JP2007535668A5 - - Google Patents
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Claims (27)
- サンプルにおける細胞による検体の産生を検出する方法であって、以下の段階を含む方法:
(i)該検体に結合することが可能な抗体および該検体の検出を高めることが可能な第一薬剤を提供する段階であって、該抗体および該第一薬剤が、同じ支持体上に固定される段階;
(ii)該抗体および該薬剤を細胞のサンプルに接触させる段階;ならびに
(iii)該検体の該抗体への結合を検出し、それによってサンプルにおける細胞による検体の産生を検出する段階。 - 支持体が、抗体および第一薬剤によって均一にコーティングされる、請求項1記載の方法。
- 抗体が、支持体上の一つまたは複数の別個の位置に固定され、かつ第一薬剤が、支持体上に均一にまたは該支持体上の一つもしくは複数の別個の位置に固定される、請求項1記載の方法。
- 二つまたはそれ以上の抗体が、支持体上に固定される、請求項3記載の方法。
- 細胞が、検体の分泌を刺激するまたは阻害することが可能な第二薬剤に接触させられている、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 段階(ii)が、細胞のサンプルを、検体の分泌を刺激するまたは阻害することが可能な第二薬剤に接触させることをさらに含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の方法。
- 第二薬剤が支持体上に固定される、請求項6記載の方法。
- 第一薬剤が検体の分泌を高めることが可能である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 第一薬剤が、第二薬剤に反応した検体の分泌を増強することが可能である、請求項5〜8のいずれか一項記載の方法。
- 第一薬剤が、検体の分泌を高めるために抑制シグナルを阻害することが可能である、請求項8または9記載の方法。
- 第一薬剤が、検体の自然な分泌を低減するために刺激シグナルを阻害することが可能である、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
- 検体の検出を高めることが可能な少なくとも二つの異なる第一薬剤が、支持体上に固定される、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 細胞がT細胞である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 検体がサイトカインである、請求項13記載の方法。
- 第一薬剤が以下のものである、請求項13または14記載の方法:
(a)ポリクローナルT細胞活性化因子;
(b)共刺激剤に対する抗体または組換えリガンド;
(c)サイトカイン;
(d)IL-10またはTGF-βである免疫刺激性シグナルを阻害することが可能である薬剤;
(e)細胞外マトリクスタンパク質;または
(f)ウイルス活性化因子。 - (a)ポリクローナルT細胞活性化因子が、CD3抗体またはPHAもしくはConAなどのレクチンである;
(b)共刺激剤が、CD28、ICOS、もしくはCD40である;
(c)サイトカインが、IL-2、IL-15、IL-4、もしくはIL-12である;
(d)細胞外マトリクスタンパク質がフィブロネクチンもしくはラミニンである;または
(e)ウイルス活性化因子がCD3抗体もしくはPHAである、
請求項15記載の方法。 - 細胞がウイルス感染細胞である、請求項1〜11のいずれか一項記載の方法。
- 検体がウイルス粒子またはタンパク質である、請求項17記載の方法。
- ウイルスがHIV、EBV、またはCMVである、請求項17または18記載の方法。
- 検体を分泌する細胞の数を決定することをさらに含む、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 検体に対して特異的な抗体および該検体を分泌する細胞の検出を高めることが可能な第一薬剤を含み、該抗体および該第一薬剤が同じ表面上に固定される、請求項1〜20のいずれか一項記載の方法における使用のためのアッセイプレート。
- 第一薬剤が、請求項8〜11、15または16のいずれか一項において定義されるものである、請求項21記載のアッセイプレート。
- 表面上に固定される、検体の分泌を刺激するまたは分泌することが可能な第二薬剤をさらに含む、請求項21または22記載のアッセイプレート。
- 表面が、PVDFまたはニトロセルロース膜である、請求項21〜23のいずれか一項記載のアッセイプレート。
- 一つまたは複数のウェルを含み、各々のウェルが、50〜100ngのタンパク質結合能力を有する、請求項21〜24のいずれか一項記載のアッセイプレート。
- 請求項21〜25のいずれか一項記載のアッセイプレートおよび検出手法を含む、キット。
- 免疫反応をモニターするため、インビトロでウイルス感染を診断するため、または抗ウイルス薬を同定するための、請求項21〜25のいずれか一項記載のアッセイプレートまたは請求項26記載のキットの使用。
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