JP2006509039A - 多価初代hiv−1糖タンパク質dnaワクチンおよびワクチン接種方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、後天性免疫不全症候群(AIDS)の治療のための方法および組成物に関する。
ヒト免疫不全ウイルス(HIV)はAIDSの原因病原体である。現在認識されているHIVの種類にはHIV-1およびHIV-2の2つがある。HIV-1は世界的に多数を占める型である。世界的流行の主体をなすHIV-1の型はHIV-1の主要群(major group)と呼ばれる。HIV-1には主要群(M群)、アウトライアー群(outlier group)(O群)および非M/非O群(N群)の3つの群がある。M群はさらに少なくとも11種の遺伝学的サブタイプに分けられ、これらは一般にクレード(clade)A、B、C、D、E、F、G、H、I、JおよびKと呼ばれており、この後にもさらに追加されることが予想される。クレードBは米国で最も頻度の高いものであり、クレードCは世界的にみて最も頻度が高い。遺伝学的サブタイプの地理的分布は絶えず変化しつづけており、最新のデータも不完全な推測値を示すにとどまる。
本明細書に提供する方法および組成物は、一部には、多価初代分離株DNAワクチンがHIV(例えば、HIV-1)に対する免疫応答を効果的に誘導するという発見に基づく。組換えHIVタンパク質組成物による追加免疫処置が、多価初代分離株DNAワクチンを投与された対象におけるHIVに対する免疫応答を増大させることも見いだされた。
本明細書に提供する方法および組成物は、一部には、HIVの多数の異なる遺伝学的サブタイプからの初代HIV-1分離株を組み合わせると、広範囲にわたる抗体応答(例えば、中和抗体応答)および細胞性免疫応答(例えば、細胞傷害性Tリンパ球(CTL))を誘導しうる多価DNA組成物を作り出せるという発見に基づく。また、本明細書に提供する方法および組成物は、多価DNA組成物を投与された対象における免疫応答の増強のために初代分離株からのHIVタンパク質を用いうるという、タンパク質追加免疫処置の発見にも基づく。最近の戦略は、CTL認識を免れることが原因で免疫防御がごくわずかしか得られないという問題に直面している(Barouch et al., 2002, Nature, 415: 335-339;Goulder et al., 2001, Nature, 412: 334-338;Goulder et al., 1997, Nature Med., 3: 212-217)。この問題に対処するために、多価組成物を作製し、それによって細胞性免疫応答を向上させ、ウイルスによるCTLエスケープの確率を低下させ、さらに中和抗体応答も向上させるという目的で、初代HIV-1分離株からの核酸配列が用いられている。この新たな方法は、種々のHIV-1タンパク質をコードするベクターの組み合わせおよびHIV-1タンパク質の組み合わせに基づく組成物の設計において柔軟性をもたらす。
ワクチンは、個体における抗原または抗原に対する免疫応答を誘導することにより、感染症または疾患を予防または軽減する点で有用である。例えば、ワクチンをナイーブ個体において予防的に用いること、またはHIVにすでに感染した個体において治療的に用いることが可能である。不活化ウイルスまたはサブユニットタンパク質抗原を含む従来のワクチンは、免疫原性が乏しく、細胞性免疫誘導能に乏しく、安全性および安定性に懸念がある上に効果が低い。核酸ワクチンの開発は有望であることが実証されている。
初代HIV分離株の抗原をコードする核酸組成物を提供する。抗原をコードする核酸を宿主に提示するためのやり方は数多くある。DNAワクチンが、抗原をコードする裸のDNAプラスミドからなってもよい。細菌ベクター、レプリコンベクター、弱毒化生菌、DNAワクチンと弱毒化生ベクターとの同時送達、およびウイルスベクターを用いることもできる。BCGおよびリステリアなどの細菌ベクターを異種遺伝子の発現のために用いることもできる。裸のDNAレプリコンベクターの場合には、哺乳動物発現プラスミドがレプリコンの初期転写のための媒体としての役割を果たす。レプリコンは細胞質中で増幅され、異種遺伝子をコードするmRNAの量がその結果増えるため、初期トランスフェクション効率は免疫原性にとってそれほど重要ではない。弱毒化生ウイルスベクター(例えば、組換えワクシニア(例えば、改変ワクシニアAnkara(MVA)、IDT Germany)、組換えアデノウイルス、禽痘ウイルス(例えば、カナリア痘(例えば、ALVAC((登録商標)), Aventis Pasteur)または鶏痘)、ポリオウイルスおよびアルファウイルスビリオンベクター)は細胞性免疫応答の誘導に成功しており、これらを用いることもできる。禽痘ウイルスは哺乳動物宿主における複製能を欠損しているが、挿入された異種遺伝子を初期プロモーターの下で発現することができる。組換えアデノウイルスベクターおよびポリオウイルスベクターは消化管内で生存できるため、効率的な粘膜免疫応答を誘発することができる。さらに、弱毒化細菌をDNAワクチン送達のための媒体として用いることもできる。適した細菌の例には、サルモネラ菌(S. enterica)、ネズミチフス菌(S. tymphimurium)、リステリア菌およびBCGが含まれる。細胞壁が脆弱な変異型細菌は細菌の外にDNAプラスミドが出るのを助ける。
本明細書に記載した核酸組成物は、水、食塩水、Tris-EDTA(TE)緩衝液またはリン酸緩衝食塩水(PBS)などの生理的適合性のある溶液中にある裸の核酸分子(例えば、裸のDNAプラスミド)として、個体に投与することができる。また、それらを、核酸の取り込みを促進する能力または免疫系細胞を接種部位に動員させる能力のある物質(例えば、促進因子およびアジュバント)の存在下で投与することもできる。アジュバントについては本明細書の別の箇所で述べた。ワクチンには多くの投与様式および投与経路がある。それらは皮内(ID)、筋肉内(IM)への投与が可能であり、いずれの経路による場合も、それらを針注射、遺伝子銃または針を用いないジェット式注射(例えば、Biojector(商標)(Bioject Inc., Portland, OR))によって投与することができる。その他の投与様式には、経口、静脈内、腹腔内、肺内、硝子体内および皮下接種が含まれる。局所接種も可能であり、これらは粘膜ワクチン接種と呼ぶことができる。これらには、鼻腔内、眼球、経口、腟内または直腸内の局所経路が含まれる。これらの局所経路による送達は、点鼻薬、点眼薬、吸入薬、坐薬またはミクロスフェアによることが可能である。
初代HIV分離株の抗原をコードするタンパク質(例えば、単離されたタンパク質)を、核酸組成物によるワクチン接種後に「追加免疫処置」として投与することができる。組換えタンパク質(例えば、標準的な分子生物学の技法を用いる、初代分離株の抗原をコードするDNAのクローニングによって作製されたタンパク質)は、追加免疫処置用の単離されたタンパク質の源の1つでありうる。個体の追加免疫処置のために用いられるタンパク質は、その個体に対して事前に投与されたDNAワクチンと同じ配列、例えば、gp120、gp140、gp160および/またはgp41を含みうる。
HIVタンパク質組成物を含む組成物による免疫処置、例えば注射、エアロゾル、経口的、経皮的、経粘膜的、胸膜内、髄腔内またはその他の適した経路によるものは、宿主の免疫系が組成物に対して応答するように誘導する。1つの態様では、Envタンパク質の組成物を投与する。1つの態様では、Envタンパク質およびGagタンパク質の組成物を投与する。
核酸組成物およびタンパク質組成物を含むキットを提供する。キットは、以下を含む1つまたは複数の他の要素を含みうる:使用のための指示書;その他の試薬、例えば、投与用の組成物を調製するための希釈剤、装置もしくは他の材料;薬学的に許容される担体;および対象への投与のための装置または他の材料。使用のための指示書は、本明細書に記載したような、推奨される投与量および/または投与様式(例えばヒト対象における)を含む、治療的適用(例えば、DNAワクチン接種およびタンパク質追加免疫処置)のための指示書を含みうる。
本明細書に記載した核酸組成物およびタンパク質組成物は、HIVに感染した対象の治療方法に用いることができる。これらの組成物を用いてこれらの対象を治療する方法には、他のHIV治療薬も投与する併用療法が含まれうる。例えば、DNAワクチン接種とタンパク質追加免疫処置を受ける対象に対して、抗レトロウイルス薬を個別に、または高活性抗レトロウイルス療法(「HAART」)(これはヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬、非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬およびHIVプロテアーゼ阻害薬の種々の組み合わせを用いる治療法のことを指す)として投与することができる。
免疫学の分野の進歩により、HIVワクチン候補に対する細胞応答のより徹底的かつ高感度な評価が可能になった。細胞内染色(例えば、フローサイトメトリー)およびELISPOT(固相酵素結合免疫アッセイ形式)などのアッセイにより、抗原に応答してサイトカイン(例えば、TNFαおよびIFN-γ)を産生する細胞の検出および算定が可能となる。例えば、動物またはヒト患者から脾細胞または末梢血単核細胞(PBMC)を単離した後に、V3などのHIVエピトープによるインビトロ曝露を行い、最後にELISPOTおよび/または細胞内サイトカイン染色(ICS)による検査を行うことにより、ワクチンのレシピエントにおける細胞性免疫応答の可能性を判定することができる。テトラマー(すなわち、所定のクラスI分子の4つのコピーがそのコグネイトペプチドおよびアルカリホスファターゼと結合したものからなる分子)を用いるフローサイトメトリーにより、抗原特異的T細胞の計数(例えば、主要組織適合性複合体(MHC)クラスI分子と結合した特異的ペプチドを認識するT細胞の検出)が可能となる。細胞毒性の評価には標準的なクロム遊離アッセイを用いることができる。DNAワクチンに対する細胞性免疫応答を評価するために、抗原に応答したT細胞増殖およびHIVエピトープを発現する自己細胞のCTLを介した死滅を測定するより一般的なアプローチを用いることもできる。
中和抗体応答を測定するためにMT-2アッセイを行うことができる。HIV-1 IIIBおよびMN(Bクレード実験室株の1つ)の抗体を介した中和は、以前に記載されたMT-2細胞死滅アッセイで測定可能である(Montefiori et al., 1988, J. Clin. Microbiol., 26: 231-237)。HIV-1 IIIBおよびMNはMT-2 T細胞における合胞体の形成を誘導する。血清による合胞体形成の阻害によって、ワクチン接種によって誘導された血清内に存在する中和抗体の活性が示される。手短に述べると、ワクチン接種を受けた被験血清および対照血清をウイルス感染細胞(例えば、MT-2 T細胞株)に対して曝露させる。中和は生細胞を染色することによって測定しうる(例えば、対照ウェルにおける細胞変性作用が約70%を上回るが100%未満である場合にはFinterのニュートラルレッドを用いる)。防御率は、被験ウェル(細胞+ウイルス)間の吸光度(A540)の差を算出して、この結果を細胞対照ウェル(細胞のみ)とウイルス対照ウェル(ウイルスのみ)との間の吸光度の差で除算することによって決定しうる。続いて、中和力価を、細胞の少なくとも50%をウイルスにより誘導される死滅から防御するために必要な血漿希釈度の逆数として表す。
本発明について以下の実施例でさらに説明するが、これは特許請求の範囲に記載された本発明の範囲を限定するものではない。
HIV-1初代Env gpの細胞外部分をコードする遺伝子断片を、gp120の形態、またはgp120とgp41との間の完全な天然切断部位を有する切断可能なgp140のいずれかとして、HIV-1 M群の7つの遺伝学的クレード(AからGまで)に相当する9種類の初代Env遺伝子からPCR増幅した(表1)。一対のコンセンサスPCRプライマーを設計し、9種類のgp120遺伝子の増幅に用いた:プラス鎖プライマーGP120-p-f1(p-cttgtgggtcacagtctattatggggtacc)(SEQ ID NO: 1)およびマイナス鎖プライマーGP120-p-b1(ggtcggatccttactccaccactcttctctttgcc)(SEQ ID NO: 2)。gp140遺伝子を増幅するためのコンセンサスプライマーはプラス鎖に対してはGP120-p-f1とし、マイナス鎖に対してはJAPCR502(cgacggatccttatgttatgtcaaaccaattccac)(SEQ ID NO: 3)とした。
DNA免疫処置
雌性New Zealandウサギ(2kg)に対して月3回のDNA免疫処置を遺伝子銃により行った。3回の各時点で、IACUCの承認を受けたプロトコールに従ってウサギに麻酔を施した後、剃毛した腹部皮膚の表面に、1回の注入毎にDNA 1μgを送達する形式で、重複しないように合計36回の注入による送達を各ウサギに対して行った。各々の免疫処置の直前および4週後に血清試料を採取した。
ELISAにより、ウサギ血清試料をgp120特異的IgG抗体応答に関して検査した。マイクロタイタープレートにConA(1ウェルにつき5μg)を1時間コーティングした後に、洗浄バッファー(PBS pH 7.2、0.1% Triton X-100を含む)で5回洗浄した。Env抗原を1μg/mlとなるように添加し(1ウェルにつき100μl)、室温で1時間インキュベートした。ブロッキングは200μl/ウェルの4%乳清ブロッキングバッファーにより室温で1時間行った。ブロッキングバッファーを除去してさらに5回洗浄した後、連続希釈した血清100μlを添加し、1時間インキュベートした。プレートを5回洗浄し、1:1000に希釈したビオチン化抗ウサギIgG 100μlと1時間インキュベートした後に洗浄した。続いて、1:2000に希釈した西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン(100μl/ウェル)を添加し、1時間インキュベートした。最後の洗浄の後に、新たなTMB基質100μlを各ウェルに添加し、3.5minインキュベートした。2M H2SO4 25μlを添加することによって反応を停止させ、プレートの光学密度(OD)を450nmで測定した。gp120に対する血清反応性を評価するELISAアッセイについては以下の実施例で説明している。
293T細胞上清および細胞可溶化物から一時的に発現されたgp120抗原を変性SDS-PAGEにかけ、ポリビニリデンフルオリド(PVDF)膜に対してブロットした。ブロッキングは0.1%のI-Blockにより行った。混合型多価gp120DNAワクチンによる免疫処置を行ったウサギ血清を1:500希釈して検出用抗体として用い、45分間インキュベートした。その後に膜をブロッキングバッファーで洗浄し、APを結合させたヤギ抗ウサギまたはヒトIgG(1:5000希釈)と反応させた。最後の洗浄の後に、ウエスタンライト(Western-light)基質を膜に5分間適用した。膜を乾燥させた上で、膜によりKodakフィルムを感光させ、X-Omat処理装置で現像した。Env反応性もウエスタンブロット法によって観察した。
動物におけるワクチンの有効性を判定する1つの手法は、その動物の免疫細胞のインビトロ機能アッセイを行うことである。上記の末梢血単核細胞(PBMC)アッセイおよびMT-2アッセイは、ワクチン接種を受けた被験動物における体液性応答のインビトロでの評価の例である。以下に述べるように、ワクチン接種を受けた動物の免疫細胞の機能的能力を評価するために細胞性免疫応答を検査することもできる。ワクチンの有効性の判定において、これらのアッセイを、ヒト対象から単離した免疫細胞を用いてインビトロで行うこともできる。
ワクチン接種を受けた動物の血清中の中和抗体の存在を、中和アッセイと呼ばれる機能アッセイで調べた。ウサギに対して、1価ワクチン(行3〜10)または多価ワクチン(行11)を用いて、上記の実施例2に記載した通りに免疫処置を行った。左の列に、ウサギがワクチン接種を受けた初代分離株ワクチンを示している。3回目の免疫処置から4週後に採取した血清を、種々の初代ウイルス分離株(一番上の行に示した)に感染させた末梢血単核細胞(PBMC)に対して適用した。表2は、1価および多価免疫処置ならびにウサギ免疫処置に関するこのPBMC中和アッセイの結果を示している。このアッセイによる結果は、免疫処置したウサギ血清を含まないウイルス対照と比較したウイルス抑制率として表されている。1価ワクチン接種による結果は、自己に対する応答能力はあるという一般的な傾向を示している。しかし、多価ワクチンを用いた一番下の行では、被験初代ウイルス分離株ウイルスのいずれに対しても57%を上回る抑制率が得られたことが見てとれ、このことは、多価初代HIV-1 Envワクチンが、このワクチンを接種したウサギにおける幅広い中和抗体応答を生じさせることができたことを示している。
新たなDNAワクチンの有効性を動物モデルで調べることが可能である。非ヒト霊長動物(例えば、チンパンジー)などのようにHIVに感染しうる動物、または流血中にヒト免疫細胞が存在するマウスなどの動物における応答を調べることが好ましい。統計学的有意性を得るためには十分に多い数の動物を用いるべきであるが、非ヒト霊長動物の場合にはその数が限られていることがあるため、例えば同一の個体で実験を繰り返す場合もある。ひとたび被験動物にワクチン接種を行い、同じベクターを含むが異種Env gp DNAは含まない陰性対照によるワクチン接種を対照動物に行った上で、両群の動物にHIVを感染させる。それらには初代分離株を感染させても実験室株を感染させてもよく、またはその両方を感染させてもよい。HIV感染が起こり、陰性対照ワクチンによる接種を受けた動物でT細胞数の低下が認められはじめるまで適した期間を置いた後に、被験動物および対照動物を防御免疫応答に関して検査する。
表3に列記した抗原を用いてDNA組成物およびタンパク質組成物を調製した。図1に示した試験デザインに従ってウサギに抗原を投与した。
コドン最適化がなされたGag DNAワクチン(tPAリーダー配列を含む、または含まない)によって誘発される細胞性免疫(CMI)応答について検討した。
* Gag p24ペプチド(199-207)AMQMLKDTI;参照ペプチド配列、p24(aa 65-73)
1価または4価製剤のいずれかとしてのHIV-1 Env DNAワクチンの免疫原性を検討した。この試験では、New Zealand White(NZW)ウサギ(雌)に対して、初代HIV-1 Env抗原を発現するDNAワクチンによる免疫処置を行った。各群には2匹(群10、11、14および17)または3匹のウサギ(群1および3)を含めた。各個体に月4回のDNA免疫処置を行い、1回の免疫処置につき合計36μgのDNAプラスミド(1価群に関しては単一のDNAを36μg、4価群に関しては各DNAを9μgずつ)を遺伝子銃(Bio-Rad)によって送達した。この試験にはコドンが最適化されていないDNAワクチンを用いた。最終DNA免疫処置から2週後に採取した血清を、抗Env IgG応答のレベルに関してELISAにより測定した。ELISAプレートには組換え初代Env抗原をコーティングした。これらの実験における開始時の血清希釈度は1:500とした。
ウサギにおける多価Env DNA+タンパク質ワクチンの免疫原性を評価した。New Zealand Whiteウサギ(雌)に対して、初代HIV-1 Env抗原を発現するDNAワクチンによる免疫処置を行った。各群にはウサギ3匹を含めた。各個体に月4回のDNA免疫処置を行い、1回の免疫処置につき36μgのDNAプラスミド(3価群に関しては各DNAを12μgずつ、8価群に関しては各DNAを4.5μgずつ)を遺伝子銃(Bio-Rad)によって送達した。この試験にはコドンが最適化されていないDNAワクチンを用いた。
最終DNA免疫処置の2週後および各タンパク質追加免疫処置の後に採取した血清を、抗Env IgG応答のレベルに関してELISAにより測定した。
多数の初代HIV-1分離株に対するDNA初回免疫+タンパク質追加免疫ワクチンレジメンによって誘発される中和抗体応答について検討した。表7に示したように、各個体に対する月4回のDNA免疫処置(DNA初回免疫処置)および月2回のタンパク質追加免疫処置を、以下に述べるさまざまな個別の用量で行った。1価群および3価群に関しては、タンパク質追加免疫処置をDNA初回免疫処置と対応させ、同じ初代gp120抗原を用いた。1価群(C1群)には初代HIV-1 Env抗原の1つであるgp120.Ba-Lを投与した。3価群(C4群)には3種類の初代HIV-1 Env抗原を投与した:gp120-B、gp120-C1およびgp120-E。8価群(C7群)の場合には、以下の8種類の初代HIV-1 Env抗原:gp120.A、gp120-B、gp120-Ba-L、gp120-C、gp120-D、gp120-E、gp120-Fおよびgp120-Gを発現するDNAワクチンを投与し、その後に以下の4種類の組換えgp120抗原:gp120-B、gp120-Ba-L、gp120-Cおよびgp120-Eを含むタンパク質追加免疫処置を行った。C10群は対照群であり、ウサギに対してエンプティDNAベクターpSW3891をまず4回接種し、その後に4種類のEnvタンパク質抗原(第7群と同じ)の混合物によるタンパク質追加免疫処置を行った。この前臨床試験では、DNAワクチン中に挿入されたenv遺伝子のコドンは最適化しなかった。
DP6-001ワクチンに用いる予定であったコドン最適化がなされたenvおよびgag DNAワクチン成分ならびにEnvタンパク質追加免疫成分の免疫原性を検討した。ウサギに対して、遺伝子銃、IDまたはIM接種によってDP6-001ワクチンのDNA成分による免疫処置を行い、その後に、抗Env抗体応答を比較しうるように、gp120タンパク質追加免疫処置をIM経路によって行った。DP6-001タンパク質追加免疫処置に用いたタンパク質のアミノ酸配列は図14に示されており、配列は互いに整列化されている。以前のウサギ試験では、コドン最適化がなされていないDNAワクチンのみを用いた。
毒性試験に用いたウサギからの血清にDP6-001ワクチン免疫原に反応する抗Env抗体および抗Gag抗体があるか否かを検討するために、New Zealand Whiteウサギに対するDP6-001ワクチンの反復投与によって誘発される抗体応答に関して評価した。DNA免疫処置段階に関しては、ウサギ(少なくとも合計5匹/各性別/群)に対して、多価DNAワクチンによる筋肉内免疫処置を4週毎に計4回行い、1回の免疫処置につき1個体当たり合計7.2mg(1つのDNAにつき1.2mlの希釈液として)の用量を投与するか、または皮内に1回の免疫処置につき1個体当たり合計3.6mg(1つのDNAにつき0.6mgの希釈液として)の用量を投与した。対照動物には食塩液対照の皮内注射と筋肉内注射を(注射日毎に)交互に行った。タンパク質追加免疫段階に関しては、ウサギに対して、筋肉内多価DNAワクチンによる筋肉内免疫処置を4週毎に計3回行い、1回の免疫処置につき1個体当たり合計0.375mg(1つのgp120につき0.075mg)の用量を投与した。タンパク質の1回の用量は、0.05mgのアジュバントQS-21および賦形剤として30mgのシクロデキストリンを含む。QS-21は、キラヤ(Quillaja saponaria Molina)皮抽出物から高純度で入手しうるサポニンアジュバント(3,28-O-ビスグルコシドキラヤ酸)である(Kensil, et al., 1998, Dev Biol Stand., 92: 41-7)。4回のDNA免疫処置または4回のDNAと3回のタンパク質免疫処置のいずれかの14日後に各ウサギから血清を採取し、プールしたgp120(DP6-001中の免疫原)およびGagタンパク質に対する抗体に関してELISAによりアッセイした。対照動物からの血清もバックグラウンドの反応性に関してアッセイした。
多価DNA初回免疫・gp120タンパク質追加免疫ワクチンの免疫原性を評価するために、非ヒト霊長動物において2つの試験を行った。第1の試験(DNA wt/タンパク質試験1と呼ぶ)では、野生型gp120(B715、Ba-L、CzmおよびE)遺伝子およびgag(pNL4-3)遺伝子をコードする5種類のDNAワクチンをID経路または遺伝子銃経路により送達した。タンパク質追加免疫原はクレードB715、Ba-L、CzmおよびEからのgp120からなる。この試験により、遺伝子銃によって送達したDNAでは抗体応答の方がCMI応答よりも上回り、一方、ID経路により送達したDNAでは測定可能なCMI応答がみられることが明らかになった。ID群および遺伝子銃群のいずれにおいても、抗体応答はgp120追加免疫処置後に著しく増大した。CMI応答および抗体応答の両方を誘発するために、A、B715、Ba-L、CzmおよびE分離株由来のコドン最適化がなされたgp120遺伝子ならびにCzm gag遺伝子を含むDP6-001ワクチンの免疫原性を検討する、第2の試験(DNA opt/タンパク質試験2と呼ぶ)を行った。この試験ではDNAをID経路またはIM経路のいずれかにより送達した。
本実施例における実験は、アカゲザルにおいて、1種類のGagタンパク質および4種類のEnvタンパク質をコードする多価DNAワクチンによる初回免疫処置に続いて、DNAワクチンと同種の4種類のgp120タンパク質による追加免疫処置を行うことによって誘発される免疫応答を検討する目的で行った。6頭のアカゲザル(雄)をこの試験に含めた。この試験で検査した多価ワクチン製剤は1種類のGag抗原および4種類のEnv抗原を有しており、1種類のGag抗原および5種類のEnv抗原を有するDP6-001製剤とは異なる。これらのサルに対して、5種類のDNAプラスミド(クレードB Ba-L、クレードB B715、クレードC CzmおよびクレードE 976からの野生型env遺伝子をコードするプラスミド4種;ならびにHIV-1クレードBのgag遺伝子をコードするプラスミド1種)の混合物の食塩水溶液による免疫処置を4回行った。3頭(961L、963Lおよび969L)には遺伝子銃によりDNAを接種し、一方、残りの3頭(971L、974Lおよび975L)にはID経路によりDNAを投与した。続いて各個体に対して、B、Ba-L、CzmおよびEに相当する4つの分離株由来の精製gp120による追加免疫処置をIM経路により2回行った。各々のID免疫処置では、各プラスミドDNAを500μgずつ(合計2.5mg)別々に注射した。遺伝子銃接種に関しては、各DNAを20μgずつ(合計100μg)を送達した。それぞれのサルに、各gp120を75μgずつ(プールgp120として300μg)、QS-21アジュバント100μgを含むPBS溶液中に配合したものを投与した。サルに対するDNA免疫処置を第0週、6週、12週および18週に行い、続いてタンパク質追加免疫処置を第24週および32週に行った。血清の採取は指定された時点、一般的には各々の免疫処置の2週後に行った。
アカゲザルにおいてDP6-001ワクチンによって誘発される体液性免疫応答および細胞性免疫応答について検討した。6頭(雄5頭および雌1頭)のアカゲザルをこの試験の対象とした。これらのサルに対して、6種類のDNAプラスミド(クレードA、B Ba-L、クレードB B715、クレードC CzmおよびクレードE 976由来のコドン最適化がなされたenv遺伝子をコードするプラスミド5種;ならびにHIV-1クレードCのgag遺伝子をコードするプラスミド1種)の混合物の食塩水溶液による免疫処置を4回行った。3頭(51M、978L、980L)にはIM経路によりDNAを接種し、3頭(991L、997L、998L)にはID経路によりDNAを投与した。続いて各個体に対して、A、B、Ba-L、CzmおよびEに相当する5つの分離株由来の精製gp120による追加免疫処置をIM経路により2回行った。各々の免疫処置では、各プラスミドDNAを500μgずつプールし(合計3mg)、総容量2mlの食塩水中に懸濁させた。各個体に対して、IM経路またはID経路により、合計3mgのDNAを投与した。ID接種に関しては、DNAを19の部位(1部位当たり100μl)に送達した。IM接種に関しては、DNAを4つの部位(1部位当たり500μl)に送達した。サルに対して、375μgのプールgp120(各gp120につき75μg)を、QS-21アジュバント100μgを含むPBS溶液中に配合したものを投与した。サルに対するDNA免疫処置を第0週、6週、12週および18週に行い、続いてタンパク質追加免疫処置を第24週および32週に行った。血清の採取は各免疫処置から約2週後に行った。結合抗体アッセイのために血清を最長49週まで採取した。
1 中和力価は、非処置対照との比較で50%を抑制する免疫血清の希釈度に基づいて算出している。
2 HIV-1CzmおよびHIV-1B715の中和は、HIV-1CzmまたはHIV-1B715に慢性的に感染させたCEM細胞を免疫血清の存在下で非感染性CEM細胞と共培養し、48hr後に合胞体を評価するという細胞間伝達アッセイによってアッセイした。
1 中和力価は、非処置対照との比較で50%を抑制する免疫血清の希釈度に基づいて算出している。
3 各血清を1:15希釈し、指定されたHIV-1分離株の中和に関して指標細胞株を用いて検査した。抑制率は、化学発光出力により測定した、免疫血清の存在下で観察された感染の程度と非処置対照との比較を基にした。
IM経路またはID経路によるDNAの単回免疫処置後の64日間にわたるDNAの生体内分布を調べた。54匹のウサギ(雌雄各27匹)をこの試験に用いた。ウサギを3つの群に等分した。まずウサギを体重および身体検査所見に基づいて無作為化用プールに含めた。コンピュータにより生成された乱数を用いてそれらを試験群に割り当てた。無作為化に際しては、各群の平均体重が対照の平均と有意差がないようにした。ウサギを表13に示した3つの群に割り当てた。対照動物(第1群)に対しては食塩水を皮内および筋肉内に1回注射した。第2群のウサギには7.2mgのHIVワクチン(プラスミド)DP6-001の単回投与を筋肉内に行い(注射部位1つにつき1.2ml、合計2.4ml)、第3群のウサギには皮内経路により3.6mgのHIVワクチン(プラスミド)DP6-001を単回接種した(注射部位1つにつき0.12ml、合計1.2ml)。筋肉内投与は左および右の大腿筋の2つの注射部位に均等に配分した(大腿毎に1.2mlを投与)。皮内投与は背部に位置する10箇所の注射部位に均等に配分した(注射部位1つ当たり約0.12ml)。注射部位はすべて剃毛し、標示を付した。全体的な試験デザインは表13に記載されている。
2 IM:筋肉内;IM/ID:筋肉内と皮内の併用(投与日毎に筋肉内と皮内の投与経路を交互に用いる);ID;皮内;NA:該当せず
3 投与容量は動物の体重にかかわらず一定とする。
DP6-001ワクチン製剤の忍容性および安全性のプロファイルをウサギモデルで検討した。このワクチン製剤はDNA成分およびタンパク質成分の両方を含むため、これらの成分の両方の毒性の有無に関して、第I相試験に用いる予定の最大用量を用い、各ウサギに対して臨床的プロトコールよりも1回余分に接種を行う形式で検討した。臨床試験で提案されているように、この毒性試験ではDNAはIM経路またはID経路のいずれかによって送達し、タンパク質はIM経路により接種した。タンパク質免疫原はQS-21アジュバントおよび賦形剤シクロデキストリンとともに製剤化される可能性があるため、QS-21/シクロデキストリン混合物の毒性に関しても、試験の別の項目で、臨床試験に用いる予定の用量を用いて検討した。この毒性試験の目立った特徴および全体的な結論について以下に考察する。
1 示した値はヒトで予想される最大の臨床用量に対する倍数である。
2 タンパク質は50μgのQS-21および30mgのシクロデキストリンとともに投与される。
3 IM:筋肉内;IM/ID:筋肉内と皮内の併用(投与日毎に筋肉内と皮内の投与経路を交互に用いる);UDL;皮内;NA:該当せず
4 投与容量は動物の体重にかかわらず一定とする。
HIVプラスミドワクチンDP6-001の筋肉内投与は皮膚観察所見に影響を及ぼさなかった。プラスミドの筋肉内注射の場合(投与部位1および2)には、主としてごく軽微なスコアの紅斑および浮腫が認められた(例外として少数は軽度スコアであった)。これらの観察所見は対照群(第1群および第2群)にもみられたため、それらは被験物とは関係なく、注射処置に伴うものと判断された。
いずれの群においても体重および体重増加に関して処置と関係のある影響は認められなかった。さらに、食物摂取に関しても処置と関係のある影響はいずれの群にも認められなかった。
ウサギにおいて、HIVワクチンDP6-001の多回反復投与に起因する、被験物と関係のある明らかな影響はみられなかった。いくつかの群でSD31および87に認められたグロブリン高値は極めてわずかに過ぎず、抗体産生に起因する可能性もあるが、動物個体間のばらつきに起因する可能性が最も高いと考えられた。他の軽微な変化はすべて動物個体間のばらつきに起因するものとされ、生物学的な意味は認められなかった。
肉眼的病理所見に関して、処置と関係のある影響はみられなかった。組織病理学な相関がみられず、容量反応関係も認められず、所見の大半は対照動物にも認められたことから、これらの所見は被験物とは関係ないと判断された。
いずれの群においても臓器重量に関して処置と関連のある変化はみられなかった。臓器重量、臓器-体重比および臓器-脳重量比における統計学的に有意な変化には以下が含まれる:第4群の雌のSD 87での脳重量の減少、第3群の雌のSD 171での胸腺重量の減少、第3群の雌のSD 183での副腎、心臓および脾臓重量の減少、ならびに第3群の雌のSD 183での脾臓-体重比および心臓-脳重量比の低下。明らかなパターンが認められず、それらは食塩水対照である第1群または2群との比較による第3群アジュバント対照動物における組織重量または比の変化を含んでいたため、これらの変化は被験物とは関係ないと判断された。
いずれの群においても組織病理所見に関して処置と関連のある影響はみられなかった。
ヒトでの臨床試験は、ワクチンの安全性を判定するため、およびワクチンの有効性を判定するために行われる。安全性を判定するためには、健常志願者に対してワクチンを接種する。副作用の発生率を調べる。有効性を判定するためには、NIHにより確立されたプロトコールに従う。高リスク集団(例えば、薬物乱用者、高リスクの性行為を行っている集団、HIVの発生率が高い集団)。高リスク集団の試験を行うためには、ベクターのみを含むDNAワクチンを接種した陰性対照群におけるHIV感染の発生率を、初代分離株配列(例えば、gp120、gp140、gp160および/またはgp41の配列)を含む多価DNAワクチンを投与した被験群におけるHIV感染の発生率と比較する。二重盲検試験を行う。免疫処置レジメンは、例えば、それぞれ1カ月間隔で行われる、遺伝子銃による3回のDNAワクチン免疫処置である。レジメン期間間に血清を採取し、上記の実施例2〜4に記載したような実験により、免疫状態をモニタリングする。さらに、ヒト患者における細胞性免疫(CTL応答)を調べる。PBMCを単離した後に、これらの細胞のインビトロ機能検査を、上記の実施例4に脾細胞に関して記載したようにして行う。次に、上記の実施例3に記載した通りに、患者の血清中の中和抗体の存在を調べる。HIVによる感染を検査し、対照群と被験群との間で発生率に有意差があるか否かを判定する。
本発明をその詳細な記載とともに説明してきたが、以上の説明は本発明を例示するためのものであって、その範囲を制限するものではなく、それは添付する特許請求の範囲によって規定されることが理解される必要がある。その他の面、利点および改変は本発明の範囲に含まれる。
(図2)1価ワクチンおよび多価ワクチンによる免疫処置を行ったウサギから単離した血清による初代HIV-1分離株の中和率を示した表である。血清はDNA免疫処置後に単離した。動物番号は図1に示したウサギ番号に対応する。
(図3)1価ワクチンおよび多価ワクチンによる免疫処置を行ったウサギから単離した血清による初代HIV-1分離株の中和率を示した表である。血清は初回のタンパク質追加免疫処置後に単離した。動物番号は図1に示したウサギ番号に対応する。
(図4)1価ワクチンおよび多価ワクチンによる免疫処置を行ったウサギから単離した血清による初代HIV-1分離株の中和率を示した表である。血清は2回のタンパク質追加免疫処置後に単離した。動物番号は図1に示したウサギ番号に対応する。
(図5)図5A〜5Cは、1価ワクチンおよび多価ワクチンによる免疫処置を行ったウサギからの血清による中和率を示した一組のグラフである。「最終DNA」は、最後のDNA免疫処置後に採取した血清に関するアッセイに対応する。「タンパク質-I」は、初回のタンパク質免疫処置後に採取した血清に関するアッセイに対応する。
(図6)ELISAにより測定した、DNA初回免疫処置後の抗env IgG応答の滴定終点力価を示した表である。ELISAプレートは、表記した種々の初代gp120抗原(Ba-L、C1、E、B、A、D、FまたはG)によりコーティングした。
(図7)図7A〜7Fは、3価gp120ワクチンによる免疫処置動物群C4における、DNA初回免疫処置およびタンパク質追加免疫処置の後の抗gp120抗体応答を示したグラフである。「最終DNA」は、4回目のDNA免疫処置後に収集した血清のことを指す。「タンパク質I」は、1回のタンパク質追加免疫処置後に収集した血清のことを指す。「タンパク質II」は、2回のタンパク質追加免疫処置後に収集した血清のことを指す。B、C1およびE DNAならびにB、C1およびEタンパク質による免疫処置を行ったウサギからの血清に関するデータを提示している。図7Aおよび7Bは、B Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図7Cおよび7Dは、C1 Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図7Eおよび7FはE Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。
(図8)図8A〜8Pは、8価gp120ワクチンによる免疫処置動物群C7における、タンパク質追加免疫原に含まれるEnv抗原に対する抗gp120 IgG応答を示したグラフである。Ba-L、B、C1、E、A、D、FおよびG DNAによる免疫処置を行った上で、B、Cl、EおよびBa-Lタンパク質による追加免疫処置を行ったウサギからの血清に関するデータを提示している。図8Aおよび8Bは、B Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Cおよび8Dは、Ba-L Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Eおよび8Fは、C Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Gおよび8Hは、E Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Iおよび8Jは、A2 Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Kおよび8Lは、D Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Mおよび8Nは、F Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。図8Oおよび8Pは、G Envタンパク質に対して検査した血清に関するデータを示している。
(図9)免疫処置の前、DNA免疫処置後および1回のタンパク質追加免疫処置後に入手したウサギ血清による、HIV-1 89.6-GFPレポーターウイルスに対する中和率を示したグラフである。各動物群に対して、表記した種々のgp120製剤による免疫処置を行った。
(図10)免疫処置の前、DNA免疫処置後、1回のタンパク質追加免疫処置後および2回のタンパク質追加免疫処置後に入手したウサギ血清による、HIV-1 SF162に対する中和率を示したグラフである。各動物群に対して、表記した種々のgp120製剤による免疫処置を行った。
(図11)免疫処置の前、DNA免疫処置後、1回のタンパク質追加免疫処置後および2回のタンパク質追加免疫処置後に入手したウサギ血清による、HIV-1 Ba-Lに対する中和率を示したグラフである。各動物群に対して、表記した種々のgp120製剤による免疫処置を行った。
(図12)免疫処置の前、DNA免疫処置後、1回のタンパク質追加免疫処置後および2回のタンパク質追加免疫処置後に入手したウサギ血清による、HIV-1 JRCSFに対する中和率を示したグラフである。各動物群に対して、表記した種々のgp120製剤による免疫処置を行った。
(図13)図13A〜13Dは、DNA初回免疫処置およびタンパク質追加免疫処置の後のウサギ血清による、HIV-1クレードA初代分離株DJ263(図8Aおよび8D)およびクレードC初代分離株TV1(図8Bおよび8C)の中和率を示した一組のグラフである。各動物群に対して、表記した種々のgp120製剤による免疫処置を行った。
(図14)A、Ba-L、B715、CzmおよびB分離株からのgp120のアミノ酸配列を示している。
(図15)図15A〜15Eは、各々のDNA免疫処置後および各々のgp120タンパク質追加免疫処置後の抗gp120 IgG応答のレベルを示した一組のグラフである。ELISAのためにコーティングした抗原を各図の上に示している(図15A、15B、15Cおよび15DはそれぞれクレードA、B、CzmおよびE)。DNAおよびタンパク質の投与の時点はそれぞれ、実線および点線の矢印で示されている。「GG」は遺伝子銃投与を表す。「IM」は筋肉内投与を表す。「ID」は皮内投与を表す。
(図16)図16Aおよび16Bは、DNAをIM経路により送達する様式でDP6-001ワクチンによる免疫処置を行ったウサギにおける抗gp120応答のレベルを示した一組のグラフである。4回のDNA接種(IM)(●)、または4回のDNA接種(IM)と3回のタンパク質接種(IM)(○)による免疫処置を行ったウサギの血清のELISA反応性を示している。血清は最終DNAまたはタンパク質による免疫処置から14日後に収集し、クレードB(B715およびBa-L)、C、EおよびAのHIV-1分離株からプールしたgp120に対して検査した。雄に関するデータを図16Aに示した。雌に関するデータを図16Bに示した。
(図17)図17Aおよび17Bは、DNAをID経路により送達する様式でDP6-001製剤による免疫処置を行ったウサギにおける抗gp120応答のレベルを示した一組のグラフである。4回のDNA接種(ID)(●)、または4回のDNA接種(ID)と3回のタンパク質接種(IM)(○)による免疫処置を行ったウサギの血清のELISA反応性を示している。血清は最終DNAまたはタンパク質による免疫処置から14日後に収集し、クレードB(B715およびBa-L)、C、EおよびAのHIV-1分離株からプールしたgp120に対して検査した。雄に関するデータを図17Aに示した。雌に関するデータを図17Bに示した。
(図18)図18Aおよび18Bは、DNAをIM経路により送達する様式でDP6-001製剤による免疫処置を行ったウサギにおける抗gag応答のレベルを示した一組のグラフである。4回のDNA接種(IM)(●)、または4回のDNA接種(IM)と3回のタンパク質接種(IM)(○)による免疫処置を行ったウサギの血清のELISA反応性を示している。血清は最終DNAまたはタンパク質による免疫処置から14日後に収集し、Gagタンパク質に対して検査した。雄に関するデータを図18Aに示した。雌に関するデータを図18Bに示した。
(図19)図19Aおよび19Bは、DNAをID経路により送達する様式でDP6-001製剤による免疫処置を行ったウサギにおける抗Gag応答のレベルを示した一組のグラフである。4回のDNA接種(ID)(●)、または4回のDNA接種(ID)と3回のタンパク質接種(IM)(○)による免疫処置を行ったウサギの血清のELISA反応性を示している。血清は最終DNAまたはタンパク質による免疫処置から14日後に収集し、Gagタンパク質に対して検査した。雄に関するデータを図19Aに示した。雌に関するデータを図19Bに示した。
(図20)図20A〜20Eは、多価DNAおよびgp120タンパク質による免疫処置を行ったマカクザル(macaque)における抗体価を示した一組のグラフである。2回(DNA2)、3回(DNA3)および4回(DNA4)のDNA免疫処置ならびに1回(タンパク質1)および2回(タンパク質2)の追加免疫処置を受けたマカクザルの血清における抗体価を、B715 gp120(A)、Ba-L gp120(B)、Czm gp120(C)、E960 gp120(D)およびGag(E)タンパク質に対するELISAによってアッセイした。血清は各々の免疫処置から2週後に収集した。抗体価はエンドポイントELISA力価に基づいており、ナイーブ動物からの血清の対応する希釈度と比較して、450nmでの光学密度が2倍となる免疫血清の希釈度から得た。
(図21)図21A〜21Cは、DNA初回免疫処置およびタンパク質追加免疫処置による免疫処置を行ったマカクザルの血清によるSHIV Ba-Lの中和率を示した一組のグラフである。4回のDNA(DNA 4)ならびに1回(タンパク質1)および2回(タンパク質2)の追加免疫処置の後に各動物から収集した血清を、U373細胞内のSHIVBa-L分離株に対する中和活性に関してアッセイした。感染の阻止率は、免疫血清の存在下で観察された感染の程度と非処置対照との比較を基とした。
(図22)図22A〜22Eは、多価DNAおよびgp120タンパク質による免疫処置を行ったマカクザルにおける血清のエンドポイントELISA力価を示した一組のグラフである。2回(DNA 2)、3回(DNA 3)および4回(DNA 4)のDNA免疫処置ならびに1回(タンパク質1)および2回(タンパク質2)の追加免疫処置を受けたマカクザルの、タンパク質追加免疫処置から5、9および13週後の血清における抗体価を、Ba-L gp120(A)、A gp120(B)、E760 gp120(C)、B715 gp120(D)およびCzm gp120(E)タンパク質に対するELISAによってアッセイした。血清は各々の免疫処置から2週後ならびに2回目のタンパク質追加免疫処置から5、9および13週後に収集した。抗体価はエンドポイントELISA力価に基づいており、ナイーブ動物からの血清の対応する希釈度と比較して、450nmでの光学密度が2倍となる免疫血清の希釈度から得た。
(図23)図23A〜23Cは、DNA初回免疫処置およびタンパク質追加免疫処置による免疫処置を行ったマカクザルの血清によるSHIV Ba-Lの中和率を示した一組のグラフである。4回のDNA(DNA 4;図23A)ならびに1回(タンパク質1;図23B)および2回(タンパク質2;図23C)の追加免疫処置の後に各動物から収集した血清を、U373細胞内のSHIVBa-L分離株に対する中和活性に関してアッセイした。感染の阻止率は、免疫血清の存在下で観察された感染の程度と非処置対照との比較を基とした。
(図24)図24A〜24Rは、DNA/タンパク質製剤による免疫処置を行ったマカクザルにおけるIFN-γを発現するPBMCの数を示した一組のグラフであり、PBMCはGagペプチドで刺激した。ELISPOTアッセイを、4回目のDNA処置(DNA 4)、初回(タンパク質1)および2回目(タンパク質2)のgp120タンパク質追加免疫処置の後に単離したマカクザルのPBMCを用いて行った。HIV-1HXB2分子クローン由来のGagタンパク質からの11アミノ酸の重複のある15merペプチドのいくつかのプールを用いてPBMCを18hr刺激し、その後にスポットの現像および定量を行った。ID免疫処置に関するデータを図24A〜24Iに示した。IM免疫処置に関するDNAを図24J〜24Rに示した。
(図25)図25Aおよび25Bは、野生型およびコドン最適化を行ったgag遺伝子をコードするDNA製剤による免疫処置を行ったマカクザルからのIFN-γを発現するPBMCの数を示した一組のグラフであり、PBMCはGagペプチドで刺激した。野生型およびコドン最適化を行ったgag遺伝子をコードするDNAによる免疫処置を皮内経路によって行ったマカクザルにおける、Gagタンパク質に対するELISPOTにより測定した、IFN-γを発現するPBMCの比較(試験1は図25A、試験2は図25B)。
(図26)図26A〜26Dは、パク質製剤による免疫処置を行ったマカクザルからのIFN-γを発現するPBMCの数を示した一組のグラフであり、PBMCはクレードEおよびBa-L Envペプチドで刺激した。ELISPOTアッセイを、4回目のDNA処置後(DNA 4;図26Aおよび26C)および初回タンパク質追加免疫処置後(タンパク質1;図26Bおよび26D)に単離したマカクザルのPBMCを用いて行った。HIV-1Ba-LおよびクレードE分離株由来のgp120タンパク質からの11アミノ酸の重複のある15merペプチドの4つのプールを用いてPBMCを18hr刺激し、その後にスポットの現像および定量を行った。
(図27〜図38)図27〜38は、Czm、Ba-L、B、EおよびA HIV-1分離株のgp120遺伝子およびgag遺伝子の野生型およびコドン最適化を行ったDNA配列を示したものである。
Claims (80)
- それぞれの核酸分子がヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質をコードする、核酸分子の複数のセットを含む核酸組成物であって、核酸分子の各セットが、異なるタイプのHIVエンベロープ糖タンパク質をコードするか、または異なる遺伝学的クレード(genetic clade)からの初代分離株配列(primary isolate sequence)を含む、核酸組成物。
- 核酸がDNAプラスミドを含む、請求項1記載の核酸組成物。
- HIVエンベロープ糖タンパク質が、gp120、gp140、gp160およびgp41のうちの任意の1つまたは複数である、請求項1記載の核酸組成物。
- HIV gagタンパク質をコードする核酸分子のセットをさらに含む、請求項1記載の核酸組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、HIV-1エンベロープ糖タンパク質である、請求項1記載の核酸組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、gp120エンベロープ糖タンパク質である、請求項1記載の核酸組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、主要(major)(M)群のクレードに属するクレードからのものである、請求項1記載の核酸組成物。
- クレードがクレードA、B、C、D、E、F、G、H、I、JまたはKである、請求項7記載の核酸組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、アウトライアー(outlier)(O)群のクレードに属するクレードからのものである、請求項1記載の核酸組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、N群のクレードに属するクレードからのものである、請求項1記載の核酸組成物。
- クレードがクレードBである、請求項8記載の核酸組成物。
- エンベロープ糖タンパク質が、B715分離株のエンベロープ糖タンパク質である、請求項8記載の核酸組成物。
- クレードがクレードCである、請求項8記載の核酸組成物。
- 核酸のセットの1つまたは複数が、最適化されたコドンを含む、請求項1記載の核酸組成物。
- 核酸分子の複数のセットを含む核酸組成物であって、この複数のセットが、以下のセットのうちの2つまたはそれ以上を含み、以下の核酸分子の各セットは、エンベロープ糖タンパク質の初代分離株配列をコードする、核酸組成物:
それぞれがクレードAのヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質をコードする核酸分子のセット;
それぞれがクレードBのHIVエンベロープ糖タンパク質をコードする核酸分子のセット;
それぞれがクレードCのHIVエンベロープ糖タンパク質をコードする核酸分子のセット;および
それぞれがクレードEのHIVエンベロープ糖タンパク質をコードする核酸分子のセット。 - 組成物が各セットのうちの1つを含む、請求項15記載の組成物。
- ヒト免疫不全ウイルス(HIV)gagタンパク質をコードする核酸分子のセットをさらに含み、そのセットが、gagタンパク質の初代分離株配列をコードする、請求項15記載の組成物。
- gagタンパク質がクレードCのgagタンパク質である、請求項17記載の組成物。
- gagタンパク質がクレードBのgagタンパク質である、請求項17記載の組成物。
- 組成物が各セットの核酸を50μg〜2,500μgの範囲で含む、請求項1記載の組成物。
- 請求項1記載の組成物および薬学的に許容される賦形剤を含む、薬学的組成物。
- 後天性免疫不全症候群(AIDS)の個体を治療する方法であって、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)による疾患の進行を抑制するのに十分な量の請求項21記載の薬学的組成物を個体に投与する段階を含む方法。
- 投与の様式が、局所投与、経口投与、針による注射、針を用いないジェット式注射、皮内投与、筋肉内投与および遺伝子銃投与からなる群より選択される、請求項22記載の方法。
- 免疫応答が防御免疫応答である、請求項22記載の方法。
- 免疫応答が細胞性免疫応答である、請求項22記載の方法。
- 免疫応答が体液性免疫応答である、請求項22記載の方法。
- 免疫応答が細胞性免疫応答および体液性免疫応答である、請求項22記載の方法。
- 組成物を、HIV感染症に対する第2の治療法と組み合わせて投与する、請求項22記載の方法。
- HIV感染症に対する第2の治療法が、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬による治療法、非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬による治療法、またはHIVプロテアーゼ阻害薬による治療法を含む、請求項28記載の方法。
- HIV感染症に対する第2の治療法が、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬による治療法、非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬による治療法、およびHIVプロテアーゼ阻害薬による治療法を含む、請求項28記載の方法。
- 脊椎哺乳動物におけるヒト免疫不全ウイルス(HIV)またはHIVエピトープに対する免疫応答を誘導する方法であって、脊椎哺乳動物におけるHIVまたはHIVエピトープを誘発するのに十分な量の請求項1記載の組成物を哺乳動物に投与する段階を含む、方法。
- 脊椎哺乳動物から免疫細胞を単離する段階;および単離された免疫細胞の免疫応答をインビトロで検査する段階をさらに含む、請求項31記載の方法。
- 組成物を長期間にわたり(例えば、4週間またはそれ以上の期間にわたり)多回投与する、請求項31記載の方法。
- アジュバント、追加免疫原(boost)または促進因子(facilitating agent)を、組成物の投与の前、最中または後に投与する段階をさらに含む、請求項31記載の方法。
- 脊椎哺乳動物がマウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長動物またはヒトである、請求項31記載の方法。
- 投与の様式が、局所投与、経口投与、針による注射、針を用いないジェット式注射、皮内投与、筋肉内投与および遺伝子銃投与である、請求項31記載の方法。
- 異なるクレードがA、B、C、D、E、F、G、H、I、JおよびKのうち任意の2つまたはそれ以上である、請求項31記載の方法。
- 脊椎哺乳動物がヒトである、請求項31記載の方法。
- ヒトがヒト免疫不全ウイルスに対するリスクを有するか、またはそれに感染している、請求項38記載の方法。
- 単離されたヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質分子のセットを含む単離されたタンパク質組成物であって、セット中の各分子が初代分離株配列を含む、組成物。
- 単離されたヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質分子の複数のセットを含むタンパク質組成物であって、セット中の各分子が異なるタイプのHIVエンベロープ糖タンパク質を含むか、または異なる遺伝学的クレードからの初代分離株配列を含む、組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、HIV-1エンベロープ糖タンパク質である、請求項41記載の組成物。
- 各セットのエンベロープ糖タンパク質が、gp120、gp140、gp160およびgp41からなる群より選択される、請求項41記載の組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、gp120エンベロープ糖タンパク質である、請求項43記載の組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、主要(M)群のクレードに属するクレードからのものである、請求項41記載の組成物。
- クレードがクレードA、B、C、D、E、F、G、H、I、JまたはKである、請求項45記載の組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、アウトライアー(O)群のクレードに属するクレードからのものである、請求項41記載の組成物。
- 複数のセットのうちの1つまたは複数のエンベロープ糖タンパク質が、N群のクレードに属するクレードからのものである、請求項41記載の組成物。
- クレードがクレードBである、請求項48記載の組成物。
- エンベロープ糖タンパク質が、B715分離株のエンベロープ糖タンパク質である、請求項41記載の組成物。
- クレードがクレードCである、請求項41記載の組成物。
- 薬学的組成物を形成するための薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項41記載の組成物。
- 後天性免疫不全症候群(AIDS)の個体を治療する方法であって、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)による疾患の進行を抑制するのに十分な量の請求項52記載の薬学的組成物を個体に投与する段階を含む、方法。
- 脊椎哺乳動物におけるヒト免疫不全ウイルス(HIV)またはHIVエピトープに対する免疫応答を誘導する方法であって、
請求項30記載の核酸組成物を哺乳動物に投与する段階;
請求項52記載のタンパク質組成物を哺乳動物に投与する段階を含み、
核酸組成物およびタンパク質組成物を、脊椎哺乳動物におけるHIVまたはHIVエピトープに対する検出可能な免疫応答を誘発するのに十分な量として投与する、方法。 - 脊椎哺乳動物から免疫細胞を単離する段階;および単離された免疫細胞の免疫応答をインビトロで検査する段階をさらに含む、請求項54記載の方法。
- タンパク質組成物を核酸組成物の後に投与する、請求項54記載の方法。
- タンパク質組成物を核酸組成物の4〜8週後に投与する、請求項56記載の方法。
- 細胞性免疫応答を検査する、請求項54記載の方法。
- 体液性免疫応答を検査する、請求項54記載の方法。
- 中和性の体液性応答を検査する、請求項59記載の方法。
- 以下を含むキット:
請求項1記載の核酸組成物、および核酸組成物を個体に投与するための指示書。 - 単離されたヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質分子のセットを含むタンパク質組成物をさらに含む、請求項61記載のキット。
- 単離されたHIVエンベロープ糖タンパク質の1つまたは複数の別のセットをさらに含み、各セットが、異なるタイプのHIVエンベロープ糖タンパク質であるか、または異なる遺伝学的クレードからの初代分離株配列を含む、請求項61記載のキット。
- 核酸組成物の核酸分子によってコードされるHIVエンベロープ糖タンパク質の1つまたは複数が、タンパク質組成物のエンベロープ糖タンパク質の1つまたは複数と同じタイプまたはクレードである、請求項61記載のキット。
- 核酸組成物の核酸分子のセットによってコードされるHIVエンベロープ糖タンパク質のそれぞれが、タンパク質組成物のエンベロープ糖タンパク質のそれぞれと同じタイプまたはクレードである、請求項64記載のキット。
- 以下を含むキット:
単離されたヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質分子のセットを含むタンパク質組成物であって、各セットが、異なるタイプのHIVエンベロープ糖タンパク質を含むか、または異なる遺伝学的クレードからの初代分離株配列を含む、組成物;および
HIVワクチンを投与された個体に対して組成物を投与するための指示書。 - 個体に核酸HIVワクチンが投与されている、請求項66記載のキット。
- タンパク質組成物が賦形剤をさらに含む、請求項66記載のキット。
- 賦形剤がシクロデキストリンである、請求項68記載のキット。
- タンパク質組成物がアジュバントをさらに含む、請求項66記載のキット。
- アジュバントがQS-21である、請求項70記載のキット。
- 以下の方法に従った、個体に対する投与のための指示書を含む、請求項61記載のキット:
核酸組成物を個体に投与する段階、および
単離されたヒト免疫不全ウイルス(HIV)エンベロープ糖タンパク質分子のセットを含むタンパク質組成物を個体に投与する段階を含む方法であって、タンパク質組成物を核酸組成物の後に投与する、方法。
- 個体が哺乳動物である、請求項72記載のキット。
- 哺乳動物がヒトである、請求項73記載のキット。
- タンパク質組成物が、単離されたHIVエンベロープ糖タンパク質の1つまたは複数の別のセットをさらに含み、各セットが、異なるタイプのHIVエンベロープ糖タンパク質であるか、または異なる遺伝学的クレードからの初代分離株配列を含む、請求項72記載のキット。
- 核酸組成物を個体に2回またはそれ以上の回数投与する、請求項75記載のキット。
- タンパク質組成物を個体に2回またはそれ以上の回数投与する、請求項75記載のキット。
- 以下の方法に従った、個体に対する投与のための指示書をさらに含む、請求項61記載のキット:
核酸組成物を個体に投与する段階、およびタンパク質組成物を個体に投与する段階を含む方法であって、タンパク質組成物を核酸組成物の後に投与する、方法。 - 個体が哺乳動物である、請求項78記載のキット。
- 哺乳動物がヒトである、請求項79記載のキット。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
JP2014533290A (ja) * | 2011-11-14 | 2014-12-11 | ノバルティス アーゲー | ポリアニオン性カルボマーとEnvポリペプチドとの免疫原性複合体ならびにその製造法および使用法 |
Families Citing this family (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6710173B1 (en) * | 1999-06-25 | 2004-03-23 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Stabilized viral envelope proteins and uses thereof |
ATE519500T1 (de) * | 2001-09-06 | 2011-08-15 | Progenics Pharm Inc | Mutanten von hüllglykoproteinen des human immunodeficiency virus und deren verwendung |
CA2481980A1 (en) * | 2002-04-05 | 2003-10-23 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Particle-bound human immunodeficiency virus envelope glycoproteins and related compositions and methods |
ES2560449T3 (es) | 2004-05-28 | 2016-02-19 | Oryxe | Una mezcla para administración transdérmica de compuestos de peso molecular bajo y alto |
US20080274134A1 (en) * | 2004-06-15 | 2008-11-06 | Norbert Schulke | Hiv-1 Neutralizing Antibodies Elicited By Trimeric Hiv-1 Envelope Glycoprotein Complex |
CN101374550B (zh) * | 2004-09-14 | 2013-05-15 | 阿戈斯治疗公司 | 病原体的非毒株依赖性扩增和针对其的疫苗 |
CA2655934A1 (en) * | 2006-06-19 | 2007-12-27 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Soluble stabilized trimeric hiv env proteins and uses thereof |
CA2667358A1 (en) * | 2006-10-23 | 2008-05-29 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Modified gp140 envelope polypeptides of hiv-1 isolates, compositions, stabilized trimeric complexes, and uses thereof |
US7888034B2 (en) * | 2008-07-01 | 2011-02-15 | 454 Life Sciences Corporation | System and method for detection of HIV tropism variants |
WO2011057160A2 (en) * | 2009-11-06 | 2011-05-12 | The Regents Of The Uiversity Of California | Method to improve the immunogenicity of vaccine antigens by modification of cleavage sites in hiv-1 gp 120 |
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AP2015008634A0 (en) | 2013-01-07 | 2015-07-31 | Beth Israel Hospital | Stabilized human immunodeficiency virus 'hiv' env elope 'env' trimer vaccines and methods of using same |
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US10906941B2 (en) | 2013-04-15 | 2021-02-02 | Duke University | Methods of inducing an immune response against HIV-1 using recombinant envelopes with improved coverage |
WO2015009946A1 (en) * | 2013-07-17 | 2015-01-22 | Emory University | Method of increasing immune response to hiv antigens |
EP3197489B1 (en) | 2014-09-26 | 2021-02-17 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods and compositions for inducing protective immunity against human immunodeficiency virus infection |
US10245313B2 (en) * | 2014-10-24 | 2019-04-02 | Versitech Limited | DNA motif compounds and methods for inducing specific antibodies and cellular immunity |
US11260018B2 (en) | 2015-09-17 | 2022-03-01 | Jrx Biotechnology, Inc. | Approaches for improving skin hydration and moisturization |
LT3390430T (lt) | 2015-12-15 | 2019-11-25 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Žmogaus imunodeficito antigenai, vektoriai, kompozicijos ir jų panaudojimo būdai |
EP3423472A4 (en) | 2016-03-01 | 2019-12-25 | Duke University | COMPOSITIONS WITH HIV COVERS FOR INDUCING CH235 CELL LINE ANTIBODIES |
EA201892735A1 (ru) | 2016-06-16 | 2019-05-31 | Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. | Состав вакцины против hiv |
CN110494159A (zh) | 2016-09-02 | 2019-11-22 | 扬森疫苗与预防公司 | 在接受抗逆转录病毒治疗的对象中诱导针对人类免疫缺陷病毒感染的免疫应答的方法 |
EP3512543B1 (en) | 2016-09-15 | 2020-07-22 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Trimer stabilizing hiv envelope protein mutations |
BR112019026126A2 (pt) | 2017-06-15 | 2020-06-30 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | vetores de poxvírus que codificam antígenos do hiv e métodos de uso dos mesmos |
MA49616A (fr) | 2017-07-19 | 2020-05-27 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Mutations de protéine d'enveloppe du vih stabilisant la forme trimère |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06501851A (ja) * | 1991-06-11 | 1994-03-03 | マイクロジェネシス インコーポレイテッド | ヒト免疫不全症候ヴィールスに対する痘苗(ワクチン)および治療方法 |
JP2000516445A (ja) * | 1996-06-21 | 2000-12-12 | メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド | 合成遺伝子を含むワクチン |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2767078B2 (ja) | 1990-10-17 | 1998-06-18 | アメリカ合衆国 | Hiv―1の分子クローンとその使用法 |
US6139843A (en) | 1991-04-02 | 2000-10-31 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Peptide compositions for the treatment of HIV |
US5593972A (en) * | 1993-01-26 | 1997-01-14 | The Wistar Institute | Genetic immunization |
US5741492A (en) * | 1996-01-23 | 1998-04-21 | St. Jude Children's Research Hospital | Preparation and use of viral vectors for mixed envelope protein vaccines against human immunodeficiency viruses |
ZA975889B (en) * | 1996-07-08 | 1998-02-23 | Genentech Inc | HIV envelope polypeptides and vaccine. |
JP5052732B2 (ja) * | 2000-08-14 | 2012-10-17 | アメリカ合衆国 | 遺伝的免疫化のための免疫原性を強化するHIVEnv、Gag、およびPolの改変 |
WO2003039470A2 (en) * | 2001-11-07 | 2003-05-15 | Duke University | Polyvalent immunogen of hiv |
-
2003
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2011
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06501851A (ja) * | 1991-06-11 | 1994-03-03 | マイクロジェネシス インコーポレイテッド | ヒト免疫不全症候ヴィールスに対する痘苗(ワクチン)および治療方法 |
JP2000516445A (ja) * | 1996-06-21 | 2000-12-12 | メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド | 合成遺伝子を含むワクチン |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6009068120, Journal of Virology, 1996, vol.70, no.3, p.1651−1667 * |
JPN6009068121, AIDS RESEARCH AND HUMAN RETROVIRUSES, 2001, vol.17, no.2, p.161−168 * |
JPN6009068122, AIDS RESEARCH AND HUMAN RETROVIRUSES, 1994, vol.10, no.5, p.541−549 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014533290A (ja) * | 2011-11-14 | 2014-12-11 | ノバルティス アーゲー | ポリアニオン性カルボマーとEnvポリペプチドとの免疫原性複合体ならびにその製造法および使用法 |
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