JP2007209209A - MITFのmRNA量によるメラニン産生抑制剤の評価法 - Google Patents
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Abstract
メラニン産生抑制効果、美白効果を有する有効成分のスクリーニング方法の提供。
【解決手段】
本発明は、メラニン産生抑制成分をスクリーニングするにあたって、メラニン産生細胞に被験物質に直接接触させて、該細胞におけるMITF-M遺伝子の発現量を解析することにより、産生されるメラニン量を精度良くスクリーニング出来る評価方法である。
Description
TRP-2(ドーパクロムトートメラーゼ)等、チロシナーゼ関連酵素の作用を受けて合成される。メラニン合成には、上記3酵素が重要な働きをするが、これらの酵素の産生を制御しているのがMITFである。(一部TRP-2遺伝子だけはやや異なる制御も受ける。)MITFにはMITF-M、MITF-B、MITF-H、MITF-C、MITF-Aの5種類のアイソフォームが存在するが、本発明ではMITF-Mを指すものである。チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2遺伝子のプロモーター上にはMボックスと呼ばれる共通の制御配列が存在し、MITF-MはこのMボックスに結合することにより、これらの酵素遺伝子の転写を活性化することが知られている。
そして、本発明は、前記の塩基配列(I)または(I')を有するオリゴヌクレオチドと、塩基配列(II)または(II')を有するオリゴヌクレオチドとを一対として含むPCR増幅用プライマーを提供する。
aquaticus由来の耐熱性DNAポリメラーゼの遺伝子組換え体など、市販の酵素が利用できる。
50cm2シャーレでヒトメラノーマ細胞(HM-3KO)を培養する。細胞はシャーレ当たり5×105個を植える。培養培地は10%FBSを添加したE-MEM培地8mlをシャーレに添加し培養する。植え付け翌日に、被験物質を添加する。2日ごとに培地および被験物質を交換し、細胞がコンフルーエントになるまで培養する。細胞がコンフルーエントになったら、0.25%トリプシン-0.02%EDTA溶液で細胞を剥がして、遠心分離により1.5mlエッペンチューブに細胞を集める。
細胞からのRNA抽出は、Ambion社のRNAqueous キットにより行なった。
1.集めた細胞に350ulのLysis/Binding solutionを添加し、ヒ゜ヘ゜ッティンク゛により細胞をよく
分散溶解させる。
2.64%Ethanolを350ul入れてよくまぜる。
3.RNAqueous FilterをCollection Tubeにセットし、上記で混ぜたサンプル700ulを入れ、15,000rpmで1分間遠心分離を行なう。
4.Collection Tubeに落ちた液を捨て、RNAqueous FilterにWash solution#1を700ul
入れ、15,000rpmで1分間遠心分離を行ない、洗浄する。
5.Collection Tubeに落ちた液は捨て、RNAqueous FilterにWash solution#2/3を500ul
入れ、15,000rpmで1分間遠心分離を行ない、洗浄する。2回繰り返す。
6.新しいCollection TubeにRNAqueous Filterをセットし、Elution solution 100ulを
添加し、15,000rpmで1分間遠心分離を行ない、RNA抽出液とする。
Ambion社のDNA-free試薬を用いて行なった。
1.調製したRNA抽出液100ulに10×緩衝液(100mM-Tris-HCl(PH7.5)、25mM-MgCl2、
5mM-CaCl2)10ulと、DNase(2unit/μl)2ulを加えて、37℃で30分保温し、DNA
を分解させる。
2.DNase Inactivation Reagent 20ulを加えて撹拌し、遠心分離を行い、上澄みをサンプルとする。
抽出したRNA溶液5μl(RNA濃度が1μgになるように調製)にOligo(dT)15プライマー 2.5 μl を入れ、65℃で10分加熱後、氷上で5分間急冷する。
H2O 20.5μl、5×First Strand buffer(250mM Tris-HCl(PH8.3 室温.)、375mM KCl、15mM MgCl2)10.0μl、0.1M DTT 5.0μl、2.5mM dTTP 5.0μl、Ribonuclease inhibitor
1.0μl、M-MLV Reverse Transcriptase (200U/μl) 1.0μlを添加し、撹拌後、37℃で1時間放置する。その後 95℃で5分間加熱し、cDNAを合成する。
Takara Z-Taq試薬を用いRT-PCRを行なった。H2O
38.5μl、10×Z-Taq buffer 5μl、2.5mM
dNTP mixture 4μl、センスプライマー5’- CCTTCTCTTTGCCAGTCCATCTTC-3’ 0.5μl、アンチセンスプライマー5’-GATCAATCAAGTTTCCCGAGACAG-3’0.5μl、Z-Taq0.5μl、および段落0023で調製したcDNA 1μlを加え、全量を 50μlとする。
PCRは、98℃で 1秒、68℃ 10秒のサイクルを35回繰り返して行なった。増幅したDNAフラグメントをハイブリダイゼーションプローブの蛍光強度で評価した。
遺伝子発現増加率は下記計算式(1)によって求め、結果を表1に示した。
Claims (5)
- 培養されたメラニン産生細胞のMITFのmRNA量を測定することを特徴とするメラニン産生抑制剤の評価方法。
- メラニン産生細胞中のMITF蛋白質をコードするmRNAを含むRNA画分を得る工程、MITF蛋白質をコードするmRNAを鋳型にしたcDNAを作成する工程、そのcDNAを、MITF蛋白質をコードするmRNAの一部と同一またはそれに対して相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドをプライマーとして用いて増幅する工程、および増幅産物の量を測定する工程を含むことを特徴とする美白剤評価方法。
- MITF蛋白質をコードするmRNAの一部と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドであって、(センス鎖)塩基配列5’-CCTTCTCTTTGCCAGTCCATCTTC-3’またはこの配列に対して4個以下の塩基が、除去、付加及び/または置換期より修飾されている塩基配列、あるいは(アンチセンス鎖)塩基配列5’-GATCAATCAAGTTTCCCGAGACAG-3’またはこの配列に対して4個以下の塩基が、除去、付加及び/または置換期より修飾されている塩基配列を有するオリゴヌクレオチド。
- MITF蛋白質をコードするmRNAの一部と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドであって、塩基配列(センス鎖)5’-CCTTCTCTTTGCCAGTCCATCTTC-3’、あるいは(アンチセンス鎖)塩基配列5’-GATCAATCAAGTTTCCCGAGACAG-3’を有するオリゴヌクレオチド。
- 請求項3または4に記載の塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを一対として含むPCR増幅用プライマー。
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JP2006006201A (ja) * | 2004-06-25 | 2006-01-12 | Shiseido Co Ltd | メラノサイト用の培地 |
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---|---|---|---|---|
JP2006006201A (ja) * | 2004-06-25 | 2006-01-12 | Shiseido Co Ltd | メラノサイト用の培地 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20140055401A (ko) * | 2012-10-31 | 2014-05-09 | (주)아모레퍼시픽 | 피부 미백 물질 스크리닝 방법 |
KR102012861B1 (ko) * | 2012-10-31 | 2019-08-22 | (주)아모레퍼시픽 | 피부 미백 물질 스크리닝 방법 |
JP6324597B1 (ja) * | 2017-09-01 | 2018-05-16 | 株式会社ユーグレナ | メラニン産生抑制剤、美白剤、遺伝子発現抑制剤、メラニン産生抑制用化粧料組成物及び美白用化粧料組成物 |
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