JP2009084293A - Ｓ／ｏサスペンション及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】微細なＳ／Ｏ粒子が分散しており、内包物の封入量が多く、封入物の漏洩が抑制されたＳ／Ｏ／Ｗエマルション及びその製造方法を提供することを主な目的とする。
【解決手段】Ｗ／Ｏエマルションを脱水することにより、平均粒径２０ｎｍ〜１０μｍの粒子として水溶性固体物質が油相中に分散したＳ／Ｏサスペンションを製造することを特徴とするＳ／Ｏサスペンションの製造方法に係る。
【選択図】なし

Description

本発明は、Ｓ／Ｏサスペンション及びその製造方法に関する。

微細なキャリア製剤は、医薬品分野、食品分野、化粧品分野などで多くの用途が期待されているが、求められるスペックは非常に高度である。例えば、静注型ＤＤＳ製剤の薬物キャリアは、まず、肝臓内などの貪食細胞に捕捉されない範囲、通常１００〜３００ｎｍに粒径を制御することが第一条件であり、次に、キャリア表面を修飾して高い機能性を付与する必要がある。そこで脂質２分子膜リポソームを中心に新たなキャリア開発が盛んに検討されているが、リポソームは薬物の封入量が低く、調製が非常に煩雑である。

一方、乳化型のＤＤＳ製剤、特に、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションを基剤とする製剤も検討されている。Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションはリポソームに比べて調製が容易であり、薬物の封入量を多くできるメリットがある反面、微細なものを調製することが難しい。即ち、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションの微細化には、構造上、その内水相粒子をより小さく、ナノスケールにする必要があり、仮に、内水相粒子が大きい場合、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションは不安定で封入した物質が簡単に漏洩することになる。しかしながら、ナノスケール領域で内水相粒子の大きさを制御する技術は現在のところ存在せず、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションの利用は困難であると考えられてきた。この他、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションでは、分子量の小さな物質を内封した際にその封入物質が油相を透過して漏洩する問題があり、実用化が困難である。

Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションも検討されたことがあるが、そのほとんどは水溶性固体物質をミキサーにより強制的に油剤に分散したＳ／Ｏサスペンションを外水相に分散して調製する。こうした方法では、固体物質の分散粒径を微細化できず、また、油剤中の固体物質が凝集し易いため、安定性に富んだＳ／Ｏ／Ｗエマルションが得られない。Ｓ／Ｏ粒子の大きさを制御して小さくすることも不可能である。

逆ミセルを用いて内封物質をナノスケールの水滴（ｗａｔｅｒ ｐｏｏｌ）に閉じ込めた逆ミセルＷ／Ｏエマルションを外水相に分散する方法が提案されている。しかし、この場合も、封入量が少なく、使用できる油剤と界面活性剤が限られ、また、それらに毒性のあるという問題を有している。

本発明は、微細なＳ／Ｏ粒子が分散しており、内包物の封入量が多く、封入物の漏洩が抑制されたＳ／Ｏ／Ｗエマルション及びその製造方法を提供することを主な目的とする。

すなわち、本発明は、下記のＳ／Ｏサスペンション及びその製造方法に係わるものである。
１． Ｗ／Ｏエマルションを脱水することにより、平均粒径２０ｎｍ〜１０μｍの粒子として水溶性固体物質が油相中に分散したＳ／Ｏサスペンションを製造することを特徴とするＳ／Ｏサスペンションの製造方法。
２． Ｗ／Ｏエマルションが、あらかじめ調製されたＷ／Ｏエマルションを多孔質膜に透過することにより得られる、前記項１に記載のＳ／Ｏサスペンションの製造方法。
３． Ｗ／Ｏエマルションを脱水してＳ／Ｏサスペンションを得た後に、下記の工程（ａ）及び（ｂ）
（ａ）該Ｓ／Ｏサスペンションに水相を加えて乳化する工程、及び
（ｂ）該混合物を脱水してＳ／Ｏサスペンションを得る工程
を繰り返すことを特徴とする前記項１又は２に記載の製造方法。
４． 繰り返しが２〜１０回であることを特徴とする前記項３に記載の製造方法。
５． 水溶性固体物質が抗癌剤であることを特徴とする前記項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
６． 多孔質膜が多孔質ガラス膜であることを特徴とする前記項１〜５のいずれかに記載の製造方法。

本発明によれば、以下のような優れた効果を得ることができる。
（１）従来のＷ／Ｏ／Ｗエマルションでは困難であった微細化が、当該Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションでは比較的容易に行うことができる。特に、本発明Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションは、医薬品分野、食品分野、化粧品分野など求められる微細なキャリア粒子として好適である。
（２）Ｗ／Ｏエマルションを脱水してＳ／Ｏサスペンションを調製する本発明方法では、従来技術よりも水溶性固体物質を微細化して油相に分散でき、且つその分散粒子を安定して保持できる。このため、かかるＳ／Ｏサスペンションを用いてＳ／Ｏ／Ｗエマルションを調製した場合も、安定性に優れたＳ／Ｏ／Ｗエマルションを得ることができる。
（３）膜乳化によりＳ／Ｏ／Ｗエマルションを調製した場合、Ｓ／Ｏ粒径を５００ｎｍ以下、例えば、肝臓内などの貪食細胞に捕捉されない範囲１００〜３００ｎｍにも粒径を制御することができ、静注型ＤＤＳ製剤の薬物キャリアとして利用することが期待できる。

１．Ｓ／Ｏサスペンション
Ｓ／Ｏサスペンションとは、油相中に水溶性の固体物質が均一に分散した懸濁状態をいう。従って、水溶性固体物質を水溶液に溶解した分散水相を油相中に分散した乳化状態、すなわち、Ｗ／Ｏエマルションとは異なる。なお、本発明では、油相中に水溶性固体物質の分散粒子と分散水相が共存する状態、あるいは分散水相中に固体物質が析出している状態は、Ｓ／Ｏサスペンションに含まれる。

本発明の水溶性固体物質（以下、単に「固体物質」という場合がある）は、水溶性であって、常温で固体のものであれば用途に応じて適宜選択することができる。例えば、Ｓ／Ｏサスペンションを用いて調製するＳ／Ｏ／Ｗエマルションの用途がＤＤＳ製剤である場合は、抗癌剤、タンパク質製剤、酵素薬物、ＤＮＡなどいずれの水溶性薬物であってもよい。同様に、食品、化粧品、高分子、電子機器、農薬などに使用する場合でも、用途に応じた水溶性の固体物質を適宜選択することができる。

本発明の油相とは、油剤と乳化剤の混合物のことを言う。

油剤は、添加する乳化剤が十分溶解あるいは均一に分散できるものであれば良く、用途に応じて適宜選択することができる。例えば、油脂類、石油系油剤、有機溶剤、合成系油剤などの油剤を単独もしくは２種以上を混合して使用できる。Ｓ／Ｏサスペンションを用いて調製するＳ／Ｏ／Ｗエマルションの用途がＤＤＳ製剤であれば、植物油、脂肪酸、パラフィン類などが挙げられる。

乳化剤は、水溶液に溶解する水性乳化剤と油剤に溶解する油性乳化剤があるが、（Ｓ／Ｏサスペンションを調製するために用いる）Ｗ／Ｏエマルションを安定に保つことができるのであればいずれであってもよく、分散粒子の用途に応じて適宜選択すれば良い。また、添加量も（Ｓ／Ｏサスペンションを調製するために用いる）Ｗ／Ｏエマルションの安定化に適した濃度に調整すれば良く、望ましくは油相の全重量に対して０．５〜１０重量％程度の範囲が好ましい。

本発明のＳ／Ｏサスペンションにおける固体分散粒子の平均粒径は、特に限定されるものではなく、Ｓ／Ｏサスペンションの用途に応じて適宜設定することができるが、通常、１０ｎｍ〜５０μｍ程度、好ましくは２０ｎｍ〜１０μｍ程度である。

２．Ｓ／Ｏサスペンションの製造方法
本発明の特徴の１つであるＳ／Ｏサスペンション製造方法について、図１に従って説明する。

まず、水相と油相を乳化してＷ／Ｏエマルションを調製する。次に、Ｗ／Ｏエマルションを脱水して水相の水を除去して、水相に溶解しておいた水溶性固体物質を析出させることにより、固体物質の微細粒子が油相に分散した本発明のＳ／Ｏサスペンションを製造することができる。

ここで、水相とは、上記水溶性固体物質を溶解した水溶液のことである。水相における水溶性固体物質の溶解量は、水溶性固体物質の種類、Ｓ／Ｏサスペンションの用途等に応じて適宜選択すればよいが、通常０．１〜３００ｇ／ｌ程度である。

また、Ｗ／Ｏエマルションや後述するＳ／Ｏサスペンションの安定性が損なわれない限り、水相に上記水性乳化剤あるいは目的に応じた他の添加剤（例えば、析出した固体粒子を強固にするためのキトサンやアルギン酸等の多糖類；固体粒子の結晶調整のためのシリカ微粒子等の結晶種）を加えてもよい。

水相と油相の体積比は、通常水相：油相＝０．１：１００〜７０：３０程度、好ましくは５：１００〜５０：５０程度の範囲に設定することができる。

Ｗ／Ｏエマルションの乳化方法は、安定なＷ／Ｏエマルションが調製できるものであれば特に限定されるものではない。例えば、攪拌による方法、高圧ホモジナイザー、高速ホモミキサーなどを用いる方法など、一般的な乳化操作によりＷ／Ｏエマルションを調製することができる。例えば、ホモミキサーを用いる場合の条件は、特に限定されるものではないが、通常、６００〜５０，０００程度（好ましくは７，０００〜２４，０００ｒｐｍ程度）にて０．５〜６０分間程度（好ましくは１〜１０分間程度）である。

しかし、Ｗ／Ｏエマルションの水相粒子はできるだけ小さく、且つ均一であることが、Ｓ／Ｏサスペンションの安定性や、Ｓ／Ｏサスペンションを後述するＳ／Ｏ／Ｗエマルションの製造に用いる場合には望ましい。このようなＷ／Ｏエマルションを調製するためには、多孔質膜を介して水相を油相に透過分散するか、もしくは、あらかじめ調製したＷ／Ｏエマルションを多孔質膜に透過する乳化方法（以下「膜乳化法」という）を利用して水相粒径を制御することが好ましい。

膜乳化法に用いる多孔質膜の形状は特に限定されず、本発明粒子の製造条件等に応じて適宜決定すれば良い。例えば、板状（平膜状）、円筒状（パイプ状）等の形状が挙げられる。また、多孔質膜の細孔径も限定的でなく、所望の粒径等に応じて適宜選択すれば良い。本発明では、多孔質膜の相対累積細孔分布曲線において、細孔容積が全体の１０％を占める時の細孔径が全体の９０％を占める時の細孔径で除した値が実質的に１から１．５までの範囲内にあるミクロ多孔質膜がより好ましい。このような膜自体は、公知の方法によって製造することができる。貫通孔（細孔）は、その断面形状が円形、楕円状、長方形（スリット状）、正方形等のいずれの形状であっても良い。また、貫通孔は、膜面に対して垂直に貫通していても良いし、斜めに貫通していても良い。或いは、貫通孔どうしが絡み合った状態になっても良い。

多孔質膜の材質も限定的でなく、例えば、ガラス、セラミックス（例えば、多孔質アルミナ、多孔質ジルコニア）、シリコン、樹脂（例えば、ポリカーボネート）、金属、酸化物膜等が挙げられる。

本発明では、多孔質膜として、特に多孔質ガラス膜を用いることが望ましい。多孔質ガラス膜としては、例えば、ガラスのミクロ相分離を利用して製造される多孔質ガラス膜が好適である。具体的には、特許第１５０４００２号に開示されたＣａＯ−Ｂ_２Ｏ_３−ＳｉＯ_２−Ａｌ_２Ｏ_３系多孔質ガラス、特許第１５１８９８９号に開示されたＣａＯ−Ｂ_２Ｏ_３−ＳｉＯ_２−Ａｌ_２Ｏ_３−Ｎａ_２Ｏ系多孔質ガラス、ＣａＯ−Ｂ_２Ｏ_３−ＳｉＯ_２−Ａｌ_２Ｏ_３−Ｎａ_２Ｏ−ＭｇＯ系多孔質ガラス等が挙げられる。これらの多孔質ガラス膜でも、その相対累積細孔分布曲線において、細孔容積が全体の１０％を占める時の細孔径が全体の９０％を占める時の細孔径で除した値が実質的に１から１．５までの範囲内にあるミクロ多孔質ガラス膜が好ましい。

膜乳化法では、多孔質膜表面の界面化学的性質が単分散エマルション調製にとって非常に重要であり（特許第２１０６９５８号及び特許第２７３３７２９号）、Ｗ／Ｏエマルションを調製する場合は疎水性膜が好適である。従って多孔質膜の表面が疎水性であればそのまま使用することができ、親水性であれば、表面改質により膜表面を疎水化した方が単分散Ｗ／Ｏエマルションを安定して生成することができる。

疎水化の方法には、シランカップリング剤など種々の反応試薬を用いて炭化水素基を導入する方法、あるいは有機系コーティング剤を付与する方法等があるが、表面改質によって多孔質膜自体の細孔構造が損なわれない限り、特に方法は限定されない。

この場合の多孔質膜の細孔径は、所望のＷ／Ｏエマルションが得られる限り特に限定されるものではないが、平均径が０．０５〜２０μｍ程度のものを用いるのが好ましい。

多孔質膜への透過の条件も、所望のＷ／Ｏエマルションが得られる限り特に限定されるものではないが、通常、加圧下（１ｋＰａ〜２０ＭＰａ程度）で、０℃〜９５℃程度である。

本発明では、Ｗ／Ｏエマルションの脱水操作は、水相粒子が合一、分離あるいは分裂しなければ特に限定されるものではなく、加熱脱水、真空脱水などの通常の方法を採用することができる。例えば、加熱脱水する場合は、油剤の沸点や分解温度、乳化剤の曇点（乳化力がなくなる上限温度）、水溶性固体物質の分解温度を考慮し、それらを越えない温度に加熱して脱水することができる。真空脱水する場合は、水が沸騰しない真空度で脱気する。温度と真空度を調節しながら脱水できるエバポレーターのような市販の装置を使用することもできる。この場合の温度の上限は、通常９５℃程度である。また、０℃以下の温度で油相が液体である場合は、凍結した水相を真空脱気することにより、昇華によって脱水することもできる。その場合の温度の下限は、特に限定されないが、通常−２０℃程度である。脱水操作は、脱水された水の量が当該Ｗ／Ｏエマルションを調製する際に用いた水相に含まれる水の量と同程度になった時点で終了すればよい。

こうして得られたＳ／Ｏサスペンション中には、Ｗ／Ｏエマルションの水相に溶解させた量の水溶性固体物質が微細粒子として分散している。

いったん得られたＳ／Ｏサスペンションに再度水相を加え、上記のようにして乳化を行うと、油相中に水相と固体分散粒子が共存した状態になり、これを脱水すると、再度加えた水相に溶解していた水溶性固体物質から新たな固体分散粒子が生成され、最初に存在していた固体分散粒子と合わせると、固体物質の量が増加することになる。すなわち、図１の矢印で示すように、Ｓ／Ｏサスペンション→水相添加→乳化→脱水→Ｓ／Ｏサスペンションの工程を、例えば、２〜１０回程度、繰り返すことにより、Ｓ／Ｏサスペンション中に分散する固体物質の量を所望の濃度まで増加させることができる。

このようにＷ／Ｏエマルションを脱水することにより、Ｗ／Ｏエマルションの平均水相粒径と粒径分布はそのまま小さい方へシフトして、Ｓ／Ｏサスペンションの平均粒径と粒径分布に移行する。水相粒子が合一することなく固体分散粒子を形成するならば、固体分散粒子の粒径ＤｓとＷ／Ｏエマルションの水相粒径Ｄｗには次の関係式が成立することになる。

Ｄｓ＝（ＭｓＣｓ／ρ）^１／３Ｄｗ
ここでＭｓは固体物質の分子量、Ｃｓは水相中の固体物質濃度、ρは固体物質の密度を示す。従って、水溶性物質の初期濃度が低いものほど小さな固体分散粒子になり、水相粒径が小さいほど固体分散粒径も小さくなる。すなわち、水相粒子の粒径分布が均一であれば、均一な固体分散粒子が得られることになる。本発明では、このようにして上記式に従って固体分散粒子の粒径を調製することができる。

また、図２に示すようにＷ／Ｏエマルションの水相粒子（１）は油相（２）の中で油性乳化剤（３）に囲まれて安定化している。これを本発明では脱水することになり、油性乳化剤（３）が一様に配向した固体分散粒子（４）が析出すると考えられ、このことが固体分散粒子を油相中で安定化する要因になっている。

本発明には、上記したようなＷ／Ｏエマルションの製造方法及び該方法により得られるＷ／Ｏエマルションも含まれる。

３．Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション
本発明のＳ／Ｏ／Ｗエマルションは、図３に示すように、上記の方法で製造したＳ／Ｏサスペンションを分散相とし、その粒子（５）（水溶性固体物質を油相中に閉じこめた粒子、以下「Ｓ／Ｏ粒子」という）は積算体積分布を有しており、
１） 当該分布の５０体積％に対応する粒径（以下「平均粒径」あるいは「５０％径」という。）が１００ｎｍ〜１００μｍの範囲内にあり、
２） 当該分布の１０体積％に対応する粒径（以下「１０％径」という。）が上記５０％径の５０％以上であり、
３） 当該分布の９０体積％に対応する粒径（以下「９０％径」という。）が上記５０％径の１５０％以下である
ことを特徴とする。

Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの外水相（６）は、水性乳化剤と添加剤を溶解した水溶液のことを言う。

ここで用いられる乳化剤は、水溶液に溶解させる水性乳化剤であり、その種類は、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを安定に保つことができる限り当該エマルションの用途に応じて、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン・ソルビタン系界面活性剤、レシチン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系界面活性剤、ポロクサマー系界面活性剤、コール酸ナトリウム等胆汁酸構成成分等の水性乳化剤等から適宜選択すれば良い。また、水性乳化剤の添加量についても、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの安定化に適した濃度に設定すればよいが、外水相全重量に対して０．１〜１０重量％となるような量が好ましい。

外水相には、添加剤として浸透圧調整剤やその他の添加剤を配合することもできる。浸透圧調整剤は、浸透圧を調節すると共に、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの安定化にも寄与している。

Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションにおいて、仮に、水溶性固体物質の飽和溶解度における浸透圧よりも、外水相の浸透圧が低い場合、浸透圧差を駆動力にして水が外水相から固体物質へ油相透過し、固体分散粒子が溶解する傾向にある。固体分散粒子が溶解してしまうと、Ｓ／Ｏ／ＷエマルションはＷ／Ｏ／Ｗエマルションへと変化し、固体物質の放出につながって安定性を保持し難くなる。従って、本発明のＳ／Ｏ／Ｗエマルションの場合、水の移動が発生しないように、水溶性固体物質の飽和溶解度における浸透圧よりも、外水相の浸透圧を高く設定することが好ましい。

外水相の浸透圧をどの程度高く設定するかについては、水溶性固体物質の種類や量などに応じて適宜設定すればよく、特に限定されるものではないが、一般に、水溶性固体物質飽和溶解度の浸透圧の１倍程度以上とするのが好ましく、１．５倍程度以上とするのがより好ましい。

本発明で用いる浸透圧調整剤は、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの安定化を妨げないものであれば特に制限されない。例えば、食塩などの無機塩類、グルコースやラクトースなどの糖類、グリセリンなどが好適である。

浸透圧調整剤の配合量は、所望の浸透圧が達成される限り特に限定されるものではなく、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションにおいて、水溶性固体物質の飽和溶解度における浸透圧よりも、外水相の浸透圧が高くなるような量とするのが好ましい。

他の添加剤としては、安定性を向上させる目的の増粘剤（例えば、アルギン酸、カラギーナン等）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸等）、防腐剤、ｐＨ調整剤などが挙げられる。

Ｓ／Ｏ／ＷエマルションにおけるＳ／Ｏ粒子の体積の割合は、用途に応じて適宜決定すれば良いが、安定性を考慮した場合、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション全体積に対して、５０容積％以下が望ましい。

４．Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの製造方法
本発明では、Ｓ／Ｏサスペンションを外水相に乳化させて、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを調製する。Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを調製するための乳化方法に特に制限はなく、安定なＳ／Ｏ／Ｗエマルションが調製できれば良い。例えば、攪拌したり、高圧ホモジナイザー、高速ホモミキサーなどを用いた一般的な乳化操作により調製することができる。Ｓ／Ｏ／ＷエマルションのＳ／Ｏ粒子をできるだけ小さく、且つ均一にすることが望まれる場合には、膜乳化法が最適である。すなわち、多孔質膜を介してＳ／Ｏサスペンションを外水相に透過分散するか、もしくは、あらかじめ調製したＳ／Ｏ／Ｗエマルションを多孔質膜に透過する膜乳化法を利用してＳ／Ｏ粒径を所望の範囲に制御することができる。多孔質膜への透過は、１回でもよいし、繰返し（例えば、２〜１０回程度）行ってもよい。

膜乳化法に用いる多孔質膜の形状、多孔質膜の細孔径、多孔質膜の細孔断面形状、材質等は、特に限定されるものではなく、上記「２．Ｓ／Ｏサスペンションの製造方法」で記載したようなものを用いることができる。

Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを製造する場合、多孔質膜表面の界面化学的性質は親水性とするのが好適である。従って多孔質膜の表面が親水性であればそのまま使用することが好ましく、疎水性であれば表面改質により膜表面を親水化した方が単分散Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを安定して生成することができる。親水化の方法には、シランカップリング剤など種々の反応試薬を用いて−ＯＨ基や−ＣＯＯＨ基を導入する方法、あるいは親水性コーティング剤を付与する方法等があるが、表面改質によって多孔質膜自体の細孔構造が損なわれない限り、特にその方法は限定されない。

膜乳化法により微細なＳ／Ｏ／Ｗエマルションを製造する場合は、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの界面張力を低く（例えば、５ｍＮ／ｍ程度以下）設定することが好ましい。界面張力が低い場合は、例えば、図４に示すように、多孔質膜の細孔（７）（孔径Ｄｍ）より大きなＳ／Ｏ粒子（８）（粒径Ｄｓ／ｏ）を有するＳ／Ｏ／Ｗエマルションを多孔質膜に対して透過すると、透過後のＳ／Ｏ粒子（９）はＤｓ／ｏ＜Ｄｍの粒径にまで微細化される。さらにそのＳ／Ｏ粒子（９）を再度膜透過すると、より微細化したＳ／Ｏ粒子（１０）に変化する。このように、界面張力が低い場合は、膜透過を繰り返すことにより、多孔質膜の細孔径よりも小さなＳ／Ｏ粒子を製造できる。

一方、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの界面張力が高い（例えば、５ｍＮ／ｍ程度を越える）場合は、例えば、図５に示すように、多孔質膜の細孔（７）より大きなＳ／Ｏ粒子（８）は多孔質膜を透過した後でもＤｓ／ｏ＞ＤｍのＳ／Ｏ粒子（１１）となり、これを何度繰り返してもＳ／Ｏ粒径は細孔よりも小さくなることはない。

なお、油相中の固体分散粒子（１２）（粒径Ｄｓ）が多孔質膜の細孔より大きい場合は、高い頻度で目詰まりが発生し、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを調製することが困難である。従って、図４および図５のいずれの場合であっても、Ｄｓ＜Ｄｍの関係であるように、固体分散粒子の粒径や多孔質膜の細孔径を選択する必要がある。

この場合に用いる多孔質膜の細孔径は、所望のＷ／Ｏ粒子が得られる限り特に限定されるものではないが、平均径が０．０５〜２０μｍ程度のものを用いるのが好ましい。

多孔質膜への透過の条件も、所望のＷ／Ｏ粒子が得られる限り特に限定されるものではないが、通常、加圧下（１ｋＰａ〜２０ＭＰａ程度）で、０℃〜９５℃程度、好ましくは４〜６０℃程度である。

このようにして、上記「３．Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション」に示すようなＳ／Ｏ／Ｗエマルションを得ることができる。

得られたＳ／Ｏ／Ｗエマルションは、医薬品分野、食品分野、化粧品分野などの種々の分野で用いることができる。例えば、Ｓ／Ｏ粒径が１μｍ以下であり、水溶性固体物質が抗癌剤である場合、このＳ／Ｏ／Ｗエマルションは静注ＤＤＳ製剤として用いることができる。特に、抗癌剤が塩酸イリノテカンである場合、抗腫瘍効果の高い塩酸イリノテカン静注製剤が得られる。

５．水溶性固体物質の放出方法
上述したように、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの安定性を保つために、外水相の浸透圧は水溶性固体物質の飽和溶解度における浸透圧よりも高く設定するのが望ましい。しかし、逆に、そのように浸透圧を設定したＳ／Ｏ／Ｗにおいて、外水相の浸透圧をその浸透圧より低くした時点で水溶性固体物質は放出を開始することになる。従って、これをスイッチング技術として利用することができる。浸透圧を下げることは外水相を希釈、すなわち、Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションに水を加えることよって行うことができる。

放出させる際に外水相の浸透圧をどの程度低くするかについては、所望の量の水溶性固体物質を放出できれば特に限定されるものではないが、一般に、水溶性固体物質飽和溶解度の浸透圧の１／２以下程度とするのが好ましく、１／１０以下程度とするのがより好ましい。

このような放出方法は、特に、医薬分野のＤＤＳ製剤の薬物放出機能として利用することができる。

以下、実施例を示し、本発明の特徴とするところをより一層明瞭にする。なお、本発明は、これら実施例に限定されるものではない。

実施例１
本発明のＳ／Ｏサスペンションとその製法、並びに粒径制御を確認するため、水溶性固体物質の濃度とＷ／Ｏエマルションの水相粒径がＳ／Ｏサスペンション固体分散粒子の粒径に及ぼす効果を調べた。

水溶性固体物質として色素のメチレンブルー（和光純薬工業製）、油性乳化剤にはショ糖エルカ酸エステル（三菱化学フーズ製、ＥＲ−２９０）、油剤には大豆油を用いた。

まず、上記メチレンブルーを純水に溶解し、２．７、１３、２７および５３ｍｍｏｌ／ｌの４種類の水溶液を調合した。次に、ＥＲ−２９０を５重量％溶解した大豆油（油相）に対して、これら水溶液の一定量（油相１ｍｌに対して０．２５ｍｌ）を添加してホモミキサーにより２４０００ｒｐｍ、１５分間の条件で乳化し、比較的微細なＷ／Ｏエマルションを得た。レーザー回折／散乱式粒度分布計（島津製作所製、ＳＡＬＤ−２０００）により測定した水相粒子の積算体積分布（１３）を図６に示す。平均水相粒径はＤｗ・＝・５０７・ｎｍであった。

このＷ／Ｏエマルションをエバポレーターにより窒素ガス雰囲気下で２〜３時間かけて脱水した。Ｗ／Ｏエマルションの水相粒子から水が蒸発し、それに溶解していたメチレンブルーは固体分散粒子になり、Ｓ／Ｏサスペンションが生成した。固体分散粒子の積算体積分布を図６に示す。初期のメチレンブルー濃度が２．７ｍｍｏｌ／ｌの場合（１４）の積算体積分布、１３ｍｍｏｌ／ｌでは（１５）、２７ｍｍｏｌ／ｌでは（１６）、５３ｍｍｏｌ／ｌでは（１７）となり、濃度が低いものほど分散粒子の粒径は小さくなった。

これら（１４）〜（１７）の平均粒径とメチレンブルー初期濃度の関係を図７にまとめた。図７中、○は、実測値を示す。これに上述の関係式
Ｄｓ＝（ＭｓＣｓ／ρ）^１／３Ｄｗ
に基づいて計算した結果（１８）を実線で併せて示したところ、実測した値と関係式はよく一致した。すなわち、上記関係式に従えば、Ｓ／Ｏサスペンションの分散粒子粒径を十分コントロールできることが確認できた。

実施例２
本発明のＳ／Ｏサスペンションとその製法、並びに粒径制御をさらに確認した。すなわち、水溶性固体物質として抗癌剤の塩酸イリノテカン（ヤクルト製）、油性乳化剤にテトラグリセリン縮合リシノレイン酸エステルＴＧＣＲ（阪本薬品工業製、ＣＲ−３１０）、油剤に大豆油を用い、塩酸イリノテカンを純水に溶解し、２．７、１３、２７および５３ｍｍｏｌ／ｌの４種類の水溶液を調合した。

次に、ＴＧＣＲを１０重量％溶解した油相に対して、これら水溶液の一定量（油相１ｍｌに対して０．２５ｍｌ）を添加してホモミキサーにより１６０００ｒｐｍ、１分間の条件で乳化し、水相の平均粒径が約１μｍの粗Ｗ／Ｏエマルションを得た。これを細孔径４００ｎｍの疎水性多孔質ガラス膜に３．５ＭＰａで透過し、平均水相粒径Ｄｗ＝５００ｎｍの単分散Ｗ／Ｏエマルションを調製した。この後、実施例１と同様の方法で脱水した結果、図６および図７とほぼ同じ結果が得られた。

また、塩酸イリノテカンの初期濃度５３ｍｍｏｌ／ｌの水溶液を用いて調製したＳ／Ｏサスペンションに、再度、同じ水溶液を加えてホモミキサーにより１６，０００ｒｐｍ、１分間の条件で乳化し、Ｗ／Ｏエマルションを生成した。これを平均細孔径４００ｎｍの疎水性多孔質ガラス膜に３．５ＭＰａで透過した。さらに、これを脱水してＳ／Ｏサスペンションを得るという操作を３度繰り返した。その結果、図６の（１７）と類似の累積体積分布を持ちながら、塩酸イリノテカンの含有量が４倍であるＳ／Ｏサスペンションが製造できた。

上記のようにして調製したＳ／Ｏサスペンションは、いずれも、３ヶ月放置しても分散固体粒子が凝集したり、沈降したりせず、極めて安定であった。

実施例３
本発明のＳ／Ｏ／Ｗエマルションとその製法、並びに膜乳化における膜孔径と界面張力がＳ／Ｏ／ＷエマルションのＳ／Ｏ粒径に及ぼす効果を調べた。

水溶性固体物質としてメチレンブルー、油性乳化剤としてＥＲ−２９０又はＴＧＣＲを５重量％溶解した大豆油を用い、実施例２と同様の方法で平均分散粒子がＤｓ＝９５ｎｍのＳ／Ｏサスペンションを製造した。これを分散相として、以下の外水相との組み合わせで２種類のＳ／Ｏ／Ｗエマルションを調製した。

ａ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション：油性乳化剤がＥＲ−２９０、外水相の水性乳化剤にＰｏｌｏｘａｍｅｒ−１８８（Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ社製）を１重量％、コール酸ナトリウム（和光純薬工業製）を１重量％添加；

ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション：油性乳化剤がＴＧＣＲ、外水相の水性乳化剤にＰｏｌｏｘａｍｅｒ−１８８を１重量％、コール酸ナトリウムを１重量％添加；

いずれも浸透圧調整剤としてグルコースを５重量％添加した。分散相と外水相の体積比は１：９である。

Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの調製は、まず、上記ａ又はｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション組成の分散相と外水相を混合攪拌し、Ｓ／Ｏ粒径が５〜５００μｍの範囲に分布する粗なＳ／Ｏ／Ｗエマルションを調製した。ａ及びｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの界面張力は、いずれも１．９ｍＮ／ｍであった。これらを細孔径Ｄｍ＝１．７０μｍの親水性多孔質ガラス膜に４回透過し、その後Ｄｍ＝０．３６μｍの親水性多孔質ガラス膜に４回透過して、透過流速Ｊ、Ｓ／Ｏ粒径と膜細孔径の関係 Ｄｓ／ｏ／Ｄｍ、粒径分散係数εの変化を調べた。粒径分散係数εは、粒子累積体積分布の１０％径、５０％径（平均粒径）、９０％径をそれぞれ^１０Ｄｓ／ｏ、^５０Ｄｓ／ｏ、^９０Ｄｓ／ｏとした時、
ε＝│^１０Ｄｓ／ｏ− ^９０Ｄｓ／ｏ│／^５０Ｄｓ／ｏ
と定義される粒子の単分散性を表す指標で、ε＜０．５が単分散である。

得られた結果を図８に示す。○印のａ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション（１９）と□印のｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルション（２０）では、Ｄｓ／ｏ／Ｄｍ＝１（２１）、すなわち、細孔径と同じ大きさであることを示すラインより小さなＳ／Ｏ粒子が生成し、膜透過を４回繰り返すことによってさらに小さくなった。また、５回目の透過から、Ｄｍ＝０．３６μｍの膜に代えてもその傾向は続いた。このため膜抵抗が低下してａ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの透過流束（２２）とｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの透過流束（２３）は上昇した。得られたＳ／Ｏ／Ｗエマルションは、この間、粒径分散係数が全てε＝０．５（２６）の単分散であった。

実施例４
本発明のＳ／Ｏ／Ｗエマルションとその製法、並びに膜乳化における膜孔径とＳ／Ｏ粒径が固体物質の封入率に及ぼす効果を調べた。

水溶性固体物質としてメチレンブルーの代わりに塩酸イリノテカンを用い、油性乳化剤としてＥＲ−２９０の代わりにＴＧＣＲを５重量％溶解した大豆油を用いる以外は、実施例１と同様にして、平均分散粒子が粒径Ｄｓ＝９５ｎｍのＳ／Ｏサスペンションを製造した。これを分散相として、実施例３と同様にして（予め粗なＳ／Ｏ／Ｗエマルションを調製し、次いで多孔質ガラス膜に４回透過させる）ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを調製した。ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションでは、あらかじめ調製しておいた疎なエマルションを細孔径Ｄｍ＝０．４５μｍの親水性多孔質ガラス膜に透過してＳ／Ｏ粒径Ｄｓ／ｏ＝３００ｎｍのＳ／Ｏ／Ｗエマルションにした。次に、これを細孔径Ｄｍ＝０．３６μｍの親水性多孔質ガラス膜に透過して、□印で表した透過流束Ｊ（２７）、Ｓ／Ｏ粒径Ｄｓ／ｏ（２８）および塩酸イリノテカン封入率（２９）の経時変化を調べた。得られた結果を図９に示す。

ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションは、多孔質ガラス膜の細孔径より小さなＳ／Ｏ粒子が膜を透過する。従って、Ｓ／Ｏ粒子は細孔壁との相互作用が少なく、同粒子内に存在する塩酸イリノテカン分散粒子の目詰まりが起こらないため、高い封入率と透過流束を確保できた。また、２００ｎｍのＳ／Ｏ粒径を得ることもできた。

以上のことから、本発明のＳ／Ｏ／Ｗエマルションでは、高い封入率を維持したままＳ／Ｏ粒径を小さい範囲、例えば２００ｎｍ以下に制御することが可能であることがわかった。また、塩酸イリノテカンを封入できたことから、静注用マイクロキャリアの製法として利用できることがわかった。

Ｓ／Ｏサスペンション製造方法を示すフロー図を示す図である。 Ｗ／ＯエマルションおよびＳ／Ｏサスペンションの概念を示す図である。 Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの概念を示す図である。 Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションを膜透過して微細化する場合の概念を示す図である。 界面張力が高い場合の膜透過の概念を示す図である。 実施例１のＷ／ＯエマルションとＳ／Ｏサスペンションの粒子累積体積分布の比較を示す図である。 実施例１のＳ／Ｏサスペンション固体分散粒子の平均粒径とメチレンブルー初期濃度の関係を示す図である。 実施例３のＳ／Ｏ／Ｗエマルション製法における多孔質膜細孔径と界面張力の効果を示す図である。 実施例４のＳ／Ｏ／Ｗエマルション製法における多孔質膜細孔径、Ｓ／Ｏ粒径および界面張力の効果を示す図である。

符号の説明

（１）Ｗ／Ｏエマルションの水相粒子
（２）油相
（３）油性乳化剤
（４）Ｓ／Ｏサスペンションの固体分散粒子
（５）Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの分散相粒子（Ｓ／Ｏ粒子）
（６）外水相
（７）多孔質膜の細孔
（８）多孔質膜を透過する前のＳ／Ｏ粒子
（９）多孔質膜を透過した後のＳ／Ｏ粒子
（１０）微細化したＳ／Ｏ粒子
（１１）界面張力が高い場合に多孔質膜を透過して生成したＳ／Ｏ粒子
（１２）油相中の固体分散粒子
（１３）Ｗ／Ｏエマルション水相粒子の積算体積分布
（１４）メチレンブルー初期濃度２．７ｍｍｏｌ／ｌの場合に生成した分散粒子の粒子累積体積分布
（１５）メチレンブルー初期濃度１３ｍｍｏｌ／ｌの場合に生成した分散粒子の粒子累積体積分布
（１６）メチレンブルー初期濃度２７ｍｍｏｌ／ｌの場合に生成した分散粒子の粒子累積体積分布
（１７）メチレンブルー初期濃度５３ｍｍｏｌ／ｌの場合に生成した分散粒子の粒子累積体積分布
（１８）平均粒径とメチレンブルー初期期濃度の計算結果
（１９）ａ−Ｓ／Ｏ／ＷエマルションのＳ／Ｏ粒径変化
（２０）ｂ−Ｓ／Ｏ／ＷエマルションのＳ／Ｏ粒径変化
（２１）細孔径と同じ大きさであることを示す関係 Ｄｓ／ｏ／Ｄｍ＝１のライン
（２２）ａ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの透過流束変化
（２３）ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの透過流束変化
（２６）粒径分散係数ε＝０．５のライン
（２７）ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの透過流束変化
（２８）ｂ−Ｓ／Ｏ／ＷエマルションのＳ／Ｏ粒径変化
（２９）ｂ−Ｓ／Ｏ／Ｗエマルションの封入率変化

Claims (6)

1. Ｗ／Ｏエマルションを脱水することにより、平均粒径２０ｎｍ〜１０μｍの粒子として水溶性固体物質が油相中に分散したＳ／Ｏサスペンションを製造することを特徴とするＳ／Ｏサスペンションの製造方法。
2. Ｗ／Ｏエマルションが、あらかじめ調製されたＷ／Ｏエマルションを多孔質膜に透過することにより得られる、請求項１に記載のＳ／Ｏサスペンションの製造方法。
3. Ｗ／Ｏエマルションを脱水してＳ／Ｏサスペンションを得た後に、下記の工程（ａ）及び（ｂ）
   （ａ）該Ｓ／Ｏサスペンションに水相を加えて乳化する工程、及び
   （ｂ）該混合物を脱水してＳ／Ｏサスペンションを得る工程
   を繰り返すことを特徴とする請求項１又は２に記載の製造方法。
4. 繰り返しが２〜１０回であることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
5. 水溶性固体物質が抗癌剤であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
6. 多孔質膜が多孔質ガラス膜であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の製造方法。