JP2008545628A - α−シヌクレイン毒性のモジュレーター - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、α-シヌクレイン媒介性毒性を阻害する組成物および方法、ならびにα-シヌクレイン媒介性毒性の阻害剤を同定するための方法に関する。
本出願は、2005年5月13日に出願された米国特許仮出願第60/681,126号、および2006年1月6日に出願された米国特許仮出願第60/756,853号からの優先権を主張する。これらの先行出願のそれぞれの全内容は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。
本発明は、米国国立衛生研究所(National Institutes of Health)により授与された認可番号2P50 NS038372-0681による政府援助でなされた。米国政府は、本発明に一定の権利を有しうる。
パーキンソン病は、主要構成要素がα-シヌクレイン(Spillantini et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:6469-6473, 1998; Arai et al., Neurosci. Lett. 259:83-86, 1999)、140アミノ酸のタンパク質(Ueda et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:11282-11286, 1993)、からなるフィラメントである、細胞質内のレビー小体(Lewy in Handbuch der Neurologie, M. Lewandowski, ed., Springer, Berlin, pp. 920-933, 1912; Pollanen et al., J. Neuropath. Exp. Neurol. 52:183-191, 1993)の存在により病理学的に特徴付けられる神経変性障害である。家族性若年性パーキンソン病を引き起こすα-シヌクレインにおける2つの優性突然変異が記述されており、レビー小体が、パーキンソン病および関連障害におけるニューロンの変性に機構的に寄与することを示唆している(Polymeropoulos et al., Science 276:2045-2047, 1997; Kruger et al., Nature Genet. 18:106-108, 1998; Zarranz et al., Ann. Neurol. 55:164-173, 2004)。α-シヌクレイン遺伝子の三重化および二重化突然変異が、パーキンソン病の早期発症に結びつけられている(Singleton et al., Science 302:841, 2003; Chartier-Harlin et al., Lancet 364:1167-1169, 2004; Ibanez et al., Lancet 364:1169-1171, 2004)。インビトロ研究は、組換えα-シヌクレインが実際にレビー小体様原線維を形成することができることを実証している(Conway et al., Nature Med. 4:1318-1320, 1998; Hashimoto et al., Brain Res. 799:301-306, 1998; Nahri et al., J. Biol. Chem. 274:9843-9846, 1999)。両方のパーキンソン病関連α-シヌクレイン突然変異は、この凝集過程を促進し、そのようなインビトロ研究が、パーキンソン病病因について関連性がありうることを実証している。α-シヌクレイン凝集および原線維形成は、核形成依存性重合過程の基準を満たす(Wood et al., J. Biol. Chem. 274:19509-19512, 1999)。この点において、α-シヌクレイン原線維形成は、アルツハイマーのβ-アミロイドタンパク質(Aβ)原線維のそれと似ている。α-シヌクレイン組換えタンパク質、およびα-シヌクレインの35アミノ酸のペプチド断片である非Aβ構成要素(NACとして知られている)の両方は、37℃でインキュベートされた場合、原線維を形成する能力をもち、コンゴレッド(偏光下で見る場合、赤色/緑色複屈折を示す)およびチオフラビンS(陽性蛍光を示す)のようなアミロイド染色で陽性である(Hashimoto et al., Brain Res. 799:301-306, 1998; Ueda et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:11282-11286, 1993)。
本発明は、特定の遺伝子が、α-シヌクレインを発現する細胞において過剰発現する場合、α-シヌクレイン媒介性細胞毒性を抑制または増強するという発見に、少なくとも一部、基づいている。これらの遺伝子がα-シヌクレイン媒介性毒性に関連していることの同定により、毒性を調節する化合物を同定するためのスクリーニングの実行が可能になる。そのようなスクリーニングにより同定された化合物は、パーキンソン病のようなシヌクレイノパチーの処置または予防のための候補薬物として用いられうる。PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する化合物の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物を、必要としている被験体に投与することによりシヌクレイノパチーを処置または予防する方法が本明細書に記載されている。いくつかの態様において、シヌクレイノパチーは、パーキンソン病(農薬、殺虫剤、もしくは除草剤のような環境的薬剤、および/もしくはマグネシウム、アルミニウム、カドミウム、銅、もしくは亜鉛のような金属への曝露により化学的に引き起こされるパーキンソン病、SNCA遺伝子連鎖型パーキンソン病、散発性もしくは特発性パーキンソン病、またはパーキン連鎖型もしくはLRRK2連鎖型パーキンソン病を含む)、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、ゴーシェ病、またはグアムのパーキンソニズム-認知症複合である。タンパク質の発現または活性を阻害する化合物は、例えば、タンパク質の分解を刺激することができる化合物を含む。
特定の遺伝子の過剰発現が、結果として、α-シヌクレイン媒介性細胞毒性の調節を生じるということが見出されている。コードされたタンパク質のこれらの遺伝子または活性の発現を調節する化合物は、α-シヌクレイン媒介性毒性を阻害するために用いることができる、およびパーキンソン病のようなシヌクレイノパチーを処置または予防するために用いることができる。
添付の実施例に詳述されているように、酵母細胞においてα-シヌクレインの過剰発現に関連した細胞毒性を調節するいくつかの遺伝子が同定されている。これらの遺伝子は酵母において過剰発現される場合、毒性を抑制することが見出され、このことから該遺伝子の発現および/または遺伝子によりコードされたタンパク質の活性を増強することにより、α-シヌクレイン発現細胞における毒性の抑制につながることが予想される。逆に、酵母において過剰発現される場合、毒性を増強することが見出されたそれらの遺伝子について、遺伝子の発現および/または遺伝子によりコードされるタンパク質の活性を阻害することが、α-シヌクレイン発現細胞において毒性の抑制を生じることが予想される。
付随の実施例において詳述されているように、遺伝子TSPS3の過剰発現は、結果として、α-シヌクレイン毒性の強力な抑制を生じた。TSPS3は、トレハロース合成複合体の調節サブユニットをコードする。
本明細書に記載された方法は、選択された標的遺伝子もしくはそれらのタンパク質産物の発現または活性を調節する(すなわち、増加または減少させる)化合物を同定するための方法(本明細書において「スクリーニングアッセイ」とも呼ばれる)を含む。そのような化合物は、例えば、ポリペプチド、ペプチド、抗体、ペプチド模倣体、ペプトイド、無機小分子、非核酸有機小分子、核酸(例えば、アンチセンス核酸、siRNA、オリゴヌクレオチド、合成オリゴヌクレオチド)、糖質、または標的タンパク質に結合する、例えば、標的遺伝子の発現もしくは標的タンパク質の活性へ、刺激性もしくは阻害性効果を生じる他の作用物質を含む。このように同定された化合物は、治療プロトコールにおいて、標的遺伝子もしくは標的タンパク質の発現または活性を調節するために用いることができる。
標的タンパク質発現または活性を調節する方法は、標的核酸配列もしくはその断片へ、または標的タンパク質へターゲットされる核酸分子を含む様々な化合物を用いて達成されうる。標的タンパク質発現または活性を阻害するために有用でありうる化合物は、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、非核酸有機小分子、無機小分子、抗体またはその断片、アンチセンスオリゴヌクレオチド、siRNA、およびリボザイムを含む。そのような化合物を同定する方法は、本明細書に記載されている。
標的RNAにターゲットされる分子は、本明細書に記載された方法、例えば、標的タンパク質発現の阻害、例えば、パーキンソン病のようなシヌクレイノパチーを処置するための方法、に有用である。核酸の例は、siRNAを含む。RNAiに関連した機構を用いて機能する、他のそのような分子もまた用いることができ、化学修飾されたsiRNA、およびその後siRNAへ切断されるヘアピンRNAのベクター作動性発現を含む。本明細書に記載されているような、有用である核酸分子または構築物は、各鎖に16〜30個、例えば、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、または30個のヌクレオチドを含むdsRNA(例えば、siRNA)分子であって、鎖の一方が、mRNAにおける標的領域と実質的に同一である、例えば、少なくとも80%(またはそれ以上、例えば、85%、90%、95%、または100%)同一である、例えば、3個、2個、1個または0個のミスマッチしたヌクレオチドを有し、かつ他方の鎖が、第一の鎖と相補的である、分子を含む。dsRNA分子は、化学合成されうる、インビトロでDNA鋳型から転写されうる、またはインビボで、例えばshRNAから転写されうる。dsRNA分子は、当技術分野において公知の方法、例えば、Dharmacon.com(siDESIGN CENTER参照)、またはmpibpc.gwdg.de/abteilunge-n/100/105/sirna.htmlでインターネットで入手できる「The siRNA User Guide」、を用いて設計されうる。
アンチセンス核酸は、標的タンパク質を阻害するために有用である。そのようなアンチセンス核酸分子、すなわち、ヌクレオチド配列が、標的タンパク質をコードするmRNAの全部または一部と相補的である、核酸分子。アンチセンス核酸分子は、標的タンパク質をコードするヌクレオチド配列のコード鎖の非コード領域の全部または一部に対してアンチセンスでありうる。非コード領域(「5'および3'非翻訳領域」)は、コード領域に隣接し、かつアミノ酸へ翻訳されない5'および3'配列である。
標的核酸配列に対する特異性をもつリボザイムもまた、標的遺伝子発現を阻害するために用いられうる。リボザイムは、それらが相補性領域を有するmRNAのような一本鎖核酸を切断する能力があるリボヌクレアーゼ活性をもつ触媒性RNA分子である。従って、リボザイム(例えば、ハンマーヘッド型リボザイム(Haselhoff and Gerlach, Nature, 334:585-591, 1988に記載された))は、mRNA転写産物を触媒的に切断し、それにより、mRNAによりコードされるタンパク質の翻訳を阻害するために用いられうる。リボザイムを設計および作製する方法は、当技術分野において公知である(例えば、Scanlon, 1999, Therapeutic Applications of Ribozymes, Humana Press参照)。標的核酸分子またはその断片に対する特異性をもつリボザイムは、標的cDNAのヌクレオチド配列に基づいて設計されうる。例えば、Tetrahymena L-19 IVS RNAの誘導体を構築することができ、活性部位のヌクレオチド配列が、標的RNAにおいて切断されうるヌクレオチド配列に相補的である(Cech et al., 米国特許第4,987,071号;およびCech et al., 米国特許第5,116,742号)。または、標的タンパク質またはその断片をコードするmRNAは、RNA分子のプールから特異的リボヌクレアーゼ活性をもつ触媒性RNAを選択するために用いられうる(例えば、Bartel and Szostak, Science, 261:1411-1418, 1993参照)。
単離された標的タンパク質、その断片およびその変異体は、本明細書に提供されている。これらのポリペプチドは、例えば、抗体を産生させるための免疫原として、スクリーニング方法において、または、例えば、標的タンパク質の投与により、被験体を処置する方法において、用いられうる。「単離された」もしくは「精製された」ポリペプチドまたはその生物活性部分は、タンパク質が由来する細胞源もしくは組織源由来のタンパク質を含む細胞物質を始めとする物質を実質的に含まない、または、化学合成された場合、化学物質前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない。専門用語「細胞物質を実質的に含まない」とは、対象となるポリペプチドが、それが単離されるまたは組換え技術によって産生される細胞の細胞成分から分離されている、ポリペプチドの調製を含む。従って、細胞物質を実質的に含まないポリペプチドは、約30%未満、20%未満、10%未満、または5%未満(乾燥重量で)の異種性タンパク質(本明細書で「混入タンパク質」とも呼ばれている)を有するポリペプチドの調製物を含む。一般的に、ポリペプチドまたはその生物活性部分が組換え技術によって産生される場合、それもまた、培地を実質的に含まない、すなわち、培地は、タンパク質調製物の容量の約20%未満、10%未満、または5%未満を示す。一般的に、ポリペプチドが化学合成により作製される場合、それは、化学物質前駆体または他の化学物質を実質的に含まない、すなわち、ポリペプチドの合成に関与する化学物質前駆体または他の化学物質から分離されている。従って、そのようなポリペプチドの調製物は、対象となるポリペプチド以外に約30%未満、20%未満、10%未満、もしくは5%未満(乾燥重量で)の化学物質前駆体または化合物を有する。
標的タンパク質またはその断片は、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体調製のための標準技術を用いて抗体を産生するための免疫原として用いられうる。完全長ポリペプチドまたはタンパク質が用いられうる、または抗原性ペプチド断片が、免疫原として用いられうる。タンパク質の抗原性ペプチドは、標的タンパク質のアミノ酸配列の少なくとも8個(例えば、少なくとも10個、15個、20個または30個)のアミノ酸残基を含み、ペプチドに対して産生される抗体がポリペプチドとの特異的免疫複合体を形成するように、標的タンパク質のエピトープを含む。
本明細書に記載された方法によりスクリーニングされ、標的タンパク質発現または活性を調節することが決定されている試験化合物は、候補化合物とみなされうる。例えば、パーキンソン病のようなシヌクレイノパチーのインビボモデルにおいてスクリーニングされ、その障害へ所望の効果を生じることが決定されている候補化合物は、候補治療薬剤とみなされうる。いったん臨床設定においてスクリーニングされたならば、候補治療薬剤は、治療薬剤である。候補治療薬剤および治療薬剤は、任意で、最適化および/または誘導体化され、ならびに薬学的組成物を形成するために生理学的に許容可能な賦形剤で製剤化されうる。
本明細書に記載された化合物および本明細書に記載されているように同定されたものが、α-シヌクレイン毒性および/または、α-シヌクレイン原線維を含むシヌクレイン原線維の形成、沈着、蓄積、もしくは持続に関連した疾患のリスクがあるかまたは疾患に罹っている被験体を処置するために用いられうる。特定の態様において、疾患は、パーキンソン病(農薬、殺虫剤、もしくは除草剤のような環境的薬剤、および/もしくはマグネシウム、アルミニウム、カドミウム、銅もしくは亜鉛のような金属への曝露により化学的に引き起こされるパーキンソン病、SNCA遺伝子連鎖型パーキンソン病、散発性もしくは特発性パーキンソン病、またはパーキン連鎖型もしくはLRRK2連鎖型パーキンソン病を含む)、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、ゴーシェ病、およびグアムのパーキンソン認知症複合のようなシヌクレイノパチーを含む。
付随の実施例に詳述されているように、以下の経路に関与する遺伝子の過剰発現は、α-シヌクレイン媒介性毒性を調節することが見出された:トレハロース生合成(TPS3);ニトロソ化ストレスに対する応答(FZF1);ホスファターゼ活性(YKL033W-A、SIT4、PPH21、およびCAX4);およびキヌレニン合成(YER152C)。これらの遺伝子の発現、またはコードされたタンパク質の活性を調節する化合物は、α-シヌクレイン媒介性毒性を低下させ、かつシヌクレイノパチーを処置するための候補治療薬剤であることが予想される。そのような化合物を同定するためのスクリーニング方法は本明細書で詳細に記載されている。
実施例1:材料および方法
プラスミド過剰発現スクリーニングに用いられた、より毒性の低いα-シヌクレイン菌株の特徴
モディファイヤースクリーニングに用いられた、2コピーα-シヌクレイン発現酵母菌株は、HIS3およびTRP1に組み込まれたaSyn-YFP、加えて、各推定上のモディファイヤー遺伝子を発現させうるガラクトース誘導性プロモーターを含むCENに基づいた染色体外プラスミドからなった。余分のガラクトース誘導性プロモーター(合計3つ)および異なるaSyn-YFP組み込み部位の存在は、結果として、最初の2コピー菌株と比較してわずかに低い毒性を生じた(Outeiro et al. (2003) Science 302:1772)。わずかに毒性の低い菌株は、ITox2Cと呼ばれ、より高い毒性の菌株はHTox2Cと呼ばれる。
増殖曲線は、2%ラフィノースを含む合成培地において細胞を一晩、30℃で対数期まで増殖させ、その後、それらを0.1〜0.3 OD600nmまで希釈することにより作製された。2%ガラクトースをその後、添加し、OD600nm読みを、示された時点で取った。生存率アッセイは、記載されているように(Haynes et al. (2004) Mol Cell 15:767)、行われた。簡単には、生存率は、ラフィノースを含む合成培地において菌株を一晩、対数期まで増殖させ、続いて、α-シヌクレインの発現を誘導するために2%ガラクトースを添加することにより、測定された。野生型細胞を対数期に維持するために、いくつかの希釈が、時間経過を通してなされた。記載された時点において、1 OD600nmを収集し、1:1000に希釈し、これらの細胞の300μlを、2%グルコースを含む合成培地上に蒔き、30℃でインキュベートした。コロニー形成単位を、その後、測定した。
3000個の完全長酵母ORFを、ポリメラーゼ連鎖反応により増幅し、Gateway(商標)pDONR221ベクター(Invitrogen)への組換えクローニングにより捕獲した。クローンを、N末端からC末端までシーケンシングし、野生型であることを検証した。発現スクリーニングのために、クローンを、Gateway(商標)テクノロジー(Invitrogen)を用いてガラクトース誘導性発現プラスミド(pBY011; CEN, URA+, ampR)へ移動した。酵母FLEXGeneコレクションについてのさらなる情報は、www.hip.harvard.edu/research/yeast_flexgene/において入手できる。発現クローン由来のプラスミドDNAを、REAL(商標)ミニプレップキット(Qiagen)を用いて単離した。DNAを、96ウェルマイクロタイタープレートの個々のウェルにおいて乾燥させ、HIS3およびTRP1座に組み込まれたα-シヌクレインを発現する菌株へ形質転換した。標準酢酸リチウム形質転換プロトコールは、自動化のために改変され、BIOROBOT Rapidplate 96ウェルピペッター(Qiagen)を用いることにより使用された。形質転換体を、グルコースを含む、ウラシルを欠く合成欠損培地(SD-Ura)において、一晩、増殖させた。一晩の培養物を、新鮮なラフィノースを含むSD-Ura培地へ播種し、定常期に達するようにさせておいた。細胞を、SD-Ura+グルコースおよびSD-Ura+ガラクトースの寒天プレート上へスポットした。α-シヌクレイン誘導性毒性のサプレッサーを、30℃での2〜3日間の増殖後、ガラクトースプレート上で同定した。スクリーニングは、独立した3回、繰り返され、候補モディファイヤー遺伝子は、それらの確実性を確認するために少なくとも2回、再試験された。α-シヌクレイン発現における単純な低下に起因する偽陽性毒性サプレッサー遺伝子の可能性を排除するために、α-シヌクレインタンパク質の量を、ウェスタンブロッティングおよびフローサイトメトリーによりモニターした。α-シヌクレイン発現に関連性のない一般的な増殖阻害に起因する偽陽性エンハンサー遺伝子を排除するために、これらの遺伝子を、野生型酵母細胞へ形質転換し、増殖へのそれらの効果を測定した。
遺伝学的アプローチは、決定的な致死傷害を同定するために用いられた。個々の酵母オープンリーディングフレームが完全にシーケンシングされて、ガラクトース誘導性プロモーターの制御下にタンパク質タグ無しで置かれた過剰発現ライブラリーが用いられた。すべての機能性クラスを代表する、このライブラリーにおける3000個のランダムに選択された遺伝子を、個々にaSyn-WTを発現する酵母菌株へ形質転換した。以前に記載されているもの(Outeiro et al. (2003) Science 302:1772および実施例1)よりわずかに低いレベルのα-シヌクレイン発現を示す酵母菌株が用いられた。毒性についての延長された時間経過が、ガラクトース含有寒天プレート上にかなりの増殖を生じ、毒性のエンハンサーおよびサプレッサーについて同時にスクリーニングすることを可能にした。過剰発現された場合、α-シヌクレイン毒性を抑制するかまたは増強するかのいずれかである遺伝子が同定された(表2)。スクリーニング中に濃縮された1つの機能性クラスは、スクリーニングの有効性についての原理の証明を提供した。これらの遺伝子(表2に非呈示)は、特異的に炭水化物代謝およびガラクトース制御性遺伝子発現に関与するか、または、より全般的な遺伝子発現の阻害を生じるかのいずれかであった。驚くことではないが、これらは、α-シヌクレイン毒性に特異的ではなかった。
本発明はその詳細な説明と共に記載されているが、前述の説明は、例証することを意図し、本発明の範囲を限定することを意図しないことは、理解されるべきである。本発明の他の局面、利点、および改変は、特許請求の範囲の範囲内である。
Claims (50)
- シヌクレイノパチーを処置または予防する方法であって、それを必要としている被験体に、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する化合物の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
- シヌクレイノパチーが、パーキンソン病、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、およびゴーシェ病である、請求項1記載の方法。
- αシヌクレイン媒介性細胞毒性を阻害する方法であって、αシヌクレインの毒性誘導性の量または型を発現する細胞を、SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する化合物の有効量と接触させる段階を含む方法。
- 化合物が前記タンパク質をコードするRNAの翻訳を阻害する核酸を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の方法。
- 化合物が前記タンパク質をコードするDNAの転写を阻害する核酸を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の方法。
- 以下の段階を含む、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物を同定する方法:
細胞の生存度を低下させるαシヌクレインの量または型を発現する細胞を供給する段階;
SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する作用物質と該細胞とを接触させる段階;および
作用物質の存在下において細胞生存度を測定する段階であって、作用物質の非存在下における細胞生存度と比較した作用物質の存在下における細胞生存度の増加により、作用物質が、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物を同定する方法:
SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する作用物質を同定するためにスクリーニングする段階;
細胞の生存度を低下させるαシヌクレインの量または型を発現する細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下において細胞生存度を測定する段階であって、作用物質の非存在下における細胞生存度と比較した作用物質の存在下における細胞生存度の増加により、作用物質が、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の発現を阻害する化合物を同定する方法:
SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、またはZNF740を発現する細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下においてタンパク質の発現を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるタンパク質の発現と比較した作用物質の存在下におけるタンパク質の発現の低下により、作用物質が、タンパク質の発現を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の発現を阻害する化合物を同定する方法:
(i)SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、またはZNF740をコードする遺伝子のプロモーター配列および(ii)レポータータンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むレポーター構築物を含む細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;ならびに
作用物質の存在下においてレポータータンパク質の発現を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるレポータータンパク質の発現と比較した作用物質の存在下におけるレポータータンパク質の発現の低下により、作用物質が、タンパク質の発現を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の活性を阻害する化合物を同定する方法:
SIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、またはZNF740タンパク質を供給する段階;
該タンパク質を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下において該タンパク質の活性を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるタンパク質の活性と比較した作用物質の存在下におけるタンパク質の活性の低下により、作用物質が、タンパク質の活性を阻害する化合物であると同定される段階。 - 作用物質が合成化合物である、請求項6〜10のいずれか一項記載の方法。
- 作用物質が天然化合物である、請求項6〜10のいずれか一項記載の方法。
- 作用物質が小分子、核酸、タンパク質、抗体、またはペプチド模倣体である、請求項6〜10のいずれか一項記載の方法。
- 細胞が酵母細胞である、請求項6〜9のいずれか一項記載の方法。
- 細胞が哺乳動物細胞である、請求項6〜9のいずれか一項記載の方法。
- 以下の段階を含む、シヌクレイノパチーの存在についてまたはシヌクレイノパチーを発症することに対する感受性について個体を評価する方法:
第一被験体から生体試料を得る段階;
PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性について試料を分析する段階;および
第一被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性を、シヌクレイノパチーに罹っていないかまたはシヌクレイノパチーを発症するリスクがない第二被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性と比較する段階であって、第一被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性の増加により、被験体がシヌクレイノパチーに罹っているかまたはシヌクレイノパチーを発症するリスクがある個体であることが示される段階。 - PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、もしくはZNF740の発現または活性を阻害する化合物の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物。
- 化合物が前記タンパク質をコードするRNAの翻訳を阻害する核酸を含む、請求項17記載の薬学的組成物。
- 化合物が前記タンパク質をコードするDNAの転写を阻害する核酸を含む、請求項17記載の薬学的組成物。
- シヌクレイノパチーを処置または予防する方法であって、それを必要としている被験体に、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの発現または活性を増強する化合物の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
- シヌクレイノパチーが、パーキンソン病、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、およびゴーシェ病である、請求項20記載の方法。
- 薬学的組成物が、(i)KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの治療的または予防的な量、および(ii)薬学的に許容可能な担体を含む、請求項20または21記載の方法。
- αシヌクレイン媒介性細胞毒性を阻害する方法であって、αシヌクレインの毒性誘導性の量または型を発現する細胞を、FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの発現または活性を増強する化合物の有効量と接触させる段階を含む方法。
- 以下の段階を含む、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物を同定する方法:
細胞の生存度を低下させるαシヌクレインの量または型を発現する細胞を供給する段階;
FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの発現または活性を増強する作用物質と該細胞とを接触させる段階;および
作用物質の存在下において細胞生存度を測定する段階であって、作用物質の非存在下における細胞生存度と比較した作用物質の存在下における細胞生存度の増加により、作用物質が、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物を同定する方法:
FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの発現または活性を増強する作用物質を同定するためにスクリーニングする段階;
細胞の生存度を低下させるαシヌクレインの量または型を発現する細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下において細胞生存度を測定する段階であって、作用物質の非存在下における細胞生存度と比較した作用物質の存在下における細胞生存度の増加により、作用物質が、αシヌクレイン媒介性毒性を阻害する化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の発現を増加させる化合物を同定する方法:
FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATタンパク質を発現する細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下においてタンパク質の発現を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるタンパク質の発現と比較した作用物質の存在下におけるタンパク質の発現の増加により、作用物質が、タンパク質の発現を増加させる化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の発現を増加させる化合物を同定する方法:
(i)FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATをコードする遺伝子のプロモーター配列、および(ii)レポータータンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むレポーター構築物を含む細胞を供給する段階;
該細胞を作用物質と接触させる段階;ならびに
作用物質の存在下においてレポータータンパク質の発現を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるタンパク質の発現と比較した作用物質の存在下におけるレポータータンパク質の発現の増加により、作用物質が、タンパク質の発現を増加させる化合物であると同定される段階。 - 以下の段階を含む、タンパク質の活性を増加させる化合物を同定する方法:
FZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATからなる群より選択されるタンパク質を供給する段階;
該タンパク質を作用物質と接触させる段階;および
作用物質の存在下において該タンパク質の活性を測定する段階であって、作用物質の非存在下におけるタンパク質の活性と比較した作用物質の存在下におけるタンパク質の活性の増加により、作用物質が、タンパク質の活性を増加させる化合物であると同定される段階。 - 作用物質が天然化合物である、請求項24〜28のいずれか一項記載の方法。
- 作用物質が小分子、核酸、タンパク質、抗体、またはペプチド模倣体である、請求項24〜28のいずれか一項記載の方法。
- 細胞が酵母細胞である、請求項24〜27のいずれか一項記載の方法。
- 細胞が哺乳動物細胞である、請求項24〜27のいずれか一項記載の方法。
- 以下の段階を含む、シヌクレイノパチーの存在についてまたはシヌクレイノパチーを発症することに対する感受性について個体を評価する方法:
第一被験体から生体試料を得る段階;
KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATからなる群より選択される1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性について試料を分析する段階;および
第一被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性を、シヌクレイノパチーに罹っていないかまたはシヌクレイノパチーを発症するリスクがない第二被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性と比較する段階であって、第一被験体由来の試料における1つもしくは複数のタンパク質の発現または活性の減少により、被験体がシヌクレイノパチーに罹っているかまたはシヌクレイノパチーを発症するリスクがある個体であることが示される段階。 - 以下の段階を含む、シヌクレイノパチーの存在についてまたはシヌクレイノパチーを発症することに対する感受性について個体を評価する方法:
第一被験体から生体試料を得る段階;
KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATからなる群より選択される第一タンパク質の発現または活性について試料を分析する段階;
PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、またはZNF740からなる群より選択される第二タンパク質の発現または活性について試料を分析する段階;ならびに
第一被験体由来の試料における第一タンパク質および第二タンパク質の発現または活性を、シヌクレイノパチーに罹っていないかもしくはシヌクレイノパチーを発症するリスクがない第二被験体由来の試料における第一タンパク質および第二タンパク質の発現または活性と比較する段階であって、第一被験体由来の試料における第一タンパク質の発現または活性の減少および第二タンパク質の発現または活性の増加により、被験体がシヌクレイノパチーに罹っているかまたはシヌクレイノパチーを発症するリスクがある個体であることが示される段階。 - KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、もしくはAADATの発現または活性を増加させる化合物の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物。
- (i)KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATからなる群より選択される単離されたポリペプチドの治療的または予防的な量、および(ii)薬学的に許容可能な担体を含む、請求項35記載の薬学的組成物。
- シヌクレイノパチーを処置または予防する方法であって、それを必要としている被験体に、オスモライトの治療的または予防的な量を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
- オスモライトがトレハロースである、請求項37記載の方法。
- オスモライトがソルビトール、グリセロホスホリルコリン、ミオイノシトール、およびベタインからなる群より選択される、請求項37記載の方法。
- シヌクレイノパチーが、パーキンソン病、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、およびゴーシェ病である、請求項37〜39のいずれか一項記載の方法。
- αシヌクレイン媒介性細胞毒性を阻害する方法であって、αシヌクレインの毒性誘導性の量または型を発現する細胞を、オスモライトの有効量と接触させる段階を含む方法。
- オスモライトがトレハロースである、請求項41記載の方法。
- オスモライトがソルビトール、グリセロホスホリルコリン、ミオイノシトール、およびベタインからなる群より選択される、請求項41記載の方法。
- シヌクレイノパチーを処置または予防する方法であって、それを必要としている被験体に、トレハラーゼ阻害剤の治療的または予防的な量を含む薬学的組成物を投与する段階を含む方法。
- シヌクレイノパチーが、パーキンソン病、レビー小体型認知症、純粋自律神経不全症、多系統萎縮症、偶発性レビー小体病、パントテン酸キナーゼ関連神経変性、アルツハイマー病、ダウン症候群、およびゴーシェ病である、請求項44記載の方法。
- αシヌクレイン媒介性細胞毒性を阻害する方法であって、αシヌクレインの毒性誘導性の量または型を発現する細胞を、トレハラーゼ阻害剤の有効量と接触させる段階を含む方法。
- αシヌクレインをコードする第一発現ベクター、およびSIT4、PPH21、CAX4、BEM3、YOR114W、UBX7、EPS1、STD1、SUT2、ECM32、PPZ1、SOL2、SMY2、YML081W、YKL063C、YOR338W、YIL055C、YMR258C、PPP2CB、PPP6C、PPP4C、PPP2CA、PPP1CA、PPP2CB、PPP2CA、PPP4C、PPP6C、PPP1CC、DOLPP1、ARHGAP24、ARHGAP21、ABR、ARHGAP22、SRGAP1、TXNDC10、UPF1、PRIC285、IGHMBP2、LOC91431、MOV10、PPP1CB、PGLS、H6PD、EGR3、ZFP161、EGR2、HKR1、またはZNF740をコードする第二発現ベクターを含む細胞。
- αシヌクレインをコードする第一発現ベクター、およびFZF1、TPS3、YKL033W-A、YER152C、CCC1、ICY1、ICY2、THI6、YBR250W、YPL201C、YIL102C、YML083C、CDC4、APJ1、CDC5、GIP2、PDE2、AVT4、UIP5、RCK1、NVJ1、PHO80、YOR129C、YDL121C、UBP3、YDR374C、YNR014W、KLF11、KLF15、ZNF624、GLIS3、ZNF22、HDHD1A、USP10、キヌレニンアミノトランスフェラーゼII、FBXW7、FBXW11、BTRC、WDR69、WDR5、DNAJA2、DNAJA1、DNAJA4、DNAJB5、DNAJB1、PLK3、PLK2、PLK1、PLK4、AURKA、PPP1R3C、PPP1R3B、SLC36A4、SLC36A1、SLC36A2、SLC36A3、SLC38A6、PDE4B、PDE9A、PDE4D、PDE4A、PDE8A、CAMK1G、CAMK1、CAMK1D、PNCK、DCAMKL3、YTHDF3、YTHDF2、YTHDF1、YTHDC1、YTHDC2、またはAADATをコードする第二発現ベクターを含む細胞。
- 細胞が酵母細胞である、請求項47または48記載の細胞。
- 細胞が哺乳動物細胞である、請求項47または48記載の細胞。
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