JP2007504112A5

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Publication number: JP2007504112A5
Application number: JP2006524340A
Authority: JP
Filing date: 2004-08-27
Publication date: 2010-12-16
Anticipated expiration: 2024-08-27

Description

２２６個のアミノ酸からなるタンパク質（ｐ２４／ｇｐ２７すなわちＳタンパク質）である小さなＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）は、２０〜３０ｎｍのリポタンパク質粒子内に単独で構築される重要なＨＢＶ抗原である。該粒子内では、複数の分子間および分子内でのジスルフィド結合によって１００〜１５０個のサブユニットが架橋される。種々のサブタイプおよび遺伝子型のＨＢＶ単離物由来のＳタンパク質の可変性は限られている。４つの安定なＨＢｓＡｇサブタイプであるａｄｗ、ａｙｗ、ａｄｒおよびａｙｒは、免疫優勢の「ａ決定因子」（残基１２４〜１４７を含む親水性領域）の近隣に位置する位置１２２および１６０における単一アミノ酸交換に関する。同サブタイプは、以前からＨＢＶ感染症における何らかの生物学的なまたは病原性における差異によるものとされてはいない。

実施例７：抗ＨＢｓＡｇ血清抗体がＨＢｓＡｇａｄｗ２で免疫されているＨＢｓａｙｗ−ｔｇマウスにおいて発生する。
Ｔ細胞免疫に加えて、液性抗ＨＢｓＡｇ免疫は、抗原血症の監視における役割を果たすことができる。ワクチン接種した正常およびトランスジェニックマウスにおいて抗ＨＢｓＡｇ血清抗体の発生を認めた。正常（非トランスジェニック）Ｂ６マウスおよびコンジェニックＨＢｓ−ｔｇＢ６マウスにｐＣＬ／ＳａｙｗまたはｐＣＬ／Ｓａｄｗ２ＤＮＡワクチンで２回免疫した。種々のサブタイプにおけるＨＢｓＡｇを測定するＩｍｘＡＵＳＡＢ試験（Ａｂｂｏｔｔ）を用いた最終の免疫の２週間後に、ＨＢｓＡｇに特異的なこれらの血清抗体力価を測定した。ｐＣＬ／ＳａｙｗまたはｐＣＬ／Ｓａｄｗ２プラスミドＤＮＡで免疫した非トランスジェニックマウスがＨＢｓＡｇに対する高い血清抗体濃度をもたらした一方で、ｐＣＬ／Ｓａｄｗ２（ｐＣＬ／Ｓａｙｗではない）プラスミドＤＮＡで免疫した後に限ってＨＢｓ−ｔｇマウスは抗ＨＢｓＡｇ血清抗体応答を示した（図８Ｂ）。ＨＢｓＡｇａｙｗまたはＨＢｓＡｇａｄｗ２粒子で免疫したマウスにおいて同様の抗体応答を認めた（データは示さず）。（ＨＢｓＡｇａｙｗまたはＨＢｓＡｇａｄｗ２粒子でコーティングしたプレートを用いた）サブタイプに特異的なＥＬＩＳＡによると、正常マウスではすべてのワクチンによって引き起こされる＞９５％の抗体応答はＨＢｓＡｇの「ａ」決定因子に向けられ、ＨＢｓ−ｔｇマウスでは＞９０％の抗体応答はａｄｗ２に特異的な決定因子に向けられる（データは示さず）。

Claims

少なくとも２つのＢ型肝炎ウイルス表面抗原（ＨＢｓＡｇ）；Ｔ細胞エピトープを含むそれらの断片であって、少なくとも１０個の共通のアミノ酸を有するがＴ細胞エピトープにおける少なくとも１個のアミノ酸は互いに異なっている断片；および／またはそれらをコードする核酸、を含み、かつＨＢＶコア抗原（ＨＢｃＡｇ）または同抗原をコードする核酸を全く含有しない組成物であって、
前記各ＨＢｓＡｇが均一粒子の形態で存在し、さらに、前記ＨＢｓＡｇがＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）におけるＨＢｓＡｇのＳ領域および／またはプレＳ１領域の遺伝子型と異なり、前記少なくとも２つのＨＢｓＡｇ又は断片はＴ細胞エピトープにおいて互いに異なる、組成物。
前記組成物が、前記少なくとも２つのＨＢｓＡｇおよび／または前記少なくとも２つのそれらの断片を含むことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
前記ＨＢｓＡｇの前記断片が、少なくとも５０個のアミノ酸を含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の組成物。
前記断片が、ＨＢｓＡｇのａ決定因子を含むことを特徴とする、請求項３に記載の組成物。
前記第１および第２の断片が、少なくとも２０個の共通のアミノ酸を有するが、少なくとも１個のアミノ酸は互いに異なることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
前記組成物が、ＨＢｓＡｇまたはそれらの断片をコードする少なくとも２つの核酸を含むことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
前記遺伝子型が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、またはＨから選択されることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
前記組成物が、少なくとも３つの異なるＨＢｓＡｇ、それらの断片、および／またはそれらをコードする核酸を含むことを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
前記組成物が、少なくとも５つの異なるＨＢｓＡｇ、それらの断片、および／またはそれらをコードする核酸を含むことを特徴とする、請求項８に記載の組成物。
前記組成物が、すべての既知のＨＢＶ遺伝子型のＨＢｓＡｇ、それらの断片、および／またはそれらをコードする核酸を含むことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
前記ＨＢｓＡｇまたはその断片をコードする核酸が、哺乳類細胞内でのＨＢｓＡｇの発現に適するプロモータの制御下で、ベクター内に存在することを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
前記ベクターが、プラスミド、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、麻疹ウイルス、およびレトロウイルスから選択されることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。
前記プロモータが、構成プロモータおよび誘導プロモータから選択されることを特徴とする、請求項１２に記載の組成物。
前記個々の成分を混合するステップを含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を調製する方法。
宿主細胞において、ＨＢｓＡｇまたはそれらの断片をコードする少なくとも２つの核酸を共発現させることを含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を調製する方法。
前記宿主細胞が、酵母細胞、特にメタノール資化性酵母（Ｈａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）、出芽酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、または酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）である、請求項１５に記載の方法。
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物および医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
ＨＢＶ感染症またはＨＢＶ介在性疾患の治療的処置のための薬物を製造するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物の使用。
ＨＢＶ感染症またはＨＢＶ介在性疾患の予防的処置のための薬物を製造するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物の使用。
前記ＨＢＶ感染症が、慢性持続性Ｂ型肝炎であることを特徴とする、請求項１８または１９に記載の使用。
前記ＨＢＶ介在性疾患が、急性Ｂ型肝炎感染症、肝硬変、または原発性肝細胞癌であることを特徴とする、請求項１８または１９に記載の使用。
前記組成物が筋肉内、皮下、皮内、静脈内、粘膜、または経口を介して投与されることを特徴とする、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の使用。
Ｂ型肝炎の治療的処置のための薬物の調製方法であって、
ａ）患者に感染したＨＢＶ遺伝子型を決定することと；
ｂ）ａ）によって決定される前記患者のＨＢＶ遺伝子型とは異なる、ＨＢＶ遺伝子型の少なくとも１つのＨＢｓＡｇ、またはＨＢｓＡｇをコードする核酸を含む薬物を提供することとを含む、調製方法。
前記遺伝子型が、ＰＣＲ法によって決定されることを特徴とする、請求項２３に記載の方法。