JP2007240185A - パラフィン切片保存シート - Google Patents
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Abstract
【解決手段】スライドガラスに代えて繊維シートを用いることにより、その保存時の取り扱いを簡便にするとともに、必要な場合に、この繊維シート上にパラフィン組織切片を固定したまま、水に戻し、再度スライドガラスですくい上げることにより、従来と全く同様に組織を貼り付けたスライドガラスとすることができる。パラフィン切片保存シートには、繊維シートの片面に厚さが3〜20μmのパラフィン包埋された哺乳類のパラフィン組織切片を固着して、5〜20秒間ろ過することを特徴とする。このろ過時間は、フィルターホルダー(IWAKI:GFH−47)を使用し、径47mmの円状ろ紙面において、100mlの蒸留水を真空ポンプ(BIO CRAFT BC−651)により50mmHgで吸引しろ過するに要する時間である。
【選択図】 なし
Description
更に、上記繊維シートを水槽中に浸し、上記哺乳類のパラフィン組織切片を水槽に浮かべ、水槽に浮かべた上記哺乳類のパラフィン組織切片を繊維シートで掬い取ることにより、上記水で湿潤した繊維シート上に載せた上記哺乳類のパラフィン組織切片を得ることができる。
この繊維シートの厚さは厚さ0.1〜0.6mmが適当である。薄いと、支持体としての強度が不足する場合がある。
このろ過時間は、フィルターホルダー(IWAKI:GFH−47)を使用し、径47mmの円状ろ紙面において、100mlの蒸留水を真空ポンプ(BIO CRAFT BC−651)により50mmHgで吸引しろ過するに要する時間をいう。
このろ過時間とJIS P 3801のろ水時間との関係については、表1に挙げた測定値から推察できるが、ろ過時間5〜20秒はろ水時間約20〜60秒に相当するものと考えられる。
この保留粒子径は、JIS P 3801に規定された硫酸バリウムなどを自然ろ過した時の漏洩粒子径により求める。
臓器を固定(ホルマリン・アルコール等)した後、アルコールにより脱脂し、キシレンによる中間剤を経てパラフィン包埋する。
「固定」の操作としては、手術および解剖にて採取した臓器を10%中性緩衝ホルマリンまたはアルコール等の固定液にて一晩から数日間浸する。
次に、パラフィン包埋されたパラフィン組織切片をミクロトームにより3〜20μmの厚さに薄切し、水槽に浮かべる。このように水に浮かべた切片を繊維シートですくい上げる。その後、必要に応じてペーパータオル等の吸湿性のシート上に置いて、乾燥させ保存する。すると、繊維シート上に重ねられたパラフィン包埋されたパラフィン組織切片は、乾燥するに伴って、繊維に微細に絡みつき、固着した状態になる。
得られたパラフィン組織切片/繊維シートを「パラフィン切片保存シート」という。
一定期間保存後、このパラフィン切片保存シートを、必要に応じて、水に浮かべることにより、繊維シートは所定のろ過速度を有するため、水が繊維シートの全面から適当な速度で浸透し、固着したパラフィン組織切片が均等に繊維シートから自然剥離する。このとき、ろ過速度が本発明で規定する所定範囲内に無い場合には、水が繊維シートの浸透する速度にばらつき等が生じ、パラフィン組織切片に亀裂が入ったりする。これは、パラフィン組織切片が繊維シートから均等に自然剥離することができないためと考えられる。
半年後、パラフィン組織切片を貼付けたろ紙を水槽に浮かべた(図1(2))。両者が剥離(パラフィン組織切片は水に浮き、ろ紙は沈む)するので(図1(3))、これをスライドグラスに貼付け湯浴式パラフィン伸展器でしわを伸ばし乾燥した。保存シートからスライドグラスに再度張り付け乾燥させるのに費やす時間は、60℃インキュベーターなら30分間以上、37℃インキュベーターなら1時間以上になる。
得られた組織を下記基準で評価した。
(1)切片の剥離を、容易・比較的容易・やや難・難・不可能の5段階で評価した。比較的容易以上が実際使用して問題無いレベルといえる。
(2)組織の亀裂の有無を目視で評価した。亀裂のあるものは標本として不適である。
亀裂の無いもの(ADVANTEC No.1を用いて作成したパラフィン切片保存シート)を図2(1)に示し、亀裂のあるもの(ADVANTEC No.2を用いて作成したパラフィン切片保存シート)を図2(2)に示す。
Claims (5)
- 繊維シートの片面に厚さが3〜20μmのパラフィン包埋された哺乳類のパラフィン組織切片が固着されてなるパラフィン切片保存シートであって、該繊維シートのろ過時間が5〜20秒であることを特徴とする、但し、該ろ過時間とは、フィルターホルダー(IWAKI:GFH−47)を使用し、該繊維シートの径47mmの円状シート面において、100mlの蒸留水を真空ポンプ(BIO CRAFT BC−651)により50mmHgで吸引しろ過するに要する時間をいう、パラフィン切片保存シート。
- 水で湿潤した前記繊維シート上に載せた前記哺乳類のパラフィン組織切片を乾燥させることにより得られた請求項1に記載のパラフィン切片保存シート。
- 前記水で湿潤した該繊維シート上に載せた前記哺乳類のパラフィン組織切片が、該繊維シートを水槽中に浸し、該哺乳類のパラフィン組織切片を該水槽に浮かべ、該水槽に浮かべた前記哺乳類のパラフィン組織切片を該繊維シートで掬い取ることにより得られた請求項2に記載のパラフィン切片保存シート。
- 前記繊維シートがJIS P 3801の1種のろ紙である請求項1〜3のいずれか一項に記載のパラフィン切片保存シート。
- 前記繊維シートが白色以外の色に着色された請求項4に記載のパラフィン切片保存シート。
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