JP2006525790A5 - - Google Patents

Claims (11)

1. ディスプレイされている二量体Ｔ細胞レセプター（dTCR）又は単鎖TCR（scTCR）のポリペプチドが、Ｔ細胞レセプター中に等価物を有しない、定常ドメイン配列の残基同士を連結する鎖内ジスルフィド結合を含んでなるdTCR又はscTCRを表面でディスプレイしているファージ粒子。
2. 前記dTCRポリペプチド対の一方のメンバーのＣ末端又は前記scTCRポリペプチドのＣ末端が該ファージ粒子の表面に露出したアミノ酸残基とペプチド結合によって連結されている請求項１に記載のファージ粒子。
3. 前記ジスルフィド結合がTRAC^*01のエキソン１のThr 48及びTRBC1^*01若しくはTRBC2^*01のエキソン１のSer 57又はこれらの非ヒト等価物と置換したシステイン残基間に存在する請求項１又は２に記載のファージ粒子。
4. 二量体Ｔ細胞レセプター（dTCR）ポリペプチド対を表面でディスプレイしている線状ファージ粒子であり、該ポリペプチド対が
   TCRα鎖可変ドメイン配列に対応する配列がTCRα鎖定常ドメイン細胞外配列に対応する配列のＮ末端に融合している第１のポリペプチド、及び
   TCRβ鎖可変ドメイン配列に対応する配列がTCRβ鎖定常ドメイン細胞外配列に対応する配列のＮ末端に融合している第２のポリペプチド
   により構成され、
   該第１のポリペプチド及び該第２のポリペプチドがTRAC^*01のエキソン１のThr 48及びTRBC1^*01若しくはTRBC2^*01のエキソン１のSer 57又はこれらの非ヒト等価物と置換したシステイン残基間のジスルフィド結合により連結され、
   該dTCRポリペプチド対の一方のメンバーのＣ末端が前記ファージのコートタンパク質にペプチド結合により連結されている請求項１に記載のファージ粒子。
5. 天然型TCR鎖間ジスルフィド結合を形成するシステイン残基が排除されるように、前記TCRが、dTCRの場合には両Ｃ末端で、scTCRの場合にはＣ末端で、天然型TCR配列に対して短縮化されている請求項１〜４のいずれか１項に記載のファージ粒子。
6. 天然型TCR鎖間ジスルフィド結合を形成するシステイン残基が非システイン残基に置換されている請求項１〜４のいずれか１項に記載のファージ粒子。
7. 前記ディスプレイされているdTCR又はscTCRにおいて、天然型TCR中に存在する未対合のシステイン残基に対応する未対合のシステイン残基が存在しない請求項１〜６のいずれか１項に記載のファージ粒子。
8. 請求項１〜７のいずれか１項に規定のファージ粒子の多様性ライブラリー。
9. 多様性が前記dTCR又はscTCRポリペプチドの可変ドメインに存在する請求項８に記載の多様性ライブラリー。
10. 請求項８又は９に記載のファージ粒子上にディスプレイされたTCRの多様性ライブラリーを、
    特定の特性について選択する選択工程に付し、該特性を有するTCRをディスプレイするファージ粒子を単離し、必要に応じて、単離した粒子を拡大させるために増幅工程に付し、及び/又は
    該特性を測定するスクリーニング工程に付し、該所望の特性を有するTCRをディスプレイするファージ粒子を同定し、これらファージ粒子を単離し、必要に応じて、単離した粒子を拡大させるために増幅工程に付すことを含む、特定の特性を有するTCRの同定方法。
11. 前記特定の特性がTCRリガンドについての増大した親和性である請求項１０に記載の方法。