JP2007169302A - 組み合わせ髄膜炎ワクチン - Google Patents
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Abstract
【解決手段】細菌性髄膜炎の処置のための組み合わせワクチン、特に、1つの実施形態において、Haemophilus influenzae B型(Hib)ならびにNeisseria meningitidis(髄膜炎菌)B血清型およびC血清型(MenB、MenC)による感染から効果的に保護する、組み合わせワクチンなど。
【選択図】なし
Description
(1)HibおよびMenCオリゴサッカライド結合物を含有する、組み合わせ髄膜炎ワクチン。
(2)MenBオリゴサッカライド結合物をさらに含有する、項目1に記載のワクチン。
(3)前記オリゴサッカライドが、4より少ない重合度を有する短鎖オリゴマーを排除するためにサイズ選択されている、項目1または2に記載のワクチン。
(4)医薬に使用するための項目1〜3のいずれかに記載のワクチン。
(5)同時の分離投与または連続投与のためのHibオリゴサッカライド結合物およびMenCオリゴサッカライド結合物。
(6)同時の分離投与または連続投与のためのHibオリゴサッカライド結合物、MenCオリゴサッカライド、およびMenBオリゴサッカライド結合物。
(7)項目1〜4のいずれかに記載のワクチンの薬学的に効果的な量を患者に投与する工程を包含する、髄膜炎の予防または治療のための方法。
(8)前記ワクチンの投与が、キャリアー初回免疫工程によって先行される、項目7に記載の方法。
(9)前記キャリアー初回免疫がDTPワクチンの投与によって達成される、項目8に記載の方法。
HibおよびMecC結合物は、当該分野で公知のオリゴサッカライドおよびキャリアータンパク質を用いる確立された結合技術に従って調製され得る。しかし好ましくは結合は、短鎖のオリゴマーを除くためのオリゴサッカライドをサイズにより分離することを包含する方法に従って調製される。
Hib結合ワクチンでのキャリアー初回免疫の効果の決定
ワクチンおよび被験体
臨床試験をSt.Louis(N=83)およびMinneapolis(N=20)における研究敷地で行った。103人の健康な乳児を約1ヶ月齢で無作為化し、ジフテリアおよび破傷風トキソイドワクチン(DT-初回免疫された群)の単独の接種を与えるか、またはワクチン接種をしないかのいずれかにした。DTワクチン(lot 1L21121,Connaught Laboratories,Inc,Swiftwater,PA)を0.5mlの用量を用いて筋肉内に与えた。DTを与えられた52人の乳児の年齢の平均値±SDは、1.1±0.1ヶ月(範囲:0.8〜1.3ヶ月)であった。2ヶ月齢で、各群の乳児をさらに無作為化し、3用量のHbOC(lot M695HK)または3用量のPRP-T(lot S2440)のいずれかを与え、2、4および6ヶ月齢で筋肉内に投与した。HbOCの用量は、0.5mlにおいて10μgのサッカライドおよび25μgのCRMタンパク質であり、そしてPRP-Tの用量は、同様に投与された0.5mlにおいて10μgのサッカライドおよび20μgのタンパク質であった。DTPワクチン(0.5ml、筋肉内、lot 2G31010 、Connaught Laboratories)の分離した接種をHib結合ワクチン接種の各時間で反対側の脚に与えた。12ヶ月齢で、0.1ml中に5μgの非結合PRPワクチンを皮下に与えた。PRPワクチンは、NIAID、NIHによって提供され、そして以前に記載されている(Granoffら、J.INf.Dis.1993;168:663-671)。血清サンプルを、Hib結合/DTP用量の各々の直前、第3の用量の約4週間後、ならびにPRPワクチン接種の直前およびワクチン接種の1ヶ月後に得た。103人の乳児のうち94人(91%)が、結合ワクチンプロトコルを完了し、そして彼らが本明細書で報告される分析に含まれる被験体である。残った9人の幼児を次の理由で除外した。:血液サンプルを得ることが困難である(1);両親が町から引越した(1);もはや参加することを望まない(2);追跡し損なった(1);研究外の不正のワクチンを偶然に与えられた(2);根元的な免疫不全の診断(1);およびワクチン接種に関連しない発熱性の発作(1)。この分析に用いられた4つの処置群の人口統計学的特徴を表1に要約する。群は、結合ワクチン接種の最初の用量において、性別、人種、および年齢に関して類似していた。
*示されたデータは、共役ワクチン接種を完了した94人の乳児に由来し、評価について望ましかった(方法を参照のこと)。
**一回目の結合ワクチン用量の時
有害反応
簡単な質問表を完成するために両親に尋ね、接種部位の局所反応、日々の体温、および各用量のDTP/結合ワクチン接種の後72時間内に起こり得る他の全身的な反応を書き留めた。これらの観察を、研究看護士によって行われた電話問診および各々の定期的な診療所往診時の起こり得る有害反応の再調査によって補った。有害反応の活発な監視を、1ヶ月齢でのDTワクチン接種の後に行わなかった;しかし、このワクチン接種に対して起こり得る重篤な反応の情報を、結合/DTPワクチン接種を始める前に、2ヶ月の往診で得た。
凍結血清の複製したコードのバイアルを、総抗PRP抗体濃度の測定のためにSt.LouisのWashington大学に送付し、そしてジフテリアおよび破傷風トキソイドに対する抗体濃度の測定のためにConnaught Laboratories,Inc,Swiftater,PAに送付した。全てのアッセイを、抗原DT初回免疫状態または結合ワクチンの割り当ての知識なしで行った。
抗破傷風トキソイド抗体および抗ジフテリアトキソイド抗体濃度を、1993年4月前にPRP追加免疫プロトコルの完了およびアッセイに対する十分量の血清の入手可能性に基づいて選択された被験者の約90%サンプル由来の血清サンプルにおいて測定した。
Chi平方検定、または小さく予想される頻度(small expected frequency)によって要求される場合Fisherの精密検定を用いて、頻度データを比較した。抗体濃度を対数に変換し、そして幾何平均の抗体濃度を分散分析により比較した。これらの計算のために、このアッセイで検出された最小値より少ない抗体濃度を最小値の50%値に割り当てた(例えば、抗PRP抗体濃度<0.07μg/ml、抗破傷風抗体濃度<0.01units/ml、および抗ジフテリア抗体濃度<0.01units/mlを,それぞれ0.35μg/ml、0.005units/ml、および0.005units/mlに割り当てた)。MinneapolisおよびSt.Louisにおける乳児の結合およびDT/DTPワクチン接種に対する抗体応答を組み合わせた。なぜなら、この2つの研究敷地間の結果に統計的に有意な差異がなかったからである。
有害反応
ワクチン接種養生は良好に許容された。いずれの乳児においても、低血圧/低敏感反応(hypotensive-hyporesponsive reaction)、てんかん発作、長期にわたって叫び声をあげる発作、>39.9℃の体温を含む重篤な反応は無かった。4つのグループにおいて、>37.8℃の体温は、DTP/結合用量1の後では20〜33%の幼児で、用量2の後では23〜29%の乳児に、そして用量3の後では21〜35%の乳児に存在した。ワクチン群間のそれぞれの差異は、有意なものではなかった(p>0.10)。
結合ワクチン接種に対する抗PRP抗体反応。
非結合PRP抗体を、結合ワクチン接種を完了した94人の幼児のうち74人(79%)に12ヶ月齢で与えた。図1に、追加免疫接種直前および追加免疫接種の1ヶ月後に得られた血清におけるそれぞれの幾何平均抗体濃度±2SE(95%信頼区間)を要約する。PRP-Tワクチン接種された幼児間で、DT初回免疫された群の幾何平均抗PRP抗体濃度は、PRP追加免疫の直前では2.6μg/mlであり、それに対してDTを受けていない対応する乳児においては1.6μg/mlであった(p=0.11)。PRP追加免疫の1ヶ月後では、幾何平均抗体濃度は、DT初回免疫された群では26.4μg/mlであり、それに対してDTを受けていない対応する乳児においては8.6μg/mlであった(p=0.01)。HbOCを与えられた乳児において、PRP追加免疫(1.2対1.1μg/ml)の前またはPRPの後1ヶ月(6.0対8.8μg/ml,p=0.34)、DT初回免疫された乳児とDT初回免疫されていない乳児との間には、それぞれの幾何平均抗PRP抗体濃度において有意な差異はなかった。
1例を除いて、1ヶ月齢でDTによりワクチン接種された乳児および1ヶ月齢でDTによりワクチン接種されていない乳児およびDTによりワクチン接種されていない乳児のそれぞれの抗D抗体濃度または抗T抗体濃度において2ヶ月齢では有意な差異はなかった(表3および表4)。例外は、DT初回免疫された群において無作為化して、PRP-Tを受けた乳児が、対応する初回免疫されていない群より2倍以上高い抗T抗体濃度を有したことであった(0.06対0.03units/ml,p<0.02)。この結果は、偶然に生じ得た。なぜなら、正反対の傾向が無作為化してHbOCを受けた対応する群で観察されたからである(0.05対0.07units/ml,p>0.10,表3)
1ヶ月でのDT初回免疫は、2、4、および6ヶ月に与えられたDTPおよび結合の引き続く接種に対する抗D抗体応答を強化した。DTP/結合での最初のワクチン接種の後、初回免疫された乳児は、初回免疫されていない乳児のそれぞれの幾何平均値より、1.5〜2倍高い幾何平均抗Dおよび抗T抗体濃度を有した(P<0.60);2回目のワクチン接種の後、初回免疫された乳児のそれぞれの幾何平均値は、初回免疫されていない乳児の幾何平均値より約3〜5倍高かった(P<0.001)。3回目のDTP/結合ワクチン接種の後、用いた特定の結合ワクチンとそれぞれの抗D抗体または抗T抗体応答との間に相互作用があるらしい。PRP-T/DTPでワクチン接種されたDT初回免疫された乳児は、初回免疫されていない乳児より2倍高い抗T抗体濃度を有していたが(P<0.001)、それぞれの抗D抗体応答は有意な差異がなかった(P>0.20)。対照的に、HbOC/DTPでワクチン接種された初回免疫された乳児は、初回免疫されていない乳児より約2倍高い抗D抗体濃度を有していたが(P<0.01)、それぞれの抗T抗体応答は有意な差異がなかった(P>0.24)。
免疫原性オリゴマーのサイズ選択
例としてここではHaemophilus influenzaeB型由来の免疫原性オリゴマー選択を記載する。上昇した温度での制御された酸加水分解の後、得られたオリゴサッカライド調製物は単一から比較的長鎖のオリゴマーまでの種々の鎖長のオリゴマーを含有する。図2および3(レーンB)は、このような加水分解物の不均一性を示している。示されている場合では、モル比においてオリゴマー種の約半分が、5糖残基より少ない糖鎖を含有すると計算される。このような加水分解物がキャリアタンパク質(例えばCRM-197)に結合する場合、それらは、免疫性が乏しいと思われるワクチン産物を産生する。
a)還元末端に一級アミノ基を導入する、選択されたオリゴサッカライドの還元性アミノ化。
b)アジピン酸のN-ヒドロキシサクシンイミドジエステルとの反応による、活性エステルへのアミノ−オリゴサッカライドの変換。
c)活性オリゴサッカライドのCRM-197へのカップリング;およびワクチン製造のための結合物の最終的な精製。
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