JP2006503847A - 神経疾患の治療のための方法および組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
視神経のような成熟した哺乳動物の神経は、通常、損傷を受けると再生しない。網膜神経節細胞(RGC)はそれらの損傷を受けた神経終末において発芽反応を開始するが、その成長は成功には至らずに細胞はすぐに死滅し始める(Ramon y Cajal, 1991)。それにも関わらず、RGCは末梢神経移植を介して(Aguayo et al., 1991)、また水晶体が損傷を受けた場合(Fischer et al., 2000; Leon et al., 2000)または末梢神経の断片が硝子体に移植された場合(Berry et al., 1996)は視神経自体を介して非常に長い軸索を再生することができる。これらの後者の処置は眼における活性化マクロファージの出現を促し、最近では硝子体内でのマクロファージ活性化はRGCに視神経を介して軸索を再生させる力があることが示されている(Leon et al., 2000; Yin et al., 2003)。培養において、硝子体に構造的に含まれる小分子と関連して作用するマクロファージ由来タンパク質は成熟ラットのRGCを刺激してcAMP依存的に軸索を再生させる(Yin et al., 2003)。
本発明は神経学的状態を持つ被験体に神経を健康的にする作用を生じる方法および組成物を提供する;このような作用には、被験体におけるニューロン生存性、軸索増殖、ニューロン再生または神経学的機能の正常化などが含まれる。
本発明は、神経障害を含む神経疾患の治療において有効な被験体に神経を健康的にする作用を生じるための方法および組成物を提供する。その方法は、ヘキソース(例えば、マンノース)またはヘキソース誘導体の治療上有効な量を被験体に投与する工程を含む。
ヘキソース誘導体および薬学的に許容されるキャリアを含む薬学的組成物、および包装された調製物も本発明によって提供される。これらの薬学的組成物は、マクロファージ由来因子および/またはcAMP調節物質も含むことができる。
本発明の薬学的に許容される調製物は、活性化合物が被験体の神経系に接触して、それによって神経を健康的にする作用を生じるように投与される。調製物の局所投与および全身投与の双方が本発明によって企図される。局所投与の望ましい特徴は、活性化合物の有効局所濃度の達成、および活性化合物の全身投与による有害な副作用の回避を含む。一つの態様において、活性化合物は被験体の脳脊髄液への導入によって投与される。本発明の一部の局面において、活性化合物は脳室、腰部、または大槽に導入される。もう一つの局面において、活性化合物は、神経もしくは索の損傷部位、疼痛もしくは神経変性部位、または神経網膜細胞に接触させるために眼内のように局所的に導入される。
本発明の方法の好ましい態様において、活性化合物は軸索増殖の効果調節のような神経を健康的にする作用を生じるために長期間、被験体に投与される。活性化合物との持続的接触は、例えば、1週間、数週間、1カ月、またはより長期間などの期間にわたる活性化合物の反復投与によって達成することができる。より好ましくは、活性化合物を投与するために用いられる薬学的に許容される調製物は、活性化合物の被験体への「ゆっくりとした放出」のように、持続的な送達を提供する。例えば、その調製物は薬学的に許容される調製物の被験体への投与後少なくとも1週間、2週間、3週間、または4週間にわたってその活性化合物を送達することができる。好ましくは、本発明に従って治療されるべき被験体は、(反復投与もしくは持続的送達系の使用、または両者によって)少なくとも30日間にわたってその活性化合物で治療される。
インビトロにおいて軸索増殖を調節するために、中枢または末梢神経系に由来するニューロンをインビトロにおいてヘキソース誘導体と接触させることができる。従って、当技術分野において周知の手法を用いてニューロンを被験体から単離してインビトロにおいて培養し、次に軸索増殖を調節するために本発明に従って処理することができる。つまり、(シャーレのような)適切な基質に付着している神経組織の断片からニューロンを移動させることによって、または機械的もしくは酵素的に組織を分解してニューロン懸濁液を作製することによって、ニューロン培養物を得ることができる。例えば、酵素であるトリプシン、コラゲナーゼ、エラスターゼ、ヒアルロニダーゼ、DNエース、プロナーゼ、ディスパーゼ(dispase)、またはそれらの様々な組み合わせを用いることができる。神経組織の単離および単離細胞を得るための組織の分解のための方法は、内容が参照として本明細書に組み入れられるFreshney, Culture of Animal Cells, A Manual of Basic Technique, Third Ed., 1994に述べられている。
ヘキソースが被験体に神経を健康的にする作用を生じる能力は、様々な公知の任意の方法およびアッセイ法を用いて評価することができる。例えば、ヘキソース誘導体がCNS損傷のような損傷後に神経の接続および/または機能を再構築する能力は(神経組織を薄切してニューロンの分枝形成を観察することによって、または色素の細胞質輸送を示すことによって)組織学的に調べることができる。本発明の化合物がCNS損傷のような損傷後に神経の接続および/または機能を再構築する能力も、ヘキソース誘導体の網膜神経または視神経に対する障害後の網膜電図を完全または部分的に回復させる能力;または障害を受けた眼における光に対する瞳孔反応を完全もしくは部分的に回復させる能力をモニターすることによって評価することができる。
実施例1
網膜神経節細胞によるヘキソースを用いた治療に反応した軸索の伸長
キンギョ網膜神経節細胞は内容が参照として本明細書に組み入れられるPCT出願シリアル番号第PCT/US98/03001号に述べられるように調製して、マンノースのようなヘキソース誘導体と接触させる。ヘキソース誘導体のキンギョ網膜神経節細胞から軸索増殖を刺激する能力は、PCT出願シリアル番号第PCT/US98/03001号に述べられるようにモニターされる。
方法
ラット硝子体からの低分子量因子の抽出。
ラット硝子体に存在する分子は通常生理食塩液中に抽出された(硝子体8つを生理食塩液1.5mlに入れて4℃にて一晩攪拌)。硝子体は、200〜250gの正常な雄の成体Fisherラット(Charles River Laboratories, Wilmington, MA)、またはレンズ損傷後7日の、この時点で本発明者らによってレンズ損傷後のRGCにおいてGAP-43アップレギュレートの明瞭な証拠が確認されるラット(Leon et al., 2000)に由来した。レンズ損傷は、既報(Leon et al., 2000)の通り30Gの針を用いて行った。硝子体抽出物は、細胞破壊片を除去するために22μM低タンパク質結合フィルター(Pall Life Sciences, Ann Arbor, MI)に通した;低分子量成分は3kDaの分子量カットオフ(MWCO)膜を介する限外ろ過によって分離した。
活性因子を濃縮して無機塩を除去するために、ウシ硝子体の低分子量抽出物を凍結乾燥して、95%エタノールで抽出した(元々の試料容積の16%、4℃、頻繁にボルテックスに掛けながら1時間)。エタノール可溶性画分を凍結乾燥して、水400μlに再溶解して、C18逆相HPLCカラム(Delta Pak 5μ C18 100Å, Waters, Milford, MA:0.5ml/min)に適用した。緩衝液Aはトリフルオロ酢酸(TFA)の0.1%水溶液であり、緩衝液Bはイソプロパノール、アセトニトリル、および水の3 : 2 : 2の割合の混合液中0.08%TFAであった。溶出のための勾配は、0%Bを2分間、続いて42分かけて0〜100%Bであった。バイオアッセイは2分の画分のプールに対して実施した。
哺乳動物AF-1を、先ず、解剖したキンギョ網膜神経節細胞(RGC)を用いたバイオアッセイにおいて特徴付けした。つまり、コメット品種のキンギョ(Mt.Parnell Fisheries, PA)を暗順応させて、4℃に冷却して、頚部切断により屠殺した。網膜を摘出して、パパイン中でのインキュベートおよび一連の粉砕工程で順次分離した結果、RGC濃縮細胞懸濁液を得た(Schwartz & Agronoff,; Schwalb et al., 1995)。ウェル当たり約500個のRGCを、試験すべき実験試料と共に、N1およびN2サプリメント(Bottenstein, Saito)、抗酸化剤、および別途詳細に述べられるウシ血清アルブミン(Schwalb et al., 1995)を加えたリーボビッツ(Leibovitz)L15培地(Gibco BRL)を含む所定の無血清培地に播種した。各実験において、軸索増殖の評価担当者に各ウェルに含まれる試料のタイプが分からないように、各試料のウェル4つは盲検的に24穴プレートに分布させた。実験には、陽性対照(事前に検証されたキンギョAF-1またはイノシン)および陰性対照(定められた培地単独)を加えて、同様に盲検的にプレートに4つずつ分布させた。21℃にて6日間培養後、軸索を≧5細胞直径の長さに伸長したRGCの割合として機能的に定義される軸索の増殖は、ウェル当たり約150個の連続的に生じたRGCにおいて評価した。データは、各試料のウェル4個における軸索成長の平均を求めて、陰性対照に見られた成長のレベルを引いて(一般に3〜5%)、陽性対照の純成長(通常、20〜40%)によって正規化して分析した。データは、正規化した平均値±SEMとして示す。すべての実験は少なくとも3回反復した。
網膜神経節細胞は、フルオロゴールド(FG:Fluorochrome, Inc.)を用いた逆行性ラベリングにより同定した。これに関して、雄の成体Sprague-Dawleyラットを麻酔して、定位装置に収容して、覆っている後大脳皮質を除去して上丘を露出させた。FGは上丘のいくつかの部位に両側的に注射した。さらに、FGを含浸させたゲルフォーム(Gelfoam)(Upjohn, Kalamazoo, MI)の小片を上丘に載せて、頭皮切開創を閉鎖して、皮膚を縫合閉鎖した。FGを視神経まで7日間、逆行的に輸送させた後、ラットを屠殺して眼球を摘出し、網膜を分離した。網膜は、パパイン処理および粉砕により順次分離した。ウェル当たり100〜150個のFG標識RGCを含む混合培養物を、24穴プレートにおいて37℃、5%CO2にて所定の無血清培地(NaHCO3を含む最小必須培地)で3日間、維持した。キンギョ培養物と同様に、すべての実験試料は四連で試験して、ランダムな方法で培養プレートに分布させた。データの統計学的処理は上記の通りであった。
Michigan State University Mass Spectrometry Facility において陽イオンまたは陰イオンモードで稼働するJEOL HX-110二重収束形質量分析計(JEOL USA, Peabody, MA)を用いてFAB質量スペクトルを得た。イオンは、Xe原子のビームを用いた衝撃(6keV)により発生させた。加速電圧は10kVであり、解像度は3000に設定した。FAB-CAD-MS/MSに関して、ヘリウムを第一の無フィールド領域に置いたセルにおける衝突ガスとして使用した。ヘリウム圧は、親イオンの存在度が50%まで減少するように調節した。データシステムにより、一定割合の電場に対する磁場(B/E)にてリンクスキャンを得た。この装置はM/Z 50から2000までスキャンした。提示するスペクトルは一回のスキャンから得られたものであった。
小軸索促進因子(small axon-promoting factor)の哺乳動物硝子体における構成的存在
レンズ損傷は網膜神経節細胞を刺激してインビボにおいて損傷した軸索を視神経まで再生させる(Leon et al., 2000)。この成長を刺激する可能性のある因子について調べるために、本発明者らは正常な硝子体、神経圧挫およびレンズ損傷1週間後の硝子体に含まれる分子を生理食塩液中に抽出した。3kDaよりも小さい分子を限外ろ過によって分離して、バイオアッセイとしてキンギョ網膜神経節細胞を用いて軸索促進活性について調べた(Schwalb et al., 1995; Benowitz et al., 1998)。低分子量抽出物は、レンズ損傷の有無に関わらず、80倍希釈時に完全な活性を示した(図1)。この濃度の十分の一では、効果を示さなかった(データは示さない)。
この小さな成長因子の十分な量を単離してその構造を解析するために、本発明者らはそれがウシ硝子体に存在するかどうかを調べた。ウシ硝子体抽出物の低分子量成分(VE<3)を80倍希釈で調べたところ、キンギョ由来AF-1と同程度にキンギョRGCからの増殖を誘発した(図2)。硝子体由来因子がAF-1のように行動するかどうかを調べるために、本発明者らは次の2つの物質のいずれかによってその活性が遮断され得るかどうかを調べた:AF-1の増殖に対する作用を非競合的に遮断するがイノシンとは競合的である6-チオグアニン(Petrausch et al., 2000);または細胞膜を介してのプリン輸送の阻害物質でありイノシンの作用は遮断するがAF-1の活性は低下させないNBTI(Benowitz et al., 1998)。NBTIはVE<3またはAF-1に誘発される成長に対してはほとんど作用を示さなかったが、イノシンに誘発される成長は効果的に遮断した。これに対して、6-TGはVE<3またはAF-1に誘発される成長を基準値よりも低く抑えたが、イノシンの作用については部分的に遮断したのみであった(図2)。このように、硝子体由来の低分子量因子はキンギョAF-1のように行動する。
成体ラットの網膜は材料および方法に述べる通りに分離して培養した;RGCは、培養物の調製前にフルオロゴールドを用いた逆行性ラベリングにより同定した。その他の因子の非存在下において、RGCの約5%〜8%は3日後に軸索を>2細胞直径の長さに伸長した。フォルスコリンを用いた、または膜透過性、非加水分解性cAMP類似体であるSp-cAMPを用いた細胞内cAMPの増加は増殖に対してほとんど作用を示さなかった。硝子体由来低分子量抽出物はわずかではあるが有意なレベルの自身の成長を刺激して(p<0.01)、この小因子とフォルスコリンまたはSp-cAMPのいずれかとの組み合わせはこの作用を著しく増強した(図3a:低分子量因子プラスフォルスコリンまたはSp-cAMPによる成長と、いずれか一つにより得られた成長とを比較してp<0.001)。キンギョRGCに関して上記に示した通り、6-TGは低分子量因子プラスフォルスコリン(p<0.01)または低分子量因子プラスSp-cAMP(p<0.05)に誘発される成長を抑制した。このように、硝子体由来低分子量因子はラットRGCをcAMP依存的に刺激して軸索を伸長する;キンギョRGCにおける軸索成長と同じく、増殖はプリン感受性メカニズムを介して調節される。低分子量断片の影響は細胞生存性における変化に無関係であった(図3b)。最大効果は、VE<3を硝子体内でのその元々の濃度の4%に希釈した際にも達成された(図3c)。
硝子体抽出物の低分子量画分は凍結乾燥によって濃縮して、少量の95%エタノールに抽出した。これにより軸索促進活性がほぼ完全に回収されて、無機塩の約98%が除去された(データは示さない)。逆相C18カラムで分離した後、軸索促進活性はカラムに保持されずに、最初の数分間で大きな吸光度ピークの一部として溶出された(図5a、5b)。
軸索促進活性および隣接する不活性ピークを含む精製画分は、高速原子衝撃(FAB)質量分析法により陽イオンおよび陰イオンモードにて分析した。主な結果はグリセロールの存在下において得られて、テトラエチルアンモニウムおよびニトロ安息香酸の存在下において確認された。陰イオンモードにおいて、活性画分(#17)は隣接する不活性画分(#16)には含まれないm/z=179.2(矢印)のイオンを含んだ(図6a、b)。陰イオンモードにおけるm/z値は真の質量マイナス1プロトンに相当するので、活性画分に含まれるこの分子は180の質量を持つことが予測される。陽イオンモードにおいて、生物学的に活性な画分には隣接する不活性画分には含まれない2つのピークが出現した(m/z=273.2および255.2:図6c、d、矢印)。陽イオンモードにおけるm/z値は1つの付加プロトンを含むので、2つの固有のイオンは272.2および254.2の質量を持つことが予測される;但し、これらのイオンが親種のグリセロール付加物(質量=92)であるならば、大きい方の質量は180であり、これは陰イオンモードで認められた質量とほぼ等しく、他方は162である。m/z=273のイオンの陽イオンモードでのMS/MSによるさらなる分析(図6e)により、グリセロール(m/z=93、アステリスク)および質量180(m/z=181、二重矢印)の存在が確認された。MS/MSも親種から18の倍数を引いた値、即ち、163、145、および127(矢印)に対応するピークを示した。後者のピークは181のイオンからのヒドロキシル基の連続的な消失を示す可能性が高く、これに対してm/z=255および237のピークは、それぞれ、163および145のイオンのグリセロール付加物を示す可能性がある。これらの結果から、この活性分子はC6H12O6(質量=180)の式を持つ炭水化物であることが予測される。
質量分析法の結果に基づいて、本発明者らは培養中のRGCに対するヘキソース糖および関連化合物の軸索促進作用について調べた。キンギョRGCにおいて、ミオイノシトール、ケトン体であるフルクトースおよびソルボース、ならびにアルドースであるD-アロース、D-アルトロース、D-グロース、D-タロース、およびD-ガラクトースはすべて、増殖を刺激できなかった(すべて50または100μMにて調べた:図7a)。しかし、構造的に関連する2つのアルドース糖であるマンノースおよびグルコースは、ゲルろ過および順相クロマトグラフィーによりウシ硝子体抽出物から単離された低分子量因子と同程度に増殖を刺激した(図5d、fを参照)。グルコースおよびマンノースのL-エナンチオマーは不活性であった(データは示さない)。マンノースに応答しての増殖は25〜50μMで飽和して、ED50は約10μMであった(図7c)。グルコースについてほぼ等しい用量-反応曲線が得られた(データは示さない)。上記のように、ウシ硝子体に由来する成長促進因子はサイズ排除および順相クロマトグラフィーによる単離後に元々の活性の60〜80%しか保持せず(図5d、f)、自らはなんら成長を惹起しないサイズ排除カラム由来の遅い画分を改めて加えると、活性を完全に回復することができた。同様に、サイズ排除カラムから得られる同一の遅れて溶出する画分を50μMマンノースまたはグルコースに加えると、活性が増大して分画化前の硝子体抽出物のレベルに回復した(図7d)。キンギョRGCに対するグルコース(図7e)またはマンノース(示さない)の作用は、膜透過性、非加水分解性cAMP類似体であるdBcAMPで増強されなかった。反対に、プロテインキナーゼAの阻害物質であるKT5720は通常の有効量である1μMにおいてマンノースの作用を抑制せず、10μMにおいて軽微な作用を示したのみであった(図7f)。同様に、PKA阻害物質であるRp-cAMPは通常の有効用量である100μMにおいてグルコース誘発性の増殖に対して影響を及ぼさなかったが、1mMで試験した場合は成長を48%遮断した(示さない)。
キンギョRGCと同じく、成熟ラットに由来するRGCもマイクロモル濃度の単糖類に反応して軸索を成長させるが、いくつかの興味深い相違点がある。ラットRGCはマンノース(p=0.05、片側)またはVE<3単独(p=0.05、両側)に対して辛うじて有意な反応を示して、フォルスコリン単独に対しては小規模ではあるが有意な反応を示す(図9a)。フォルスコリンの存在下において、マイクロモル濃度のマンノースはフォルスコリン単独によって誘発される軸索成長レベルを2倍以上とした(p<0.001)。マンノースに誘発される成長は、未分画化ウシ硝子体抽出物の低分子量成分に誘発される成長と少なくとも同等であり、高濃度のグルコースを添加してもさらなる増強はなかった。その他の試験において、マンノースは50μMにおいてほぼ最大効果を達成することが認められた(データは示さない)。これに対して、グルコースはインビボにおいて生じるミリモル濃度においても、またフォルスコリンの存在下においても、フォルスコリン単独のレベルを上回る成長を誘発することはできなかった。図9bは、この作用が細胞生存性に関連しないことを示す。このように、キンギョRGCは細胞内cAMPの増加を伴うことなくグルコースまたはマンノースに反応して極めて長い軸索を伸長するが、ラットRGCはマンノースに対してcAMP依存的に選択的に反応する。
培養において、10〜20kDaのマクロファージ由来タンパク質は[cAMP]iの上昇時に硝子体由来成長小因子に対するラットRGCの反応性を増強する(Yin et al., 2003)。フォルスコリンの存在下において、マクロファージで調整した培地はマンノースに対するラットRGCの反応をほぼ倍増させて、成長は基準値のほぼ6倍に増加した(図9e)。この成長は、培養RGCが3日間で伸長する軸索の50%強に相当する。
本発明者らは、本明細書において、特定の単糖類が網膜神経節細胞の軸索再生を刺激すること、またこの作用がエネルギー代謝に依存しないことを示す。他のエネルギー源が豊富である場合であっても、キンギョRGCは低マイクロモル濃度のグルコースまたはマンノースに反応して軸索を再生する。これらの炭水化物に対する反応性は細胞内cAMPの増加を必要としない。一方、ラットRGCはより選択的である。ラットRGCはcAMP依存的にマイクロモル濃度のマンノースに反応して軸索を伸長するが、インビボにおいて認められる量とほぼ等しい量のグルコースに対しては反応しない。ラットRGCの反応は、マクロファージから分泌される高分子によってさらに増強することができる。これらの所見は、インビボにおける下等脊椎動物および高等脊椎動物の再生能が異なることを一部説明するのに役立つ可能性がある。キンギョの場合、多量のグルコースは損傷後にRGCにそれらの軸索を再生させるのに十分である可能性がある。しかし、ラットの場合は硝子体液にはマンノースが豊富であるが、その軸索再生刺激における役割は調節的というよりは許容的である可能性が高い。単独では、マンノースはインビボまたはインビトロにおいて軸索再生を誘発する能力を持たない。しかし、増加した細胞内cAMPの存在下では、マンノースはマクロファージ由来因子の作用を増強し、従って、インビボにおいてマクロファージ活性化後に見られる劇的な軸索再生において役割を担う可能性が高い(Yin et al.、提出済み)。
当業者は、ごく定型的な実験を用いて、本明細書に述べられる発明の具体的態様に対する多くの同等品を認識し、または確認することができる。このような同等品は特許請求の範囲によって内包されることが意図される。
Claims (26)
- 治療上有効な量のヘキソースを被験体に投与する工程を含む、必要とする被験体における神経疾患の治療方法。
- ヘキソースがD-マンノース、グルコース、およびグルコース-6-リン酸からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
- 被験体にcAMP調節物質を投与する工程をさらに含む、請求項1記載の方法。
- cAMP調節物質が非加水分解性cAMP類似体、アデニル酸シクラーゼ活性化物質、cAMPを刺激するマクロファージ由来因子、マクロファージ活性化物質、カルシウムイオノフォア、膜脱分極、ホスホジエステラーゼ阻害物質、特異的ホスホジエステラーゼIV阻害物質、β2-アドレナリン受容体阻害物質、または血管作用性腸ペプチドである、請求項3記載の方法。
- 被験体にマクロファージ由来因子を投与する工程をさらに含む、請求項1記載の方法。
- マクロファージ由来因子がオンコモジュリン(oncomodulin)である、請求項5記載の方法。
- マクロファージ由来因子がTGF-βである、請求項5記載の方法。
- 治療がニューロン障害をくつがえす、請求項1記載の方法。
- 治療が神経疾患を緩和する、請求項1記載の方法。
- 疾患が外傷性脳損傷、卒中、脳動脈瘤、脊髄損傷、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、びまん性脳皮質(diffuse cerebral cortical)萎縮、レヴィ小体型痴呆、ピック病、メソリンボコーティカル(mesolimbocortical)痴呆、視床変性、ハンチントン舞踏病、皮質-線状体-脊髄変性、皮質-基底核(basal-ganglionic)変性、大脳小脳変性、痙性対性不全麻痺を伴う家族性痴呆、ポリグルコサン体(polyglucosan body)病、シャイ-ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳(olivopontocerebellar)萎縮、進行性核上性麻痺、変形性筋失調、ハレルフォルデン−スパッツ病、メージュ症候群、家族性振戦、ジルドラトゥレット症候群、舞踏病-有棘赤血球症(acanthocytic chorea)、フリードライヒ運動失調症、ホームズ家族性皮質小脳萎縮、ゲルストマン-シュトロイスラー-シャインカー(Scheinker)病、進行性脊髄性筋萎縮症、進行性バルバー(balbar)麻痺、原発性側索硬化症、遺伝性筋萎縮症、痙性対麻痺、腓骨部筋萎縮症、肥厚性間質性多発ニューロパシー、遺伝性多発神経炎性失調、視覚性ニューロパシー、眼筋麻痺、網膜または視神経障害からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
- ヘキソースがニューロン損傷領域への導入によって投与される、請求項1記載の方法。
- ヘキソースが被験体の脳脊髄液に導入される、請求項1記載の方法。
- ヘキソースが被験体の髄腔内に導入される、請求項1記載の方法。
- ヘキソースが被験体の脳室、腰部、および大槽からなる群より選択される領域に導入される、請求項1記載の方法。
- ヘキソースが被験体の眼に局所的に投与される、または眼内注射によって投与される、請求項1記載の方法。
- 被験体が哺乳動物である、請求項1記載の方法。
- 哺乳動物がヒトである、請求項16記載の方法。
- 神経疾患が脊髄損傷である、請求項1記載の方法。
- 脊髄損傷が単麻痺、両麻痺、対麻痺、片麻痺、および四肢麻痺を特徴とする、請求項18記載の方法。
- 視神経に対する障害が緑内障の結果である、請求項10記載の方法。
- 網膜に対する障害が黄斑変性の結果である、請求項10記載の方法。
- 包装材料、および該包装材料内に含まれる薬学的物質を含み、該包装材料が該薬学的物質が薬学的に許容されるキャリアと共に神経疾患の治療に有効な用量で十分な期間、投与されることが可能であり、その薬学的物質がD-マンノースを含むことを示すラベルを含む、製造品。
- cAMP調節物質をさらに含む、請求項22記載の製造品。
- オンコモジュリンをさらに含む、請求項22記載の製造品。
- D-マンノースおよびcAMP調節物質、ならびに薬学的に許容されるキャリアを含む、薬学的調製物。
- オンコモジュリンをさらに含む、請求項25記載の薬学的調製物。
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