JP2008035760A - 反芻動物用飼料 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ヒノキチオール0.0001〜0.05重量%並びにクエン酸、酒石酸及び乳酸からなる群から選ばれた少なくとも1種類の有機酸0.01〜5重量%を含有することを特徴とする反芻動物用飼料。
【選択図】なし
Description
ヒバ抽出物とは、ヒノキ科ヒバの樹木(例:台湾ヒノキ、青森ヒバ、木曾ヒバ、イブキ、ビャクシン等)より抽出したヒバ油及びその主成分であるヒノキチオールあるいは副成分であるβ−ドラブリン、α−ツヤプシリン、γ−ツヤプシリン、ヨシキソール等を指す。ヒバ油中の有効主成分ヒノキチオールはβ−ツヤプシリンともいい、分子式はC10H12O2で芳香族化合物の一種である。通常、ヒバの端材から抽出したヒバ油から油分を除去しヘキサン等で再結晶させて精製する。また、クロマトグラフィーを使用して分離・精製しても良い。ヒバ抽出物は精製度合いによりヒノキチオール含量が異なるが、通常1〜99%のヒノキチオールを含有する。
Streptococcus bovisに対するMICを指標にして様々な天然物抽出物/エキスを比較した。
MICの測定は感受性ディスク用培地(寒天培地)を用いて好気条件下で実施した。培養温度は38℃とした。
表1にその結果の一部を示したが、大半の天然物が102〜103オーダーの抗菌性であったのに対して「ヒノキチオール」又は「ヒノキチオール」を50%含有する「ヒバ油」は1.56μg/mLと高い抗菌性を示した。クエン酸・酒石酸・乳酸からなる「有機酸混合物」(メディアインターナショナル社製、「カルボミック−S(商品名)」、酸含量52%品)は1,600μg/mLと中程度の抗菌性であった。
Streptococcus bovis(ATCC 700410)に対するMICの測定は液体培地により行った。培地はTSB(Trypticase Soy Broth)を用い、培養温度は37℃、嫌気条件下でジャー培養した。供試物の溶媒には80%メタノールを使用した。
MIC測定結果を表2に示した。Streptococcus bovisに対するMICの値は「ヒノキチオール」(ヒノキチオール99%品)で1.56μg/mL、クエン酸・酒石酸・乳酸からなる「有機酸混合物」(酸含量52%品)で1,600μg/mLであった。「ヒノキチオール」と「有機酸混合物」を組み合わせた場合には単独の場合より抗菌性が強く、太枠の濃度領域において相乗作用が認められた。
Streptococcus bovis、Lactobacillus ruminis、Corynebacterium vitaeruminis、Salmonella enteritidis、Escherichia coliに対するMICの測定は感受性ディスク用培地を用いて好気条件下で実施した。Corynebacterium vitaeruminisは30℃、その他の株については38℃で培養を行なった。
Bifidobacterium ruminantium、Butyrivibrio fibrisolvens、Selenomonas ruminantium、Megasphaera elsdenii、Clostridium perfringensに対するMICの測定はTSB(Trypticase Soy Broth)を用いて嫌気ボックス内で実施した。培養温度は、37℃とした。
いずれも供試物の溶媒には80%メタノールを使用した。
MIC測定結果を表3に示した。「ヒノキチオール」あるいは「ヒノキチオール」+「有機酸混合物」の組み合わせはStreptococcus bovisやLactobacillus ruminisといったグラム陽性で乳酸を産生する菌に対して強い抗菌性を示した。一方、グラム陰性で乳酸利用菌であるMegasphaera elsdeniiに対する抗菌性は低かった。乳酸は易発酵性の炭水化物が多給された場合に第一胃内で発生する酸であり、第一胃アシドーシス等の原因となり得る。乳酸産生菌の減少、乳酸利用菌の増加は第一胃発酵状態の改善に寄与する可能性を示唆している。なお、一般的な病原性のグラム陽性菌であるCorynebacterium vitaeruminis、Clostridium perfringensあるいは病原性のグラム陰性菌であるSalmonella enteritidis、Escherichia coliといった菌に対してはモネンシンナトリウム同様に抗菌性が低かった。
なお、Streptococcus bovisで実施例2と若干値が異なるが、液体培養法と寒天培養法の測定法上の違いによるものと推察される。ただし、実施例2、実施例3とも相乗効果が見られた点について違いはない。
対照飼料はLindahlらの鼓脹症誘起飼料(Ivan L.Lindahl,R.E.Davis,Don R.Jacobson and J.C.Shaw「Feedlot bloat studies.I.Animal and dietary factors.」Journal of Animal Sci.16:165−178(1957))とし、対照飼料に「ヒノキチオール」(ヒノキチオール99%品)、クエン酸・酒石酸・乳酸からなる「有機酸混合物」(酸含量52%品)を表4に従って添加したものを試験1区〜試験4区用飼料とした。添加量はMICの10〜20倍を目安に設定した。
試験は3×3ラテン方格法にて1期3週間で実施した。供試牛は第一胃カニューレを装着した乳用種未経産牛(体重約400kg)3頭を使用した。なお、第一胃内に残存した粗飼料由来の繊維を完全に消化させることを目的として予備期間を3週間設けた。試験前は対照飼料及びチモシー乾草を給与し、予備期間中は対照飼料のみを粗飼料無給与で給与、試験期間中はそれぞれ対照飼料、試験1区用飼料、試験2区用飼料を粗飼料無給与で給与した。期間中の飼料給与量は日本飼養標準・肉牛(2000)で維持の場合にTDN充足率が174%となるように設定した。飼料給与は9:30、17:30の2回/日に分けて行なった。
第一胃液は9:30の飼料給与から2時間後に500mLを採取し、二重ガーゼでろ過したものをサンプルとした。測定時にはガラス棒で撹拌して液が均一となるように注意した。
第一胃液性状の測定項目はIVI(起泡性)、stable IVI(泡沫安定性 以下s.IVI)、ガス発生量、粘度、VFA(揮発性脂肪酸)、pH、第一胃プロトゾア数/組成とした。IVI、s.IVIはJacobsonらの方法(Jacobson,D.R.,I.L.Lindahl,J.J.McNeill,J.C.Shaw,R.N.Detsch and R.E.Davis「Feedlot bloat studies.II.Physical factors involved in the etiology of frothy bloat.」Journal of Animal Sci.16:515−524(1957))、ガス発生量は宇佐川らの方法(宇佐川智也、西野武蔵「鼓脹症誘起飼料を給与しためん羊の第一胃内容液の性状に及ぼすモネンシンの影響」日本畜産学会報 53(8):535−540(1982))とした。粘度は回転式粘度計(東機産業社製、TVB 10M Lアダプター装着)を用い、39℃で測定した。回転速度は12rpmを基本としたが、12rpmで測定できないサンプルについては他の回転数で測定し、他サンプルから得た換算式で12rpm時相当の数値に補正した。VFA測定はルーメン液と等量の10%メタリン酸溶液[2N硫酸に10%(w/v)となるようにメタリン酸を溶解したもの]を加えて、10,000rpm以上で、20分以上遠心分離した上清を、凍結保存したものを用いた。上清はガスクロマトグラフィーに注入し、VFAの定量を行なった。ガスクロマトグラフィーはDB−WAXカラム(内径0.25mm 長さ30cm 膜厚0.25μm)を用い、キャリアーガスはHe 1mL/min、水素40mL/min、空気500mL/min、カラム温度150℃(5℃/min)→200℃(10℃/min)→230℃(1min)の条件で検出した。酪酸についてはn−酪酸とiso−酪酸の合計値を酪酸として算出した。pHはポータブルpHメーターを用いて第一胃液採取後5分以内に測定した。第一胃プロトゾア数/組成の測定は今井らの総説(今井壮一、勝野正則「ルーメン繊毛虫の同定の手引き」宮獣会報 30(1)3−23(1977))に基づいて行なった。測定は1週間毎に行い平均値を算出したが、プロトゾアに関しては各期の終了時のみ測定した。
第一胃液性状の測定結果は、表5〜7に示した。「ヒノキチオール」の投与により、泡沫安定性を示すs.IVIの値が有意に低下した(p<0.05)。また、「ヒノキチオール」を半減し、「有機酸混合物」と組み合わせた区ではs.IVIの値の有意な低下(p<0.01)に加えて、起泡性を示すIVIも有意に低下した(p<0.05)。粘度、ガス産生量については「ヒノキチオール+有機酸混合物」で若干低下する傾向を示したが、有意な差ではなかった(表5)。
一方、VFA組成及びプロトゾア総数/組成は、区間で有意な差が認められなかった(表6、表7)。
以上の結果から、「ヒノキチオール」及び「有機酸混合物」によりモネンシンナトリウム同様に鼓脹症の症状が緩和される可能性があることが示された。また、第一胃液性状の改善効果は「ヒノキチオール」単独よりも「ヒノキチオール」と「有機酸混合物」を組み合わせることで強まることが分かった。
「ヒノキチオール」+「有機酸混合物」の組み合わせでドース確認試験を行なった。
試験方法は実施例5と基本的に同様に行なった。ただし、ラテン方格法の1期は2週間とし予備期間も2週間とした。
第一胃液性状の測定結果は表8〜10に示した。今回の試験でも実施例5同様に泡沫安定性を示すs.IVIが“「ヒノキチオール」15.6ppm+「有機酸混合物」0.4%”では有意(p<0.05)に、“「ヒノキチオール」3.9ppm+「有機酸混合物」0.1%”では有意差は無いが低下することが確認された(表8)。
一方、VFA組成及びプロトゾア総数/組成は区間で有意な差が認められなかった(表9、表10)。
「ヒノキチオール」+「有機酸混合物」の組み合わせでモネンシンナトリウムとの比較試験を行なった。濃厚飼料は鼓脹症誘起力をさらに強めるために実施例4のアルファルファペレットを粉砕トウモロコシに置き換え調製した(表11)。また、試験5区のモネンシンナトリウムの添加量は飼料安全法上の規定添加量である30g力価/tとした。
乳用種去勢牛(体重約600kg)8頭をモネンシン区(試験5区)4頭、“「ヒノキチオール」+「有機酸混合物」”区(試験6区)4頭に分けて供試した。試験前は両区とも対照飼料を不断給与、粗飼料は濃厚飼料の10%を給与した。試験は3週間の制限給与期間を設け、試験5区飼料又は試験6区飼料を制限給与、粗飼料を段階的に減少させた。その後2週間の不断給与期間とし、試験5区飼料又は試験6区飼料を不断給与、粗飼料を無給与とした。
第一胃液性状の測定結果は表12に示した。“「ヒノキチオール」+「有機酸混合物」”添加はモネンシンナトリウム30g力価/t添加に比べて起泡性を示すIVIが有意に高いものの、粘度、s.IVI、s.IVI/IVI、腹囲/胸囲に差は認められなかった。
よってIVI以外のいずれの項目についても「ヒノキチオール」と「有機酸混合物」の組み合わせは鼓脹症抑制に対してモネンシンナトリウムと同等の効果があるものと考えられた。
Claims (5)
- ヒノキチオール0.0001〜0.05重量%並びにクエン酸、酒石酸及び乳酸からなる群から選ばれた少なくとも1種類の有機酸0.01〜5重量%を含有することを特徴とする反芻動物用飼料。
- 有機酸がクエン酸、酒石酸及び乳酸からなる有機酸混合物である請求項1に記載の反芻動物用飼料。
- 反芻動物が、牛、めん羊及び山羊からなる群から選ばれたものであることを特徴とする請求項1又は2に記載の反芻動物用飼料。
- 鼓脹症予防性を有することを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の反芻動物用飼料。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載の反芻動物用飼料を反芻動物に給与することを特徴とする反芻動物の飼育方法。
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