JP2007536891A5 - - Google Patents

Description

＜ヒト組換え環状置換ＴＲＡＩＬをコードする遺伝子の構築及び発現＞
ヒトＴＲＡＩＬの１２１残基から２８１残基にあるアミノ酸残基をコードする、遺伝子配列を、ヒト脾臓ｃＤＮＡライブラリーから得た。ヒトＴＲＡＩＬの１２１残基〜２８１残基のアミノ酸残基をコードする遺伝子を、ヒトＴＲＡＩＬ遺伝子をテンプレートとして用いて、通常行われるＰＣＲ法によって生成した。つぎに、ＴＲＡＩＬのアミノ酸残基１２２残基〜１３５残基をコードするＤＮＡ配列を、ＰＣＲ法によってＴＲＡＩＬの１３５〜２８１位にあるアミノ酸残基をコードするＤＮＡ配列の３’末端と結合させた。アミノ酸残基１３５残基〜２８１残基をコードするＤＮＡ配列とＴＲＡＩＬのアミノ酸残基１２２〜１３５をコードするＤＮＡ配列との間に、５個のグリシン残基をコードするＤＮＡ配列を挿入した。グリシンの柔軟性により、タンパク質の折り畳みを容易にすることができる。このようにして得られるＣＰＴコード遺伝子を、ＮｃｏＩ及びＢａｍＨＩを用いてベクタープラスミドｐｅｔ２８ｂ（又は他のベクター）に連結して、発現ベクターとした。そのＤＮＡ配列は、塩基配列決定によって正しいことが確認された。

Claims (14)

1. 抗癌作用を持つ組換えタンパク質であって、
   （１）配列表に示す配列番号２のアミノ酸配列を有するタンパク質と、
   （２）配列番号２との配列同一性が９０％を超え、かつ配列番号２の活性と同等の抗癌活性を有する、配列番号２に由来するタンパク質と、
   （３）配列番号２のアミノ酸配列にある１残基又は数残基のアミノ酸残基の置換、欠失、又は付加によって得られ、かつ配列番号２の活性と同等の抗癌活性を有する、配列番号２に由来するタンパク質と、からなる群から選択される組換えタンパク質である、抗癌作用を持つ組換えタンパク質。
2. 前記タンパク質が配列表に示す配列番号２である、請求項１に記載の組換えタンパク質。
3. 抗癌作用を持つ組換えタンパク質をコードする遺伝子であって、
   （１）配列表に示す配列番号１と、
   （２）配列表に示す配列番号２のアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドと、
   （３）配列番号１によって定義されるＤＮＡ配列との配列同一性が９０％を超え、かつ配列番号１によってコードされるタンパク質と同等の抗癌活性を有するタンパク質をコードするＤＮＡ配列と、
   （４）配列番号２に由来するタンパク質をコードするＤＮＡ配列であり、配列番号２に由来する前記タンパク質が、配列番号２のアミノ酸配列にある１残基又は数残基のアミノ酸残基の置換、欠失、又は付加によって得られ、かつ配列番号２によってコードされるタンパク質と同等の抗癌活性を有するＤＮＡ配列と、からなる群から選択される遺伝子である、抗癌作用を持つ組換えタンパク質をコードする遺伝子。
4. 前記遺伝子が配列表に示す配列番号１である、請求項３に記載の遺伝子。
5. 請求項１又は２に記載の組換えタンパク質を活性成分として含む、癌を治療するための医薬品。
6. 請求項３又は４に記載の遺伝子を含む、発現ベクター。
7. 請求項３又は４に記載の遺伝子を含む、細胞株。
8. 癌を治療するための医薬品に用いる、請求項１又は２に記載の組換えタンパク質の使用。
9. 前記癌は、大腸癌、肺癌、多発性骨髄腫、脳神経膠腫、白血病、乳癌、小細胞肺癌、膵臓癌からなる群から選ばれる少なくとも一種である、請求項８に記載の使用。
10. 前記癌は多発性骨髄腫である、請求項９に記載の使用。
11. 前記癌は白血病である、請求項９に記載の使用。
12. 前記癌は脳神経膠腫である、請求項９に記載の使用。
13. 前記癌は肺癌である、請求項９に記載の使用。
14. 前記癌は大腸癌である、請求項９に記載の使用。