JP2007535669A - CultiSpotアッセイ法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、細胞による一つまたは複数の検体の産生を検出するための方法に関する。本発明は、細胞による一つまたは複数の検体の産生を検出する方法における使用のための新規の製品、その製品を含むキット、その製品およびキットの使用、ならびにその製品を製造するための方法にも関する。
タンパク質レベルで、分泌型サイトカインならびにその他の可溶性物質の検出に対して使用されるアッセイ法には、ELISAおよびELISpotアッセイ法が含まれる。例えば、酵素免疫スポットアッセイ法(enzyme-linked immunospot assay)(ELISpot)は、T細胞特異的反応の検出に対して広く使用される。ELISpotアッセイ法において、特異的サイトカインを分泌するT細胞は、そのサイトカインに対して特異的な抗体が固定されるELISpotアッセイプレートにおいて、T細胞をインキュベートすることによって検出される。次いで、抗体に結合したサイトカインは、標準的な免疫学的試験法を使用して可視化される。サイトカイン産生が生じた、アッセイプレートの領域に局在する結合サイトカインのスポットは、活性化T細胞の存在を示す。各々のスポットは、単一の細胞によるサイトカイン産生を意味する。それ故に、アッセイ法において存在する細胞の数が公知である場合、ELISpotアッセイ法によって、形成されたスポットの数を数えることにより反応細胞の頻度が確定される。
本発明は、細胞の同時培養を伴うELISpotの利点と抗体アッセイ法の柔軟性を伴う細胞産物の捕獲とを組み合わせる新規のアッセイ法を提供し、培養細胞によって放出される産物のインビトロ検出のための高感度手法を提供する。本発明のアッセイ法は、一つまたは複数の検体に対する抗体が固体表面上の別個の位置に固定されるアッセイプレートを使用する。本発明の新規アッセイ法は、個々のサンプルにおける培養細胞によって放出される複数のサイトカインの同時検出を可能にする。本発明のアッセイ法は高感度で、特異的免疫反応の分析においてなど、少数の反応または産生細胞を伴う検体に対して使用され得る。ELISpotアッセイ法と異なり、個々のサンプルに存在し得る細胞の数は制限されない。それ故に、本発明のアッセイ法において、ウェルあたり、より多くの数の細胞がアッセイされ得る。従って、新規アッセイ法の感度は、公知のELISpotアッセイ法に比べて高められる。
(a)(i)第一検体に特異的に結合する第一結合タンパク質、および
(ii)任意で、第二検体に特異的に結合する第二結合タンパク質
を提供し、第一結合タンパク質および任意で第二結合タンパク質が、ウェル内の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される段階;
(b)細胞のサンプルをウェルに導入する段階;
(c)以下に適した条件下で、前記細胞のサンプルを培養する段階:
(i)前記細胞による第一検体および任意で第二検体および任意で一つまたは複数のさらなる検体の放出;ならびに
(ii)第一検体の第一結合タンパク質への結合および任意で第二検体の第二結合タンパク質への結合;ならびに
(d)第一検体が第一結合タンパク質に結合しているかどうか、および第二検体が第二結合タンパク質に結合しているかどうかを判定し、それによって一つまたは複数の検体の細胞のサンプルによる産生を検出する段階。
本発明は、細胞のサンプルによる一つまたは複数の検体の産生を検出するためのインビトロの方法を提供し、その方法は以下の段階を含む:
(a)(i)第一検体に特異的に結合する第一結合タンパク質、および
(ii)任意で、第二検体に特異的に結合する第二結合タンパク質
を提供し、第一結合タンパク質および任意で第二結合タンパク質が、ウェル内の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される段階;
(b)細胞のサンプルをウェルに導入する段階;
(c)以下に適した条件下で、前記細胞サンプルを培養する段階:
(i)前記細胞による第一検体および任意で該第二検体の放出;ならびに
(ii)第一検体の第一結合タンパク質への結合および任意で第二検体の第二結合タンパク質への結合;ならびに
(d)第一検体が第一結合タンパク質に結合しているかどうか、および任意で第二検体が第二結合タンパク質に結合しているかどうかを判定し、それによって一つまたは複数の検体の細胞のサンプルによる産生を検出する段階。
(iii)細胞による各々の一つまたは複数のさらなる検体の放出;および
(iv)各々のさらなる検体の、各々の一つまたは複数のさらなる結合タンパク質への結合;
かつ段階(d)は、前記一つまたは複数のさらなる検体の各々が、さらなる結合タンパク質の各々に結合しているかどうかを判定することを付加的に含む。
第一結合タンパク質は、第一検体に特異的に結合することが可能なタンパク質である。第二結合タンパク質は、第二検体に特異的に結合することが可能なタンパク質である。さらなる結合タンパク質は、さらなる検体に特異的に結合することが可能である。タンパク質は、特異的な検体に対して選択的または高親和性を有して結合する場合に、検体に「特異的に結合する」が、その他の物質には結合しない、実質的には結合しない、または低親和性のみを有して結合する。タンパク質の特異的結合能力は、任意の適した方法によって決定され得る。競合的結合に対する様々なプロトコールが、当技術分野において周知である(例えば、Maddox et al. (1993), J. Exp. Med. 158:1211-1226を参照されたい)。
本発明の方法における検出に対する検体は、細胞によって産生される任意の物質であり得る。概して、検体はタンパク質である。検体は、典型的には、細胞から分泌される。検体は、免疫反応性物質、すなわち、抗体に結合する物質であることが好ましい。本発明の方法は、細胞の単一サンプルによって産生される、一つまたは複数の、例えば、2〜100、3〜75、4〜60、5〜50、6〜40、7〜30、8〜20、9〜15、または10〜12の検体を検出するために使用され得る。
ウェルは、典型的には複数ウェルプレートのウェルである。結合タンパク質は、典型的にはウェルの底面上に固定される。ウェルは、溶液を保持するのに適した任意の構造であり、結合タンパク質が固定され得、かつ表面上に固定された結合タンパク質への検体の結合を検出するのに適した、固体表面を含む。ウェルは、典型的には、平らな水平の底面、および垂直の壁面または複数の壁面を含む。ウェルは、典型的には約25μl〜約250μl、約30μl〜約200μl、約40μl〜約150μl、または約50μl〜100μlの容量を有する。適した培養条件下で、表面が細胞のサンプルに接触させられることが可能であるならば、固体表面がウェルの底面であることは必須ではない。例えば、結合試薬は、細胞培養の間にウェルに置かれるカバースリップまたは類似物などの、固体表面上に固定され得る。
特異的結合タンパク質を使用して検出され得る検体を産生する任意の細胞が、本アッセイ法において使用され得る。一つの好ましい態様において、細胞のサンプルは、T細胞を含む。T細胞は、概して、血液サンプルにおける被験体から採取されるが、T細胞を含むサンプルのその他の型が使用されてもよい。サンプルは、本アッセイ法に直接的に添加され得る、または処理され得る。典型的には、処理は、血液からの細胞の単離および細胞培養培地または緩衝液におけるこれらの懸濁を含み得る。細胞懸濁液は、試験状況に応じて、細胞の異なる濃度を含むように希釈され得る。サンプルにおける細胞の濃度は、血液中の濃度よりも高い可能性がある。
本発明の方法において、細胞のサンプルは、細胞からの第一検体、および任意で第二またはさらなる検体の放出に適した任意の条件下で、ウェルに導入される、または固定化結合タンパク質に接触させられる。条件は、検体が固定化結合タンパク質に結合するのにも適している。概して、細胞は、好ましくは培養培地である溶液中に存在すると思われる。
固定化結合タンパク質と細胞から放出される検体との間で形成される複合体は、任意の適した手法によって検出され得る。抗体が固定される表面は、検出に先行して非結合免疫反応性物質を除去するために、例えばPBS中で、概して洗浄される。
本発明の方法は、典型的には、特異的刺激シグナルに反応して検体を産生する細胞を検出するために使用される。従って、試験される細胞は、検体の分泌を刺激することが可能な第一薬剤に接触させられ得る。
(a)(i)第一ウイルスタンパク質に特異的に結合する第一結合タンパク質、および
(ii)任意で、第二ウイルスタンパク質に特異的に結合する第二結合タンパク質
を提供し、第一結合タンパク質および任意で第二結合タンパク質が、固体表面上の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される段階;
(b)固体表面を、ウイルス感染細胞のサンプルおよび試験薬剤に接触させる段階;
(c)以下に適した条件下で、前記細胞サンプルを培養する段階:
(i)前記細胞による第一ウイルスタンパク質および任意で第二ウイルスタンパク質の放出;ならびに
(ii)第一ウイルスタンパク質の第一結合タンパク質への結合および任意で第二ウイルスタンパク質の第二結合タンパク質への結合;ならびに
(d)第一ウイルスタンパク質が第一結合タンパク質に結合しているかどうか、および任意で第二ウイルスタンパク質が第二結合タンパク質に結合しているかどうかを判定し、それによって試験薬剤が抗ウイルス活性を有するかどうかを判定する段階。
(a)(i)第一サイトカインに特異的に結合する第一結合タンパク質、および
(ii)任意で、第二サイトカインに特異的に結合する第二結合タンパク質
を提供し、第一結合タンパク質および任意で第二結合タンパク質が、固体表面上の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される段階;
(b)固体表面を、T細胞のサンプルおよび試験薬剤に接触させる段階;
(c)以下に適した条件下で、細胞のサンプルを培養する段階:
(i)第一サイトカインおよび任意で第二サイトカインの放出;ならびに
(ii)第一サイトカインの第一結合タンパク質への結合および任意で第二サイトカインの第二結合タンパク質への結合;ならびに
(d)第一サイトカインが第一結合タンパク質に結合しているかどうか、および任意で第二サイトカインが第二結合タンパク質に結合しているかどうかを判定し、それによって試験薬剤が免疫調節性活性を有するかどうかを判定する段階。
本発明の方法において、細胞のサンプルは、第一、第二、およびさらなる検体の一つまたは複数の検出を高める第二薬剤に接触させられてもよい。第二薬剤は、段階(b)の間に溶液中に添加され得る、または固体表面上に固定され得る。第二薬剤が表面上に固定される場合、第二薬剤は、第一および任意で第二およびさらなる結合タンパク質が固定される固体表面全体にわたって存在し得る。または、第二薬剤は、結合タンパク質を含まない基底材の一部上に、好ましくは別個の位置に、存在し得る。
本発明は、一つまたは複数の検体のサンプルにおける、細胞による産生を検出することに適した製品も提供し、製品は、以下を含むウェルを含む:
(i)第一検体に特異的に結合する第一結合タンパク質;
(ii)任意で、第二検体に特異的に結合する第二結合タンパク質;
(iii)第一検体および/または第二検体の産生を誘導するまたは阻害することが可能な第一薬剤;ならびに
(iv)任意で、第一および/または第二検体の検出を高める第二薬剤、
ここで、第一結合タンパク質および任意で第二結合タンパク質が、ウェル内の一つまたは複数の別個の位置に固定され、かつ第一薬剤および任意で第二薬剤が、ウェル内に固定される。
本発明は、本発明の方法を実施するためのキットも提供し、キットは、本発明に係る製品、ウェルの表面への第一検体ならびに任意で第二およびさらなる検体の結合を検出する手法を含む。
本発明の方法は、診断的応用と同様に調査状況において使用され得る。本発明の方法は、ELISpotアッセイ法の任意の公知の応用において使用され得る。本発明の方法は、特異的免疫反応を調べるための調査、例えば、ワクチン研究において、特に使用され得る。本発明の方法は、様々な感染症、アレルゲン、腫瘍抗原、または自己免疫標的へのT細胞の反応を検出することを目的とする診断的アッセイ法において使用され得る。
アッセイ法の特異性を試験するために、図1に示されるように、試験アッセイプレート(96ウェルELISpot)が製造された。4つの異なる抗サイトカイン捕獲抗体、αIFN-γ、αIL-2、αIL-10、およびαIL-13が、図1に示されるパターンで、PVDFプレート上にスポットされた(4 nl/スポット)。
PBMC(180000/ウェル)は、実施例1において記載されるように調製されたPVDFプレートにおいて、PPD(マイコバクテリウムに由来する精製タンパク質)、CD8反応性ウイルスペプチドのプール、インフルエンザペプチド(インフルエンザウイルスに由来する単一ペプチド)、または培地単体の存在下で、44時間37℃で培養された。インキュベーション後、細胞は洗い流され、ビオチン結合検出抗体、SA-ALP、および基質が、実施例1において記載されるように添加された。ELISpotは、参照として、並行して行なわれた。
Claims (18)
- 一つまたは複数の検体のサンプルにおける、細胞による産生を検出するための方法であって、以下の段階を含む方法:
(a)(i)第一検体に特異的に結合する第一結合タンパク質、および
(ii)任意で、第二検体に特異的に結合する第二結合タンパク質
を提供し、該第一結合タンパク質および任意で該第二結合タンパク質が、ウェル内の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される段階;
(b)細胞のサンプルを該ウェルに導入する段階;
(c)以下に適した条件下で、該細胞のサンプルを培養する段階:
(i)該細胞による該第一検体および任意で該第二検体および任意で該一つまたは複数のさらなる検体の放出;ならびに
(ii)該第一検体の該第一結合タンパク質への結合および任意で該第二検体の該第二結合タンパク質への結合;ならびに
(d)該第一検体が該第一結合タンパク質に結合しているかどうか、および該第二検体が該第二結合タンパク質に結合しているかどうかを判定し、それによって一つまたは複数の検体の細胞のサンプルによる産生を検出する段階。 - 段階(a)が、固体表面上の一つまたは複数の別個の位置に固定される一つまたは複数のさらなる検体に特異的に結合する一つまたは複数のさらなる結合タンパク質を提供することをさらに含み;段階(c)において、細胞が、該細胞による該一つまたは複数のさらなる検体の放出、および該一つまたは複数のさらなる検体の該一つまたは複数のさらなる結合タンパク質への結合に適した条件下で培養され;ならびに段階(d)が、該一つまたは複数のさらなる検体が該一つまたは複数のさらなる結合タンパク質に結合しているかどうかを判定することをさらに含む、請求項1記載の方法。
- 別個の位置がスポットである、請求項1または2記載の方法。
- スポットがグリッドとして配置される、請求項3記載の方法。
- 第一、第二、およびさらなる結合タンパク質の一つまたは複数が抗体である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 段階(c)において、細胞が、第一検体、第二検体、および/または一つもしくは複数のさらなる検体の産生を誘導するまたは阻害することが可能な第一薬剤の存在下で培養される、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 段階(c)において、細胞が、第一、第二、またはさらなる検体の一つまたは複数の検出を高める第二薬剤の存在下で培養される、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 第二薬剤が:
(i)第一薬剤に反応した、第一検体、第二検体、および/または一つもしくは複数のさらなる検体の産生を増強する;
(ii)該第一検体、該第二検体、および/または該一つもしくは複数のさらなる検体の産生を抑制するシグナルを阻害する;または
(iii)該第一検体、該第二検体、および/または該一つもしくは複数のさらなる検体の自然な産生を刺激するシグナルを阻害する、
請求項7記載の方法。 - 第一薬剤および/または第二薬剤がウェルに固定される、請求項6〜8のいずれか一項記載の方法。
- 第一薬剤および/または第二薬剤が、ウェルの底面上に均一に固定される、請求項9記載の方法。
- 第一薬剤および/または第二薬剤が、ウェル内の一つまたは複数の別個の位置にそれぞれ固定される、請求項9記載の方法。
- 第一薬剤および/または第二薬剤が溶液中に添加される、請求項6〜8のいずれか一項記載の方法。
- 細胞のサンプルが白血球を含む、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 第一検体、第二検体、および一つもしくは複数のさらなる検体の一つまたは複数がサイトカインである、請求項13記載の方法。
- 細胞のサンプルが、癌細胞、幹細胞、または単離神経細胞を含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
- 細胞のサンプルが、感染物質に曝露されている細胞を含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
- 感染物質がウイルスである、請求項16記載の方法。
- 第一検体、第二検体、および一つもしくは複数のさらなる検体の一つまたは複数が、ウイルス粒子またはタンパク質である、請求項17記載の方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015527588A (ja) * | 2012-08-24 | 2015-09-17 | イェール ユニバーシティーYale University | ハイスループット多重検出用システム、装置及び方法 |
JP2017510810A (ja) * | 2014-04-09 | 2017-04-13 | バイオ−ラッド・イノベーションズBio−Rad Innovations | 分析方法でシグナル検出を改善する吸収性粒子の使用 |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0409775D0 (en) | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Mabtech Ab | Assay |
US7981606B2 (en) * | 2005-12-21 | 2011-07-19 | Roche Molecular Systems, Inc. | Control for nucleic acid testing |
DE102007052517A1 (de) * | 2007-10-29 | 2009-04-30 | Autoimmun Diagnostika Gmbh | ELISPOT-Verfahren mit zwei Filtersystemen |
WO2013078452A1 (en) | 2011-11-22 | 2013-05-30 | University Of Maryland, Baltimore | Plasmonic Substrates for Metal-Enhanced Fluorescence Based Sensing, Imaging and Assays |
FR2983213B1 (fr) * | 2011-11-30 | 2015-03-06 | Commissariat Energie Atomique | Procede de mesure en temps reel des secretions individuelles d'une cellule |
CN102998441A (zh) * | 2012-11-20 | 2013-03-27 | 哈德逊(天津)生物技术有限责任公司 | 快速检测诱导性多潜能干细胞的试剂盒 |
EP2948770B1 (en) * | 2013-01-23 | 2020-11-18 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Number of il4 and/or il3 secreting t-cells as a biomarker for allergic diseases |
EP3441109A1 (en) | 2013-05-30 | 2019-02-13 | Graham H. Creasey | Flexible dermal patch for a topical nerve stimulator system |
US11229789B2 (en) | 2013-05-30 | 2022-01-25 | Neurostim Oab, Inc. | Neuro activator with controller |
US11077301B2 (en) | 2015-02-21 | 2021-08-03 | NeurostimOAB, Inc. | Topical nerve stimulator and sensor for bladder control |
JP2021510608A (ja) | 2017-11-07 | 2021-04-30 | ニューロスティム オーエービー インコーポレイテッド | 適応回路を有する非侵襲性神経アクティベーター |
EP3591406A1 (de) * | 2018-07-06 | 2020-01-08 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG | Vorrichtung und verfahren zur antikörperdetektion |
JP2021535359A (ja) * | 2018-08-30 | 2021-12-16 | エッセン インストゥルメンツ,インコーポレイテッド ディー/ビー/エー エッセン バイオサイエンス,インコーポレイテッド | 単一サンプル中の低濃度及び高濃度タンパク質の濃度を決定する方法 |
CN114126704A (zh) | 2019-06-26 | 2022-03-01 | 神经科学技术有限责任公司 | 具有自适应电路的非侵入性神经激活器 |
CN114728161A (zh) | 2019-12-16 | 2022-07-08 | 神经科学技术有限责任公司 | 具有升压电荷输送的非侵入性神经激活器 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06502726A (ja) * | 1991-07-23 | 1994-03-24 | メドジェニクス、ディアニョスティク、ソシエテ、アノニム | 培養細胞による分子のそれらの産生部位におけるインビトロアッセイ |
JP2005521032A (ja) * | 2001-09-10 | 2005-07-14 | メソ スケイル テクノロジーズ,エルエルシー | 1つの試料について複数の測定を実施する方法及び装置 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AR231590A1 (es) | 1981-04-29 | 1984-12-28 | Ciba Geigy Ag | Dispositivo de analisis inmunologico y procedimiento para obtenerlo |
US4591570A (en) | 1983-02-02 | 1986-05-27 | Centocor, Inc. | Matrix of antibody-coated spots for determination of antigens |
GB8803000D0 (en) | 1988-02-10 | 1988-03-09 | Ekins Roger Philip | Determination of ambient concentrations of several analytes |
AU4346989A (en) * | 1988-10-14 | 1990-05-01 | Cecil Czerkinsky | A method for simultaneous detection of different types of antibodies and/or antigens produced by individual cells |
US6410252B1 (en) | 1995-12-22 | 2002-06-25 | Case Western Reserve University | Methods for measuring T cell cytokines |
DE19821289A1 (de) * | 1998-05-13 | 1999-11-18 | Volkmar Schoellhorn | Verfahren zur Bestimmung der Aktivität von menschlichen und tierischen Zellen, insbesondere Blutzellen, und Mikrotiterplatten |
AU760486B2 (en) | 1999-10-13 | 2003-05-15 | Incyte Genomics, Inc. | Multiplex cytokine analysis |
DE60239317D1 (de) | 2001-01-12 | 2011-04-14 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Nukleinsäure mukosale immunisierung |
EP1241476A1 (en) | 2001-03-12 | 2002-09-18 | Mabtech AB | Diagnosis of metal allergy through cytokine release by T-cells in vitro |
AU2002342299A1 (en) | 2001-10-31 | 2003-05-12 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of | Generation of use of tc1 and tc2 cells |
US20040049351A1 (en) | 2002-08-28 | 2004-03-11 | Matson Robert S. | Immunosorbent assay in microarray format |
US20060079461A1 (en) * | 2003-12-24 | 2006-04-13 | Scios, Inc. | Treatment of multiple myeloma by inhibition of p38 MAP kinase |
GB0409775D0 (en) * | 2004-04-30 | 2004-06-09 | Mabtech Ab | Assay |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06502726A (ja) * | 1991-07-23 | 1994-03-24 | メドジェニクス、ディアニョスティク、ソシエテ、アノニム | 培養細胞による分子のそれらの産生部位におけるインビトロアッセイ |
JP2005521032A (ja) * | 2001-09-10 | 2005-07-14 | メソ スケイル テクノロジーズ,エルエルシー | 1つの試料について複数の測定を実施する方法及び装置 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6010062829; OKAMOTO,Y. et al.: 'Development of a dual color enzyme-linked immunospot assay for simultaneous detection of murine T he' Immunopharmacology Vol.39, No.2, 1998, p.107-116 * |
JPN6010062830; CROTTY,S. et al.: 'Tracking human antigen-specific memory B cells: a sensitive and generalized ELISPOT system' J.Immunol.Methods Vol.286, No.1/2, 2004, p.111-122 * |
JPN6010062831; 岡本能弘 他: '慢性関節リウマチの発症とサイトカインバランス' 薬学雑誌 Vol.121, No.2, 2001, p.131-138 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015527588A (ja) * | 2012-08-24 | 2015-09-17 | イェール ユニバーシティーYale University | ハイスループット多重検出用システム、装置及び方法 |
JP2017510810A (ja) * | 2014-04-09 | 2017-04-13 | バイオ−ラッド・イノベーションズBio−Rad Innovations | 分析方法でシグナル検出を改善する吸収性粒子の使用 |
US11268955B2 (en) | 2014-04-09 | 2022-03-08 | Bio-Rad Europe Gmbh | Use of absorbent particles to improve signal detection in an analysis method |
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