JP2009509946A

JP2009509946A - リーシュマニア症及びトリパノソーマ症の治療のためのニトロビニルフラン誘導体を含有する医薬組成物

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Publication number: JP2009509946A
Application number: JP2008531517A
Authority: JP
Inventors: カンシオ、ニロ、ラモンカスタネード; ロドリゲス、セルジオシフォンテス; フィダルゴ、リアネットモンゾテ; ヘルナンデス、ヤミレロペス; アルバレス、アナ、マルガリータモンタルボ; ボウルサック、ファン、フランシスコインファンテ; マンソ、エルベリオエルセオオラサバル
Original assignee: セントロデバイオアクティボスクイミコス
Priority date: 2005-09-26
Filing date: 2006-09-18
Publication date: 2009-03-12
Also published as: CN101272778A; ATE448783T1; EP1941877B1; ES2336606T3; CU23506B6; BRPI0616340A2; DE602006010591D1; US20090042978A1; WO2007033616A1; EP1941877A1

Abstract

本発明は、皮膚型、粘膜皮膚型及び内臓型リーシュマニア症並びにトリパノソーマ症の治療のために、ＬｅｉｓｈｍａｎｉａおよびＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉの種々の株に関連する新しい製品ファミリーの代表の作用に関係する。上記製品は、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｍｅｘｉｃａｎａａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓ，Ｌ．ｄｏｎｏｖａｎｉｉｎｆａｎｔｕｍ，Ｌ．ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓ及びＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉに関連して、実験動物及びヒトにおけるインビトロ試験において既市販の医薬品より大きな有効性を示した。該ファミリーの製剤の治療効果は、種々の投与経路を使用して上記疾患の治療に使用してヒト及び動物において立証されている。

Description

本発明はヒト又は動物の健康に関係し、一般的にリーシュマニア症及びトリパノソーマ症の病原体に対して生物学的活性を持つ化合物のファミリーに関係する。

リーシュマニア症は、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ属の寄生原虫により引き起こされる疾患である。この属は、ヒト及び動物対して病原性を持つ約２０種を含んでいる。この疾患は、８８カ国において記述されており、毎年１．５〜２百万人の新たな症例が報告されている。世界的に１２百万人が罹患し、毎年３５０百万人が危険に曝されていると推定されている（ＣＤＣ．ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｐｄ．ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｄｐｄｘ．，ＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．ＦａｃｔＳｈｅｅｔ１．Ａｐｒｉｌ２００４）。

３つの臨床型（ｃｌｉｎｉｃａｌｆｏｒｍｓ）がある。
皮膚リーシュマニア症：この皮膚型は最も一般的であり、症例の９０％を占める。治癒するまでに数ヶ月から数年を要する皮膚潰瘍が典型的である。二次的細菌又は真菌感染がしばしば一次病巣を悪化させる。

内臓リーシュマニア症：肝臓及び脾臓が腫大し、骨髄が障害され、そして患者は貧血症及び進行性体重減少になる。治療を受けなかった大部分及び遅い段階で治療を受けた患者の１５〜２０％は死亡する。

皮膚粘膜リーシュマニア症：一次の皮膚病巣が治癒した後数ヶ月から数年して、或いは皮膚潰瘍が未だ存在するときでも、寄生虫が口、鼻及び咽頭の粘膜に分布する。軟組織、主に軟骨が損傷を受け、顔面の奇怪な変形（ｍｏｎｓｔｒｏｕｓｄｅｆｏｒｍｉｔｉｅｓ）を生じ、最終的に喉頭軟骨が破壊された後呼吸障害により死亡する。

後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）では、患者が長期間の治療を必要とし再発の頻度が高いので、この疫学的状況を悪化している（ＡｌｖａｒＪ，ｅｔ．ａｌ．ＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＲｅｖ１９９７（１０）２９８−３１９）。

５価アンチモン誘導体は、５０年の間第一線の（ｔｈｅｆｉｒｓｔｌｉｎｅ）薬物である。今日、Ｐｅｎｔｏｓｔａｍ^{（登録商標）}（スチボグルコン酸ナトリウム）及びＧｌｕｃａｎｔｉｍｅ^{（登録商標）}（アンチモン酸メグルミン）が、医療において使用されている医薬形態である。これらは総ての種に対して有効ではない；Ｌ．ａｅｔｈｉｏｐｉｃａ及びＬ．ｍａｊｏｒは最も感受性が低い。さらに、従来感受性であった種の中で耐性の株の数が増加している（ＡｐａｒｉｃｉｏＰ，ｅｔ．ａｌ．

ＥｎｆｅｒｍｉｎｆｅｃｃＭｉｃｒｏｂｉｏｌＣｌｉｎ２００３；２１（１０）：５７９−９４）。５価アンチモン誘導体に関連する副作用は、しばしば治療中止の原因となった。無症候性の膵炎（３１％）、心臓毒性（１５％）及び腎毒性（５％）は主な副作用である。リーシュマニアも併せて感染したＡＩＤＳ患者は膵炎に対して著しく敏感である（ＡｌｖａｒＪ，ｅｔ．ａｌ．ＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＲｅｖ１９９７（１０）：２９８−３１９）。

アンホテリシンＢ及びペンタミジンはリーシュマニア症の治療のための二次的な（ｔｈｅｓｅｃｏｎｄｌｉｎｅ）薬物である。それらは、５価アンチモン耐性の症例のための予備である。二種のより毒性が少なく、有効なアンホテリシンＢリピッド製剤（Ａｌｐｈｏｃｉｌ^{（登録商標）}及びＡｍＢｉｓｏｎｅ^{（登録商標）}）が開発されたが、罹患母集団の大部分は治療費を支払う余裕が無い（ＡｐａｒｉｃｉｏＰ，ｅｔ．ａｌ．

ＥｎｆｅｒｍｉｎｆｅｃｃＭｉｃｒｏｂｉｏｌＣｌｉｎ２００３；２１（１０）：５７９−９４）。

Ｃｈａｇａｓ病としても知られるアメリカのトリパノソーマ症は、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉ感染により生じるラテンアメリカの風土病である。その結果として、毎年約５０，０００人が死亡する。毎年、２０，０００，０００人がこの疾患に罹患していると推定され、さらに１００，０００，０００人は病気にかかる危険がある。吸血性の昆虫の汚染された糞が人々に寄生虫を伝達する原因である（Ａｎｏｎｙｍｏｕｓ，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｕｎｌ．ｅｄｕ．ａｒ／ｅｊｅ．ｐｈｐ？ＩＤ＝１８３４，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ１５，２００５）。

過去６０年間に、構造的に異なる数百の化合物がＴ．ｃｒｕｚｉに対して試験された。しかし、そのうちわずか数個が比較的成功して前臨床段階をパスした。ラテンアメリカにおいて二つの殺トリパノソーマ薬が承認された：ｎｉｆｕｒｔｉｍｏｘ（１９７２−１９９２）は最終的に市場から回収され、ベンズニダゾールは１９７５年から臨床上使用できるようになった（ＰａｕｌｉｎｏＡ，ｅｔａｌ．ＭｉｎｉＲｅｖＭｅｄＣｈｅｍ２００５；５（５）：４９９−５１９；ＬｏｃｋｍａｎＪＷ，ＨａｍｉｌｔｏｎＡＤＣｕｒｒＭｅｄＣｈｅｍ２００５；１２（８）：９４５−５９）。

発明の説明
本発明はβ‐ニトロビニルフラン化学ファミリーの代表の下記６個のいずれかを含有する医薬組成物の作用を記述する：
２−（２−ニトロビニル）−フラン
２−ブロモ−５−（２−ニトロビニル）−フラン
２−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
２−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン
２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン

これらの医薬組成物は、β−ニトロビニルフラン誘導体の他に、医薬品に使用するビヒクル、賦形剤、溶媒及びアジュバントを含有する。溶媒は、ヒマワリ油、ワセリン又はＭｙｇｌｉｏｌ８１０などの無極性溶媒が好ましい。これらの医薬組成物はβ−ニトロビニルフラン誘導体を０．０１から１０％の範囲の濃度で含有する。正確な組成は、個別の化合物及び投与経路に依存する。局所又は全身の特定の投与経路の選択は、疾患の臨床型により決定する。トリパノソーマ症並びに粘膜皮膚型及び内蔵型のリーシュマニア症は、薬物の全身的分布を確実にする経路により治療される。これに対して、皮膚型リーシュマニア症及び上記臨床型のリーシュマニア症の皮膚症状は局所及び全身の両経路により治療される。

化合物の活性は、皮膚型、粘膜皮膚型及び内蔵型のリーシュマニア症の原因となる代表的種である３つのＬｅｉｓｈｍａｎｉａの種に対して試験された。また、Ｃｈａｇａｓ病の病原体であるＴｒｉｍａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉに対しても試験された。

実施例１：前鞭毛型Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａに対するβ−ニトロビニルフラン誘導体のインビトロ活性
前鞭毛虫型のＬ．ｍｅｘｉｃａｎａａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓ，Ｌ．ｄｏｎｏｖａｎｉｉｎｆａｎｔｕｍ及びＬ．ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓに対する平均阻害濃度（ＣＩ５０％）を、ＢｏｄｌｅｙＡＬｅｔａｌ（ＪＩｎｆｅｃｔＤｉｓ１９９５；１７２（４）：１１５７−９）により記述されている方法に従って測定した。殺寄生虫最低濃度（ＣＰ１００，培地中の総ての寄生虫の運動能を消失させることができる最低濃度）も測定した。アンホテリシンＢ及びＧｌｕｃａｎｔｉｍｅ^{（登録商標）}は対照薬として試験された。

β−ニトロビニルフラン誘導体は総てかなり低い濃度で寄生虫の増殖を阻害した。同様に、それらを培地に加えた後最初の２〜３時間以内に低濃度において寄生虫死を生じた。アンホテリシンＢはβ−ニトロビニルフランよりも高い活性であったが、Ｇｌｕｃａｎｔｉｍｅ^{（登録商標）}は有意に活性が低かった。

記号解：
Ａ：２−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｂ：２−ブロモ−５−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｃ：２−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｄ：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｅ：２−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン
Ｆ：２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン

実施例２：Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉに対するインビトロ活性
β−ニトロビニルフラン誘導体のインビトロ活性を、ラット筋芽細胞系の中で増殖した錘鞭毛型Ｔ．ｃｒｕｚｉに対して試験した。殺寄生虫最低濃度（培地中の総ての寄生虫を不動化する最低濃度）及び平均阻害濃度（非処理対照培地中に認められる寄生虫数の５０％へ減数する濃度）をＢｕｃｋｎｅｒの方法（ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒ１９９６；４０（１１）：２５９２−７）にしたがって測定した。この実験結果は、試験化合物がベンゾインダゾールよりも優れるインビトロ殺寄生虫活性を有することを明らかにした。

記号解：
Ａ：２−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｂ：２−ブロモ−５−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｃ：２−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｄ：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｅ：２−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン
Ｆ：２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン

実施例３：毒性試験
β−ニトロビニルフラン誘導体の比較毒性試験を実施するために、インビボ抗リーシュマニア試験に使用されるのと同じ動物モデルを使用した。この目的に使用した組成物の主な賦形剤はヒマワリ油であった。それぞれのβ−ニトロビニルフラン誘導体及びアンホテリシンＢの平均致死量（ＬＤ５０）は、雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（体重１８〜２０ｇ）において、１回腹腔内に注射して評価した。最高非致死用量（ＬＤ０）は用量−死亡曲線から算出した。また、最大耐容量（ＭＴＤ，死亡を生ぜず、また最初の体重から１０％を越える体重減少を生じない最大投与量）も、１４日間１２時間毎又は２４時間毎に腹腔内に反復投与することにより測定した。結果は、β−ニトロビニルフラン誘導体は比較的広範囲のＬＤ５０を有し、アンホテリシンＢより優れていることを示した。今回の一連の実験の間に測定されたＭＴＤから、インビボ抗リーシュマニア活性の試験のために適切な投与量を選ぶことができた。

記号解：
Ａ：２−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｂ：２−ブロモ−５−（２−ニトロビニル）−フラン
Ｃ：２−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｄ：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン
Ｅ：２−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン
Ｆ：２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン

実施例４：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランによる実験的皮膚型リーシュマニア症の治療。早期段階の病巣が２４時間毎に治療された。
Ｂａｌｂ／ｃマウスをその足蹠の皮内にＬ．ｍ．ａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓ前鞭毛虫を注射して実験的に感染させ、６週間後に腹腔内経路により試験化合物でマウスを治療した。製品２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランは５ｍｇ／Ｋｇの用量で投与し、２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランは５０ｍｇ／Ｋｇの用量で投与し、アンホテリシンＢは１ｍｇ／Ｋｇで投与した。動物には１４日間毎日投与した。β−ニトロビニルフラン誘導体の賦形剤として使用したＭｉｇｌｙｏｌ８１０を、同様に一群のマウスに投与した。全く治療を受けない感染マウスの一群を、対照として含めた。

病巣拡大曲線（図１）は、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン又は２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランのいずれかにより治療されたマウスでは、治療の最初の週の間で病巣拡大が最小であることを示した。２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランで治療された動物は病変サイズの若干の減少を示した。試験群のその週の病巣の拡大は他の群に比較して統計的に少なかった。治療の第二週の間の拡大率は総ての実験群においてほぼ同じであった。しかし、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランによる治療により第一週に生じた相違は、治療終了後さらに２週間続いた。アンホテリシンＢで治療されたマウスの群は対照群に類似する経過であった；しかし、治療中止後第一週の間、病巣拡大率の著しい減少を示した。

実施例５：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランによる実験的皮膚リーシュマニア症の治療。早期段階の病巣が１２時間毎に治療された。
実験は、本質的に上記の方法に類似する方法で行われた。しかし、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランを２ｍｇ／Ｋｇの用量で投与し、２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランを１００ｍｇ／Ｋｇの用量で投与した。治療は腹腔内経路で投与したが、２４時間毎でなく１２時間毎であった。

２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランで治療されたマウスの病巣は、治療の第一週の間減少し（図２）、対照マウスよりも統計的に小さかった（Ｐ＜０．００１）。次の週、病巣は対照と類似の速度で大きくなり、そして次の週、病変拡大速度の減少が認められた。治療終了の７日後、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランで治療したマウスは対照より統計的に（Ｐ＜０．０５）小さい病変を示した。

２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン又は２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランのいずれかで治療されたマウスの病巣拡大速度は、対照に比較して有意に小さかった。同様に、両製品はアンホテリシンＢよりも高い活性を示した。

実施例６：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランによる実験的皮膚リーシュマニア症の治療。慢性病変を１２時間毎に治療した。
感染後１８週の慢性リーシュマニア病巣をマウスに作った。病巣は潰瘍化し、厚い痂皮で覆われていた。感染した足の甲−底方向（ｄｏｒｓｏ−ｐｌａｎｔａｒ）の平均径は１．２３±０．２４ｃｍであり側方向（ｌａｔｅｒａｌ）の径は１．２４±０．１９ｃｍであった。その時点において、１日おきに１日２回の２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン２ｍｇ／Ｋｇ；２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン５０ｍｇ／Ｋｇ又はアンホテリシンＢ５ｍｇ／Ｋｇのいずれかによる治療を始めた。実験には、非治療感染マウスにより構成された対照群も含めた。薬物は総て腹腔内経路により１４日間投与された。

２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランによる治療の第一週の間、感染足の甲−底方向の径の減少を示し（図３）、それは対照群と差があった（Ｐ＜０．０５）。これらのマウスの病巣の側方向の径も減少を示したが、対照マウスの径に近似していた（Ｐ＞０．０５）。２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランは、慢性病変に対して有効性は認められなかった。アンホテリシンＢは、甲−底方向の径も側方向の径も対照群の病巣と統計的に差がなかったので（Ｐ＞０．０５）、有効でなかった。

治療終了時まで（図４）、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランにより治療されたマウスは病巣サイズの減少を示した。これらのマウスの病巣は、足の甲−底方向の径（Ｐ＜０．０５）及び側方向の径（Ｐ＜０．０１）の両者において対照に対して有意に異なった。またこれらのマウスはアンホテリシンＢで治療したマウスとも異なった（Ｐ＜０．０５）。これに対して、２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランによる治療は効果的でなかった。

アンホテリシンＢにより治療された動物では、対照と同様に足の甲−底の径は増加した（Ｐ＞０．０５）。アンホテリシンＢ治療マウスの病変において側方向の径は減少したが、この変化は対照において認められた変化と差がなかった（Ｐ＞０．０５）。

対照マウスが主に足の甲−底方向の径でその病変を増加させていることを図は示している。興味あることに、試験薬物の治療効果は側方向の径に関してより明瞭である。

Ｌ．ｍ．ａｍａｚｏｎｅｎｓｉｓを接種されたＢａｌｂ／ｃマウスに発症した実験的皮膚リーシュマニア症の生物モデルにおいて実証されたように、この試験により、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランがＬｅｉｓｈｍａｎｉａに対してインビボ活性を持つことが示された。他方、２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランは高用量が必要であったが、実験的疾患に対するインビボ効果も示された。

実施例７：２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フランによるヒト皮膚リーシュマニア症の治療
皮膚リーシュマニア症の寄生虫学的診断を受けた１００例の患者を治療した。活性成分として２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン０．１５％と主たる賦形剤としてワセリンを含有する油性軟膏で１日１回２１日間外用により患者を治療した。

患者の９０％は皮膚病変の完全治癒を示した。回復の時間は病巣の重症度により、１０日から２１日まで変動した。治療期間の終りに、回復した患者の９０％は潰瘍の治癒のみならず、寄生虫感染の一次作用及び二次的細菌又は真菌汚染による局所及び全身症状も同様に消失したことを示した。
患者は、プロトコールでは予想された、治療の継続を妨げるような副作用は全く示さなかった。

実験的皮膚リーシュマニア症に対する２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランのインビボ活性。早期段階の病巣を２４時間毎に治療した。実験的皮膚リーシュマニア症に対する２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランのインビボ活性。早期段階の病巣を１２時間毎に治療した。実験的慢性皮膚リーシュマニア症に対する２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランのインビボ活性。治療の最初の週の間の効果。治療の始めから終りまでの病巣サイズの変化により測定された、実験的慢性皮膚リーシュマニア症に対する２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン及び２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランのインビボ活性。

Claims

リーシュマニア症及びトリパノソーマ症を治療するためのニトロビニルフラン誘導体を含有する医薬組成物。
前記リーシュマニア症は皮膚型、粘膜皮膚型及び内蔵型の臨床型を含み、トリパノソーマ症はＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉにより生じる症状である、請求項１に記載の医薬組成物。
前記ニトロビニルフラン誘導体が、２−（２−ニトロビニル）−フラン、２−ブロモ−５−（２−ニトロビニル）−フラン、２−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン、２−ブロモ−５−（２−ブロモ−２−ニトロビニル）−フラン、２−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フラン又は２−ブロモ−５−（２−メチル−２−ニトロビニル）−フランである、請求項１及び２に記載の医薬組成物。
投与経路が局所又は全身のいずれかである、請求項１から３の請求項に記載の医薬組成物。
前記医薬活性成分、及び、投与経路によって、油性軟膏、油及びグリコールを含有する請求項１から４に記載の医薬組成物。
リーシュマニア症及びリーシュマニア病変に伴う日和見細菌感染及び真菌疾患を併せて治療するのに適している請求項１から５に記載の医薬組成物。