JP2009512844A5 - - Google Patents
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Claims (17)
- サンプル中のアグリカンおよび／またはアグリカン由来フラグメントを検出または定量的に決定するためのイムノアッセイ法であって、前記サンプルを、ケラタン硫酸鎖を有するアグリカンのＧ２ドメインに対する特異的な結合親和性を有する免疫結合パートナーと接触させる工程と、前記免疫結合パートナーの特異的な結合の存在または量を決定する工程とを含む方法。
- 前記Ｇ２ドメインがケラタン硫酸鎖を有する場合、および前記Ｇ２ドメインが組換え型で発現される場合の両方において、前記免疫結合パートナーが、アグリカンの前記Ｇ２ドメインに対する特異的結合親和性を有する、請求項２に記載の方法。
- 前記免疫結合パートナーを捕捉剤または検出剤として使用するサンドイッチイムノアッセイとして実施される、請求項１または請求項２に記載の方法。
- 前記免疫結合パートナーを捕捉剤として使用し、前記免疫結合パートナーを検出剤として使用するサンドイッチイムノアッセイとして実施される、請求項３に記載の方法。
- 前記捕捉剤が固体表面上に固定化された前記免疫結合パートナーによって提供され、前記検出剤が検出可能な標識を有する前記特異的結合パートナーによって提供される、請求項４に記載の方法。
- （ａ）前記免疫結合パートナーが固体表面に固定化され、前記サンプルと前記Ｇ２ドメインもしくはそれらの抗体結合部分とを含む標識された競合剤と共にインキュベートされる競合イムノアッセイ、または（ｂ）前記Ｇ２ドメインもしくはそれらの抗体結合部分を含む競合剤が固体表面に固定化され、前記サンプルおよび標識された前記免疫結合パートナーと共にインキュベートされる競合イムノアッセイとして実施される、請求項１または請求項２に記載の方法。
- （ａ）前記免疫結合パートナーを使用し、（ｂ）ＦＦＧＶＧ．．またはＡＲＧＳ．．を含むＮ末端アミノ酸配列に対する特異的結合親和性を有する免疫結合パートナーを使用するサンドイッチイムノアッセイとして実施される方法であって、前記アッセイにおいて（ａ）または（ｂ）の一方が捕捉剤として使用され、そして（ａ）および（ｂ）のうち他方が検出剤として使用される、請求項１または請求項２に記載の方法。
- 前記免疫結合パートナー（ｂ）が、ハイブリドーマ細胞系ＡＴＣＣ ＨＢ１１６７１によって生成される抗体ＡＦ−２８である、請求項６に記載の方法。
- 前記サンプルが、滑液、血清、または、軟骨組織片もしくは軟骨細胞の培養物由来の馴化培地のサンプルである、あるいは滑液、血清、または、軟骨組織片もしくは軟骨細胞の培養物由来の馴化培地を含有するサンプルである、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- サンプル中の軟骨代謝回転のマーカーを検出または定量するためのインビトロにおける方法であって、アグリカンのＧ２ドメインがケラタン硫酸鎖を有する場合、および前記Ｇ２ドメインが組換え型で発現される場合の両方において、前記サンプルを、前記Ｇ２ドメインに対する特異的結合親和性を有する免疫結合パートナーと接触させる工程と、前記免疫結合パートナーの特異的結合の存在または量を決定する工程とを含む方法。
- 前記サンプルが、患者由来のサンプルであり、前記決定された結合レベルを軟骨破壊疾患状態の不在および／または存在に対応する較正値と比較する工程をさらに含む、請求項９に記載の方法。
- ケラタン硫酸鎖を有するアグリカンのＧ２ドメインに対する特異的結合親和性を有する免疫結合パートナー。
- 前記Ｇ２ドメインがケラタン硫酸鎖を有する場合、および前記Ｇ２ドメインが組換え型で発現される場合の両方において、アグリカンの前記Ｇ２ドメインに対する特異的結合親和性を有する請求項１１に記載の免疫結合パートナー。
- モノクローナル抗体または特異的結合特性を有するそのフラグメントの形態である請求項１１または請求項１２に記載の免疫結合パートナー。
- 請求項１３に記載のモノクローナル抗体を発現するハイブリドーマ細胞系。
- 組換えによって発現される、請求項１１または請求項１２に記載の免疫結合パートナー。
- さらなる抗アグリカン抗体と、
抗アグリカン抗体に結合するペプチド競合剤とのうちの１つ以上と、
任意選択的に、洗浄試薬、バッファー、停止試薬、酵素標識、酵素標識基質、抗マウス抗体、較正標準物質および取扱説明書のうちの１つ以上と、
請求項１１または請求項１２に記載の免疫結合パートナーと
を含むイムノアッセイキット。
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