JP2009201522A - 微生物を培養するためのカートリッジ - Google Patents

Abstract

【課題】培養基の層上に受容された微生物の発育、計数及び同定のための条件を改善する微生物培養カートリッジを提供すること。
【解決手段】第１チャンバー（２７）に面する第１端面と、第２チャンバー（２８）に面する、第１端面とは反対側の第２端面を有する培養基層（３）を収容した培養トレーを使用し、第１チャンバー内に第２チャンバー内の圧力より高い圧力を創出する工程を含む。それによって、培養基層中の水、及び、随意選択として培養基層に投与された再水和溶液（２９）の培養基層中での拡散を促進する。培養カートリッジは、培養基層を被覆されたグリッド（７）と環状壁との間に、内側に突条を画定する厚肉部分を有する中実環体を含む本体（２）を有する。
【選択図】図１

Description

本発明は、一般に、バクテリア、酵母菌、カビ等の微生物を培養するためのカートリッジに関する。

微生物を検出するには、監視すべき環境から得られた微生物を培養基の層を収容した培養トレー（以下、単に「トレー」とも称する）内に入れ、そのトレーを培養器に入れて、微生物を裸眼に見えるコロニー（群体）の形に発育させるための所要の温度で所要時間培養し、微生物を計数し、同定することができるようにする。

本発明は、培養基層上に受容された微生物の発育、従ってその計数及び同定のための条件を改善することを課題とする。

この目的のために、本発明は、微生物の検出において、第１チャンバーに臨む（面する）第１端面と、第２チャンバーに臨む（面する）、第１端面とは反対側の第２端面を有する培養基層を収容した培養トレーを使用する工程と、第１チャンバー内に第２チャンバー内の圧力より高い圧力を創出する工程を含むことを特徴とする微生物検出方法を提供する。

培養基層の両端面間に存在する圧力差が、培養基層の含水量が不均一になったとき、培養基層内の液体を拡散させて含水量、特に微生物を受容している表面の含水量を再均一化させることを可能にする。

本発明は、微生物の発育にとって有害な、従って、微生物の計数及び同定を困難にする結果となる、培養基層の不均質を排除又は大幅に減少させることを可能にする。

本発明の好ましい実施形態においては、前記第１チャンバーを流体密とするトレーを設け、第１チャンバー内に第２チャンバー内の圧力より高い圧力を創出する前記工程（高圧創出工程）は、この流体密の第１チャンバーを閉鎖する工程を含む。

第１チャンバー内に高い圧力を創出する前記工程は、流体密の第１チャンバーを閉鎖したときチャンバー内に捕捉されている空気のある程度の圧縮の結果として、及び、又は、培養器の温度より低い温度下に置かれていた流体密の第１チャンバーが培養器内に装入されてチャンバー内の温度が上昇したときチャンバー内に捕捉されている空気が膨張する結果として生じる圧力上昇を利用することによって特に容易に好便に実施することができる。

他の好ましい実施形態においては、本発明の方法は、前記高圧創出工程の前に、前記培養基層の第２端面に空気ジェットを吹きつける工程を含む。空気ジェット吹きつけ工程は、空気中に存在する微生物を培養基層にぶつけて付着させるために空気分析装置内で行われる。

空気ジェットは培養基層にクレーター（衝撃によるくぼみ）を発生させるとともに、培養基層を乾燥させるので、高圧創出工程は、空気ジェット吹きつけ工程の後に実施する方が有利である。培養基層の、空気ジェットを吹きつけられた端面とは反対側の端面を加圧することによって、液体を乾燥されている端面に向けて拡散させるので、培養基層の再均質化を促進することができる。

更に他の好ましい実施形態においては、本発明の方法は、前記高圧創出工程の前に、前記培養基層の第１端面に所定容量の再水和溶液を添加する工程を含む。再水和溶液は加圧作用によって培養基層中で拡散する性質があるが、再水和溶液の添加は、後に前記高圧創出工程が実施されたとき、第１チャンバー内の高圧が再水和溶液の培養基層中での拡散を重力作用だけによる場合より著しく促進するので、培養基層がある程度乾燥してしまっている場合特に有利である。

再水和溶液は、単なる水であってもよく、あるいは、栄養物質及び、又は特定の染料を添加した水であってもよい。第１チャンバー内の高圧によって促進される再水和溶液の拡散は、それに添加されている栄養物質及び、又は染料を一緒に培養基層中に分配する。

かくして、最初に基準培養基を装入されているトレーを用いて、特定の微生物を選択的に計数及び同定することを可能にする特定の培養基を得るためにその基準培養基の特性を改変することができる。

更に他の好ましい実施形態においては、本発明に使用される培養トレーは、グリッド（格子）を有するものとし、そのグリッドにその平面に平行に培養基層を塗布することができる。そのようなグリッドの存在は、培養基層のための支持フレームを提供する上で特に有利である。（培養基層の両端面はそれぞれチャンバーに臨む（面する又は露呈する）ようにしなければならないので、培養基層の保持を端面に頼ることはできない。）

本発明は、又、微生物を培養するためのカートリッジに関する。本発明による培養カートリッジは、グリッドと、グリッドの平面に対して横断方向に向けられグリッドを囲繞する環状壁から成る本体と、グリッドの平面に平行に被覆された培養基層、好ましくは寒天培養基のようなゲル状又は自立（自己保形性）培養基の層を有し、上述した本発明の方法を実施するのに適するようにするために、前記本体は、前記環状壁とグリッドとの間に、内部側（半径方向内方）に突条を画定する厚肉部分を有する中実環体を含むことを特徴とする。

この厚肉突条は、内部側（半径方向内方）に存在するので、たとえ培養基層が若干収縮してその周縁が本体の環状壁から分離したとしても、培養基層によって被覆されたままに留まる。突条が培養基層によって被覆されたままであり、環体が中実であるから、培養基層の周縁と本体との間に流体を通すような間隙が生じることがなく、従って、本体内の、培養基層の各端面側に存在する空間が互いに流体密状態に分離される。それによって、培養基層の両端面間に圧力差を設定することを可能にする。

本発明の好ましい特徴によれば、カートリッジの製造及び本発明の方法の実施の簡略化と便宜のために、
（ａ）カートリッジは、培養基層の第１端面が位置する側に流体密チャンバーを画定するために前記本体に嵌着させることができるようになされた着脱自在のベースを有する。好ましくは、このベースは、本体の環状壁の外周面に嵌合させ、ベースの内表面を環状壁の、該ベースのある側と同じ側の端面に接触させる。又、好ましくは、本体とベースは、成形プラスチックで形成し、ベースの方が本体より高い可撓性を有するものとする。
（ｂ）カートリッジは、培養基層の第２端面が面している、外部に連通するチャンバーを画定するために前記本体に嵌着させることができるようになされた着脱自在のカバーを有する。好ましくは、このカバーは、本体に嵌合させたとき、カバーの内外間に連通を設定する少なくとも１つの穴を有する。又、好ましくは、カバーは、本体の環状壁の外周面に嵌合させ、カバーの内表面を環状壁の、該カバーのある側と同じ側の端面に接触させる。好ましくは、本体とカバーは、成形プラスチックで形成し、カバーの方が本体より高い可撓性を有するものとする。

本発明の他の好ましい実施形態においては、培養が完了したとき、コロニーの計数をし易くするために、前記グリッドは、方形の網目を有するものとし、随意選択として、培養基層とは対照的な色とすることができる。

培養基層上に受容された微生物の発育、従ってその計数及び同定のための条件を改善する、微生物を培養するためのカートリッジが提供される。

図１は、本発明によるカートリッジの立断面図である。 図２は、図１のカートリッジの、カバー、フィルム及び培養基層を除去して示す平面図である。 図３は、図１のカートリッジの上下逆にした、ベースを除く立断面図である。 図４は、空気サンプルを採取し、その空気サンプル中に存在する微生物のための培養基層に空気サンプルを吹きつけるための装置内に嵌着させた本発明のカートリッジの立断面図であり、カートリッジのカバー及びフィルムは除去されている。 図５は、カートリッジの耳片が図４の空気分析装置に係合する態様を示す立断面図である。 図６は、再びカバーを装着され、培養基層上に所定量の再水和溶液を適用するためにベースを除去されて上下逆にされたカートリッジの立断面図である。

以下に、本発明を実施形態に関連して説明するが、本発明は、ここに例示した実施形態の構造及び形状に限定されるものではない。
図示のカートリッジ１は、本体２と、培養基層３と、フィルム４と、カバー５と、ベース６を有する。本体２は、比較的剛性の成形プラスチック材で形成され、グリッド７と、グリッド７の平面に対して横断方向に向けられ、グリッドを囲繞する環状壁８を有する。グリッド７は、図１にみられるようにこの例では断面円形のストランドによって形成され、方形の（即ち、図２にみられるように４辺が同じ長さの）網目を有する。

グリッド７の周縁は、内部側に、即ちグリッドに近い側（半径方向内方）に、突条１０を画定する厚肉部分を有する中実環体９によって壁８に連結されている。中実環体９の厚肉は、この例ではベース６に面する側にのみ存在する。（換言すれば、フィルム４に面する側には凸部は存在しない。）

環状壁８は、一定の厚みを有し、総体的に断面円形の短い筒の形を有している。壁８の、フィルム４のある側と同じ側の端面と環体９との間の長さは、対応する（壁８のフィルム側の端面と環体９との間に存在する）培養基層３の厚さのほぼ半分に相当する所定の長さであり、壁８の、ベース６のある側と同じ側の端面と環体９との間の長さは、対応する（壁８のベース側の端面と環体９との間に存在する）培養基層３の厚さのほぼ２倍に相当する長さである。

培養基は、ゲル状培養基、又は、自立性であり、このカートリッジ内に形成することができる培養基であることが好ましい。例えば、寒天系培養基であれば、任意のものでよい。

壁８の外周面から複数の耳片１１が側方に突設されている。各耳片１１と壁８の、フィルム４のある側の端面との間の距離は正確に同じである。各耳片１１には複数の孔が穿設されている。この例では、耳片１１は４個設けられ、各耳片には、後述する目的のために、３つの孔が穿設されているが、耳片１１及び孔の個数は必要に応じて決定することができる。

フィルム４は、可撓性の流体密のプラスチック材で形成され、最初は、丸いコーナーを有する正方形であり、正方形の各辺は、壁８の外周面の直径より相当に長い。フィルム４を覆ってカバー５が装着されると、フィルム４の各コーナーは、操作者が握りやすい突片（図１の左端及び右端参照）を形成する。

カバー５は、半剛性のプラスチック材で形成され、従って本体２のプラスチック材よりは高い可撓性を有する。カバー５は、ボウルの形を有し、その側壁は、断面円形の直径の異なる２つの筒状部分１２Ａ，１２Ｂと、両筒状部分に対して横断方向に延長し両者を連結する環状部分１３から成る。

筒状部分１２Ａは、壁８の外径よりごく僅かに大きい内径を有し、壁８との間にフィルム４を挟みつけて壁８の周りに壁８を若干締めつけるようにして嵌合する。

筒状部分１２Ｂは、筒状部分１２Ａより小さい内径を有し、両者の内表面が環状部分１３の環状表面によって結合されている。環状部分１３の環状表面の寸法は、壁８の、フィルム４のある側の端面の環状表面に対応しており、カバー５を本体２に押し被せて壁８の端面に当接させたときフィルム４を壁８のこの端面に密着させることができるようになされている。

カバー５は、その側壁の筒状部分１２Ｂに対して横断方向に延長し筒状部分１２Ｂの内表面に周縁を結合された平坦な壁によって形成されたパネル１４によって閉鎖されている。パネル１４は、環状部分１３に連結された筒状部分１２Ｂの端部からかなり離れたところに位置する。筒状部分１２Ｂの一部分は、パネル１４を越えて突出し、自由端となっており、その自由端部にこの例では４つの凹部１５が形成されている。パネル１４には、筒状部分１２Ｂとの結合部のところで各凹部１５の中央部とそれぞれ同じ高さのところにこの例では４つの、後述する目的のための小さい穴１６が形成されている。

ベース６は、カバー５と同様に半剛性のプラスチック材で形成され、カバー５と同様にボウルの形を有し、その側壁は、断面円形の直径の異なる２つの筒状部分１７Ａ，１７Ｂと、両筒状部分に対して横断方向に延長し両者を連結する環状部分１８から成る。筒状部分１７Ａは、壁８の外径に対応する内径を有し、その内表面を壁８の外表面に密着させて嵌合させることができる。

筒状部分１７Ａの端部には、図１の右端及び図５に示されるように壁８の耳片１１を受容するための凹部が形成されている。

筒状部分１７Ｂは、筒状部分１７Ａより小さい内径を有し、両者の内表面が環状部分１８の環状表面によって結合されている。環状部分１８の環状表面は、壁８のベース６側の端面に当接し密着するようになされている。

ベース６は、その側壁の筒状部分１７Ｂに対して横断方向に延長し筒状部分１７Ｂの、環状部分１８に連結された端部とは反対側の端部に連結された、内側に凸面状表面を有するパネル１９によって閉鎖されている。

ベース６を本体２に押し被せて、壁８の耳片１１を筒状部分１７Ａの凹部に嵌合させ、環状部分１８を壁８の端面に当接させると、本体２とベース６の間に流体密シールが設定される。

ただし、ベース６は、該ベースの筒状部分１７Ａの端部に形成された凹部ではなく、凹部と凹部の間の凸部が本体２の環状壁８の耳片１１に対峙するような角度位置に位置決めすることもでき、この位置では、ベース６は、その筒状部分１７Ａの凹部と凹部の間の凸部の自由端が本体２の耳片１１に当接する位置にまでしか本体２に押し被せることができない。この位置では、壁８の外周に該壁のベース６側の自由端から所定の長さに亘って切り込まれた、後述する目的のための小さいスロット２０がベース６によって完全には覆われないので（筒状部分１７Ａが壁８を囲繞する高さは、スロット２０の高さ方向の長さより低い）、カートリッジの内部がそれらのスロット２０を通して外部大気と連通する。ベース６をこの位置に位置決めする目的は、後述する。

以下に、カートリッジ１の製造方法及び滅菌方法を説明する。
まず最初に、フィルム４を本体２の上面を覆って壁８の対応する端面に被せ、本体２に嵌着させる。それによって、カバー５の側壁の筒状部分１２Ａの内表面がフィルム４を覆って壁８の端面を越えて摺動しフィルム４を壁８の外周面に沿って引張るのでフィルム４を緊張させる。このフィルム嵌着操作が終了した時点では、フィルム４は、壁８の外周面と筒状部分１２Ａの内表面との間、及び、壁８の端面と、筒状部分１２Ａと１２Ｂの間の環状表面との間に挟持される。小穴１６の存在により、フィルム４の両面間にフィルム４を変形させるような圧力差が生じることがない。このように緊張され、カバー５によって挟みつけられたフィルム４は、壁８に密封接触する。

次に、ベース６をその筒状部分１７Ａの端部に形成された凹部と凹部の間の凸部が耳片１１に当接する位置にまで、即ち、壁８の外周のスロット２０がベース６によって完全には覆われない位置にまで本体２に押し被せる。

次いで、カートリッジをＥＴＯのような滅菌用ガスを入れたチャンバー内に入れる。滅菌用ガスは、カバー５の穴１６及び壁１８のスロット２０を通ってカートリッジ内に進入する。

滅菌操作が終ったならば、無菌状態下での作業でベース６を外し、本体２とフィルム４とカバー５から成る組立体を上下逆にし、筒状部分１２Ｂの、パネル１４より上に位置する部分によって形成される一種の三脚台の上に支持させる。次いで、予め液状になるように加熱しておいた培養基を本体２とフィルム４によって画定されるボウル内へ注ぎ入れ、図３に示されるようにグリッド７を覆う。この培養基を冷却した後、ベース６をその筒状部分１７Ａの凹部が耳片１１と対向するように位置決めし、ベース６を完全に押し込む。

カートリッジ１のこの状態は、図１に示されている。この状態では、培養基層３は、外部との接触から遮断されているので、完全に無菌状態に保持される。

環体９の突条１０は、フィルム４に面する側には何らの突出部も有していないので、培養基を注入したとき培養基がフィルム４と環体９の間の空間を満たすのを妨害しない。

突条１０は、環体９の内部側に存在するので、たとえ培養基層３が若干収縮してその周縁が本体２の環状壁８から分離したとしても、培養基層３によって被覆されたままに留まる。従って、培養基層３が収縮しても、本体２の内側の、培養基層３の両端面側に存在する空間と空間の間に流体密シールの破れが生じない。

この流体密シールと、本体２とカバー５との間の流体密シールとにより、培養基層３の、フィルム４によって画定される表面とは反対側の端面に対面する空間が、流体密チャンバーを形成し、そのチャンバー内に以下に説明するように所定の超過圧力を設定することができる。

このカートリッジ１は、図４に部分的に示される微生物投与装置２１を用いて空気のサンプルの分析を実施するように設計されている。微生物投与装置２１は、空気サンプル中に存在する微生物を培養基層３の、フィルム４によって画定される表面上に投与するための装置である。

装置２１は、そらせ板２３を装着した流線形スリーブ２２を有し、そらせ板２３の周りに空気流を吸引タービン（図示せず）に向けて送るための導管又は通路２４を形成している。

スリーブ２２の端部には着脱自在の網２５が装着されている。網２５は、カバー５及びフィルム４が除去されたカートリッジ１の耳片１１の端部を受容するための切欠き２２’（図５）を備えている。網２５は、フィルム４によって画定される培養基層３の表面に正対面する中央壁２６を有し、その中央壁２６に多数のパーフォレーション（細孔）が形成されている。

装置２１の吸引タービン（図示せず）が作動されると、外部空気が図４に矢印で示されるように中央壁２６のパーフォレーションを通して吸入され、そらせ板２３の端部はベース６によって閉鎖されているので、空気は導管２４を通して吸引タービンに向けて吸引される。

培養基層３と有孔壁２６の間の空気の流れは、有孔壁２６の各パーフォレーションに対応する細い空気ジェットの形で生じる。これらの空気ジェットは、培養基層３にぶつかり、培養基層３にぶつかった空気中に存在する微生物は、その衝撃によって培養基層３上に固定される。

培養基層３と網２５の有孔壁２６との間の離隔間隔は、本発明に従って製造されるどのカートリッジにも再現される（同じ）幾何学的特徴を有しているので、培養基層３の表面を形成するためにフィルム４を使用することにより、この表面の、本体２に対する位置関係を正確に固定することを可能にし、本体２の、有孔壁２６に対する位置関係は、カートリッジをその耳片１１を介してスリーブ２２に固定することによってどのカートリッジにも同じ精度で再現されるので、吸引タービンの１回転毎に吸入される空気流の量が、どのカートリッジにおいても実質的に同じであり、従って、吸引タービンの回転速度を一定とした場合、空気が培養基層３にぶつかる速度は一定であり、吸引タービンの回転数を一定とした場合、吸入される空気の容量も一定である。

カートリッジ１の耳片１１と、それらを受容するスリーブ２２の端部の切欠き２２’との協同により、カートリッジを調心し、カートリッジの軸方向の位置決めを行う。各耳片１１の自由端は湾曲している（図２）が、耳片１１の端部だけが切欠き２２’に受容される。

次に、耳片１１を導管２４を横切って跨らせるが、耳片１１に形成された、この例では３つの孔が吸引タービンへの空気の通過を許す。

カートリッジ１とそらせ板２３とは、そらせ板２３の内側を締め切るのに十分な僅かなクリアランスをもって嵌合させる。即ち、カートリッジのベース６の筒状部分１７Ｂの外径は、そらせ板２３の端部の内径より小さくされており、ベース６の筒状部分１７Ｂをそらせ板２３の内側に嵌着させる。それによって、そらせ板２３の内側は空気流に対して閉鎖される。

所要容量の空気が吸入されたならば、網２５を装置２１から外し、カバー５を再びカートリッジ１に嵌着し、カートリッジ１を装置２１から取り出す。

その後は、培養基層３に吹きつけられた微生物を慣用の態様で培養すればよい。即ち、カートリッジ１を培養器の中に入れて所定温度（例えば、３２．５℃±２〜５℃）に所要時間（例えば、２日間）加熱する。カバー５に形成されている穴１６がコロニーの発育に必要な、カートリッジ１の内外間のガス交換、特に、有酸素空気の交換を可能にする。

微生物の培養を行うには、カートリッジ１を上下逆にすることが好ましい。即ち、カートリッジをカバー５の側壁の筒状部分１２Ｂの、パネル１４より上に位置する部分によって形成される一種の三脚台の上に支持させる（図６参照）。その場合、筒状部分１２Ｂの凹部１５が空気の循環を可能にし、パネル１４が培養基層３の上にではなく、下に位置するので、周知の態様でカバー５の結露現象を防止する。

培養基層３と、壁８と、ベース６によって画定される空間２７は、流体密チャンバーを構成するので、ベース６が閉鎖されたとき、チャンバー２７内に取り込まれた空気は、僅かな超過圧力とされており、培養器の温度は原則的にチャンバー２７内の空気の初期温度より高いので、カートリッジ１が培養器内に入れられたときは、チャンバー２７内の空気が加熱されて膨張するので、更なる超過圧力が創生される。

一方、チャンバー２７内には超過圧力が存在するのに対して、培養基層３と、壁８と、カバー５によって画定される空間２８は、特に穴１６を通して外部と通じているので、培養基層３の両端面間に圧力差が存在する。この圧力差が、培養基層３、特に、装置２１によって空気ジェットを吹きつけられた培養基層３の表面の再均質化を助成する。

実際、培養基層３のこの表面に吹きつけられた空気ジェットは、その表面にクレーターを形成し、培養基の栄養価を低下させる若干の乾燥を惹起する。この乾燥は、かなりの乾燥量であり、例えば、培養基層３に含有される合計３４ｇの水のうちサンプルとして採取された空気１ｍ³当たり２ｇの水が失われるのが普通であると推定される。

空気ジェットを吹きつけられた培養基層の表面を再水和するために培養基層３中に残留している水だけに依存せず、図６に示されるように培養基層３の、空気ジェットを吹きつけられた表面とは反対側の表面に若干量の再水和溶液２９を投与することができる。

再水和溶液の投与をするには、ベース６を外し、ピペット３０を用いて所要量の再水和溶液２９（カートリッジ１の重量を計量することによって測定された脱水量の例えば８０又は９０％に相当する量の再水和溶液）を培養基層の表面に塗布する。

再水和溶液は、重力だけでなく、流体密チャンバー２７内の超過圧力によってそれを塗布された培養基層の表面とは反対側の表面即ち空気ジェット吹きつけ表面にまで到達する。この超過圧力は、液体、特に再水和溶液２９の培養基層３内での拡散を助成する。

空気ジェット吹きつけ表面の再水和は、空気ジェットの衝撃によって生じたクレーターを消滅する。クレーターの消滅は、コロニーの発育に有利であり、従って、微生物の同定を容易にするのみならず、表面が平滑であるということは、微生物の計数を容易にし、更に細かい同定分析を必要とするコロニーの継代培養をも助成する。

再水和溶液は、必要に応じて、水だけとしてもよく、培養基層の微生物の選択的同定又は生育を可能にする栄養物質及び、又は特定の染料を添加した水とすることもできる。

グリッド７の網目を正方形とすることは、コロニーが発育した表面のサイズを測る尺度を与えてくれるので有利であり、１つの網目の面積を例えば１ｃｍ²とすることができる。培養基が透明である場合、グリッド７は見やすくするために色つきとすることが好ましく、本体２は、例えば黒色のプラスチックで成形することができる。カバー５は、カートリッジ１を閉じたまま読取りを行うことができるように、透明とすることが好ましい。

もちろん、本発明によるカートリッジは、例えば、液体の汚染度を測定するためなどの他の種類の分析にも適用することができる。その場合、最初にフィルム４によって画定されている培養基層３の表面にメンブレンを被せ、そのメンブレンを通して所要量の被分析液を適用する。

又、ここには図示されていない変型例として、フィルム４なしで培養トレーを使用することができる。その場合、フィルム４の代わりに、カートリッジの製造及び保管のためにのみ利用されるカバーを使用し、そのカバーを、カートリッジの使用中は、上述したカバー５と同じタイプのカバーに代えることができる。

以上、本発明を実施形態に関連して説明したが、本発明は、ここに例示した実施形態の構造及び形状に限定されるものではなく、いろいろな実施形態が可能であり、いろいろな変更及び改変を加えることができることを理解されたい。

１ カートリッジ
２ 本体
３ 培養基層
４ フィルム
５ カバー
６ ベース
７ グリッド
８ 環状壁
９ 中実環体
１０ 突条
１１ 耳片
１６ 穴
２７ 第１チャンバー
２８ 第２チャンバー
２９ 再水和溶液

Claims (9)

1. 微生物を培養するためのカートリッジであって、
   グリッドと、
   該グリッドの平面に対して横断方向に向けられ該グリッドを囲繞する環状壁とから成る本体と、
   前記グリッドの平面に平行に被覆され、再水和用の第１端面と、該第１端面とは反対側の、微生物を培養する第２端面とを有する培養基層と、
   前記環状壁とグリッドとの間の、内部側（半径方向内方）に突条を画定する厚肉部分を有する中実環体と、
   前記培養基層の第１端面が位置する側の、閉鎖可能な流体密チャンバーと、
   閉鎖された流体密チャンバーを確定するために前記本体の前記第２端面とは反対側に嵌着させることができるようにした着脱自在のベースと、
   を含み、前記閉鎖された流体密チャンバーにより、培養基層の前記第１及び第２の各端面間に圧力差を生じさせるようにした微生物培養カートリッジ。
2. ベースは、本体の環状壁の外周面に嵌合し、該環状壁の、該ベースのある側と同じ側の端面に接触する内表面を有する請求項１に記載の微生物培養カートリッジ。
3. 本体とベースは、成形プラスチックで形成され、該ベースの方が本体より高い可撓性を有する請求項１に記載の微生物培養カートリッジ。
4. 培養基層の第２端面が面している、外部に連通するチャンバーを画定するために本体に嵌着させることができるようになされた着脱自在のカバーを有する請求項１〜３のいずれかに記載の微生物培養カートリッジ。
5. カバーは、本体に嵌合したとき、該カバーの内外間に連通を設定する少なくとも１つの穴を有する請求項４に記載の微生物培養カートリッジ。
6. カバーは、本体の環状壁の外周面に嵌合し、該環状壁の、該カバーのある側と同じ側の端面に接触する内表面を有する請求４又は５に記載の微生物培養カートリッジ。
7. 本体とカバーは、成形プラスチックで形成され、該カバーの方が本体より高い可撓性を有することを特徴とする請求項４〜６のいずれかに記載の微生物培養カートリッジ。
8. グリッドは、正方形の網目を有することを特徴とする請求項１に記載の微生物培養カートリッジ。
9. グリッドは、培養基層とは対照的な色とされていることを特徴とする請求項１に記載の微生物培養カートリッジ。

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