JP2008530244A - フコシル残基を欠くcd30に対するモノクローナル抗体 - Google Patents
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Abstract
Description
9:1620-1627 (1995))。このファミリーのメンバーは、リンパ球の増殖と分化の調節に重要であると考えられている。
al. Nature 299:65 (1982))。マウスおよびラットCD30cDNAは、498および493アミノ酸をそれぞれコードすることがわかっている。ヒトCD30cDNAは、さらに90アミノ酸をコードし、システインリッチなドメインから部分的に複製される。CD30遺伝子は、ヒトにおける1p36、およびラットにおける5q36.2をマッピングしていた。
al., Blood 83:2045-2056 (1994))。CD30は、本来、ホジキン病のホジキン細胞およびリード−ステルンベルグ細胞上に発現した抗原に反応性を示すモノクローナル抗体Ki−1によって同定されていた(Schwab et
al., Nature 299:65 (1982))。したがって、CD30は、ホジキンリンパ腫の臨床マーカーとして広く使用されており、血液癌に関連するものであった(Froese et
al., J. Immunol. 139:2081 (1987); Carde et al., Eur. J. Cancer 26:474 (1990))。
al., Blood 66:848 (1985); Miettinen, Arch. Pathol. Lab. Med. 116:1197 (1992); Piris et al., Histopathology 17:211 (1990); Burns et
al., Am. J. Clin. Pathol. 93:327(1990); and Eckert et al., Am. J. Dermatopathol. 11:345 (1989))、ならびにヒトT細胞リンパ腫ウイルスIもしくはII形質転換T細胞、およびエプスタイン−バールウイルス形質転換B細胞などの数種のウイルス性形質転換株に発現することがわかっている(Stein et
al., Blood 66:848 (1985);Andreesen et al., Blood 63:1299 (1984))。さらに、CD30発現は、胎児性癌、非胎児性癌、悪性メラノーマ、間葉腫瘍、および骨髄性細胞株や、分化後期のマクロファージにおいても認められている(Schwarting et
al., Blood 74:1678 (1989); Pallesen et al.,
Am J. Pathol. 133:446 (1988); Mechtersheimer et
al., Cancer 66:1732 (1990); Andreesen et al.,
Am. J. Pathol. 134:187 (1989))。
al. Int J Cancer 54:418 (1993))。しかしながら、これまで得られた結果から、CD30は、免疫治療の有用な標的であることが明らかになったとともに、それらはまた、現時点で利用可能なネズミ抗体が理想的な治療薬ではないことが明らかである。陽性抗体治療は、難治性ホジキン病の患者に対しては、in
vitro またはin vivoで有効性が認めらていない。抗CD30抗体Ber−H2の臨床試験から、抗体の局在化が明らかになったが、反応性はない(Falini B. et
al.(1992) Brit
J Haematol. 82:38-45; Koon, H.B. et al. (2000) Curr Opin in Oncol. 12:588-593)。抗CD30抗体と脱グリコシル化されたリシントキシンA鎖トキシンとが結合することによって、被験体においてはグレード3の毒性が示されたが、SCIDマウスモデルにおけるヒトホジキン病の治療での細胞傷害性が示された(Schell, R. et
al. (2002) Annals
of Oncology 13:57-66)。
vitro でのADCCをフコシル化された形態の抗体と比較して上昇させる。したがって本発明の抗体は、CD30発現によって特徴付けられる障害の治療に対する、改良された手段を提供する。
(a)配列番号1、2および3からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
(b)配列番号4、5および6からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、
該抗体は、CD30と結合し、フコース残基を欠いている。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
(b)配列番号4のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、を含む。
(a)配列番号2のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
(b)配列番号5のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、を含む。
(a)配列番号3のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
(b)配列番号6のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、を含む。
(a)重鎖可変領域CDR1配列は、配列番号:7、8および9のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み;
(b)重鎖可変領域CDR2配列は、配列番号:10、11および12のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み;
(c)重鎖可変領域CDR3配列は、配列番号:13、14および15のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み;
(a)軽鎖可変領域CDR1配列は、配列番号:16、17および18のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み;
(a)軽鎖可変領域CDR2配列は、配列番号:19、20および21のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み;そして
(a)軽鎖可変領域CDR3配列は、配列番号:22、23および24のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、
該抗体は、CD30と結合し、フコース残基を欠いている。
(a)配列番号:7を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:10を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:13を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:16を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:19を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:22を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
(a)配列番号:8を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:11を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:14を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:17を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:20を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:23を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
(a)配列番号:9を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:12を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:15を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:18を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:21を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:24を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
341:544-546);および(vi)単離された相補性決定領域(CDR)。さらに、Fvフラグメントの2つのドメインVLおよびVHは別個の遺伝子にコードされているが、これらは、組換え方法によって、VLおよびVH領域が対になって一価の分子(一本鎖Fv(scFv)として知られている)を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらを結合する合成リンカーを用いて結合することができる(例えば、Bird et al. (1988) Science
242:423-426;およびHuston et
al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照されたい)。このような一本鎖抗体も、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されるものと、意図されている。これらの抗体フラグメントは、当業者に公知の従来技術を用いて得られ、それらのフラグメントは、インタクト抗体と同じ態様で実用性についてスクリーニングされている。
本発明は、フコシル化された形態の抗体と比較した場合、CD30を発現する細胞に対する抗体指向性細胞傷害性(ADCC)が増強されている、脱フコシル化された抗CD30抗体に関する。好ましい態様において、本発明の脱フコシル化された抗体は、in vitroでL1236細胞のADCCを誘発するが、抗体濃度0.1μg/mlおよび標的対細胞の比1:50の条件下において、フコシル化された形態の抗体は、ADCCを誘発しない。別の好ましい態様において、本発明の脱フコシル化された抗体は、抗体濃度0.1μg/mlおよび標的対細胞の比1:50の条件下において、L540、L428およびKarpas細胞のin
vitro でのADCCを、フコシル化された形態の抗体と比較して上昇させる。
vitro ADCCアッセイにおいて、脱フコシル化された抗CD30抗体によるADCCは、CD30+細胞株L1236を用いて、抗体濃度0.005μg/mlと低い濃度で観察されたが、一方、フコシル化された抗CD30抗体を用いた場合、濃度0.1μg/mlと高い濃度でADCC活性が検出された。
抗CD30抗体(例えば、ネズミ抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体およびヒト抗体)は当該技術分野において公知であり、本発明に用いてもよい。本発明の抗CD30抗体は、該抗体がフコシル残基を欠くように改変される。抗体は、種々の方法の1つでフコシル残基を欠くように改変することができる。例えば、抗体は、組換えDNA技術を用いて、フコシル残基の糖鎖への追加が阻害されるように改変されたグリコシル化メカニズムを有する細胞内で発現させることができる。さらに、または別法として、抗体は、フコシル残基の化学的除去によって脱フコシル化することができる。
al.)およびYamane-Ohnuki et al.
(2004) Biotechnol
Bioeng 87:614-22)を用いて、CHO/DG44細胞中でFUT8遺伝子を標的破壊することによって作製した。別の例として、EP1,176,195(Hanai et
al.)は、機能的に破壊されたFUT8遺伝子を有する細胞株を記載している。この遺伝子はフコシルトランスフェラーゼをコードしており、このような細胞株中で発現した抗体は、アルファ1,6結合関連酵素の減少または消失によって低フコシル化を示している。Hanai et
al.は、抗体のFc領域に結合するかまたはその酵素活性を有していないN−アセチルグルコサミンにフコースを付加する酵素活性が本質的に低い細胞株、例えば、ラットミエローマ細胞株YB2/0(ATCC CRL1662)についても述べている。PCT公開公報WO03/035835(Presta)には、フコースをAsn(297)結合糖に付着させる能力が低下しており、その結果、その宿主細胞中で発現した抗体のフコシル化が低下することになる変形CHO細胞やLec13細胞について記載されている(同様に、Shields, R.L. et al. (2002) J.
Biol. Chem. 277:26733-26740を参照)。PCT公開公報WO99/54342(Umana et al.)は、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ(例えば、β(1,4)−N−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIII(GnTIII))を発現するように工学的処理を行った細胞株を記載しており、この工学的処理を行った細胞株中で発現した抗体が、二分性GlcNac構造の増加を示し、その結果、抗体のADCC活性が増加することになる(同様に、Umana et
al. (1999) Nat.
Biotech. 17:176-180参照)。
本発明の抗体は、例えば、Fc部分の糖鎖においてフコシル残基を欠いている。APTSレーザー誘導蛍光によるAPTSキャピラリー電気泳動法などの当該技術分野において公知の標準的な技法によって、抗体におけるフコシル残基の欠落を調べることができる。簡単に述べれば、精製された抗CD30抗体のN−結合オリゴ糖は、ペプチドN−グリカナーゼ(Prozyme)を添加して、一晩インキュベートすることによって放出することができる。糖を再懸濁させ、8−アミノピレン−1,3,6−トリスルホネート(APTS)を用いて、フコシル残基の脱アシル化および損失を最小限にする穏やかな還元性アミノ化の条件下で誘導体化する。反応付加物を、レーザー誘導蛍光検出装置(Beckman Coulter)を用いたキャピラリー電気泳動法により分析する。フコースの欠落は、同じ抗体でフコースを含有するものと比較した電気泳動におけるシフトによって観察することができる。抗CD30抗体上のフコースの欠落を調べるための別の技法は、HPLCを用いた単糖分析である。CD30結合を測定する好適なアッセイは、実施例においてさらに述べる。
脱フコシル化された抗CD30抗体を試験し、貪食作用およびCD30を発現する細胞の殺傷を媒介する能力について試験することができる。ある態様において、脱フコシル化された抗CD30抗体は、フコースを含有する同じ抗体と同じ濃度で比較した場合、CD30を発現する細胞の殺傷性を増強させる。別の態様において、脱フコシル化された抗CD30抗体は、CD30を発現する細胞の殺傷を誘発し、フコースを含有する同じ抗体は、同じ濃度で殺傷を誘発しない。
1)CD30発現生細胞への結合;
2)CD30への結合の高アフィニティ;
3)CD30上の固有エピトープへの結合(相補的活性を有するモノクローナル抗体を組み合わせて使用した場合に同一のエピトープへの結合と競合する可能性を除くため);
4)CD30を発現する細胞によるオプソニン処理;
5)ヒトエフェクター細胞存在下における、CD30を発現する細胞の増殖阻害、貪食作用および/または細胞殺傷のin vitro媒介。
本発明の抗体は、CD30への結合について、当該技術分野において公知の標準的なアッセイ、例えば、ELISA、FACS分析および/またはBiacore分析などによって試験することができる。典型的なELISAにおいては、簡単に説明すると、マイクロタイタープレートをPBS中0.25μg/mLの精製CD30でコーティングし、次に、PBS中5%のウシ血清アルブミンでブロックする。抗体希釈物を各ウェルに添加し、37℃で1〜2時間インキュベートする。プレートをPBS/Tweenで洗浄し、次に、アルカリホスファターゼ結合第2試薬(例えば、ヒト抗体用には、ヤギ抗ヒトIgG Fc−特異的ポリクローナル試薬)とともに37℃で1時間、インキュベートする。洗浄後、プレートをpNPP基質(1mg/mL)で発色させ、OD406−650で分析する。
いくつかの態様において、本発明の脱フコシル化された抗CD30抗体は、キメラまたはヒト化抗体である。このような抗体は、マウス抗体をキメラ抗体またはヒト化抗体に変換するための、当該技術において利用可能な、確立された処置によってマウス抗CD30抗体を用いて調製することができる。そのような抗CD30抗体の例としては、限定されないが、AC10、HeFi−1、Ber−H2、Ki−1、Ki−4、HRS−3、Irac、HRS−4、M44、M67、およびBer−H8モノクローナル抗体が含まれる。さらにヒト化抗CD30抗体は、PCT国際公開公報WO02/4661に記載がある。
本発明の好ましい抗体は、ヒト抗CD30モノクローナル抗体である。ヒト抗CD30モノクローナル抗体の例としては、PCT国際公開WO03/059282号にもともと記載されていたように、単離され、構造的に特徴付けられている5F11、17G1、および2H9抗体が挙げられる。5F11、17G1、および2H9のVHアミノ酸配列を、配列番号:1、2および3にそれぞれ示す。5F11、17G1、および2H9のVLアミノ酸配列を配列番号:4、5および6にそれぞれ示す。
(a)配列番号:1、2および3からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域;および、
(b)配列番号:4、5および6からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域。該抗体は、ヒトCD30に特異的に結合する。
(a)配列番号:1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域;および(b)配列番号:4のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または、
(a)配列番号:2のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域;および(b)配列番号:5のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または、
(a)配列番号:3のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域;および(b)配列番号:6のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
(1991) Sequences of
Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition,
U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242)を用いて表示する。
(a)配列番号:7、8および9からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:10、11および12からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:13、14および15からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:16、17および18からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:19、20および21からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:22、23および24からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域CDR3。該抗体は、CD30に特異的に結合する。
(a)配列番号:7を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:10を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:13を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:16を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:19を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:22を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
(a)配列番号:8を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:11を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:14を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:17を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:20を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:24を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
(a)配列番号:9を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
(b)配列番号:12を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
(c)配列番号:15を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
(d)配列番号:18を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
(e)配列番号:21を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
(f)配列番号:24を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む。
いくつかの態様において、本発明の脱フコシル化された抗体は、特定の生殖系列重鎖イムノグロブリン遺伝子からの重鎖可変領域、および/または、特定の生殖系列軽鎖イムノグロブリン遺伝子からの軽鎖可変領域を含む。
(a)ヒトVH4−34または3−07遺伝子(配列番号25および26にそれぞれ記載のアミノ酸配列をそれぞれコードする)の生成物である、またはそれに由来する重鎖可変領域を含み;
(b)ヒトVKL15、A27またはL6遺伝子(配列番号27、28および29にそれぞれ記載のアミノ酸配列をそれぞれコードする)の生成物である、またはそれに由来する軽鎖可変領域を含み;
(c)ヒトCD30に特異的に結合する。
さらに別の態様において、本発明の脱フコシル化された抗体は、本明細書に記載の好ましい抗体のアミノ酸配列に相同なアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域を含む。該抗体は、本発明の抗CD30抗体の望ましい機能的特性を維持している。
(a)重鎖可変領域は、配列番号:1、2および3からなる群から選択されるアミノ酸配列に80%以上相同なアミノ酸配列を含み、
(b)軽鎖可変領域は、配列番号:4、5および6からなる群から選択されるアミノ酸配列に80%以上相同なアミノ酸配列を含み、
(c)抗体は、ヒトCD30に特異的に結合する。
Mol. Biol. 215:403-10)を用いて行うことができる。BLASTタンパク質検索は、XBLASTプログラム(スコア=50、ワード長=3)を用いて行い、本発明の抗体分子に相同なアミノ酸配列を取得することができる。比較の目的で、ギャップのある配列比較をするために、Altschul et al., (1997) Nucleic
Acids Res. 25(17):3389-3402に記載されているようにGapped BLASTを用いることができる。BLASTおよびGapped BLASTプログラムを用いる場合、それぞれのプログラム(例えば、XBLASTおよびNBLAST)のデフォルトパラメーターを用いることができる。http://www.ncbi.nlm.nih.gov.を参照されたい。
いくつかの態様において、本発明の脱フコシル化された抗体は、CDR1、CDR2およびCDR3配列を有する重鎖可変領域およびCDR1、CDR2およびCDR3配列を有する軽鎖可変領域を含む。これらのCDR配列の1以上は、本明細書に記載の好ましい抗体(例えば、5F11、17G1および2H9抗体)またはそれらの保存的改変体に基づいて、特定のアミノ酸配列を含み、該抗体は、本発明の抗CD30抗体の望ましい機能的特性を維持している。したがって、本発明は、CDR1、CDR2およびCDR3配列を有する重鎖可変領域ならびにCDR1、CDR2およびCDR3配列を有する軽鎖可変領域を含む、脱フコシル化されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を提供する。尚、
(a)重鎖可変領域CDR3配列は、配列番号:9、12または15のアミノ酸配列からなる群から選択されたアミノ酸配列およびその保存的改変を含み;
(b)軽鎖可変領域CDR3配列は、配列番号:18、21または24のアミノ酸配列からなる群から選択されたアミノ酸配列およびその保存的改変を含み;
(c)抗体は、ヒトCD30に特異的に結合する。
別の態様において、本発明は、本明細書に記載の5F11、17G1または2H9抗体と同じエピトープに結合する他のヒト抗体など、ここに提供する本発明の種々の抗CD30モノクローナル抗体に結合するのと同じエピトープに結合する脱フコシル化された抗体を提供する。そのような更なる抗体は、本発明の他の抗体、例えば、5F11、17G1または2H9に交差競合する(例えば、統計学的に有意なやり方で結合を競合的に阻害する)能力に基づいて、標準的なCD30結合アッセイにおいて、同定することができる。試験抗体が、例えば、5F11、17G1または2H9のヒトCD30への結合を阻害する能力は、試験抗体が、ヒトCD30に結合する抗体と競合することができること、例えば、非限定的な理論によれば、そのような抗体が同じ、もしくは関連する(例えば、構造的に類似し、空間的に近い)、競合する抗体であるヒトCD30のエピトープと結合すること、を示すものである。好ましい態様において、ヒトCD30上のエピトープと同じ抗体に結合する脱フコシル化された抗体、5F11、17G1または2H9などは、ヒトモノクローナル抗体である。そのようなヒトモノクローナル抗体は、PCT国際公開03/059282号に記載のようにして調製および単離することができる。
本発明の脱フコシル化された抗体は、さらに、本明細書に開示されている1以上のVHおよび/またはVL配列を有する抗体を開始物質として用いて、改変された抗体を工学的処理することによって調製することができる。その改変された抗体は、開始抗体から特性を改変しておいてもよい。抗体は、1つまたは双方の可変領域(すなわち、VHおよび/またはVL)内、例えば、1以上のCDR領域内および/または1以上のフレームワーク領域内の1以上の残基を改変することによって、工学的処理することができる。さらにまたは別法として、抗体は、定常領域内で残基を改変することによって、工学的に処理して、例えば、抗体のエフェクター機能を変更することができる。
(1986) Nature 321:522-525;
Queen, C. et al. (1989) Proc. Natl. Acad.
See. U.S.A. 86:10029-10033; 米国特許第5,225,539号(Winter)および米国特許第5,530,101号;第5,585,089号;第5,693,762号;および第6,180,370(Queen et al.)参照)。
of Proteins of Immunological Interest, Fifth
Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No.
91-3242; Tomlinson, I. M., et al. (1992) "The Repertoire of Human Germline VH
Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different
Hypervariable Loops" J. Mol. Biol. 227:776-798; and Cox, J.
P. L. et al. (1994) "A Directory of Human Germ-line VH
Segments Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J. Immunol. 24:827-836を参照。それぞれの内容は、本明細書において明確に援用により引用する。
Biol. Chem. 276:6591-6604参照)。FcγRIIIに対する結合を高めるために位置256、290、298、333、334および339の特定の突然変異を示す。FcγRIII結合を高めるためにさらに以下の組み合わせの変異体を示す。T256A/S298A、S298A/E333A、S298A/K224A、およびS298A/E333A/K334A。
et al.)に記載されている。
上記のように、本明細書に開示されているVHおよびVK配列をもつ、脱フコシル化された抗CD30抗体を用いて、VHおよび/またはVK配列、またはそこに付着された定常領域を改変することによって新たな抗CD30抗体を作出することができる。このように、本発明のさらに別の局面において、本発明の抗CD30抗体、例えば、5F11、17G1または2H9の構造的特徴を用いて、構造的に関連し、本発明の抗体の、例えば、ヒトCD30への結合といった、少なくとも1つの機能的特性を維持している、脱フコシル化された抗CD30抗体を作製することができる。例えば、5F11、17G1または2H9の1以上のCDR領域、またはその突然変異を、公知のフレームワーク領域および/または他のCDRとを組換え技術により組み合わせて、上で述べたように本発明の抗CD30抗体を作出することができる。他のタイプの改変としては、前のセクションで述べたものが挙げられる。工学的処理のための開始物質は、本明細書に記載のVHおよび/またはVK配列の1以上、そのCDR領域の1以上である。工学的処理された抗体を作出するために、実際に本明細書に記載のVHおよび/またはVK配列の1以上またはそのCDR領域をもつ抗体を調製する(すなわち、タンパク質として発現させる)必要はない。むしろ、その配列に含まれる情報を開始材料として用いて、オリジナルの配列に由来する「第2の世代」の配列を作出し、次いで、「第2の世代」の配列を調製してタンパク質として発現させる。
(a)(i)配列番号:7、8および9からなる群から選択されるCDR1配列、配列番号:10、11および12からなる群から選択されるCDR2配列、および/もしくは配列番号:13、14および15からなる群から選択されるCDR3配列を含む重鎖可変領域の抗体配列、ならびに/または(ii)配列番号:16、17および18からなる群から選択されるCDR1配列、配列番号:19、20および21からなる群から選択されるCDR2配列、および/もしくはは配列番号:22、23および24からなる群から選択されるCDR3配列を含む軽鎖可変領域の抗体配列を提供すること;
(b)重鎖可変領域の抗体配列、および/または、軽鎖可変領域抗体配列内の少なくとも1つのアミノ酸残基を変更して、少なくとも1つの変更された抗体配列を生成すること、ならびに、
(c)前記変更された配列をタンパク質として発現させることを含む。
本発明の別の局面は、本発明の抗体をコードする核酸分子に関する。本明細書において用いられる「核酸分子」という用語は、DNA分子またはRNA分子を含むことを意図する。核酸分子は、一本鎖または二本鎖であってよいが、好ましくは二本鎖DNAである。核酸は、細胞全体に存在していてもよいし、細胞ライセート中に存在してもよい。または、特定の、精製された、もしくは実質的に純粋な形態で存在してもよい。核酸は、他の細胞成分もしくは他の混入物、例えば、他の細胞核酸もしくはタンパク質から、アルカリ/SDS処理、CsClバンド形成、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動、および当該技術分野において公知の他の方法をはじめとした標準的な技法によって精製された状態のとき、「単離されている」または「実質的に純粋である」という(F. Ausubel, et al.,
ed. (1987) Current Protocols
in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York)。本発明の核酸は、例えば、DNAまたはRNAであり、イントロンの配列を含有していてもしていなくてもよい。好ましい態様において、核酸は、cDNA分子である。
of Proteins of Immunological Interest, Fifth
Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No.
91-3242)。これらの領域を含むDNAフラグメントは、標準的なPCR増幅によって得ることができる。重鎖定常領域は、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgMもしくはIgD定常領域とすることができるが、最も好ましくはIgG1もしくはIgG4定常領域である。Fabフラグメント重鎖遺伝子としては、VHコードDNAは、重鎖CH1定常領域のみをコードする別のDNA分子に作用可能に連結される。
of Proteins of Immunological Interest, Fifth
Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No.
91-3242)。これらの領域を含むDNAフラグメントは、標準的なPCR増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域は、カッパまたはラムダ定常領域とすることができるが、最も好ましくはカッパ定常領域である。
(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554)。
本発明のモノクローナル抗体(mAbs)は、従来のモノクローナル抗体法、例えば、標準的な体細胞性の細胞ハイブリダイゼーション技法(Kohler and Milstein (1975) Nature 256: 495)を含む、種々の技法によって作製することができる。体細胞性の細胞ハイブリダイゼーション技法が好ましいが、原則的に、他のモノクローナル抗体作製法、例えば、Bリンパ球のウイルス性または腫瘍形成性の形質転換などを採用することができる。
Inc.)は、転位されていないヒト重鎖(μおよびγ)ならびに軽鎖イムノグロブリン配列をコードするヒトイムノグロブリン遺伝子の小さな座を、内因性μおよびκ鎖座に不活性な標的化された突然変異とともに含有している(例えば、Lonberg, et
al. (1994) Nature 368(6474): 856-859)。したがって、マウスにおいては、マウスIgMまたはκの発現が減少し、免疫化に反応して、導入されたヒト重鎖および軽鎖トランスジーンは、クラススイッチングおよび体細胞性の突然変異を行い、高アフィニティーヒトIgGκモノクローナルを産生させる(Lonberg, N. et al. (1994)、上掲; Lonberg, N. (1994) Handbook of Experimental Pharmacology 113:49-101; Lonberg, N. and Huszar, D. (1995) Intern.
Rev. Immunol. 13: 65-93, and Harding, F. and
Lonberg, N. (1995) Ann. N.Y. Acad. Sci. 764:536-546で検討されている)。HuMabマウスの調製および使用、ならびにそのようなマウスが持つゲノム改変は、Taylor, L. et al. (1992)Nucleic acids Research 20:6287-6295; Chen, J. et al. (1993) International
Immunology 5: 647-656; Tuaillon et al.
(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:3720-3724; Choi et al.
(1993) Nature Genetics 4:117-123; Chen, J. et al. (1993) EMBO J. 12: 821-830; Tuaillon et al.
(1994) J. Immunol. 152:2912-2920;
Taylor, L. et al. (1994) International Immunology 6: 579-591; and Fishwild, D. et al. (1996) Nature
Biotechnology 14: 845-851にさらに記載されている。その内容の全体を引用によってここに援用する。例えば、さらに、米国特許第5,545,806号;第5,569,825号;第5,625,126号;第5,633,425号;第5,789,650号;第5,877,397号;第5,661,016号;第5,814,318号;第5,874,299号;および第5,770,429号(すべてLonbergとKay);米国特許第5,545,807号(Surani et al.);PCT国際公開WO92/03918号;WO93/12227号;WO94/25585号;WO97/13852号;WO98/24884号;およびWO99/45962号(全てLonbergとKay);ならびにPCT国際公開WO01/14424号(Korman et al)。
Natl. Acad. Sci. USA 97:722-727に記載がある。さらに、ヒト重鎖および軽鎖トランスクロモソームを保有するウシについて、当該技術において記載があり(Kuroiwa et al. (2002) Nature
Biotechnology 20:889-894)、本発明の抗CD30抗体を産生させるために用いることができる。
ヒトIgマウスを用いて本発明のヒト抗体を産生させる場合、そのようなマウスは、Lonberg, N. et al. (1994) Nature
368(6474): 856-859; Fishwild, D. et al. (1996) Nature
Biotechnology 14: 845-851およびPCT国際公開WO98/24884号およびWO01/14424号に記載されているようにして、精製もしくは濃縮された抗原、および/または、組み換えCD30もしくはCD30融合タンパク質により、免疫できる。好適には、6〜16週齢の当該マウスに対して最初の注入を行う。例えば、CDの精製された調製物または組換え調整物(5〜50μg)のCD30抗原を用いて、腹腔中でヒトIgマウスに免疫できる。
本発明のヒトモノクローナル抗体産生ハイブリドーマ作製のため、免疫したトランスジェニックマウス由来の脾臓細胞および/またはリンパ節細胞を単離し、マウスミエローマ細胞株のような適切な不死化細胞株に融合できる。得られたハイブリドーマについて、抗原特異的抗体の産生をスクリーニングできる。例えば、免疫したマウス由来の脾臓リンパ球の単細胞懸濁物を、50%PEGにより、6分の1の数のP3X63−Ag8.653非分泌マウスミエローマ細胞(ATCC、CRL1580)に融合できる。細胞は、約2×105で平底マイクロタイタープレートに播種し、20%胎児クローン血清、18%“653”調整培地、5%オリゲン(IGEN)、4mM L−グルタミン、1mM ピルビン酸ナトリウム、5mM HEPES、0.055mM 2−メルカプトメタノール、50単位/mLペニシリン、50mg/mL ストレプトマイシン、50mg/mL ゲンタマイシンおよび1xHAT(Sigma;HATを、注入24時間後に添加する)を含む選択培地中で2週間インキュベートする。約2週後、細胞を、HATをHTに置き換えた培地中で培養する。次に、それぞれのウェルをELISAでスクリーニングし、ヒトモノクローナルIgMおよびIgG抗体をスクリーニングする。いったん広範なハイブリドーマ増殖が起こると、培地は、通常、10〜14日後に観察できる。抗体分泌ハイブリドーマを再播種し、再度スクリーニングし、もしヒトIgGがまだ陽性であるならば、モノクローナル抗体を少なくとも2回、限定希釈によってサブクローニングする。次に、安定なサブクローンをin vitroで培養し、少量の抗体を組織培地に産生させ、特性解析する。
また、本発明の抗体は、例えば、当該技術において公知の組み換えDNA技術と遺伝子トランスフェクション技術を組み合わせて用いて、宿主細胞トランスフェクトーマ中で産生させることができる(例えば、Morrison,S.(1985)Science 229:1202)。
Enzymology 185、Academic Press、San Diego、CA(1990))に記載されている。当業者は、制御配列の選択を含む発現ベクターの設計が形質転換される宿主細胞の選択、所望のタンパク質の発現レベル等のような因子に依存することを理解できる。哺乳類宿主細胞発現のための好適な制御配列には、サイトメガロウイルス(CMV)、シミアンウイルス40(SV40)、アデノウイルス(例えば、アデノウイルス主要後期プロモーター(AdMLP)およびパピローマに由来するプロモーターおよび/またはエンハンサーのような、哺乳類細胞におけるタンパク質高発現を指示するウイルスエレメントを含む。これとは別に、ユビキチンプロモーターまたはβ−グロビンプロモーターのような非ウイルス制御配列も使用できる。さらに、制御エレメントは、SRαプロモーターシステムのような異なる起源由来の配列で構成され、それらはSV40アーリープロモーターおよびヒトT細胞白血病ウイルス1型の長い末端繰り返し由来の配列を含む(Takebe,Y. et
al.(1988)Mol.Cell.Biol. 8:466-472)。
Today 6:12-13)。
159:601-621に記載されているようにDHFR選択マーカーとともに使用される)、NSOミエローマ細胞、COS細胞およびSP2細胞が含まれる。特に、NSOミエローマ細胞とともに使用する場合には、別の好適な発現システムは、WO87/04462、WO89/01036および欧州特許第338,841号に開示されたGS遺伝子発現システムである。抗体遺伝子をコードする組み換え発現ベクターを哺乳類宿主細胞中に導入する時、宿主細胞中で抗体を発現させる、またはさらに好適には、宿主細胞を増殖させる培地中に抗体を分泌させるだけの十分な時間宿主細胞を培養することによって、抗体は産生される。抗体は標準的なタンパク質精製方法を用いて培地から回収できる。
別の局面において、本発明は、サイトトキシン、薬物(例えば、免疫抑制剤)または放射性トキシンのような治療分子に複合させた脱フコシル化された抗CD30抗体またはそのフラグメントを特徴とする。このような複合物を、ここで、「免疫複合体」と称する。1個以上のサイトトキシンを含む免疫複合体は、「イムノトキシン」と称される。サイトトキシン、すなわち、細胞傷害性物質には、細胞に有害な(例えば、死滅させる)あらゆる物質が含まれる。例として、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、エチジウムブロマイド、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジハイドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシンおよびそのアナログまたはホモログが挙げられる。また、治療薬には、例えば、代謝拮抗物質(例えば、メトトレキセート、6−メルカプトプリン、6−チオグアニン、シタラビン、5−フルオロウラシルデカルバジン)、アルカリ化剤(例えば、メクロレタミン、チオエパクロラムブチル、メルファラン、カルムスチン(BSNU)およびロムスチン(CCNU)、シクロソスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、およびシス−ジクロロジアミン白金(II)(DDP)シスプラチン)、アントラサイクリン(例えば、ダウノルビシン(旧ダウノマイシン)およびドキソルビシン)、抗生物質(例えば、ダクチノマイシン(旧アクチノマイシン)、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアンスラマイシン(AMC))、および有糸分裂剤(例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチン)が含まれる。
Adv. Drug Deliv. Rev. 55:199-215;
Trail, P.A. et al. (2003) Cancer Immunol.
Immunother. 52:328-337; Payne, G. (2003) Cancer Cell 3:207-212; Allen, T.M. (2002) Nat. Rev. Cancer 2:750-763; Pastan, I. and
Kreitman, R. J. (2002) Curr. Opin. Investig. Drugs 3:1089-1091; Senter, P.D. and Springer, C.J. (2001)
Adv. Drug Deliv. Rev. 53:247-264も参照できる。
Pharmaceuticals)が含まれ、類似の方法を用いて本発明の抗体を用いて放射免疫複合体を調製できる。
"Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer
Therapy", in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld
et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., " Antibodies
For Drug Delivery", in Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of
Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review", in Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); "Analysis, Results, And Future
Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer
Therapy", in Monoclonal
Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al. (eds.), pp. 303-16 (Academic Press 1985)、およびThorpe et al., "The
Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates",
Immunol. Rev., 62:119-58 (1982) を参照できる。
別の局面において、本発明は、例えば、本発明のモノクローナル抗体またはその抗原結合部分を1種、またはその組み合わせを含有し、薬学的に許容できる担体とともに調剤された医薬組成物を提供する。このような組成物は、本発明の(例えば、2種以上の異なる)抗体、または免疫複合体を1個、または、その組み合わせを含んでいてもよい。例えば、本発明の医薬組成物は、標的抗原上の異なるエピトープに結合するか、または補完的活性を有する抗体(または免疫複合体または二重特異性抗体)の組み合わせを含むことができる。
Pharm. Sci. 66:1-19を参照)。このような塩の例として、酸付加塩および塩基付加塩を含む。酸付加塩は、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、燐等のような無毒性の無機酸由来、ならびに脂肪族モノ−およびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸等のような無毒性の有機酸に由来するものが含まれる。塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等のようなアルカリ土金属、ならびにN,N’−ジベンチルエチレンジアミン、N−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカイン等のような無毒の有機アミン由来のものが含まれる。
Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R.
Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New
York, 1978参照。
Biophys. Res. Commun. 153:1038)、抗体(P.G.
Bloeman et al. (1995) FEBS Lett.
357:140; M. Owais et al. (1995) Antimicrob. Agents Chemother. 39:180)、界面活性剤プロテインAレセプター(Briscoe et al. (1995) Am.
J. Physiol. 1233:134)、p120(Schreier et al. (1994) J. Biol. Chem. 269:9090)が含まれ、また、K. Keinanen; M.L. Laukkanen (1994) FEBS Lett. 346:123; J.J. Killion; I.J.
Fidler (1994) Immunomethods 4:273を参照することができる。
本発明の脱フコシル化された抗体、抗体組成物および方法は、CD30発現に関連する障害の診断治療に関わる、多数のin vitroおよびin vivoでの診断的および治療的用途を有している。例えば、これらの分子は、培養細胞に対してin vitroでもしくはex vivoで、あるいはヒト被験体に対して、例えば、in vivoで投与して、様々な障害において、治療、予防および診断をするために投与することができる。本明細書において用いられている用語「被験体」とは、ヒトおよび非ヒト動物類を含むことを意味している。非ヒト動物には、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類等のような哺乳類および非哺乳類である、全脊椎動物類が含まれる。好適な被験体には、CD30発現に関連する障害を有するヒト患者が含まれる。CD30に対する抗体を別の物質とともに投与するときには、その2つは、順番にまたは同時に投与できる。
vitroの好適な投与経路は、当該技術分野において公知であり、当業者によって選択され得る。例えば、抗体組成物は、注射(例えば、静脈内もしくは皮下注射)によって投与することができる。好適な投与量は患者の年齢および体重、そして抗体組成物の濃度および/または製剤によって変わるであろう。
ある態様において、本発明の抗体は、CD30のレベル、またはCD30をその膜表面に含有する細胞のレベルを検出するために使用することができる。次にそのレベルは特定の疾患の症状と結びつけることができる。
結果的に特定の疾患、症状の予防または寛解につながるCD30の機能を阻害または遮断するために抗体を用いることができる。それによって、CD30は、該疾患に関連すると見なされる。疾患状態と非疾患状態の間のCD30発現の差は、抗体とCD30の間で複合体形成することが可能な条件下で、該疾患に罹患した患者から採取した試験サンプルと対照サンプルとを抗CD30抗体に接触させることによって測定することができる。抗体とCD30との間に形成された何らかの複合体を検出し、サンプル中と対照中で比較する。
ある態様において、本発明の免疫複合体は、化合物(例えば、治療薬、標識、サイトトキシン、放射性トキシン、免疫抑制薬など)を、CD30細胞表面レセプターをもつ細胞に標的化させるために使用することができる。それはそのような化合物を抗体に結合させることによって行う。したがって、本発明はまた、ex vivo または in vitroでCD30(例えば、検出可能な標識、放射性同意体、蛍光化合物、酵素、または酵素共因子など)を発現する細胞を局在化する方法も提供する。あるいは、免疫複合体は、サイトトキシンまたは放射性トキシンが、CD30、例えば、CD30発現腫瘍細胞を標的とし、その結果、腫瘍細胞を除去することによって、または、CD30発現抗原提示細胞を標的とし、その結果、免疫反応を阻害するための手段としてAPCsを除去することによって、PSMA細胞表面レセプターをもつ細胞を死滅させるために使用することができる。
CD30によって媒介される、またはそれに関与する疾患、例えば、CD30の発現、典型的には過剰発現を特徴とする疾患、例えば、マクロファージ、活性化された好中球、樹状細胞またはNK細胞によって媒介される自己免疫疾患、移植に対する拒絶反応、すなわち、移植片対宿主疾患(GVHD)といった疾患を治療するために該組成物をin
vitro またはin vivo で使用することができる。可溶性CD30は、CD30を発現する細胞の表面からの定期的に流出し、CD30のレベルは、腫瘍原性および自己免疫疾患の患者の血清において上昇することが報告されている。したがって、本発明の抗体のさらに別の使用例として、CD30の流出の遮断または阻害に関連する疾患の予防または治療のために使用される。
他の態様において、本発明は、被験者においてCD30+腫瘍細胞(すなわち、CD30を発現する腫瘍細胞)の成長を阻害する方法であって、本発明のフコシル化された抗CD30抗体を患者に投与することによって、CD30+腫瘍細胞の成長を阻害する提供する。ヒト被験者に対しては、該抗体は、ヒト化抗体またはヒト抗体であることが好ましい。好ましい態様において、該腫瘍細胞は、ホジキン病腫瘍細胞である。他の好ましい態様において、該腫瘍細胞は、未分化巨大細胞リンパ腫(ALCL)腫瘍細胞である。他の好ましい態様において、該腫瘍細胞は、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、結節性小分裂細胞リンパ腫(nodular small cleaved-cell lymphomas)、リンパ球性リンパ腫、末梢T細胞リンパ腫、レナートリンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、T細胞白血病(ATLL)、成人T細胞白血病(T−ALL)、内生分芽型/中心細胞性(cb/cc)濾胞性リンパ腫癌、B系列のびまん性巨大細胞リンパ腫、血管免疫芽細胞性リンパ節症(AILD)様T細胞リンパ腫、成人T細胞リンパ腫(ATL)、HIV関連体腔ベースリンパ腫(body cavity based lymphomas)、胎児性癌、鼻咽頭腔の未分化癌(例えば、シュミンケ腫瘍)、カストルマン病、カポジ肉腫、CD30+T細胞リンパ腫およびCD30+B細胞リンパ腫からなる群から選択されることもある。
また、本発明の抗体を含むキットおよび使用説明書も本発明の範囲内である。そのキットはさらに、免疫刺激剤、細胞障害剤、または放射毒性剤、または1以上の本発明のさらなる抗体(例えば、第1のヒト抗体とは別のCD30抗原中のエピトープに結合する相補的活性を有するヒト抗体)などの少なくともさらに一つの試薬を含むことができる。キットは、通常、キット内容物の目的用途を示したラベルを有している。用語ラベルは、すべての文書を含み、キットの上面またはキットとともに付与されるか、そうでない場合にはキットに添付される。
本実施例では、完全ヒト抗CD30モノクローナル抗体が、フコシルトランスフェラーゼ酵素を欠き、その結果、細胞株がその糖中にフコースを欠くタンパク質を生成する細胞株中で発現される。キャピラリー電気泳動法、アミノ酸配列の比較、マススペクトロスコピーによる質量相違、およびキャピラリー等電点フォーカシングによる帯電変化をはじめとした種々の化学的分析技術を用いて、フコシル化された抗CD30抗体(フコシルトランスフェラーゼ酵素を含有する異なる細胞株中で発現される)に対して脱フコシル化された抗体を試験し、抗体間の構造的および特性的相違を測定した。
175:179, 1996)。この発現ベクターについては、米国特許出願第60/500,803号に記載されている。その内容を明確に援用によって本明細書に引用する。
抗CD30モノクローナル抗体5F11は、抗体依存性細胞傷害性(ADCC)を介してのエフェクター細胞数の補充によって、CD30+細胞の殺傷を可能とする。この実施例において、脱フコシル化された5F11(defuc-5F11)モノクローナル抗体を試験して、細胞毒性クロム放出アッセイにおいて該抗体がエフェクター細胞の存在下でCD30+ 細胞株を殺傷する能力について調べた。
%溶解=(サンプルCPM−抗体を含まないCPM)/TritonX PM−抗体を含まないCPM)×100
この実施例において、抗CD30モノクローナル抗体を試験して、該抗体がCD30+細胞株をエフェクター細胞の存在下で殺傷する能力を、蛍光細胞傷害性アッセイにおける細胞傷害性活性(ADCC)を介して調べた。ヒトエフェクター細胞を上記のようにして調製し、上記のようにADCCアッセイを行った。図9からわかるように、脱フコシル化された抗CD30抗体を用いた場合、親抗CD30抗体と比較してADCC活性が増加していた。さらに脱フコシル化された抗CD30抗体は、EC50の減少から明らかなように、親抗体と比較して力価が高かった。該抗体はまた、最大パーセント溶解が脱フコシル化された抗CD30抗体においてより高いことから明らかなように、より有効であった。いずれかの抗体を用いることによって、抗CD16(3G8)抗体は、ADCCを有効に阻害する。これは、この溶解がCD16によって媒介されることを示唆するものである。
ADCCアッセイは、上で述べたとおりである。しかしながら、本実験においては、マウスエフェクター細胞とヒトエフェクター細胞を比較した。図10から明らかなように、マウスエフェクター細胞を用いて脱フコシル化された抗体をもつ親抗CD30抗体どうしを比較したとき、ADCCの増加は認められなかったものの、ヒトエフェクター細胞を調べた場合、親抗CD30抗体の場合と比較して脱フコシル化された抗体を用いた場合ADCCにおいて顕著な増加があった。
カニクイザルから全血を採取した。赤血球が溶解したカニクイザル末梢血細胞を50U/mlのrIL−2で刺激し、10%FBSを含有するRPMI1640培地中で、37℃で一晩培養した。実験当日にカニクイザル細胞をアッセイ緩衝液(RPMI1640、10%FBS、2.5mMプロベネシド)中に1×107細胞/mLの濃度で再懸濁させた。CD30陽性標的細胞、Karpas299を標識し、洗浄緩衝液(PBS、2.5mMプロベネシド、20mMのHEPES)で3回洗浄し、1×105細胞/mLの1:50標的対エフェクター細胞に調節した。上記のようにしてADCCアッセイを行った。親抗CD30抗体と脱フコシル化された抗体を、カニクイザル血から精製したエフェクター細胞を用いて比較した。親抗体では、中等度のADCC活性が認められた(10μg/mLで7〜10%の細胞溶解)。対照的に、脱フコシル化された抗体は、より高いパーセント溶解を誘発し(10μg/mLで約10〜30%細胞溶解)と、EC50の低下を誘発した(図11)。
親抗体および脱フコシル化された抗CD30の結合アフィニティーを測定した。CD30陽性L540細胞ならびにPHA/ConA活性化ヒトもしくはカニクイザル末梢血単核細胞に対する結合アフィニティーを、2つの抗体間で比較した。
当業者であれば、ルーチンの実験以上のことをすることなく、ここに解説した本発明の具体的な実施の形態の均等物を数多く、認識し、または確認できることであろう。このような均等物は以下の請求の範囲の包含するところと、意図されている。
Claims (31)
- フコース残基を欠く、単離された抗CD30抗体。
- 前記抗体は、細胞表面CD30を発現する細胞の抗体依存性細胞傷害性を増強させる、請求項1に記載の抗体。
- 前記抗体は、フコシル化された形態では、L1236細胞(DSMZ寄託番号:ACC530)のin vitroでの抗体依存性細胞傷害性(ADCC)を誘発しないが、脱フコシル化された形態では、L1236細胞のin vitroでのADCCを誘発する抗体であり、ADCCは、抗体濃度0.1μg/mlおよび標的細胞対エフェクター細胞の比1:50でADCCアッセイによって評価される、請求項2に記載の抗体。
- 前記抗体は、フコシル化された形態では、L540細胞(DSMZ寄託番号:ACC72)、L428細胞(DSMZ寄託番号:ACC197)およびKarpas細胞(DSMZ寄託番号:ACC31)のin vitroでのADCCを、フコシル化された形態の抗体と比較して上昇させ、ADCCは、抗体濃度0.1μg/mlおよび標的細胞対エフェクター細胞の比1:50でADCCアッセイによって評価される、請求項3に記載の抗体。
- モノクローナル抗体である、請求項1に記載の抗体。
- ヒト化抗体またはキメラ抗体である、請求項5に記載の抗体。
- 前記ヒト化抗体またはキメラ抗体は、AC10、HeFi−1、Ber−H2、Ki−1、Ki−4、HRS−3、Irac、HRS−4、M44、M67、およびBer−H8からなる群から選択されるマウス抗CD30抗体から調製される、請求項6に記載の抗体。
- ヒト抗体である、請求項5に記載の抗体。
- ヒト抗体は、ヒト重鎖可変領域およびヒト軽鎖可変領域を含み、
(a)該ヒト重鎖可変領域は、配列番号1、2および3からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、
(b)該ヒト軽鎖可変領域は、配列番号4、5および6からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項8に記載の抗体。 - 前記ヒト重鎖可変領域は、配列番号:1のアミノ酸配列を含み、前記ヒト軽鎖可変領域は、配列番号:4のアミノ酸配列を含む、請求項9に記載の抗体。
- 前記ヒト重鎖可変領域は、配列番号:2のアミノ酸配列を含み、前記ヒト軽鎖可変領域は、配列番号:5のアミノ酸配列を含む、請求項9に記載の抗体。
- 前記ヒト重鎖可変領域は、配列番号:3のアミノ酸配列を含み、前記ヒト軽鎖可変領域は、配列番号:6のアミノ酸配列を含む、請求項9に記載の抗体。
- a)配列番号:7、8および9からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号:10、11および12からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号:13、14および15からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号:16、17および18からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号:19、20および21からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
f)配列番号:22、23および24からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む、請求項5に記載の抗体。 - a)配列番号:7を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号:10を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号:13を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号:16を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号:19を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
f)配列番号:22を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む、請求項13に記載の抗体。 - a)配列番号:8を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号:11を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号:14を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号:17を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号:20を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
f)配列番号:23を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む、請求項13に記載の抗体。 - a)配列番号:9を含むヒト重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号:12を含むヒト重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号:15を含むヒト重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号:18を含むヒト軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号:21を含むヒト軽鎖可変領域CDR2;および
f)配列番号:24を含むヒト軽鎖可変領域CDR3、を含む、請求項13に記載の抗体。 - ヒトVH4−34またはVH3−07遺伝子の生成物である、またはそれに由来する重鎖可変領域を含む、請求項8に記載の抗体。
- ヒトVkL15、A27またはL6遺伝子の生成物である、またはそれに由来する軽鎖可変領域を含む、請求項8に記載の抗体。
- ヒトVH4−34またはVH3−07遺伝子の生成物である、またはそれに由来する重鎖可変領域、およびヒトVkL15、A27またはL6遺伝子の生成物である、またはそれに由来する軽鎖可変領域を含む、請求項8に記載の抗体。
- 抗CD30抗体をコードするイムノグロブリン重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子を含む宿主細胞であって、前記宿主細胞は、フコシルトランスフェラーゼを欠くため、前記宿主細胞によって発現される前記抗CD30抗体はフコース残基を持たない、宿主細胞。
- 前記イムノグロブリン重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子は、ヒトイムノグロブリン重鎖遺伝子および軽鎖遺伝子である、請求項20に記載の宿主細胞。
- 前記フコシルトランスフェラーゼは、FUT8である、請求項20に記載の宿主細胞。
- CHO細胞である、請求項20に記載の宿主細胞。
- CD30+細胞の成長を阻害する方法であって、前記細胞の抗体依存性細胞傷害性(ADCC)を誘発するのに十分な条件下で、前記細胞を脱フコシル化された抗CD30抗体に接触させることを含む、方法。
- 前記細胞は腫瘍細胞である、請求項24に記載の方法。
- 前記抗CD30抗体は、ヒト抗体である、請求項24に記載の方法。
- 被験者において、CD30を発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する方法であって、被験者においてCD30を発現する腫瘍細胞の増殖を阻害するのに有効な量の脱フコシル化された抗CD30抗体を、被験者に投与することを含む方法。
- 前記抗CD30抗体は、ヒト抗体である、請求項27に記載の方法。
- 前記腫瘍細胞は、ホジキン病(HD)腫瘍細胞である、請求項27に記載の方法。
- 前記腫瘍細胞は、未分化巨大細胞リンパ腫(ALCL)腫瘍細胞である、請求項27に記載の方法。
- 前記腫瘍細胞が、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、結節性小分裂細胞リンパ腫(nodular small
cleaved-cell lymphomas)、リンパ球性リンパ腫、末梢T細胞リンパ腫、レナートリンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、T細胞白血病(ATLL)、成人T細胞白血病(T−ALL)、内生分芽型/中心細胞性(cb/cc)濾胞性リンパ腫癌、B系列のびまん性巨大細胞リンパ腫、血管免疫芽細胞性リンパ節症(AILD)様T細胞リンパ腫、成人T細胞リンパ腫(ATL)、HIV関連体腔ベースリンパ腫(body cavity based
lymphomas)、胎児性癌、鼻咽頭腔の未分化癌(例えば、シュミンケ腫瘍)、カストルマン病、カポジ肉腫、CD30+T細胞リンパ腫およびCD30+B細胞リンパ腫からなる群から選択される疾患である、請求項27に記載の方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013116900A (ja) * | 2005-02-18 | 2013-06-13 | Medarex Inc | フコシル残基を欠くcd30に対するモノクローナル抗体 |
JP2020202832A (ja) * | 2020-07-10 | 2020-12-24 | ツムトー バイオロジクス、インコーポレイテッド | 非フコシル化タンパク質および方法 |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1471938A4 (en) | 2002-01-09 | 2008-03-05 | Medarex Inc | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST CD30 |
AR045563A1 (es) | 2003-09-10 | 2005-11-02 | Warner Lambert Co | Anticuerpos dirigidos a m-csf |
MX2007003533A (es) | 2004-10-01 | 2007-05-23 | Medarex Inc | Metodos de tratar linfomas cd30 positivas. |
CA2660795C (en) * | 2006-09-18 | 2014-11-18 | Xencor, Inc. | Optimized antibodies that target hm1.24 |
EP2311493A4 (en) * | 2008-05-20 | 2012-09-26 | Kaneka Corp | CYTOTOXIC COMPOSITION |
WO2011039150A1 (en) * | 2009-10-02 | 2011-04-07 | Roche Glycart Ag | A-fucosylation detection in antibodies |
CA2829110C (en) * | 2011-03-06 | 2019-01-15 | Merck Serono S.A. | Low fucose cell lines and uses thereof |
KR102023496B1 (ko) | 2011-04-21 | 2019-09-20 | 시애틀 지네틱스, 인크. | 신규 결합제-약물 콘주게이트 (adc) 및 그의 용도 |
EP2812702B1 (en) * | 2012-02-10 | 2019-04-17 | Seattle Genetics, Inc. | Diagnosis and management of CD30-expressing cancers |
CN105407921A (zh) * | 2013-03-13 | 2016-03-16 | 赛诺菲 | 包含抗cd38抗体和卡非佐米的组合物 |
ES2798307T3 (es) * | 2013-03-15 | 2020-12-10 | Hoffmann La Roche | Composiciones de cultivo de células con antioxidantes y procedimientos para la producción de polipéptidos |
DK3708583T3 (da) * | 2013-08-01 | 2022-05-16 | Five Prime Therapeutics Inc | Ikke-fucosylerede anti-fgfr2iiib-antistoffer |
EP2876114A1 (en) | 2013-11-25 | 2015-05-27 | Consejo Superior De Investigaciones Científicas | Antibodies against CCR9 and applications thereof |
CA2924448C (en) * | 2013-11-29 | 2021-12-14 | Genentech, Inc. | Antibody selection apparatus and methods |
US10022453B2 (en) | 2013-12-23 | 2018-07-17 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Antibody drug conjugates (ADCs) with kinesin spindel protein (KSP) |
DK3194583T3 (da) * | 2014-07-30 | 2021-12-20 | Zumutor Biologics Inc | Ikke-fucosyleret protein og fremgangsmåder dermed |
US11033637B2 (en) | 2014-11-21 | 2021-06-15 | University Of Maryland, Baltimore | Targeted structure-specific particulate delivery systems |
EP3590961A1 (en) * | 2015-03-25 | 2020-01-08 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Bispecific multivalent fusion proteins |
MX2017017172A (es) | 2015-06-22 | 2018-02-23 | Bayer Pharma AG | Conjugados de ligador-principio activo (adcs) y conjugados de ligador-profarmaco (apdcs) con grupos enzimaticamente escindibles. |
TW202340452A (zh) | 2015-08-04 | 2023-10-16 | 美商再生元醫藥公司 | 補充牛磺酸之細胞培養基及用法 |
WO2017060322A2 (en) | 2015-10-10 | 2017-04-13 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Ptefb-inhibitor-adc |
US11951175B2 (en) | 2016-02-08 | 2024-04-09 | Synaffix B.V. | Bioconjugates containing sulfamide linkers for use in treatment |
WO2017137423A1 (en) | 2016-02-08 | 2017-08-17 | Synaffix B.V. | Improved sulfamide linkers for use in bioconjugates |
EP3413915A1 (en) * | 2016-02-08 | 2018-12-19 | Synaffix B.V. | Antibody-conjugates with improved therapeutic index for targeting her2 tumours and method for improving therapeutic index of antibody-conjugates |
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US11542332B2 (en) | 2016-03-26 | 2023-01-03 | Bioatla, Inc. | Anti-CTLA4 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof |
EP3919518A1 (en) | 2016-06-15 | 2021-12-08 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Specific antibody-drug-conjugates (adcs) with ksp inhibitors and anti-cd123-antibodies |
MX2018016404A (es) | 2016-06-21 | 2019-10-15 | Teneobio Inc | Anticuerpos de union a cd3. |
RS65595B1 (sr) | 2016-09-14 | 2024-06-28 | Teneoone Inc | Antitela koja vezuju cd3 |
BR112019012883A2 (pt) | 2016-12-21 | 2019-11-26 | Bayer Ag | conjugados de ligante-fármaco (adcs) que têm grupos enzimaticamente cliváveis |
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CN110072556B (zh) | 2016-12-21 | 2023-05-02 | 拜耳制药股份公司 | 具有ksp抑制剂的特异性抗体药物缀合物(adc) |
WO2018237006A1 (en) | 2017-06-20 | 2018-12-27 | Teneoone, Inc. | ANTIBODIES ONLY TO HEAVY ANTI-BCMA CHAINS |
WO2018237037A2 (en) | 2017-06-20 | 2018-12-27 | Teneobio, Inc. | HEAVY CHAIN ANTIBODY ONLY ANTI-BCMA |
KR20220020810A (ko) | 2019-06-14 | 2022-02-21 | 테네오바이오, 인코포레이티드 | Cd22와 cd3에 결합하는 다중특이적 중쇄 항체 |
WO2021221927A1 (en) | 2020-04-27 | 2021-11-04 | Parsons Corporation | Narrowband iq signal obfuscation |
EP4186564A1 (en) | 2020-04-29 | 2023-05-31 | Teneoone, Inc. | Multispecific heavy chain antibodies with modified heavy chain constant regions |
EP4161563A1 (en) | 2020-06-05 | 2023-04-12 | Tessa Therapeutics Ltd. | Treatment of cd30-positive cancer |
CA3218235A1 (en) | 2021-04-27 | 2022-11-03 | Baylor College Of Medicine | Virus-specific immune cells expressing chimeric antigen receptors |
CN112986164B (zh) * | 2021-05-18 | 2021-08-24 | 上海执诚生物科技有限公司 | 一种抗肝素稳定的α-L-岩藻糖苷酶检测试剂盒及其应用 |
TW202321443A (zh) | 2021-10-26 | 2023-06-01 | 新加坡商泰莎治療有限公司 | 用於生產編碼car之反轉錄病毒載體的細胞株 |
TW202328438A (zh) | 2021-12-08 | 2023-07-16 | 新加坡商泰莎治療有限公司 | 淋巴瘤之治療 |
WO2023198744A1 (en) | 2022-04-13 | 2023-10-19 | Tessa Therapeutics Ltd. | Therapeutic t cell product |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003059282A2 (en) * | 2002-01-09 | 2003-07-24 | Medarex, Inc. | Human monoclonal antibodies against cd30 |
WO2003085107A1 (fr) * | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cellules à génome modifié |
WO2004029092A2 (fr) * | 2002-09-13 | 2004-04-08 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Anticorps pour adcc et induisant la production de cytokines. |
WO2005014651A1 (ja) * | 2003-08-11 | 2005-02-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 糖鎖改変抗hm1.24抗体 |
Family Cites Families (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4475196A (en) | 1981-03-06 | 1984-10-02 | Zor Clair G | Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system |
US4447233A (en) | 1981-04-10 | 1984-05-08 | Parker-Hannifin Corporation | Medication infusion pump |
US4439196A (en) | 1982-03-18 | 1984-03-27 | Merck & Co., Inc. | Osmotic drug delivery system |
US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US4447224A (en) | 1982-09-20 | 1984-05-08 | Infusaid Corporation | Variable flow implantable infusion apparatus |
US4487603A (en) | 1982-11-26 | 1984-12-11 | Cordis Corporation | Implantable microinfusion pump system |
US4486194A (en) | 1983-06-08 | 1984-12-04 | James Ferrara | Therapeutic device for administering medicaments through the skin |
US4596556A (en) | 1985-03-25 | 1986-06-24 | Bioject, Inc. | Hypodermic injection apparatus |
US5374548A (en) | 1986-05-02 | 1994-12-20 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor |
MX9203291A (es) | 1985-06-26 | 1992-08-01 | Liposome Co Inc | Metodo para acoplamiento de liposomas. |
US4941880A (en) | 1987-06-19 | 1990-07-17 | Bioject, Inc. | Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly |
US4790824A (en) | 1987-06-19 | 1988-12-13 | Bioject, Inc. | Non-invasive hypodermic injection device |
US5312335A (en) | 1989-11-09 | 1994-05-17 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
US5064413A (en) | 1989-11-09 | 1991-11-12 | Bioject, Inc. | Needleless hypodermic injection device |
WO1991007437A2 (en) | 1989-11-20 | 1991-05-30 | Parker, David, L. | Improved cd-30 antibodies and fragments thereof |
US5165923A (en) | 1989-11-20 | 1992-11-24 | Imperial Cancer Research Technology | Methods and compositions for the treatment of hodgkin's disease |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US6713610B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-03-30 | Raju Kucherlapati | Human antibodies derived from immunized xenomice |
WO1994025585A1 (en) | 1993-04-26 | 1994-11-10 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
EP0814159B1 (en) | 1990-08-29 | 2005-07-27 | GenPharm International, Inc. | Transgenic mice capable of producing heterologous antibodies |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
DE4200043A1 (de) | 1991-11-11 | 1993-05-13 | Stein Harald Prof Dr | Lymphoides cd30-antigen (ki-1), dessen protein- und die zugehoerige nucleotidsequenz, seine herstellung sowie mittel zur diagnose und untersuchung von tumoren |
CA2131003A1 (en) | 1992-05-26 | 1993-12-09 | Raymond G. Goodwin | Novel cytokine that binds cd30 |
US5383851A (en) | 1992-07-24 | 1995-01-24 | Bioject Inc. | Needleless hypodermic injection device |
AU4953693A (en) | 1992-08-25 | 1994-03-15 | Medac Gesellschaft Fur Klinische Spezialpraparate Mbh | Antibody/radioisotope conjugate for tumor diagnosis and/or therapy |
DE4337197C1 (de) | 1993-10-30 | 1994-08-25 | Biotest Pharma Gmbh | Verfahren zur selektiven Herstellung von Hybridomazellinien, die monoklonale Antikörper mit hoher Zytotoxizität gegen humanes CD16-Antigen produzieren, sowie Herstellung bispezifischer monoklonaler Antikörper unter Verwendung derartiger monoklonaler Antikörper und des CD30-HRS-3-Antikörpers zur Therapie menschlicher Tumore |
CA2210620C (en) | 1995-01-18 | 2004-06-22 | Boehringer Mannheim Gmbh | Anti-cd 30 antibodies preventing proteolytic cleavage and release of membrane-bound cd 30 antigen |
DE19543039C1 (de) | 1995-11-08 | 1996-11-21 | Medac Klinische Spezialpraep | Rekombinante Liganden für das menschliche Zellmembran-Antigen CD30 |
AU5702298A (en) | 1996-12-03 | 1998-06-29 | Abgenix, Inc. | Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and VK regions nd antibodies produced therefrom |
WO1999040187A1 (de) | 1998-02-06 | 1999-08-12 | Hinrich Abken | Nukleinsäuren zur modulation zellulärer aktivierung |
DE19937264A1 (de) | 1999-08-06 | 2001-02-15 | Deutsches Krebsforsch | F¶v¶-Antikörper-Konstrukte |
DE60035337T2 (de) * | 2000-05-12 | 2008-02-28 | Gpc Biotech Ag | Humane Peptide/Proteine, die das Töten von Zellen, einschliesslich lymphoider Tumorzellen, herbeiführen oder bewirken |
US7016788B2 (en) | 2000-07-07 | 2006-03-21 | Curagen Corporation | Methods for classifying nucleic acids and polypeptides |
US6652854B2 (en) | 2000-08-08 | 2003-11-25 | Immunex Corporation | Methods for treating autoimmune and chronic inflammatory conditions using antagonists of CD30 or CD30L |
AU2001285286A1 (en) | 2000-08-29 | 2002-03-13 | Noveon Ip Holdings Corp. | Hydrogels containing substances |
US20040018194A1 (en) | 2000-11-28 | 2004-01-29 | Francisco Joseph A. | Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof |
US7090843B1 (en) | 2000-11-28 | 2006-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof |
JPWO2003000286A1 (ja) * | 2001-06-22 | 2004-10-07 | 第一サントリーファーマ株式会社 | 好酸球増多性疾患治療薬 |
NZ592087A (en) * | 2001-08-03 | 2012-11-30 | Roche Glycart Ag | Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity |
MXPA04003798A (es) | 2001-10-25 | 2004-07-30 | Genentech Inc | Composiciones de glicoproteina. |
AU2003210060B2 (en) | 2002-03-22 | 2010-02-25 | Aprogen, Inc. | Humanized antibody and process for preparing same |
US7470775B2 (en) | 2002-06-07 | 2008-12-30 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Anti-CD30 stalk and anti-CD30 antibodies suitable for use in immunotoxins |
EP2248892B1 (en) * | 2003-01-22 | 2015-04-22 | Roche Glycart AG | Fusion constructs and use of same to produce antibodies with increased FC receptor binding affinity and effector function |
MX2007003533A (es) * | 2004-10-01 | 2007-05-23 | Medarex Inc | Metodos de tratar linfomas cd30 positivas. |
US8207303B2 (en) * | 2005-02-18 | 2012-06-26 | Medarex, Inc. | Monoclonal antibodies against CD30 lacking in fucosyl residues |
-
2006
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-
2007
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- 2007-07-31 IL IL184950A patent/IL184950A/en not_active IP Right Cessation
-
2012
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-
2013
- 2013-01-10 JP JP2013002702A patent/JP2013116900A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003059282A2 (en) * | 2002-01-09 | 2003-07-24 | Medarex, Inc. | Human monoclonal antibodies against cd30 |
WO2003085107A1 (fr) * | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cellules à génome modifié |
WO2004029092A2 (fr) * | 2002-09-13 | 2004-04-08 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Anticorps pour adcc et induisant la production de cytokines. |
WO2005014651A1 (ja) * | 2003-08-11 | 2005-02-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 糖鎖改変抗hm1.24抗体 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013116900A (ja) * | 2005-02-18 | 2013-06-13 | Medarex Inc | フコシル残基を欠くcd30に対するモノクローナル抗体 |
JP2020202832A (ja) * | 2020-07-10 | 2020-12-24 | ツムトー バイオロジクス、インコーポレイテッド | 非フコシル化タンパク質および方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2598561C (en) | 2014-01-21 |
KR101323455B1 (ko) | 2013-10-29 |
ES2498794T3 (es) | 2014-09-25 |
CN101128486A (zh) | 2008-02-20 |
CA2598561A1 (en) | 2006-08-24 |
RU2492186C2 (ru) | 2013-09-10 |
US20100021479A1 (en) | 2010-01-28 |
US8207303B2 (en) | 2012-06-26 |
WO2006089232A2 (en) | 2006-08-24 |
AU2006214033B2 (en) | 2011-08-11 |
EP1848745B1 (en) | 2014-07-09 |
MX2007009940A (es) | 2007-10-10 |
US8491898B2 (en) | 2013-07-23 |
NZ560209A (en) | 2009-04-30 |
KR20070107770A (ko) | 2007-11-07 |
JP2013116900A (ja) | 2013-06-13 |
US20120251533A1 (en) | 2012-10-04 |
IL184950A (en) | 2011-04-28 |
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IL184950A0 (en) | 2007-12-03 |
NO20073943L (no) | 2007-11-14 |
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