JP2007527408A - ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビター - Google Patents

Abstract

式（Ｉ）の、新しいクラスのホスホイノシチド依存性キナーゼ−１（ＰＤＫ−１）インヒビター；ここで、Ｘはアルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；Ａｒはフェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択されるアリールラジカルであり；そしてここで、Ａｒはハロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ハロアルキル、アジド、Ｃ_１〜Ｃ_４アジドアルキル、アリール、アキルアリール、ハロアリール、ハロアルキルアリール、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される１個以上のラジカルで必要に応じて置換され；そしてＲはニトリル、アセトニトリル、エチルニトリル、プロピルニトリル、カルボキサミド、アミジン、テトラゾール、オキシム、ヒドラゾン、アセトアミジン、アミノアセタミド、グアニジン、および尿素からなる群より選択される。

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、米国仮特許出願番号６０／５０８，６１９（発明の名称：「ＰＤＫ−１／Ａｋｔ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ」；２００３年１０月３日出願）および米国仮特許出願番号６０／５０９，８１４（発明の名称：「ＰＤＫ−１／Ａｋｔ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ」；２００３年１０月８日出願）に対する優先権を主張する；これらの出願の各々の全体は、本明細書において参考として援用される。

（連邦政府資金による研究または開発）
本発明は、少なくとも一部、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｇｒａｎｔ ＣＡ９４８２９およびＡｒｍｙ Ｇｒａｎｔ ＤＡＭＤ １７−０２−１−０１１７のもとでの、連邦政府支援によってなされた。当該連邦政府は、本発明において一定の権利を有し得る。

（発明の背景）
ホスホイノシチド（ＰＩ）３−キナーゼ／ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達カスケードは、細胞の増殖および生存を調節する、多血に対するレセプターチロシンキナーゼおよびサイトカイン媒介性経路の収束点を表し、そして細胞の生存を維持する多くの細胞外の栄養因子の能力を説明するフレームワークを提供する。構成的成長因子―レセプター活性および／またはＰＴＥＮ模倣（ｉｍｉｔａｔｉｏｎ）に起因するこのシグナル伝達カスケードの調節異常によって、Ａｋｔがアップレグレーションを引き起こして、次いで腫瘍の浸潤性、血管形成、および進行を促進する。従って、ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビターは、有用な化学療法剤または化学予防剤の開発に関係すると言い換えられる。潜在的ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビターである、新しい化合物を開発する必要性が存在する。さらに、ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達阻害に基づく化学療法剤および化学予防剤を開発する必要性が存在する。

（発明の要旨）
式Ｉの化合物

が提供され、
ここで、Ｘはアルキルおよびハロアルキルから選択され；Ａｒはフェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；Ｒは、

から選択される。式Ｉはまた、その薬学的に受容可能な塩、代謝産物またはそれらのプロドラッグを含む。
（発明の詳細な説明）
新しいクラスのＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビターが提供される。本明細書で記述する化合物は、癌細胞のような所望されない増殖細胞におけるアポトーシスを誘導するのに有用である。本明細書で記述する化合物はまた、創傷治癒の促進および瘢痕の予防に有用である。本明細書で記述する化合物はさらに、再狭窄を予防するのに適用される。本明細書で記述する化合物はさらに、臓器移植に適用される。

本明細書で記述する化合物は、一般式Ｉ

で示され得、
ここで、Ｘはアルキルおよびハロアルキルから選択され；
Ａｒは、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；Ｒは、

からなる群より選択さる。別な方法で記述すると、Ｒは、ニトリル、アセトニトリル、エチルニトリル、プロピルニトリル、カルボキシアミド、アミジン、ピラゾール、オキシム、ヒドラゾン、アセトアミジン、アセタミド、グアニジン、および尿素から選択される。式Ｉはまた、それらの薬学的に受容可能な塩、代謝産物、およびそれらのプロドラッグを含む。

いくつかの実施形態では、ＸはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルである。いくつかの実施形態では、ＸはＣＦ_３である。いくつかの実施形態では、Ａｒは、任意の置換し得る位置で、ハロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ハロアルキル、アジド、Ｃ_１〜Ｃ_４アジドアルキル、アリール、アキルアリール（ａｋｙｌａｒｙｌ）、ハロアリール、ハロアルキルアリール、およびそれらの組み合わせのような、ただしこれらに限定されない１個以上のラジカルで置換され得る。いくつかの実施形態では、Ａｒは２−ナフチル、４−ビフェニル、９−アントリル、２−フルオレニル、４−アジドフェニル、４−アジドメチルフェニル、４−（２−アジドエチル）フェニル、４−（３−アジドプロピル）フェニル、４−（４−アジドブチル）フェニル、４−（４−アジドフェニル）フェニル、４−（４−アジドメチルフェニル）フェニル、４−メチルフェニル、４−エチルフェニル、４−プロピルフェニル、４−ブチルフェニル、４−（２−ブロモエチル）フェニル、４−（３−ブロモプロピル）フェニル、４−（４−ブロモブチル）フェニル、４−（トリフルオロメチル）フェニル、４−（４−メチルフェニル）フェニル、４−（４−ブロモメチルフェニル）フェニル、４−（４−ブチルフェニル）フェニル、４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）フェニル、２−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２，５−ジメチルフェニル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメチルフェニル、４−（４−クロロフェニル）フェニル、４−（３，５−ジクロロフェニル）フェニル、４−（２，３−ジクロロフェニル）フェニル、４−（３，５−ジメチルフェニル）フェニル、４−（２，４，５−トリクロロフェニル）フェニル、４−（４−トリフルオロメチルフェニル）フェニル、２−フェナントレニル、３−インドリル、２−ピロリル、および４−（ベンジル）フェニルから選択される。いくつかの実施形態では、Ａｒは４−（２−ブロモエチル）フェニル、４−（３−ブロモプロピル）フェニル、４−（２−アジドエチル）フェニル、４−（３−アジドプロピル）フェニル、４−ブチルフェニル、４−ｔ−ブチルフェニル、２−ナフタレニル、３−インドリル、４−ビフェニルイル、４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、３’，５’−ジクロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、２’，３’−ジクロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―メチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―トリフルオロメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ブロモメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、３’，５’−ジメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ブチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ｔｅｒｔ−ブチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４−（フェニルメチル）フェニル、９Ｈ−フルオレン−２−イル、９−アントラセニル、２−フェナントレニル、９−フェナントレニルから選択される。いくつかの実施形態では、Ａｒは２−フェナントレニルである。いくつかの実施形態では、Ｒはアミノアセタミドおよびグアニジンから選択される。

本明細書で記述される別の実施形態は、式ＩＩ

の実施形態であり、
ここでＸはアルキルおよびハロアルキルから選択され；Ｒは

から選択され、または別の方法で記述すると、Ｒは、ニトリル、アセトニトリル、エチルニトリル、プロピルニトリル、カルボキシアミド、アミジン、ピラゾール、オキシム、ヒドラゾン、アセトアミジン、アセタミド、グアニジン、および尿素から選択される。いくつかの実施形態では、ＸはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルであり、そしていくつかの実施形態では、ＸはＣＦ_３である。いくつかの実施形態では、Ｒはアミノアセタミドまたはグアニジンである。式ＩＩはまた、それらの薬学的に受容可能な塩、それらの代謝産物、およびそれらのプロドラッグを含む。

本明細書で記述される別の実施形態は、式ＩＩＩ

の実施形態であり、
ここでＲは

からなる群から選択され、または別の方法で記述すると、Ｒは、ニトリル、アセトニトリル、エチルニトリル、プロピルニトリル、カルボキシアミド、アミジン、ピラゾール、オキシム、ヒドラゾン、アセトアミジン、アセタミド、グアニジン、および尿素から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒはアミノアセタミドまたはグアニジンである。式ＩＩＩはまた、それらの薬学的に受容可能な塩、それらの代謝産物、およびそれらのプロドラッグを含む。

式ＩＩＩのいくつかのさらなる化合物はＲに関して次の基を含む：

別の実施形態では、上記化合物は式ＩＶまたはＶの化合物である：

式Ｉ〜Ｖの化合物を使用して、処置の必要な被験体において所望しない増殖細胞におけるアポトーシスを誘導する方法もまた提供される。上記方法は、治療有効量の式Ｉ〜Ｖの化合物またはその誘導体、代謝産物、もしくは薬学的に受容可能な塩を用いてそのような処置を必要とする上記被験体を処置する工程を包含する。

本明細書で記述する化合物および方法は、癌の発生を処置、阻止、または遅延するために有用であるが、これらに限定されない。上記化合物および方法はまた、前癌および所望しない細胞増殖についての他の発症を処置するのに有用である。式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶもしくはＶの化合物、またはそれらの組み合わせは、所望しない細胞増殖により特徴付けられた障害と診断された、または所望しない細胞増殖により特徴付けられた障害を発症する危険のある被験体に投与される。上記化合物および方法は、癌（白血病、黒色腫、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系の癌、卵巣癌、乳癌、腎臓癌、および前立腺癌が挙げられるがこれらに限定されない）を処置するために有用である。さらに、それらは、前癌を有する個体およびこれらの障害を受けやすいまたはこれらの障害に対する遺伝的な素因を有する個体において、これらの癌の成長を遅くするのに有用である。

上記化合物は、所望されない急速に増殖する細胞におけるアポトーシスを誘導する方法において有用であり、この方法は、所望されない急速に増殖する細胞に、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、またはＶの化合物の治療有効量を導入する工程を包含する。上記癌細胞は、白血病、黒色腫、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系の癌、卵巣癌、乳癌、腎臓癌、および前立腺癌からなる群より選択され得る。

上記化合物はさらに、血管形成術またはステント法を受けた被験体において再狭窄を予防するのに有用である。この予防は、血管形成術またはステント法を受けた被験体に式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、もしくはＶの化合物、またはこれらの組み合わせ、またはこれらの薬学的に受容可能な塩および／もしくは代謝産物を投与する工程を包含する。

本明細書で使われる以下の用語は、次の定義を含むが、これらに限定されない。

用語「ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビター」は、特定の化合物または化合物の組み合わせが、インビボであるかインビトロであるかに関わらず、ブランクに対して測定したとき、ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達経路を崩壊できること、を意味する。一つの方法が以下の実施例で記述されるが、現在公知であるかまたは今後開発される他の方法もまた使用され得る。

本明細書で使用される用語「処置」は、状態の予防もしくは管理、および／または状態の治療（ｒｅｍｅｄｙ）を提供するための、本明細書で記述される１種以上の化合物の被験体への投与および／または適用を包含する。本開示の目的のための「処置」は、治癒を提供し得るが、提供しなくてもよい。むしろ、「処置」は、上記状態の管理の形態であり得る。本明細書で記述される化合物が、癌を含む、所望されない増殖細胞を処置するために使用されるとき、「処置」は、正常細胞への破壊的影響が最小限な状態での、所望されない増殖細胞の部分的または全体破壊を含む。癌を含む、所望されない急速に増殖する細胞の処置の細胞レベルでの所望する機序は、アポトーシスである。

本明細書で使用される用語「予防」は、全体として、臨床的に明白な所望されない細胞増殖の開始を予防することか、もしくは遅くすること、または危険を有する個体における所望されない急速な細胞増殖の前臨床的に明白な段階の開始を予防することかもしくは遅くすること、のいずれかを含む。この定義にはまた、悪性細胞の転移の予防もしくは遅延、または悪性細胞の進行を抑止することもしくは逆転することを含むことが意図される。これは、前癌および癌を発症する危険のある被験体の予防的な処置を含む。この定義にはまた、血管形成術またはステント法を受けた被験体における再狭窄の予防または減速が含まれる。

用語「治療的に有効な」および「薬学的に有効な」は、本明細書で記述される化合物での処置の間にわたって、疾患の重傷度および発生頻度の改善という目標を達成する、各々の薬剤の量を定めることを意図する。治療的に有効な量または薬学的に有効な量は、当業者によって簡単に決定され得る。

処置のための、用語「被験体」には、所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害と診断されたか、所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害の症状を有するか、または所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害の危険がある、任意のヒトまたは動物が含まれる。そのような障害として癌および前癌が挙げられるが、これらに限定されない。予防の方法に関して、上記被験体は任意のヒト被験体または動物被験体である。説明すると、予防の目的に関して、被験体は、癌のような所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害の危険にあるか、または癌のような所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害を遺伝的に獲得しやすいヒト被験体であり得る。上記被験体は、発癌因子への暴露、所望されない急速な細胞増殖により特徴付けられる障害を遺伝的に受けやすいことなどに起因して危険を有し得る。ヒトの処置のために有用である以外に、本明細書で記述される化合物はまた、哺乳動物の獣医学的処置のために有用である。これらの哺乳動物として、コンパニオン動物および家畜、例えば、これらに限定されないが、犬、猫、馬、牛、羊、および豚が挙げられる。

（投薬量および投与）
動物による予備試験により、これらの化合物は経口的に吸収され得、ＴＧＩより数倍高い平均血清濃度を生じ、そしてより重要なことに１ヶ月間の毎日の経口投与後、動物に対しほとんど毒性を生じないことが分かった（データは示されない）。

本発明の化合物は、経口投与用に錠剤、カプセル、またはエリキシルのような適切な医薬品、または非経口投与用に無菌溶液または無菌懸濁液に処方され得る。本明細書で記述される治療剤は、当該分野で周知の技術および手順を使用して医薬組成物に処方され得る。

本明細書で記述されるＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビターは、生理学的に受容可能なビヒクル、キャリア、賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香味料など、受容された薬学的実施により要求されるような単位服用形態で調合される。それらの組成物または製剤における活性物質の量は、示された範囲における適切な投薬量が得られるような量である。いくつかの実施形態では、上記投薬量は、ＰＤＫ−１／Ａｆｔシグナル伝達インヒビターで０．１〜１０００ｍｇの間であり得る。いくつかの実施形態では、上記組成物は、単位投薬形態で処方され得、各々の投薬量は１〜５００ｍｇである。他の実施形態では、上記投薬量は、活性成分の１０〜１００ｍｇであり得る。用語「単位投薬形態」は、ヒト被験体および他の哺乳動物に対する単位投薬として適切な物理的に不連続な単位をいう。各単位は、適切な薬学的賦形剤と関連して、所望の治療効果を生み出すように計算された活性物質の所定の量を含む。上記投薬量は、多くの要因、例えば、被験体の年齢およびサイズ、処置されている状態、状態の重傷度、および当業者に公知の他の要因に依存する。それらの要因を考慮して、投薬量は、当業者により決定され得る。

組成物を調製するために、本発明の方法において使用される治療剤の１種以上が適切な薬学的に受容可能なキャリアと混合される。上記治療剤の混合または添加後、得られた混合物は溶液、懸濁液、エマルジョンなどであり得る。これらは、当業者に公知の方法に準じて調製され得る。得られた混合物の形態は、多くの要因（意図した投与様式および選択されたキャリアまたはビヒクルにおける化合物の溶解度が挙げられる）に依存する。効果的な濃度は、癌細胞などの所望されない細胞におけるアポトーシスを誘導するのに十分な濃度であり、経験的に決定され得る。

本発明の治療剤の投与に適切な薬学的キャリアまたはビヒクルには、投与の具体的な様式に適した任意のそのようなキャリアが含まれる。さらに、活性物質はまた、所望の作用を損なうことのない他の活性物質と混合され得るか、または所望の作用を補充されるか、もしくは別の作用を有する物質と混合され得る。本発明の治療剤は、上記組成物中の単独の薬学的活性成分として処方され得るか、または他の活性成分と併用され得る。塩またはプロドラッグのような、本発明の治療剤の誘導体もまた、効果的な薬学的組成物を処方するのに使用され得る。

本発明の治療剤は、徐放性処方物またはコーティング剤のような、これらの治療剤を身体からの急速な除去に対して保護する、キャリアと共に調製され得る。そのようなキャリアには、マイクロカプセルにした伝送システムのような制御放出処方物が挙げられるが、これらに限定されない。上記活性化合物は、処置されている患者における所望しない副作用なしで、治療に有用な効果を発揮するに十分な量で、薬学的に受容可能なキャリアに含まれ得る。

上記活性成分は一度に投与され得るか、または時間間隔を空けて投与される、何回かにわたるより少ない用量に分割され得る。正確な投薬量および処置期間は、処置されている疾患の関数であり、公知の試験プロトコルを使用することによるか、またはインビボまたはインビトロでの試験データから推定により、経験的に決定され得ることが、理解される。濃度および投薬量の値はまた、軽減される状態の重傷度に伴って変化し得ることを、銘記すべきである。任意の特定の被験体の場合、特定の投薬量レジメンは、個体の必要性および上記組成物を投与するまたは管理する人の専門的判断に従って、長期にわたって調節されるべきであること、そして本明細書に述べられる濃度範囲は、例示のみであって、特許請求された組成物の範囲または実施を限定することを意図されないこと、をさらに理解しているものとする。

経口用の組成物は、一般に、不活性な希釈剤または食べられるキャリアを含み、そして錠剤に圧縮され得るかまたはゼラチンカプセルに包み込まれ得る。経口治療投与の目的の場合、単一の活性化合物または複数の活性化合物が賦形剤と共に組み込まれ得、そして錠剤、カプセル、トローチの形態で使用され得る。薬学的に適合性のある結合剤およびアジュバント物質は、上記組成物の一部として含まれ得る。

錠剤、丸薬、カプセル、トローチなどは、同様な性質の次の成分または化合物のいずれかを含み得る：結合剤、例えば、トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチ、またはゼラチン、これに限定されない；賦形剤、例えば、微結晶性セルロース、でんぷん、またはラクトース；分解剤、例えば、アルギン酸およびコーンスターチ、これに限定されない；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、これに限定されない；流動促進剤、例えば、コロイド状二酸化ケイ素、これに限定されない；甘味剤、例えば、スクロースまたはサッカリン；および香料添加剤、例えば、ペパーミント、サリチル酸メチルまたはフルーツ香味料。

式Ｉ〜Ｖの化合物は、多くの異なった機序によって細胞死を誘発し得るが、ほとんどの実施形態では、式Ｉ〜Ｖの化合物は、所望しない増殖細胞におけるアポトーシスを誘導できる。用語「アポトーシス」は、プログラム化した細胞死の過程を意味する。全ての人で、古いまたは傷ついた何十万の細胞が、アポトーシスの過程により毎日死滅し、そして置き換えられ、身体における生存細胞を増減させながら一定数を維持する。古い細胞および傷ついた細胞は、その標的細胞が自己破壊するため、細胞表面で誘発されたシグナルに応答して死亡する。アポトーシスは、腫れ、赤み、痛みおよび圧痛を引き起こす壊死のような他の細胞死の機序とは区別される。アポトーシスはそのような応答を刺激しない。アポトーシスでは、細胞は縮み、破片に崩壊し、内容物は炎症を誘導しない方法によって静かに取り除かれる。これらの理由で、癌細胞のように急激に増殖している細胞においては、壊死よりアポトーシスを誘導する方がいっそう望ましい。しかしながら、いくつかの癌細胞での突然変異によって、これらの細胞がアポトーシスへの抵抗性を与える。たとえ突然変異のために癌細胞がアポトーシスに抵抗性であっても、式Ｉ〜Ｖの化合物は、その癌細胞においてアポトーシスを誘導することが見出された。アポトーシスは、顕微鏡観察のような方法で他の処理機序と区別され得る。これらの方法は、当該分野で公知である。

用語「増殖性細胞」、「増殖細胞」、「急速に増殖する細胞」、「所望されない増殖細胞」、「所望されない（ｕｎｄｅｓｉｒａｂｌｅ）急速に増殖する細胞」、「所望されない（ｕｎｗａｎｔｅｄ）急速に増殖する細胞」、などは、被験体において、癌細胞、前癌細胞、および他の所望されない、急速に分裂する細胞を意味する。

（材料および方法）
（材料）
４−［５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼンスルホンアミドを、Ａｍｅｒｉｓｏｕｒｃｅ Ｈｅａｌｔｈ（Ｍａｌｖｅｒｎ、ＰＡ）から得たカプセルから酢酸エチルで抽出し、次いで、酢酸エチルおよびヘキサンの混合物から再結晶を行った。Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡ法キットを、Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（Ｍａｎｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。Ａｋｔおよびホスホ−^４７３ Ｓｅｒ Ａｋｔに対するウサギポリクローナル抗体をＣｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ （Ｂｅｖｅｒｌｙ、ＭＡ）から得た。マウスモノクローナル抗ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）抗体を、Ｐｈａｍｉｎｇｅｎ（Ｓａｒｉ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）から得た。ＰＤＫ−１キナーゼアッセイキットをＵｐｓｔａｔｅ（Ｌａｋｅ Ｐｌａｃｉｄ、ＮＹ）から購入した。他の化学物質および生化学物質を、他に述べない限り、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から得た。核磁気共鳴スペクトル（^１Ｈ ＮＭＲ）をＢｒｕｋｅｒ ２５０ ＭＨｚで測定した。化学シフト（δ）は、他に述べない限り、ＣＤＣ_１３を溶媒として用いＴＭＳピークに対する百万分率（ｐｐｍ）で報告する。高分解能エレクトロスプレーイオン化質量分析を、３−Ｔｅｓｌａ Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＦＴＭＳ−２０００フーリエ変換質量分析計で行った。

（化学物質の合成）
表１に列挙した化合物を、以下に示すように調製し、そして試験した。化学物質名、プロトン核磁気共鳴（^１Ｈ ＮＭＲ）および高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）データを以下にまとめる。化合物１〜３６を合成するのに使用した手順を以下の実施例に記述する。

（表１ 命名、^１Ｈ ＮＭＲ（プロトン核磁気共鳴）、および化合物１〜３６のＨＲＭＳ（高分解能質量分析）による特徴付け）

（細胞培養）
ＰＣ−３（ｐ５３−／−）ヒトアンドロゲン非反応性前立腺癌細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ、 ＶＡ）から譲渡された。細胞を、５％ ＣＯ_２を含む、加湿したインキュベーター中３７℃で、１０％ ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ｇｉｂｃｏ）を補充したＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ、Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）で培養した。

（細胞生存度分析）
４−［５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼンスルホンアミドおよびその誘導体のＰＣ−３細胞生存度に対する効果を、ＭＴＴ｛［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド］｝アッセイを使用することによって、６個の反復で評価した。細胞を、９６−ウェル、平底プレート中の１０％ ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ １６４０培地で２４時間培養し、１％ 血清含有ＲＰＭＩ １６４０培地中、異なった時間間隔で、ＤＭＳＯ（最終濃度≦０．１％）中に溶解した種々の濃度の化合物１〜３６に暴露した。コントロールは、薬物で処理した細胞中の濃度に等しい濃度でＤＭＳＯビヒクルを受容した。上記培地を除き、１０％ ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ １６４０培地中で２００μｌの０．５ｍｇ／ｍｌ ＭＴＴで置き換え、そして細胞をＣＯ_２インキュベーターで３７℃で２時間インキュベートした。上清を上記ウェルから除き、上記還元したＭＴＴ染料を２００μＬ／ウェルのＤＭＳＯに溶解した。５７０ｎｍでの吸光度をプレートリーダーで決定した。

（細胞増殖）
ＰＣ−３細胞を、５０，０００細胞／ウェルで６−ウェルプレート中の１０％ ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ−１６４０培地中に播種した。２４時間の付着期間後に、細胞を三連で、１０％ ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ−１６４０培地中の表示された濃度の化合物１〜３６か、またはＤＭＳＯビヒクルで処理した。異なった時間間隔で、トリプシン処理によって細胞を収穫し、そしてＣｏｕｌｔｅｒカウンターモデルＺ１ Ｄ／Ｔ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ、ＣＡ）を使用してその数を数えた。

（アポトーシス分析）
二方法を使用して薬剤誘導性アポトーシス細胞死を判定した。この二方法とは、Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡキット（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ．Ｍａｎｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）によるＤＮＡ断片の検出およびポリ−（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）開裂のウェスタンブロット分析である。ＥＬＩＳＡ法を、その製造業者の手引きに従って行った。これは、誘導されたアポトーシス死後に生成されたモノヌクレオソームまたはオリゴヌクレオソームの形態の細胞質のヒストン結合ＤＮＡ断片の定量決定に基づいている。簡単に言うと、４×１０^５ ＰＣ−３細胞を、処理する前に、Ｔ−２５フラスコで２４時間培養した。細胞を、上記表示した濃度で６〜２４時間、ＤＭＳＯビヒクルで処理するか、または上記試験薬剤で処理し、回収し、２×１０^３ ＰＣ−３細胞に相当する細胞溶解物をＥＬＩＳＡ法で使用した。ＰＡＲＰ開裂アッセイの場合、薬剤で処理した細胞は、処理後４〜８時間で回収し、氷冷したＰＢＳで洗浄し、そして２０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ８、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ_２、１０％ グリセロール、１％ Ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ−４０、０．５％ デオキシコール酸塩、０．１％ ＳＤＳ，１００μＭ ４−（２−アミノエチル）ベンゼンスルホニルフルオリド、１０μｇ／ｍＬ ロイペプチン、および１０μｇ／ｍＬ アプロチニン含有溶解緩衝液に再懸濁した。可溶性細胞溶解物を、５分間の１０，０００ｇでの遠心分離後に回収した。各々の溶解物からの等量タンパク質（６０〜１００μｇ）を８％ ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲルに再溶解した。バンドをニトロセルロース膜に移し、そして抗ＰＡＲＰ抗体を用いる免疫ブロット法により分析した。

（免疫ブロット法）
Ａｋｔおよびホスホ−Ａｋｔのウェスタンブロット分析に関する一般的手順を以下に記述する。細胞をＰＢＳで洗浄し、超音波ソニケーターで５秒間処理したＳＤＳサンプル緩衝液に再懸濁し、そして５分間煮沸した。短期の遠心分離後、可溶性フラクションから等量タンパク質濃縮物を、Ｍｉｎｉｇｅｌ器具上の１０％ ＳＤＳ−ポリアクルルアミドゲルに再溶解し、そして半乾燥移送用セルを使用してニトロセルロース膜に移した。トランスブロットした膜を０．０５％ Ｔｗｅｅｎ ２０含有ＴＢＳ（ＴＢＳＴ）を用いて３回洗浄した。５％の無脂肪乳含有ＴＢＳＴを用いて６０分間ブロックした後、上記膜を、ＴＢＳＴ−５％低脂肪ミルク中に１：１，０００の希釈率で上記一次抗体と共に４℃で１２時間インキュベートし、そしてＴＢＳＴで３回洗浄した。上記膜を、室温で１時間、ヤギ抗ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体（１：１，０００）で探索（ｐｒｏｂｅ）し、そしてＴＢＳＴで３回洗浄した。免疫ブロットを、増強された化学発光により視覚化した。

（ＰＤＫ−１キナーゼ活性）
このインビトロアッセイを、販売元の手引きに従ってＰＤＫ−１キナーゼアッセイキット（Ｕｐｓｔａｔｅ、Ｌａｋｅ Ｐｌａｃｉｄ、ＮＹ）を使用して行った。この無細胞アッセイは、ＤＭＳＯビヒクルまたは上記試験薬剤の存在の下での、下流キナーゼ血清およびグルココルチコイド制御キナーゼ（これは、次に、［γ−^３２］−ＡＴＰを有するＡｋｔ／ＳＧＫ特異ペプチド基質ＲＰＲＡＡＴＦをリン酸エステル化する）を活性化する組換えＰＤＫ−１の能力に基づく。次に、［^３２Ｐ］でリン酸エステル化したペプチド基質を、Ｐ８１ホスホセルロース紙を使用して残基［γ−^３２Ｐ］−ＡＴＰから分離し、０．７５％リン酸を用いる３回の洗浄後シンチレーション計数計で定量した。報告される値は２つの独立した測定値の平均を表す。

（免疫沈降Ａｋｔキナーゼのアッセイ）
Ａｋｔ免疫沈降を、公開されている修正した手順に従って行った。ＰＣ−３細胞を、明示した濃度で２時間、ＤＭＳＯビヒクルまたは上記試験薬剤を用いて処理し、次に５０ｍＭ トリス−ＨＣＩ、ｐＨ７．５、１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＥＧＴＡ、５０ｍＭ フッ化ナトリウム、１０ｍＭ β−グリセロリン酸ナトリウム、０．１％ ２−メルカプトエタノール、０．１ｍＭ フッ化フェニルメチルスルホニル、ならびに１μｇ／ｍＬの各々のアプロチニン、ペプスタチン、およびロイペプチン含有緩衝液Ａに４℃で、１時間で溶解した。細胞溶解物を、１０，０００ｇで５分間遠心分離した。上清を、４℃で６０分間、抗Ａｋｔで処理し、次いでさらに６０分間タンパク質Ｇアガロースビーズで処理した。上記免疫沈降物を使って、上述したＡｋｔ／ＳＧＫ−特異的ペプチド基質ＲＰＲＡＡＴＦを用いて、Ａｋｔキナーゼ活性を分析した。値は、２つの独立した決定値の平均を表す。

（統計分析）
各々の実験を、別に述べない限り、三つ組みで行った。全ての実験を、少なくとも二回別の時期に行った。適切な場合、データを、平均±９５％信頼区間として表した。

２４種の代表的誘導体の構造、ＰＤＫ−１キナーゼ活性を阻害する能力およびＰＣ−３細胞成長を、表２にまとめる。

（表２ ４−［５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼンスルホンアミドおよび化合物３７−６０（１−２４）に関する構造、組換えＰＤＫ−１キナーゼ活性を阻害する能力ならびにＰＣ−３細胞でのアポトーシス死を誘導する能力）

これらの化合物はインドール誘導体４４を除いて、４−［５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼンスルホンアミドに対して改善したＰＤＫ−１阻害活性および抗増殖活性を示した。さらに、これらの化合物は全て、測定可能なＣＯＸ−２阻害活性を示さなかった（データは示してない）。ＰＤＫ−１阻害活性での一般的増加が、上記芳香環のかさ（ｂｕｌｋｉｎｅｓｓ）が増加するにつれ示された；すなわち、三環式芳香環（５７−５９）＞置換ビフェニル（４５−５５）＞置換フェニル（３７−４２）。これらのデータから、上記芳香族系が上記酵素ポケットの大きな疎水性領域に結合していることが示された。上記試験された２４アナローグのうち、化合物５９は表２に報告されたように、ＰＤＫ−１活性の阻害およびＰＣ−３細胞生存度に関して、それぞれ、９μＭおよび５μＭのＩＣ_５０値を示し、最適な誘導体を表した。これらのＩＣ_５０値は、４−［５−（４−メチルフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］ベンゼンスルホンアミドの活性（それぞれ、４８μＭおよび３０μＭ）に対して５〜６倍の改善に相当した。しかし、化合物６０は、ＰＤＫ−１の阻害活性において化合物５９と比較して減少を示した。これは、その三環式芳香環の不都合な配向により強いられた立体障害に起因され得る。

試験された全ての化合物でＰＤＫ−１とＰＣ−３成長阻害能力との間に相関関係が存在した。これは、抗増殖効果に対するＰＤＫ−１阻害の機序の関係を示している。全体として、ＰＣ細胞増殖の阻害に関するＩＣ_５０値は、ＰＤＫ−１阻害のＩＣ_５０値の約半分であった。この矛盾は、Ａｕｇで処理した細胞でのＰＤＫ−１阻害と付随するタンパク質ホスファターゼ２Ａ（ＰＰ２Ａ）によるＡｋｔ脱リン酸化との間の機序の相乗効果（増強されたＡｋｔの非活性化を生じる）に起因する可能性がある。この前提を検査するために、ＰＣ−３細胞を種々の濃度の化合物５９で２時間処理し、結果としてのＡＭに対する効果を二つの独立したアッセイ（免疫沈降Ａｋｔキナーゼ活性およびＡｋｔリン酸化状態）によって評価した。両アッセイから一致した結果を得た。

キナーゼアッセイによると、分子内Ａｋｔ活性化を阻害する化合物５９のＩＣ_５０は５μＭであった。化合物５９も他の化合物も、免疫沈降Ａｋｔ活性に対する直接的阻害効果を示さなかった。一方、ウェスタンブロット分析は、５μＭ以上での化合物５９によるＰＣ−３細胞の処理が、有意なＡｋｔ脱リン酸化を生じることを示す。

用量依存的様式でＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達の阻害は、ＤＮＡ断片化およびＰＡＲＰ開裂で立証されているような、１％ ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ １６４０培地でのＰＣ−３細胞のアポトーシス死を生じる。２４時間で５０％ ＰＣ−３細胞死を誘導するのに要求される化合物５９の用量は、５μＭであった。化合物５９に関するＰＣ−３細胞死を誘導するＩＣ_５０値は、薬物で処理した細胞におけるＡｋｔ活性化を阻害するＩＣ_５０値と一致した。さらに、化合物５９のＰＣ−３細胞増殖に対する効果を、１０％ ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ １６４０培地で試験した。１μＭの化合物５９は、高い抗増殖性活性を示した。一緒にすると、これらのデータで、ＰＣ−３成長阻害での化合物５９のインビトロ効力が明白に示された。

上記モデル化は、化合物５９が、ＰＤＫ−１の２個の葉（ｌｏｂｅ）間の深い間隙内に位置するＡＴＰ結合ドメインにドッキングしたことを示した。化合物５９は、結合でＡＴＰと競合するが、化合物５９の場合の結合様式は、ＡＴＰの様式と多少異なっていることが見出された。上記ベンゼンスルホンアミド部分は、アデニン結合型モチーフを占めるが、上記平面ピラゾール部分はリボース環に垂直であった。この配置は、隣接フェナントレン環をトリホスフェート結合ポケットの後ろに位置付けた。上記フェナントレン環は、グリシンリッチなループにより結合された２個の隣接βシートの一部を含む残基８８〜９６によって形成された無極性領域と疎水的に相互作用した。

１２種の代表的誘導体の構造、ＰＤＫ−１に対するそれらの能力、およびＰＣ−３細胞におけるアポトーシス死を起こすそれらの能力を、表３にまとめる。

（表３ 化合物２５〜３６に関する、構造および組換えＰＤＫ−１キナーゼ活性を阻害し、またＰＣ−３細胞におけるアポトーシス死を誘導する能力。これらの化合物の一般構造式を上部に示してある。）

これらの誘導体の中で、化合物７０および７１は、ＰＤＫ−１阻害に対し、それぞれ、５μＭおよび２μＭのＩＣ_５０値を示した。この値は、化合物５９に対して２倍および５倍の能力増大を示している。化合物７０および７１は、それぞれ、２−アミノアセタミド（−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＮＨ_２，）およびグアニジン（−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２）の側鎖を含んだ。化合物５９と同様に、化合物７０および７１は、免疫沈降Ａｋｔキナーゼ活性に関する測定可能な直接的阻害を示さず、また５０μＭまでの濃度で、いかなる測定可能なＣＯＸ−２阻害活性も、検出されなかった。ＰＣ−３細胞のいずれかの薬剤（たとえ１μＭでも）に対する暴露は、ホスホ−Ａｋｔレベルの大幅な減少となった。能力におけるこの改善は、これらの誘導体に関しタンパク質−リガンド相互作用における水素結合の強化を反映していた。この前提は、上記のモデル化された、化合物７１のＡＴＰ結合部位へのドッキングによって支持された。化合物７１のグアニジノ基は、ＡＴＰのプリン環の一部構造に似ており、これは、上記ドッキングモデルにより記述されたように、Ｓｅｒ１６０およびＡｌａ１６２との水素結合の生成を可能にした。

（ＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達インヒビターの細胞効果）
化合物７０および７１の両方は、ＤＮＡ断片化およびＰＡＲＰ開裂で立証されたように、用量依存的様式で、１％ ＦＢＳ含有培地でＰＣ−３細胞のアポトーシス死を誘導した。これらの薬剤は、２．５μＭより高濃度でアポトーシス誘導において化合物５９より高い能力を示した。さらに、これらの誘導体は、白血病、黒色腫、ならびに肺、結腸、脳、卵巣、乳房、前立腺、および腎臓の癌を表わす６０種のヒト腫瘍細胞株についてのスクリーニングのために、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ （ＮＣＩ）のＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｒｏｇｒａｍ （ＤＴＰ）にかけた。５％ ＦＢＳ含有培地中における２日の暴露後の、腫瘍細胞の各クラスからの１種の代表的細胞株の用量−反応データを図１Ｃに示す。この図には、１、ＲＰＭＩ−８２２６ 白血病細胞；２、ＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍ 非小細胞肺癌細胞；３、ＨＴ２９結腸癌細胞；４、Ｕ２５１ ＣＮＳ癌細胞；５、ＳＫ−ＭＥＬ−２８黒色腫癌細胞；６、ＳＫ−ＯＶ−３卵巣癌細胞；７、ＲＸＦ ３９３腎臓癌細胞；８、ＰＣ−３前立腺癌細胞；９、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞が含まれる。これらの細胞株の多くは、０．１μＭ程度の低い濃度で両薬剤の成長阻害効果に反応した。

上記６０細胞株アッセイにおいて、各細胞株に関する３個の用量反応パラメータを、成長阻害曲線に基づいて計算した。これらのパラメータには、Ｇ１５０（５０％成長阻害が生じる濃度）、ＴＧＩ（完全（ｔｏｏｌ）成長阻害が生じる濃度）、およびＬＣ５０（最初の薬剤処理に比べて薬剤処理の終わりでの測定したタンパク質レベルで５０％減少が生じる濃度）が挙げられる。２日間の処理後の化合物７０および７１に関する上記６０の異なる細胞株の中でのこれらのパラメータの平均は、それぞれ、次ぎの通りである。Ｇ１５０：１．１および１．２μＭ；ＴＧＩ：３．２および２．９μＭ；ＬＣ５０：２４および８．５μＭ。これらのデータは、明らかに、化合物７０および７１のインビトロでの効力を実証している。両薬剤は、３〜５μＭの治療範囲で広範な範囲の腫瘍細胞株において細胞成長を完全に抑えることができた。

癌細胞の生存および癌細胞の増殖におけるＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達の保存的役割を考慮すると、この経路は、経口的、生物的に利用可能な、小分子インヒビターを開発するための治療に関連する標的を示す。

化合物５９のＡＴＰ結合ポッケットへのインシリコドッキングは、この分子が、部分的には上記スルホンアミドとＡｌａ１６２のアミドとの間の水素結合を通して、ＡＴＰ結合ドメインに固着されたことを示した。Ａｌａ１６２はまた、ＡＴＰ^ｌ７およびＵＣＮ−０１のような他のリガンドをＰＤＫ−１に固着する際に重要な役割をすることを報告されている。これらのデータは、一緒に、化合物５９のスルホンアミド部分が能力の最適化のための変化を受けやすいかもしれないことを示唆している。

従って、上記スルホンアミド官能基を２−アミノアセタミド（−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＮＨ_２）およびグアニジン［−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２］で置き換えると、それぞれ、化合物７０および７１が得られた。両者は、それぞれ、５および２μＭのＩＣ_５０値を有する、改善されたＰＤＫ−１阻害を示した。化合物７１の上記ＡＴＰ結合部位へのドッキングよって、グアニジン部分とＳｅｒ１６０の骨格（ｂａｃｋｂｏｎｅ）酸素との間のさらなる水素結合の存在が明らかになった。これは、能力の増強が水素結合の増加に起因し得ることを示唆している。しかしながら、これらの側鎖のリガンド結合に対する効果は、表３にまとめられた構造−活性関係により例示されているように、わずかである。

ＰＤＫ−１阻害における化合物７０および７１の高い能力は、低μＭ濃度でＰＣ−３細胞において効果的にＡｋｔ活性化を阻止し、そしてアポトーシス細胞死を誘導するそれらの能力に反映されていた（図１Ａ、１Ｂ）。より重要なことに、細胞増殖および細胞生存におけるＰＤＫ−１／Ａｋｔシグナル伝達の保存的役割に起因して、これらの薬剤は、試験した６０種のヒト腫瘍細胞株全てで、血清含有培地での細胞成長を阻害する能力があった。平均ＧＩ５０（５０％ 細胞成長阻害）値は、それぞれ、１．２μＭおよび１．３μＭであり、そしてＴＧＩ（全成長阻害）値は、それぞれ、３．２μＭおよび２．９μＭであった。発明者らの予備的動物研究によって、これらの化合物は、経口的に吸収され得、ＴＧＩより数倍高い平均血清濃度を生じ得、そしてより重要なことに、１ヶ月間毎日の経口投与後、上記動物への毒性をほとんど生じないことが示された（データは示されない）。

ヌードマウスでの種々の腫瘍異種移植片に対するインビボ効力の試験を現在この研究室で実行中である。さらに、これらの薬剤の毒性試験および薬理的試験を、ＮＣＩでのＲａｐｉｄ Ａｃｃｅｓｓ ｔｏ Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（ＲＡＩＤ）プログラムに基づいて行う。

（化合物３７〜６０に関する一般的合成手順）
全ての化学物質薬剤および有機溶媒を、別に記述がない限り、Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入した。化合物１〜２４は、図式１に記述されている２工程の一般的手順に従って合成し、式中Ａｒはそれぞれの芳香環構造を表す。

化合物５９をここで例として使用し、化合物の群の合成を例示する（図式２）。他の化合物では、種々の芳香環構造を有する前駆体およびそれぞれ中間体の場合と同じ手順に従った（化合物ＩおよびＩＩ）。

（実施例１ １，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン前駆体の合成（工程１））
５ｍＬの無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中の水素化ナトリウム（ＮａＨ；０．１３ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、アルゴン下でエチルトリフルオロアセテート（ＣＦ_３ＣＯＯＥｔ；０．６４ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を加えた。２５℃で１０分攪拌後、５ｍＬのＴＨＦ中の２−アセチルフェナントレン（１ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を、上記溶液に滴下した。混合物は透明になり、そして３０分以内にオレンジ色になった。さらに２時間攪拌後、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水に懸濁し、そしてエチルアセテート（１５ｍＬ）で２回抽出した。この有機相を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で濃縮し乾固して上記生成物（黄色の固体；１．２９ｇ、９０％収率）を得た。この生成物をさらに精製することなく、直接使用した。

（実施例２ 化合物５９の合成（工程２））
４−ヒドラジノベンゼン−１−スルホンアミドハイドロクロライド（１．１ｇ；４．９ｍｍｏｌ）を、４０ｍＬのエタノール中の１，１，１，−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン（１．２９ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を、１２時間還流し、室温まで冷却し、そして減圧下濃縮して乾固した。この残留物を、エチルアセテートに溶解し、そして水で洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製し、５９を得た（１．５２ｇ、８０％収率）。

（実施例３〜１４ 化合物６１〜７２の合成）
化合物６１〜７２を、前述の工程１の生成物である１，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オンを共通の前駆体（図式３、エラー！参照源が見つからない）として合成した。

（実施例３ ４−［５−（２−フェナントラセニル（Ｐｈｅｎａｎｔｈｒａｃｅｎｙｌ））−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−ベンゼンカルボキサミド（６１）（工程３））
（４−カルバモイルフェニル）−ヒドラジンハイドロクロライド（０．９２ｇ、４．９ｍｍｏｌ）を、２５℃の４０ｍＬのエタノール中の１，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン（１．２９ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を１２時間還流して、室温まで冷却し、そして減圧下濃縮して乾固した。この残留物を、エチルアセテートに溶解し、そして水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（エチルアセテート−ヘキサン、１：１）で精製し、６１を得た（１ｇ、６０％収率）。

（実施例４ ４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−ベンゾニトリル（６２）（工程４））
６０ｍＬのエタノール中の１，１，ｌ−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン（２．４５ｇ、７．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、２５℃の４−シアノフェニルヒドラジンハイドロクロライド（２．５３ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１２時間還流下で攪拌して、室温まで冷却し、そして減圧下濃縮して乾固した。この残留物をエチレンクロライドに溶解し、そして水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で濃縮した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（エチルアセテート−ヘキサン、１：４）で精製し、６２を得た（２．７ｇ、８５％収率）。

（（実施例５ ４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−Ｎ−ヒドロキシベンズアミジン（６３）（工程５））
ヒドロキシルアミンハイドロクロライド（２５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）中のＮａ金属（８．３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。この混合物を、１０分間室温で攪拌し、そして化合物６２（１２２４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を２時間還流して、その後、さらに１６時間２５℃で攪拌し、減圧下で濃縮した。残留物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（エチルアセテート−ヘキサン、１：４から１：１）で精製し、６３を得た（１２０ｍｇ、７６％収率）。

（実施例６ ５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール（６４）（工程６））
５ｍＬの１０％ ＨＣ１中の化合物６２（１２５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、ＮＨ_４Ｃｌ（１２３．７ｍｇ）、およびＮａＮ_３（５８．５ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を含む混合物を加え、２０ｍＬのメチレンクロライドで２回抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、乾固した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（エチルアセテート−ヘキサン、１：４）で精製し、６４を得た（９６ｍｇ、７０％収率）。

（実施例７ ４−５［−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール（ｐｙｒａｘｏｌ）−１−イル］−ベンズアルデヒドオキシム（６５）（工程７））。

ＤＩＢＡＬ−Ｈ（３．１ｍＬ、３．１ｍｍｏｌ、ヘキサン中で１．０Ｍ）を、−４０℃で５ｍＬのＴＨＦ中の化合物６２（０．４１７ｇ、１．１ｍｍｏｌ）に滴下した。この混合物を、８時間攪拌して、５ｍＬの１０％ 酢酸に注ぎ、３０分間撹拌した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で濃縮し、乾固した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（エチルアセテート−ヘキサン、１：４）で精製し、アルデヒド中間体を得（１４１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、これを直ちに５ｍＬのエタノール中のヒドロキシルアミドハイドロクロライド（２１１ｍｇ）およびＫ_２ＣＯ_３を含む溶液に加えた。この混合物を還流下１６時間攪拌した。溶媒の除去後、その残留物をＣＨ_２Ｃ１_２で抽出し、そして水で洗浄した。

（実施例８ ４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−ベンズアルデヒドヒドラゾン（６６）（工程８））
ヒドロキシルアミンハイドロクロライドの代わりにヒドラジン一水和物（１５３ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）を使用した以外は、６５の場合と同じ様式で化合物６６（１２４ｍｇ、８５％収率）を合成した。

（実施例９ ｛４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−フェニル｝−アセトニトリル（６７）（工程９））
（ａ）（４−ヒドラジノフェニル）アセトニトリルハイドロクロライドの調製。水（２０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（３．１５ｇ、４５．７ｍｍｏｌ）の溶液を、濃塩酸溶液（５５ｍＬ）中の４−アミノベンゾニトリル（５ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）の冷却（−１５℃）した、攪拌懸濁液に温度が−１０℃未満に保たれるような速度で滴下した。添加終了後、この反応混合物を迅速にろ過し固体を取り除き、そしてこのろ液を濃塩酸溶液（３７ｍＬ）中のＳｎＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ（４７．７ｇ、０．２１ｍｏｌ）の冷却（−２０℃）した、攪拌溶液に、温度が−１０℃未満に保たれるような速度で複数回にわたって加えた。この溶液をさらに１５分間攪拌した後、溶液中の固体を回収し、ジエチルエーテル（４×２５ｍＬ）で洗浄し、そして乾燥し（４−ヒドラジノフェニル）アセトニトリルハイドロクロライド（５．６ｇ、７８％）を得た。（ｂ）化合物６７。エタノール（２０ｍＬ）中の（４−ヒドラジノフェニル）アセトニトリルハイドロクロライド（０．３２ｇ、１ｍｍｏｌ）および１，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン（０．１８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の混合物を、還流下で２４時間攪拌し、室温に冷却し、減圧下濃縮して乾固し、そしてエチルアセテートに溶解した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、乾固した。この粗生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン−エチルアセテート、２：１）で精製し、６７を得た（０．３５ｇ、８１％収率）。

（実施例１０ ２−｛４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−フェニル｝−Ｎ−ヒドロキシ−アセトアミジン（６８）（工程１０））
エタノール（１０ｍＬ）中の化合物６７（０．４３ｇ、１ｍｍｏｌ）およびヒドロキシアミンハイドロクロライド（０．０７５ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液を、還流下８時間攪拌し、そして減圧下濃縮して乾固した。残留物を水に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液を加えてｐＨ８〜９にし、そしてエチルアセテートで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、そして減圧下で濃縮し、乾固した。この粗生成物を、ジエチルエーテル−ヘキサン中で再結晶し、化合物６８を得た（０．３２ｇ、７１％収率）。

（実施例１１ ５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール（６９）（工程１１））
トルエン（５ｍＬ）中に、化合物６７（０．４３ｇ、１ｍｍｏｌ）、アジ化ナトリウム（０．０８ｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミンハイドロクロライド（０．１２ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を含む混合物を、１００℃で５時間攪拌し、室温に冷却し、そして水（１０ｍＬ）で抽出した。その水相に、３６％ 塩化水素溶液を滴下し、生じたテトラゾール６９を塩析した。ろ過後、その固体を減圧下で乾燥し、化合物３３を得た（０．３９ｇ、８４％収率）。

（実施例１２〜１４ １−（４−ニトロフェニル）−５−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール（ＩＩＩ）（工程１２））
４０ｍＬのエタノール中の１，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オン（１．２９ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の溶液に、４−ニトロフェニルヒドラジンハイドロクロライド（０．９３ｇ、４．９ｍｍｏｌ）を攪拌しながら加え、１時間還流し、室温まで冷却し、そして減圧下で濃縮し乾固した。残留物をエチルアセテートに溶解し、そして水で洗浄した。この有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下で濃縮し乾固した。この粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物ＩＩＩを得た（０．８８ｇ、５０％収率）。

（４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピロゾール−１−イル］フェニルアミン（ＩＶ）（工程１３）)
２０ｍＬ エタノール中の化合物ＩＩＩ（０．８８ｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、酸化白金（２７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、Ｈ_２下、５５ｐｓｉで１２時間攪拌し、ろ過して触媒を除去し、そして減圧下で濃縮して乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、化合物ＩＶ（０．５７ｇ、７０％収率）を得た。

（実施例１２ ２−アミノ−Ｎ−４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−フェニル｝−アセタミド（７０）（工程１４および１５））
１０ｍＬのテトラヒドロフラン中のｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔＢＯＣ）−グリシン（０．２５ｇ、１．４ｍｍｏｌ）および化合物ＩＶ（０．５７ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミドハイドロクロライド（０．４１ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で１２時間攪拌し、そしてロータリーエバポレーター中において減圧下で濃縮乾固した。この残留物を水に懸濁し、そして生成物をエチルアセテートで抽出した。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮乾固し、化合物Ｖ（０．６７ｇ、８５％収率）を得た。化合物Ｖ（０．６７ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、０．７ｍＬの濃ＨＣｌ溶液を含有する８ｍＬのエチルアセテートに溶解し、室温で２時間攪拌し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物７０を白色粉末（０．４９ｇ、９０％）として得た。

（実施例１３ ４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］−フェニル−グアニジン（７１）（工程１６））
７ｍＬのエタノール中の化合物ＩＶ（０．５７ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、シアナミド（８９ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）および１．５ｍＬの１Ｎ ＨＣｌを加えた。この混合物を２４時間還流して、そして減圧下で濃縮乾固した。この生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物７１を白色固体（０．２５ｇ、４０％収率）として得た。

（実施例１４ ４−［５−（２−フェナントレニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］フェニル尿素（７２）（工程１７））
酢酸（５０ｍＬ）、水（１２ｍＬ）、およびエタノール（２０ｍＬ）を含む２５０ｍＬ 丸底フラスコに、化合物ＩＶ（２．２５ｇ、５．６ｍｍｏｌ）を加え、次いでイソシアン酸ナトリウム（０．７４ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応を１．５時間攪拌し、そして１Ｎの水酸化ナトリウム、次いで水酸化ナトリウムペレットを添加して中和し、この溶液のｐＨを７．０まで変化させた。この生成物を分離し、そして１００ｍＬの水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして溶媒を除去して粗生成物を得た。精製をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで（ヘキサン−エチルアセテート、３：２からヘキサン−アセトン、１：３）によって行い、化合物７２を得た。

（実施例１５ さらなる化合物の調製）
表４の化合物を上記実施例の方法を使用して調製した。

（実施例１６ いくつかの癌細胞株に対する化合物７０および７１のスクリーニング）
上記癌スクリーニングパネルのヒト腫瘍細胞株を、５％ ウシ胎児血清および２ｍＭ Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ １６４０培地で培養する。典型的なスクリーニング実験については、個々の細胞株の倍加期間に依存して、細胞を、５，０００〜４０，０００細胞／ウェルの範囲のプレーティング密度で９６ウェルマイクロタイタープレート中に接種する。細胞接種後、実験薬物を添加する前に、上記マイクロタイタープレートを、３７℃、５％ ＣＯ_２、９５％ 空気および１００％ 相対湿度で２４時間インキュベートした。

２４時間後、薬物添加（Ｔｚ）時に各々の細胞株に関する細胞数の測定を表すため、各々の細胞株の２個のプレートをそのままでＴＣＡで固定した。実験用の薬物を、所望の最終最大試験濃度の４００倍でジメチルスルホキシドに可溶化し、そして使用するまで冷凍保存した。薬物添加時に、冷凍濃縮物のアリコットを融かし、そして所望の最終最大試験濃度を５０μｇ／ｍｌ ゲンタマイシンを含む完全な培地で２倍に希釈した。さらなる４個の、１０倍希釈または１／２ ｌｏｇ連続番号希釈を行い、全体で５種類の濃度の薬物およびコントロールを提供する。これらの種々の希釈液の１００μｌのアリコートを、既に１００μｌの培地を含む、上記適切なマイクロタイターウェルに加え、所望の最終薬物濃度液を得た。

薬物添加後、上記プレートを、さらに４８時間、３７℃で、５％ ＣＯ_２、９５％ 空気、１００％ 相対湿度でインキュベートする。付着細胞の場合、上記アッセイを、冷却ＴＣＡの穏やかな添加によって終結する。細胞を５０μＬの冷却５０％（ｗ／ｖ）ＴＣＡ（最終濃度、１０％ ＴＣＡ）でその場で固定し、４℃で６０分間インキュベートする。この上清を廃棄し、プレートを５回水道水で洗浄し、そして風乾する。１％ 酢酸中で０．４％（ｗ／ｖ）のスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）溶液（１００μｌ）を、各ウェルに添加し、そしてプレートを室温で１０分間インキュベートする。染色後、未結合染料を１％ 酢酸で５回洗浄することによって除去し、そしてプレートを風乾する。結合染色物を次に１０ｍＭ ｔｒｉｚｍａ塩基で可溶化し、そして吸光度を自動プレートリーダー上で５１５ｎｍの波長で読み取る。浮遊細胞の場合、上記アッセイを、５０μｌの８０％ ＴＣＡ（最終濃度、１６％ ＴＣＡ）を穏やかに添加することによってウェルの底に定着した細胞を固定することによって、終結する。７回の吸光度測定［時間ゼロ、（Ｔｚ）、コントロール成長、（Ｃ）、および上記５つの濃度レベルでの薬物の存在下における試験成長（Ｔｉ）］を使用して、パーセント成長を各々の薬物濃度レベルで計算する。パーセント成長阻害を、以下のように計算する：
Ｔｉ≧Ｔｚの場合の濃度に対して［（Ｔｉ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）］×１００
Ｔｉ＜Ｔｚの場合の濃度に対して［（Ｔｉ−Ｔｚ）／Ｔｚ］×１００
３個の用量反応パラメーターを、各々の実験用薬物に対して計算する。５０％（ＧＩ_５０）の成長阻害を、［（Ｔｉ−Ｔｚ）／（Ｃ−Ｔｚ）］×１００＝５０から計算する。これは薬物インキュベーション中におけるコントロール細胞の正味タンパク質増加（ＳＲＢ染色により測定される）における５０％減少の結果をもたらす薬物濃度である。全成長阻害（ＴＧＩ）を生じる薬物濃度は、Ｔｉ＝Ｔｚから計算される。処理後の正味損失を表すＬＣ_５０（最初における薬物濃度と比較して、薬物処理の終わりでの測定されたタンパク質において５０％減少の結果となる薬物の濃度）は、［（Ｔｉ−Ｔｚ）／Ｔｚ］×１００＝−５０から計算される。活性のレベルに達する場合、値はこれらの３個のパラメーターの各々に対し計算される。しかし、この効果が達しないか、またはこの効果を超える場合、上記パラメーターに対する値は、試験された最大濃度または最小濃度より大きいか、または小さい濃度として表される。

記述された方法は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ ＨｅａｌｔｈにおけるＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｐｒｏｇｒａｍにより提供されたスクリーニングサービスのもとで、６０種の細胞株のパネルにおいて化合物７０および７１を試験するために使用した。図１Ｃに示されるのは、１、ＲＰＭＩ−８２２６白血病細胞；２、；ＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍ非小細胞肺癌細胞；３、ＨＴ２９結腸癌細胞；４、Ｕ２５１ ＣＮＳ癌細胞；５、ＳＫ−ＭＥＬ−２８黒色腫癌細胞；６、ＳＫ−ＯＶ−３卵巣癌細胞；７、ＲＸＦ３９３腎臓癌細胞；８、ＰＣ−３前立腺癌細胞；９、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞である。

全６０種の細胞株に対する化合物７０および７１の試験結果を、以下の表に示す。試験は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｐｒｏｇｒａｍにより行われた。示された結果は、インビトロ試験結果である。

（表５ ６０種の癌細胞株に対する化合物７０の試験結果）

（表６ ６０種の癌細胞株に対する化合物７１の試験結果）

本明細書で記述される実施例は、記述される化合物の合成および用途の例示を意味する。上記実施例は、本明細書で記述される発明の範囲を限定することを意味しない。

図１は、９種の代表的ヒト腫瘍細胞株における、ＰＣ−３細胞の細胞生存度および細胞成長に対する化合物７０（左パネル）および化合物７１（右パネル）の用量依存性効果を示す。 図２は、１，１，１−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−フェナントレン−２−イル−ブト−３−エン−２−オンを共通の前駆体として使用することによる化合物３７〜７２の合成を示す。

Claims (26)

1. 式Ｉの化合物
   

   

   またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩であって、
   ここで、
   Ｘはアルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
   Ａｒは、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；
   Ｒは、
   

   

   からなる群より選択される、化合物またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩。
2. 請求項１に記載の化合物であって、ここでＸはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルである、化合物。
3. 請求項２に記載の化合物であって、ここでＸはＣＦ_３である、化合物。
4. 請求項１に記載の化合物であって、ここでＡｒはハロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ハロアルキル、アジド、Ｃ_１〜Ｃ_４アジドアルキル、アリール、アキルアリール、ハロアリール、ハロアルキルアリール、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される１個以上のラジカルで、任意の置換され得る位置において置換されている、化合物。
5. 請求項１に記載の化合物であって、ここでＡｒは２−ナフチル、４−ビフェニル、９−アントリル、２−フルオレニル、４−アジドフェニル、４−アジドメチルフェニル、４−（２−アジドエチル）フェニル、４−（３−アジドプロピル）フェニル、４−（４−アジドブチル）フェニル、４−（４−アジドフェニル）フェニル、４−（４−アジドメチルフェニル）フェニル、４−メチルフェニル、４−エチルフェニル、４−プロピルフェニル、４−ブチルフェニル、４−（２−ブロモエチル）フェニル、４−（３−ブロモプロピル）フェニル、４−（４−ブロモブチル）フェニル、４−（トリフルオロメチル）フェニル、４−（４−メチルフェニル）フェニル、４−（４−ブロモメチルフェニル）フェニル、４−（４−ブチルフェニル）フェニル、４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）フェニル、２−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２，５−ジメチルフェニル、３，４−ジメチルフェニル、３，５−ジメチルフェニル、４−（４−クロロフェニル）フェニル、４−（３，５−ジクロロフェニル）フェニル、４−（２，３−ジクロロフェニル）フェニル、４−（３，５−ジメチルフェニル）フェニル、４−（２，４，５−トリクロロフェニル）フェニル、４−（４−トリフルオロメチルフェニル）フェニル、２−フェナントレニル、３−インドリル、２−ピロリル、および４−（ベンジル）フェニルからなる群より選択される、化合物。
6. 請求項５に記載の化合物であって、ここでＡｒは４−（２−ブロモエチル）フェニル、４−（３−ブロモプロピル）フェニル、４−（２−アジドエチル）フェニル、４−（３−アジドプロピル）フェニル、４−ブチルフェニル、４−ｔ−ブチルフェニル、２−ナフタレニル、３−インドリル、４−ビフェニルイル、４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、３’，５’−ジクロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、２’，３’−ジクロロ［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―メチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―トリフルオロメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ブロモメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、３’，５’−ジメチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ブチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４’―ｔｅｒｔ−ブチル［１，１’−ビフェニル］−４−イル、４−（フェニルメチル）フェニル、９Ｈ−フルオレン−２−イル、９−アントラセニル、２−フェナントレニル、９−フェナントレニルからなる群より選択される、化合物。
7. 請求項６に記載の化合物であって、ここでＡｒは、２−フェナントレニルである、化合物。
8. 請求項１に記載の化合物であって、ここでＲはアミノアセタミドおよびグアニジンから選択される、化合物。
9. 請求項１に記載の化合物であって、ここでＸはＣＦ_３であり、Ａｒは２−フェナントレニルであり、そしてＲはアミノアセタミドおよびグアニジンから選択される、化合物。
10. 式２の化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩であって、
    Ｘはアルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
    Ｒは、
    

    

    からなる群より選択される、化合物またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩。
11. 請求項１０に記載の化合物であって、ここでＸはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルである、化合物。
12. 請求項１１に記載の化合物であって、ここでＸはＣＦ_３である、化合物。
13. 請求項１０に記載の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩であって、ここでＲはアミノアセタミドおよびグアニジンから選択される、化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩。
14. 式ＩＩＩの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩であって、
    Ｘはアルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
    Ｒは、
    

    

    からなる群より選択さる、化合物またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩。
15. 請求項１４に記載の化合物であって、ここでＸはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルである、化合物。
16. 請求項１５に記載の化合物であって、ここでＸはＣＦ_３である、化合物。
17. 請求項１４に記載の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩であって、ここでＲはアミノアセタミドおよびグアニジンから選択される、化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩。
18. 式ＩＶの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩。
19. 式Ｖの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩。
20. 所望されない急速に増殖する細胞においてアポトーシスを誘導する方法であって、該方法は、式Ｉの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩の治療有効量を、該急速に増殖する細胞に接触させる工程を包含し、
    ここで、
    Ｘは、アルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
    Ａｒは、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；
    Ｒは、
    

    

    からなる群より選択される、方法。
21. 請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記急速に増殖する細胞は癌細胞であり、ここで、該癌細胞は、白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系の癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、および乳癌からなる群より選択される、方法。
22. 請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記化合物は、化合物ＩＶおよびＶ
    

    

    またはそれらの組み合わせ、またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩からなる群より選択される、方法。
23. 癌の発生を処置、阻止、または遅延するための方法であって、そのような処置の必要な被験体においての方法であって、ここで、該癌は、白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、中枢神経系の癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、および乳癌からなる群より選択され、該方法は式Ｉの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩の治療有効量を、そのような処置の必要な該被験体に投与する工程を包含し、
    ここで、
    Ｘはアルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
    Ａｒはフェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；
    Ｒは、
    

    

    からなる群より選択される、方法。
24. 請求項２３に記載の方法であって、ここで、前記化合物は、化合物ＩＶおよびＶ
    

    

    またはそれらの組み合わせ、またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩から選択される、方法。
25. 請求項２３に記載の方法であって、ここで前記被験体はヒトである、方法。
26. 血管形成術またはステント法を受けた被験体において再狭窄を予防する方法であって、該方法は式Ｉの化合物
    

    

    またはそれらの代謝産物もしくは薬学的に受容可能な塩の治療有効量を、そのような処置の必要な該被験体に投与する工程を包含し、
    ここで
    Ｘは、アルキルおよびハロアルキルからなる群より選択され；
    Ａｒは、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびフルオレニルからなる群より選択され；
    Ｒは、
    

    

    からなる群より選択される、方法。

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