組成物に用いると、治療剤の腸送達をもたらし得ることが見出された（ＷＯ９６／３７１９６、および米国特許第５６６５３８９号；およびＦａｓａｎｏら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９９：１１５８〜１１６４（１９９７））。米国特許第５８６４０１４号では、ＺＯＴ受容体が、腸細胞株、すなわちＣａＣｏ２細胞から同定され、精製された。さらに、米国特許第５９１２３２３号では、ヒトの腸、心臓および脳組織由来のＺＯＴ受容体が、同定され、精製された。

ＺＯＴは、腸細胞の表面と相互作用することによって、一連の細胞内事象を媒介する。ＺＯＴ結合は、小腸の部位によって変化し、空腸および末端回腸において検出可能であり、絨毛−陰窩(crypt)軸に沿って減少し、大腸において検出可能でない。この結合分布は、腸の透過性へのＺＯＴの局所的効果と一致する。

免疫学的および機能的にＺＯＴに関連する哺乳動物タンパク質が同定されてきている。米国特許第５９４５５１０号では、免疫学的および機能的にＺＯＴに関連し、哺乳動物タイトジャンクションの生理的なモジュレーターとしても機能する、新規な哺乳動物タンパク質が同定され、精製された。「ゾヌリン」と呼ばれるこれらの哺乳動物タンパク質は、哺乳動物タイトジャンクションの生理的なエフェクターとして機能する。

本明細書中で企図されるタイトジャンクション・アゴニスト（例えば、ＺＯＴおよび／またはゾヌリンのアゴニスト）は、ＺＯＴ受容体に結合することが確認された。これらのアゴニストは、可逆的および再現可能な様式でタイトジャンクションを迅速に開放し、したがって、ＺＯＴが、腸送達エンハンサーとして用いられるのと同様に、治療剤または免疫原の腸のバイオアベイラビリティーを促進するのに用いることができ、これは以下の特許参考文献に記載されている：ＷＯ０５／０１００２２、ＷＯ９６／３７１９６；米国特許第５８２７５３４号；米国特許第５６６５３８９号；および米国特許第５９０８８２５号。

本明細書中で企図されるタイトジャンクション・アンタゴニスト（例えば、ＺＯＴおよび／またはゾヌリンのアンタゴニスト）は、ＺＯＴ受容体に結合するが、哺乳動物タイトジャンクションの開放を生理的に調節するよう機能しないことが確認された。米国特許第６４５８９２５号を参照されたい。ペプチド・アンタゴニストは、ＺＯＴおよびゾヌリンの、ＺＯＴ受容体への結合を競合的に阻害し、それによって、ＺＯＴおよびゾヌリンの、哺乳動物タイトジャンクションの開放を生理的に調節する能力を阻害する。様々な解剖学的バリアーにおける、タイトジャンクションの開放の阻害は、自己免疫疾患の処置に有用となり得る。

本発明は、１以上のタイトジャンクション・エフェクター(tight junction effector)を含む組成物を提供する。そのような組成物は、コア粒子、コア粒子上のベースコート(base coat)、およびベースコート上に配置された遅延放出コーティングを含むことができる。いくつかの実施形態では、ベースコートは、１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アゴニストを含むことができる。いくつかの実施形態では、遅延放出コーティングは、胃液中で実質的に安定であり得る。特定の実施形態では、ベースコートは、１以上のタイトジャンクション・アンタゴニスト、１以上のタイトジャンクション・アゴニスト、または１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストおよびタイトジャンクション・アゴニストの組合せを含むことができる。いくつかの実施形態では、遅延放出コーティングは、ユードラジット(Eudragit)Ｌ化合物を含むことができる。

典型的には、遅延放出コーティングは、酸性環境中で実質的に安定であり、中性付近からアルカリ性環境中で実質的に不安定である、腸溶剤を含む。適当な遅延放出コーティングは、トリステアリン、トリオレイン、トリカプリリン、トリカプリン、トリミリスチン、トリパルミチンおよびトリラウリンからなる群から選択することのできる１以上のトリグリセリド、ならびにコーティング支持剤(coating support agent)を含むことができる。

タイトジャンクション・アゴニストの例は、閉鎖帯毒素(zonula occludens toxin)（ＺＯＴ）であり、これは、コレラ菌によって産生される。ＺＯＴ受容体アゴニストは、ＺＯＴに利用されるのと同じ受容体を通じて、タイトジャンクションの開放を媒介すると考えられている化合物である。別の実施形態では、タイトジャンクション・アゴニストは、ゾヌリンを含むことができる。ゾヌリン受容体アゴニストは、ゾヌリンに利用されるのと同じ受容体を通じて、タイトジャンクションの開放を媒介すると考えられている化合物である。ＺＯＴ受容体アゴニストおよびゾヌリン受容体アゴニストはともに、タイトジャンクション・アゴニストの例である。理論に束縛されることを望むものではないが、ＺＯＴおよびゾヌリンは、同じ受容体を利用すると同時にタイトジャンクション・アゴニストとして機能すると考えられている。特定の実施形態では、本発明の組成物は、配列番号１を含むペプチドを含むタイトジャンクション・アンタゴニストを含むことができる。別の特定の実施形態では、本発明の組成物は、配列番号２を含むペプチドを含むタイトジャンクション・アゴニストを含むことができる。

本発明の組成物は、１以上の治療剤および／または免疫原(immunogenic agent)を含むことができる。治療剤および／または免疫原は、存在する場合、コア粒子、ベースコート、および／または遅延放出コート中に配置することができる。典型的には、治療剤および／または免疫原は、ベースコートおよび／またはコア粒子中に配置することができる。適当な治療剤の例として、限定されないが、グルコース代謝剤（例えば、インスリン、レパグリニド、アセトヘキサミド、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、ミグリトール、グリメピリドなど）、抗生物質、抗腫瘍剤(antineoplastic)、抗高血圧剤、抗てんかん剤、中枢神経系剤、および免疫系抑制剤が挙げられる。

一実施形態では、本発明の組成物は、錠剤、カプセル剤または粉末サッシェ中に存在する、複数の遅延放出粒子を含むことができる。

本発明の組成物は、種々の疾患および病状を処置するのに用いることができる。一実施形態では、本発明は、胃腸の炎症(gastrointestinal inflammation)を処置する方法であって、その処置を必要とする対象に、本発明の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法を提供する。別の実施形態では、本発明は、医師によって胃腸の炎症について検査され、胃腸の炎症処置のための療法の必要があると診断されたヒトにおいて、胃腸の炎症を処置するための方法であって、そのヒトに、本発明の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法を提供する。別の実施形態では、本発明は、医師によって糖尿病について検査され、糖尿病のための療法の必要があると診断されたヒトにおいて、糖尿病を処置するための方法であって、そのヒトに、タイトジャンクション・アゴニスト（例えば、ゾヌリン・アゴニスト）およびインスリンを含む本発明の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法を提供する。

別の実施形態では、本発明は、１より多い遅延放出コーティングされた粒子を含む組成物を提供する。そのような粒子は、同じであっても異なっていてもよく、例えば、１以上の同じまたは異なる、タイトジャンクション・エフェクター、治療剤および／または免疫原、および遅延放出コーティングを含むことができる。そのような組成物の例は、第１のコア粒子、第１のコア粒子上の第１のベースコート（ここで、第１のベースコートは１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含む）、第１のベースコート上に配置され第１の遅延放出粒子を形成する第１の遅延放出コーティング（ここで、第１の遅延放出コーティングは胃液中で実質的に安定である）：および第２のコア粒子、第２のコア粒子上の第２のベースコート（ここで、第２のベースコートは１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含む）、および第２のベースコート上に配置され第２の遅延放出粒子を形成する第２の遅延放出コーティング（ここで、第２の遅延放出コーティングは胃液中で実質的に安定である）を含むことができる。いくつかの実施形態では、第１の遅延放出コーティングおよび第２の遅延放出コーティングは、異なる時間で放出を遅延させる。例えば、第１の遅延放出粒子中に存在するタイトジャンクション・エフェクターの約半分は、腸液への曝露後、約５分間〜約１０分間放出されることができ、第２の遅延放出粒子中に存在するタイトジャンクション・エフェクターの約半分は、腸液への曝露後、約１２分間〜約１８分間放出されることができる。このタイプの組成物では、タイトジャンクション・エフェクターは、任意の様式で分布していてよく、例えば、第１の遅延放出粒子中に存在するタイトジャンクション・エフェクターは、組成物中の全タイトジャンクション・エフェクターの約６０重量％〜約９０重量％を構成することができ、第２の遅延放出粒子中に存在するタイトジャンクション・エフェクターは、組成物中の全量のタイトジャンクション・エフェクターの約１０重量％〜約４０重量％を構成することができる。同様に、第１の遅延放出粒子は、タイトジャンクション・アンタゴニストおよび／またはタイトジャンクション・アゴニストを含むことができ、一方第２の遅延放出粒子も、タイトジャンクション・アンタゴニストおよび／またはタイトジャンクション・アゴニストを含むことができる。このタイプの組成物に適したタイトジャンクション・アンタゴニストには、限定されないが、配列番号１を含むタイトジャンクション・アンタゴニストが含まれる。このタイプの組成物に適したタイトジャンクション・アゴニストには、限定されないが、配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストが含まれる。このタイプの組成物は、任意の様式で配置される、１以上の治療剤および／または免疫原をさらに含んでもよい。例えば、第１の遅延放出粒子および／または第２の遅延放出粒子は、１以上の治療剤および／または１以上の免疫原を含むことができる。このタイプの組成物は、複数の第１の遅延放出粒子および／または第２の遅延放出粒子を含むことができる。このタイプの組成物は、種々の疾患および／または病状を処置するのに用いることができ、例えば、本発明は、胃腸の炎症を処置する方法であって、その処置を必要とする患者に、第１の遅延放出粒子および第２の遅延放出粒子を含む組成物を、経口的に投与することを含む方法を提供する。

特定の一実施形態では、本発明は、コア粒子、コア粒子上のベースコート（ここで、ベースコートは配列番号１を含むタイトジャンクション・アンタゴニストを含む）、およびベースコート上に配置された遅延放出コーティング（ここで、遅延放出コーティングは胃液中で実質的に安定である）を含む組成物を提供する。そのような組成物に適したコア粒子は、大きさ約２５〜約３０メッシュとすることができる。ベースコートは、結合剤（例えば、ベイカー糖(Baker’s sugar)）を含んでもよく、遅延放出コーティングは、ユードラジットＬ３０Ｄを含んでもよい。任意の量の１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを用いることができ、例えば、１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストは、組成物の約０．１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％、組成物の約１〜約２０ｗｔ％、組成物の約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％、または組成物の約４〜約６ｗｔ％を構成することができる。

別の特定の実施形態では、本発明は、コア粒子、配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストを含む、コア粒子上のベースコート（ここで、ベースコートは配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストを含む）、およびベースコート上に配置された遅延放出コーティング（ここで、遅延放出コーティングは胃液中で実質的に安定である）を含む組成物を提供する。そのような組成物に適したコア粒子は、大きさ約２５〜約３０メッシュとすることができる。ベースコートは、結合剤（例えば、ベイカー糖）を含んでもよく、遅延放出コーティングは、ユードラジットＬ３０Ｄを含んでもよい。任意の量の１以上のタイトジャンクション・アゴニストを用いることができ、例えば、１以上のタイトジャンクション・アゴニストは、組成物の約０．１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％、組成物の約１〜約２０ｗｔ％、組成物の約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％、または組成物の約４〜約６ｗｔ％を構成することができる。このような組成物は、１以上の治療剤および／または１以上の免疫原をさらに含んでもよい。適当な治療剤として、限定されないが、グルコース代謝剤（例えば、インスリン、レパグリニド、アセトヘキサミド、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、ミグリトール、グリメピリドなど）、抗生物質、抗腫瘍剤、抗高血圧剤、抗てんかん剤、中枢神経系剤、および免疫系抑制剤が挙げられる。適当な免疫原には、限定されないが、ワクチン（例えば、ペプチド・ワクチン、弱毒微生物ワクチン、および／または弱毒ウイルスワクチン）が含まれる。

本発明は、１以上のタイトジャンクション・アゴニストおよび／またはタイトジャンクション・アンタゴニストを含む組成物に関する。本明細書で用いる場合、「タイトジャンクション・エフェクター」は、タイトジャンクション・アゴニストおよびタイトジャンクション・アンタゴニストを一括して指すのに用いることができる。用語「アンタゴニスト」は、アゴニストによって誘発される応答を防止、阻害、低減する、または逆行させる化合物として定義される。したがって、本明細書で用いるタイトジャンクション・アゴニストは、タイトジャンクションの開放を媒介する化合物（例えば、タイトジャンクションの生理的な、一過性の解体(disassembly)を誘発する作用物質）であり；タイトジャンクション・アンタゴニストは、タイトジャンクション・アゴニストによって媒介されるタイトジャンクションの開放を防止、阻害、低減する、または逆行させる化合物（例えば、タイトジャンクションの生理的な、一過性の解体を防止する作用物質）である。いくつかの実施形態では、タイトジャンクション・アゴニストは、ＺＯＴ受容体および／またはゾヌリン受容体に結合することによって作用することができ、すなわち、ＺＯＴ受容体アゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アゴニストであることができる。いくつかの実施形態では、タイトジャンクション・アンタアゴニスト（ａｎｔａａｇｏｎｉｓｔ）は、ＺＯＴ受容体および／またはゾヌリン受容体に結合することによって作用することができ、すなわち、ＺＯＴ受容体アンタゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アンタゴニストとなることができる。理論に束縛されることを望むものではないが、ＺＯＴおよびゾヌリンは、同じ受容体を通じてタイトジャンクション開放を調節すると考えられる。いくつかの実施形態では、タイトジャンクション・アゴニストには、タイトジャンクション構造を物理的に崩壊させる作用物質、例えば、界面活性剤は含まれないであろう。いくつかの実施形態では、タイトジャンクション・アンタゴニストには、タイトジャンクション・アゴニストに直接結合することによって機能する化合物は含まれないであろう。適当なタイトジャンクション・エフェクターの例には、限定されないが、１以上の以下の配列：
ＧＧＶＬＶＱＰＧ（配列番号１、場合によってＡＴ１００１と呼ばれるタイトジャンクション・アンタゴニスト）およびＦＣＩＧＲＬ（配列番号２、タイトジャンクション・アゴニスト）ならびにこれらの配列の機能的誘導体
を含むペプチドが含まれる。

例えば、ペプチドＧＧＶＬＶＱＰＧの機能的誘導体として、限定されないが、以下のものが挙げられる。

例えば、ペプチドＦＣＩＧＲＬの機能的誘導体として、限定されないが、以下のものが挙げられる。

Ｘａａ_１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、およびＭｅｔからなる群から選択することができ；Ｘａａ_２は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、およびＧｌｎからなる群から選択することができ；Ｘａａ_３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、およびＭｅｔからなる群から選択することができ；Ｘａａ_４は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、およびＧｌｎからなる群から選択することができ；Ｘａａ_５は、ＬｙｓおよびＨｉｓからなる群から選択することができ；Ｘａａ_６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、およびＭｅｔからなる群から選択することができる。

（配列番号２）のさらなる機能的誘導体として、以下のものが挙げられる。

Ｘａａ_１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、およびＭｅｔからなる群から選択することができ；Ｘａａ_２は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、およびＧｌｎからなる群から選択され；Ｘａａ_３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、およびＭｅｔからなる群から選択され；Ｘａａ_４は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、およびＧｌｎからなる群から選択され；Ｘａａ_５は、ＬｙｓおよびＨｉｓからなる群から選択され；Ｘａａ_６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、およびＭｅｔからなる群から選択される。

配列番号１〜４７のペプチドに基づく小分子、ペプチド、ペプチド模倣体およびペプチド類似体として、当業者によって典型的に分類されるタイトジャンクション・エフェクターを含む組成物も企図される。タイトジャンクション・エフェクターがペプチドである場合、任意の長さのペプチドを用いることができる。例えば、エフェクターの長さは、アミノ酸の個数で約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４または約１５とすることができる。

いくつかの実施形態では、エフェクターが、ペプチド・タイトジャンクション・アゴニストである場合、このペプチドの長さは、アミノ酸の個数で約３〜約１２、約４〜約１２、約５〜約１２、約６〜約１２、約７〜約１２、約８〜約１２、約９〜約１２、約１０〜約１２、約３〜約１０、約４〜約１０、約５〜約１０、約６〜約１０、約７〜約１０、約８〜約１０、約９〜約１０とすることができる。いくつかの実施形態では、タイトジャンクション・エフェクターが、タイトジャンクション・アゴニストペプチドである場合、このペプチドの長さは、アミノ酸９個以下とすることができる。

いくつかの実施形態では、エフェクターが、ペプチド・タイトジャンクション・アンタゴニストである場合、このペプチドの長さは、アミノ酸の個数で約３〜約２５、約６〜約２５、約８〜約２５、約１０〜約２５、約１５〜約２５、約２０〜約２５、約６〜約２０、約８〜約２０、約１０〜約２０、約１５〜約２０、約６〜約１５、約８〜約１５、約１０〜約１５、約６〜約１０、約８〜約１０、または約９〜約１０とすることができる。いくつかの実施形態では、ペプチド・アンタゴニストの長さは、アミノ酸１０個以下とすることができる。

本発明の組成物は、腸送達用に製剤化することができ、例えば、１以上のコーティング、例えば、１以上の腸溶剤を含有する遅延放出コーティングを含むことができる。遅延放出コーティングは、典型的には胃液中で実質的に安定であり、腸液中で実質的に不安定であり（例えば、急速に溶解するか、または物理的に不安定である）、したがって、十二指腸または空腸において、組成物からのタイトジャンクション・エフェクターの実質的な放出を提供する。本発明は、組成物が、１以上の治療分子または免疫原的に活性な分子を含んでもよいことも企図する。

本発明の組成物は、この組成物の全重量の約０．１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１８ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１６ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１４ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１２ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約８ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約６ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約４ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約２ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．９ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．８ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．７ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．６ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．４ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．３ｗｔ％、または約０．１ｗｔ％〜約０．２ｗｔ％の濃度で、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含むことができる。本発明の組成物は、この組成物の全重量に基づいて、約０．１ｗｔ％、約０．２ｗｔ％、約０．３ｗｔ％、約０．４ｗｔ％、約０．５ｗｔ％、約０．６ｗｔ％、約０．７ｗｔ％、約０．８ｗｔ％、または約０．９ｗｔ％の濃度で、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含むことができる。

本発明の組成物は、この組成物の全重量の約１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１８ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１６ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１４ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１２ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約９ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約８ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約７ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約６ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約５ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約４ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約３ｗｔ％、または約１ｗｔ％〜約２ｗｔ％の濃度で、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含むことができる。本発明の組成物は、この組成物の全重量に基づいて、約１ｗｔ％、約２ｗｔ％、約３ｗｔ％、約４ｗｔ％、約５ｗｔ％、約６ｗｔ％、約７ｗｔ％、約８ｗｔ％、または約９ｗｔ％の濃度で、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含むことができる。

用語「胃液中で安定である」または「酸性環境中で安定である」は、ｐＨ５以下の胃液、またはｐＨ５以下の模擬胃液中、約６０分間で、組成物中の全タイトジャンクション・アンタゴニストまたはアゴニストの３０重量％以下を放出する組成物を指す。本発明の組成物は、ｐＨ５以下の胃液、またはｐＨ５以下の模擬胃液中、約６０分間で、組成物中の全タイトジャンクション・アンタゴニストまたはアゴニストの約０重量％〜約３０重量％、約０重量％〜約２５重量％、約０重量％〜約２０重量％、約０重量％〜約１５重量％、約０重量％〜約１０重量％、５重量％〜約３０重量％、約５重量％〜約２５重量％、約５重量％〜約２０重量％、約５重量％〜約１５重量％、約５重量％〜約１０重量％を放出し得る。本明細書で用いる場合、数値を修飾するために用いられる「約」は、その値の１０％以内であることを意味する。本発明の組成物は、ｐＨ５以下の胃液、またはｐＨ５以下の模擬胃液中、約６０分間で、組成物中の全タイトジャンクション・アンタゴニストまたはアゴニストの約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約９重量％、または約１０重量％を放出し得る。

用語「腸液中で不安定である」は、腸液または模擬腸液中、約６０分間で、組成物中の全タイトジャンクション・エフェクターの７０重量％以上を放出する組成物を指す。用語「中性付近からアルカリ性環境中で不安定である」は、ｐＨ５以上の腸液、またはｐＨ５以上の模擬腸液中、約９０分間で、組成物中の全量のタイトジャンクション・アゴニストまたはアンタゴニストの７０重量％以上を放出する組成物を指す。例えば、中性付近またはアルカリ性の環境中で不安定である組成物は、ｐＨ約５超を有する液体（例えば、約５〜約１４、約６〜約１４、約７〜約１４、約８〜約１４、約９〜約１４、約１０〜約１４、または約１１〜約１４のｐＨを有する液体）中、約５分間〜約９０分間、または約１０分間〜約９０分間、または約１５分間〜約９０分間、または約２０分間〜約９０分間、または約２５分間〜約９０分間、または約３０分間〜約９０分間、または約５分間〜約６０分間、または約１０分間〜約６０分間、または約１５分間〜約６０分間、または約２０分間〜約６０分間、または約２５分間〜約９０分間、または約３０分間〜約６０分間で、タイトジャンクション・アゴニストペプチドまたはタイトジャンクション・アンタゴニストペプチドの７０重量％以上を放出し得る。

一実施形態では、遅延放出コーティングは、胃液中で、本質的に無傷のままであり得るか、または本質的に不溶性であり得る。遅延放出コーティングの安定性は、ｐＨ依存性とすることができる。ｐＨ依存性である遅延放出コーティングは、酸性環境（ｐＨ５以下）中で実質的に安定であり、中性付近からアルカリ性環境（ｐＨ５超）中で実質的に不安定であるだろう。例えば、遅延放出コーティングは、小腸中で見出されるような中性付近からアルカリ性環境中で、本質的に崩壊または溶解し得る。

模擬胃液および模擬腸液の例として、限定されないが、「２００５ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ ２３ＮＦ／２８ＵＳＰ ｉｎ Ｔｅｓｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」の２８５８頁に開示されているもの、ならびに／または当業者に知られている他の模擬胃液および模擬腸液、例えば酵素なしで調製された模擬胃液および／または模擬腸液が挙げられる。

あるいは、遅延放出コーティングの安定性は、酵素依存性とすることができる。酵素依存性である遅延放出コーティングは、特定の酵素を含有しない液体中で実質的に安定であり、その酵素を含有する液体中で実質的に不安定であるだろう。この遅延放出コーティングは、適切な酵素を含有する液体中で、本質的に崩壊または溶解するだろう。酵素依存性の制御は、例えば、ガラクトマンナンなどの、腸内の酵素に曝露されている状態でのみ活性成分を放出する物質を用いることによってもたらすことができる。

本明細書で用いる場合、タイトジャンクション・アンタゴニストは、タイトジャンクションの開放(opening)を防止、阻害または低減する。タイトジャンクション・アゴニストは、タイトジャンクションの開放を媒介、促進または増強する。タイトジャンクション・アンタゴニストは、タイトジャンクション・アゴニスト（例えばＺＯＴおよびゾヌリン）の、１以上の受容体分子（例えば、ＺＯＴ受容体）への結合を阻害することができ、それによって、アゴニストのタイトジャンクションの開放を生理的に調節する能力を阻害または低減する。

本発明の組成物からのタイトジャンクション・アゴニストまたはタイトジャンクション・アンタゴニストの放出のための標的器官は、小腸、特に十二指腸および空腸である。米国特許第６４５８９２５号、同第５９４５５１０号および同第５８２７５３４号では、当技術分野で示されている耐胃性(gastroresistent)錠剤またはカプセル剤による、タイトジャンクション・アンタゴニスト、ゾヌリンまたはＺＯＴの小腸送達ための経口投与組成物の可能性が考察されている。そのような錠剤またはカプセル剤の調製の例については、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、１６版、Ｏｓｏｌ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、８９章（１９８０）；Ｄｉｇｅｎｉｓら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、８３：９１５〜９２１（１９９４）；Ｖａｎｔｉｎｉら、Ｃｌｉｎｉｃａ Ｔｅｒａｐｅｕｔｉｃａ、１４５：４４５〜４５１（１９９３）；Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、４０：１９０２〜１９０５（１９９２）；Ｔｈｏｍａら、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ、４６：３３１〜３３６（１９９１）；Ｍｏｒｉｓｈｉｔａら、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、７：３０９〜３１９（１９９１）；Ｌｉｎら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓ．、８：９１９〜９２４（１９９１）を参照されたい。

一実施形態では、本発明の腸溶製剤は、１以上の遅延放出コーティングおよび不活性コアを利用することによって、場合により、他の治療剤および／または免疫原とともに、タイトジャンクション・アゴニスト化合物またはタイトジャンクション・アンタゴニスト化合物の、有効で遅延させながらも実質的な送達を提供することができる。コーティングされた組成物は、酸性環境または胃液中で実質的に安定であり、中性付近からアルカリ性または腸液中で実質的に不安定である。本発明の組成物は、本発明の精神の範囲内で、追加の化合物、例えば、緩衝液、賦形剤、タルクまたは結合剤なども含むことができる。

タイトジャンクション・アゴニストまたはアンタゴニストおよび腸溶コーティングを含む粒子
一実施形態では、本発明は、１以上のタイトジャンクション・アゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを含むベースコートを有するコア粒子、ならびにコーティングされたコア粒子上に配置された遅延放出コーティングを含む組成物を提供する。遅延放出コーティングは、酸性環境および／または胃液中で実質的に安定であり、および／または中性付近からアルカリ性の環境もしくは腸液中で実質的に不安定であることができ、それによってコーティングされたコア粒子を腸液に曝露する。１以上のタイトジャンクション・アゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを含むベースコートは、１以上の治療剤をさらに含むことができる。場合によって、複数のベースコートをコアに施すことができ、そのそれぞれは、タイトジャンクション・エフェクターおよび／または治療剤を含有することができる。場合によって、コア粒子は、１以上のタイトジャンクション・エフェクターおよび／または１以上の治療剤を含んでもよい。

一実施形態では、処置を必要とする対象に、コーティングされたコア粒子を含有する錠剤またはカプセル剤の形態で、上述した組成物を提供することができる。そのような錠剤またはカプセル剤は、経口的に投与することができる。あるいは、対象は、コーティングされたコア粒子、および場合により、１以上の補助剤、例えば、甘味料または香味剤などを含む、粉末サッシェを提供される場合がある。次いでこの対象は、粉末を液体と混合し、この混合物を経口的に投与することができる。

コア粒子は、約５〜約５０メッシュ、約５〜約４５メッシュ、約５〜約４０メッシュ、約５〜約３５メッシュ、約５〜約３０メッシュ、約５〜約２５メッシュ、約５〜約２０メッシュ、約５〜約１５メッシュ、約５〜約１０メッシュ、約１０〜約５０メッシュ、約１０〜約４５メッシュ、約１０〜約４０メッシュ、約１０〜約３５メッシュ、約１０〜約３０メッシュ、約１０〜約２５メッシュ、約１０〜約２０メッシュ、約１０〜約１５メッシュ、約１５〜約５０メッシュ、約１５〜約４５メッシュ、約１５〜約４０メッシュ、約１５〜約３５メッシュ、約１５〜約３０メッシュ、約１５〜約２５メッシュ、約１５〜約２０メッシュ、約２０〜約５０メッシュ、約２０〜約４５メッシュ、約２０〜約４０メッシュ、約２０〜約３５メッシュ、約２０〜約３０メッシュ、約２０〜約２５メッシュ、約２５〜約５０メッシュ、約２５〜約４５メッシュ、約２５〜約４０メッシュ、約２５〜約３５メッシュ、約２５〜約３０メッシュ、約３０〜約５０メッシュ、約３０〜約４５メッシュ、約３０〜約４０メッシュ、または約３０〜約３５メッシュの平均サイズを有する球体またはシード（ｓｅｅｄ）を含むことができる。コア粒子は、コーティング組成物でコーティングされることができ、この組成物は、本明細書に記載された、１以上のタイトジャンクション・アゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストおよび／または１以上の治療剤を含むことができる。

コア粒子は、様々な酸化物、セルロース、有機ポリマーおよび他の材料、ならびにそれらの混合物を含む不水溶性粒子、または様々な無機塩、糖、ノンパレルおよび他の材料ならびにそれらの混合物を含む水溶性粒子とすることができる。コア粒子は、最終粒子組成物の、約２５〜約７５、約３０〜約７５、約３５〜７５、約４０〜約７５、約４５〜約７５、約５０〜約７５、約５５〜約７５、約６０〜約７５、約６５〜約７５、約７０〜約７５、約２５〜約７０、約２５〜約６５、約２５〜約６０、約２５〜約５５、約２５〜約５０、約２５〜約４５、約２５〜約４０、約２５〜約３５、約２５〜約３０、約３０〜約６０、約３５〜約５５、約４０〜約５０、約４２〜約４７、または約４２〜約４５ｗｔ％を構成することができる。一実施形態では、コア粒子は、最終粒子組成物の約４３．２ｗｔ％を構成することができる。一般的な形態のそのようなコア粒子は、市販されており、例えば、Ｃｅｌｐｈｅｒｅｓ（商標）またはノンパレルなどである。コア粒子は、場合によって、１以上のタイトジャンクション・エフェクター化合物および／または１以上の治療剤を含んでもよい。コア粒子は、当技術分野で知られている技法、例えば、米国特許第６２４８３６３号（特に実施例）および同第６２９４１９２号（特に実施例）に記載されている技法を用いてコーティングすることができる。

本発明の組成物は、当業者に知られている、１以上の以下の製剤助剤、例えば、界面活性剤、増量剤、崩壊剤、アルカリ性物質および／または結合剤なども含むことができる。

本発明に用いるのに適した界面活性剤には、限定されないが、任意の薬学的に許容可能な、無毒性の界面活性物質が含まれる。本発明の組成物中に用いるのに適した界面活性物質の分類として、限定されないが、ポリエトキシ化脂肪酸、ＰＥＧ−脂肪酸ジエステル、ＰＥＧ−脂肪酸モノ−およびジ−エステル混合物、ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル、アルコール−油エステル交換生成物、ポリグリセライズド(polyglycerized)脂肪酸、プロピレングリコール脂肪酸エステル、プロピレングリコールエステル−グリセロールエステルの混合物、モノ−およびジグリセリド、ステロールおよびステロール誘導体、ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、糖エステル、ポリエチレングリコールアルキルフェノール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル、低級アルコール脂肪酸エステル、イオン性界面活性物質、ならびにそれらの混合物が挙げられる。いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、限定されないが、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、およびクエン酸トリエチルを含めた、１以上の界面活性物質を含むことができる。界面活性剤は、最終粒子組成物の全重量に基づいて、約０．１ｗｔ％〜約５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約４．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約４．０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約３．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約３．０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約２．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約２．０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約１．０ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約１．０ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約１．５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約２．０ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約２．５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約３．０〜約５．０ｗｔ％、約３．５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約４．０ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約４．５ｗｔ％〜約５．０ｗｔ％、約０．２５ｗｔ％〜約２．５ｗｔ％、約１．０ｗｔ％〜約２．０ｗｔ％、または約１．５ｗｔ％〜約２．０ｗｔ％の濃度で存在することができる。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、最終粒子組成物の全重量に基づいて、約１．０ｗｔ％、約１．１ｗｔ％、約１．２ｗｔ％、約１．３ｗｔ％、約１．４ｗｔ％、約１．５ｗｔ％、約１．６ｗｔ％、約１．７ｗｔ％、約１．８ｗｔ％、約１．９ｗｔ％、または約２．０ｗｔ％の濃度で本発明の組成物中に存在することができる。一実施形態では、本発明の組成物は、最終粒子組成物の全重量に基づいて、約１．８ｗｔ％の界面活性物質を含むことができる。

本発明の組成物中に用いるのに適したアルカリ性物質として、限定されないが、酸、例えば、リン酸、炭酸、クエン酸などの、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびアルミニウム塩、ならびに他のアルミニウム／マグネシウム化合物が挙げられる。さらに、アルカリ性物質は、制酸物質、例えば、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウムおよびマグネシウム酸化物などからなる群から選択することができる。アルカリ性剤は、アルカリ性物質の相対強度に応じて、コーティング組成物の全重量に基づいて、約１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１８ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１６ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１４ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１２ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約８ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約６ｗｔ％、約１ｗｔ％〜約４ｗｔ％、または約１ｗｔ％〜約２ｗｔ％の濃度で存在することができる。いくつかの実施形態では、アルカリ性物質は、コーティング組成物の全重量に基づいて、約１ｗｔ％、約２ｗｔ％、約３ｗｔ％、約４ｗｔ％、約５ｗｔ％、約６ｗｔ％、約７ｗｔ％、約８ｗｔ％、約９ｗｔ％、約１０ｗｔ％、約１１ｗｔ％、約１２ｗｔ％、約１３ｗｔ％、約１４ｗｔ％、約１５ｗｔ％、約１６ｗｔ％、約１７ｗｔ％、約１８ｗｔ％、約１９ｗｔ％、または約２０ｗｔ％の濃度で、本発明の組成物中に存在することができる。

本発明の組成物中に用いるのに適した結合剤には、限定されないが、任意の薬学的に許容可能な、無毒性の薬学的に許容可能な結合剤が含まれる。結合剤は、水溶性ポリマーとすることができる。いくつかの実施形態では、結合剤は、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロースなどからなる群から選択される、１以上の結合剤を含むことができる。水溶性結合剤が用いられる場合、それは、水などの水性媒体から施用することができる。本発明の組成物は、アルカリ性物質の相対強度に応じて、コーティング組成物の全重量に基づいて、約１ｗｔ％〜約１５ｗｔ％の濃度で１以上の結合剤を含むことができる。増量剤、例えば、糖、例えばラクトース、デキストロース、スクロースおよびマルトースなど、微結晶セルロースなども、コーティング組成物中に含めることができる。好ましい市販の増量剤は、Ｂａｋｅｒｓ Ｓｐｅｃｉａｌ Ｓｕｇａｒである。

コーティングされたコア粒子に遅延放出コーティングを施す前に、粒子は、場合によって、アルカリ性化合物、例えばｐＨ緩衝化合物などを含む医薬賦形剤を含む、１つまたは複数の分離層で覆うことができる。分離層は、コーティングされたコア粒子を遅延放出コーティングから本質的に分離する。

分離層は、コーティング装置、例えばコーティングパン、コーティング造粒機などを典型的に用いるコーティングまたは層状化手順によって、あるいは水および／またはコーティングプロセス用有機溶媒を用いる流動床装置で、コーティングされたコア粒子に施すことができる。別の方法として、分離層は、粉体コーティング技法を用いることによって、コア材料に施すことができる。分離層のための材料は、薬学的に許容可能な化合物、例えば、糖、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム等などであり、単独または混合物で用いられる。可塑剤、着色剤、色素、増量剤、粘着防止剤(anti-tacking agent)および帯電防止剤などの添加剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、二酸化チタン、タルクなど、および他の添加剤も分離層中に含めることができる。

一実施形態では、遅延放出コーティングは、酸性環境中で実質的に安定であり、中性付近からアルカリ性環境中で実質的に不安定である、腸溶剤を含む。遅延放出コーティング組成物は、水または適当な有機溶媒のいずれにも分散または溶解することができ、当業者に周知の方法によってコア粒子に施すことができる。１以上の遅延放出コーティングを、コーティングされたコア粒子に施すことができる。また、説明したように、遅延放出コーティングを施す前に、任意選択の分離層をコーティングされたコア粒子に施すことができる。

腸溶剤は、例えば、メタクリル酸コポリマー、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸フタル酸ポリビニル、カルボキシメチルエチルセルロース、およびユードラジット型ポリマー（ポリ（メタクリル酸、メチルメタクリル酸））、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸トリメリト酸セルロース、セラックまたは他の適当な腸溶コーティングポリマーの溶液または分散系からなる群から選択することができる。ユードラジット型ポリマーとして、ユードラジットＬ、ＮＥ、ＲＬ、ＲＳが挙げられる。ユードラジットＬポリマーが好ましい。腸溶剤は、前述の溶液または分散系の組合せとすることができる。

別の実施形態では、遅延放出コーティングは、溶液中のｐＨおよび／または酵素の存在を問わず、水溶液中において、時間の関数として分解し得る。そのようなコーティングは、不水溶性ポリマーを含むことができる。したがって、水溶液中のその溶解度は、ｐＨに依存しない。本明細書で用いる用語「ｐＨ非依存性の」は、ポリマーの透水性およびその医薬成分を放出する能力が、ｐＨの関数ではないこと、および／または非常にわずかしかｐＨに依存しないことを意味する。そのようなコーティングは、徐放製剤を調製するのに用いることができる。適当な不水溶性ポリマーには、溶液のｐＨに依存しないで、水性媒体、例えば水に実質的に不溶性である、薬学的に許容可能な無毒性のポリマーが含まれる。適当なポリマーとして、限定されないが、セルロースエーテル、セルロースエステル、またはセルロースエーテル−エステル、すなわち、セルロース骨格上のヒドロキシ基の一部が、アルキル基で置換され、一部がアルカノイル基で修飾されているセルロース誘導体が挙げられる。例として、エチルセルロース、アセチルセルロース、ニトロセルロースなどが挙げられる。不溶性ポリマーの他の例として、限定されないが、ラッカー、ならびにアクリル酸エステルポリマーおよび／またはメタクリル酸エステルポリマー、四級アンモニウム低含量のアクリレートまたはメタクリレートのポリマーまたはコポリマー、またはそれらの混合物などが挙げられる。不溶性ポリマーの他の例として、ユードラジットＲＳ（登録商標）、ユードラジットＲＬ（登録商標）、およびユードラジットＮＥ（登録商標）が挙げられる。本発明において有用な不溶性ポリマーとして、ポリビニルエステル、ポリビニルアセタール、ポリアクリル酸エステル、ブタジエンスチレンコポリマーなどが挙げられる。

別の実施形態では、遅延放出コーティングは、胃液中で実質的に安定である腸溶剤を含有する。腸溶剤は、膵リパーゼに感受性があるだろう。膵リパーゼに感受性のある腸溶剤として、トリグリセリド、トリステアリン、トリオレイン、トリカプリリン、トリカプリン、トリミリスチン、トリパルミチンおよびトリラウリンが挙げられる。１以上のこれらのトリグリセリド、例えばエチルセルロースなどのセルロース型材料は、コーティング支持剤と組み合わせて、遅延中継(delayed relay)コーティング組成物を調製するのに用いられ、次いでこれがコーティングされたコア粒子に施される。

遅延放出コーティング組成物は、０．１ｗｔ％〜５ｗｔ％のトリグリセリドまたはトリグリセリドの混合物、および０．５ｗｔ％〜１０ｗｔ％のコーティング支持剤を含むことができる。別の遅延放出コーティング組成物は、０．５％ｗｔ％〜３ｗｔ％のトリグリセリドまたはトリグリセリドの混合物、および１ｗｔ％〜５ｗｔ％のコーティング支持剤を含むだろう。

１以上の遅延放出コーティングを、コーティングされたコア粒子に施すことができる。例えば、膵リパーゼに感受性のある腸溶剤に加えて、追加の遅延放出コーティングを、コーティングされたコア粒子に施すことができる。そのような追加のコーティングは、本明細書に説明した酸性環境中で実質的に安定である腸溶剤を含むことができる。また、説明したように、遅延放出コーティングを施す前に、任意選択の分離層を、コーティングされたコア粒子に施すことができる。

遅延放出コーティング組成物は、コーティング組成物の全重量に基づいて、１０〜８０ｗｔ％の量で、１以上の不活性プロセシング助剤も含むことができる。不活性プロセシング助剤として、微粒形態のタルク、二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウムなどが挙げられる。

遅延放出コーティング組成物は、所望の機械特性、例えば、柔軟性や硬度などを得るために薬学的に許容可能な可塑剤も含有することできる。そのような可塑剤として、限定されないが、トリアセチン、クエン酸エステル、フタル酸エステル、セバシン酸ジブチル、セチルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリソルベートまたは他の可塑剤が挙げられる。

可塑剤の量は、用いられる選択された腸溶剤に関連して、それぞれの遅延放出コーティングについて最適化される。選択される可塑剤および腸溶剤の適用量は、所望の機械特性、すなわち、遅延放出コーティングの柔軟性および硬度について最適化される。遅延放出コーティングの硬度は、ビッカース硬度として多くの場合例示され、最終のコーティングされた粒子の耐酸性が、粒子を錠剤に圧縮する間に大きく減少しないように調整される。他の化合物を、遅延放出コーティング組成物に加えることによって、膜厚を増加させ、胃中の酸性胃液に対する耐性を増大させることができる。

遅延放出コーティング組成物は、１以上の適用溶媒(application solvent)も含むことができる。遅延放出コーティング組成物を施すのに用いることのできる、いくつかのより一般的な溶媒として、イソプロピルアルコール、アセトン、塩化メチレンなどが挙げられる。一般に、腸溶剤および不活性プロセシング助剤は、溶媒の重量を含めて、コーティング組成物の５ｗｔ％〜６０ｗｔ％を占めるだろう。

遅延放出コーティングでコーティングされた粒子は、オーバーコート層でさらに覆うことができる。オーバーコート層は、他のコーティング組成物について説明したように施すことができる。オーバーコート材料は、薬学的に許容可能な化合物、例えば、糖、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム等などであり、単独または混合物で用いられる。オーバーコート材料は、遅延放出コーティングでコーティングされた粒子の潜在的な凝集を防止する、遅延放出コーティングを、圧縮プロセスの間のひび割れから保護する、または錠剤化プロセスを向上させることができる。

最終生成物の全体的な放出特性は、異なる放出特性を有する２つ以上の粒子タイプを組み合わせることによって調節し得ることが理解される。例えば、一実施形態では、コーティングされたコア粒子の約半分は、約５分〜約１０分後にタイトジャンクション・アゴニストまたはアンタゴニストを腸液に曝露する腸溶コーティングを有する、第１のコーティングされたコア粒子タイプであり、コーティングされたコア粒子の約半分は、約１２分〜約１８ないし６０分後にタイトジャンクション・アゴニストまたはアンタゴニストを腸液に曝露する腸溶コーティングを有する、第２のコーティングされたコア粒子タイプである。別の実施形態では、第１のコーティングされた粒子は、組成物中のタイトジャンクション・エフェクターの全量の、６０重量％〜９０重量％を構成し、第２のコーティングされた粒子は、１０重量％〜４０重量％を構成する。

１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを含む組成物
一実施形態では、本発明の組成物は、１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストを含むことができる。ゾヌリンの適当なアンタゴニストの例は、ペプチドＧＧＶＬＶＱＰＧ（配列番号１）およびその誘導体、特に、１つまたは複数の保存的アミノ酸置換を有する誘導体である。そのような組成物は、限定されないが、自己免疫疾患を含めた広範な疾患を処置するのに用いることができる。本発明の組成物を用いて処置することのできる自己免疫疾患の例として、限定されないが、セリアック病、原発性胆汁性肝硬変、ＩｇＡ腎症、ウェゲナー肉芽腫症、多発性硬化症、強皮症、全身性硬化症、１型糖尿病、関節リウマチ、クローン病、紅斑性狼瘡、橋本甲状腺炎（甲状腺機能低下)、グレーブス病（甲状腺機能亢進）、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、類天疱瘡、デビック症候群(Devic’s syndrome)、グッドパスチャー症候群、Ｌａｍｂｅｒｔ−Ｅａｔｏｎ筋無力症候群（ＬＥＭＳ）、自己免疫性リンパ球増殖症候群（ＡＬＰＳ）、腫瘍随伴症候群、多腺性自己免疫症候群（ＰＧＡ）、および円形脱毛症が挙げられる。

本発明の組成物は、腸透過性の増大を生じさせる胃腸の炎症の処置のための抗炎症剤として用いることができる。したがって、アンタゴニストは、例えば、タンパク喪失性腸症もたらす腸の状態の処置において有用である。タンパク喪失性腸症は、
感染、例えば、Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ感染、全腸炎、細菌性赤痢、ウイルス性胃腸炎、寄生虫感染症、細菌異常増殖、ウィップル病；
粘膜浸食または潰瘍形成を伴う疾患、例えば、胃炎、胃癌、膠原性大腸炎、炎症性腸疾患；および
潰瘍形成を伴わない粘膜疾患、例えば、メネトリエ病、セリアック病、好酸球性胃腸炎
に起因して起こり得る。

本発明の組成物および方法で処置することのできる他の疾患として、限定されないが、リンパ管閉塞によって特徴づけられる疾患、例えば、先天性腸リンパ管拡張症、サルコイドーシスリンパ腫、腸間膜結核、および先天性心疾患の術後矯正、および免疫疾患、例えば、全身性紅斑性狼瘡または主に乳汁に対する食物アレルギー（その全体が本明細書に参照により組み込まれる「Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ」、Ｗｙｌｌｉｅら編、Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．（１９９３）、５３６〜５４３頁の表４０−２も参照されたい）が挙げられる。

ゾヌリンのアンタゴニストの薬学的有効量は、処置される疾患または状態、ならびに処置される対象の年齢、体重および性別に応じて変動するだろう。一般に、胃腸の炎症を阻害する、例えばゾヌリンの生物活性を阻害するのに用いられるアンタゴニストの量は、約１．０μｇ〜１０００μｇ、好ましくは約１．０μｇ〜１００μｇの範囲内である。

ペプチド・タイトジャンクション・アンタゴニストは、周知の技法、例えば「Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ： Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」、Ｍａｎｔら編、Ｃ．Ｒ．Ｃ．Ｐｒｅｓｓ（１９９１）に記載されているもの、およびＳｙｍｐｈｏｎｙ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ）などのペプチド合成機などを用いて、または組換えＤＮＡ技法、すなわち、ペプチドをコードするヌクレオチド配列が、それぞれの宿主細胞中で発現される適切な発現ベクター、例えば、大腸菌もしくは酵母菌発現ベクターの中に挿入され、次いで周知の技法を用いて精製される技法、などを用いることによって、化学的に合成し、精製することができる。

１以上のタイトジャンクション・アゴニストを含む組成物
一実施形態では、タイトジャンクション・アゴニストは、ペプチド配列を含むことができる。適当なペプチド配列の例は、ＦＣＩＧＲＬ（配列番号２）およびその誘導体、特に、１以上の保存的アミノ酸置換を有する誘導体である。ペプチド配列は、単独で用いることができるか、またはより大きな分子、例えばポリペプチドの一部であってもよい。ゾヌリンのアゴニストが、ポリペプチドを含む場合、そのようなポリペプチドは、典型的には長さ１００個未満のアミノ酸残基、または５０、４０、３０、２０、１０、もしくは８個未満のアミノ酸残基である。ポリペプチドは、６個のアミノ酸ＦＣＩＧＲＬ（配列番号２）のみを含有することができるか、または、追加のアミノ酸を含むことができる。他のアミノ酸は、他の機能、例えば精製を促進するための抗原標識、を提供する場合がある。

一実施形態では、本発明の組成物は、１以上のタイトジャンクション・アゴニストならびに１以上の治療剤および／または免疫原を含むことができる。一実施形態では、本発明の組成物は、１以上の疾患を処置する、緩和させる、または予防するための治療剤および／または免疫原、ならびにゾヌリンおよびコレラ菌ファージＣＴＸΦ ＺＯＴタンパク質のヒト受容体のアゴニストを含むことができる。この組成物は、アゴニストおよび治療剤が、同時、ほぼ同時または順次の投与のために連携して梱包された医薬キットの形態で存在することができることも企図される。後者の例では、アゴニストおよび治療剤は、互いに１２、８、４、２、もしくは１時間以内、または互いにわずか５、１０もしくは１５分以内に投与される。

組成物中に用いることのできる治療剤には、身体の任意の器官、例えば、心臓、脳、腸、または腎臓に作用する剤が含まれる。

組成物中に用いられる特定の治療剤または免疫原は、サイズまたは電荷にかかわらず、任意の小分子化合物、生物活性ペプチド、ワクチン、または別の方法では経細胞経路を通じて十分に吸収されない任意の他の部分であることができる。

本発明で用いることのできる薬物化合物の例として、限定されないが、心血管系に作用する薬物、中枢神経系に作用する薬物、抗腫瘍剤および抗生物質が挙げられる。心血管系に作用する薬物の例として、限定されないが、抗高血圧剤、スタチン、アデノシン、ドブタミン、ドーパミン、エピネフリン、ノルエピネフリン、およびフェントラミンが挙げられる。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。

中枢神経系に作用する薬物の例として、限定されないが、ドキサプラム、アルフェンタニル、デゾシン(dezocin)、ナルブフィン、ブプレノルフィン、ナロキソン、ケトロラック、ミダゾラム、およびプロポフォールが挙げられる。他の例として、限定されないが、抗精神病薬、抗うつ薬、抗てんかん剤、およびアルツハイマー病を処置するのに用いられる薬物が挙げられる。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。

抗腫瘍剤の例として、限定されないが、シタラビン、マイトマイシン、ドキソルビシン、ビンクリスチンおよびビンブラスチン、カルボプラチン、シスプラチン、オキサロプラチン(oxaloplatin)、ビノレルビン、ドセタキセル、パクリタキセル、タキサン、５−フルオロウリジン関連薬、キセロダ、ゲルムシタビン(germcitabine)、およびアントラクリン(anthracline)が挙げられる。追加の例として、限定されないが、エルビタックス、ハーセプチン（登録商標）、アバスチン（商標）、ならびにエストロゲン受容体アンタゴニストおよびアゴニストが挙げられる。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。

抗生物質の例として、限定されないが、メチシリン、メズロシリン、ピペラシリン、セトキシチン、セフォニシド、セフィネタゾール(cefinetazole)およびアズトレオナムが挙げられる。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。

任意の種類の治療剤および／または免疫原を、本発明の実施に際して用いることができる。特定の種類の作用剤(agent)の例として、限定されないが、ＲＮＡｉ、トリートメントアプタマー、抗ウイルス剤（例えば、アマンタジン、リマンタジン、ザナマビル(zanamavir)およびオセルタミビル）、免疫抑制薬（例えば、シクロスポリンＡ）、ＨＩＶ融合阻害剤（例えば、エンフビルチド）、およびＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、（例えば、リトナビル、サキナビル、インジナビル、アンプレナビル、ネルフィナビル、ロピナビル、アタザナビル、エントリシタビン、およびホスアンプレナビルカルシウム）が挙げられる。

生物活性ペプチドの例として、ホルモン、リンホカイン、グロブリン、およびアルブミンが挙げられる。本発明に用いることのできるホルモンの例として、テストステロン、ナンドロレン、メノトロピン、インスリン、成長ホルモン、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）およびウロホルトロピン(urofolltropin)が挙げられる。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。生物活性成分が、インスリンである場合、経口投与組成物は、糖尿病の処置のために有用である。本発明に用いることのできるリンホカインの例として、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インターロイキン−４およびインターロイキン−８が挙げられる。

グロブリンの例として、α−グロブリン、β−グロブリンおよびγ−グロブリン（免疫グロブリン）が挙げられる。本発明に用いることのできる免疫グロブリンの例として、多価ＩｇＧまたは特異的ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＭ、例えば、抗破傷風抗体が挙げられる。用いることのできるアルブミンの例は、ヒト血清アルブミンである。当技術分野で知られている他のものも、用いることができる。

組成物中に用いることのできるワクチンの例として、ペプチドおよび弱毒微生物およびウイルスが挙げられる。ペプチド抗原の例として、毒素原性大腸菌の易熱性エンテロトキシンのＢサブユニット、コレラ毒素のＢサブユニット、腸病原体の莢膜抗原、腸病原体の線毛またはピリ線毛、ＨＩＶ表面抗原、ダストアレルゲンおよびダニアレルゲンが挙げられる。当技術分野で知られている他の免疫原性化合物も、用いることができる。

組成物中に用いることのできる弱毒微生物およびウイルスの例には、毒素原性大腸菌、腸病原性大腸菌、コレラ菌、フレクスナー赤痢菌、チフス菌およびロタウイルスといったものが挙げられる（そのそれぞれの全体が本明細書に参照により組み込まれている、Ｆａｓａｎｏら、「Ｌｅ Ｖａｃｃｉｎａｚｉｏｎｉ ｉｎ Ｐｅｄｉａｔｒｉａ」、Ｖｉｅｒｕｃｃｉら編、ＣＳＨ、Ｍｉｌａｎ、１０９〜１２１頁（１９９１）、Ｇｕａｎｄａｌｉｎｉら、「Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ａｎｄ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｉｎ Ｉｎｆａｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ」、Ｅｌｓｅｖｉｏｒ、Ｂｕｔｚら編、Ａｍｓｔｅｒｄａｍ、２５章（１９９３）、Ｌｅｖｉｎｅら、Ｓｅｍ．Ｐｅｄ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．、５．２４３〜２５０（１９９４）；およびＫａｐｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．、８：４８〜８６（１９９５））。

本発明の医薬組成物は、疾患を処置する、緩和させる、および／または予防するために用いることができる。疾患は、癌、自己免疫疾患、血管疾患、細菌感染症、胃炎、胃癌、膠原性大腸炎、炎症性腸疾患、骨粗鬆症、全身性紅斑性狼瘡、食物アレルギー、喘息、および過敏性腸症候群からなる群から選択することができる。

別の実施形態では、組成物は、対照の健康な個体と比べて、ゾヌリンの発現が増大した患者を処置する方法において用いることができる。この場合、治療剤は、アミノ酸ＳＬＩＧＫＶＤＧＴＳＨＶＴＧ（配列番号４８）に対する抗体であることができる。例えば、抗体は、合成阻害ペプチド（配列番号１）によって結合されるタンパク質と共局在する、ＣａＣｏ２細胞中に発現されるタンパク質に結合することができる。抗体は、組換えヒトＰＡＲ−２を発現するヒト細胞またはラット細胞に結合しない。抗体は、ＳＡＭＩ１ではない。

本願に記載された任意のアンタゴニストペプチドおよびアゴニストペプチドについて、１以上の保存的置換を行うことができ、この置換において、アミノ酸は、同様の特性を有する別のアミノ酸と交換されることが理解されるべきである。ある特定のアミノ酸の保存的置換は、ゾヌリンのアゴニストペプチドならびにゾヌリンのアンタゴニストペプチドにおいて行うことができる。例えば、保存的置換は、配列番号１〜４７の任意の１つの配列を有するアゴニストペプチドにおいて行うことができる。保存的置換の例として、限定されないが、Ｇｌｙ⇔Ａｌａ、Ｖａ⇔Ｉｌｅ⇔Ｌｅｕ、Ａｓｐ⇔Ｇｌｕ、Ｌｙｓ⇔Ａｒｇ、Ａｓｎ⇔Ｇｌｎ、およびＰｈｅ⇔Ｔｒｐ⇔Ｔｙｒが挙げられる。保存的アミノ酸置換は、典型的には、約１〜２アミノ酸残基の範囲内に入る。

どのアミノ酸残基が、生物活性または免疫学的活性を無効にすることなく置換され得るかの判定における手引きは、当技術分野で周知のコンピュータ・プログラム、例えば、ＤＮＡＳＴＡＲソフトウェアなどを用いて、またはＤａｙｈｏｆｆら（１９７８）、「Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」（Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．）において見出すことができる。

アミノ酸置換は、１対１のアミノ酸交換として定義される。この置換は、置換されるアミノ酸が、同様の構造および／または化学特性を有する場合、性質において保存的である。保存的交換の例は、ロイシンのイソロイシンもしくはバリンとの置換、アスパラギン酸のグルタミン酸との置換、またはスレオニンのセリンとの置換である。

特に好ましいオリゴペプチド類似体は、保存的である置換、すなわち、アミノ酸の側鎖に関連する、アミノ酸のファミリー内で起こる置換を含む。具体的には、アミノ酸は以下のファミリーに一般に分類される：（１）酸性のアスパラギン酸およびグルタミン酸；（２）塩基性のリシン、アルギニン、ヒスチジン；（３）非極性のアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン；（４）非荷電極性のグリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、スレオニン、およびチロシン；ならびに（５）芳香族アミノ酸のフェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシン。例えば、ロイシンのイソロイシンもしくはバリンとの孤立した置換、アスパラギン酸のグルタミン酸との孤立した置換、スレオニンのセリンとの孤立した置換、またはアミノ酸の構造的に関連したアミノ酸との同様の保存的置換は、生物学的活性に大きな影響を与えないであろうということが、当然予測可能である。

記載した組成物は、１日に１回〜数回投与することができる。ゾヌリンのアゴニストまたはアンタゴニストの典型的な１日用量は、多様であり、様々な要因、例えば、患者の個々の必要量、投与様式、および疾患などに依存するだろう。一実施形態では、ゾヌリンのアンタゴニストは、食事前に投与される。そのような投与の適用には、セリアック病の処置が含まれる。

一般に、ＺＯＴおよび／またはゾヌリンのアゴニストまたはアンタゴニストの１日用量は、１〜１０００ｍｇの活性物質の範囲内となろう。
実施例

タイトジャンクション・アンタゴニストを含む遅延放出粒子の調製
配列番号１のタイトジャンクション・アンタゴニストを含有するベースコートを、２０００ｇの水を混合し、１５ｇのアンタゴニストペプチドを徐々に加えることによって調製した。ペプチドが分散したら、１５ｇのＢａｋｅｒｓ Ｓｐｅｃｉａｌ Ｓｕｇａｒを加えた。全重量を、水を追加して２１０７ｇに調節した。当業者は、Ｂａｋｅｒｓ Ｓｐｅｃｉａｌ Ｓｕｇａｒ以外の結合剤を用いることができることを理解するであろう。適当な結合剤は、典型的には、限定されないが、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えば、グルコースまたはβ−ラクトースなど、トウモロコシ甘味料、天然および合成ゴム、例えば、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムなど、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを含む、薬学的に許容可能な結合剤である。他の適当な結合剤として、薬学的に許容可能な結合剤、例えば、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロース、ポリメタクリレート、ワックスなどが挙げられる。上述の結合剤の混合物も、用いることができる。

完全に溶解させた後、ベースコートを施す。用いるベースコートの量は、所望の腸溶コーティングされたビーズの最終重量によって決定する。上述した量について、１０００ｇの２５／３０メッシュのノンパレルを入れたＷｕｒｓｔｅｒ装置に、以下の条件下で、コーティングが完了するまで、３２７０ｇのベースコートを加えた（３．２７ｇベースコート／１グラムのノンパレルの比）：１３５〜１５０°Ｆ、流動化を維持するよう調節された１０〜２５の処理空気量(Process Air Volume)（ＳＣＦＭ）、３〜１０ｇ／分／ノズルの噴霧速度、および２５ｐｓｉの気圧。

ユードラジット(Eudragit)Ｌ３０Ｄを含有する遅延放出コーティングも調製した。１５ｇのタルクを、５００ｇの水に加え、１０分間勢いよく撹拌した。８５０グラムのユードラジットＬ３０Ｄ（タイプＣ）を、空気を取り込ませることなく、ボルテックス撹拌による混合容器中に、６０メッシュの篩にかけて入れた。次いで３０ｇの医薬品グレートのクエン酸トリエチルを徐々に加え、同様の条件下で１０分間混合し、溶解及び分散が完了するまで混合を続けた。水を加えて、全量を１５００ｇにした。

次いで、Ｗｕｒｓｔｅｒ装置（ベース・コーティングされた粒子を含有）に、以下の条件下で、コーティングが完了するまで、遅延放出コーティングを加えた。１３５〜１５０°Ｆ、流動化を維持するよう調節された１０〜２５の処理空気量（ＳＣＦＭ）、３〜１０ｇ／分／ノズルの噴霧速度、および２５ｐｓｉの気圧。

最終組成は、以下の通りであった。

４〜６％のタイトジャンクション・アンタゴニストペプチド（配列番号１）を含有する遅延放出粒子の安定性試験を行った。上述のように調製した遅延放出粒子を、制御温度（３７℃±０．５℃）および攪拌下、溶解装置中で、０．１％ ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ ８０Ｋを含有する模擬胃液（ＳＧＦ）に１時間曝露した。ビーズをＳＧＦから取り出し、０．１％ ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ ８０Ｋを含有する模擬腸液（ＳＩＦ）に曝露した。試料を浴槽から取り出し、Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−２ ＨＰＬＣ Ｇｕａｒｄ Ｃｏｌｕｍｎ（２０ｍｍ×４．６μｍ、５μｍ）を有する、Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−２ ＨＰＬＣ Ｃｏｌｕｍｎ（１５０ｍｍ×３ｍｍ、５μｍ）による２２０ｎｍでのＨＰＬＣによって分析した。移動相Ａ：９２：８ 水：ＡＣＮ、０．１％ＴＦＡ、移動相Ｂ：ＡＣＮ、０．１％ＴＦＡ。クロマトグラフィー条件を以下に示す。

放出された全タイトジャンクション・エフェクターの割合は、エフェクターの参照標準と比較することによって決定する。

６０分の時間経過にわたって、８％未満の配列番号１のアンタゴニストペプチドが、０．１％ ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ ８０Ｋを含有する模擬胃液（ＳＧＦ）の存在下で放出された。

模擬胃液は、以下のようにして調製することができる。１リットル当たり、以下のものを容器に入れる：２．０グラムの塩化ナトリウム、７．０ｍＬの濃塩酸、および１．０Ｌの水。完全に溶解するまで撹拌する。ｐＨを確認し、希ＨＣｌまたはＮａＯＨを用いて１．２±０．１に調節する。媒体を脱気する。この溶液に、Ｔｗｅｅｎ ８０を０．１％（ｖ／ｖ）まで加える。あるいは、市販のＳＧＦを用い（Ｒｉｃｃａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ、Ｔｅｘａｓ）、Ｔｗｅｅｎ ８０Ｋを加えてもよい。

９０％超の配列番号１のアンタゴニストペプチドが、０．１％ ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ ８０Ｋを含有する模擬腸液（ＳＩＦ）の存在下で、１５分以内に放出され、６０分以内に、本質的にすべてのペプチドが放出された。ＳＩＦは、以下のようにして調製することができる。以下のものを容器に入れる：１．９ｋｇの蒸留水、１３６ｇのリン酸二水素カリウム、および１８．１グラムの水酸化ナトリウム。完全に溶解するまで撹拌する。溶液を１８．０ｋｇの水で希釈する。ｐＨを確認し、希ＨＣｌまたはＮａＯＨを用いて６．８±０．１に調節する。媒体を脱気する。この溶液に、Ｔｗｅｅｎ ８０Ｋを０．１％（ｖ／ｖ）まで加える。あるいは、市販のＳＩＦを購入し（Ｒｉｃｃａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ、Ｔｅｘａｓ）、Ｔｗｅｅｎ ８０Ｋを０．１％（ｖ／ｖ）まで加えてもよい。

タイトジャンクション・エフェクターの遅延放出のための、多粒子腸溶コートビーズ製剤の調製
本実施形態は、複数（例えば、２、３、４、５など）の異なる腸溶コートビーズの組合せのカプセル化(encapsulation)を提供する。任意の量の各種類のビーズを、カプセル化することができる。いくつかの実施形態では、２種の異なるビーズを、任意の割合でカプセル化することができる。特定の一実施形態では、ほぼ等しい割合の２種のビーズを、カプセル化することができる。それぞれのビーズは、任意の適当なコーティング材料を用いて、任意の適当なコーティングレベルでコーティングすることができる。いくつかの実施形態では、２種のビーズは、ユードラジットＬ３０Ｄ５５を用いて、２０および７０％のコーティングレベルでコーティングすることができる。２０％および７０％のコーティングレベルを含む製剤により、１以上のタイトジャンクション・エフェクター（例えば、ＡＴ１００１）の、十二指腸および空腸の両方への遅延放出が可能になる。重量パーセントの計算に関して、重量測定は、２種の物質を合わせる前に行う。例えば、７０％のコーティングレベルは、１００ｇのビーズへの７０ｇのコーティングポリマーの添加である。

ユードラジットＬ３０Ｄは、ｐＨ＞５．５で分解し始めるポリマーコーティング剤である。したがって、ユードラジットＬ３０Ｄ５５でコーティングされたビーズは、胃を通過する際は、無傷のままであるが、十二指腸に入るとすぐに溶解し始めるように設計される。これは、２０％のユードラジットＬ３０Ｄ５５でコーティングされたビーズの場合である。７０％のユードラジットＬ３０Ｄ５５でコーティングされたビーズは、ｐＨ６．０の溶解媒体中で約３０分後に溶解し、空腸に入るとすぐに放出を開始するように設計される。図１は、この実施形態に従って調製したビーズの溶解特性を示す。

本質的に、ビーズは、２ステップで調製することができる。第１に、薬物を、ノンパレルビーズ上に層状に重ねる。次いで、薬物を層状に重ねたビーズを、所望のレベルまで、Ｌ３０Ｄ５５で腸溶コーティングすることができる。

２０％未満のユードラジットＬ３０Ｄ５５のコーティングは、ｉｎ ｖｉｔｒｏで模擬胃液（ｐＨ１．１）中で溶解し始めることが見出されたため、胃中で溶解しない状態では残存しないであろう。７０％超のコーティングは、コーティング材料の制限のため可能ではなかった。

一実施形態では、ビーズは、１：１のポリメタクリル酸と酢酸エチルである、ポリメタクリレート（例えば、ユードラジットＬ３０Ｄ５５）であることができる。

いくつかの実施形態では、例えば、４０℃／７５％相対湿度の条件で測定した場合の、タイトジャンクション・エフェクターの安定性（化学的安定性および溶解安定性の両方）を改善する目的で、ＡＴ１００１腸溶コートビーズ製剤を最適化するよう様々なパラメーターを変更することができる。

いくつかの実施形態では、１以上の追加のコーティングを、本発明の製剤に施すことができる。例えば、１以上のシールコートおよび／またはトップコートを用いることができる。特定の実施形態では、シールコートを薬物層に施すことができる。このタイプの実施形態では、コア粒子は、タイトジャンクション・エフェクター含有層でコーティングすることができ、これを、シーリングコートでさらにコーティングすることができる。シーリングコートを施した後、１以上の遅延放出コーティング（例えば、ユードラジットＬ３０Ｄ５５）を施すことができる。遅延放出コーティングを施した後、シーリングコートを施すことができる。当業者に知られている任意の適当なシールコートを用いることができる。適当なシールコートの例として、限定されないが、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、例えば、Ｓｅｐｐｉｆｉｌｍ（商標）、Ｏｐａｄｒｙ（登録商標）ＡＭＢ（ポリビニルアルコールおよびレシチン）、およびＫｏｌｌｉｃｏａｔ（登録商標）Ｐｒｏｔｅｃｔ（ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールコポリマーおよびポリビニルアルコール）などが挙げられる。当業者に知られている、任意の他の適当なシールコートを用いることができる。

いくつかの実施形態では、本発明の製剤は、ビーズの外側周囲に、トップコートを含むことができる。これらの製剤は、シーリングコートも含むことができる。例えば、このタイプの実施形態は、コア粒子、薬物層、シーリングコート、ポリマーコートおよびトップコートを含んでもよい。

本発明のいくつかの実施形態では、薬物層は、結合剤として非還元糖（例えば、トレハロース）を含むことができる。このタイプの製剤は、コア粒子、トレハロースも含むタイトジャンクション・エフェクター含有層、および遅延放出ポリマー層を含んでもよい。そのような製剤は、上述したように、タイトジャンクション・エフェクター含有層上のシール層、および／または遅延放出層上のトップコート層をさらに含んでもよい。

遅延放出コート（例えば、ユードラジットＬ３０Ｄ５５を含むコート）は、当技術分野で知られている任意の技法を用いて製剤化することができる。いくつかの実施形態では、遅延放出コーティングは、タルクを含むことができる。タルクは、コーティングを施すのに用いられる溶液の、約０．５重量％〜約１５重量％、約１重量％〜約１５重量％、約２重量％〜約１５重量％、約３重量％〜約１５重量％、約４重量％〜約１５重量％、約５重量％〜約１５重量％、約６重量％〜約１５重量％、約７重量％〜約１５重量％、約８重量％〜約１５重量％、約９重量％〜約１５重量％、約１０重量％〜約１５重量％、約１１重量％〜約１５重量％、約１２重量％〜約１５重量％、約１３重量％〜約１５重量％、約１４重量％〜約１５重量％として存在することができる。したがって、遅延放出コートを施すのに用いられる溶液は、約０．５重量％、約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約９重量％、約１０重量％、約１１重量％、約１２重量％、約１３重量％、約１４重量％または約１５重量％のタルクを含むことができる。

本発明の製剤は、すべて非限定的な例として、遅延放出コートの施用後、任意のトップコートの施用後、薬物層の後、または腸溶コートの代わりに、ビーズに施すことのできる１以上の添加剤をさらに含むことができる。そのような添加剤は、所望の溶解特性または他の特性を付与する１以上の剤を含むことができ、その非限定的な例がＡｓｇｈａｒら、Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ（２００６）、９（３）、３２７〜３３８頁において開示されている。そのような例には、様々なｐＨ依存放出（ユードラジットＬ−１００、ユードラジットＳ−１００、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）、セラック、エチルセルロースなど）、時間依存放出（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、微結晶セルロース、ラクトース／ベヒン酸(behinic acid)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、または細菌に依存する放出（例えば、キトサン、ペクチン、グアーガム、コンドロイチン硫酸、アミロース、アルギン酸塩）を得る手段が含まれる。他の添加剤として、混合物をより均一にするための剤、例えば、二酸化ケイ素またはシロイドを挙げることができる。上記のすべては、当技術分野で知られている剤の非限定的な例である。

本明細書において述べた、すべての刊行物、特許および特許出願は、本発明が関係する分野の当業者の技術のレベルを示しており、それぞれの個々の刊行物、特許または特許出願について、具体的に個々に参照により組み込まれると示した場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

本発明の一実施形態に従って調製した２ビーズ製剤からｐＨ６の溶解媒体中で溶解した、時間の関数としての、放出されたタイトジャンクション・エフェクターの百分率のグラフである。

Claims (59)

1. コア粒子、
   前記コア粒子上のベースコートであって、１以上のタイトジャンクション・アンタゴニストおよび／または１以上のタイトジャンクション・アゴニストを含むベースコート、ならびに
   前記ベースコート上に配置された遅延放出コーティングであって、胃液中で実質的に安定である遅延放出コーティング
   を含む組成物。
2. 前記ベースコートがタイトジャンクション・アンタゴニストを含む、請求項１に記載の組成物。
3. 前記ベースコートがタイトジャンクション・アゴニストを含む、請求項１に記載の組成物。
4. 治療剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
5. 前記遅延放出コーティングが、酸性環境中で実質的に安定であり、中性付近からアルカリ性の環境中で実質的に不安定である腸溶剤を含む、請求項１に記載の組成物。
6. 前記遅延放出コーティングが、トリステアリン、トリオレイン、トリカプリリン、トリカプリン、トリミリスチン、トリパルミチンおよびトリラウリンからなる群から選択される、１以上のトリグリセリド、ならびにコーティング支持剤を含む、請求項１に記載の組成物。
7. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、配列番号１を含むペプチドを含む、請求項２に記載の組成物。
8. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、配列番号２を含むペプチドを含む、請求項３に記載の組成物。
9. 前記治療剤が前記ベースコート中に配置される、請求項４に記載の組成物。
10. 前記治療剤が前記コア粒子中に配置される、請求項４に記載の組成物。
11. 前記治療剤が、グルコース代謝剤、抗生物質、抗腫瘍剤、抗高血圧剤、抗てんかん剤、中枢神経系剤、および免疫系抑制剤からなる群から選択される、請求項４に記載の組成物。
12. 前記グルコース代謝剤が、インスリン、レパグリニド、アセトヘキサミド、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、ミグリトール、およびグリメピリドからなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
13. 錠剤、カプセル剤または粉末サッシェ中に存在する、複数のコーティングされたコア粒子をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
14. 前記遅延放出コーティングがユードラジットＬ化合物を含む、請求項１に記載の組成物。
15. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、ＺＯＴ受容体アンタゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アンタゴニストである、請求項２に記載の組成物。
16. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、ＺＯＴ受容体アゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アゴニストである、請求項３に記載の組成物。
17. 胃腸の炎症を処置する方法であって、その処置を必要とする対象に、請求項１に記載の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法。
18. 医師によって胃腸の炎症について検査され、胃腸の炎症処置のための療法の必要があると診断されたヒトにおいて、胃腸の炎症を処置するための方法であって、前記ヒトに、請求項１に記載の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法。
19. 医師によって糖尿病について検査され、糖尿病のための療法の必要があると診断されたヒトにおいて、糖尿病を処置するための方法であって、前記ヒトに、請求項１２に記載の組成物を含む医薬剤形を経口的に投与することを含む方法。
20. 第１のコア粒子、
    前記第１のコア粒子上の第１のベースコートであって、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含む第１のベースコート、および
    前記第１のベースコート上に配置され、第１の遅延放出粒子を形成する第１の遅延放出コーティングであって、胃液中で実質的に安定である第１の遅延放出コーティング、
    第２のコア粒子、
    前記第２のコア粒子上の第２のベースコートであって、１以上のタイトジャンクション・エフェクターを含む第２のベースコート、および
    前記第２のベースコート上に配置され、第２の遅延放出粒子を形成する第２の遅延放出コーティングであって、胃液中で実質的に安定である第２の遅延放出コーティング
    を含む組成物であって、
    前記第１の遅延放出コーティングおよび前記第２の遅延放出コーティングが、異なる時間にわたって放出を遅延させる組成物。
21. 前記第１の遅延放出粒子中に存在する前記タイトジャンクション・エフェクターの約半分が、腸液への曝露後、約５分間〜約１０分間放出され、前記第２の遅延放出粒子中に存在する前記タイトジャンクション・エフェクターの約半分が、腸液への曝露後、約１２分間〜約１８分間放出される、請求項２０に記載の組成物。
22. 前記第１の遅延放出粒子中に存在する前記タイトジャンクション・エフェクターが、前記組成物中の全タイトジャンクション・エフェクターの約６０重量％〜約９０重量％を構成し、前記第２の遅延放出粒子中に存在する前記タイトジャンクション・エフェクターが、前記組成物中の全量のタイトジャンクション・エフェクターの約１０重量％〜約４０重量％を構成する、請求項２０に記載の組成物。
23. 前記第１の遅延放出粒子が、タイトジャンクション・アンタゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
24. 前記第１の遅延放出粒子が、タイトジャンクション・アゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
25. 前記第２の遅延放出粒子が、タイトジャンクション・アンタゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
26. 前記第２の遅延放出粒子が、タイトジャンクション・アゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
27. 前記第１の遅延放出粒子が、配列番号１を含むタイトジャンクション・アンタゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
28. 前記第１の遅延放出粒子が、配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
29. 前記第２の遅延放出粒子が、配列番号１を含むタイトジャンクション・アンタゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
30. 前記第２の遅延放出粒子が、配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストを含む、請求項２０に記載の組成物。
31. 前記第１の遅延放出粒子および／または前記第２の遅延放出粒子が、治療剤をさらに含む、請求項２０に記載の組成物。
32. 胃腸の炎症を処置する方法であって、その処置を必要とする患者に、請求項２０に記載の組成物を経口的に投与することを含む方法。
33. 複数の第１の遅延放出粒子を含む、請求項２０に記載の組成物。
34. 複数の第２の遅延放出粒子を含む、請求項２０に記載の組成物。
35. 複数の第１の遅延放出粒子および複数の第２の遅延放出粒子を含む、請求項２０に記載の組成物。
36. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、ＺＯＴ受容体アンタゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アンタゴニストである、請求項２３に記載の組成物。
37. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、ＺＯＴ受容体アゴニストおよび／またはゾヌリン受容体アゴニストである、請求項２４に記載の組成物。
38. コア粒子、
    前記コア粒子上のベースコートであって、配列番号１を含むタイトジャンクション・アンタゴニストを含むベースコート、および
    前記ベースコート上に配置された遅延放出コーティングであって、胃液中で実質的に安定である遅延放出コーティング
    を含む組成物。
39. 前記コア粒子が、大きさ約２５〜約３０メッシュである、請求項３８に記載の組成物。
40. 前記ベースコートが、ベイカー糖およびトレハロースからなる群から選択される糖を含む、請求項３９に記載の組成物。
41. 前記遅延放出コーティングがユードラジットＬ３０Ｄを含む、請求項４０に記載の組成物。
42. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、前記組成物の約０．１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％を構成する、請求項３８に記載の組成物。
43. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、前記組成物の約１〜約２０ｗｔ％を構成する、請求項３８に記載の組成物。
44. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、前記組成物の約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％を構成する、請求項３８に記載の組成物。
45. 前記タイトジャンクション・アンタゴニストが、前記組成物の約４〜約６ｗｔ％を構成する、請求項３８に記載の組成物。
46. コア粒子、
    前記コア粒子上のベースコートであって、配列番号２を含むタイトジャンクション・アゴニストを含むベースコート、および
    前記ベースコート上に配置された遅延放出コーティングであって、胃液中で実質的に安定である遅延放出コーティング
    を含む組成物。
47. 前記コア粒子が、大きさ約２５〜約３０メッシュである、請求項４６に記載の組成物。
48. 前記ベースコートが、ベイカー糖およびトレハロースからなる群から選択される糖を含む、請求項４７に記載の組成物。
49. 前記遅延放出コーティングがユードラジットＬ３０Ｄを含む、請求項４８に記載の組成物。
50. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、前記組成物の約０．１ｗｔ％〜約２０ｗｔ％を構成する、請求項４６に記載の組成物。
51. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、前記組成物の約１〜約２０ｗｔ％を構成する、請求項４６に記載の組成物。
52. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、前記組成物の約１ｗｔ％〜約１０ｗｔ％を構成する、請求項４６に記載の組成物。
53. 前記タイトジャンクション・アゴニストが、前記組成物の約４〜約６ｗｔ％を構成する、請求項４６に記載の組成物。
54. 前記組成物が治療剤をさらに含む、請求項４６に記載の組成物。
55. 前記治療剤が、グルコース代謝剤、抗生物質、抗腫瘍剤、抗高血圧剤、抗てんかん剤、中枢神経系剤、および免疫系抑制剤からなる群から選択される、請求項５４に記載の組成物。
56. 前記グルコース代謝剤が、インスリン、レパグリニド、アセトヘキサミド、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、ミグリトール、およびグリメピリドを含む群から選択される、請求項５５に記載の組成物。
57. 免疫原をさらに含む、請求項４６に記載の組成物。
58. 前記免疫原がワクチンである、請求項５７に記載の組成物。
59. 前記ワクチンが、ペプチド・ワクチン、弱毒微生物ワクチン、および弱毒ウイルスワクチンからなる群から選択される、請求項５８に記載の組成物。

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