JP2009186361A - 三次元構造体及びこれを用いた生体関連分子担持体並びに三次元構造体の製造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ポリスチレンビーズ等の粒状材料を、液状媒質に懸濁し、その懸濁液を支持面に液滴状にして付着させた後、懸濁液の液体成分を蒸発させ、粒状材料の各粒子を架橋体構成材料を架橋させて形成される架橋体を介して架橋させる。こうして得られた三次元構造体は、厚さ寸法領域当たりに複数個の前記粒状材料の各粒子を含み、前記架橋体が前記粒状材料の各粒子間に形成され、空隙を保ちつつ三次元に密に配列している。
【選択図】図12
Description
これによれば、粒状材料の各粒子が自己集合し三次元に配列化するタイミングにあわせて光照射できるので、各粒子が配列化する前や、配列が崩れてしまった後に結合してしまうことを防ぐことができる。
上述した光架橋剤、ATFB-SE (4-azido-2,3,5,6-tetrafluorobenzoic acid, succinimidyl ester)を用い、常法に従い、ウシ血清アルブミン(BSA)の側鎖アミノ基に光反応性官能基であるアジド基を導入した。
上記ビーズ懸濁調製液中のBSA含有換算濃度が0.5mg/mlとなるように混合した以外は、実施例1と同様にして、三次元構造体を得た。図4にはその電子顕微鏡写真を示す。
上記ビーズ懸濁調製液中のBSA含有換算濃度が1.5mg/mlとなるように混合した以外は、実施例1と同様にして、三次元構造体を得た。図5にはその電子顕微鏡写真を示す。
上記ビーズ懸濁調製液中のBSA含有換算濃度が3.0mg/mlとなるように混合した以外は、実施例1と同様にして、三次元構造体を得た。図6にはその電子顕微鏡写真を示す。
上記ビーズ懸濁調製液中のBSA含有換算濃度が5.0mg/mlとなるように混合した以外は、実施例1と同様にして、三次元構造体を得た。図7にはその電子顕微鏡写真を示す。
上記ビーズ懸濁調製液中のBSA含有換算濃度が6.67mg/mlとなるように混合した以外は、実施例1と同様にして、三次元構造体を得た。図8にはその電子顕微鏡写真を示す。
UV照射しない以外は実施例1と同様に三次元構造体の調製操作を行った。乾燥後、ビーズは基板上にとどまっていたが、水で洗浄操作を施すと配列がくずれ、2次元で配列したビーズの上に積層していたビーズの一部は流去してしまった。
BSAの代わりにAnti-IgAを用いてポリスチレンビーズを結合してなる三次元構造体を作成した。
ビーズを基板上に滴下・凝集(乾燥)させた後、三次元に配列したビーズ構造体の端に架橋体構成材料を滴下し、ビーズによる三次元構造の内部に架橋体構成材料を浸透させることで、三次元構造体を作成した。
上記実施例7や実施例8で得られた三次元構造体は、架橋体構成材料としてAnti-IgAを用いているので、そのAnti-IgAは三次元構造体の架橋体の構成成分となっているとともに、それ自体でIgAと結合することができる。したがって、生体関連分子担持体を構成している。そこで、実施例8で得られた三次元構造体を用いて、ヒトIgAの段階希釈溶液に対するELISAを行った。また、比較のために、上記実施例8において、ビーズを滴下せず、光反応性官能基導入後のAnti-IgA含有反応液のみをPDMSの基板上に滴下し、光照射したものを調製し、同様にELISAを行った。その結果を図13に示す。
Claims (13)
- 平均粒子径0.02〜10μmの粒状材料を結合してなる三次元構造体であって、前記粒状材料の各粒子が、架橋体を介して結合されていることを特徴とする三次元構造体。
- 前記架橋体が、平均分子量1,000〜1,000,000の高分子物質を含む構造体である請求項1記載の三次元構造体。
- 前記高分子物質が、蛋白質、ポリアミノ酸、核酸、及び樹脂からなる群より選ばれた少なくとも一種である請求項2記載の三次元構造体。
- 前記高分子物質が、ウシ血清アルブミンである請求項2記載の三次元構造体。
- 請求項1〜4のいずれか1つに記載の三次元構造体に生体由来物質又は該生体由来物質に結合するプローブ分子が担持されていることを特徴とする生体関連分子担持体。
- 平均粒子径0.02〜10μmの粒状材料を結合してなる三次元構造体の製造方法であって、液状媒質に前記粒状材料を懸濁し、該懸濁液を支持面に液滴状にして付着させる液滴形成工程と、前記懸濁液の液体成分を蒸発させ、前記粒状材料の各粒子を自己集合させて三次元に配列化させる粒子配列工程と、架橋体構成材料を架橋させて形成される架橋体を介して、前記粒状材料の各粒子を結合する架橋工程とを含むことを特徴とする三次元構造体の製造方法。
- 前記液滴形成工程において、架橋体構成材料の少なくとも一成分を含有する液状媒質に前記粒状材料を懸濁し、該懸濁液を支持面に液滴状にして付着させる請求項6記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記粒子配列工程を経て配列化した粒状材料の各粒子に、架橋体構成材料の少なくとも一成分を添加する請求項6又は7記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記架橋体構成材料が、平均分子量1,000〜1,000,000の高分子物質と、該高分子物質及び前記粒状材料に結合し得る架橋剤を含むものであり、該架橋剤は、(1)前記粒状材料の各粒子が三次元に配列化する前に添加するか、(2)前記粒状材料の各粒子が三次元に配列化する途中に添加するか、(3)前記粒状材料の各粒子が三次元に配列化した後に添加するか、又は(4)予め前記高分子物質に側鎖として導入されている請求項6〜8のいずれか1つに記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記架橋剤が、光反応性官能基を有し、前記架橋工程において光を照射して前記粒状材料の各粒子を結合する請求項6〜9のいずれか1つに記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記高分子物質が、蛋白質、ポリアミノ酸、核酸、及び樹脂からなる群より選ばれた少なくとも一種である請求項6〜10のいずれか1つに記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記高分子物質が、ウシ血清アルブミンである請求項11記載の三次元構造体の製造方法。
- 前記液滴形成工程において、インクジェット方式により、前記懸濁液を支持面に液滴状にして付着させる請求項6〜12のいずれか1つに記載の三次元構造体の製造方法。
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